湖北省孝感市2018-2019学年高二下学期生物期中考试试卷（A）
一、单选题
1．（2019高二下·孝感期中）下列关于基因工程的叙述中错误的是（ ）
A．基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建
B．将目的基因导入大肠杆菌细胞常用Ca2+处理法
C．基因工程技术可以定向改造生物的性状，培育新的生物品种
D．基因工程技术是唯一能打破远缘杂交不亲和障碍培育生物新品种的方法
2．（2019高二下·孝感期中）下列哪项不是DNA重组技术的基本操作所用到的工具酶（ ）
A．限制酶 B．E.coli DNA连接酶
C．T2 DNA连接酶 D．T4 DNA连接酶
3．（2019高二下·孝感期中）下列关于几种酶的叙述，错误的是（ ）
A．E.coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来
B．限制酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子
C．构建cDNA文库至少要使用两种酶
D．限制酶能使DNA的氢键断裂
4．（2019高二下·孝感期中）下列关于质粒的叙述，正确的是（ ）
A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种细胞器
B．质粒是独立于细菌拟核之外，能自主复制的小型环状DNA分子
C．细菌质粒作为运载体常用抗生素合成基因作为标记基因
D．细菌质粒的复制过程一定是在受体细胞外独立进行的
5．（2019高二下·孝感期中）关于cDNA文库和基因组文库的比较不正确的是（ ）
A．cDNA文库小
B．cDNA文库无启动子
C．cDNA文库有内含子
D．cDNA文库含有某种生物的部分基因
6．（2019高二下·孝感期中）受体细胞不同，将目的基因导入受体细胞的方法也不相同，下列受体细胞与导入方法匹配错误的一项是（ ）
选项 受体细胞 导入方法
A 棉花细胞 花粉管通道法
B 大肠杆菌 农杆菌转化法
C 羊受精卵 显微注射技术
D 玉米细胞 基因枪法
A．A B．B C．C D．D
7．（2019高二下·孝感期中）限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割 DNA 分子上特定的核苷酸碱基序列。下图依次为四种限制酶BamHⅠ，EcoRⅠ，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列，箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的 DNA 片段末端可以互补黏合（ ）
A．BamHI和EcoRI B．BamHI和HindⅢ
C．EcoRI和HindⅢ D．BamHI和BglII
8．（2019高二下·孝感期中）下列关于蛋白质工程实施的叙述，不正确的是（ ）
A．可以根据人类的需要，设计并制造出自然界不存在的全新蛋白质
B．可以根据功能的需要替代蛋白质中的某一个肽段或一个特定的结构区域
C．可以通过基因工程间接地改造蛋白质中特定的一个或几个氨基酸
D．可以通过人工化学合成的方法直接对蛋白质的氨基酸进行改造
9．（2019高二下·孝感期中）蛋白质工程的基本操作程序正确的是（ ）
①设计预期的蛋白质结构
②找到相对应的脱氧核苷酸的序列
③推测应有的氨基酸的序列
④蛋白质的预期功能
A．①→②→③→④ B．④→③→②→①
C．④→①→③→② D．②→③→①→④
10．（2019高二下·孝感期中）北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（ ）
A．过程①获取的目的基因，与比目鱼染色体中的抗冻基因序列完全相同
B．对抗冻基因进行基因修饰，能够得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选
D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
11．（2019高二下·孝感期中）下列有关愈伤组织的叙述错误的是（ ）
A．是植物细胞脱分化后形成的
B．愈伤组织的代谢类型是异养需氧型
C．每个细胞仍然具有全能性
D．由于脱分化导致遗传物质发生了改变
12．（2019高二下·孝感期中）下图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，下列叙述不正确的是（ ）
A．该途径依据的原理是植物细胞具有全能性
B．过程①需控制好培养基中植物激素的比例
C．经过程①细胞的形态和结构发生了变化
D．过程③需使用液体培养基，有利于细胞增殖
13．（2019高二下·孝感期中）下列有关植物细胞工程应用的叙述，错误的是（ ）
A．用人工薄膜将愈伤组织包裹可形成人工种子
B．在紫草素的细胞产物工厂化生产的过程中使用的是液体培养基
C．对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种
D．利用植物组织培养技术培育的脱毒苗具有不含或很少含病毒的特点
14．（2019高二下·孝感期中）人工种子是指植物离体培养中产生的胚状体，包裹在含有养分和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够萌发成幼苗。下列与人工种子形成过程无关的是（ ）
A．细胞的脱分化和再分化 B．细胞全能性
C．细胞有丝分裂 D．细胞减数分裂
15．（2019高二下·孝感期中）下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程，据图分析错误的是（ ）
A．①过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理
B．②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变
C．③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能
D．④过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理
16．（2019高二下·孝感期中）利用植物体细胞杂交技术将白菜和甘蓝(均为二倍体)培育成“白菜—甘蓝”杂种植株(如图所示)，下列说法正确的是（ ）
A．图示“白菜—甘蓝”植株不能结子
B．植物体细胞杂交技术的目的是获得杂种细胞
C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程
D．“白菜—甘蓝”杂种植株所具有的性状是基因选择性表达的结果
17．（2019高二下·孝感期中）下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜—甘蓝”，克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍
B．切取一定大小的马铃薯茎尖进行组织培养，可获得脱毒苗
C．常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激等
D．细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸
18．（2019高二下·孝感期中）以下有关动物细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．动物细胞培养中分散细胞的处理方法是酶解法
B．核移植是动物克隆得以实现的技术中最基础的技术
C．动物细胞融合中，常用灭活的病毒处理
D．单克隆抗体最广泛的用途是做体外诊断试剂
19．（2019高二下·孝感期中）动物细胞培养是动物细胞工程的基础，其培养过程的顺序是（ ）
①胰蛋白酶处理动物组织，形成分散的悬浮细胞 ②传代培养③定期用胰蛋白酶处理培养细胞，配制成细胞悬浮液 ④原代培养
A．①②③④ B．①③④② C．①④②③ D．①④③②
20．（2019高二下·孝感期中）下列对动物细胞核移植技术的描述，不正确的是（ ）
A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞
B．体细胞核移植的过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的核
C．体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期卵母细胞作为受体细胞
D．通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对供体100%的复制
21．（2019高二下·孝感期中）一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ）
①无毒的环境 ②无菌的环境 ③固体培养基 ④温度与动物体温相近 ⑤需要O2，不需要CO2⑥CO2能调节培养液pH
A．①②④⑤ B．①②③④ C．①③⑤⑥ D．①②④⑥
22．（2019高二下·孝感期中）下列有关利用动物细胞工程生产单克隆抗体的叙述，错误的是（ ）
A．单克隆抗体制备使用的主要生物材料是骨髓瘤细胞和浆细胞
B．单克隆抗体制备的原理之一是一个浆细胞可以产生多种特异性抗体
C．筛选能分泌所需抗体的杂交瘤细胞运用了抗原一抗体特异性反应原理
D．单克隆抗体具有纯度高、产量大、灵敏度高等优点
23．（2019高二下·孝感期中）甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。下列错误的是（ ）
A．为了培育该新型药用植物，取甲和乙的叶片，先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁
B．用化学诱导剂PEG诱导二者融合
C．形成的融合细胞进一步培养形成愈伤组织，之后形成整个植株，这一过程中进行了植物组织培养
D．上述杂种植株属于二倍体
24．（2019高二下·孝感期中）核移植的受体细胞是MII期卵母细胞,下列有关说法错误的是（ ）
A．MII期卵母细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质
B．MII期卵母细胞体积比较大,操作起来相对容易
C．可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中
D．MII期卵母细胞对克隆动物的遗传特性没有任何影响
25．（2019高二下·孝感期中）下列关于细胞工程的叙述中，正确的是（ ）
A．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得脱毒苗
B．动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C．动物细胞培养和植物组织培养中所用培养基的营养成分完全相同
D．动物细胞培养中只进行过一次用胰蛋白酶进行处理
二、非选择题
26．（2019高二下·孝感期中）根据基因工程的有关知识。回答下列问题。
（1）大肠杆菌质粒常作为基因工程目的基因的载体，另外， 和动植物病毒也可作为载体，若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，而常用Ca2+处理大肠杆菌，其目的是 。
（2）利用转基因技术实现胰岛素的批量生产是目前治疗糖尿病的新思路，该过程中的关键操作环节是 。
（3）对于胰岛素基因的获取，途径之一是通过提取 细胞中的胰岛素mRNA，经过反转录过程合成目的基因，之后通过 技术大量扩增。
27．（2019高二下·孝感期中）草鱼生长激素基因可促进鲤鱼生长，利用精子载体法（将构建好的表达载体与精子混合培养，使外源基因进入精子内），可将草鱼生长激素基因导入鲤鱼受精卵细胞，培育转基因鲤鱼。请回答。
（1）基因工程中，一个基因表达载体的组成，除了目的基因以外，还必须有 、以及 、 。
（2）作为载体的精子取自 鱼。
（3）可通过检测鲤鱼体内激素增加量或 来检测目的基因是否成功表达。
28．（2019高二下·孝感期中）美国化学家从红豆杉树皮中分离出高抗癌活性的紫杉醇，从此，国家重点保护珍稀植物——红豆杉遭受了掠夺式的砍伐。为拯救红豆杉，同时获得紫杉醇，科研小组设计了如下图所示的实验流程。请回答下列问题：
（1）选用茎尖分生组织进行组织培养可以获得脱毒苗，原因是茎尖分生组织细胞 ；诱导茎尖分生组织形成愈伤组织的过程叫 。利用愈伤组织诱导形成的胚状体经人工薄膜包装后就可得到 。
（2）茎尖分生组织细胞具有全能性的原因是 。
（3）紫杉醇作为常见的细胞产物，抗癌效果显著，通常取自愈伤组织的 （细胞器）。
29．（2019高二下·孝感期中）回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞会分裂缓慢甚至完全停止，但极少数细胞可以连续增殖，这些细胞已经发生突变正朝着等同于 细胞的方向发展。
（3）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞有丝分裂 期的细胞用显微镜进行观察。
（4）在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞。
30．（2019高二下·孝感期中）下图表示单克隆抗体的制备过程。请回答下列问题：
（1）过程①注射特定的抗原的目的是 。
（2）过程②诱导融合运用的原理是 ，该过程中区别于植物原生质体融合的方法是用 处理。
（3）过程③是杂交瘤细胞的培养，在体外培养时培养基中需要提供一定浓度的CO2，目的是 。杂交瘤细胞需要经过两次筛选，第二次筛选的目的是 。
答案解析部分
1．【答案】D
【知识点】基因工程的原理；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：A. 基因工程的步骤为：获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，A不符合题意；
B. 以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2+处理细胞以使其处于感受态，以便目的基因的导入，B不符合题意；
C. 基因工程可以按照人们的意愿，克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，培育新的生物品种，C不符合题意；
D. 基因工程技术和细胞工程技术都能打破远缘杂交不亲和障碍，培育生物新品种，D符合题意。
故答案为：D
【分析】1.基因工程 ：又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
2.操作步骤：
（1）提取目的基因
获取目的基因是实施基因工程的第一步。
（2）目的基因与运载体结合
基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
（3）将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。
（4）目的基因的检测和表达
目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性 。
2．【答案】C
【知识点】基因工程的基本工具简介
【解析】【解答】基因工程中常用的工具酶有DNA连接酶、限制性核酸内切酶，其中常用的DNA连接酶包括Ecoli DNA连接酶和T4 DNA连接酶。
故答案为：C
【分析】基因工程工具：
（1）酶：限制性核酸内切酶、DNA连接酶。
（2）载体：质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体。
3．【答案】D
【知识点】基因工程的基本工具简介
【解析】【解答】解：A. E.coli DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来，A不符合题意；
B. 限制性核酸内切酶将一个DNA分子片段切成两个片段，即断裂两个磷酸二酯键，因此需消耗两个水分子，B不符合题意；
C. 构建cDNA文库时至少用到逆转录酶与DNA连接酶，C不符合题意；
D. 限制酶能使DNA的磷酸二酯键断裂，D符合题意。
故答案为：D
【分析】生物几种酶的总结：
4．【答案】B
【知识点】基因工程的基本工具简介
【解析】【解答】解：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的小型双链环状DNA分子，不是细胞器，A不符合题意，B符合题意；细菌质粒作为运载体常用抗生素抗性基因作为标记基因，C不符合题意；细菌质粒的复制过程可在宿主细胞内独立进行，D不符合题意。
故选B。
故答案为：B
【分析】1.质粒广泛存在于生物界，从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物，甚至人类机体中都含有。从分子组成看，有DNA 质粒，也有RNA 质粒; 从分子构型看，有线型质粒、也有环状质粒: 其表型也多种多样。细菌质粒是基因工程中最常用的载体。
2.质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体（或拟核）以外的DNA分子，存在于细胞质中（但酵母除外，酵母的2 μm质粒存在于细胞核中），具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子。质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质，可自行丢失或人工处理而消除，如高温、紫外线等。质粒携带的遗传信息能赋予宿主菌某些生物学性状，有利于细菌在特定的环境条件下生存。
5．【答案】C
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：基因组文库含有某种生物的全部基因，cDNA文库是从某时期的细胞中提取mRNA，利用反转录法获取的，只含有该生物的部分基因，因此cDNA文库比较小，且无启动子和内含子，A项、B项、D不符合题意，C符合题意。
故答案为：C
【分析】1.cDNA文库: 以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
2.基因组文库: 一个生物体的基因组DNA用限制性内切酶部分酶切后，将酶切片段插入到载体DNA分子中，所有这些插入了基因组DNA片段的载体分子的集合体，将包含这个生物体的整个基因组，也就是构成了这个生物体的基因文库。
6．【答案】B
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：A. 棉花细胞是植物细胞，可采用花粉管通道法，A不符合题意；
B. Ca2+处理法能使大肠杆菌细胞的生理状态发生改变，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，所以将目的基因导入微生物细胞，常采用感受态细胞法，农杆菌转化法常用于植物，B符合题意；
C. 动物受精卵为受体细胞时，常用显微注射法，C不符合题意；
D. 在自然条件下，农杆菌感染双子叶植物和裸子植物，因此农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法，对于某些单子叶植物细胞如玉米细胞，可以用基因枪法，D不符合题意。
故答案为：B
【分析】将目的基因导入受体细胞的方法比较：
生物种类 植物 动物 微生物
常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 感受态细胞法
受体细胞 体细胞或受精卵 受精卵 原核细胞
转化过程 将目的基因插入到Ti质粒的T DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子
7．【答案】D
【知识点】基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】解：限制酶所识别的是特定的碱基序列，并在特定部位进行切割，只要切下的游离碱基互补即可互补黏合，由图示可知，BamH I和Bgl II切割产生的黏性末端相同，可通过DNA连接酶连接，D符合题意。
故答案为：D
【分析】限制酶是识别特定的核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。
根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子，限制性内切酶可分为两大类，即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。
8．【答案】D
【知识点】蛋白质工程
【解析】【解答】解：A. 蛋白质工程是在原有蛋白质的基础上，根据人们的需求对蛋白质分子作出的定向的改造，可以设计并制造出自然界不存在的全新蛋白质，A不符合题意；
B. 蛋白质工程可以根据功能的需要替代蛋白质中的某一个肽段或一个特定的结构区域，B不符合题意；
C. 蛋白质工程较小的改造是改造蛋白质分子中某些活性部位的1个或几个氨基酸残基通过定点诱变技术，以获得人类所需要的目的蛋白质，C不符合题意；
D. 蛋白质工程不能通过人工化学合成的方法直接对蛋白质的氨基酸进行改造，D符合题意。
故答案为：D
【分析】蛋白质工程：以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过化学、物理和分子生物学的手段进行基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求。
9．【答案】C
【知识点】蛋白质工程
【解析】【解答】蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因），最后按照基因工程的一般步骤进行。因此，蛋白质工程的基本操作程序正确的是④→①→③→②。
故答案为：C
【分析】蛋白质工程：
10．【答案】B
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：图中①是通过逆转录法获取目的基因的过程，该方法获取的目的基因中无内含子等结构，故与比目鱼染色体中的抗冻基因序列不完全相同，A不符合题意；由题干信息“编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强”可知，对抗冻基因进行基因修饰，得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B符合题意；导入农杆菌是为了扩增和更易导入番茄细胞，C不符合题意；DNA探针技术可检测目的基因的存在，但不能检测其是否完全表达，后者利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来， D不符合题意。
故答案为：B
【分析】基因工程步骤：
11．【答案】D
【知识点】植物组织培养的过程
【解析】【解答】愈伤组织是植物细胞脱分化后形成的，代谢类型是异养需氧型，每个细胞仍然具有全能性，细胞分裂方式是有丝分裂，导致遗传物质没有改变。
故答案为：D
【分析】愈伤组织：是无定形的组织团块.指植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织.它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞.
12．【答案】A
【知识点】植物细胞工程的应用
【解析】【解答】解：该途径获得细胞群和细胞产物（紫杉醇），没有体现细胞的全能性，A符合题意；过程①表示脱分化，需在培养基中加入适当比例的生长素和细胞分裂素，B不符合题意；外植体在植物激素的刺激下发生脱分化形成由相对没有分化的薄壁细胞组成的愈伤组织，因此经过过程①，细胞的形态和结构发生了变化，C不符合题意；过程③表示细胞大量增殖的过程，需使用液体培养基，D不符合题意。
故答案为：A
【分析】
13．【答案】A
【知识点】植物细胞工程的应用
【解析】【解答】解：A、用人工薄膜将胚状体包装后可制成人工种子，错误；
B、细胞产物的工厂化生产是从人工培养的愈伤组织细胞中提取某种成分，如紫草素等，使用的液体培养基，正确；
C、在育种中，可以对植物的愈伤组织进行化学或物理的诱变处理，促使其发生突变，再通过诱导分化形成植株。从这些植株中筛选出高抗、高产、优质的突变体，从而培育成新品种，正确；
D、利用组织培养技术培育脱毒草莓幼苗的原理是细胞的全能性，培育时，一般选取植物茎尖作材料，其依据是茎尖不含病毒（或含病毒极少），正确。
故答案为：A
【分析】 植物繁殖的新途径
1、微型繁殖技术
2、作物脱毒
3、人工种子
作物新品种的培育
1、单倍体育种
2、突变体的利用
3、细胞产物的工厂化生产
14．【答案】D
【知识点】人工种子的制备
【解析】【解答】解：植物组织培养的过程是外植体脱分化→愈伤组织再分化→胚状体→试管苗，人工种子的形成需要脱分化和再分化，A项不符合题意。植物组织培养依据的原理是细胞的全能性，B项不符合题意。
C、人工种子形成过程离不开细胞的有丝分裂和细胞分化，C项不符合题意。减数分裂的结果是产生精子或卵细胞等有性生殖细胞，用于繁衍后代，人工种子形成过程不存在减数分裂，D项符合题意。
故答案为：D
【分析】所谓人工种子，就是将组织培养产生的体细胞胚和性细胞胚包裹在能提供养分的胶囊里，再在胶囊外包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜，形成一种类似于种子的结构。
以植物组织培养的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子。
是指植物离体培养中产生的胚状体（包括体细胞胚和性细胞胚），包裹在含有养分、激素和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。
人工种子又称合成种子或体细胞种子，指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。
15．【答案】B
【知识点】植物组织培养的过程；植物组织培养的影响因素
【解析】【解答】解：①过程是去除细胞壁获得原生质体，需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶处理，A不符合题意；②过程是对原生质体进行诱变处理，促使其发生基因突变，由此产生的变异是不定向的，需要经过筛选才可能获得优良性状的突变，B符合题意；③过程是脱分化，就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程，C不符合题意；④过程是再分化，需用适宜浓度的生长素和细胞分裂素处理，D不符合题意。
故答案为：B
【分析】植物组织培养（广义）：又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织，器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
植物组织培养（狭义）：指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
16．【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】“白菜-甘蓝”杂种植株具有2个亲本的遗传物质，含有同源染色体，能正常结籽，A不符合题意；获得融合细胞后需利用植物的组织培养技术将细胞培育成植株，故植物体细胞杂交技术的最终目的是培育具有优良性状的植物新品种，B不符合题意；上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化，没有发生减数分裂，C不符合题意； “白菜-甘蓝”杂种植株的形成是白菜-甘蓝”杂种细胞进行植物组织培养的结果，是基因选择性表达的结果，D符合题意。
故答案为：D
【分析】植物体细胞杂交：
17．【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；动物细胞培养技术；细胞融合的方法
【解析】【解答】解：A. 萝卜和甘蓝不属于同一物种，它们之间存在生殖隔离，因此利用植物体细胞杂交技术培育的“萝卜一甘蓝”，能够克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，A不符合题意；
B. 因为分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，所以将马铃薯茎尖进行离体培养能获得脱毒植株，B不符合题意；
C. 常用于诱导动物细胞融合手段有：化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）、物理法（如电激等），C不符合题意；
D. 细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，D符合题意。
故答案为：D
【分析】植物细胞和动物细胞培养的比较：
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理 细胞的全能性 细胞增殖
培养基性质 固体培养基 液体培养基
培养基特有成分 蔗糖、植物激素 葡萄糖、动物学清、促生长因子
培养结果 新的个体或细胞产品 细胞或细胞产品
培养目的 快速繁殖、培育无病毒植株等 获得细胞或细胞产物
18．【答案】B
【知识点】动物细胞工程的常用技术与应用；动物细胞核移植技术；单克隆抗体的优点及应用
【解析】【解答】动物细胞培养中分散细胞的方法是用胰蛋白酶处理，A不符合题意。动物细胞培养是动物克隆得以实现的技术中最基础的技术，B符合题意。动物细胞融合中，常用灭活的病毒处理，C不符合题意。单克隆抗体最广泛的用途是做体外诊断试剂，D不符合题意。
故答案为：B
【分析】动物细胞工程就是应用细胞学的方法，按照我们人类的需要和预定的设计，有目的、有计划地保存、改变动物细胞和创造新的动物细胞，进而培育成新的物种或者品种的一门科学技术。动物细胞工程常用的技术：动物细胞培养（其它动物细胞工程的基础）、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体技术
19．【答案】D
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】解：动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础.其培养过程为：取动物组织块--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养.由以上分析可知，动物细胞培养的顺序为①④③②。
故答案为：D
【分析】细胞培养
1、动物细胞培养：从动物机体中取出相关的组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，生长，增殖。
2，常用方法，物理：剪刀剪碎，
化学法：胰蛋白酶，胶原蛋白酶
3丶制作细胞悬浮液，方法：加培养液，形成细胞悬浮液
4丶培养细胞株，原代培养，传代培养
5丶形成细胞系，传代培养，遗传物质的改变。
20．【答案】D
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】解：哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎核移植容易进行，A不符合题意；卵母细胞的核需出去，B不符合题意；卵母细胞需培养到MⅡ中期，C不符合题意；体细胞核移植中，细胞质基因是来自卵母细胞，而非供核细胞，D符合题意。
故答案为：D
【分析】动物细胞核移植技术：
21．【答案】D
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】解：①动物细胞培养需要无毒环境，①正确；
②动物细胞培养需要无菌环境，②正确；
③用于动物细胞培养的合成培养基是液体培养基，需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，③错误；
④动物细胞培养需要适宜的温度和pH，其中温度要与动物体温相近，④正确；
⑤动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，⑤错误；
⑥5%的CO2能调节培养液的pH，⑥正确；故正确的有①②④⑥，D符合题意。
故答案为：D
【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：
(1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。
(2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
(3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
(4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
22．【答案】B
【知识点】单克隆抗体的制备过程；单克隆抗体的优点及应用
【解析】【解答】单克隆抗体制备使用的主要生物材料是骨髓瘤细胞（能在体外培养条件下无限增殖）和浆细胞（能产生抗体），A不符合题意；一个浆细胞只能产生一种特异性抗体，B符合题意；抗体的本质是免疫球蛋白，抗体可以和抗原进行特异性结合，所以筛选抗体时可以运用抗原一抗体特异性反应原理，C不符合题意；单克隆抗体的特点是：特异性强、灵敏度高，可以大量制备，D不符合题意。
故答案为：B
【分析】单抗的制备过程：
23．【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】解：A. 细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，利用纤维素酶和果胶酶可以除去细胞壁，获得具有活力的原生质体，A不符合题意；
B. 诱导原生质体融合可用化学诱导剂PEG，B不符合题意；
C. 形成的融合细胞经植物组织培养，脱分化形成愈伤组织，之后形成植株，C不符合题意；
D. 甲、乙都是二倍体，体细胞杂交得到的是四倍体，D符合题意。
故答案为：D
【分析】
24．【答案】D
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】解：通常用处于MII中期去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它的细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质，A不符合题意；MII期卵母细胞体积比较大，操作起来相对容易，B不符合题意；根据分析可知，可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中，C不符合题意；生物的性状是由细胞核和细胞质共同决定的，克隆动物的细胞核中遗传物质来自于供体核，细胞质中的遗传物质来自于MII期卵母细胞，D符合题意。
故答案为：D
【分析】动物细胞核移植的过程：
25．【答案】A
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；动物细胞工程的常用技术与应用；动物细胞培养技术
【解析】【解答】解：A. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，通过观察细胞的畸变率来确定物质毒性的大小，茎尖分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，培养可获得脱毒苗，A符合题意；
B. 动物细胞融合不能形成杂种个体，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，但两者都能形成杂种细胞，B不符合题意；
C. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基物理性质不同、成分也不同，前者含有葡萄糖和动物血清，后者含有蔗糖和植物激素，C不符合题意；
D. 在动物细胞培养过程中，先后两次用胰蛋白酶处理，第一次是使动物组织中的细胞分散开，第二次是细胞贴壁生长后，用胰蛋白质酶将细胞从瓶壁上处理下来，D不符合题意。
故答案为：A
【分析】细胞工程：
26．【答案】（1）λ噬菌体的衍生物；提高受体细胞的转化率（或使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子）
（2）基因表达载体的构建
（3）胰岛B；PCR
【知识点】基因工程的基本工具（详细）；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：（1）基因工程常用的运载体除了大肠杆菌质粒、动植物病毒外，还有λ噬菌体的衍生物等；未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA）的能力极弱，因此常用Ca2+处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子。（2）基因工程的核心步骤是构建基因表达载体。（3） 胰岛素基因只能在胰岛B细胞中选择性表达，因此应该从胰岛B细胞提取胰岛素mRNA，经过逆转录形成胰岛素基因，再通过PCR技术大量扩增目的基因。
【分析】几种目的基因获取方法的比较：
方法 从基因文库中获取 人工合成
从基因组文库中获取 从部分基因文库，如cDNA文库中获取 化学合成法 反转录法
过程
27．【答案】（1）启动子；终止子；标记基因
（2）鲤
（3）测量并统计个体的体长或体重的增加量
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：（1）基因工程中，一个基因表达载体的组成，除了目的基因以外，还必须有启动子、以及终止子、标记基因。（2）利用精子载体法培育转基因鲤鱼时，将构建好的表达载体与精子混合培养，使外源基因进入精子内，作为载体的精子取自鲤鱼，因为自然情况只有同种生物的精子和卵细胞才能相互识别。（3）根据题干可知，本题的目的基因是草鱼生长激素基因，可促进鲤鱼生长，故可通过检测鲤鱼体内激素增加量或测量并统计个体的体长或体重的增加量来检测目的基因是否成功表达。
【分析】 基因表达载体的构建
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。
③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
28．【答案】（1）病毒极少，甚至无病毒；脱分化；人工种子
（2）茎尖分生组织细胞含有该种生物的全部遗传信息
（3）液泡
【知识点】植物组织培养的过程
【解析】【解答】解：（1）茎尖分生组织含有的病毒极少，甚至无病毒，进行组织培养可以获得脱毒苗；分生组织经过脱分化过程可以形成愈伤组织；利用愈伤组织诱导形成的胚状体经人工薄膜包装后可得到人工种子。（2）茎尖分生组织细胞含有该种生物的全部遗传信息，因此具有发育的全能性。（3）紫杉醇作为常见的细胞产物，抗癌效果显著，通常取自愈伤组织的液泡中。
【分析】分析题图，红豆杉茎尖分生组织通过脱分化过程形成愈伤组织，一方面愈伤组织通过再分化形成胚状体，进而培养成红豆杉植株；另一方面，愈伤组织培养增殖产生更多的愈伤组织细胞，从愈伤组织细胞中提取紫杉醇。
29．【答案】（1）相互接触；接触抑制
（2）癌
（3）中
（4）冷冻
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】解：（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞会分裂缓慢甚至完全停止，但极少数细胞可以连续增殖，这些细胞已经发生突变正朝着等同于癌细胞的方向发展。（3）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞有丝分裂中期的细胞用显微镜进行观察。（4）在细胞培养过程中，通常在冷冻或液氮条件下保存细胞。
【分析】 动物细胞培养的过程：
30．【答案】（1）使小鼠产生能分泌特定抗体的浆细胞（B淋巴细胞）
（2）细胞膜的流动性；灭活的病毒
（3）维持培养液的pH；获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞
【知识点】单克隆抗体的制备过程
【解析】【解答】解：（1）过程①表示给小鼠注射特定抗原，其目的是使小鼠产生能分泌特定抗体的浆细胞（B淋巴细胞）。（2）过程②诱导融合运用的原理是细胞膜的流动性，诱导动物细胞融合区别于植物原生质体融合的方法是用灭活的病毒处理。（3）动物细胞培养时需要提供一定浓度的CO2，其目的是维持培养液的pH。杂交瘤细胞两次筛选的目的不同，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
【分析】单抗的制备过程：
1 / 1湖北省孝感市2018-2019学年高二下学期生物期中考试试卷（A）
一、单选题
1．（2019高二下·孝感期中）下列关于基因工程的叙述中错误的是（ ）
A．基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建
B．将目的基因导入大肠杆菌细胞常用Ca2+处理法
C．基因工程技术可以定向改造生物的性状，培育新的生物品种
D．基因工程技术是唯一能打破远缘杂交不亲和障碍培育生物新品种的方法
【答案】D
【知识点】基因工程的原理；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：A. 基因工程的步骤为：获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，A不符合题意；
B. 以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2+处理细胞以使其处于感受态，以便目的基因的导入，B不符合题意；
C. 基因工程可以按照人们的意愿，克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，培育新的生物品种，C不符合题意；
D. 基因工程技术和细胞工程技术都能打破远缘杂交不亲和障碍，培育生物新品种，D符合题意。
故答案为：D
【分析】1.基因工程 ：又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
2.操作步骤：
（1）提取目的基因
获取目的基因是实施基因工程的第一步。
（2）目的基因与运载体结合
基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
（3）将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。
（4）目的基因的检测和表达
目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性 。
2．（2019高二下·孝感期中）下列哪项不是DNA重组技术的基本操作所用到的工具酶（ ）
A．限制酶 B．E.coli DNA连接酶
C．T2 DNA连接酶 D．T4 DNA连接酶
【答案】C
【知识点】基因工程的基本工具简介
【解析】【解答】基因工程中常用的工具酶有DNA连接酶、限制性核酸内切酶，其中常用的DNA连接酶包括Ecoli DNA连接酶和T4 DNA连接酶。
故答案为：C
【分析】基因工程工具：
（1）酶：限制性核酸内切酶、DNA连接酶。
（2）载体：质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体。
3．（2019高二下·孝感期中）下列关于几种酶的叙述，错误的是（ ）
A．E.coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来
B．限制酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子
C．构建cDNA文库至少要使用两种酶
D．限制酶能使DNA的氢键断裂
【答案】D
【知识点】基因工程的基本工具简介
【解析】【解答】解：A. E.coli DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来，A不符合题意；
B. 限制性核酸内切酶将一个DNA分子片段切成两个片段，即断裂两个磷酸二酯键，因此需消耗两个水分子，B不符合题意；
C. 构建cDNA文库时至少用到逆转录酶与DNA连接酶，C不符合题意；
D. 限制酶能使DNA的磷酸二酯键断裂，D符合题意。
故答案为：D
【分析】生物几种酶的总结：
4．（2019高二下·孝感期中）下列关于质粒的叙述，正确的是（ ）
A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种细胞器
B．质粒是独立于细菌拟核之外，能自主复制的小型环状DNA分子
C．细菌质粒作为运载体常用抗生素合成基因作为标记基因
D．细菌质粒的复制过程一定是在受体细胞外独立进行的
【答案】B
【知识点】基因工程的基本工具简介
【解析】【解答】解：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的小型双链环状DNA分子，不是细胞器，A不符合题意，B符合题意；细菌质粒作为运载体常用抗生素抗性基因作为标记基因，C不符合题意；细菌质粒的复制过程可在宿主细胞内独立进行，D不符合题意。
故选B。
故答案为：B
【分析】1.质粒广泛存在于生物界，从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物，甚至人类机体中都含有。从分子组成看，有DNA 质粒，也有RNA 质粒; 从分子构型看，有线型质粒、也有环状质粒: 其表型也多种多样。细菌质粒是基因工程中最常用的载体。
2.质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体（或拟核）以外的DNA分子，存在于细胞质中（但酵母除外，酵母的2 μm质粒存在于细胞核中），具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子。质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质，可自行丢失或人工处理而消除，如高温、紫外线等。质粒携带的遗传信息能赋予宿主菌某些生物学性状，有利于细菌在特定的环境条件下生存。
5．（2019高二下·孝感期中）关于cDNA文库和基因组文库的比较不正确的是（ ）
A．cDNA文库小
B．cDNA文库无启动子
C．cDNA文库有内含子
D．cDNA文库含有某种生物的部分基因
【答案】C
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：基因组文库含有某种生物的全部基因，cDNA文库是从某时期的细胞中提取mRNA，利用反转录法获取的，只含有该生物的部分基因，因此cDNA文库比较小，且无启动子和内含子，A项、B项、D不符合题意，C符合题意。
故答案为：C
【分析】1.cDNA文库: 以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
2.基因组文库: 一个生物体的基因组DNA用限制性内切酶部分酶切后，将酶切片段插入到载体DNA分子中，所有这些插入了基因组DNA片段的载体分子的集合体，将包含这个生物体的整个基因组，也就是构成了这个生物体的基因文库。
6．（2019高二下·孝感期中）受体细胞不同，将目的基因导入受体细胞的方法也不相同，下列受体细胞与导入方法匹配错误的一项是（ ）
选项 受体细胞 导入方法
A 棉花细胞 花粉管通道法
B 大肠杆菌 农杆菌转化法
C 羊受精卵 显微注射技术
D 玉米细胞 基因枪法
A．A B．B C．C D．D
【答案】B
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：A. 棉花细胞是植物细胞，可采用花粉管通道法，A不符合题意；
B. Ca2+处理法能使大肠杆菌细胞的生理状态发生改变，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，所以将目的基因导入微生物细胞，常采用感受态细胞法，农杆菌转化法常用于植物，B符合题意；
C. 动物受精卵为受体细胞时，常用显微注射法，C不符合题意；
D. 在自然条件下，农杆菌感染双子叶植物和裸子植物，因此农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法，对于某些单子叶植物细胞如玉米细胞，可以用基因枪法，D不符合题意。
故答案为：B
【分析】将目的基因导入受体细胞的方法比较：
生物种类 植物 动物 微生物
常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 感受态细胞法
受体细胞 体细胞或受精卵 受精卵 原核细胞
转化过程 将目的基因插入到Ti质粒的T DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子
7．（2019高二下·孝感期中）限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割 DNA 分子上特定的核苷酸碱基序列。下图依次为四种限制酶BamHⅠ，EcoRⅠ，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列，箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的 DNA 片段末端可以互补黏合（ ）
A．BamHI和EcoRI B．BamHI和HindⅢ
C．EcoRI和HindⅢ D．BamHI和BglII
【答案】D
【知识点】基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】解：限制酶所识别的是特定的碱基序列，并在特定部位进行切割，只要切下的游离碱基互补即可互补黏合，由图示可知，BamH I和Bgl II切割产生的黏性末端相同，可通过DNA连接酶连接，D符合题意。
故答案为：D
【分析】限制酶是识别特定的核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。
根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子，限制性内切酶可分为两大类，即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。
8．（2019高二下·孝感期中）下列关于蛋白质工程实施的叙述，不正确的是（ ）
A．可以根据人类的需要，设计并制造出自然界不存在的全新蛋白质
B．可以根据功能的需要替代蛋白质中的某一个肽段或一个特定的结构区域
C．可以通过基因工程间接地改造蛋白质中特定的一个或几个氨基酸
D．可以通过人工化学合成的方法直接对蛋白质的氨基酸进行改造
【答案】D
【知识点】蛋白质工程
【解析】【解答】解：A. 蛋白质工程是在原有蛋白质的基础上，根据人们的需求对蛋白质分子作出的定向的改造，可以设计并制造出自然界不存在的全新蛋白质，A不符合题意；
B. 蛋白质工程可以根据功能的需要替代蛋白质中的某一个肽段或一个特定的结构区域，B不符合题意；
C. 蛋白质工程较小的改造是改造蛋白质分子中某些活性部位的1个或几个氨基酸残基通过定点诱变技术，以获得人类所需要的目的蛋白质，C不符合题意；
D. 蛋白质工程不能通过人工化学合成的方法直接对蛋白质的氨基酸进行改造，D符合题意。
故答案为：D
【分析】蛋白质工程：以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过化学、物理和分子生物学的手段进行基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求。
9．（2019高二下·孝感期中）蛋白质工程的基本操作程序正确的是（ ）
①设计预期的蛋白质结构
②找到相对应的脱氧核苷酸的序列
③推测应有的氨基酸的序列
④蛋白质的预期功能
A．①→②→③→④ B．④→③→②→①
C．④→①→③→② D．②→③→①→④
【答案】C
【知识点】蛋白质工程
【解析】【解答】蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因），最后按照基因工程的一般步骤进行。因此，蛋白质工程的基本操作程序正确的是④→①→③→②。
故答案为：C
【分析】蛋白质工程：
10．（2019高二下·孝感期中）北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（ ）
A．过程①获取的目的基因，与比目鱼染色体中的抗冻基因序列完全相同
B．对抗冻基因进行基因修饰，能够得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选
D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
【答案】B
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：图中①是通过逆转录法获取目的基因的过程，该方法获取的目的基因中无内含子等结构，故与比目鱼染色体中的抗冻基因序列不完全相同，A不符合题意；由题干信息“编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强”可知，对抗冻基因进行基因修饰，得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B符合题意；导入农杆菌是为了扩增和更易导入番茄细胞，C不符合题意；DNA探针技术可检测目的基因的存在，但不能检测其是否完全表达，后者利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来， D不符合题意。
故答案为：B
【分析】基因工程步骤：
11．（2019高二下·孝感期中）下列有关愈伤组织的叙述错误的是（ ）
A．是植物细胞脱分化后形成的
B．愈伤组织的代谢类型是异养需氧型
C．每个细胞仍然具有全能性
D．由于脱分化导致遗传物质发生了改变
【答案】D
【知识点】植物组织培养的过程
【解析】【解答】愈伤组织是植物细胞脱分化后形成的，代谢类型是异养需氧型，每个细胞仍然具有全能性，细胞分裂方式是有丝分裂，导致遗传物质没有改变。
故答案为：D
【分析】愈伤组织：是无定形的组织团块.指植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织.它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞.
12．（2019高二下·孝感期中）下图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，下列叙述不正确的是（ ）
A．该途径依据的原理是植物细胞具有全能性
B．过程①需控制好培养基中植物激素的比例
C．经过程①细胞的形态和结构发生了变化
D．过程③需使用液体培养基，有利于细胞增殖
【答案】A
【知识点】植物细胞工程的应用
【解析】【解答】解：该途径获得细胞群和细胞产物（紫杉醇），没有体现细胞的全能性，A符合题意；过程①表示脱分化，需在培养基中加入适当比例的生长素和细胞分裂素，B不符合题意；外植体在植物激素的刺激下发生脱分化形成由相对没有分化的薄壁细胞组成的愈伤组织，因此经过过程①，细胞的形态和结构发生了变化，C不符合题意；过程③表示细胞大量增殖的过程，需使用液体培养基，D不符合题意。
故答案为：A
【分析】
13．（2019高二下·孝感期中）下列有关植物细胞工程应用的叙述，错误的是（ ）
A．用人工薄膜将愈伤组织包裹可形成人工种子
B．在紫草素的细胞产物工厂化生产的过程中使用的是液体培养基
C．对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种
D．利用植物组织培养技术培育的脱毒苗具有不含或很少含病毒的特点
【答案】A
【知识点】植物细胞工程的应用
【解析】【解答】解：A、用人工薄膜将胚状体包装后可制成人工种子，错误；
B、细胞产物的工厂化生产是从人工培养的愈伤组织细胞中提取某种成分，如紫草素等，使用的液体培养基，正确；
C、在育种中，可以对植物的愈伤组织进行化学或物理的诱变处理，促使其发生突变，再通过诱导分化形成植株。从这些植株中筛选出高抗、高产、优质的突变体，从而培育成新品种，正确；
D、利用组织培养技术培育脱毒草莓幼苗的原理是细胞的全能性，培育时，一般选取植物茎尖作材料，其依据是茎尖不含病毒（或含病毒极少），正确。
故答案为：A
【分析】 植物繁殖的新途径
1、微型繁殖技术
2、作物脱毒
3、人工种子
作物新品种的培育
1、单倍体育种
2、突变体的利用
3、细胞产物的工厂化生产
14．（2019高二下·孝感期中）人工种子是指植物离体培养中产生的胚状体，包裹在含有养分和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够萌发成幼苗。下列与人工种子形成过程无关的是（ ）
A．细胞的脱分化和再分化 B．细胞全能性
C．细胞有丝分裂 D．细胞减数分裂
【答案】D
【知识点】人工种子的制备
【解析】【解答】解：植物组织培养的过程是外植体脱分化→愈伤组织再分化→胚状体→试管苗，人工种子的形成需要脱分化和再分化，A项不符合题意。植物组织培养依据的原理是细胞的全能性，B项不符合题意。
C、人工种子形成过程离不开细胞的有丝分裂和细胞分化，C项不符合题意。减数分裂的结果是产生精子或卵细胞等有性生殖细胞，用于繁衍后代，人工种子形成过程不存在减数分裂，D项符合题意。
故答案为：D
【分析】所谓人工种子，就是将组织培养产生的体细胞胚和性细胞胚包裹在能提供养分的胶囊里，再在胶囊外包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜，形成一种类似于种子的结构。
以植物组织培养的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子。
是指植物离体培养中产生的胚状体（包括体细胞胚和性细胞胚），包裹在含有养分、激素和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。
人工种子又称合成种子或体细胞种子，指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。
15．（2019高二下·孝感期中）下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程，据图分析错误的是（ ）
A．①过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理
B．②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变
C．③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能
D．④过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理
【答案】B
【知识点】植物组织培养的过程；植物组织培养的影响因素
【解析】【解答】解：①过程是去除细胞壁获得原生质体，需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶处理，A不符合题意；②过程是对原生质体进行诱变处理，促使其发生基因突变，由此产生的变异是不定向的，需要经过筛选才可能获得优良性状的突变，B符合题意；③过程是脱分化，就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程，C不符合题意；④过程是再分化，需用适宜浓度的生长素和细胞分裂素处理，D不符合题意。
故答案为：B
【分析】植物组织培养（广义）：又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织，器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
植物组织培养（狭义）：指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
16．（2019高二下·孝感期中）利用植物体细胞杂交技术将白菜和甘蓝(均为二倍体)培育成“白菜—甘蓝”杂种植株(如图所示)，下列说法正确的是（ ）
A．图示“白菜—甘蓝”植株不能结子
B．植物体细胞杂交技术的目的是获得杂种细胞
C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程
D．“白菜—甘蓝”杂种植株所具有的性状是基因选择性表达的结果
【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】“白菜-甘蓝”杂种植株具有2个亲本的遗传物质，含有同源染色体，能正常结籽，A不符合题意；获得融合细胞后需利用植物的组织培养技术将细胞培育成植株，故植物体细胞杂交技术的最终目的是培育具有优良性状的植物新品种，B不符合题意；上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化，没有发生减数分裂，C不符合题意； “白菜-甘蓝”杂种植株的形成是白菜-甘蓝”杂种细胞进行植物组织培养的结果，是基因选择性表达的结果，D符合题意。
故答案为：D
【分析】植物体细胞杂交：
17．（2019高二下·孝感期中）下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜—甘蓝”，克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍
B．切取一定大小的马铃薯茎尖进行组织培养，可获得脱毒苗
C．常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激等
D．细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸
【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；动物细胞培养技术；细胞融合的方法
【解析】【解答】解：A. 萝卜和甘蓝不属于同一物种，它们之间存在生殖隔离，因此利用植物体细胞杂交技术培育的“萝卜一甘蓝”，能够克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，A不符合题意；
B. 因为分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，所以将马铃薯茎尖进行离体培养能获得脱毒植株，B不符合题意；
C. 常用于诱导动物细胞融合手段有：化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）、物理法（如电激等），C不符合题意；
D. 细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，D符合题意。
故答案为：D
【分析】植物细胞和动物细胞培养的比较：
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理 细胞的全能性 细胞增殖
培养基性质 固体培养基 液体培养基
培养基特有成分 蔗糖、植物激素 葡萄糖、动物学清、促生长因子
培养结果 新的个体或细胞产品 细胞或细胞产品
培养目的 快速繁殖、培育无病毒植株等 获得细胞或细胞产物
18．（2019高二下·孝感期中）以下有关动物细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．动物细胞培养中分散细胞的处理方法是酶解法
B．核移植是动物克隆得以实现的技术中最基础的技术
C．动物细胞融合中，常用灭活的病毒处理
D．单克隆抗体最广泛的用途是做体外诊断试剂
【答案】B
【知识点】动物细胞工程的常用技术与应用；动物细胞核移植技术；单克隆抗体的优点及应用
【解析】【解答】动物细胞培养中分散细胞的方法是用胰蛋白酶处理，A不符合题意。动物细胞培养是动物克隆得以实现的技术中最基础的技术，B符合题意。动物细胞融合中，常用灭活的病毒处理，C不符合题意。单克隆抗体最广泛的用途是做体外诊断试剂，D不符合题意。
故答案为：B
【分析】动物细胞工程就是应用细胞学的方法，按照我们人类的需要和预定的设计，有目的、有计划地保存、改变动物细胞和创造新的动物细胞，进而培育成新的物种或者品种的一门科学技术。动物细胞工程常用的技术：动物细胞培养（其它动物细胞工程的基础）、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体技术
19．（2019高二下·孝感期中）动物细胞培养是动物细胞工程的基础，其培养过程的顺序是（ ）
①胰蛋白酶处理动物组织，形成分散的悬浮细胞 ②传代培养③定期用胰蛋白酶处理培养细胞，配制成细胞悬浮液 ④原代培养
A．①②③④ B．①③④② C．①④②③ D．①④③②
【答案】D
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】解：动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础.其培养过程为：取动物组织块--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养.由以上分析可知，动物细胞培养的顺序为①④③②。
故答案为：D
【分析】细胞培养
1、动物细胞培养：从动物机体中取出相关的组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，生长，增殖。
2，常用方法，物理：剪刀剪碎，
化学法：胰蛋白酶，胶原蛋白酶
3丶制作细胞悬浮液，方法：加培养液，形成细胞悬浮液
4丶培养细胞株，原代培养，传代培养
5丶形成细胞系，传代培养，遗传物质的改变。
20．（2019高二下·孝感期中）下列对动物细胞核移植技术的描述，不正确的是（ ）
A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞
B．体细胞核移植的过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的核
C．体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期卵母细胞作为受体细胞
D．通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对供体100%的复制
【答案】D
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】解：哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎核移植容易进行，A不符合题意；卵母细胞的核需出去，B不符合题意；卵母细胞需培养到MⅡ中期，C不符合题意；体细胞核移植中，细胞质基因是来自卵母细胞，而非供核细胞，D符合题意。
故答案为：D
【分析】动物细胞核移植技术：
21．（2019高二下·孝感期中）一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ）
①无毒的环境 ②无菌的环境 ③固体培养基 ④温度与动物体温相近 ⑤需要O2，不需要CO2⑥CO2能调节培养液pH
A．①②④⑤ B．①②③④ C．①③⑤⑥ D．①②④⑥
【答案】D
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】解：①动物细胞培养需要无毒环境，①正确；
②动物细胞培养需要无菌环境，②正确；
③用于动物细胞培养的合成培养基是液体培养基，需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，③错误；
④动物细胞培养需要适宜的温度和pH，其中温度要与动物体温相近，④正确；
⑤动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，⑤错误；
⑥5%的CO2能调节培养液的pH，⑥正确；故正确的有①②④⑥，D符合题意。
故答案为：D
【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：
(1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。
(2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
(3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
(4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
22．（2019高二下·孝感期中）下列有关利用动物细胞工程生产单克隆抗体的叙述，错误的是（ ）
A．单克隆抗体制备使用的主要生物材料是骨髓瘤细胞和浆细胞
B．单克隆抗体制备的原理之一是一个浆细胞可以产生多种特异性抗体
C．筛选能分泌所需抗体的杂交瘤细胞运用了抗原一抗体特异性反应原理
D．单克隆抗体具有纯度高、产量大、灵敏度高等优点
【答案】B
【知识点】单克隆抗体的制备过程；单克隆抗体的优点及应用
【解析】【解答】单克隆抗体制备使用的主要生物材料是骨髓瘤细胞（能在体外培养条件下无限增殖）和浆细胞（能产生抗体），A不符合题意；一个浆细胞只能产生一种特异性抗体，B符合题意；抗体的本质是免疫球蛋白，抗体可以和抗原进行特异性结合，所以筛选抗体时可以运用抗原一抗体特异性反应原理，C不符合题意；单克隆抗体的特点是：特异性强、灵敏度高，可以大量制备，D不符合题意。
故答案为：B
【分析】单抗的制备过程：
23．（2019高二下·孝感期中）甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。下列错误的是（ ）
A．为了培育该新型药用植物，取甲和乙的叶片，先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁
B．用化学诱导剂PEG诱导二者融合
C．形成的融合细胞进一步培养形成愈伤组织，之后形成整个植株，这一过程中进行了植物组织培养
D．上述杂种植株属于二倍体
【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】解：A. 细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，利用纤维素酶和果胶酶可以除去细胞壁，获得具有活力的原生质体，A不符合题意；
B. 诱导原生质体融合可用化学诱导剂PEG，B不符合题意；
C. 形成的融合细胞经植物组织培养，脱分化形成愈伤组织，之后形成植株，C不符合题意；
D. 甲、乙都是二倍体，体细胞杂交得到的是四倍体，D符合题意。
故答案为：D
【分析】
24．（2019高二下·孝感期中）核移植的受体细胞是MII期卵母细胞,下列有关说法错误的是（ ）
A．MII期卵母细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质
B．MII期卵母细胞体积比较大,操作起来相对容易
C．可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中
D．MII期卵母细胞对克隆动物的遗传特性没有任何影响
【答案】D
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】解：通常用处于MII中期去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它的细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质，A不符合题意；MII期卵母细胞体积比较大，操作起来相对容易，B不符合题意；根据分析可知，可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中，C不符合题意；生物的性状是由细胞核和细胞质共同决定的，克隆动物的细胞核中遗传物质来自于供体核，细胞质中的遗传物质来自于MII期卵母细胞，D符合题意。
故答案为：D
【分析】动物细胞核移植的过程：
25．（2019高二下·孝感期中）下列关于细胞工程的叙述中，正确的是（ ）
A．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得脱毒苗
B．动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C．动物细胞培养和植物组织培养中所用培养基的营养成分完全相同
D．动物细胞培养中只进行过一次用胰蛋白酶进行处理
【答案】A
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；动物细胞工程的常用技术与应用；动物细胞培养技术
【解析】【解答】解：A. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，通过观察细胞的畸变率来确定物质毒性的大小，茎尖分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，培养可获得脱毒苗，A符合题意；
B. 动物细胞融合不能形成杂种个体，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，但两者都能形成杂种细胞，B不符合题意；
C. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基物理性质不同、成分也不同，前者含有葡萄糖和动物血清，后者含有蔗糖和植物激素，C不符合题意；
D. 在动物细胞培养过程中，先后两次用胰蛋白酶处理，第一次是使动物组织中的细胞分散开，第二次是细胞贴壁生长后，用胰蛋白质酶将细胞从瓶壁上处理下来，D不符合题意。
故答案为：A
【分析】细胞工程：
二、非选择题
26．（2019高二下·孝感期中）根据基因工程的有关知识。回答下列问题。
（1）大肠杆菌质粒常作为基因工程目的基因的载体，另外， 和动植物病毒也可作为载体，若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，而常用Ca2+处理大肠杆菌，其目的是 。
（2）利用转基因技术实现胰岛素的批量生产是目前治疗糖尿病的新思路，该过程中的关键操作环节是 。
（3）对于胰岛素基因的获取，途径之一是通过提取 细胞中的胰岛素mRNA，经过反转录过程合成目的基因，之后通过 技术大量扩增。
【答案】（1）λ噬菌体的衍生物；提高受体细胞的转化率（或使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子）
（2）基因表达载体的构建
（3）胰岛B；PCR
【知识点】基因工程的基本工具（详细）；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：（1）基因工程常用的运载体除了大肠杆菌质粒、动植物病毒外，还有λ噬菌体的衍生物等；未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA）的能力极弱，因此常用Ca2+处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子。（2）基因工程的核心步骤是构建基因表达载体。（3） 胰岛素基因只能在胰岛B细胞中选择性表达，因此应该从胰岛B细胞提取胰岛素mRNA，经过逆转录形成胰岛素基因，再通过PCR技术大量扩增目的基因。
【分析】几种目的基因获取方法的比较：
方法 从基因文库中获取 人工合成
从基因组文库中获取 从部分基因文库，如cDNA文库中获取 化学合成法 反转录法
过程
27．（2019高二下·孝感期中）草鱼生长激素基因可促进鲤鱼生长，利用精子载体法（将构建好的表达载体与精子混合培养，使外源基因进入精子内），可将草鱼生长激素基因导入鲤鱼受精卵细胞，培育转基因鲤鱼。请回答。
（1）基因工程中，一个基因表达载体的组成，除了目的基因以外，还必须有 、以及 、 。
（2）作为载体的精子取自 鱼。
（3）可通过检测鲤鱼体内激素增加量或 来检测目的基因是否成功表达。
【答案】（1）启动子；终止子；标记基因
（2）鲤
（3）测量并统计个体的体长或体重的增加量
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】解：（1）基因工程中，一个基因表达载体的组成，除了目的基因以外，还必须有启动子、以及终止子、标记基因。（2）利用精子载体法培育转基因鲤鱼时，将构建好的表达载体与精子混合培养，使外源基因进入精子内，作为载体的精子取自鲤鱼，因为自然情况只有同种生物的精子和卵细胞才能相互识别。（3）根据题干可知，本题的目的基因是草鱼生长激素基因，可促进鲤鱼生长，故可通过检测鲤鱼体内激素增加量或测量并统计个体的体长或体重的增加量来检测目的基因是否成功表达。
【分析】 基因表达载体的构建
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。
③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
28．（2019高二下·孝感期中）美国化学家从红豆杉树皮中分离出高抗癌活性的紫杉醇，从此，国家重点保护珍稀植物——红豆杉遭受了掠夺式的砍伐。为拯救红豆杉，同时获得紫杉醇，科研小组设计了如下图所示的实验流程。请回答下列问题：
（1）选用茎尖分生组织进行组织培养可以获得脱毒苗，原因是茎尖分生组织细胞 ；诱导茎尖分生组织形成愈伤组织的过程叫 。利用愈伤组织诱导形成的胚状体经人工薄膜包装后就可得到 。
（2）茎尖分生组织细胞具有全能性的原因是 。
（3）紫杉醇作为常见的细胞产物，抗癌效果显著，通常取自愈伤组织的 （细胞器）。
【答案】（1）病毒极少，甚至无病毒；脱分化；人工种子
（2）茎尖分生组织细胞含有该种生物的全部遗传信息
（3）液泡
【知识点】植物组织培养的过程
【解析】【解答】解：（1）茎尖分生组织含有的病毒极少，甚至无病毒，进行组织培养可以获得脱毒苗；分生组织经过脱分化过程可以形成愈伤组织；利用愈伤组织诱导形成的胚状体经人工薄膜包装后可得到人工种子。（2）茎尖分生组织细胞含有该种生物的全部遗传信息，因此具有发育的全能性。（3）紫杉醇作为常见的细胞产物，抗癌效果显著，通常取自愈伤组织的液泡中。
【分析】分析题图，红豆杉茎尖分生组织通过脱分化过程形成愈伤组织，一方面愈伤组织通过再分化形成胚状体，进而培养成红豆杉植株；另一方面，愈伤组织培养增殖产生更多的愈伤组织细胞，从愈伤组织细胞中提取紫杉醇。
29．（2019高二下·孝感期中）回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞会分裂缓慢甚至完全停止，但极少数细胞可以连续增殖，这些细胞已经发生突变正朝着等同于 细胞的方向发展。
（3）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞有丝分裂 期的细胞用显微镜进行观察。
（4）在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞。
【答案】（1）相互接触；接触抑制
（2）癌
（3）中
（4）冷冻
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】解：（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞会分裂缓慢甚至完全停止，但极少数细胞可以连续增殖，这些细胞已经发生突变正朝着等同于癌细胞的方向发展。（3）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞有丝分裂中期的细胞用显微镜进行观察。（4）在细胞培养过程中，通常在冷冻或液氮条件下保存细胞。
【分析】 动物细胞培养的过程：
30．（2019高二下·孝感期中）下图表示单克隆抗体的制备过程。请回答下列问题：
（1）过程①注射特定的抗原的目的是 。
（2）过程②诱导融合运用的原理是 ，该过程中区别于植物原生质体融合的方法是用 处理。
（3）过程③是杂交瘤细胞的培养，在体外培养时培养基中需要提供一定浓度的CO2，目的是 。杂交瘤细胞需要经过两次筛选，第二次筛选的目的是 。
【答案】（1）使小鼠产生能分泌特定抗体的浆细胞（B淋巴细胞）
（2）细胞膜的流动性；灭活的病毒
（3）维持培养液的pH；获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞
【知识点】单克隆抗体的制备过程
【解析】【解答】解：（1）过程①表示给小鼠注射特定抗原，其目的是使小鼠产生能分泌特定抗体的浆细胞（B淋巴细胞）。（2）过程②诱导融合运用的原理是细胞膜的流动性，诱导动物细胞融合区别于植物原生质体融合的方法是用灭活的病毒处理。（3）动物细胞培养时需要提供一定浓度的CO2，其目的是维持培养液的pH。杂交瘤细胞两次筛选的目的不同，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
【分析】单抗的制备过程：
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