(共16张PPT)
内容要求 4.2 动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合
和干细胞的应用等技术
4.2.1 阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织,分散成单个细胞后,在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础
4.2.2 阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使重组细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的过程
4.2.3 阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段,使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
4.2.4 概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术
4.2.5 简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值
细胞培养
是动物细胞工程的基础
选择性必修3 第三章 动物细胞工程 第一节
动物细胞培养的条件
学习内容
动物细胞培养的过程
动物细胞培养的价值
活动1 鸡胚细胞的原代培养过程
75%酒精擦拭鸡蛋后
用镊子敲碎线内蛋壳
小心去除蛋壳
撕去壳膜
换镊子,取出鸡胚
用Hank’s缓冲液
清洗2次
剪去头、四肢、内脏
保留部分躯干
躯干转移至新培养皿中
剪碎(越小越好)
胰蛋白酶消化
获取鸡胚
分散细胞
活动1 鸡胚细胞的培养过程
为什么要在超净工作台上获取鸡胚?
确保无菌
获取了鸡的胚胎,如何获得分散的细胞?
机械消化、胰蛋白酶消化(或胶原蛋白酶)
为什么细胞要分散后进行培养?
获得充足的营养
思考讨论:
胶原蛋白纤维
活动1 鸡胚细胞的培养过程
75%酒精擦拭鸡蛋、手等的目的是什么?还有哪些措施达成这一目的?
为什么可以用胰蛋白酶消化,却还要先用剪刀剪碎材料?
为什么用胰蛋白酶而不采用胃蛋白酶?
开放式培养的目的是什么? CO2培养箱有什么作用?
拧松半圈
CO2培养箱中开放式培养
转移至卡氏瓶中
拧紧盖子
培养观察
24h后倒置显微镜观察
除去胰酶后
加培养液
思考讨论:
请用一句话概括动物细胞培养的过程
动物细胞培养是从动物体获得相关组织,分散成单个细胞后,在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程。
原代培养
活动2 分析动物细胞培养的条件
充足的营养
血清
稳定的环境
无菌
培养基
细胞
CO2培养箱
温度
湿度
pH
渗透压
无毒
关 联
水
氨基酸
糖类
维生素
生长因子
无机盐
无菌操作
更换
NaHCO3
包 括
提 供
保 障
保 障
提 供
动物体细胞可在体外适宜条件下培养
气体条件
7.2~7.4
37℃
5%CO2 95%空气
抗生素
活动2 分析动物细胞培养的条件
充足的营养
血清
稳定的环境
无菌
培养基
细胞
CO2培养箱
温度
湿度
pH
渗透压
无毒
关 联
水
氨基酸
糖类
维生素
生长因子
无机盐
无菌操作
更换
NaHCO3
包 括
提 供
保 障
保 障
提 供
气体条件
7.2~7.4
37℃
5%CO2 95%空气
抗生素
动物体细胞可在体外适宜条件下培养
活动3 观察并分析体外培养动物细胞的生长特点
从显微镜观察到的结果分析,动物细胞培养时,细胞生长有什么特点?
提示:
培养液晃动后,细胞并未散开。
视野中所有细胞均清晰。
成纤维细胞
贴附生长
接触抑制
单层生长
倒置显微镜观察
卡氏瓶
活动4 举例动物细胞培养的价值
航天员在我国空间站天宫的天和核心舱进行细胞学研究,观察失重环境下细胞的生长,观察心机细胞的收缩,这体现了动物细胞培养哪方面的价值?
心肌细胞的收缩
活动4 举例动物细胞培养的价值
新冠病毒灭活疫苗(Vero细胞)制备中重要的一步是培养Vero细胞(非洲绿猴肾细胞),这体现了动物细胞培养哪方面的价值?
培养中的Vero细胞
(非洲绿猴肾细胞)
活动4 举例动物细胞培养的价值
价值
观察细胞的
动态变化过程
直接观察分析形态结构
研究生命活动
生理、病理、药理研究
组织器官修复
获取代谢产物
疫苗
理论研究
实际应用
干扰素
单克隆
抗体
活动4 举例动物细胞培养的价值
价值
观察细胞的
动态变化过程
直接观察分析形态结构
研究生命活动
生理、病理、药理研究
组织器官修复
获取代谢产物
疫苗
理论研究
实际应用
干扰素
单克隆
抗体
细胞系是泛指可传代的细胞,细胞株是具有特殊性质的细胞系
细胞系
连续细胞系
(无限细胞系)
有限细胞系
二倍体细胞
发生转化
(遗传物质改变)
恶性细胞系
(癌)
良性无限细胞系
不死性=连续分裂
有接触抑制
无接触抑制
不死性
不致癌
细胞株
具有特殊性质
选择或纯化
(克隆培养)
恒定的染色体组型
病毒敏感性或抗性
特点
包括
连续细胞株
有限细胞株
包括
把一个细胞从群体中分离出来单独培养,使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。
克隆培养(细胞克隆)
克隆培养
有限稀释法:用培养液将细胞悬液稀释一定倍数,使一定体积的细胞数少于某个数量,如1个/ML,转移到96孔板中培养,使每个孔少于等于1个细胞。
卡氏瓶
培养皿
多孔培养板
96孔板
多道移液器
若我们已经培养了大熊猫细胞,可以直接培育成大熊猫吗?