(共23张PPT)
6.2 基因工程及其应用
问题
探讨
提示:此节“问题探讨”以基因工程菌的实例,引导学生思考基因工程的原理。为启发学生思考,教师可引导学生回忆前面学过的遗传学知识,如不同生物的DNA在结构上的统一性、几乎所有的生物都共用一套遗传密码等。
1.你知道为什么能把人的基因“嫁接”到细菌上吗?你能推测出,这种基因的“嫁接”是怎么实现的吗?你能举出一些类似的、与你的生活关系很密切的例子吗?
PART
01
基因工程的原理
● 基因工程的基本工具
● 基因工程的操作程序
基因工程的原理
基因工程的原理
基因工程,又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工,需要有专门的工具。“基因剪刀”、“基因针线”和“基因的运载体”是基因工程最基本的工具。
基因工程的工具
基因工程的原理
基因的“剪刀” 基因的“剪刀”指的是限制性核酸内切酶(以下简称限制酶)。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子,断裂磷酸二酯键。
例如,大肠杆菌中的一种叫做EcoRI的限制酶,能够专一识别GAATTC的序列,并在G和A之间将这段序列切开。
G
C
A
A
T
T
C
T
T
A
A
G
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
EcoRI限制酶
黏性末端
黏性末端
基因工程的工具
基因工程的原理
基因的“剪刀” 基因的“剪刀”指的是限制性核酸内切酶(以下简称限制酶)。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子,断裂磷酸二酯键。
例如,粘质沙雷氏菌中的一种叫做SmaI的限制酶,能够专一识别CCCGGG的序列,并在C和G之间将这段序列切开。
C
G
C
C
G
G
G
G
G
C
C
C
SmaI限制酶
平末端
平末端
C
G
G
G
C
C
C
G
G
G
C
C
基因工程的工具
基因工程的原理
G
C
A
A
T
T
C
T
T
A
A
G
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
EcoRI限制酶
黏性末端
黏性末端
G
C
A
A
T
T
C
T
T
A
A
G
EcoRI限制酶
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
黏性末端
黏性末端
会产生相同的黏性末端
1.如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割,会怎样呢?
基因工程的工具
基因工程的原理
基因的“针线”两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后,末端可以相互黏合,但是,这种黏合只能使互补的碱基连接起来,脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的DNA 骨架上的缺口,需要靠DNA连接酶来“缝合”,形成磷酸二酯键。
例如,根据酶的来源不同,可以将这些酶分为两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为E coli DNA连接酶;另一类从T4噬菌体中分离出来的,称为T4DNA连接酶。
E coli DNA连接酶—黏性末端
T4DNA连接酶—黏性末端或平末端
基因工程的工具
基因工程的原理
例如:E coli DNA连接酶—黏性末端
G
C
A
A
T
T
C
T
T
A
A
G
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
G
C
A
A
T
T
C
T
T
A
A
G
EcoRI切此位点 双链断开
不同来源的DNA片段结合
E coli DNA连接酶
基因工程的工具
基因工程的原理
基因的运载体要将外源基因送入受体细胞,还需要有专门的运输工具,这就是运载体。目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等。质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物的细胞中,是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子。
DNA
大肠杆菌细胞
抗生素
抗性基因
控制质粒DNA转移的基因
质粒
基因工程的程序
基因工程的原理
基因工程的操作一般要经历如下图所示的四个步骤:
提取目的基因
目的基因与运载体结合
将目的基因导入受体细胞
目的基因的检测与鉴定
(一)
(二)
(三)
(四)
PART
02
基因工程的应用
● 基因工程与作物育种
● 基因工程与药物研制
基因工程的应用
基因工程的应用
1993年,中国农业科学院的科学家成功地培育出了抗棉铃虫的转基因抗虫棉,抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白质晶体,能使棉铃虫等鳞翅目害虫瘫痪致死。
毒蛋白(BT)基因
植物的组织培养
农杆菌
Ti质粒
T-DNA
同种限制酶切割
DNA连接酶连接
将(重组质粒)目的基因导入棉花受体细胞
插入新基因的DNA
抗虫棉植株
苏云金杆菌
棉花细胞
重组质粒
作物育种
基因工程的应用
抗虫棉的培育过程
药物研制
基因工程的应用
1978年,科学家将人体内能够产生胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组,并且在大肠杆菌内获得成功的表达。
用基因工程方法生产的药物还有干扰素、白细胞介素、溶血栓剂、凝血因子,以及预防乙肝、霍乱、伤寒、疟疾的疫苗,等等。
PART
03
转基因生物
和转基因食品的安全性
● 转基因生物和转基因食品的安全性
食品的安全性
转基因生物和转基因
另一种观点 转基因生物和转基因食品是安全的,应该大范围推广
1.转基因食品的构成与非转基因食品一样,都是由氨基酸、蛋白质和碳水化合物等物质组成的,从理论上分析是安全的。
2.对转入了苏云金杆菌基因的西红柿进行毒性分析表明,这种转基因西红柿对人体健康没有影响。
3.转基因作物能使贫穷国家的亿万人口摆脱饥饿,同时还能减少使用农药引起的环境污染。
4.对于一种转基因食品,只要不能证明它不安全,就应该视为安全。否则就可能因为无休止的争论,而耽误了科学技术发展的时机。
......
一种观点 转基因生物和转基因食品不安全,要严格控制
1.一个简陋的小实验室,就能把艾滋病病毒与感冒病毒组装到一起,使艾滋病病毒像感冒一样,大范围地传播。
2.1999年5月20日的《自然》杂志报导:帝王蝶的幼虫在吃了某种转基因玉米的花粉沾染过的牛奶草叶子后,近一半的个体死亡,幸存的也不能正常发育。
某些公司曾利用基因工程技术让细菌生产牛的生长激素(BST),然后定期给奶牛注射 BST,使奶牛分泌更多的乳汁。但是,注射BST 的奶牛,乳房感染更为频繁,必须用抗生素治疗,结果导致乳汁中含有抗生素。
......
思考与讨论
1.你认为应该如何对待转基因生物和转基因食品的安全性问题?
提示:a.趋利避害,而不能因咽废食
b.建立相应的法规,如1993年制定的《基因工程安全管理办法》和2002年颁布的《农业转基因生物标识管理办法》
PART
04
课后练习
● 课后练习
课后练习
1.简述基因工程操作的几个步骤。
一、基础题
2.假如用限制性内切酶EcoRI处理以下的 DNA序列,会产生几个片段?请先写出下面的 DNA序列的互补链,然后标出酶切位点。
提示:基因工程的操作通常包括以下4步: (1)获得目的基因(外源基因);(2)目的基因与运载体结合,形成重组DNA分子; (3)将重组DNA分子导人受体细胞;(4)目的基因的检测与表达。
ATCTCGAGACTGATTGGCCTTAAGCTCGAGATGACCATGGCCAGGCTCGAGCTGATGA
TAGAGCTCTGACTAACCGGAATTCGAGCTCTACTGGTACCGGTCCGAGCTCGACTACT
ATCTCGAGACTGATTGGCCTTAAGCTCGAGATGACCATGGCCAGGCTCGAGCTGATGA
课后练习
一、基础题
3.将外源基因导入受体细胞时,常用的运载体有哪些?
提示:常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等。
课后练习
1.细菌和人是差异非常大的两种生物,为什么通过基因重组后,细菌能够合成人体的某些蛋白质呢?
提示:这是因为在基因水平上,人和细菌的遗传机制是一致的。细菌和人的遗传物质都是DNA,都使用同一套遗传密码子,都遵循中心法则。因此,通过基因重组,细菌能够合成人体的某些蛋白质。
二、拓展题
课后练习
2.如果你是一个生产基因工程产品的农场的经营者,你将如何向客户解释你的产品,并让他们放心地购买你的产品呢?。
提示:例如,可以向客户说明农场具备相应的安全检测设施和措施,已经领取了农业转基因生物安全证书,产品中所含有的成分都是自然界天然存在的物质,产品经过试用表明对人体无害等。
二、拓展题