(共21张PPT)
第2节 种群数量的变化(第二课时)
1.实验目的
初步学会酵母菌等微生物的计数及种群数量变化曲线的绘制;
2.实验原理
《探究培养液中酵母菌种群数量的变化》
酵母菌进行_______生殖,_____ 条件下可快速增殖。可用_____________培养酵母菌,种群的增长受________________________等因素的影响。
计算酵母菌数量可用___________法。
抽样检测
有氧
出芽
培养液的成分、空间、pH、温度
液体培养基
提出问题
作出假设
实验思路
培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?
①培养液中的酵母菌数量一开始呈“______”型增长;
②随着时间推移,由于营养物质的______、有害代谢产物的__________、pH的_________,酵母菌数量呈_________型增长。
自变量:________________________
因变量:________________________
无关变量:_______________________
J
消耗
积 累
改 变
S
时间
酵母菌数量
培养液的体积等
---《探究培养液中酵母菌种群数量的变化》
探究实验
酵母菌培养液
一定体积的培养液
血细胞计数板
实验过程
分析结果得出结论
1、怎样进行酵母菌计数?
讨论:
抽样检测法
2、在吸取培养液计数前,要轻轻振荡几次试管,目的是什么?
使培养液中的酵母菌均匀分布,减少误差。
3、本实验没有另设对照实验,原因是?
4、该实验是否需要重复实验?试解释原因:
需要 为了提高实验数据的准确性
酵母菌每天的数量变化可形成前后对照
6、如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取的措施?
按一定比例稀释后再计数
时间 次数 1 2 3 4 5 6 7
1
2
3
平均值
7、记录表
6、怎么分辨死亡细胞和有活性的细胞?
死亡细胞多集结成团;
可以借助台盼蓝染色(死亡细胞呈蓝色)
血球计数板(1mm × 1mm × 0.1mm)
血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。
放大后的计数池
每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。
每个计数池分为9个大方格。
滴液处
计数室
1mm
血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器
计数室(中间大方格)的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为______mm3 ,合_________mL。
0.1
1×10-4
大方格
中方格
小方格
方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。
大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即1mm×1mm×0.1mm,其容积为0.1mm3;
计数室通常也有两种规格
16×25型:
即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格
25×16型:
即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。
不管计数室是哪一种构造,其每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。
2、取样
16×25型:
一般取四角的四个中方格(100个小方格)计数
25×16型:
一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。
——只计相邻两边及其顶角上的酵母菌,
一般遵循“计上不计下,计左不计右”的原则
8.问题:对于压在小方格界限上的酵母菌,应当怎样计数?
3、计算
b表示培养液稀释倍数;用所数小方格中细胞总数/所数小方格数是为求得每个小方格中的细胞平均总数。
案例
假设小方格酵母菌数量的平均值是A个,稀释倍数为B,求每毫升培养液中酵母菌的数量:
大方格中酵母菌数量=A×400÷0.1×1000×B
说明:大方格体积=0.1立方毫米,每个大方格共分为25个中方格,共有25×16=400个小方格
分析结果得出结论
实验结论:
在适宜条件下 ,酵母菌种群呈“S” 形增长;
种群的增长速率是:先增加后减少,在K/2时增长速率最大
0 1 2 3 4 5 6 7 时间/天
种群数量
酵母菌数量为何会下降?
①营养物质消耗殆尽
②有害代谢产物积累
③pH改变
若继续培养,则出现下图现象
第 1 天
第 4 天
第 6 天
第 7 天
死亡
9.注意事项
(1)取样时间需一致,且应做到随机取样(每天同一时间取样,或者每隔相同一段时间取样;
(2)抽取样液之前,需要振荡,使酵母菌均匀分布,若直接从静置的菌液上层中吸取,所测数值可能偏小,因为酵母菌会沉降在瓶底;
(3)若保持培养条件,酵母菌种群数量不会一直保持稳定,将会下降,因为营养物质减少、代谢废物增多、空间有限、pH降低等;
(4)血细胞计数板使用完毕后,用水冲洗干净或浸泡在酒精溶液中,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度
试管编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃)
A 10 — 0.1 28
B 10 — 0.1 5
C — 10 0.1 28
时间/d
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
7
6
5
4
3
2
1
酵母菌数量/万个·mL-1
A
C
B
8.进一步探究:温度或者营养物质对酵母菌数量的影响
5、每天同一时间,各组取出试管,用血球计数板分别计数
酵母个数,并作记录,连续观察7天。
拓展创新
温度对酵母菌种群数量增长有影响
实验设计:
1、取两支相同试管分别加入5ml无菌肉汤培养液,塞上棉塞。
2、用高压锅进行高压蒸汽灭菌后冷却至室温,标记甲、乙。
3、将酵母菌母液分别加入试管各5ml,摇匀后用血球计数板
计数起始酵母菌个数,做好记录。
4、将两试管分别送进4℃的冰箱冷藏箱和27℃的恒温箱,
培养7天。