辽宁省营口市大石桥市三中2020-2021学年高二下学期期初考试生物试卷
一、单选题
1．（2017高二下·成都期中）下列关于传统发酵技术的说法，正确的是（ ）
A．利用酵母菌酿酒时，发酵时间越长，产生的酒精量就越多
B．制作果醋的醋酸菌，属于严格的厌氧型微生物
C．青霉、毛霉、曲霉等真核生物均参与了腐乳的发酵
D．制作泡菜的微生物是一种需氧型细菌
2．（2021高二下·大石桥开学考）制作泡菜、酸菜时，所用菜坛子必须密封，其原因是( )
A．防止水分蒸发
B．防止菜叶萎蔫
C．防止产生的乳酸挥发
D．乳酸菌在有氧条件下发酵被抑制
3．（2021高二下·大石桥开学考）中国酸菜历史悠久，早在北魏的《齐名要术》中就记载了用白菜等原料腌制酸菜的多种方法。酸菜不仅口感好，而且对人体有益。下列说法错误的是（ ）
A．酸菜制作过程中，主要起作用的微生物是乳酸菌
B．真空包装的酸菜可能会因杂菌污染而发生“胀袋”
C．腌制过程中，坛中水分会因蔬菜细胞渗透失水而增多
D．酸菜的腌制时间越长，口感越好，营养价值越高
4．（2020·海南模拟）下列关于果酒、果醋和泡菜制作的叙述，错误的是（ ）
A．制作果醋和泡菜常用的微生物分别为醋酸菌和乳酸菌
B．将密封的果酒置于30-35℃的环境中发酵，可得到果醋
C．参与果酒、果醋和泡菜制作的微生物细胞中都有核糖体
D．发酵产生的果醋和泡菜都呈酸味，但形成酸味的物质不同
5．（2021高二下·大石桥开学考）下列依次表示倒平板，接种的位置以及平板划线法接种的路径的示意图，其中错误的是（ ）
A． B．
C． D．
6．（2021高二下·大石桥开学考）下列关于倒平板操作叙述正确的是（ ）
A．待培养基完全冷却后开始倒平板，以防烫伤
B．平板倒置培养的目的是加快培养基里水分的蒸发
C．培养基灭菌后调节pH，然后倒平板
D．倒平板时将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，防止杂菌污染
7．（2021高二下·大石桥开学考）下列常用的无菌操作错误的是（ ）
A．无菌操作不要求杀死培养基内的一切微生物
B．用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒
C．实验操作过程中应在酒精灯火焰附近进行
D．玻璃器皿可用酒精擦拭来进行灭菌
8．（2021高二下·大石桥开学考）下列有关消毒和灭菌的说法正确的是（ ）
A．接种环、接种针、镊子等金属用具以及玻璃器皿只能用灼烧灭菌
B．干热灭菌法是利用高温使蛋白质等变性，从而使微生物丧失活性
C．针对某些实验器具、餐具、饮用水可以采用巴氏消毒法
D．用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源属于物理消毒法
9．（2021高二下·大石桥开学考）下图是平板划线法接种微生物的示意图，下列叙述正确的是（ ）
A．该接种过程一般需灼烧接种环5次
B．在第5区域中才可以得到单个菌体形成的菌落
C．划线时，在火焰附近将皿盖打开一条缝隙
D．该接种方法也能计数培养液中微生物数量
10．（2021高二下·大石桥开学考）不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（ ）
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B．碳源物质也是该微生物的能源物质
C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D．水是该微生物的营养要素之一
11．（2021高二下·大石桥开学考）有关平板划线操作的叙述错误的是 ( )
A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
B．每次划线结束后，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种
C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液
D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种
12．（2021高二下·大石桥开学考）下面关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述中，正确的是（ ）
A．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素
B．筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一营养物质
C．统计样品中的活菌数目时一般用平板划线法
D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌
13．（2020高二下·重庆期中）在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B．固氮细菌、大肠杆菌、放线菌
C．固氮细菌、霉菌、放线菌
D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
14．（2021高二下·大石桥开学考）在“分离土壤中分解尿素的细菌”实验中，为判断是否起到了分离效果，提高实验结果的可信度，需要精心设置对照．对照组的设置方式为（ ）
A．牛肉膏蛋白胨培养基上接种相同土壤样液
B．牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水
C．筛选分解尿素细菌的选择培养基不接种
D．筛选分解尿素细菌的选择培养
15．（2021高二下·大石桥开学考）通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是（ ）
A．将培养皿倒置，37℃恒温培养24~48小时
B．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数
C．取104、105倍的土壤稀释液0.1mL，分别涂布于各组平板上
D．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
16．（2021高二下·大石桥开学考）某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是（ ）
A．利用平板划线法对细菌进行计数
B．以石油为唯一碳源的培养基筛选
C．采用稀释涂布平板法分离菌种
D．称取和稀释土壤时应在火焰旁
17．（2021高二下·大石桥开学考）筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，得到如图所示的两个菌落，培养平板经稀碘液处理，出现了以菌落为中心的透明圈。相关叙述正确的是（ ）
A．培养基中的淀粉也可为微生物提供氮源
B．两个菌落中的微生物为同一种微生物
C．两个菌落中的微生物均能将淀粉酶分泌至细胞外
D．透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明微生物分解淀粉的能力越弱
18．（2021高二下·大石桥开学考）某同学利用稀释涂布平板法进行菌落数目的统计，在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2760 个/mL、295个/mL和46个/mL，则菌落总数（个/mL）为（ ）
A．3.76×104 B．3.95×104 C．3.6×104 D．3.775×104
19．（2021高二下·大石桥开学考）下列关于啤酒的工业化生产的叙述，不正确的是（ ）
A．啤酒生产的主要原料是大麦
B．啤酒生产的发酵过程包括主发酵阶段和后发酵阶段
C．主发酵在低温、密闭条件下进行，发酵液澄清、成熟可以饮用
D．发酵的温度和时间会影响啤酒的口味
20．（2021高二下·大石桥开学考）利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用菌种分别是（ ）
A．酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌
B．酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌
C．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌
D．黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌
21．（2021高二下·大石桥开学考）下面与发酵工程有关的叙述中，不正确的是（ ）
A．发酵罐中必须通入无菌空气
B．不经处理排放的废弃培养液是一种污染物
C．培育新菌种，可用于分解更多种类的有机污染物
D．发酵工程在医药工业、食品工业和环境保护等方面均有广泛应用
22．（2021高二下·大石桥开学考）下列关于单细胞蛋白的叙述，正确的是（ ）
A．是微生物细胞中提取的蛋白质 B．是通过发酵生产的微生物菌体
C．是微生物细胞分泌的抗生素 D．单细胞蛋白不能作为食品
23．（2021高二下·河南开学考）发酵工程的内容包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌、接种、发酵和产品的分离，提纯等方面。下列关于发酵工程的认识不科学的是（ ）
A．发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点
B．发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身
C．通常所指的发酵条件包括温度控制，溶氧控制、pH控制
D．发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵
24．（2021高二下·大石桥开学考）发酵工程的正确操作过程是（ ）
①接种与发酵 ②培养基的配制 ③灭菌 ④产品的分离与提纯 ⑤菌种的选育 ⑥扩大培养
A．①③④⑤②⑥ B．⑤⑥②③①④
C．②⑤③①⑥④ D．⑥⑤②④③①
25．（2021高二下·大石桥开学考）发酵工程在现代生物工程中地位越来越重要。下列有关发酵过程叙述错误的是（ ）
A．首先要对发酵设备和培养基严格灭菌
B．要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵过程
C．在发酵过程中不需要向装置中再添加必需的营养组分
D．要严格控制温度、pH，溶解氧等发酵条件
二、综合题
26．（2021高二下·大石桥开学考）鸭梨醋饮属于绿色健康饮品，既保存了鸭梨中的多种氨基酸、维生素、矿物质、有机酸等营养成分，又兼具果醋醒酒护肝、助消化、降低血脂、软化血管等养生保健功能，深受广大消费者的青睐。下面为鸭梨醋饮的制作流程图，请据图回答问题：
（1）果酒的酿造原理是先使酵母菌进行
，以增加酵母菌的数量，然后再通过
获得果酒。（填写呼吸类型）
（2）在果酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在 上的野生型酵母菌。
（3）酒精发酵时一般将温度控制在18~30 ℃，温度过高时，酵母菌代谢减慢甚至死亡，原因是 。
（4）果醋发酵过程中，适宜的温度为
，较高的酒精度通常不适宜进行醋酸发酵，原因是 。
（5）酒精发酵后转入醋酸发酵前，除改变温度外，还需调整的发酵条件是 。
27．（2021高二下·大石桥开学考）多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，呈油状液体，污染土壤后，很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。
（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应先将土壤样品 ，接种到以 为唯一的碳源培养基上，从功能上讲，该培养基属于 。
（2）对初步提取到的菌株要进行 ，一般操作方法有两种，下图是 法。
（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下直接计数。若用 法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是 。
（4）将1mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为 。
28．（2021高二下·大石桥开学考）如图表示研究者从土壤中筛选分解尿素的细菌并计数的相关实验，请据图回答下列问题：
（1）进行过程①和②的目的分别是
和 ；图中弧线箭头上“ ”的具体操作是 。
（2）进行培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是 。倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板 放在恒温箱中，并用记号笔在皿底上标明培养微生物的名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及 等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是
和 。
（3）研究者可以通过观察培养形成的菌落的 、隆起程度等特征，来判断培养基上是否感染了其他细菌。在实验中，研究者每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止
。
答案解析部分
1．【答案】C
【知识点】果酒果醋的制作；腐乳的制作
【解析】【解答】解：A、利用酵母菌酿酒时，在一定范围内，发酵时间越长，产生的酒精量就越多，但时间过长后，由于营养物质的消耗等原因，酒精产量减少，A错误；
B、醋酸菌属于需氧菌，B错误；
C、青霉、毛霉、曲霉等真核生物均参与了腐乳的发酵，C正确；
D、制作泡菜的微生物是乳酸菌，属于厌氧型细菌，D错误．
故选：C．
【分析】1 参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2 6CO2+12H2O+能量；
2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6 2CO2+2C2H5OH+能量．
2 参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
3 参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型．腐乳制作的原理：
蛋白质 小分子肽和氨基酸；脂肪 甘油和脂肪酸．
2．【答案】D
【知识点】泡菜的制作
【解析】【解答】A、密封的目的不是防止水分蒸发，是为乳酸菌提供无氧环境，A项错误；
B、密封的目的是为乳酸菌提供无氧环境，不是防止菜叶萎蔫，B项错误；
C、密封的目的是防止氧气进入，而不是防止产生的乳酸挥发，C项错误；
D、乳酸菌是厌氧菌，需要无氧环境，所以密封的作用是为了防止乳酸菌在有氧条件下发酵被抑制，D项正确。
故答案为：D。
【分析】泡菜的制作利用的是乳酸菌，乳酸菌是在无氧条件下能将葡萄糖分解成乳酸的一类细菌的总称。乳酸菌是厌氧微生物，在有氧气存在时，无氧呼吸受抑制。
3．【答案】D
【知识点】泡菜的制作
【解析】【解答】A、酸菜制作过程中，白菜经乳酸菌发酵后产生大量乳酸，因此起主要作用的微生物是乳酸菌，A正确；
B、真空包装的酸菜可能会因杂菌污染而发生“胀袋”，B正确；
C、腌制过程中，外界溶液浓度高会使蔬菜细胞渗透失水，导致坛中水分增多，C正确；
D、酸菜制作过程中会产生亚硝酸盐，因此并不是腌制时间越长，口感越好，营养价值越高，D错误。
故答案为：D。
【分析】 （1）制作泡菜所用微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下，将糖分解为乳酸。分裂方式是二分裂 ，
（2）控制发酵时间：一般在腌制10天后，亚硝酸盐含量开始下降。但泡菜发酵时间并不是越长越好，一方面发酵时间过长，可能会产生其他有害物质，另一方面，发酵时间过长，乳酸含量过高，口味不佳。
4．【答案】B
【知识点】原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同；果酒果醋的制作；泡菜的制作
【解析】【解答】解：A. 由分析可知，制作果醋和泡菜常用的微生物分别为醋酸菌和乳酸菌，A正确；
B.制作果醋中的菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，所以果酒发酵产生果醋的过程中需要通入空气，不能密封，B错误；
C. 参与果酒、果醋和泡菜制作的微生物，都具有细胞结构，所以细胞中都有核糖体这种细胞器，C正确；
D. 发酵产生的果醋和泡菜都呈酸味，但形成酸味的物质分别为醋酸和乳酸，D正确。
该题需选择错误选项，故答案为B。
【分析】传统发酵技术中常用的菌种的比较：
菌种 酵母菌 醋酸菌 乳酸菌
生物种类 真核生物 原核生物 原核生物
代谢类型 异养兼性厌氧 异养需氧 异养厌氧
生产应用 酿酒 酿醋 制作泡菜
发酵 条件 氧气 初期需氧，后期厌氧 一直需氧 一直厌氧
适宜温度 18-25℃ 30-35℃ 30℃左右
5．【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、倒平板时，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，防止空气中的杂菌污染，A正确；
B、接种时，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，B正确；
C、划线时在要从上一次划线的末端开始进行，让菌种来源于上一次划线末端，C正确；
D、在划线法接种时，第二次划线应从第一次划线的线末开始，图中没有让接种环在固体培养基表面连续划线的操作，D错误。
故答案为：D。
【分析】（1） 微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
① 在配制培养基中，常用到倒平板，步骤如下：拔出锥形瓶的棉塞；将瓶口迅速通过火焰(如图b所示)；用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基(10～20 mL)倒入培养皿，立即盖上皿盖；等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。
② 平板划线法接种菌种时，要防止杂菌污染：接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧；划线操作在酒精灯火焰旁进行；接种环蘸取菌液时，要将试管口通过火焰；划线时将培养皿的皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划线，划线后及时盖上皿盖。
③ 在作第二次划线以及其后的操作时，要从上一次划线的末端开始划线的原因是划线末端含有的细菌数目较少， 每次从上一次划线的末端开始划线能够使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分散成单个的细菌。
6．【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、待培养基冷却到50℃左右时，进行倒平板，A错误；
B、平板冷凝后需倒置放置的原因是既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，B错误；
C、为防止杂菌污染，培养基调节pH后灭菌，然后倒平板，C错误；
D、倒平板时需要将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，这样可防止杂菌污染，D正确。
故答案为：D。
【分析】倒平板的注意事项：
①倒平板的温度一般在50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。
②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好的挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
③锥形瓶的瓶口通过火焰，可以通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
④倒平板的时候，不慎将培养基溅在皿盖与皿底上，不能用来培养微生物。因为空气中的微生物可能会在皿盖与皿底之间的培养基上滋生
7．【答案】D
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】A、无菌技术是用来防止培养物被其他外来微生物污染，而不是杀死培养基中的一切微生物，A正确；
B、用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒，B正确；
C、实验操作过程中应在酒精灯火焰旁进行，防止瓶口的微生物污染培养基，C正确；
D、对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭只能消毒不能灭菌，D错误。
故答案为：D。
【分析】（1）无菌操作
①取土样的用具在使用前都需要灭菌。
②实验操作均应在火焰旁进行。
(2)做好标记：实验使用的平板和试管比较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记。例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。
(3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。
8．【答案】B
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】A、接种环、接种针、镊子等金属用具常采用灼烧灭菌，但也可采用干热灭菌，玻璃器皿适用干热灭菌，A错误；
B、干热灭菌法是利用高温使微生物体内的蛋白质等变性，酶失去活性，达到灭菌的目的，B正确；
C、针对某些实验器具、餐具、饮用水可以采用煮沸消毒法，C错误；
D、用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源属于化学消毒法，D错误。
故答案为：B。
【分析】（1）消毒指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。
① 适用对象：操作的空间、操作者的衣着和手等。
② 常用方法：煮沸消毒、巴氏消毒等。
（2）灭菌指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
① 适用对象：用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等。
②常用方法：湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等
9．【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、由图可知：该平板划了5次线，故需要灼烧接种环6次，A错误；
B、由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，在4区域也有可能得到所需要的菌落，B错误；
C、划线时，为防止空气中微生物的污染，在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，划线后再通过酒精灯火焰，C正确；
D、该接种方法属于平板划线法，不能计数培养液中微生物数量，D错误。
故答案为：C。
【分析】平板划线法的原理：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单个菌落。
（1） 每次划线前灼烧杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端。
（2）在作第二次划线以及其后的操作时，要从上一次划线的末端开始划线的原因是划线末端含有的细菌数目较少，每次从上一次划线的末端开始划线能够使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分散成单个的细菌。
（3）平板划线法不能计数培养液中微生物数量。
10．【答案】B
【知识点】微生物的分离和培养；培养基概述及其分类
【解析】【解答】A、微生物生长繁殖需要氮源，氮源物质为该微生物提供必要的氮素，A正确；
B、该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质，B错误；
C、无机盐是微生物生长繁殖不可缺少的营养物质，C正确；
D、生命活动离不开水，水是该微生物的营养要素之一，D正确。
故答案为：B。
【分析】培养基的成分：
(1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常用的无机氮源是铵盐和硝酸盐。
(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源和能源。
(3)某些微生物之所以需要补充生长因子，往往是由于缺乏合成作为生长因子的物质所需要的酶或合成能力有限。
11．【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A. 接种前先要用火焰灼烧接种环，目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，A正确；
B. 每次划线结束，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，B正确；
C. 在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端，C错误；
D. 划线结束后，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，D正确。
【分析】平板划线操作中三种灼烧的目的不同
项目 目的
蘸取菌液前灼烧 避免接种环上可能存在的微生物污染菌种
每次划线前灼烧 杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端
划线操作结束后灼烧 及时杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者
12．【答案】A
【知识点】测定某种微生物的数量；尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】A、只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，A正确；
B、筛选分解尿素的细菌的实验中，采用的是以尿素为唯一“氮源”的培养基，B错误；
C、统计样品中的活菌数目一般用稀释涂布平板法，C错误；
D、在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂变红，这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素，D错误。
故答案为：A。
【分析】1、能分解尿素的细菌可以合成脲酶，脲酶能催化尿素分解产生NH3，NH3可以作为细菌生长的氮源；因此，以尿素为唯一氮源的培养基可以分离出能分解尿素的细菌。
2、微生物的数量测定：（1）利用显微镜直接计数：需利用细菌计数板或血细胞计数板计数。但不能区分活菌和死菌，使得计数结果偏大。
（2）稀释涂布平板法：为了保证结果的准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。
13．【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、乳酸菌属于异养厌氧微生物，不能在缺氮培养基上生存；金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，A错误；
B、在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，大肠杆菌不能在添加青霉素的选择培养基上生存，B错误；
C、在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，在添加青霉素的选择培养基上可以筛选分离真菌（如霉菌），加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长可以筛选分离放线菌，C正确；
D、在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，D错误。
故答案为：C。
【分析】在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物；青霉素可以破坏原核生物的细胞壁，在添加青霉素的选择培养基上可以筛选分离真菌；加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，这样的选择培养基可以筛选分离放线菌。
14．【答案】A
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】A、本实验中，目的是为了判断选择培养基是否起到了分离效果，故应用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，接种相同土壤样液观察菌落的多少，通过两种培养基上菌落的多少，可判断选择培养基是否起到了分离效果，A正确；
B、牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水可用于检测培养基是否合格，与题意不符，B错误；
C、筛选分解尿素细菌的选择培养基是实验中，应该接种，否则无法达到筛选的目的，C错误；
D、筛选分解尿素细菌的选择培养是为了增加细菌的数量，保证筛选的成功，不是对照组，D错误。
故答案为：A。
【分析】能分解尿素的细菌可以合成脲酶，脲酶能催化尿素分解产生NH3，NH3可以作为细菌生长的氮源；因此，以尿素为唯一氮源的培养基可以分离出能分解尿素的细菌，故应用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。
15．【答案】B
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】A、细菌培养时，要将培养皿倒置培养，可防止冷凝水滴落到培养基表面，并在37℃恒温培养24～48小时，A正确；
B、选择菌落数在30-300个的一组平板为代表进行计数，而不是选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数，B错误；
C、结合分析可知，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，C正确；
D、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压（高压蒸汽灭菌）灭菌后倒平板，D正确。
故答案为：B。
【分析】稀释涂布平板法：
（1）稀释：将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL悬液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。
（2）涂布：取0.1mL的菌液，滴加到培养基表面。涂布器先浸在有酒精的烧杯中，再放在火焰上灼烧，待酒精烧尽、涂布器冷却后，再进行涂布。用涂布器将菌液均匀的涂布在培养基表面。涂布时转动培养皿，使涂布均匀。
（3）培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入恒温培养箱（30~37℃）中培养1~2天 ，在涂布有合适浓度菌液的平板上可以观察到分离的单菌落。
（4）计数：一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，以减少偶然误差。
16．【答案】A
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】A、平板划线法能对细菌分离纯化，但是不能计数，A错误；
B、该实验目的是筛选出能分解石油的细菌，培养基的配方应以石油为唯一碳源，B正确；
C、分离菌种常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于菌种的计数，C正确；
D、微生物的分离和培养的关键技术是无菌技术，因此在微生物的分离和培养的过程中，称取和稀释土壤时应在火焰旁等活动要在火焰旁进行，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、分离微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
2、微生物的计数方法：（1）利用显微镜直接计数：需利用细菌计数板或血细胞计数板计数。但不能区分活菌和死菌，使得计数结果偏大。 （2）稀释涂布平板法：为了保证结果的准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。
17．【答案】C
【知识点】培养基对微生物的选择作用
【解析】【解答】A、淀粉属于多糖，其组成元素是C、H、O，因此，培养基中的淀粉也可为微生物提供碳源，A错误；
B、能够水解淀粉的微生物不一定是同一种微生物，B错误；
C、据图分析可知，两个菌落均产生了透明圈，说明两种细菌均能将淀粉酶分泌至细胞外，C正确；
D、透明圈直径与菌落直径的比值越大，分解淀粉能力越强，该值的大小能反映了两种细菌分解淀粉能力的差异，D错误。
故答案为：C。
【分析】1、碳源来源有糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等，氮源的来源有牛肉膏、蛋白胨、蛋白质、核酸、尿素、氨基酸等。
2、使用以淀粉为唯一碳源的培养基，根据是否产生透明圈来筛选淀粉分解菌。
18．【答案】D
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】在进行稀释涂布平板法进行计数时，需要选择菌落数在30~300的进行计数，否则会导致误差过大，因此菌落总数应该为46×103=4.6×104个/mL，295×102=2.95×104个/mL，二者的平均数为（4.6+2.95）÷2×104=3.775×104个/mL，即D正确。
故答案为：D。
【分析】稀释涂布平板法计算公式：每克样品中的菌株数=C÷V×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液体积（mL），M代表稀释倍数。
19．【答案】C
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌无氧呼吸将糖类分解为酒精而制成的，A正确；
B、啤酒生产的发酵过程包括主发酵阶段和后发酵阶段，B正确；
C、为了防止酒精形成乙醛和醋酸，啤酒生产的后发酵阶段要在低温度和密闭环境下进行，主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒，C错误；
D、发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种的口味要求的不同而有所差异，D正确。
故答案为：C。
【分析】啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境中储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。
20．【答案】C
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】啤酒的工业发酵使用的菌种是酵母菌；味精的生产可利用谷氨酸棒状杆菌发酵生产出谷氨酸，再经处理得到谷氨酸钠便可制成味精；胰岛素的生产需要使用基因工程的方法将人的胰岛素基因转移至大肠杆菌，由大肠杆菌进行工业发酵获得胰岛素；酸奶的工业发酵使用的菌种是乳酸杆菌，C正确，ABD错误。
故答案为：C。
【分析】1、酵母菌是单细胞真菌，是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，酒酿酵母最适生长温度约为28℃。
2、乳酸菌是厌氧菌，在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸，常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。
3、醋酸菌是好氧菌，当氧气和糖源都充足时能将糖分解成醋酸；当缺少糖源时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变成醋酸。
21．【答案】A
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、发酵罐中的微生物如果是需氧微生物，则必须通入无菌空气，如果是厌氧微生物，则不能通入无菌空气，A错误；
B、不经处理排放的废弃培养液中含有大量的发酵微生物，是一种污染物，B正确；
C、培育新菌种，增加了分解者的种类，可用于分解更多种类的有机污染物，C正确；
D、发酵工程主要应用于医药工业、食品工业和环境科学领域，D正确．
故选：A．
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术．发酵工程的 内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面．主要应用于医药工业、食品工业和环境科学 领域．
22．【答案】B
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】根据分析可知单细胞蛋白指通过发酵获得的微生物菌体，不是微生物细胞中提取的蛋白质，也不是细胞分泌的抗生素，酵母菌等生产的单细胞蛋白可以作为食品添加剂。故ACD错误，B正确
故答案为：B
【分析】以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得了大量的微生物菌体，即单细胞蛋白。酵母菌等生产的单细胞蛋白可以作为食品添加剂；用单细胞蛋白制成的微生物饲料能使家畜、家禽增重快，产奶或产蛋量显著提高。
23．【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、发酵工程具有条件温和、原料来源丰富且价格低廉、产物单一、污染小和容易处理的特点，A错误；
B、发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身，应用于食品工业、医药工业和农牧业等领域，B错误；
C、通常所指的发酵条件包括温度控制、溶解氧控制、pH控制，环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成，C错误；
D、传统发酵技术和现代发酵工程最大的相同之处是利用各种微生物的代谢来实现相关产品的生产，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。
①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；
②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
24．【答案】B
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】结合分析可知，发酵工程的基本操作过程为：菌种的选育→扩大培养→培养基的配制→灭菌→接种与发酵过程→产品的分离提纯。因此正确的操作过程是⑤⑥②③①④，即B正确。
故答案为：B。
【分析】发酵工程的基本操作过程为：
（1）菌种的选育：从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。
（2）扩大培养：发酵之前需对菌种进行扩大培养。
（3）培养基的配制：在菌种确定后，要选择原料制备培养基，培养基的配方须经反复试验才能确定。
（4）灭菌：培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
（5）接种：对发酵过程进行监控和控制，还可以进行反馈控制。
（6）发酵过程：这是发酵工程的中心环节，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加需要的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。
（7）产品的分离提纯：如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥。若产品是代谢物，可采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
25．【答案】C
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、为防止杂菌污染，发酵时首先要对发酵设备和培养基严格灭菌，A正确；
B、为了解发酵过程，要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，B正确；
C、在发酵过程中需要向装置中再添加必需的营养组分，C错误；
D、为保证发酵过程的顺利正常进行，要严格控制温度、pH、溶解氧等发酵条件，D正确。
故答案为：C。
【分析】发酵工程的基本操作过程为：
（1）菌种的选育：从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。
（2）扩大培养：发酵之前需对菌种进行扩大培养。
（3）培养基的配制：在菌种确定后，要选择原料制备培养基，培养基的配方须经反复试验才能确定。
（4）灭菌：培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
（5）接种：对发酵过程进行监控和控制，还可以进行反馈控制。
（6）发酵过程：这是发酵工程的中心环节，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加需要的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。
（7）产品的分离提纯：如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥。若产品是代谢物，可采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
26．【答案】（1）有氧呼吸；无氧呼吸
（2）鸭梨皮
（3）温度过高，酶的活性降低或失活
（4）30~35℃；较高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢，使产酸量下降
（5）通入无菌空气
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】（1）过程①是酒精发酵，其所用的微生物是酵母菌，该过程中先使酵母菌进行有氧呼吸（此时酵母菌可通过出芽生殖大量繁殖），以增加酵母菌的数量，然后为了获得酒精再通过密封制造无氧条件让酵母菌进行无氧呼吸获得果酒。
（2）在果酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在 葡萄糖皮上的野生型酵母菌，因而不需要接种。
（3）酒精发酵时一般将温度控制在18~30℃，温度过高时，酵母菌代谢减慢甚至死亡，温度过高，会导致酶的活性降低或失活，进而使酵母菌代谢减慢而死亡。
（4）果醋发酵过程中，适宜的温度为30~35℃，因为醋酸菌适宜的生长温度是30~35℃，较高的酒精度通常不适宜进行醋酸发酵，因为较高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢，影响醋酸发酵，进而引起产酸量下降。
（5）酒精发酵后转入醋酸发酵前，由于酒精发酵是无氧环境，且温度条件是18~30 ℃，而醋酸菌需要需要环境，温度条件是30~35℃，因此，除了需要改变温度外还需将无氧条件改为有氧条件，即需要通入无菌空气。
【分析】果酒、果醋的制作：
（1）将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，晾干备用。
（2）取新鲜鸭梨，用清水冲洗1~2次，沥干。
（3）用榨汁机榨取鸭梨汁，装入发酵瓶中，要留有大约1/3的空间，盖好瓶盖。
（4）将温度控制在18~30℃进行发酵。在发酵过程中，每隔12小时左右拧松瓶盖一次，此后在拧紧瓶盖。发酵时间为10到12天。可用过发酵瓶口取样来对发酵的情况进行监控。
（5）当果酒制作完成后，打开瓶盖盖上一层纱布，进行果醋的发酵。发酵温度为30~35℃，时间为7到8天。
27．【答案】（1）稀释（溶解）；多氯联苯；选择培养基
（2）纯化；平板划线
（3）稀释涂布平板（或涂布平板）；检验培养基平板灭菌是否成功（倒平板是否感染杂菌或是否彻底灭菌）
（4）5.7×107个/L
【知识点】微生物的分离和培养；测定某种微生物的数量
【解析】【解答】（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应先将土壤样品稀释，接种到以多氯联苯为唯一的碳源培养基上，只有能分解多氯联苯的菌株才能在这样的培养基上生存，所以从功能上讲，该培养基属于选择培养基。
（2）对初步提取到的菌株要进行分离纯化，一般操作方法有两种，平板划线法和稀释涂布平板法，图示是利用平板划线法对微生物进行接种。
（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数。若用稀释涂布平板法统计菌落数目，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是检验培养基平板灭菌是否成功。
（4）由题可知，1mL水样中菌落数为：（56+57+58）÷3÷0.1×100=5.7×104个，每升水样中的活菌数为：5.7×104×103=5.7×107个。
【分析】1、分离微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
2、微生物的数量测定：（1）利用显微镜直接计数：需利用细菌计数板或血细胞计数板计数。但不能区分活菌和死菌，使得计数结果偏大。 （2）稀释涂布平板法：为了保证结果的准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。
3、稀释涂布平板法计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液体积（mL），M代表稀释倍数。
28．【答案】（1）选择培养；增加分解尿素的细菌数量；挑选菌落
（2）先挑pH后灭菌；培养基；种类；平板划线法；稀释涂布平板法
（3）形状、大小、颜色；因培养时间不足导致遗漏细菌数目
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】（1）结合实验目的可知，①过程是从土壤中筛选分解尿素的细菌，目的是选择培养，②过程是扩大培养，目的是增加分解尿素的细菌的数量；图中弧线箭头上“？”的具体操作是挑出菌落，然后用平板划线法接种进行纯化培养。
（2）进行培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是先调节pH，后灭菌，这样可以避免调节pH过程中造成污染，倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，并用记号笔在皿底上标明培养微生物名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及培养基种类等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，因为这两种方法均可获得单菌落。
（3）因为菌落具有种的特异性，因此，研究者可以通过观察培养形成的菌落的形状、大小、颜色、隆起程度等特征，来判断培养基上是否感染了其他细菌。实验中，研究者每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足导致遗漏细菌数目，从而减少实验误差。
【分析】1、稀释涂布平板法：
（1）稀释：将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL悬液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。
（2）涂布：取0.1mL的菌液，滴加到培养基表面。涂布器先浸在有酒精的烧杯中，再放在火焰上灼烧，待酒精烧尽、涂布器冷却后，再进行涂布。用涂布器将菌液均匀的涂布在培养基表面。涂布时转动培养皿，使涂布均匀。
（3）培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入恒温培养箱（30~37℃）中培养1~2天 ，在涂布有合适浓度菌液的平板上可以观察到分离的单菌落。
（4）计数：一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，以减少偶然误差。
2、分离微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
1 / 1辽宁省营口市大石桥市三中2020-2021学年高二下学期期初考试生物试卷
一、单选题
1．（2017高二下·成都期中）下列关于传统发酵技术的说法，正确的是（ ）
A．利用酵母菌酿酒时，发酵时间越长，产生的酒精量就越多
B．制作果醋的醋酸菌，属于严格的厌氧型微生物
C．青霉、毛霉、曲霉等真核生物均参与了腐乳的发酵
D．制作泡菜的微生物是一种需氧型细菌
【答案】C
【知识点】果酒果醋的制作；腐乳的制作
【解析】【解答】解：A、利用酵母菌酿酒时，在一定范围内，发酵时间越长，产生的酒精量就越多，但时间过长后，由于营养物质的消耗等原因，酒精产量减少，A错误；
B、醋酸菌属于需氧菌，B错误；
C、青霉、毛霉、曲霉等真核生物均参与了腐乳的发酵，C正确；
D、制作泡菜的微生物是乳酸菌，属于厌氧型细菌，D错误．
故选：C．
【分析】1 参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2 6CO2+12H2O+能量；
2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6 2CO2+2C2H5OH+能量．
2 参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
3 参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型．腐乳制作的原理：
蛋白质 小分子肽和氨基酸；脂肪 甘油和脂肪酸．
2．（2021高二下·大石桥开学考）制作泡菜、酸菜时，所用菜坛子必须密封，其原因是( )
A．防止水分蒸发
B．防止菜叶萎蔫
C．防止产生的乳酸挥发
D．乳酸菌在有氧条件下发酵被抑制
【答案】D
【知识点】泡菜的制作
【解析】【解答】A、密封的目的不是防止水分蒸发，是为乳酸菌提供无氧环境，A项错误；
B、密封的目的是为乳酸菌提供无氧环境，不是防止菜叶萎蔫，B项错误；
C、密封的目的是防止氧气进入，而不是防止产生的乳酸挥发，C项错误；
D、乳酸菌是厌氧菌，需要无氧环境，所以密封的作用是为了防止乳酸菌在有氧条件下发酵被抑制，D项正确。
故答案为：D。
【分析】泡菜的制作利用的是乳酸菌，乳酸菌是在无氧条件下能将葡萄糖分解成乳酸的一类细菌的总称。乳酸菌是厌氧微生物，在有氧气存在时，无氧呼吸受抑制。
3．（2021高二下·大石桥开学考）中国酸菜历史悠久，早在北魏的《齐名要术》中就记载了用白菜等原料腌制酸菜的多种方法。酸菜不仅口感好，而且对人体有益。下列说法错误的是（ ）
A．酸菜制作过程中，主要起作用的微生物是乳酸菌
B．真空包装的酸菜可能会因杂菌污染而发生“胀袋”
C．腌制过程中，坛中水分会因蔬菜细胞渗透失水而增多
D．酸菜的腌制时间越长，口感越好，营养价值越高
【答案】D
【知识点】泡菜的制作
【解析】【解答】A、酸菜制作过程中，白菜经乳酸菌发酵后产生大量乳酸，因此起主要作用的微生物是乳酸菌，A正确；
B、真空包装的酸菜可能会因杂菌污染而发生“胀袋”，B正确；
C、腌制过程中，外界溶液浓度高会使蔬菜细胞渗透失水，导致坛中水分增多，C正确；
D、酸菜制作过程中会产生亚硝酸盐，因此并不是腌制时间越长，口感越好，营养价值越高，D错误。
故答案为：D。
【分析】 （1）制作泡菜所用微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下，将糖分解为乳酸。分裂方式是二分裂 ，
（2）控制发酵时间：一般在腌制10天后，亚硝酸盐含量开始下降。但泡菜发酵时间并不是越长越好，一方面发酵时间过长，可能会产生其他有害物质，另一方面，发酵时间过长，乳酸含量过高，口味不佳。
4．（2020·海南模拟）下列关于果酒、果醋和泡菜制作的叙述，错误的是（ ）
A．制作果醋和泡菜常用的微生物分别为醋酸菌和乳酸菌
B．将密封的果酒置于30-35℃的环境中发酵，可得到果醋
C．参与果酒、果醋和泡菜制作的微生物细胞中都有核糖体
D．发酵产生的果醋和泡菜都呈酸味，但形成酸味的物质不同
【答案】B
【知识点】原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同；果酒果醋的制作；泡菜的制作
【解析】【解答】解：A. 由分析可知，制作果醋和泡菜常用的微生物分别为醋酸菌和乳酸菌，A正确；
B.制作果醋中的菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，所以果酒发酵产生果醋的过程中需要通入空气，不能密封，B错误；
C. 参与果酒、果醋和泡菜制作的微生物，都具有细胞结构，所以细胞中都有核糖体这种细胞器，C正确；
D. 发酵产生的果醋和泡菜都呈酸味，但形成酸味的物质分别为醋酸和乳酸，D正确。
该题需选择错误选项，故答案为B。
【分析】传统发酵技术中常用的菌种的比较：
菌种 酵母菌 醋酸菌 乳酸菌
生物种类 真核生物 原核生物 原核生物
代谢类型 异养兼性厌氧 异养需氧 异养厌氧
生产应用 酿酒 酿醋 制作泡菜
发酵 条件 氧气 初期需氧，后期厌氧 一直需氧 一直厌氧
适宜温度 18-25℃ 30-35℃ 30℃左右
5．（2021高二下·大石桥开学考）下列依次表示倒平板，接种的位置以及平板划线法接种的路径的示意图，其中错误的是（ ）
A． B．
C． D．
【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、倒平板时，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，防止空气中的杂菌污染，A正确；
B、接种时，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，B正确；
C、划线时在要从上一次划线的末端开始进行，让菌种来源于上一次划线末端，C正确；
D、在划线法接种时，第二次划线应从第一次划线的线末开始，图中没有让接种环在固体培养基表面连续划线的操作，D错误。
故答案为：D。
【分析】（1） 微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
① 在配制培养基中，常用到倒平板，步骤如下：拔出锥形瓶的棉塞；将瓶口迅速通过火焰(如图b所示)；用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基(10～20 mL)倒入培养皿，立即盖上皿盖；等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。
② 平板划线法接种菌种时，要防止杂菌污染：接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧；划线操作在酒精灯火焰旁进行；接种环蘸取菌液时，要将试管口通过火焰；划线时将培养皿的皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划线，划线后及时盖上皿盖。
③ 在作第二次划线以及其后的操作时，要从上一次划线的末端开始划线的原因是划线末端含有的细菌数目较少， 每次从上一次划线的末端开始划线能够使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分散成单个的细菌。
6．（2021高二下·大石桥开学考）下列关于倒平板操作叙述正确的是（ ）
A．待培养基完全冷却后开始倒平板，以防烫伤
B．平板倒置培养的目的是加快培养基里水分的蒸发
C．培养基灭菌后调节pH，然后倒平板
D．倒平板时将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，防止杂菌污染
【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、待培养基冷却到50℃左右时，进行倒平板，A错误；
B、平板冷凝后需倒置放置的原因是既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，B错误；
C、为防止杂菌污染，培养基调节pH后灭菌，然后倒平板，C错误；
D、倒平板时需要将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，这样可防止杂菌污染，D正确。
故答案为：D。
【分析】倒平板的注意事项：
①倒平板的温度一般在50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。
②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好的挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
③锥形瓶的瓶口通过火焰，可以通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
④倒平板的时候，不慎将培养基溅在皿盖与皿底上，不能用来培养微生物。因为空气中的微生物可能会在皿盖与皿底之间的培养基上滋生
7．（2021高二下·大石桥开学考）下列常用的无菌操作错误的是（ ）
A．无菌操作不要求杀死培养基内的一切微生物
B．用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒
C．实验操作过程中应在酒精灯火焰附近进行
D．玻璃器皿可用酒精擦拭来进行灭菌
【答案】D
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】A、无菌技术是用来防止培养物被其他外来微生物污染，而不是杀死培养基中的一切微生物，A正确；
B、用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒，B正确；
C、实验操作过程中应在酒精灯火焰旁进行，防止瓶口的微生物污染培养基，C正确；
D、对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭只能消毒不能灭菌，D错误。
故答案为：D。
【分析】（1）无菌操作
①取土样的用具在使用前都需要灭菌。
②实验操作均应在火焰旁进行。
(2)做好标记：实验使用的平板和试管比较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记。例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。
(3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。
8．（2021高二下·大石桥开学考）下列有关消毒和灭菌的说法正确的是（ ）
A．接种环、接种针、镊子等金属用具以及玻璃器皿只能用灼烧灭菌
B．干热灭菌法是利用高温使蛋白质等变性，从而使微生物丧失活性
C．针对某些实验器具、餐具、饮用水可以采用巴氏消毒法
D．用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源属于物理消毒法
【答案】B
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】A、接种环、接种针、镊子等金属用具常采用灼烧灭菌，但也可采用干热灭菌，玻璃器皿适用干热灭菌，A错误；
B、干热灭菌法是利用高温使微生物体内的蛋白质等变性，酶失去活性，达到灭菌的目的，B正确；
C、针对某些实验器具、餐具、饮用水可以采用煮沸消毒法，C错误；
D、用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源属于化学消毒法，D错误。
故答案为：B。
【分析】（1）消毒指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。
① 适用对象：操作的空间、操作者的衣着和手等。
② 常用方法：煮沸消毒、巴氏消毒等。
（2）灭菌指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
① 适用对象：用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等。
②常用方法：湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等
9．（2021高二下·大石桥开学考）下图是平板划线法接种微生物的示意图，下列叙述正确的是（ ）
A．该接种过程一般需灼烧接种环5次
B．在第5区域中才可以得到单个菌体形成的菌落
C．划线时，在火焰附近将皿盖打开一条缝隙
D．该接种方法也能计数培养液中微生物数量
【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、由图可知：该平板划了5次线，故需要灼烧接种环6次，A错误；
B、由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，在4区域也有可能得到所需要的菌落，B错误；
C、划线时，为防止空气中微生物的污染，在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，划线后再通过酒精灯火焰，C正确；
D、该接种方法属于平板划线法，不能计数培养液中微生物数量，D错误。
故答案为：C。
【分析】平板划线法的原理：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单个菌落。
（1） 每次划线前灼烧杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端。
（2）在作第二次划线以及其后的操作时，要从上一次划线的末端开始划线的原因是划线末端含有的细菌数目较少，每次从上一次划线的末端开始划线能够使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分散成单个的细菌。
（3）平板划线法不能计数培养液中微生物数量。
10．（2021高二下·大石桥开学考）不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（ ）
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B．碳源物质也是该微生物的能源物质
C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D．水是该微生物的营养要素之一
【答案】B
【知识点】微生物的分离和培养；培养基概述及其分类
【解析】【解答】A、微生物生长繁殖需要氮源，氮源物质为该微生物提供必要的氮素，A正确；
B、该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质，B错误；
C、无机盐是微生物生长繁殖不可缺少的营养物质，C正确；
D、生命活动离不开水，水是该微生物的营养要素之一，D正确。
故答案为：B。
【分析】培养基的成分：
(1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常用的无机氮源是铵盐和硝酸盐。
(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源和能源。
(3)某些微生物之所以需要补充生长因子，往往是由于缺乏合成作为生长因子的物质所需要的酶或合成能力有限。
11．（2021高二下·大石桥开学考）有关平板划线操作的叙述错误的是 ( )
A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
B．每次划线结束后，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种
C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液
D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种
【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A. 接种前先要用火焰灼烧接种环，目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，A正确；
B. 每次划线结束，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，B正确；
C. 在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端，C错误；
D. 划线结束后，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，D正确。
【分析】平板划线操作中三种灼烧的目的不同
项目 目的
蘸取菌液前灼烧 避免接种环上可能存在的微生物污染菌种
每次划线前灼烧 杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端
划线操作结束后灼烧 及时杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者
12．（2021高二下·大石桥开学考）下面关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述中，正确的是（ ）
A．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素
B．筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一营养物质
C．统计样品中的活菌数目时一般用平板划线法
D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌
【答案】A
【知识点】测定某种微生物的数量；尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】A、只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，A正确；
B、筛选分解尿素的细菌的实验中，采用的是以尿素为唯一“氮源”的培养基，B错误；
C、统计样品中的活菌数目一般用稀释涂布平板法，C错误；
D、在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂变红，这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素，D错误。
故答案为：A。
【分析】1、能分解尿素的细菌可以合成脲酶，脲酶能催化尿素分解产生NH3，NH3可以作为细菌生长的氮源；因此，以尿素为唯一氮源的培养基可以分离出能分解尿素的细菌。
2、微生物的数量测定：（1）利用显微镜直接计数：需利用细菌计数板或血细胞计数板计数。但不能区分活菌和死菌，使得计数结果偏大。
（2）稀释涂布平板法：为了保证结果的准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。
13．（2020高二下·重庆期中）在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B．固氮细菌、大肠杆菌、放线菌
C．固氮细菌、霉菌、放线菌
D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、乳酸菌属于异养厌氧微生物，不能在缺氮培养基上生存；金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，A错误；
B、在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，大肠杆菌不能在添加青霉素的选择培养基上生存，B错误；
C、在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，在添加青霉素的选择培养基上可以筛选分离真菌（如霉菌），加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长可以筛选分离放线菌，C正确；
D、在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，D错误。
故答案为：C。
【分析】在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物；青霉素可以破坏原核生物的细胞壁，在添加青霉素的选择培养基上可以筛选分离真菌；加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，这样的选择培养基可以筛选分离放线菌。
14．（2021高二下·大石桥开学考）在“分离土壤中分解尿素的细菌”实验中，为判断是否起到了分离效果，提高实验结果的可信度，需要精心设置对照．对照组的设置方式为（ ）
A．牛肉膏蛋白胨培养基上接种相同土壤样液
B．牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水
C．筛选分解尿素细菌的选择培养基不接种
D．筛选分解尿素细菌的选择培养
【答案】A
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】A、本实验中，目的是为了判断选择培养基是否起到了分离效果，故应用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，接种相同土壤样液观察菌落的多少，通过两种培养基上菌落的多少，可判断选择培养基是否起到了分离效果，A正确；
B、牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水可用于检测培养基是否合格，与题意不符，B错误；
C、筛选分解尿素细菌的选择培养基是实验中，应该接种，否则无法达到筛选的目的，C错误；
D、筛选分解尿素细菌的选择培养是为了增加细菌的数量，保证筛选的成功，不是对照组，D错误。
故答案为：A。
【分析】能分解尿素的细菌可以合成脲酶，脲酶能催化尿素分解产生NH3，NH3可以作为细菌生长的氮源；因此，以尿素为唯一氮源的培养基可以分离出能分解尿素的细菌，故应用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。
15．（2021高二下·大石桥开学考）通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是（ ）
A．将培养皿倒置，37℃恒温培养24~48小时
B．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数
C．取104、105倍的土壤稀释液0.1mL，分别涂布于各组平板上
D．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
【答案】B
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】A、细菌培养时，要将培养皿倒置培养，可防止冷凝水滴落到培养基表面，并在37℃恒温培养24～48小时，A正确；
B、选择菌落数在30-300个的一组平板为代表进行计数，而不是选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数，B错误；
C、结合分析可知，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，C正确；
D、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压（高压蒸汽灭菌）灭菌后倒平板，D正确。
故答案为：B。
【分析】稀释涂布平板法：
（1）稀释：将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL悬液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。
（2）涂布：取0.1mL的菌液，滴加到培养基表面。涂布器先浸在有酒精的烧杯中，再放在火焰上灼烧，待酒精烧尽、涂布器冷却后，再进行涂布。用涂布器将菌液均匀的涂布在培养基表面。涂布时转动培养皿，使涂布均匀。
（3）培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入恒温培养箱（30~37℃）中培养1~2天 ，在涂布有合适浓度菌液的平板上可以观察到分离的单菌落。
（4）计数：一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，以减少偶然误差。
16．（2021高二下·大石桥开学考）某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是（ ）
A．利用平板划线法对细菌进行计数
B．以石油为唯一碳源的培养基筛选
C．采用稀释涂布平板法分离菌种
D．称取和稀释土壤时应在火焰旁
【答案】A
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】A、平板划线法能对细菌分离纯化，但是不能计数，A错误；
B、该实验目的是筛选出能分解石油的细菌，培养基的配方应以石油为唯一碳源，B正确；
C、分离菌种常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于菌种的计数，C正确；
D、微生物的分离和培养的关键技术是无菌技术，因此在微生物的分离和培养的过程中，称取和稀释土壤时应在火焰旁等活动要在火焰旁进行，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、分离微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
2、微生物的计数方法：（1）利用显微镜直接计数：需利用细菌计数板或血细胞计数板计数。但不能区分活菌和死菌，使得计数结果偏大。 （2）稀释涂布平板法：为了保证结果的准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。
17．（2021高二下·大石桥开学考）筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，得到如图所示的两个菌落，培养平板经稀碘液处理，出现了以菌落为中心的透明圈。相关叙述正确的是（ ）
A．培养基中的淀粉也可为微生物提供氮源
B．两个菌落中的微生物为同一种微生物
C．两个菌落中的微生物均能将淀粉酶分泌至细胞外
D．透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明微生物分解淀粉的能力越弱
【答案】C
【知识点】培养基对微生物的选择作用
【解析】【解答】A、淀粉属于多糖，其组成元素是C、H、O，因此，培养基中的淀粉也可为微生物提供碳源，A错误；
B、能够水解淀粉的微生物不一定是同一种微生物，B错误；
C、据图分析可知，两个菌落均产生了透明圈，说明两种细菌均能将淀粉酶分泌至细胞外，C正确；
D、透明圈直径与菌落直径的比值越大，分解淀粉能力越强，该值的大小能反映了两种细菌分解淀粉能力的差异，D错误。
故答案为：C。
【分析】1、碳源来源有糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等，氮源的来源有牛肉膏、蛋白胨、蛋白质、核酸、尿素、氨基酸等。
2、使用以淀粉为唯一碳源的培养基，根据是否产生透明圈来筛选淀粉分解菌。
18．（2021高二下·大石桥开学考）某同学利用稀释涂布平板法进行菌落数目的统计，在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2760 个/mL、295个/mL和46个/mL，则菌落总数（个/mL）为（ ）
A．3.76×104 B．3.95×104 C．3.6×104 D．3.775×104
【答案】D
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】在进行稀释涂布平板法进行计数时，需要选择菌落数在30~300的进行计数，否则会导致误差过大，因此菌落总数应该为46×103=4.6×104个/mL，295×102=2.95×104个/mL，二者的平均数为（4.6+2.95）÷2×104=3.775×104个/mL，即D正确。
故答案为：D。
【分析】稀释涂布平板法计算公式：每克样品中的菌株数=C÷V×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液体积（mL），M代表稀释倍数。
19．（2021高二下·大石桥开学考）下列关于啤酒的工业化生产的叙述，不正确的是（ ）
A．啤酒生产的主要原料是大麦
B．啤酒生产的发酵过程包括主发酵阶段和后发酵阶段
C．主发酵在低温、密闭条件下进行，发酵液澄清、成熟可以饮用
D．发酵的温度和时间会影响啤酒的口味
【答案】C
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌无氧呼吸将糖类分解为酒精而制成的，A正确；
B、啤酒生产的发酵过程包括主发酵阶段和后发酵阶段，B正确；
C、为了防止酒精形成乙醛和醋酸，啤酒生产的后发酵阶段要在低温度和密闭环境下进行，主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒，C错误；
D、发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种的口味要求的不同而有所差异，D正确。
故答案为：C。
【分析】啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境中储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。
20．（2021高二下·大石桥开学考）利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用菌种分别是（ ）
A．酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌
B．酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌
C．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌
D．黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌
【答案】C
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】啤酒的工业发酵使用的菌种是酵母菌；味精的生产可利用谷氨酸棒状杆菌发酵生产出谷氨酸，再经处理得到谷氨酸钠便可制成味精；胰岛素的生产需要使用基因工程的方法将人的胰岛素基因转移至大肠杆菌，由大肠杆菌进行工业发酵获得胰岛素；酸奶的工业发酵使用的菌种是乳酸杆菌，C正确，ABD错误。
故答案为：C。
【分析】1、酵母菌是单细胞真菌，是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，酒酿酵母最适生长温度约为28℃。
2、乳酸菌是厌氧菌，在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸，常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。
3、醋酸菌是好氧菌，当氧气和糖源都充足时能将糖分解成醋酸；当缺少糖源时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变成醋酸。
21．（2021高二下·大石桥开学考）下面与发酵工程有关的叙述中，不正确的是（ ）
A．发酵罐中必须通入无菌空气
B．不经处理排放的废弃培养液是一种污染物
C．培育新菌种，可用于分解更多种类的有机污染物
D．发酵工程在医药工业、食品工业和环境保护等方面均有广泛应用
【答案】A
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、发酵罐中的微生物如果是需氧微生物，则必须通入无菌空气，如果是厌氧微生物，则不能通入无菌空气，A错误；
B、不经处理排放的废弃培养液中含有大量的发酵微生物，是一种污染物，B正确；
C、培育新菌种，增加了分解者的种类，可用于分解更多种类的有机污染物，C正确；
D、发酵工程主要应用于医药工业、食品工业和环境科学领域，D正确．
故选：A．
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术．发酵工程的 内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面．主要应用于医药工业、食品工业和环境科学 领域．
22．（2021高二下·大石桥开学考）下列关于单细胞蛋白的叙述，正确的是（ ）
A．是微生物细胞中提取的蛋白质 B．是通过发酵生产的微生物菌体
C．是微生物细胞分泌的抗生素 D．单细胞蛋白不能作为食品
【答案】B
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】根据分析可知单细胞蛋白指通过发酵获得的微生物菌体，不是微生物细胞中提取的蛋白质，也不是细胞分泌的抗生素，酵母菌等生产的单细胞蛋白可以作为食品添加剂。故ACD错误，B正确
故答案为：B
【分析】以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得了大量的微生物菌体，即单细胞蛋白。酵母菌等生产的单细胞蛋白可以作为食品添加剂；用单细胞蛋白制成的微生物饲料能使家畜、家禽增重快，产奶或产蛋量显著提高。
23．（2021高二下·河南开学考）发酵工程的内容包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌、接种、发酵和产品的分离，提纯等方面。下列关于发酵工程的认识不科学的是（ ）
A．发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点
B．发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身
C．通常所指的发酵条件包括温度控制，溶氧控制、pH控制
D．发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵
【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、发酵工程具有条件温和、原料来源丰富且价格低廉、产物单一、污染小和容易处理的特点，A错误；
B、发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身，应用于食品工业、医药工业和农牧业等领域，B错误；
C、通常所指的发酵条件包括温度控制、溶解氧控制、pH控制，环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成，C错误；
D、传统发酵技术和现代发酵工程最大的相同之处是利用各种微生物的代谢来实现相关产品的生产，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。
①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；
②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
24．（2021高二下·大石桥开学考）发酵工程的正确操作过程是（ ）
①接种与发酵 ②培养基的配制 ③灭菌 ④产品的分离与提纯 ⑤菌种的选育 ⑥扩大培养
A．①③④⑤②⑥ B．⑤⑥②③①④
C．②⑤③①⑥④ D．⑥⑤②④③①
【答案】B
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】结合分析可知，发酵工程的基本操作过程为：菌种的选育→扩大培养→培养基的配制→灭菌→接种与发酵过程→产品的分离提纯。因此正确的操作过程是⑤⑥②③①④，即B正确。
故答案为：B。
【分析】发酵工程的基本操作过程为：
（1）菌种的选育：从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。
（2）扩大培养：发酵之前需对菌种进行扩大培养。
（3）培养基的配制：在菌种确定后，要选择原料制备培养基，培养基的配方须经反复试验才能确定。
（4）灭菌：培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
（5）接种：对发酵过程进行监控和控制，还可以进行反馈控制。
（6）发酵过程：这是发酵工程的中心环节，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加需要的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。
（7）产品的分离提纯：如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥。若产品是代谢物，可采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
25．（2021高二下·大石桥开学考）发酵工程在现代生物工程中地位越来越重要。下列有关发酵过程叙述错误的是（ ）
A．首先要对发酵设备和培养基严格灭菌
B．要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵过程
C．在发酵过程中不需要向装置中再添加必需的营养组分
D．要严格控制温度、pH，溶解氧等发酵条件
【答案】C
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、为防止杂菌污染，发酵时首先要对发酵设备和培养基严格灭菌，A正确；
B、为了解发酵过程，要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，B正确；
C、在发酵过程中需要向装置中再添加必需的营养组分，C错误；
D、为保证发酵过程的顺利正常进行，要严格控制温度、pH、溶解氧等发酵条件，D正确。
故答案为：C。
【分析】发酵工程的基本操作过程为：
（1）菌种的选育：从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。
（2）扩大培养：发酵之前需对菌种进行扩大培养。
（3）培养基的配制：在菌种确定后，要选择原料制备培养基，培养基的配方须经反复试验才能确定。
（4）灭菌：培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
（5）接种：对发酵过程进行监控和控制，还可以进行反馈控制。
（6）发酵过程：这是发酵工程的中心环节，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加需要的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。
（7）产品的分离提纯：如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥。若产品是代谢物，可采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
二、综合题
26．（2021高二下·大石桥开学考）鸭梨醋饮属于绿色健康饮品，既保存了鸭梨中的多种氨基酸、维生素、矿物质、有机酸等营养成分，又兼具果醋醒酒护肝、助消化、降低血脂、软化血管等养生保健功能，深受广大消费者的青睐。下面为鸭梨醋饮的制作流程图，请据图回答问题：
（1）果酒的酿造原理是先使酵母菌进行
，以增加酵母菌的数量，然后再通过
获得果酒。（填写呼吸类型）
（2）在果酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在 上的野生型酵母菌。
（3）酒精发酵时一般将温度控制在18~30 ℃，温度过高时，酵母菌代谢减慢甚至死亡，原因是 。
（4）果醋发酵过程中，适宜的温度为
，较高的酒精度通常不适宜进行醋酸发酵，原因是 。
（5）酒精发酵后转入醋酸发酵前，除改变温度外，还需调整的发酵条件是 。
【答案】（1）有氧呼吸；无氧呼吸
（2）鸭梨皮
（3）温度过高，酶的活性降低或失活
（4）30~35℃；较高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢，使产酸量下降
（5）通入无菌空气
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】（1）过程①是酒精发酵，其所用的微生物是酵母菌，该过程中先使酵母菌进行有氧呼吸（此时酵母菌可通过出芽生殖大量繁殖），以增加酵母菌的数量，然后为了获得酒精再通过密封制造无氧条件让酵母菌进行无氧呼吸获得果酒。
（2）在果酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在 葡萄糖皮上的野生型酵母菌，因而不需要接种。
（3）酒精发酵时一般将温度控制在18~30℃，温度过高时，酵母菌代谢减慢甚至死亡，温度过高，会导致酶的活性降低或失活，进而使酵母菌代谢减慢而死亡。
（4）果醋发酵过程中，适宜的温度为30~35℃，因为醋酸菌适宜的生长温度是30~35℃，较高的酒精度通常不适宜进行醋酸发酵，因为较高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢，影响醋酸发酵，进而引起产酸量下降。
（5）酒精发酵后转入醋酸发酵前，由于酒精发酵是无氧环境，且温度条件是18~30 ℃，而醋酸菌需要需要环境，温度条件是30~35℃，因此，除了需要改变温度外还需将无氧条件改为有氧条件，即需要通入无菌空气。
【分析】果酒、果醋的制作：
（1）将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，晾干备用。
（2）取新鲜鸭梨，用清水冲洗1~2次，沥干。
（3）用榨汁机榨取鸭梨汁，装入发酵瓶中，要留有大约1/3的空间，盖好瓶盖。
（4）将温度控制在18~30℃进行发酵。在发酵过程中，每隔12小时左右拧松瓶盖一次，此后在拧紧瓶盖。发酵时间为10到12天。可用过发酵瓶口取样来对发酵的情况进行监控。
（5）当果酒制作完成后，打开瓶盖盖上一层纱布，进行果醋的发酵。发酵温度为30~35℃，时间为7到8天。
27．（2021高二下·大石桥开学考）多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，呈油状液体，污染土壤后，很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。
（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应先将土壤样品 ，接种到以 为唯一的碳源培养基上，从功能上讲，该培养基属于 。
（2）对初步提取到的菌株要进行 ，一般操作方法有两种，下图是 法。
（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下直接计数。若用 法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是 。
（4）将1mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为 。
【答案】（1）稀释（溶解）；多氯联苯；选择培养基
（2）纯化；平板划线
（3）稀释涂布平板（或涂布平板）；检验培养基平板灭菌是否成功（倒平板是否感染杂菌或是否彻底灭菌）
（4）5.7×107个/L
【知识点】微生物的分离和培养；测定某种微生物的数量
【解析】【解答】（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应先将土壤样品稀释，接种到以多氯联苯为唯一的碳源培养基上，只有能分解多氯联苯的菌株才能在这样的培养基上生存，所以从功能上讲，该培养基属于选择培养基。
（2）对初步提取到的菌株要进行分离纯化，一般操作方法有两种，平板划线法和稀释涂布平板法，图示是利用平板划线法对微生物进行接种。
（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数。若用稀释涂布平板法统计菌落数目，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是检验培养基平板灭菌是否成功。
（4）由题可知，1mL水样中菌落数为：（56+57+58）÷3÷0.1×100=5.7×104个，每升水样中的活菌数为：5.7×104×103=5.7×107个。
【分析】1、分离微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
2、微生物的数量测定：（1）利用显微镜直接计数：需利用细菌计数板或血细胞计数板计数。但不能区分活菌和死菌，使得计数结果偏大。 （2）稀释涂布平板法：为了保证结果的准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。
3、稀释涂布平板法计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液体积（mL），M代表稀释倍数。
28．（2021高二下·大石桥开学考）如图表示研究者从土壤中筛选分解尿素的细菌并计数的相关实验，请据图回答下列问题：
（1）进行过程①和②的目的分别是
和 ；图中弧线箭头上“ ”的具体操作是 。
（2）进行培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是 。倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板 放在恒温箱中，并用记号笔在皿底上标明培养微生物的名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及 等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是
和 。
（3）研究者可以通过观察培养形成的菌落的 、隆起程度等特征，来判断培养基上是否感染了其他细菌。在实验中，研究者每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止
。
【答案】（1）选择培养；增加分解尿素的细菌数量；挑选菌落
（2）先挑pH后灭菌；培养基；种类；平板划线法；稀释涂布平板法
（3）形状、大小、颜色；因培养时间不足导致遗漏细菌数目
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】（1）结合实验目的可知，①过程是从土壤中筛选分解尿素的细菌，目的是选择培养，②过程是扩大培养，目的是增加分解尿素的细菌的数量；图中弧线箭头上“？”的具体操作是挑出菌落，然后用平板划线法接种进行纯化培养。
（2）进行培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是先调节pH，后灭菌，这样可以避免调节pH过程中造成污染，倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，并用记号笔在皿底上标明培养微生物名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及培养基种类等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，因为这两种方法均可获得单菌落。
（3）因为菌落具有种的特异性，因此，研究者可以通过观察培养形成的菌落的形状、大小、颜色、隆起程度等特征，来判断培养基上是否感染了其他细菌。实验中，研究者每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足导致遗漏细菌数目，从而减少实验误差。
【分析】1、稀释涂布平板法：
（1）稀释：将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL悬液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。
（2）涂布：取0.1mL的菌液，滴加到培养基表面。涂布器先浸在有酒精的烧杯中，再放在火焰上灼烧，待酒精烧尽、涂布器冷却后，再进行涂布。用涂布器将菌液均匀的涂布在培养基表面。涂布时转动培养皿，使涂布均匀。
（3）培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入恒温培养箱（30~37℃）中培养1~2天 ，在涂布有合适浓度菌液的平板上可以观察到分离的单菌落。
（4）计数：一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，以减少偶然误差。
2、分离微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
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