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湖北省孝感市2018-2019学年高二下学期生物期中考试试卷（B）
一、单选题
1．（2019高二下·孝感期中）在制果酒、果醋、泡菜时，发酵过程中对氧气的需求分别是（ ）
A．无氧、有氧、无氧 B．有氧、无氧、无氧
C．无氧、有氧、有氧 D．兼氧、无氧、有氧
【答案】A
【知识点】果酒果醋的制作；泡菜的制作
【解析】【分析】果酒制作的原理是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精；果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧气、糖源都充足时，将果汁中的糖分分解成醋酸，在氧气充足、缺少糖源时，先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；泡菜发酵的实验原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。综上分析， A项正确，B、C、D三项均错误。
故答案为：A
【点评】 （1）酒精发酵和醋酸发酵的比较：
区别 酒精发酵 醋酸发酵
微生物 酵母菌 醋酸菌
最适温度 20℃ 30-35℃
氧气 无氧 有氧
气味和味道 酒精 酸味
气泡和泡沫 有气泡和泡沫 无气泡和泡沫
发酵液的颜色 混浊 混浊，液面形成白色菌膜
联系 酒精发酵为醋酸发酵提供酒精
（2）泡菜主要是利用蔬菜自然带入的乳酸菌，在厌氧条件下进行乳酸发酵制成的。蔬菜在带入乳酸菌的同时，还带有大肠杆菌等一些有害微生物。在泡菜制作过程中加入一定浓度的食盐可以抑制有害微生物的生长。随着乳酸菌的繁殖，产生的乳酸进一步抑制有害细菌的生长。
2．（2019高二下·孝感期中）下图是制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A．挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗
B．家庭酿酒中，要将葡萄汁装满整个发酵瓶
C．A过程后仅需提高一定的环境温度就能产生果醋
D．为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种
【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【分析】解：A、实验过程中为防止杂菌污染，应该在冲洗之前去除腐烂的籽粒，冲洗之后再去除枝梗，错误。
B、参与果酒制作的微生物是酵母菌，前期为了使酵母菌快速生长繁殖，发酵瓶内需要留有充足的空间来进行有氧呼吸，错误。
C、A过程是酒精发酵，A过程完后，要进行果醋发酵，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧菌，最适温度是30~35℃，故转入醋酸发酵后，要持续通气，提高温度，错误。
D、为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种，正确。
故答案为：D
【点评】果酒、果醋的流程示意图：
3．（2019高二下·孝感期中）下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是（ ）
A．多种微生物参与发酵，主要是乳酸杆菌
B．加盐是为了调节水分，利于微生物生长
C．加料酒主要是为了灭菌，避免腐乳变质
D．封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰
【答案】D
【知识点】腐乳的制作
【解析】【分析】解：腐乳制作过程中，多种微生物参与发酵，主要是毛霉，A错误。
加盐是为了析出水分和抑制微生物生长，B错误；
加料酒主要是为了调节腐乳的风味，其次也能抑菌，C错误；
封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰，这样可以防止杂菌污染，D正确.
故答案为：D
【点评】 腐乳的制作：
4．（2019高二下·孝感期中）下列关于亚硝酸盐含量测定原理的描述正确的是（ ）
A．重氮化→酸化→显色→比色 B．重氮化→酸化→比色→显色
C．酸化→重氮化→比色→显色 D．酸化→重氮化→显色→比色
【答案】D
【知识点】亚硝酸盐含量的测定
【解析】【分析】解：盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合，生成玫瑰红色复合物，亚硝酸盐浓度不同，颜色深浅不同，D正确。
故答案为：D
【点评】 亚硝酸盐含量测定原：
配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色。
（1）配置溶液
对氨基苯磺酸溶液：称取0.4克对氨基苯磺酸，溶解于100mL体积分数为20％的盐酸中，避光保存(4mg/mL)。
N-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液：称取0.2克N-1－萘基乙二胺盐酸盐，溶解于100mL的水中，避光保存(2mg/mL)。
亚硝酸钠溶液：称取0.10克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，用水溶解至500mL，再转移5mL溶液至200mL容量瓶，定容至200mL(5ug/mL)
提取剂：分别称取50克氯化镉、氯化钡，溶解于1000mL蒸馏水中，用盐酸调节pH至1。氢氧化铝乳液和2.5mol/l的氢氧化钠溶液。
（2）配制标准液
用移液管吸取0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL亚硝酸钠溶液，分别置于50mL比色管中，再取1支比色管作为空白对照。并分别加入2.0mL对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3～5分钟后，再分别加入1.0mLN-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液，加蒸馏水至50mL，混匀，观察亚硝酸钠溶液颜色的剃度变化。
（3）制备样品处理液
将3坛样品做好标记后，分别称取0.4千克泡菜，榨汁过滤得200mL汁液。取其中100mL至500mL容量瓶中，加200mL蒸馏水、100mL提取剂，混匀，再加入40mL氢氧化钠溶液，用蒸馏水定容至500mL后，立即过滤。将60mL滤液转移至100mL容量瓶中，加入氢氧化铝（吸附脱色）乳液，定容至100mL，过滤。
（4）比色
吸取40mL透明澄清的滤液，转移到50mL比色管中，将比色管做好标记。按步骤2的方法分别加入对氨基苯磺酸溶液和N-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液，并定容至50mL，混匀，静置15min
5．（2019高二下·孝感期中）豆腐“毛坯”装瓶时的操作，不正确的是（ ）
A．动作要迅速小心
B．加人卤汤后，要用胶条将瓶口密封
C．加人卤汤后，瓶口不用密封，因为其内有盐,不会再滋生其他微生物
D．封瓶时, 最好将瓶口通过酒精灯火焰
【答案】C
【知识点】腐乳的制作
【解析】【分析】豆腐“毛坯”装瓶时，应迅速小心，以免豆腐块破碎或污染，A项正确；加人卤汤后，要用胶条将瓶口密封，且最好将瓶口通过酒精灯火焰，以免污染，B项正确，C项错误，D项正确。
故答案为：C
【点评】腐乳制作的关键点分析
(1)豆腐的选取：豆腐含水量以70%为宜，若含水量过高，豆腐块不易成形；若含水量过低，则不利于毛霉的生长。
(2)控制好材料的用量
①盐的用量：制作时，应逐层加盐，近瓶口处盐要铺厚一些，以防止杂菌从瓶口进入。
a．盐的浓度过高，会影响口味。
b．盐的浓度过低，不足以抑制微生物生长，腐乳易腐败变质。
②酒的用量：卤汤中酒的含量应控制在12%左右。酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。
a．酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，会使腐乳成熟时间延长。
b．酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，但杂菌繁殖快，豆腐易腐败变质。
(3)防止杂菌的污染
①用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。
②装瓶腌制时，操作要迅速小心，且要逐层加盐，离瓶口表面的盐要铺厚一些。
③加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。
(4)发酵温度：前期发酵温度应保持在15～18℃，如温度过低，则菌丝生长缓慢，不能进入豆腐块的深层；温度过高，菌丝易老化和死亡，影响腐乳的品质。
(5)发酵时间：发酵时间影响生化反应速度及生化产物的量。
6．（2019高二下·孝感期中）关于腐乳发酵的原理的叙述，不正确的是（ ）
A．多种微生物参与了腐乳发酵
B．装瓶后豆腐上的毛霉继续生长繁殖
C．发酵过程中蛋白质分解成小分子肽和氨基酸
D．料酒可以影响腐乳的风味和成熟的时间
【答案】B
【知识点】腐乳的制作
【解析】【分析】多种微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等参与了腐乳发酵，其中起主要作用的是毛霉，A项正确；装瓶后豆腐上的毛霉受高浓度盐分、酒精抑制，不能继续生长繁殖，B项错误；发酵过程中蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，C项正确；料酒可以影响腐乳的风味和成熟的时间，D项正确。
故答案为：B
【点评】酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵．前期发酵所发生的主要变化是毛霉在豆腐（白坯）上的生长，发酵的温度为15～18℃，一是使豆腐表面有一层菌膜包住，形成腐乳的“体”；二是毛霉分泌以蛋白酶为主的各种酶，有利于豆腐所含有的蛋白质水解为各种氨基酸．后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程．通过腌制并配入各种辅料（红曲、面曲、酒酿），使蛋白酶作用缓慢，促进其他生化反应，生成腐乳的香气．
7．（2019高二下·孝感期中）下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是（ ）
A．腐乳制作所需要的适宜温度最高
B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D．使用的菌种都具有细胞膜、核糖体、DNA和RNA
【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作；腐乳的制作
【解析】【分析】解：A、制作果醋的过程所需温度最高，错误。
B、果醋的发酵仅涉及有氧发酵，故转入醋酸发酵后，要持续通气，错误。
C、参与果酒、果醋和腐乳制作相关的菌种分别为酵母菌、醋酸菌、毛霉，错误。
D、酵母菌、醋酸菌和毛霉都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA，正确。
故答案为：D
【点评】 果酒、果醋和腐乳制作 ：
8．（2019高二下·孝感期中）下列有关泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定的实验叙述中，正确的是（ ）
A．将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水（盐和清水的质量比为4：1）混匀装瓶
B．发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水
C．在酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色沉淀
D．随发酵进行，亚硝酸盐含量逐渐增加，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定
【答案】B
【知识点】泡菜的制作；亚硝酸盐含量的测定
【解析】【分析】解：A、泡菜制作中应先加蔬菜，再加盐水，且盐与水比例为1：4；A错误.
B、由于乳酸菌的严格厌氧的，因此发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水；B正确.
C、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；C错误.
D、随发酵进行，亚硝酸盐含量先逐渐增加，后又逐渐降低，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定；D错误.
故答案为：B
【点评】水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用，空气中21％是氧气，这是最简易的造成无氧环境的方法。这样，坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭，则会有许多需氧菌生长，蔬菜会腐烂。
9．（2019高二下·孝感期中）制作泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化是（ ）。
A．先减少后增加 B．先增加后减少
C．逐渐增加 D．逐渐减少
【答案】B
【知识点】泡菜的制作
【解析】【分析】解：泡菜腌制过程中，由于坛内环境中硝酸还原菌的繁殖，促进硝酸盐被还原为亚硝酸盐，但随腌制时间延长，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸，抑制硝酸盐还原菌繁殖，使亚硝酸盐含量逐渐下降，所以B正确；A、C、D错误。
故答案为：B
【点评】泡菜制作过程中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化情况分析：
10．（2019高二下·孝感期中）在用乳酸菌制作泡菜中泡菜腐烂，下列原因中不正确的是（ ）
A．罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌的生长繁殖
B．罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
C．罐口封闭缺氧，抑制了其他好氧菌的生长和繁殖
D．罐口封闭不严促进了需氧腐生菌的生长和繁殖
【答案】A
【知识点】泡菜的制作
【解析】【分析】解：A、因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，罐口密闭缺氧，有利于乳酸菌的生长繁殖，错误。
B、因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，罐口封闭不严，氧气会抑制乳酸菌的生长繁殖，正确。
C、罐口封闭缺氧，抑制了其他好氧菌的生长和繁殖，是泡菜发酵所需要的条件，正确。
D、罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖，而使泡菜腐烂，正确。
故答案为：A
【点评】泡菜的制作：
11．（2019高二下·孝感期中）取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL大肠杆菌菌液，37℃培养36小时后，统计菌落数（见表），以下相关叙述错误的是（ ）
组别 培养基 各平板的菌落数
1 2 3
Ⅰ 琼脂、C6H12O6、NH4NO3 30 31 27
Ⅱ 琼脂、C6H12O6、NH4NO3、维生素 169 178 193
Ⅲ 琼脂、NH4NO3、维生素 0 0 1
A．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖
B．Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖
C．三组实验均采用了稀释涂布平板法，以便菌落计数
D．三组实验所使用的培养基均需62℃、30min灭菌
【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养；培养基概述及其分类
【解析】【分析】解：Ⅰ组和Ⅱ组培养基成分的差异是有无维生素，结果可以说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖，A正确.
Ⅱ组和Ⅲ组的差异是有无葡萄糖，结果说明没有葡萄糖大肠杆菌不能正常生长，B正确.
稀释涂布平板法培养大肠杆菌便于菌落计数，C正确.
对培养基加热到62℃不能彻底灭菌，应采用高压蒸汽灭菌，D错误.
故答案为：D
【点评】该实验共有两组对照实验：培养皿Ⅰ和Ⅱ、培养皿Ⅱ和Ⅲ．若以培养皿Ⅰ和Ⅱ为一组对照实验，则实验变量是维生素，目的是探究维生素对大肠杆菌生长的影响；
12．（2019高二下·孝感期中）在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（ ）
A．纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长
B．可以充分利用培养基中的营养物质
C．可以增加纤维素分解菌的浓度
D．可获得高纯度的纤维素分解菌
【答案】C
【知识点】纤维素分解菌的分离
【解析】【分析】解：A、纤维素分解菌在液体和固体培养基上都可以生长，错误。
B、使用液体培养基是为了使纤维素分解菌快速生长繁殖，增加纤维素分解菌的浓度，错误。
C、固体培养基的容量有限，而使用液体培养基空间大，同时振荡培养可以保证充分供氧，利于纤维素分解菌的生长，因此可以增加纤维素分解菌的浓度，正确。
D、筛选需要用固体培养基，错误。
故答案为：C
【点评】对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基，其中的纤维素是唯一的碳源，只有纤维素分解菌可以很好地生存，其他微生物不能生存，同时振荡培养可以保证充分供氧，利于纤维素分解菌的生长，所以可以起到对纤维素分解菌的富集作用，获得大量的菌体．
13．（2017高三上·黑龙江开学考）灭菌的标准是（ ）
A．杀死所有的微生物
B．杀死所有的微生物的细胞、芽孢和孢子
C．杀死所有的病原微生物
D．使病原菌不生长
【答案】B
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】微生物培养中，灭菌是指实验强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，所以B符合题意，ACD不符合题意。
故答案为：B
【分析】理清消毒和灭菌的区别：
项目 条件 结果 常用方法 应用范围
消
毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法 日常用品
巴氏消毒法 不耐高温的液体
化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源
灭
菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法 接种工具
干热灭菌法 玻璃器皿、
金属工具
高压蒸汽
灭菌法 培养基及容
器的灭菌
14．（2019高二下·孝感期中）下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（ ）
A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水
C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水
D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
【答案】A
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【分析】解：能合成脲酶的细菌才能分解尿素，选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。筛选出能够分解尿素的细菌，就必须是在以尿素为唯一氮源的培养基上，而且需要有碳源，故A项正确；B和D的配方中没有尿素，当然不能筛选出能够分解尿素的细菌，B、D项错误；C中有尿素，且为唯一氮源，但配方中缺少碳源，细菌不能生长（细菌不能利用尿素中的碳），故C项错误。
故答案为：A
【点评】分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度.pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
15．（2017高二下·盐城期末）在恒温箱培养微生物时，平板要倒罝的主要原因是（ ）
A．利于通气
B．利用微生物的快速繁殖
C．防止菌落粘连影响观察
D．防止皿盖内的冷凝水滴入培养基
【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】恒温箱培养微生物时，为了防止皿盖内的冷凝水滴入培养基造成杂菌污染，平板要倒罝放入，D符合题意；而不是利于通气或利用微生物的快速繁殖或防止菌落粘连影响观察，A、B、C不符合题意。
故答案为：D
【分析】本题的知识点是微生物的分离和培养，平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
16．（2019高二下·孝感期中）防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（ ）
A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B．接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌
C．在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染
D．平板划线接种时，应先将皿盖打开并放置于桌面上，以便于划线操作
【答案】D
【知识点】灭菌技术
【解析】【分析】实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A项正确；接种环、接种针等金属用具，可直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌，B项正确；在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，C项正确；平板划线接种时，应在酒精灯火焰旁接种，D项错误。
故答案为：D
【点评】微生物实验室培养的关键是防止杂菌污染，无菌操作分为消毒合灭菌，其中消毒只是杀死物体表面的微生物，而杀菌是杀死所有微生物，常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌。
17．（2019高二下·孝感期中）在微生物的培养过程中对操作者的双手、培养基、培养皿、接种环、超净工作台的处理方法依次是（ ）
A．酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
B．酒精消毒、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
C．紫外线消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
D．酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、干热灭菌、酒精消毒
【答案】A
【知识点】灭菌技术
【解析】【分析】消毒是使用较为温和的理化方法，杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子），适用于实验操作的空间、操作者的衣服和手、食品等；灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，适用于微生物的培养器皿、接种用具和培养基等。据此可知：在微生物的培养过程中对操作者的双手、培养基、培养皿、接种环、超净工作台的处理方法依次是酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒，A项正确，B、C、D三项均错误。
故答案为：A
【点评】消毒和灭菌的比较：
消毒 灭菌
概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
18．在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B．分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌
C．分解尿素的细菌、霉菌、放线菌
D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
【答案】C
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】乳酸菌属于异养厌氧微生物，不能在缺氮培养基上生存；金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，A错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，大肠杆菌不能在添加青霉素的选择培养基上生存，B错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，在添加青霉素的选择培养基上可以筛选分离真菌（如霉菌），加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长可以筛选分离放线菌，C正确；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，D错误。
【分析】本题主要考查微生物的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
19．（2019高二下·孝感期中）含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是（ ）
A．抗生素呈碱性，会与乳酸发生中和反应
B．抗生素能杀死或抑制乳酸菌的生长
C．抗生素能够抑制酵母菌的生长
D．抗生素在酸性环境中会被分解破坏
【答案】B
【知识点】灭菌技术
【解析】【分析】解：A、抗生素多是一些带有环状碳链的化学物质，不会与乳酸发生中和反应，错误。
B、乳酸菌属于细菌，对抗生素敏感，抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长，所以含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，正确。
C、细菌对抗生素敏感，真菌对抗生素不敏感，且酸奶的制作与酵母菌无关，错误。
D、含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶不是因为抗生素在酸性环境中会被分解破坏，错误。
故答案为：B
【点评】抗生素，是指由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。
20．（2019高二下·孝感期中）下列环境中，纤维素分解菌含量最高的是（ ）
A．热带雨林中的土壤 B．寒带雨林中的土壤
C．花盆中的土壤 D．荒漠地区的土壤
【答案】A
【知识点】纤维素分解菌的分离
【解析】【分析】解：生物与环境是相互依存的，纤维素含量高的地区，土壤中纤维素分解菌含量就多。相比较而言，在这四种环境中，热带雨林中残枝败叶最丰富，其土壤中富含纤维素。
故答案为：A
【点评】 分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度.pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
21．（2019高二下·孝感期中）下列关于植物组织培养的表述，错误的是（ ）
A．外植体可以来自于植物的任何细胞
B．培养应在无菌条件下进行
C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株
D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同
【答案】A
【知识点】植物组织培养的过程；植物组织培养的影响因素
【解析】【分析】A.体细胞保持亲本的遗传性状，如花药形成的是单倍体，最好用分生区细胞形成脱毒苗；错误。
B.培养应在无菌条件下进行，防止微生物消耗营养物质，产生有毒物质危害培养物的生长；正确。
C.以花粉作为外植体可得到单倍体植株；正确。
D.不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同，诱导培养物的分裂和分化；正确。
故答案为：A
【点评】植物组织培养可以分为四个阶段：
（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织或器官。
（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的。
（3）将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可以直接切取进行扦插生根。
（4）试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。
22．（2019高二下·孝感期中）植物组织培养是指（ ）
A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织
B．愈伤组织培育成植株
C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体
D．愈伤组织形成高度液泡化组织
【答案】C
【知识点】植物组织培养的过程
【解析】【分析】
1、植物组织培养是离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体。
脱分化 再分化
2、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体） → 愈伤组织 → 胚状体→植株；选C。
【点评】试题相对简单，注重基础知识的考查。
23．（2019高二下·孝感期中）下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A．一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养
B．在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照
C．接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给适宜的温度和光照即可
D．移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日
【答案】C
【知识点】植物组织培养的影响因素
【解析】【分析】解：A.容易无性繁殖的植物其细胞全能性较高，容易组织培养，A正确；B.在初期，菊花组织培养过程每天要用日光灯照射12小时；月季初期培养不需要光照，幼小植株形成后才需要光照，B正确；C.一般情况下，接种后应暗培养，有利脱分化产生愈伤组织，光照下会分化产生维管组织，不利愈伤组织的产生，C错误；D.移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日，目的是提高适应能力，D正确。
故答案为：C
【点评】植物组织培养可以分为四个阶段：
（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织或器官。
（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的。
（3）将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可以直接切取进行扦插生根。
（4）试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。
24．（2019高二下·孝感期中）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。在植物组织培养过程中，如何使用这两种激素更有利于胚状体的形成？（ ）
A．先使用生长素，后使用细胞分裂素
B．同时使用
C．先使用细胞分裂素，后使用生长素
D．都不使用
【答案】B
【知识点】组织培养基的成分及作用
【解析】【分析】解：胚状体的胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子，已经出现了细胞分化，在植物组织培养过程中，同时使用生长素和细胞分裂素可以使分化频率提高，因此更有利于胚状体的形成。
故答案为：B
【点评】植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分、脱分化和再分化的关键性因素．在生长素存在的前提下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
25．（2019高二下·孝感期中）植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致。下列叙述正确的是 （ ）
A．菊花茎段组织培养中，需对外植体进行灭菌处理
B．菊花茎段组织培养中，必须添加植物激素
C．月季花药培养中，一般从略微开放的花中选择单核期花药
D．选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期
【答案】D
【知识点】植物细胞工程的应用
【解析】【分析】植物组织培养时需要对外植体进行消毒处理，A错误；植物组织培养中可以添加人工合成的化学物质，B错误；月季花药的培养，一般选择单核靠边期的花药进行培养，其成功率最高，C错误；选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，D正确。
故答案为：D
【点评】植物组织培养依据的原理是细胞的全能性．
培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽最终形成植物体．
影响植物细胞脱分化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素．植物激素中细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素．生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长．
二、非选择题
26．（2019高二下·孝感期中）请根据腐乳制作流程图回答相关问题：
（1）制腐乳坯时用沸水处理豆腐的目的是 ；豆腐含水量 最适，含水量不能过高的原因是 。
（2）图中A是 ，该步骤中温度应控制在 ℃；B是 。
（3）腐乳制作过程中，能够抑制微生物生长的物质有 等。
（4）若你完成了腐乳制作，则可以从 等方面评价乳腐的质量。
【答案】（1）消毒；70%；不利于毛霉的生长，制作的腐乳也不易成形
（2）让豆腐上长出毛霉；15-18；加卤汤装瓶
（3）食盐、卤汤中的酒、香辛料等
（4）色泽、口味、块形等
【知识点】腐乳的制作
【解析】【分析】解：（1）制作腐乳时，为防止杂菌污染，需要用沸水消毒；控制发酵豆腐的含水量在70%左右，这个含水量既能满足毛毒对水的需求量，又能使豆腐透气，满足毛霉对氧的需求，若含水量过高，不利于毛霉的生长，制作的腐乳也不易成形。（2）腐乳制作的流程为：制腐乳坯→让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制，故图中A为让豆腐上长出毛霉，该步骤中温度应控制在16℃（15-18℃）左右，并保持一定的湿度以利于毛霉生长；B是加卤汤装瓶。（3））在腐乳制作过程中，抑制微生物生长的物质有盐、酒、香辛料等。（4）若完成了腐乳制作，可从色泽、口味、块形等方面评价腐乳的质量。
【点评】腐乳的制作流程：
27．（2019高二下·孝感期中）某酒厂由于操作不当生产了一批酸败的果酒。如何利用它来酿制果醋，把它变废为宝？
（1）酿制前用60-70℃温度杀菌20min，目的是 。
（2）接种醋酸菌，在发酵过程中，需对发酵液补充足够的空气，原因是
（3）发酵过程中温度控制在 ℃。
（4）发酵过程中，pH变化的原因是 。
【答案】（1）杀灭杂菌
（2）醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时才能进行旺盛的生命活动
（3）30-35
（4）营养物质的消耗，代谢产物的积累
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【分析】解：（1）酿制前为防止杂菌污染，需要用60-70℃温度杀菌20min。（2）接种醋酸菌后需对发酵液补充足够的空气，是因为醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时才能进行旺盛的生命活动。（3）果醋的发酵温度较高，发酵过程中温度控制在30-35℃。（4）发酵过程中，pH变化的原因是营养物质的消耗，代谢产物的积累。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸为酸性、呼吸作用产生的CO2也使pH降低。
【点评】果酒、果醋制作的比较：
28．（2019高二下·孝感期中）研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就“如何从土壤中获得纤维素分解菌”回答以下问题：
（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和 酶。
（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线法进行接种，此过程所用的接种工具是 ，对该接种工具采用 灭菌的方法。
（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与 和 发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红。 (填“第一种”或“第二种”)方法会使菌落之间发生混杂。
（4）如果观察到产生 的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行 的实验。
【答案】（1）葡萄糖苷
（2）接种环；灼烧
（3）纤维二糖；葡萄糖；第一种
（4）透明圈；发酵产纤维素酶
【知识点】纤维素分解菌的分离
【解析】【分析】解：（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是接种环，操作时采用灼烧灭菌的方法。（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红。第一种方法会使菌落之间发生混杂。第二种方法：产生淀粉酶的微生物也产生模糊的透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈，故两种方法各有缺点。（4）刚果红与纤维素反应呈红色，纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色，在菌落周围会出现透明圈。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。
【点评】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：
1．分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度.pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
2．统计菌落数目的方法
(1)稀释涂布平板法（间接）
①当样品的稀释庋足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。
(2)利用显微镜直接计数
3．分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
4．实验流程
土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定
29．（2019高二下·孝感期中）大肠杆菌是一种兼性厌氧菌。在无氧条件下发酵，能将葡萄糖转换成多种有机酸并生成二氧化碳。某研究机构利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。
回答下列相关问题：
（1）研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后，装入图甲所示的试管中，再将污水水样滴加进去震荡摇匀，适宜条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为 。
（2）图乙滤膜的孔径应 （“大于”、“小于”、“等于”）大肠杆菌。
（3）制备图乙中牛肉膏蛋白胨固体培养基时，对培养基的灭菌方法是 ，待培养基冷却至 ℃左右时进行倒平板。
（4）为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入 染料，该研究机构通过统计 色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际值 （“偏高”、“偏低”或“相等”），理由是 。
【答案】（1）蓝色→绿色→黄色
（2）小于
（3）高压蒸汽灭菌；50
（4）伊红美蓝；黑色；偏低；两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落
【知识点】测定某种微生物的数量；培养基概述及其分类；灭菌技术
【解析】【分析】（1）大肠杆菌细胞呼吸产生的二氧化碳气体可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。（2）图乙滤膜的孔径应小于大肠杆菌，否则大肠杆菌会漏掉。（3）牛肉膏蛋白胨固体培养基一般采取高压蒸汽灭菌法，灭菌后一定要等冷却到50℃左右时才能倒平板。（4）为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入伊红美蓝染料，可以将大肠杆菌菌落染成黑色。由于多个菌落连在一起时会出现重叠现象，只计算一个，所以统计值比真实值要小。
【点评】伊红美蓝是专一鉴别大肠杆菌的指示剂，为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入伊红美蓝作为指示剂．在伊红美蓝培养基上，可以鉴定出菌落为黑色的具有金属光泽的大肠杆菌，因此该小组通过统计黑色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目．
30．（2019高二下·孝感期中）基因型为AaBb的小麦的花粉细胞通过无菌操作接入含有全部营养成分的培养基的试管中，在一定条件下诱导形成试管幼苗，其过程如下：
小麦的花粉细胞①—→愈伤组织②—→丛芽③—→植株④
（1）发育成的植株④称为 ，基因型有 。
（2）小麦形成花粉的细胞分裂方式是 ，花粉发育成植物体的过程中细胞分裂方式是 。
（3）若得到可育的植株，需要用 （化学试剂）对③进行处理，所获得的基因型可能是 。
（4）①→②过程需要的条件有（______）。（多选）
A．营养 B．激素 C．光照 D．pH
【答案】（1）单倍体；AB、Ab、aB、ab
（2）减数分裂；有丝分裂
（3）秋水仙素；AABB、AAbb、aaBB、aabb
（4）A；B；D
【知识点】植物组织培养的过程；组织培养基的成分及作用
【解析】【分析】解：（1）花药细胞直接发育的个体叫单倍体，故植株④叫做单倍体，基因型有Ab、aB、AB、ab，4种。（2）小麦形成花粉的细胞分裂方式是减数分裂，经四分体时期，依次又经历单核居中期、单核靠边期，最终发育成花粉粒（双核期）。花粉发育成为植物体，只有有丝分裂过程。（3）单倍体植物不育，若要得到可育植株，需要用秋水仙素对③进行处理，使染色体加倍可以进行正常的减数分裂，所得的植株基因型为AABB、AAbb、aaBB、aabb。（4）分析图示，月季的花药细胞①→愈伤组织②的程称为脱分化，不需要光照，需要的条件有A营养、B激素、D pH，再分化过程中才需要光。
【点评】植物组织培养依据的原理是细胞的全能性．培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽最终形成植物体．影响植物细胞脱分化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素．植物激素中细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素．生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长．
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湖北省孝感市2018-2019学年高二下学期生物期中考试试卷（B）
一、单选题
1．（2019高二下·孝感期中）在制果酒、果醋、泡菜时，发酵过程中对氧气的需求分别是（ ）
A．无氧、有氧、无氧 B．有氧、无氧、无氧
C．无氧、有氧、有氧 D．兼氧、无氧、有氧
2．（2019高二下·孝感期中）下图是制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A．挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗
B．家庭酿酒中，要将葡萄汁装满整个发酵瓶
C．A过程后仅需提高一定的环境温度就能产生果醋
D．为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种
3．（2019高二下·孝感期中）下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是（ ）
A．多种微生物参与发酵，主要是乳酸杆菌
B．加盐是为了调节水分，利于微生物生长
C．加料酒主要是为了灭菌，避免腐乳变质
D．封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰
4．（2019高二下·孝感期中）下列关于亚硝酸盐含量测定原理的描述正确的是（ ）
A．重氮化→酸化→显色→比色 B．重氮化→酸化→比色→显色
C．酸化→重氮化→比色→显色 D．酸化→重氮化→显色→比色
5．（2019高二下·孝感期中）豆腐“毛坯”装瓶时的操作，不正确的是（ ）
A．动作要迅速小心
B．加人卤汤后，要用胶条将瓶口密封
C．加人卤汤后，瓶口不用密封，因为其内有盐,不会再滋生其他微生物
D．封瓶时, 最好将瓶口通过酒精灯火焰
6．（2019高二下·孝感期中）关于腐乳发酵的原理的叙述，不正确的是（ ）
A．多种微生物参与了腐乳发酵
B．装瓶后豆腐上的毛霉继续生长繁殖
C．发酵过程中蛋白质分解成小分子肽和氨基酸
D．料酒可以影响腐乳的风味和成熟的时间
7．（2019高二下·孝感期中）下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是（ ）
A．腐乳制作所需要的适宜温度最高
B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D．使用的菌种都具有细胞膜、核糖体、DNA和RNA
8．（2019高二下·孝感期中）下列有关泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定的实验叙述中，正确的是（ ）
A．将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水（盐和清水的质量比为4：1）混匀装瓶
B．发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水
C．在酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色沉淀
D．随发酵进行，亚硝酸盐含量逐渐增加，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定
9．（2019高二下·孝感期中）制作泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化是（ ）。
A．先减少后增加 B．先增加后减少
C．逐渐增加 D．逐渐减少
10．（2019高二下·孝感期中）在用乳酸菌制作泡菜中泡菜腐烂，下列原因中不正确的是（ ）
A．罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌的生长繁殖
B．罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
C．罐口封闭缺氧，抑制了其他好氧菌的生长和繁殖
D．罐口封闭不严促进了需氧腐生菌的生长和繁殖
11．（2019高二下·孝感期中）取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL大肠杆菌菌液，37℃培养36小时后，统计菌落数（见表），以下相关叙述错误的是（ ）
组别 培养基 各平板的菌落数
1 2 3
Ⅰ 琼脂、C6H12O6、NH4NO3 30 31 27
Ⅱ 琼脂、C6H12O6、NH4NO3、维生素 169 178 193
Ⅲ 琼脂、NH4NO3、维生素 0 0 1
A．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖
B．Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖
C．三组实验均采用了稀释涂布平板法，以便菌落计数
D．三组实验所使用的培养基均需62℃、30min灭菌
12．（2019高二下·孝感期中）在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（ ）
A．纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长
B．可以充分利用培养基中的营养物质
C．可以增加纤维素分解菌的浓度
D．可获得高纯度的纤维素分解菌
13．（2017高三上·黑龙江开学考）灭菌的标准是（ ）
A．杀死所有的微生物
B．杀死所有的微生物的细胞、芽孢和孢子
C．杀死所有的病原微生物
D．使病原菌不生长
14．（2019高二下·孝感期中）下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（ ）
A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水
C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水
D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
15．（2017高二下·盐城期末）在恒温箱培养微生物时，平板要倒罝的主要原因是（ ）
A．利于通气
B．利用微生物的快速繁殖
C．防止菌落粘连影响观察
D．防止皿盖内的冷凝水滴入培养基
16．（2019高二下·孝感期中）防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（ ）
A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B．接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌
C．在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染
D．平板划线接种时，应先将皿盖打开并放置于桌面上，以便于划线操作
17．（2019高二下·孝感期中）在微生物的培养过程中对操作者的双手、培养基、培养皿、接种环、超净工作台的处理方法依次是（ ）
A．酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
B．酒精消毒、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
C．紫外线消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
D．酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、干热灭菌、酒精消毒
18．在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B．分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌
C．分解尿素的细菌、霉菌、放线菌
D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
19．（2019高二下·孝感期中）含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是（ ）
A．抗生素呈碱性，会与乳酸发生中和反应
B．抗生素能杀死或抑制乳酸菌的生长
C．抗生素能够抑制酵母菌的生长
D．抗生素在酸性环境中会被分解破坏
20．（2019高二下·孝感期中）下列环境中，纤维素分解菌含量最高的是（ ）
A．热带雨林中的土壤 B．寒带雨林中的土壤
C．花盆中的土壤 D．荒漠地区的土壤
21．（2019高二下·孝感期中）下列关于植物组织培养的表述，错误的是（ ）
A．外植体可以来自于植物的任何细胞
B．培养应在无菌条件下进行
C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株
D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同
22．（2019高二下·孝感期中）植物组织培养是指（ ）
A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织
B．愈伤组织培育成植株
C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体
D．愈伤组织形成高度液泡化组织
23．（2019高二下·孝感期中）下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A．一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养
B．在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照
C．接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给适宜的温度和光照即可
D．移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日
24．（2019高二下·孝感期中）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。在植物组织培养过程中，如何使用这两种激素更有利于胚状体的形成？（ ）
A．先使用生长素，后使用细胞分裂素
B．同时使用
C．先使用细胞分裂素，后使用生长素
D．都不使用
25．（2019高二下·孝感期中）植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致。下列叙述正确的是 （ ）
A．菊花茎段组织培养中，需对外植体进行灭菌处理
B．菊花茎段组织培养中，必须添加植物激素
C．月季花药培养中，一般从略微开放的花中选择单核期花药
D．选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期
二、非选择题
26．（2019高二下·孝感期中）请根据腐乳制作流程图回答相关问题：
（1）制腐乳坯时用沸水处理豆腐的目的是 ；豆腐含水量 最适，含水量不能过高的原因是 。
（2）图中A是 ，该步骤中温度应控制在 ℃；B是 。
（3）腐乳制作过程中，能够抑制微生物生长的物质有 等。
（4）若你完成了腐乳制作，则可以从 等方面评价乳腐的质量。
27．（2019高二下·孝感期中）某酒厂由于操作不当生产了一批酸败的果酒。如何利用它来酿制果醋，把它变废为宝？
（1）酿制前用60-70℃温度杀菌20min，目的是 。
（2）接种醋酸菌，在发酵过程中，需对发酵液补充足够的空气，原因是
（3）发酵过程中温度控制在 ℃。
（4）发酵过程中，pH变化的原因是 。
28．（2019高二下·孝感期中）研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就“如何从土壤中获得纤维素分解菌”回答以下问题：
（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和 酶。
（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线法进行接种，此过程所用的接种工具是 ，对该接种工具采用 灭菌的方法。
（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与 和 发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红。 (填“第一种”或“第二种”)方法会使菌落之间发生混杂。
（4）如果观察到产生 的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行 的实验。
29．（2019高二下·孝感期中）大肠杆菌是一种兼性厌氧菌。在无氧条件下发酵，能将葡萄糖转换成多种有机酸并生成二氧化碳。某研究机构利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。
回答下列相关问题：
（1）研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后，装入图甲所示的试管中，再将污水水样滴加进去震荡摇匀，适宜条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为 。
（2）图乙滤膜的孔径应 （“大于”、“小于”、“等于”）大肠杆菌。
（3）制备图乙中牛肉膏蛋白胨固体培养基时，对培养基的灭菌方法是 ，待培养基冷却至 ℃左右时进行倒平板。
（4）为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入 染料，该研究机构通过统计 色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际值 （“偏高”、“偏低”或“相等”），理由是 。
30．（2019高二下·孝感期中）基因型为AaBb的小麦的花粉细胞通过无菌操作接入含有全部营养成分的培养基的试管中，在一定条件下诱导形成试管幼苗，其过程如下：
小麦的花粉细胞①—→愈伤组织②—→丛芽③—→植株④
（1）发育成的植株④称为 ，基因型有 。
（2）小麦形成花粉的细胞分裂方式是 ，花粉发育成植物体的过程中细胞分裂方式是 。
（3）若得到可育的植株，需要用 （化学试剂）对③进行处理，所获得的基因型可能是 。
（4）①→②过程需要的条件有（______）。（多选）
A．营养 B．激素 C．光照 D．pH
答案解析部分
1．【答案】A
【知识点】果酒果醋的制作；泡菜的制作
【解析】【分析】果酒制作的原理是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精；果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧气、糖源都充足时，将果汁中的糖分分解成醋酸，在氧气充足、缺少糖源时，先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；泡菜发酵的实验原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。综上分析， A项正确，B、C、D三项均错误。
故答案为：A
【点评】 （1）酒精发酵和醋酸发酵的比较：
区别 酒精发酵 醋酸发酵
微生物 酵母菌 醋酸菌
最适温度 20℃ 30-35℃
氧气 无氧 有氧
气味和味道 酒精 酸味
气泡和泡沫 有气泡和泡沫 无气泡和泡沫
发酵液的颜色 混浊 混浊，液面形成白色菌膜
联系 酒精发酵为醋酸发酵提供酒精
（2）泡菜主要是利用蔬菜自然带入的乳酸菌，在厌氧条件下进行乳酸发酵制成的。蔬菜在带入乳酸菌的同时，还带有大肠杆菌等一些有害微生物。在泡菜制作过程中加入一定浓度的食盐可以抑制有害微生物的生长。随着乳酸菌的繁殖，产生的乳酸进一步抑制有害细菌的生长。
2．【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【分析】解：A、实验过程中为防止杂菌污染，应该在冲洗之前去除腐烂的籽粒，冲洗之后再去除枝梗，错误。
B、参与果酒制作的微生物是酵母菌，前期为了使酵母菌快速生长繁殖，发酵瓶内需要留有充足的空间来进行有氧呼吸，错误。
C、A过程是酒精发酵，A过程完后，要进行果醋发酵，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧菌，最适温度是30~35℃，故转入醋酸发酵后，要持续通气，提高温度，错误。
D、为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种，正确。
故答案为：D
【点评】果酒、果醋的流程示意图：
3．【答案】D
【知识点】腐乳的制作
【解析】【分析】解：腐乳制作过程中，多种微生物参与发酵，主要是毛霉，A错误。
加盐是为了析出水分和抑制微生物生长，B错误；
加料酒主要是为了调节腐乳的风味，其次也能抑菌，C错误；
封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰，这样可以防止杂菌污染，D正确.
故答案为：D
【点评】 腐乳的制作：
4．【答案】D
【知识点】亚硝酸盐含量的测定
【解析】【分析】解：盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合，生成玫瑰红色复合物，亚硝酸盐浓度不同，颜色深浅不同，D正确。
故答案为：D
【点评】 亚硝酸盐含量测定原：
配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色。
（1）配置溶液
对氨基苯磺酸溶液：称取0.4克对氨基苯磺酸，溶解于100mL体积分数为20％的盐酸中，避光保存(4mg/mL)。
N-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液：称取0.2克N-1－萘基乙二胺盐酸盐，溶解于100mL的水中，避光保存(2mg/mL)。
亚硝酸钠溶液：称取0.10克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，用水溶解至500mL，再转移5mL溶液至200mL容量瓶，定容至200mL(5ug/mL)
提取剂：分别称取50克氯化镉、氯化钡，溶解于1000mL蒸馏水中，用盐酸调节pH至1。氢氧化铝乳液和2.5mol/l的氢氧化钠溶液。
（2）配制标准液
用移液管吸取0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL亚硝酸钠溶液，分别置于50mL比色管中，再取1支比色管作为空白对照。并分别加入2.0mL对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3～5分钟后，再分别加入1.0mLN-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液，加蒸馏水至50mL，混匀，观察亚硝酸钠溶液颜色的剃度变化。
（3）制备样品处理液
将3坛样品做好标记后，分别称取0.4千克泡菜，榨汁过滤得200mL汁液。取其中100mL至500mL容量瓶中，加200mL蒸馏水、100mL提取剂，混匀，再加入40mL氢氧化钠溶液，用蒸馏水定容至500mL后，立即过滤。将60mL滤液转移至100mL容量瓶中，加入氢氧化铝（吸附脱色）乳液，定容至100mL，过滤。
（4）比色
吸取40mL透明澄清的滤液，转移到50mL比色管中，将比色管做好标记。按步骤2的方法分别加入对氨基苯磺酸溶液和N-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液，并定容至50mL，混匀，静置15min
5．【答案】C
【知识点】腐乳的制作
【解析】【分析】豆腐“毛坯”装瓶时，应迅速小心，以免豆腐块破碎或污染，A项正确；加人卤汤后，要用胶条将瓶口密封，且最好将瓶口通过酒精灯火焰，以免污染，B项正确，C项错误，D项正确。
故答案为：C
【点评】腐乳制作的关键点分析
(1)豆腐的选取：豆腐含水量以70%为宜，若含水量过高，豆腐块不易成形；若含水量过低，则不利于毛霉的生长。
(2)控制好材料的用量
①盐的用量：制作时，应逐层加盐，近瓶口处盐要铺厚一些，以防止杂菌从瓶口进入。
a．盐的浓度过高，会影响口味。
b．盐的浓度过低，不足以抑制微生物生长，腐乳易腐败变质。
②酒的用量：卤汤中酒的含量应控制在12%左右。酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。
a．酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，会使腐乳成熟时间延长。
b．酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，但杂菌繁殖快，豆腐易腐败变质。
(3)防止杂菌的污染
①用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。
②装瓶腌制时，操作要迅速小心，且要逐层加盐，离瓶口表面的盐要铺厚一些。
③加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。
(4)发酵温度：前期发酵温度应保持在15～18℃，如温度过低，则菌丝生长缓慢，不能进入豆腐块的深层；温度过高，菌丝易老化和死亡，影响腐乳的品质。
(5)发酵时间：发酵时间影响生化反应速度及生化产物的量。
6．【答案】B
【知识点】腐乳的制作
【解析】【分析】多种微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等参与了腐乳发酵，其中起主要作用的是毛霉，A项正确；装瓶后豆腐上的毛霉受高浓度盐分、酒精抑制，不能继续生长繁殖，B项错误；发酵过程中蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，C项正确；料酒可以影响腐乳的风味和成熟的时间，D项正确。
故答案为：B
【点评】酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵．前期发酵所发生的主要变化是毛霉在豆腐（白坯）上的生长，发酵的温度为15～18℃，一是使豆腐表面有一层菌膜包住，形成腐乳的“体”；二是毛霉分泌以蛋白酶为主的各种酶，有利于豆腐所含有的蛋白质水解为各种氨基酸．后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程．通过腌制并配入各种辅料（红曲、面曲、酒酿），使蛋白酶作用缓慢，促进其他生化反应，生成腐乳的香气．
7．【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作；腐乳的制作
【解析】【分析】解：A、制作果醋的过程所需温度最高，错误。
B、果醋的发酵仅涉及有氧发酵，故转入醋酸发酵后，要持续通气，错误。
C、参与果酒、果醋和腐乳制作相关的菌种分别为酵母菌、醋酸菌、毛霉，错误。
D、酵母菌、醋酸菌和毛霉都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA，正确。
故答案为：D
【点评】 果酒、果醋和腐乳制作 ：
8．【答案】B
【知识点】泡菜的制作；亚硝酸盐含量的测定
【解析】【分析】解：A、泡菜制作中应先加蔬菜，再加盐水，且盐与水比例为1：4；A错误.
B、由于乳酸菌的严格厌氧的，因此发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水；B正确.
C、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；C错误.
D、随发酵进行，亚硝酸盐含量先逐渐增加，后又逐渐降低，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定；D错误.
故答案为：B
【点评】水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用，空气中21％是氧气，这是最简易的造成无氧环境的方法。这样，坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭，则会有许多需氧菌生长，蔬菜会腐烂。
9．【答案】B
【知识点】泡菜的制作
【解析】【分析】解：泡菜腌制过程中，由于坛内环境中硝酸还原菌的繁殖，促进硝酸盐被还原为亚硝酸盐，但随腌制时间延长，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸，抑制硝酸盐还原菌繁殖，使亚硝酸盐含量逐渐下降，所以B正确；A、C、D错误。
故答案为：B
【点评】泡菜制作过程中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化情况分析：
10．【答案】A
【知识点】泡菜的制作
【解析】【分析】解：A、因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，罐口密闭缺氧，有利于乳酸菌的生长繁殖，错误。
B、因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，罐口封闭不严，氧气会抑制乳酸菌的生长繁殖，正确。
C、罐口封闭缺氧，抑制了其他好氧菌的生长和繁殖，是泡菜发酵所需要的条件，正确。
D、罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖，而使泡菜腐烂，正确。
故答案为：A
【点评】泡菜的制作：
11．【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养；培养基概述及其分类
【解析】【分析】解：Ⅰ组和Ⅱ组培养基成分的差异是有无维生素，结果可以说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖，A正确.
Ⅱ组和Ⅲ组的差异是有无葡萄糖，结果说明没有葡萄糖大肠杆菌不能正常生长，B正确.
稀释涂布平板法培养大肠杆菌便于菌落计数，C正确.
对培养基加热到62℃不能彻底灭菌，应采用高压蒸汽灭菌，D错误.
故答案为：D
【点评】该实验共有两组对照实验：培养皿Ⅰ和Ⅱ、培养皿Ⅱ和Ⅲ．若以培养皿Ⅰ和Ⅱ为一组对照实验，则实验变量是维生素，目的是探究维生素对大肠杆菌生长的影响；
12．【答案】C
【知识点】纤维素分解菌的分离
【解析】【分析】解：A、纤维素分解菌在液体和固体培养基上都可以生长，错误。
B、使用液体培养基是为了使纤维素分解菌快速生长繁殖，增加纤维素分解菌的浓度，错误。
C、固体培养基的容量有限，而使用液体培养基空间大，同时振荡培养可以保证充分供氧，利于纤维素分解菌的生长，因此可以增加纤维素分解菌的浓度，正确。
D、筛选需要用固体培养基，错误。
故答案为：C
【点评】对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基，其中的纤维素是唯一的碳源，只有纤维素分解菌可以很好地生存，其他微生物不能生存，同时振荡培养可以保证充分供氧，利于纤维素分解菌的生长，所以可以起到对纤维素分解菌的富集作用，获得大量的菌体．
13．【答案】B
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】微生物培养中，灭菌是指实验强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，所以B符合题意，ACD不符合题意。
故答案为：B
【分析】理清消毒和灭菌的区别：
项目 条件 结果 常用方法 应用范围
消
毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法 日常用品
巴氏消毒法 不耐高温的液体
化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源
灭
菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法 接种工具
干热灭菌法 玻璃器皿、
金属工具
高压蒸汽
灭菌法 培养基及容
器的灭菌
14．【答案】A
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【分析】解：能合成脲酶的细菌才能分解尿素，选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。筛选出能够分解尿素的细菌，就必须是在以尿素为唯一氮源的培养基上，而且需要有碳源，故A项正确；B和D的配方中没有尿素，当然不能筛选出能够分解尿素的细菌，B、D项错误；C中有尿素，且为唯一氮源，但配方中缺少碳源，细菌不能生长（细菌不能利用尿素中的碳），故C项错误。
故答案为：A
【点评】分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度.pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
15．【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】恒温箱培养微生物时，为了防止皿盖内的冷凝水滴入培养基造成杂菌污染，平板要倒罝放入，D符合题意；而不是利于通气或利用微生物的快速繁殖或防止菌落粘连影响观察，A、B、C不符合题意。
故答案为：D
【分析】本题的知识点是微生物的分离和培养，平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
16．【答案】D
【知识点】灭菌技术
【解析】【分析】实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A项正确；接种环、接种针等金属用具，可直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌，B项正确；在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，C项正确；平板划线接种时，应在酒精灯火焰旁接种，D项错误。
故答案为：D
【点评】微生物实验室培养的关键是防止杂菌污染，无菌操作分为消毒合灭菌，其中消毒只是杀死物体表面的微生物，而杀菌是杀死所有微生物，常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌。
17．【答案】A
【知识点】灭菌技术
【解析】【分析】消毒是使用较为温和的理化方法，杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子），适用于实验操作的空间、操作者的衣服和手、食品等；灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，适用于微生物的培养器皿、接种用具和培养基等。据此可知：在微生物的培养过程中对操作者的双手、培养基、培养皿、接种环、超净工作台的处理方法依次是酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒，A项正确，B、C、D三项均错误。
故答案为：A
【点评】消毒和灭菌的比较：
消毒 灭菌
概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
18．【答案】C
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】乳酸菌属于异养厌氧微生物，不能在缺氮培养基上生存；金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，A错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，大肠杆菌不能在添加青霉素的选择培养基上生存，B错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，在添加青霉素的选择培养基上可以筛选分离真菌（如霉菌），加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长可以筛选分离放线菌，C正确；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，D错误。
【分析】本题主要考查微生物的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
19．【答案】B
【知识点】灭菌技术
【解析】【分析】解：A、抗生素多是一些带有环状碳链的化学物质，不会与乳酸发生中和反应，错误。
B、乳酸菌属于细菌，对抗生素敏感，抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长，所以含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，正确。
C、细菌对抗生素敏感，真菌对抗生素不敏感，且酸奶的制作与酵母菌无关，错误。
D、含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶不是因为抗生素在酸性环境中会被分解破坏，错误。
故答案为：B
【点评】抗生素，是指由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。
20．【答案】A
【知识点】纤维素分解菌的分离
【解析】【分析】解：生物与环境是相互依存的，纤维素含量高的地区，土壤中纤维素分解菌含量就多。相比较而言，在这四种环境中，热带雨林中残枝败叶最丰富，其土壤中富含纤维素。
故答案为：A
【点评】 分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度.pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
21．【答案】A
【知识点】植物组织培养的过程；植物组织培养的影响因素
【解析】【分析】A.体细胞保持亲本的遗传性状，如花药形成的是单倍体，最好用分生区细胞形成脱毒苗；错误。
B.培养应在无菌条件下进行，防止微生物消耗营养物质，产生有毒物质危害培养物的生长；正确。
C.以花粉作为外植体可得到单倍体植株；正确。
D.不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同，诱导培养物的分裂和分化；正确。
故答案为：A
【点评】植物组织培养可以分为四个阶段：
（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织或器官。
（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的。
（3）将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可以直接切取进行扦插生根。
（4）试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。
22．【答案】C
【知识点】植物组织培养的过程
【解析】【分析】
1、植物组织培养是离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体。
脱分化 再分化
2、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体） → 愈伤组织 → 胚状体→植株；选C。
【点评】试题相对简单，注重基础知识的考查。
23．【答案】C
【知识点】植物组织培养的影响因素
【解析】【分析】解：A.容易无性繁殖的植物其细胞全能性较高，容易组织培养，A正确；B.在初期，菊花组织培养过程每天要用日光灯照射12小时；月季初期培养不需要光照，幼小植株形成后才需要光照，B正确；C.一般情况下，接种后应暗培养，有利脱分化产生愈伤组织，光照下会分化产生维管组织，不利愈伤组织的产生，C错误；D.移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日，目的是提高适应能力，D正确。
故答案为：C
【点评】植物组织培养可以分为四个阶段：
（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织或器官。
（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的。
（3）将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可以直接切取进行扦插生根。
（4）试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。
24．【答案】B
【知识点】组织培养基的成分及作用
【解析】【分析】解：胚状体的胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子，已经出现了细胞分化，在植物组织培养过程中，同时使用生长素和细胞分裂素可以使分化频率提高，因此更有利于胚状体的形成。
故答案为：B
【点评】植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分、脱分化和再分化的关键性因素．在生长素存在的前提下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
25．【答案】D
【知识点】植物细胞工程的应用
【解析】【分析】植物组织培养时需要对外植体进行消毒处理，A错误；植物组织培养中可以添加人工合成的化学物质，B错误；月季花药的培养，一般选择单核靠边期的花药进行培养，其成功率最高，C错误；选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，D正确。
故答案为：D
【点评】植物组织培养依据的原理是细胞的全能性．
培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽最终形成植物体．
影响植物细胞脱分化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素．植物激素中细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素．生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长．
26．【答案】（1）消毒；70%；不利于毛霉的生长，制作的腐乳也不易成形
（2）让豆腐上长出毛霉；15-18；加卤汤装瓶
（3）食盐、卤汤中的酒、香辛料等
（4）色泽、口味、块形等
【知识点】腐乳的制作
【解析】【分析】解：（1）制作腐乳时，为防止杂菌污染，需要用沸水消毒；控制发酵豆腐的含水量在70%左右，这个含水量既能满足毛毒对水的需求量，又能使豆腐透气，满足毛霉对氧的需求，若含水量过高，不利于毛霉的生长，制作的腐乳也不易成形。（2）腐乳制作的流程为：制腐乳坯→让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制，故图中A为让豆腐上长出毛霉，该步骤中温度应控制在16℃（15-18℃）左右，并保持一定的湿度以利于毛霉生长；B是加卤汤装瓶。（3））在腐乳制作过程中，抑制微生物生长的物质有盐、酒、香辛料等。（4）若完成了腐乳制作，可从色泽、口味、块形等方面评价腐乳的质量。
【点评】腐乳的制作流程：
27．【答案】（1）杀灭杂菌
（2）醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时才能进行旺盛的生命活动
（3）30-35
（4）营养物质的消耗，代谢产物的积累
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【分析】解：（1）酿制前为防止杂菌污染，需要用60-70℃温度杀菌20min。（2）接种醋酸菌后需对发酵液补充足够的空气，是因为醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时才能进行旺盛的生命活动。（3）果醋的发酵温度较高，发酵过程中温度控制在30-35℃。（4）发酵过程中，pH变化的原因是营养物质的消耗，代谢产物的积累。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸为酸性、呼吸作用产生的CO2也使pH降低。
【点评】果酒、果醋制作的比较：
28．【答案】（1）葡萄糖苷
（2）接种环；灼烧
（3）纤维二糖；葡萄糖；第一种
（4）透明圈；发酵产纤维素酶
【知识点】纤维素分解菌的分离
【解析】【分析】解：（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是接种环，操作时采用灼烧灭菌的方法。（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红。第一种方法会使菌落之间发生混杂。第二种方法：产生淀粉酶的微生物也产生模糊的透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈，故两种方法各有缺点。（4）刚果红与纤维素反应呈红色，纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色，在菌落周围会出现透明圈。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。
【点评】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：
1．分离菌株的思路
(1)自然界中目的菌株的筛选
①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度.pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
2．统计菌落数目的方法
(1)稀释涂布平板法（间接）
①当样品的稀释庋足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。
(2)利用显微镜直接计数
3．分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
4．实验流程
土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定
29．【答案】（1）蓝色→绿色→黄色
（2）小于
（3）高压蒸汽灭菌；50
（4）伊红美蓝；黑色；偏低；两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落
【知识点】测定某种微生物的数量；培养基概述及其分类；灭菌技术
【解析】【分析】（1）大肠杆菌细胞呼吸产生的二氧化碳气体可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。（2）图乙滤膜的孔径应小于大肠杆菌，否则大肠杆菌会漏掉。（3）牛肉膏蛋白胨固体培养基一般采取高压蒸汽灭菌法，灭菌后一定要等冷却到50℃左右时才能倒平板。（4）为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入伊红美蓝染料，可以将大肠杆菌菌落染成黑色。由于多个菌落连在一起时会出现重叠现象，只计算一个，所以统计值比真实值要小。
【点评】伊红美蓝是专一鉴别大肠杆菌的指示剂，为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入伊红美蓝作为指示剂．在伊红美蓝培养基上，可以鉴定出菌落为黑色的具有金属光泽的大肠杆菌，因此该小组通过统计黑色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目．
30．【答案】（1）单倍体；AB、Ab、aB、ab
（2）减数分裂；有丝分裂
（3）秋水仙素；AABB、AAbb、aaBB、aabb
（4）A；B；D
【知识点】植物组织培养的过程；组织培养基的成分及作用
【解析】【分析】解：（1）花药细胞直接发育的个体叫单倍体，故植株④叫做单倍体，基因型有Ab、aB、AB、ab，4种。（2）小麦形成花粉的细胞分裂方式是减数分裂，经四分体时期，依次又经历单核居中期、单核靠边期，最终发育成花粉粒（双核期）。花粉发育成为植物体，只有有丝分裂过程。（3）单倍体植物不育，若要得到可育植株，需要用秋水仙素对③进行处理，使染色体加倍可以进行正常的减数分裂，所得的植株基因型为AABB、AAbb、aaBB、aabb。（4）分析图示，月季的花药细胞①→愈伤组织②的程称为脱分化，不需要光照，需要的条件有A营养、B激素、D pH，再分化过程中才需要光。
【点评】植物组织培养依据的原理是细胞的全能性．培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽最终形成植物体．影响植物细胞脱分化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素．植物激素中细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素．生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长．
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