迁西县职业技术教育中心普职融通部二部2021-2022学年度第二学期期中考试试卷 学科《 生物 》
考试时间： 90分钟 试卷满分： 100 分
题号 一 二 三 总分
得分
I卷客观题（40分）
一．单选（共13道题，每题2分，共26分）
下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（）
A. 腌制泡菜若时间过短，泡菜中杂菌少但酸性弱、亚硝酸盐含量高
B. 家庭制作果醋和泡菜时，表面产生菌膜分别由醋酸菌、酵母菌形成
C. 果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
D. 制酸奶时加入少量抗生素可以避免杂菌污染
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述中正确的是（）
A. 实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉
B. 利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数
C. 观察细菌培养的实验时，最好是在另一块平板上接种清水作为对照实验
D. 培养基中含有的淀粉、蛋白胨可以分别为细菌培养提供碳源和氮源
阅读下列材料，回答9、10题。
甜瓣子是豆瓣酱的重要成分，风味受蚕豆蛋白分解产生的氨基酸影响，也受发酵过程中不同微生物的多种代谢产物影响。其生产工艺如下。
蚕豆瓣豆瓣曲酱醅甜瓣子
某研究团队对加盐水后的发酵阶段的传统工艺（盐度15%，温度37℃，发酵30天）进行了改良，改良后甜瓣子风味得以提升。新工艺参数如下表所示。
时期 时段（天） 盐度（%） 温度（℃）
前期 0～12 6 12
中期 12～16 6 37
后期 16～30 15 37
两种工艺的结果比较见图。
下列对实验结果的分析，错误的是（ ）
A. 新工艺中期活霉菌总数下降由温度升高导致
B. 新工艺后期活细菌总数下降由温度、盐度均升高导致
C. 新工艺中期氨基酸产生速率较前期末加快，是因为温度升高提高了蛋白酶活性
D. 新工艺中甜瓣子风味提升，与前、中期活微生物总数高和氨基酸终产量高均有关
在下列过程中，需要采用植物组织培养技术的是（ ）
①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株
②用花药离体培养得到的单倍体植株
③用基因工程培养抗棉铃虫的植株
④利用细胞工程培养“番茄马铃薯”杂种植株
⑤无子西瓜的大量繁殖
A. ①②③④ B. ①③④⑤ C. ①②④⑤ D. ②③④⑤
某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的（ ）
植物细胞工程 动物细胞工程
技术手段 植物组织培养和植物体细胞杂交 动物细胞培养和单克隆抗体的制备
特殊处理 机械法去除细胞壁 胰蛋白酶处理，制成细胞悬液
融合方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、生物方法
典型应用 人工种子、杂种植株 单克隆抗体的制备
培养液 区别 生长素和细胞分裂素影响脱分化和再分化 动物血清（血浆）不可缺少
A. 1 B. 2 C. 3 D. 4
如图为哺乳动物受精卵发育过程中某一时期的示意图，下列叙述正确的是（）
A. 此图中细胞还没有分化，图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团
B. 此图为桑椹胚期，可作为胚胎移植的材料
C. 胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化
D. 进行胚胎分割时，取③中的细胞做性别鉴定
下列有关基因工程说法中，不正确的是（ ）
A. 基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向地改造生物，培育出新品种
B. 基因工程的操作步骤包括提取目的基因、目的基因与载体结合和导入目的基因
C. 基因工程中的工具酶是限制酶和DNA连接酶；常用的载体有质粒、 λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等
D. 对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制
科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关基因工程的叙述错误的是（ ）
A. 在基因工程中，PCR技术可用于任何目的基因的获取，且能迅速获得大量目的基因
B. 启动子对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的
C. 应用DNA探针技术，可以检测转基因马铃薯植株中目的基因的存在及其转录产物
D. 用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可用DNA连接酶连接形成重组DNA分子
作物脱毒、改善畜产品的品质、抗除草剂作物、可保存的干扰素、检测有毒物质、性别鉴定依次是下列哪项生物技术的应用（ ）
①基因工程 ②细胞工程 ③蛋白质工程 ④胚胎工程
A. ①②②③④④ B. ②①①③②④ C. ②①②③②④ D. ②①②④③②
如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述不正确的是（）
A. 代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤
B. 代表中心法则内容的是①②
C. ①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,⑤代表DNA合成
D. 蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计
下列有关基因工程说法中，不正确的是（ ）
A. 基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向地改造生物，培育出新品种
B. 基因工程的操作步骤包括提取目的基因、目的基因与运载体结合和导入目的基因
C. 基因工程中的工具酶是限制酶和DNA连接酶；常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等
D. 对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制
生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ）
A. 应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质
B. 当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆
C. 反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿性别
D. 生物武器是利用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
新冠肺炎在全世界的大流行，使我们对病毒的威力有深刻感受，所以生物武器更是人类要严格禁止的。下列关于生物武器的说法，错误的是（ ）
A. 生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等
B. 利用炭疽杆菌制成的生物武器，具有传染性强、死亡率高的特点
C. 中美两国发布联合声明，重申在一般情况下不发展、不生产、不储存生物武器
D. 彻底销毁生物武器是世界上大多数国家的共识
二．不定项选择题（共5题，每题3分，共15分）
下列有关传统果酒、果醋和腐乳制作的比较，正确的是（ ）
A. 参与果酒、腐乳制作的主要微生物属于真核生物，参与果醋制作的主要微生物属于原核生物
B. 三种发酵过程中都需要控制适宜的发酵温度
C. 果酒发酵主要在无氧环境下进行，果醋发酵和腐乳前期发酵在有氧条件下进行
D. 三种发酵过程中微生物的种群密度不断增加
图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述正确的是（ ）
A. 骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用仙台病毒诱导融合
B. 骨髓瘤细胞在HAT筛选培养液中不能正常增殖
C. 免疫B细胞的种类不唯一，所以杂交瘤细胞仍需进一步筛选
D. 筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止真菌污染
下列关于DNA重组技术基本工具的叙述，正确的是（）
A. 天然质粒须经过人工改造后才能作为载体
B. 限制酶和DNA连接酶分别催化磷酸二酯键的水解和形成
C. 不同限制酶切割DNA分子后产生的黏性末端不同
D. DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸结合到引物链上
如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述不正确的是( )
A. ②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与
B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C. ④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状
D. ⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
下列关于细胞工程的有关叙述，正确的是（ ）
A. 利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术
B. 在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组
C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体
D. 基因工程药物与天然产物完全相同，蛋白质工程药物与天然产物不相同
Ⅱ卷 非选择题（60分）
三．非选择题（30个空，每空2分，共60分）
（18分）谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取谷氨酸钠（味精）。如图为谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径，通过发酵工程可以大量生产谷氨酸。回答下列问题：
（1）与酵母菌相比，谷氨酸棒状杆菌在结构上的主要特点是 ______；谷氨酸发酵的培养基成分有豆饼水解液、玉米浆、尿素、磷酸氢二钾、硫酸镁、生物素等，从物理状态看，该培养基属于 ______培养基。
（2）测定谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法有显微镜直接计数法和 ______，前者计数的结果比后者计数的结果值更 ______（填“大”或“小”），原因是______ 。
（3）由图可知，谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸，则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，微生物这种对自身代谢速率的调节方式是 ______。
（4）谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要严格控制发酵液的pH。在中性和弱碱性条件下会积累 ______；在酸性条件下则容易形成 ______和 ______。
（18分）下表是几种限制酶识别序列及切割位点，图1为某质粒的示意图，图2是一段含有目的基因的DNA片段。请回答下列问题：
（1）基因工程中“分子手术刀”和“分子缝合针”分别是指______。
（2）利用______技术可以实现目的基因在体外大量扩增。
（3）基因工程中载体应具备的条件有： 、 （答出两点即可）。
（4）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用______两种限制酶切割，含有重组质粒的大肠杆菌不能在含______的培养基上生存。
（5）若要检测目的基因是否成功导入大肠杆菌，采用的检测方法是______。
（6）若用BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为______，对于该部位，这两种酶______（填“都能”“都不能”或“只有一种能”）切开。
（10分）用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据下列材料回答问题：
材料一：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张度，可制成防弹背心，降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。
（1）图中，过程①⑤所需要的工具酶有_____，构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由_____、_____、启动子、终止子等部分组成。
（2）过程②将重组质粒导入山羊受体细胞时，采用最多也最有效的方法是_____。通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从_____中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。
（3）通过⑤⑥⑦培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有_____等突出优点。
（14分）利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，
可用于生产基因工程疫苗。如图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：
（1）对1号猪使用______处理，使其超数排卵，收集并选取处在______时期的卵母细胞用于核移植。
（2）采集2号猪的组织块，用______处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的CO2培养箱中培养，其中CO2的作用是 _ _____。
（3）为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行______。产出的基因编辑猪的性染色体来自于______号猪。
（4）为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有______（填序号）。
①DNA测序
②染色体倍性分析
③体细胞结构分析
④抗原-抗体杂交
第2页，共2页20220508手动选题通用卷
副标题
题号 一 二 三 四 总分
得分
一、单选题（本大题共13小题，共13.0分）
下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（）
A. 腌制泡菜若时间过短，泡菜中杂菌少但酸性弱、亚硝酸盐含量高
B. 家庭制作果醋和泡菜时，表面产生菌膜分别由醋酸菌、酵母菌形成
C. 果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
D. 制酸奶时加入少量抗生素可以避免杂菌污染
【答案】
B
【解析】
【分析】
本题主要考查传统发酵的相关知识，旨在考查学生对知识的识记能力。
【解答】
A.腌制泡菜若时间过短，泡菜中杂菌少但酸性弱、亚硝酸盐含量低，A错误；
B.家庭制作果醋和泡菜时，表面产生菌膜分别由醋酸菌、酵母菌形成，B正确；
C.果酒、果醋制作过程中溶液的pH都是逐渐降低，C错误；
D.抗生素可以杀死乳酸菌等会细菌，因此在制作酸奶时不能加入抗生素，D错误。
故选B。
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述中正确的是（）
A. 实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉
B. 利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数
C. 观察细菌培养的实验时，最好是在另一块平板上接种清水作为对照实验
D. 培养基中含有的淀粉、蛋白胨可以分别为细菌培养提供碳源和氮源
【答案】
D
【解析】
【分析】
本题依托调查湖水中细菌的污染情况的实验，意在考查考生对微生物的培养基、灭菌、接种培养、菌落观察与计数的知识的理解能力。
【解答】
A.实验用过的带菌培养基经过高压蒸汽灭菌后才能倒掉，A错误；
B.应利用稀释涂布平板划线法对细菌进行分离纯化并计数，B错误；
C.要使实验结果可靠，最好是在另一块平板上接种无菌水作为对照实验，C错误；
D.培养基中含有的淀粉、蛋白胨可以分别为细菌培养提供碳源和氮源，D正确。
故选D。
阅读下列材料，回答9、10题。
甜瓣子是豆瓣酱的重要成分，风味受蚕豆蛋白分解产生的氨基酸影响，也受发酵过程中不同微生物的多种代谢产物影响。其生产工艺如下。
蚕豆瓣豆瓣曲酱醅甜瓣子
某研究团队对加盐水后的发酵阶段的传统工艺（盐度15%，温度37℃，发酵30天）进行了改良，改良后甜瓣子风味得以提升。新工艺参数如下表所示。
时期 时段（天） 盐度（%） 温度（℃）
前期 0～12 6 12
中期 12～16 6 37
后期 16～30 15 37
两种工艺的结果比较见图。
下列对实验结果的分析，错误的是（ ）
A. 新工艺中期活霉菌总数下降由温度升高导致
B. 新工艺后期活细菌总数下降由温度、盐度均升高导致
C. 新工艺中期氨基酸产生速率较前期末加快，是因为温度升高提高了蛋白酶活性
D. 新工艺中甜瓣子风味提升，与前、中期活微生物总数高和氨基酸终产量高均有关
【答案】
B
【解析】
【解答】
A、对比表中数据，新工艺前期12℃、中期37℃，其他条件相同，故新工艺中期活霉菌总数下降由温度升高导致，A正确；
B、对比表中数据，新工艺盐度前期、中期6%、后期15%，其他条件相同，故新工艺后期活细菌总数下降是由盐度均升高导致，B错误；
C、对比表中数据，新工艺前期12℃、中期37℃，其他条件相同，故新工艺中期氨基酸产生速率较前期末加快，是因为温度升高提高了蛋白酶活性，C正确；
D、根据“风味受蚕豆蛋白分解产生的氨基酸影响，也受发酵过程中不同微生物的多种代谢产物影响”可知，工艺中甜瓣子风味提升，与前、中期活微生物总数高和氨基酸终产量高均有关，D正确。
故选：B。
【分析】
分析表格：新工艺前中期比较，温度由前期12℃升到中期37℃；中后期比较，盐度由6%升到15%。
分析曲线图：活霉菌总数，新工艺比原工艺高；活细菌总数前中期，新工艺比原工艺高，后期相反；氨基酸态氮含量，新工艺比原工艺高。
本题以甜瓣子的制作为材料，考查了酶的特性等知识点，重点考查学生从文字、表格、曲线图中获取有用信息的能力。
在下列过程中，需要采用植物组织培养技术的是（ ）
①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株
②用花药离体培养得到的单倍体植株
③用基因工程培养抗棉铃虫的植株
④利用细胞工程培养“番茄马铃薯”杂种植株
⑤无子西瓜的大量繁殖
A. ①②③④ B. ①③④⑤ C. ①②④⑤ D. ②③④⑤
【答案】
D
【解析】本题主要考查植物组织培养的知识，构建知识网络，提高综合分析能力。
①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，①错误；
②利用花药离体培养得到的单倍体植株，需要采用植物组织培养技术，②正确；
③利用基因工程培养抗棉铃虫的植株，需要采用植物组织培养技术，③正确；
④利用细胞工程培养“番茄马铃薯”杂种植株，需要采用植物组织培养技术，④正确；
⑤无子西瓜的大量繁殖，需要采用植物组织培养技术，⑤正确。
综上所述，②③④⑤正确，即D正确，ABC错误。
故选D。
某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的（ ）
植物细胞工程 动物细胞工程
技术手段 植物组织培养和植物体细胞杂交 动物细胞培养和单克隆抗体的制备
特殊处理 机械法去除细胞壁 胰蛋白酶处理，制成细胞悬液
融合方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、生物方法
典型应用 人工种子、杂种植株 单克隆抗体的制备
培养液 区别 生长素和细胞分裂素影响脱分化和再分化 动物血清（血浆）不可缺少
A. 1 B. 2 C. 3 D. 4
【答案】
B
【解析】
【试题解析】
【分析】
本题考查植物细胞工程和动物细胞工程，要求考生识记植物细胞工程和动物细胞工程的技术、方法、应用等基础知识，能对两者进行比较，再结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。
【解答】
（1）技术手段：植物细胞工程的技术手段有植物组织培养和植物体细胞杂交；动物细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植等技术，单克隆抗体的制备是动物细胞融合的应用，错误；
（2）特殊处理：植物体细胞杂交时，采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁；动物细胞培养时，需要采用胰蛋白酶处理，制成细胞悬液，错误；
（3）融合方法：诱导植物细胞融合的方法有物理（离心、振动和电激等）和化学方法（聚乙二醇）；诱导动物细胞融合的方法有物理、化学和生物方法（灭活的病毒），正确；
（4）应用：植物细胞工程技术可应用于制备人工种子、植物体细胞杂交技术可用于种间杂交等；动物细胞工程中的动物细胞融合技术可以用于制备单克隆抗体，正确；
（5）培养液：植物细胞工程中的培养基中需要用生长素和细胞分裂素以影响愈伤组织的生长和分化；动物细胞工程的培养液中需要加入动物血清、血浆等天然成分，正确。
由此可见，表中只有2处不正确。B正确，ACD错误。
故选B。
如图为哺乳动物受精卵发育过程中某一时期的示意图，下列叙述正确的是（）
A. 此图中细胞还没有分化，图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团
B. 此图为桑椹胚期，可作为胚胎移植的材料
C. 胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化
D. 进行胚胎分割时，取③中的细胞做性别鉴定
【答案】
C
【解析】
【分析】
本题结合囊胚期胚胎示意图，考查动物胚胎发育的过程、胚胎分割等知识，要求考生识记动物胚胎发育过程，能准确判断图示胚胎所处的时期及其中结构的名称；识记胚胎分割的对象及注意事项，能结合所学的知识准确判断各选项。
分析题图：图示表示囊胚期胚胎示意图，其中①为透明带，在囊胚期后期会破裂；②为滋养层，将来分化成胎盘和胎膜；③为内细胞团，将来分化形成各种组织。
【解答】
A.囊胚时期细胞已出现分化，A错误；
B.此图为囊胚期，可作为胚胎移植的材料，B错误；
C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化，C正确；
D.对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定，D错误。
故选C。
下列有关基因工程说法中，不正确的是（ ）
A. 基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向地改造生物，培育出新品种
B. 基因工程的操作步骤包括提取目的基因、目的基因与载体结合和导入目的基因
C. 基因工程中的工具酶是限制酶和DNA连接酶；常用的载体有质粒、 λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等
D. 对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制
【答案】
B
【解析】
【分析】
本题主要考查基因工程的概念、工具以及操作步骤等相关知识，属于识记理解水平，意在考查学生对基因工程的理解程度。
【解答】
A.基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向地改造生物，培育出新品种，A正确；
B.基因工程的操作步骤包括提取目的基因、目的基因与运载体结合、导入目的基因以及目的基因的检测与鉴定四步，B错误；
C.基因工程中的工具酶是限制酶和DNA连接酶；常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，C正确；
D.对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制，以防止污染环境，D正确。
故选B。
科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关基因工程的叙述错误的是（ ）
A. 在基因工程中，PCR技术可用于任何目的基因的获取，且能迅速获得大量目的基因
B. 启动子对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的
C. 应用DNA探针技术，可以检测转基因马铃薯植株中目的基因的存在及其转录产物
D. 用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可用DNA连接酶连接形成重组DNA分子
【答案】
A
【解析】
【分析】
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。
【解答】
A.用PCR技术提取目的基因，需要已知基因的部分起始核苷酸序列，以便制备引物，而并非所有的目的基因都已知其核苷酸序列，A错误；
B.基因表达载体中的启动子能驱动基因，促进基因表达，因此该结构对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的，B正确；
C.DNA探针技术又称分子杂交技术，是利用DNA分子的变性、复性以及碱基互补配对的高度精确性，对某一特异性DNA序列进行探查的新技术，将目的基因的一段已知序列的多聚核苷酸用同位素或荧光染料等标记制成特异性探针，根据探针与所测分子的杂交程度检测细胞中是否存在目的基因及其转录产物，C正确；
D.用同种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接就可以形成重组DNA分子，D正确。
故选A。
作物脱毒、改善畜产品的品质、抗除草剂作物、可保存的干扰素、检测有毒物质、性别鉴定依次是下列哪项生物技术的应用（ ）
①基因工程 ②细胞工程 ③蛋白质工程 ④胚胎工程
A. ①②②③④④ B. ②①①③②④ C. ②①②③②④ D. ②①②④③②
【答案】
B
【解析】（1）作物脱毒是植物组织培养技术的应用，属于②细胞工程；
（2）改善畜产品的品质，将乳糖酶基因导入奶牛基因组，使得转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低；属于①基因工程。
（3）抗除草剂作物的培育技术属于DNA重组技术的应用，属于①基因工程。
（4）保存干扰素，干扰素是一种蛋白质，治疗癌症和病毒感染，很难保存，运用③蛋白质工程。
（5）检测有毒物质，判断某物质的毒性，②细胞工程中动物细胞的培养。
（6）性别鉴定，在囊胚中取滋养层细胞，做DNA分析，属于④胚胎工程。
故选：B。
如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述不正确的是（）
A. 代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤
B. 代表中心法则内容的是①②
C. ①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,⑤代表DNA合成
D. 蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计
【答案】
D
【解析】解：A、代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤，A正确；
B、代表中心法则内容的是①②，B正确；
C、①代表转录，②代表翻译，④代表分子设计，⑤代表 DNA合成，C正确；
D、蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计，通过基因合成或修饰实现，D错误．
故选：D．
1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求．（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）
2、蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程．
3、基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行．（注意：目的基因只能用人工合成的方法）
本题考查蛋白质工程的相关知识，要求考生识记蛋白质工程的概念、原理、基本途径，明确蛋白质工程的直接操作对象是基因，再结合所学的知识准确判断各选项．
转基因食品存在“是否安全”的争议，有人认为转基因食品是有害的。比如抗“草甘膦（除草剂）”转基因农作物的种植，使喷洒除草剂的人患癌症。请用已学知识判断以下说法正确的是（ ）
A. 自古就有“吃啥补啥”的说法，所以吃了转基因食品，则其中的基因会整合到人的基因组中
B. 严格管理好目的基因和控制好目的基因的表达部位，则转基因食品安全性可以得到保障
C. 若食用转基因大米，就一定会对人的健康造成危害
D. 抗除草剂植物生产的食品会导致人患癌症
【答案】
B
【解析】
【解答】
A、吃了转基因食品，其中的基因会被消化分解，因此不会整合到人的基因组中，A错误；
B、严格管理好目的基因和控制好目的基因的表达部位，则转基因食品安全性可以得到保障，B正确；
C、食用转基因大米不一定会对人的健康造成危害，C错误；
D、抗除草剂植物生产的食品不会导致人患癌症，D错误。
故选B。
【分析】
转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
本题考查转基因生物的安全性问题，要求考生了解转基因生物的安全性问题，能结合所学的知识准确判断各选项。
生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ）
A. 应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质
B. 当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆
C. 反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿性别
D. 生物武器是利用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
【答案】
D
【解析】
【分析】
本题考查生物技术安全性和伦理问题的知识点，要求学生掌握生物技术安全性和伦理问题的焦点和争论的观点是解决问题的关键。
【解答】
A. 为了转基因的安全应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质，A正确；
B. 社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆，B正确；
C. 反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿，C正确；
D. 生物武器是用微生物、毒素、及重组致病菌等来形成杀伤力，干扰素不属于生物武器，D错误。
故选D。
新冠肺炎在全世界的大流行，使我们对病毒的威力有深刻感受，所以生物武器更是人类要严格禁止的。下列关于生物武器的说法，错误的是（ ）
A. 生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等
B. 利用炭疽杆菌制成的生物武器，具有传染性强、死亡率高的特点
C. 中美两国发布联合声明，重申在一般情况下不发展、不生产、不储存生物武器
D. 彻底销毁生物武器是世界上大多数国家的共识
【答案】
C
【解析】
【分析】
本题考查了生物武器的相关知识，意在考查学生对生物武器的特点及其应用的理解，提升学生分析问题和解决问题的能力。
1、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
生物武器的特点：单位面积效应大；有特定的伤害对象；具有传染性；危害时间久；不易被发现和鉴定；使用者本身易受伤害；生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。
【解答】
A、生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等，应当予以禁止，A正确；
B、利用炭疽杆菌制成的生物武器，具有传染性强、死亡率高、污染面广、难以防治的特点，B正确；
C、1998年6月27日，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误；
D、生物武器杀伤力强，彻底销毁生物武器是世界上大多数国家的共识，D正确。
故选C。
二、多选题（本大题共5小题，共10.0分）
下列有关传统果酒、果醋和腐乳制作的比较，正确的是（ ）
A. 参与果酒、腐乳制作的主要微生物属于真核生物，参与果醋制作的主要微生物属于原核生物
B. 三种发酵过程中都需要控制适宜的发酵温度
C. 果酒发酵主要在无氧环境下进行，果醋发酵和腐乳前期发酵在有氧条件下进行
D. 三种发酵过程中微生物的种群密度不断增加
【答案】
ABC
【解析】A、参与果酒制作的主要菌种是酵母菌，参与腐乳制作的主要菌种是毛霉，酵母菌和毛霉均属于真核生物；参与果醋制作的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌属于原核生物，A正确；
B、果酒、果醋和腐乳制作过程中菌种生活的温度条件不同，需要将温度控制在发酵菌种的最适温度范围内，B正确；
C、酵母菌是兼性厌氧型微生物，在有氧条件下大量繁殖，在无氧条件下通过无氧呼吸产生酒精，因此果酒发酵主要在无氧环境下进行，而醋酸菌和毛霉属于需氧生物，故果醋发酵和腐乳前期发酵在有氧条件下才能进行，C正确；
D、发酵过程中，随营养物质的消耗，代谢产物的积累，微生物的种群密度不会一直增加，D错误。
图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述正确的是（ ）
A. 骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用仙台病毒诱导融合
B. 骨髓瘤细胞在HAT筛选培养液中不能正常增殖
C. 免疫B细胞的种类不唯一，所以杂交瘤细胞仍需进一步筛选
D. 筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止真菌污染
【答案】
BC
【解析】A、诱导动物细胞融合的方法有电激、聚乙二醇、灭活的病毒（如灭活的仙台病毒）等，A错误；
B、骨髓瘤细胞虽然能无限增殖，但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT ），不能正常合成DNA，所以骨髓瘤细胞在HAT筛选培养液中不能正常增殖，B正确；
C、免疫B细胞的种类不唯一，每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体，因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；
D、筛选出的杂交瘤细胞体外培养时，添加抗生素可以防止杂菌污染，D错误。
故选：BC。
1、动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性、细胞的增殖，诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产性杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。
2、单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内、体外培养。
3、制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体，但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。
本题考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。
下列关于DNA重组技术基本工具的叙述，正确的是（）
A. 天然质粒须经过人工改造后才能作为载体
B. 限制酶和DNA连接酶分别催化磷酸二酯键的水解和形成
C. 不同限制酶切割DNA分子后产生的黏性末端不同
D. DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸结合到引物链上
【答案】
AB
【解析】
【分析】
本题考查基因工程基本工具，意在考查学生对知识的理解和记忆能力。
【解答】
A.天然质粒须经过人工改造后才能作为载体，A正确；
B.限制酶和DNA连接酶分别催化磷酸二酯键的水解和形成，B正确；
C.不同限制酶切割DNA分子后产生的黏性末端可能相同，C错误；
D.DNA连接酶能连接双链DNA片段的黏性末端或平末端，DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸结合到引物链上，D错误。
故选AB。
如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述不正确的是( )
A. ②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与
B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C. ④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状
D. ⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
【答案】
ABC
【解析】
【分析】
本题考查基因工程的有关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。
【解答】
A. 构建载体需要限制酶和DNA连接酶，A错误；
B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到④的染色体上，B错误；
C. 染色体上含有目的基因，但目的基因也可能不能转录或者不能翻译，或者表达的蛋白质不具有生物活性，C错误；
D. 植株表现出抗虫性状，说明含有目的基因，属于基因重组，为可遗传变异，D正确。
故选ABC
下列关于细胞工程的有关叙述，正确的是（ ）
A. 利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术
B. 在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组
C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体
D. 基因工程药物与天然产物完全相同，蛋白质工程药物与天然产物不相同
【答案】
AB
【解析】
【分析】
本题考查的是细胞工程的有关内容，意在考查学生的识记和理解能力。
【解答】
A.利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株时，需要采用植物组织培养技术，将杂种细胞培育成杂种植株。而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株，不是将离体植物细胞或组织培育成植物体，所以没有采用植物组织培养技术，A正确；
B.根尖细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，细胞通过有丝分裂方式进行增殖，在有丝分裂过程中染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组，B正确；
C.动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所根据的原理均不完全相同，而且动物细胞融合不能形成杂种个体，只能形成杂种细胞，C错误；
D.基因工程是将一种生物的基因转移到另一种生物体内，故基因工程药物与天然药物完全相同，而蛋白质工程是通过修改基因或创造基因合成新基因来改造生物的遗传和表达性状，因此蛋白质工程药物与天然产物不完全相同，D错误。
故选AB。
三、探究题（本大题共3小题，共45.0分）
谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取谷氨酸钠（味精）。如图为谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径，通过发酵工程可以大量生产谷氨酸。回答下列问题：
（1）与酵母菌相比，谷氨酸棒状杆菌在结构上的主要特点是 ______；谷氨酸发酵的培养基成分有豆饼水解液、玉米浆、尿素、磷酸氢二钾、硫酸镁、生物素等，从物理状态看，该培养基属于 ______培养基。
（2）测定谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法有显微镜直接计数法和 ______，前者计数的结果比后者计数的结果值更 ______（填“大”或“小”），原因是
______。
（3）由图可知，谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸，则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，微生物这种对自身代谢速率的调节方式是 ______。
（4）谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要严格控制发酵液的pH。在中性和弱碱性条件下会积累 ______；在酸性条件下则容易形成 ______和 ______。
【答案】
（1）无以核膜为界限的细胞核 液体
（2）稀释涂布平板法 大 前者死活菌体一起计数，后者只计数活菌数，且可能有多个菌体形成同一个菌落
（3）负反馈调节
（4）谷氨酸 谷氨酰胺 N乙酰谷氨酰胺
【解析】（1）谷氨酸棒状杆菌属于原核生物，而酵母菌属于真核生物，与真核细胞相比，原核细胞在结构上的主要特点是无以核膜为界限的细胞核。因谷氨酸发酵的培养基成分有豆饼水解液、玉米浆等，所以从物理状态看，该培养基属于液体培养基。
（2）测定谷氨酸棒状杆菌数目可采用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法。由于显微镜直接计数法是死菌和活菌一起计数，而稀释涂布平板法只计数活菌，且可能有多个菌体形成一个菌落，因此显微镜直接计数法的结果比稀释涂布平板法计数的结果大。
（3）据图分析，当谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸时，会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，导致合成谷氨酸的速率下降，这种对自身代谢速率的调节方式是负反馈调节。
（4）谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要严格控制发酵液的pH。在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸；在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N乙酰谷氨酰胺。
1、培养基按物理性质分：
名称 特征 功能
固体培养基 外观显固体状态的培养基 主要用于微生物的分离、鉴定
液体培养基 呈液体状态的培养基 主要用于工业生产
2、测定微生物数目可采用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法。
3、分析题图：当谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸时，会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，导致合成谷氨酸的速率下降，这属于负反馈调节，可维持谷氨酸浓度的相对稳定。
本题结合图解，考查微生物的相关知识，要求考生识记培养基的种类及功能；识记计数微生物的方法及优缺点，能结合图中信息准确答题。
下表是几种限制酶识别序列及切割位点，图1为某质粒的示意图，图2是一段含有目的基因的DNA片段。请回答下列问题：
（1）基因工程中“分子手术刀”和“分子缝合针”分别是指______。
（2）利用______技术可以实现目的基因在体外大量扩增。
（3）基因工程中载体应具备的条件有：______（答出两点即可）。
（4）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用______两种限制酶切割，含有重组质粒的大肠杆菌不能在含______的培养基上生存。
（5）若要检测目的基因是否成功导入大肠杆菌，采用的检测方法是______。
（6）若用BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为______，对于该部位，这两种酶______（填“都能”“都不能”或“只有一种能”）切开。
【答案】
（1）限制性内切核酸酶、DNA连接酶
（2）PCR
（3）能自我复制；有一个至多个限制酶切割位点；具有标记基因；能在受体细胞中稳定存在；不影响宿主细胞的生命活动
（4）BclⅠ和HindⅢ ；氨苄青霉素
（5）DNA分子杂交技术
（6） 或 ；都不能
【解析】
【分析】
本题结合基因结构图和运载体结构图，考查基因工程的技术和原理，重点是限制酶和DNA连接酶，要求考生认真分析图，能根据图中和表中信息选择合适的限制酶，准确判断使用DNA连接酶连接的结果，再运用所学的知识答题。
【解答】
（1）基因工程中“分子手术刀”和“分子缝合针”分别是指限制性内切核酸酶、DNA连接酶。
（2）利用PCR技术可以实现目的基因在体外大量扩增。
（3）基因工程中载体应具备的条件有：能自我复制；有一个至多个限制酶切割位点；具有标记基因；能在受体细胞中稳定存在；不影响宿主细胞的生命活动。
（4）选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但使用BamHⅠ可能破坏质粒中的两种抗性基因，BclⅠ和HindⅢ都只会破坏氨苄青霉素抗性基因，四环素抗性基因完好，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割。含有重组质粒的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素的培养基上生存。
（5）若要检测目的基因是否成功导入大肠杆菌，采用的检测方法是DNA分子杂交技术。
（6）根据BamHⅠ和BclⅠ的酶切位点，若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，则连接部位的6个碱基对序列为或，对于该部位，由于与两种酶的酶切位点均不同，故这两种酶都不能切开。
用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据下列材料回答问题：
材料一：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张度，可制成防弹背心，降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。
（1）图中，过程①⑤所需要的工具酶有_____，构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由_____、_____、启动子、终止子等部分组成。
（2）过程②将重组质粒导入山羊受体细胞时，采用最多也最有效的方法是_____。通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从_____中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。
（3）通过⑤⑥⑦培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有_____等突出优点。
【答案】
（1）限制酶、DNA连接酶 目的基因 、标记基因（复制起点，限制酶切位点等）
（2）显微注射 乳汁
（3）目的性强，能克服远缘杂交不亲和的障碍（或能有效地打破物种间的生殖隔离界限）
【解析】
【分析】
基因工程的基本工具包括限制性核酸内切酶（限制酶)、DNA连接酶、载体。限制酶的作用：识别特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键；DNA连接酶的作用：在两个核苷酸之间形成磷酸二酯键以连接两个DNA片段。
【解答】
(1)基因工程常用的工具酶是限制酶、DNA连接酶，故在基因表达载体的构建中需要用到这两种酶;基因表达载体包括目的基因、启动子，终止子、标记基因。
(2）将目的基因导入动物细胞的常用方法是显微注射技术; 培育的蜘蛛羊作为乳腺生物反应器，就可以从乳汁中获取需要的蜘蛛丝蛋白。
(3）基因工程育种的优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，目的性较强。
利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。如图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：
（1）对1号猪使用______处理，使其超数排卵，收集并选取处在______时期的卵母细胞用于核移植。
（2）采集2号猪的组织块，用______处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的CO2培养箱中培养，其中CO2的作用是______。
（3）为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行______。产出的基因编辑猪的性染色体来自于______号猪。
（4）为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有______（填序号）。
①DNA测序
②染色体倍性分析
③体细胞结构分析
④抗原-抗体杂交
【答案】
（1）促性腺激素 减数第二次分裂中期
（2）胰蛋白酶（胶原蛋白酶） 维持培养液的pH
（3）分割 2
（4）①④
【解析】
【分析】
据图分析，图示基因编辑猪培育过程涉及的技术手段有转基因技术、核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等，利用转基因技术将病毒外壳蛋白基因（目的基因）导入2号猪的体细胞核中，然后将2号猪的体细胞核移植到1号猪的去核卵母细胞中，再将重组细胞培养到囊胚并移植到3号猪的子宫中去，最后分娩产生了4号转基因克隆猪。
解答本题的关键是掌握转基因技术、动物细胞培养、胚胎移植等过程，能够弄清楚题图中不同的猪提供的结构和作用，明确核移植时的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期，并能够选择正确的方法检测目的基因是否表达。
【解答】
（1）据图分析可知，1号猪提供的是卵母细胞，对其注射促性腺激素可使其超数排卵，获得的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才能进行核移植。
（2）将2号猪的组织块分散成单个的成纤维细胞需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，该细胞的培养应在37℃含5%的CO2的恒温培养箱中进行，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。
（3）利用胚胎分割技术对图示早期胚胎进行分割，可以获得更多的基因编辑猪；据图分析可知，核移植的细胞核来自于2号猪，因此产出的基因编辑猪的性染色体来自于2号猪。
（4）检测病毒外壳蛋白基因（目的基因）是否导入4号猪，可以采用DNA分子杂交法检测目的基因的序列；目的基因表达的最终产物是蛋白质（病毒外壳蛋白），可以利用抗原-抗体杂交法进行检测，故选①④。
