河南省郑州市十校2021-2022学年高二下学期期中联考生物试卷
一、单选题
1．（2016高二下·河北期中）某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验．下列相关叙述正确的是（ ）
A．酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高
B．先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵
C．与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好
D．适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】解：A、醋酸菌是嗜热菌，果醋发酵所需的最适温度较高，A错误；
B、进行果酒、果醋发酵实验，要先进行隔绝空气果酒发酵，再供氧进行果醋发酵，B错误；
C、人工接种菌种品质更好，且不容易存在杂菌污染，C错误；
D、适当加大接种量，让菌体快速形成优势菌群，可以抑制杂菌生长，提高发酵速率，D正确．
故选：D．
【分析】酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵．在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵.20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性．
醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸．醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃．
2．（2022高二下·郑州期中）与酵母菌相比，醋酸菌具有的特点是（ ）
A．无线粒体，只能通过无氧呼吸获得能量
B．无核糖体，只能依靠寄主细胞合成蛋白质
C．无细胞核，只能通过出芽生殖方式繁殖后代
D．无染色体，只能在DNA水平上产生可遗传变异
【答案】D
【知识点】原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同
【解析】【解答】酵母菌为由真核细胞构成的真核生物，醋酸菌为由原核细胞构成的原核生物。醋酸菌是一种好氧细菌，无线粒体，通过有氧呼吸获得能量，A项错误；醋酸菌有核糖体，依靠自身细胞合成蛋白质，B项正确；醋酸菌无细胞核，通过二分裂方式繁殖后代，C项正确；醋酸菌无染色体，其可遗传变异的来源只有基因突变，即只能在DNA水平上产生可遗传变异，D项正确。
【分析】原核生物与真核生物的比较；
原核生物 真核生物
细胞壁 主要成分是肽聚糖 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，大多数真菌细胞壁的主要成分是几丁质
细胞膜 都含有磷脂和蛋白质
细胞器 只有核糖体 有核糖体和其他细胞器
细胞核 无核膜、核仁 有核膜、核仁
DNA的存在形式 拟核：大型环状（裸露存在） 质粒：小型环状（裸露存在） 细胞核：与蛋白质等形成染色体（质） 细胞质：裸露存在
分裂方式 二分裂 无丝分裂、有丝分裂、减数分裂
变异类型 基因突变 基因突变、基因重组、染色体变异
3．（2022高二下·郑州期中）下列关于毛霉的叙述，错误的是( )
A．毛霉是一类有细胞壁但没有成形细胞核的生物
B．毛霉属于异养生物，在生态系统中属于分解者
C．毛霉的菌丝有直立菌丝和匍匐菌丝
D．豆腐上长出的白毛主要是毛霉的直立菌丝
【答案】A
【知识点】腐乳的制作
【解析】【解答】毛霉属于霉菌，霉菌是真核生物，具有成形的细胞核，也具有以几丁质为主要成分的细胞壁。其代谢类型为异养需氧型，在生态系统中属于分解者。其菌丝有直立菌丝和匍匐菌丝，豆腐上长出的白毛主要是毛霉的直立菌丝，A错误，BCD正确。
故答案为：A。
【分析】毛霉营腐生生活，代谢类型为异养需氧型，在生态系统中属于分解者；毛霉进行无性生殖，因此其变异来源只有基因突变和染色体变异两种；毛霉的生殖方式为孢子生殖。
4．（2022高二下·郑州期中）卤汤中酒的含量一般控制在12%左右，下列不是其作用的是（ ）
A．抑制微生物的生长 B．使腐乳具有独特香味
C．使腐乳中蛋白质变性 D．与有机酸结合形成酯
【答案】C
【知识点】腐乳的制作
【解析】【解答】卤汤中酒可以抑制微生物的生长，防止杂菌污染，由于酒中特别是黄酒中含酵母菌，经发酵可产生醇，并与有机酸结合形成酯，产生特殊的香味，C符合题意，ABD不符合题意。
故答案为：C。
【分析】腐乳发酵：
（1）让豆腐上长出微生物（如酵母、曲霉、毛霉等）；
（2）加盐腌制，析出豆腐中的水分，抑制微生物的生长；
（3）加卤汤装瓶（卤汤成分：①酒：含量12%左右，抑制微生物生长，使腐乳具有独特的味道。②香辛料：调味、防腐杀菌。）
（4）密封腌制：用酒精灯对瓶口灭菌后密封。
5．（2022高二下·郑州期中）腐乳制作过程中，影响腐乳风味和质量的是（ ）
①盐的用量 ②酒的种类和用量 ③发酵温度
④发酵时间 ⑤豆腐含水量 ⑥盛豆腐的容器大小
A．①④⑥ B．①③⑤⑥ C．①②③④⑤ D．①②③⑥
【答案】C
【知识点】腐乳的制作
【解析】【解答】①用盐腌制时，注意盐的用量，盐的浓度过低，不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败变质，盐的浓度过高，会影响腐乳的口味，①正确；
②酒能抑制微生物的繁殖，同时使得腐乳具有独特的香味，酒的种类和用量影响腐乳的风味，②正确；
③毛霉生长的最适温度一般是15-18℃，因此发酵温度会影响腐乳风味和质量，③正确；
④发酵时间决定了腐乳是否成熟，也能影响腐乳的风味和质量，④正确；
⑤豆腐若含水量过多，会由于湿度过大而抑制毛霉的生长，从而影响腐乳风味和质量，⑤正确；
⑥盛豆腐的容器大小与腐乳风味无关，⑥错误。
C正确。
【分析】腐乳发酵：
（1）让豆腐上长出微生物（如酵母、曲霉、毛霉等）；
（2）加盐腌制，析出豆腐中的水分，抑制微生物的生长；
（3）加卤汤装瓶（卤汤成分：①酒：含量12%左右，抑制微生物生长，使腐乳具有独特的味道。②香辛料：调味、防腐杀菌。）
（4）密封腌制：用酒精灯对瓶口灭菌后密封。
6．（2017高二下·黑龙江期中）腐乳味道鲜美,易于消化、吸收,是因为其含有的主要营养成分有 （ ）
A．无机盐、水、维生素
B．NaCl、水、蛋白质
C．小分子的肽、氨基酸、甘油和脂肪酸
D．蛋白质、脂肪、NaCl、水
【答案】C
【知识点】腐乳的制作
【解析】【解答】毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些物质易于消化、吸收，因此腐乳中含有的主要营养成分有小分子的肽、氨基酸、甘油和脂肪酸，故C符合题意。
故答案为：C
【分析】腐乳的制作原理是利用毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；产生的脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸；这些小分子有机物既利于消化吸收，有具有特殊的鲜美味道。
7．（2022高二下·郑州期中）测定亚硝酸盐含量的操作步骤正确的是（ ）
A．制备标准显色液——配制溶液——制备样品处理液——比色
B．制备标准显色液——制备样品处理液——配制溶液——比色
C．配制溶液——制备样品处理液——制备标准显色液——比色
D．配制溶液——制备标准显色液——制备样品处理液——比色
【答案】D
【知识点】亚硝酸盐含量的测定
【解析】【解答】泡菜中亚硝酸盐含量的测定原理是在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐形成玫瑰红色染料，因此亚硝酸盐含量的测定的实验步骤是：配制溶液→制备标准显色液→制备泡菜样品处理液→比色，因此A、B、C三项均错误，D项正确。
故答案为：D。
【分析】亚硝酸盐含量的测定：
（1）亚硝酸盐的产生：由硝酸盐还原菌促进硝酸盐还原形成。
（2）亚硝酸盐的危害：在特定情况下可转变成致癌物亚硝胺。
（3）亚硝酸盐含量的测定：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐先与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，然后与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色产物，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
（4）泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量是先增加后减少。
8．（2022高二下·郑州期中）测定泡菜中亚硝酸盐的含量，制备样品处理液时，要先在泡菜汁中加提取剂，则之后的正确操作过程是（ ）
A．加入氢氧化铝乳液，再加入氢氧化钠溶液，然后过滤
B．加入氢氧化钠溶液，再加入氢氧化铝乳液，然后过滤
C．加入氢氧化钠溶液，过滤后再加入氢氧化铝乳液，再过滤
D．加入氢氧化铝乳液，过滤后再加入氢氧化钠溶液，再过滤
【答案】C
【知识点】亚硝酸盐含量的测定
【解析】【解答】制备样品处理液时，要先在泡菜汁中加提取剂，接着加氢氧化钠过滤，过滤后再加氢氧化铝乳液再过滤。
故答案为：C。
【分析】亚硝酸盐含量的测定：
（1）亚硝酸盐的产生：由硝酸盐还原菌促进硝酸盐还原形成。
（2）亚硝酸盐的危害：在特定情况下可转变成致癌物亚硝胺。
（3）亚硝酸盐含量的测定：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐先与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，然后与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色产物，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
9．获得纯净培养物的关键是（ ）
A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B．接种纯种细菌
C．适宜环境条件下培养
D．防止外来杂菌的入侵
【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【分析】在微生物的培养过程中，除了要将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌外，最关键的是要无菌操作，以防止外来杂菌的入侵。
【点评】本题难度一般，要求学生识记微生物培养的相关知识，考查学生对获得纯净培养物方式的理解。
10．（2022高二下·郑州期中）为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是（ ）
A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上
C．临时保藏菌种容易被污染或产生变异
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温－4℃保藏的方法
【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】AB、对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上培养，然后将试管放入4℃的冰箱中保藏，AB正确；
C、临时保藏菌种容易被污染或产生变异，C正确；
D、对于需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存，称为甘油管藏法，D错误。
故答案为：D。
【分析】关于菌种的保存有以下几种方式：
（1）对于频繁使用的菌种：可以采用临时保藏的方法。临时保藏方法：将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中保藏。以后每3-6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移新鲜的培养基上。这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。
（2）对于需要长期保存的菌种：可以采用甘油管藏的方法，在甘油瓶中装入1 mL 甘油后灭菌将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在﹣20℃的冷冻箱中保存（或将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后放在﹣20℃的冷冻箱中保存）。但是，应该先将甘油瓶及甘油灭菌后与菌液混合，而不可混合后经高压蒸汽灭菌。斜面培养基能增大接种面积，创造合适的条件微生物就能生长，可用作菌种保存。
11．（2020高三上·上高月考）关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中错误的是（ ）
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C．待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板
D．待平板冷却凝固约5~10 min后将平板倒过来放置
【答案】A
【知识点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误；将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，C正确；待平板冷却凝固约5 l0min后将平板倒过来放置，,以防止水蒸气凝集滴入培养基，D正确。
【分析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏融化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却至50℃时，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于融化状态时进行倒平板。平板冷却凝固约5~10min后还需要倒置。
12．（2022高二下·郑州期中）下列关于消毒和灭菌的说法，不正确的是（ ）
A．灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
B．消毒和灭菌实质上是相同的
C．接种环用灼烧的方法灭菌
D．常用消毒方法有煮沸法、紫外线法、化学药品法
【答案】B
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】A、灭菌是指采用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；
B、消毒是指杀死物体表面或内部一部分微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是要将所有的微生物全部杀灭，以达到无菌的目的，灭菌一定可以达到消毒的目的，但消毒不一定能达到灭菌的效果，B错误；
C、接种环常用灼烧法灭菌，即通过酒精灯火焰灼烧的方式去掉接种环上的微生物，C正确；
D、煮沸法、紫外线法、化学药品法都属于常用的消毒方法，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、灭菌的方法：（1）灼烧灭菌：应用于接种工具及试管口、瓶口等的灭菌。 （2）干热灭菌：应用于玻璃器皿、金属用具的灭菌。 （3）湿热灭菌：应用于培养基等的灭菌。
2、消毒的方法：（1）煮沸消毒法：杀死微生物的营养组织和一部分芽孢。（2）巴氏消毒法：不耐高温的液体。（3）化学药物消毒法：酒精擦拭双手、氯气消毒水源等。（4）紫外线消毒法：接种台、接种箱和超净工作台的消毒。
13．（2021高二下·珠海月考）用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 ( )
①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接种
③都需要在火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌
A．①② B．③④ C．①③ D．②④
【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【分析】平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。
14．（2022高二下·郑州期中）将接种后的培养基和一个未接种的培养皿都放入37℃恒温箱的目的是 （ ）
A．对比观察培养基有没有被微生物利用
B．对比分析培养基上是否生有杂菌
C．没必要放入未接种的培养基
D．为了下次接种时再使用
【答案】B
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】将接种后的培养基和未接种的培养基同时放入37℃恒温箱，目的是作为空白对照，判断培养基是否被污染．一段时间后若未接种的培养基有菌落说明培养基被污染，则培养基不能使用，若无菌落说明培养基没有被污染，可以使用，故答案为：B。
【分析】通过设计对照实验，目的是为了检测培养基制备是否成功，即是否污染了杂菌。
15．（2022高二下·郑州期中）在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（ ）
①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦37℃恒温箱中培养 ⑧28～30℃温度下培养
A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦
【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】①自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感，①错误；
②自生固氮微生物属于细菌，对抗生素敏感，培养基不能添加抗生素，②正确；
③自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，③错误；
④自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，④正确；
⑤自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑤正确；
⑥自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑥错误；
⑦自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑦错误；
⑧自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑧正确。
故答案为：C。
【分析】选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。
16．（2020高二上·云南期中）某同学对 101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别是 2760、295 和 16，则菌落总数为（所用稀释液体积为 0.1 mL）（ ）
A．2.76×104个/mL B．2.95×105 个/mL
C．4.6×104个/mL D．3.775×104个/mL
【答案】B
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】某同学在101、102、103倍稀释的平均菌落数为2760、295和46，应选择在菌落数在30～300的平板进行计数，故数值为295，稀释倍数为102，则每毫升菌落总数为295×102÷0.1=2.95×105个/mL。
故答案为：B。
【分析】1、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。2、计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
17．（2022高二下·郑州期中）某种物质X（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解X。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和X，乙的组分为无机盐、水、X和Y。下列相关叙述中错误的是（ ）
A．甲、乙培养基均属于选择培养基，乙培养基组分中的Y物质是琼脂
B．若要筛选高效降解X的细菌菌株，甲、乙培养基中X是唯一的碳源
C．a、b、c培养瓶中的X溶液要有一定的浓度梯度
D．筛选过程中，若培养基中的X浓度过高，某菌株对X的降解量可能下降
【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养；培养基对微生物的选择作用
【解析】【解答】A、甲、乙培养基均只含有机物X，属于选择培养基，乙培养基组分中除了X外，还加入了Y物质琼脂，从而获得固体培养基，A正确；
B、若要筛选高效降解X的细菌菌株，需要甲、乙培养基中的X是唯一提供碳源的有机物，B正确；
C、步骤⑤中自变量是挑取的不同的菌落，各培养瓶中的X溶液的浓度应该是一致的，C错误；
D、步骤⑤的筛选过程中，若培养基中的X浓度过高，则会导致菌体失水影响菌体的正常生长，因此某菌株对X的降解量可能下降，D正确。
故答案为：C。
【分析】 分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以 S 为唯一碳源和氮源的选择培养基上，其中 Y 为琼脂，④为挑取单菌落接种，⑤用以 X 为唯一碳源和氮源的选择培养基进一步筛选。
18．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
【答案】D
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】首先要进行培养基的制备、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，A正确；然后对土壤稀释液进行涂布于各组平板上，B正确；将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，C正确；确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数，D错误。
【分析】本题主要考查微生物的分离和计数的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解把握知识间内在联系的能力。
19．（2022高二下·郑州期中）用加酶洗衣粉洗涤衣物时，下列说法正确的是（ ）
A．可用加碱性蛋白酶的洗衣粉洗涤毛料衣服
B．一般先用热水浸开，然后调至适宜温度
C．水温太低使洗衣粉中的酶丧失活性后不能再恢复
D．使用添加了碱性蛋白酶的洗衣粉洗衣服后应立即冲洗双手
【答案】D
【知识点】加酶洗衣粉的洗涤效果及其影响因素
【解析】【解答】A、毛料的主要成分是蛋白质，加酶洗衣粉中含有蛋白酶，会破坏毛料衣服，A错误；
B、一般用温水浸泡，水温太高会使酶失活，B错误；
C、水温太低会抑制酶的活性，但不会使酶失活，活性可以恢复，C错误；
D、用含碱性蛋白酶的洗衣粉洗涤衣物后，需要彻底清洗双手是因为皮肤细胞中含蛋白质，若不彻底洗手，就会使手部皮肤受到损伤，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、加酶洗衣粉中酶的种类：
种类 洗涤原理 洗涤的物质种类
蛋白酶 蛋白质→小分子肽或氨基酸 血渍、奶渍等
脂肪酶 脂肪→甘油和脂肪酸 食品的油渍、人体皮脂、口红等
淀粉酶 淀粉→麦芽糖、葡萄糖 来自面条等的污垢
纤维素酶 使纤维的结构变得蓬松 棉纺品的表面浮毛
2、在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高。温度和pH偏高和偏低，酶活性都会明显降低。过酸、过碱或温度过高，会使酶的空间结构遭到破坏，使酶永久失活。
20．（2022高二下·郑州期中）下列有关酶的叙述，错误的是（ ）
A．果胶酶是一类酶的总称，探究果胶酶的最适温度时，需将底物和酶分别在同等温度下处理后再混合
B．低温和高温对酶活性的影响是相同的，而过酸过碱对酶活性的影响是不同的
C．探究果胶酶的最适温度和最适pH实验中应严格控制酶作用时间，因此待酶作用完后立即煮沸失活
D．解旋酶作用于碱基对间的氢键
【答案】B
【知识点】酶活力测定的一般原理和方法；果胶酶的活性测定
【解析】【解答】将底物和酶分别在设定的同等温度下处理后再混合，才能保证酶在特定温度下反应。A正确；
B、低温使酶活性降低但不会失活，温度过高会使酶失去活性，过酸过碱都会使酶失活，B错误；
C、因酶具有高效性，探究果胶酶的最适温度和最适pH实验中应严格控制酶作用时间，待酶作用完后立即煮沸失活，C正确；
D、解旋酶作用于DNA双螺旋结构之间的氢键，使双螺旋解开成两条单链，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、果胶酶：（1）成分：是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。 （2）作用：果胶可溶性半乳糖醛酸。 （3）应用：降低果汁的黏度，有助于压榨，还能起到澄清作用。
2、在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高。温度和pH偏高和偏低，酶活性都会明显降低。过酸、过碱或温度过高，会使酶的空间结构遭到破坏，使酶永久失活。底物浓度和酶浓度也会影响酶促反应的速率。
21．（2019高二下·吉林月考）在探究果胶酶最适用量的实验中，下列说法不正确的是( )
A．实验时可配制不同浓度的果胶酶溶液
B．当底物浓度一定时，酶用量越大，滤出的果汁越多
C．本实验应控制在适宜温度和pH下
D．反应溶液的pH必须相同
【答案】B
【知识点】果胶酶的活性测定；固定化酶及其应用
【解析】【解答】解：本实验的自变量是不同浓度的果胶酶溶液，故需要配置不同浓度的果胶酶溶液，A正确；当底物浓度一定时，当酶的量增加到某个值后，再增加酶量，果汁体积不再改变，B错误；本实验温度和pH均为无关变量，故应控制在适宜温度和pH下，C正确；该实验中，反应溶液的pH是无关变量，必须相同，D正确。故答案为：B。
【分析】果胶酶不特指一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。
22．（2022高二下·郑州期中）下面制备固定化酵母细胞的正确步骤是（ ）
①配制 CaCl2 溶液 ②配制海藻酸钠溶液 ③海藻酸钠溶液与酵母细胞混合
④酵母细胞活化 ⑤固定化酵母细胞
A．①②③④⑤ B．④①③②⑤ C．④⑤②①③ D．④①②③⑤
【答案】D
【知识点】固定化细胞及其应用
【解析】【解答】制备固定化酵母细胞的步骤为：酵母细胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。
故答案为：D。
【分析】固定化酵母细胞：
（1）酵母细胞的活化：1g干酵母+10mL蒸馏水搅拌均匀，放置1h左右，使其活化。
（2）配置0.05mol/L的CaCl2溶液：无水CaCl20.83g+150mL蒸馏水充分溶解，待用。
（3）配置海藻酸钠溶液：0.7g的海藻酸钠+10mL水，小火或间断加热，边加热边搅拌，直至完全溶化，加蒸馏水定容至10mL。
（4）海藻酸钠溶液与酵母细胞混合：将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入以活化的酵母细胞，充分搅拌使其混合均匀，在转移至注射器中。
（5）固定化酵母细胞：以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到配置好的CaCl2溶液中，形成凝胶珠，使凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡约30min。
（6）冲洗：凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次，除去表面的CaCl2溶液。
（7）发酵：将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移至200mL的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25℃下发酵24h。
23．（2022高二下·郑州期中）下列有关利用固定化酶技术生产高果糖浆的说法不正确的是（ ）
A．葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成的是果糖
B．从固定化酶反应柱下端流出的不只有果糖
C．高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管疾病，对人类的健康更有益
D．酶溶解于葡萄糖溶液后，可从糖浆中回收
【答案】D
【知识点】固定化酶及其应用
【解析】【解答】A、生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出，A正确；
B、用固定化酶生产高果糖浆过程中，反应柱下端的筛板不允许固定化酶颗粒通过，但是不影响反应物和产物的通过，由于葡萄糖异构酶催化效率并非100%，因此下端流出的既有果糖，又有没反应完的葡萄糖，B正确；
C、高果糖浆是指果糖含量为42％左右的糖浆，作为蔗糖的替代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病，对人类的健康更有益，C正确；
D、反应柱下端的筛板不允许固定化酶颗粒通过，但是不影响反应物和产物的通过，因此下端流出的既有果糖，又有没反应完的葡萄糖，但没有固定化酶颗粒，即固定化酶颗粒不进入糖浆中，故可反复利用，大大降低了生产成本，D错误。
故答案为：D。
【分析】 生产高果糖浆时所用的酶应为葡萄糖异构酶，将这种酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入。使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化萄萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本。
24．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的分离过程可表示为下列哪一项（ ）
A． B． C． D．
【答案】B
【知识点】蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】解：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢．选项中的B图符合．
故选：B．
【分析】凝胶色谱法（分配色谱法）：①原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢．②凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖．③分离过程：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子
洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动．④作用：分离蛋白质，测定生物大分子分子量，蛋白质的脱盐等．
25．（2022高二下·郑州期中）在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡存在的原因是（ ）
A．气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果
B．气泡阻碍蛋白质的运动
C．气泡能与蛋白质发生化学反应
D．气泡会在装填凝胶的时候使凝胶不紧密
【答案】A
【知识点】蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】装填凝胶色谱柱时，若产生气泡，则其会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，从而影响分离效果，A正确，B、C、D均错误。
故答案为：A。
【分析】凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。
26．对凝胶电泳的相关认识错误的是（ ）
A．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只取决于分子的大小
B．蛋白质在SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小
C．SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离
D．凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响
【答案】A
【知识点】蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】解：A、蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只决于分子的大小和所带电荷等，A错误；
B、由于加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质﹣SDS复合物”，蛋白质在SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小，B正确；
C、SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离，C正确；
D、凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小．D正确．
故选：A．
【分析】凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同．（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等．（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质﹣SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小．
27．提取的植物芳香油具有很强的挥发性，其组成比较复杂，主要包括( )
A．蛋白质和糖 B．核酸和蛋白质
C．脂肪和蛋白质 D．萜类化合物及其衍生物
【答案】D
【知识点】芳香油的提取
【解析】【解答】植物芳香油主要成分是萜类化合物及其衍生物，所以D正确。
【分析】本题考查植物芳香油的内容，意在考查考生对所学知识的理解并把握知识间的内在联系。
28．（2022高二下·郑州期中）提取玫瑰精油的过程中，油水混合物中要加入氯化钠，下列不属于其目的的是（ ）
A．增大玫瑰精油的溶解度 B．盐析，使玫瑰精油和水分开
C．利于玫瑰精油的纯化 D．利于玫瑰精油的回收
【答案】A
【知识点】芳香油的提取
【解析】【解答】A、加入氯化钠的目的是促进油水分层，便于除去水分获得玫瑰油，不是为了增大玫瑰油的溶解度，A正确；
B、油水混合物中加入氯化钠，通过盐析使玫瑰油和水分开，B错误；
C、加入氯化钠的目的是促进油水分层，便于除去水分获得纯度较高的玫瑰油，有利于玫瑰油的纯化，C错误；
D、加入氯化钠的目的是促进油水分层，便于除去水分获得纯度较高的玫瑰油，有利于玫瑰液的回收，D错误。
故答案为：A。
【分析】玫瑰精油的提取：
（1）方法：常用水蒸气蒸馏法。
（2）原理：利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。
（3）步骤：鲜玫瑰花+清水水蒸气蒸馏油水混合物分离油层除水玫瑰油。
29．（2022高二下·郑州期中）制取橘皮精油的过程中，需先后进行a、b两次过滤，则橘皮精油为（ ）
A．经过a过滤后的滤液
B．经过a过滤后的滤液和b过滤后的滤液
C．经过b过滤后的滤液
D．经过a过滤后静置处理吸出的上清液和b过滤后的滤液
【答案】D
【知识点】芳香油的提取
【解析】【解答】制取橘皮精油时，为了提高出油率，首先将橘皮去水干燥，然后用石灰水浸泡，经漂洗、压榨得到压榨液后，用布袋过滤除去固体物和残渣（第一次过滤），对滤液进行离心进一步除去较小的残留固体物，再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮精油分离出来，然后在5℃～10℃下静置5～7天，使果蜡等杂质沉淀，用吸管吸出上层澄清橘皮油，其余部分通过滤纸过滤（第二次过滤），滤液与吸出的上层橘皮油合并后成为最终的橘皮精油，即橘皮精油是经过第一次a过滤后静置处理的上清液和第二次b过滤后的滤液，D正确，ABC错误。
故答案为：D。
【分析】橘皮精油的提取：
（1）方法：压榨法。
（2）原理：通过机械加压，提取出果皮中的芳香油。
（3）步骤：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油。
30．（2022高二下·郑州期中）关于蒸馏装置进水口和出水口的说法正确的是（ ）。
A．水充满冷凝管后，要封闭进水口和出水口
B．出水口的位置高于进水口
C．进水口的水温高于出水口
D．玫瑰油从进水口进入，从出水口排出
【答案】B
【知识点】芳香油的提取
【解析】【解答】冷水源源不断地从进水口进入，吸收了蒸馏气的热量后，从出水口源源不断地排出，所以，出水口的水温高于进水口，AC错误；出水口的位置高于进水口，B正确；冷凝管中的水通道和蒸馏气通道并不相通，玫瑰精油不能从进水口进入，D错误。
【分析】蒸馏装置图：
二、综合题
31．（2022高二下·郑州期中）高果糖家具有甜度高、热量低、风味好，有民疗保健作用等优点，其生产工艺流程如下，请回答下列问题：
（1）筛选白色链荐菌时可以观察菌落特征，菌落特征包括菌落的形状、大小、 等方面，筛选步骤需要使用 （填“固体”或“液体”）培养基；得到菌种后，为了增加白色链霉菌的数量，应转移到 （填“固体”或“液体”）培养基中培养。
（2）与固定化酶技术相比，固定化细胞技术的优势是 ，固定化细胞常采用图中的是 （填序号）方式。
（3）从反应柱下端收集到的某批次糖液变质，检查发现原因是酵母菌污染。生产设备中的残留糖液为酵母菌的入侵和迅速繁殖提供了 这一主要营养物质。除了酵母菌，芽孢杆菌也是主要的污染微生物，必须在固定化细胞灌柱前对反应柱做的处理是
【答案】（1）隆起程度和颜色；固体；液体
（2）成本更低，操作更容易；③
（3）碳源；彻底清洗并用蒸汽灭菌
【知识点】微生物的分离和培养；固定化酶及其应用；固定化细胞及其应用
【解析】【解答】(1)一般来说，在一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征。这些特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面；不同菌体的菌落特征不同，菌落只能在固体培养基上形成，因此筛选白色链霉菌的培养基为含琼脂的固体培养基；为了增加白色链霉菌数量，需要用液体培养基培养，因为液体培养基有利于菌体与培养基中营养成分的充分接触，可加速菌种繁殖。
(2)固定化酶的过程中需要先提取制备酶产品再固定，而固定化细胞则是直接将细胞进行固定，所以固定化细胞的成本更低，操作更容易；由于细胞个大，难以被吸附或结合，所以常用包埋法固定细胞（图中③）。图中①为交联法，②为吸附法。
(3)糖液中的糖可为异养的酵母菌提供碳源和能源；为了保证发酵过程中不被微生物污染，必须在固定化细胞灌柱前对反应柱彻底清洗并用蒸汽灭菌。
【分析】1、固定化酶与固定化细胞的比较：
固定化酶 固定化细胞
固定酶的种类 一种 一系列
适用方法 化学结合法、物理吸附法 包埋法
特点 优点 酶既可与反应物结合，又可与产物分离，固定在载体上的酶可反复利用 成本低，操作容易
缺点 一种酶只能催化一种或一类化学反应 可能导致反应效率下降
2、菌落的特征包括：菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面；筛选步骤需要使用固体培养基；扩增目的菌应该采用液体培养基，因为液体培养基有利于菌体与培养基中营养成分的充分接触，加速菌种繁殖；
32．（2022高二下·郑州期中）曲门螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：
请回答：
（1）在配制培养基时，要加入尿素和盼红指示剂，这是因为Hp含有 ，它能以尿素作为氮源：若有Hp，则菌落周围会出现 色环带。
（2）下列对培养基进行灭菌的最适的方法是____灭菌。
A．高压蒸汽 B．紫外灯照射
C．70%酒精浸泡 D．过滤
（3）步骤X表示 。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液 到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得 菌落。
（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在 中。若不倒置培养，将导致 。
（5）临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的尿素分解为NH3和
【答案】（1）脲酶；红
（2）A
（3）接种；涂布；单
（4）恒温培养箱；无法形成单菌落
（5）14CO2
【知识点】微生物的分离和培养；培养基概述及其分类；灭菌技术
【解析】【解答】(1)幽门螺杆菌含有脲酶，能分解尿素为菌体提供氮源，因此在配制培养基时要加入尿素；加入酚红指示剂的目的是检验是否有Hp存在，若有Hp存在会分解尿素，培养基pH会升高，酚红指示剂将变红，则菌落周围会出现红色环带。
(2)培养基的灭菌方法通常是高压蒸汽灭菌法，故答案为：A。
(3)微生物的分离和培养步骤是：配制培养基→灭菌、倒平板→接种→培养，故步骤X表示接种；接种时先将菌液稀释，目的是获得单一菌落，然后再涂布到培养基平面上。
(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中；倒置培养的目的主要是防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，若不倒置培养，将导致无法形成单菌落。
(5)如果人体感染了Hp，Hp能将尿素分解为NH3和14CO2，故而用14C标记尿素中的C，可通过呼吸产物来判断是否感染Hp。
【分析】1、培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。培养基按物理性质可分为固体培养基和液体培养基，液体培养基中加入凝固剂可以制成固体培养基；固体培养基一般用于微生物的鉴别、分离和计数，液态培养基常用于扩大化生产，观察细菌运动。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分为选择培养基、鉴别培养基。 2、消毒和灭菌
消毒 灭菌
概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
3、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
33．（2022高二下·郑州期中）某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下：
请回答下列有关问题：
（1）样品处理中红细胞的洗涤要用 反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是 。
（2）血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是 ，若要尽快达到理想的透析效果，可以 （写出一种方法）。
（3）电泳利用了待分离样品中各种分子的 等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。
（4）一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有 种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是 。
【答案】（1）生理盐水；渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破）
（2）除去小分子杂质；增加缓冲液的量或及时更换缓冲液
（3）带电性质以及分子大小、形状
（4）2；携带者具有（控制血红蛋白的）一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质
【知识点】蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】（1）样洗涤红细胞可以用生理盐水。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，其原理是渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破）。
（2）透析的目的是除去小分子杂质；若要尽快达到理想的透析效果，可以增加缓冲液的量或及时更换缓冲液。
（3）电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。
（4）由图可知携带者有2种血红蛋白，原因是携带者具有（控制血红蛋白的）一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质。
【分析】血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
三、实验题
34．（2022高二下·郑州期中）番茄红素是一种类胡萝卜素，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，化学性质稳定。番茄红素可以从番茄中提取，具有抗氧化、抗癌与抑癌的功效。某科研小组按如下步骤进行了相关实验：
①提取番茄红素；②将等量癌细胞分别接种在甲、乙两组培养瓶内，适宜条件下培养24h后除去上清液；③向两组培养瓶中分别加入适量番茄红素培养液和等量生理盐水，适宜条件下继续培养；
④2h后统计并计算两组的癌细胞增殖抑制率。回答下列问题：
（1）提取番茄红素时不宜使用水蒸气蒸馏法，原因是 。根据番茄红素易溶于有机溶剂的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，为了提高萃取效果，应对番茄进行 后用有机溶剂进行浸泡提取。根据番茄红素化学性质，在乙醇和石油醚两种溶剂中，应选择 作为番茄红素的萃取剂。
（2）根据步骤②～④分析，科研小组的探究目的是 。若要进一步探究番茄红素的浓度与细胞增殖抑制率的关系，请写出简要实验思路： 。
（3）新技术新工艺——超临界CO2萃取法：利用超临界状态下的CO2流体对天然有机物具有特殊溶解作用而进行，具有无需高温加热、无残留等特点。其过程如下：
番茄粉碎，干燥→通入超临界CO2进行萃取→粗产品→无水乙醇→真空抽滤→高纯度番茄红素据题干分析可知，超临界CO2替代传统有机溶剂的突出优点是能避免 （填一点即可）。
（4）对提取的粗品进行鉴定时，可以采用的方法是 。现有两份不同的番茄红素萃取样品鉴定结果（如图所示）。由图可知， （填“B”或“C”）萃取样品纯度更高。
【答案】（1）番茄红素不易挥发；粉碎、干燥；石油醚
（2）探究番茄红素对癌细胞的增殖是否有抑制作用；用不同浓度的番茄红素分别处理癌细胞，统计各组的癌细胞增殖抑制率。
（3）有机溶剂残留/有机溶剂易燃易爆/产品纯度低/高温下有效成分分解/溶剂污染环境
（4）纸层析法；C
【知识点】胡萝卜素的提取
【解析】【解答】（1）提取番茄红素时不宜使用水蒸气蒸馏法，原因是番茄红素不易挥发。根据番茄红素易溶于有机溶剂的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，为了提高萃取效果，应对番茄进行粉碎、干燥后用有机溶剂进行浸泡提取。根据番茄红素化学性质，在乙醇和石油醚两种溶剂中，乙醇与水互溶，应选择石油醚作为番茄红素的萃取剂。
（2）由题意可知，科研小组的探究目的是探究番茄红素对癌细胞的增殖是否有抑制作用。可以设计不同浓度的番茄红素分别处理癌细胞，统计各组的癌细胞增殖抑制率，探究番茄红素的最适浓度。
（3）由题意可知，超临界CO2替代传统有机溶剂的突出优点是能避免高温下有效成分分解以及有机溶剂易燃易爆等缺点。
（4）对提取的粗品进行鉴定时，可以采用的方法是纸层析。由图可知，C萃取样品与标样层析结果相同，纯度更高。
【分析】胡萝卜素的提取∶(1)胡萝卜素的性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。(2)胡萝卜素的提取来源∶提取天然胡萝卜素的方法主要有：一是从植物中提取；二是从大面积养殖的岩藻中荻得；三是利用微生物的发酵生产。（3）萃取剂∶最适宜作胡萝卜素萃取剂的是石油醚。（4）实验流程∶胡萝卜一粉碎→干燥→萃取(石油醚）→过滤→浓缩一胡萝卜素→鉴定（纸层析法)。（5）胡萝卜素常用来治疗因缺乏维生素A引起的疾病；还是常用的食品色素；还具有使癌变细胞恢复为正常细胞的作用。
1 / 1河南省郑州市十校2021-2022学年高二下学期期中联考生物试卷
一、单选题
1．（2016高二下·河北期中）某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验．下列相关叙述正确的是（ ）
A．酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高
B．先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵
C．与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好
D．适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
2．（2022高二下·郑州期中）与酵母菌相比，醋酸菌具有的特点是（ ）
A．无线粒体，只能通过无氧呼吸获得能量
B．无核糖体，只能依靠寄主细胞合成蛋白质
C．无细胞核，只能通过出芽生殖方式繁殖后代
D．无染色体，只能在DNA水平上产生可遗传变异
3．（2022高二下·郑州期中）下列关于毛霉的叙述，错误的是( )
A．毛霉是一类有细胞壁但没有成形细胞核的生物
B．毛霉属于异养生物，在生态系统中属于分解者
C．毛霉的菌丝有直立菌丝和匍匐菌丝
D．豆腐上长出的白毛主要是毛霉的直立菌丝
4．（2022高二下·郑州期中）卤汤中酒的含量一般控制在12%左右，下列不是其作用的是（ ）
A．抑制微生物的生长 B．使腐乳具有独特香味
C．使腐乳中蛋白质变性 D．与有机酸结合形成酯
5．（2022高二下·郑州期中）腐乳制作过程中，影响腐乳风味和质量的是（ ）
①盐的用量 ②酒的种类和用量 ③发酵温度
④发酵时间 ⑤豆腐含水量 ⑥盛豆腐的容器大小
A．①④⑥ B．①③⑤⑥ C．①②③④⑤ D．①②③⑥
6．（2017高二下·黑龙江期中）腐乳味道鲜美,易于消化、吸收,是因为其含有的主要营养成分有 （ ）
A．无机盐、水、维生素
B．NaCl、水、蛋白质
C．小分子的肽、氨基酸、甘油和脂肪酸
D．蛋白质、脂肪、NaCl、水
7．（2022高二下·郑州期中）测定亚硝酸盐含量的操作步骤正确的是（ ）
A．制备标准显色液——配制溶液——制备样品处理液——比色
B．制备标准显色液——制备样品处理液——配制溶液——比色
C．配制溶液——制备样品处理液——制备标准显色液——比色
D．配制溶液——制备标准显色液——制备样品处理液——比色
8．（2022高二下·郑州期中）测定泡菜中亚硝酸盐的含量，制备样品处理液时，要先在泡菜汁中加提取剂，则之后的正确操作过程是（ ）
A．加入氢氧化铝乳液，再加入氢氧化钠溶液，然后过滤
B．加入氢氧化钠溶液，再加入氢氧化铝乳液，然后过滤
C．加入氢氧化钠溶液，过滤后再加入氢氧化铝乳液，再过滤
D．加入氢氧化铝乳液，过滤后再加入氢氧化钠溶液，再过滤
9．获得纯净培养物的关键是（ ）
A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B．接种纯种细菌
C．适宜环境条件下培养
D．防止外来杂菌的入侵
10．（2022高二下·郑州期中）为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是（ ）
A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上
C．临时保藏菌种容易被污染或产生变异
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温－4℃保藏的方法
11．（2020高三上·上高月考）关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中错误的是（ ）
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C．待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板
D．待平板冷却凝固约5~10 min后将平板倒过来放置
12．（2022高二下·郑州期中）下列关于消毒和灭菌的说法，不正确的是（ ）
A．灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
B．消毒和灭菌实质上是相同的
C．接种环用灼烧的方法灭菌
D．常用消毒方法有煮沸法、紫外线法、化学药品法
13．（2021高二下·珠海月考）用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 ( )
①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接种
③都需要在火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌
A．①② B．③④ C．①③ D．②④
14．（2022高二下·郑州期中）将接种后的培养基和一个未接种的培养皿都放入37℃恒温箱的目的是 （ ）
A．对比观察培养基有没有被微生物利用
B．对比分析培养基上是否生有杂菌
C．没必要放入未接种的培养基
D．为了下次接种时再使用
15．（2022高二下·郑州期中）在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（ ）
①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦37℃恒温箱中培养 ⑧28～30℃温度下培养
A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦
16．（2020高二上·云南期中）某同学对 101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别是 2760、295 和 16，则菌落总数为（所用稀释液体积为 0.1 mL）（ ）
A．2.76×104个/mL B．2.95×105 个/mL
C．4.6×104个/mL D．3.775×104个/mL
17．（2022高二下·郑州期中）某种物质X（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解X。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和X，乙的组分为无机盐、水、X和Y。下列相关叙述中错误的是（ ）
A．甲、乙培养基均属于选择培养基，乙培养基组分中的Y物质是琼脂
B．若要筛选高效降解X的细菌菌株，甲、乙培养基中X是唯一的碳源
C．a、b、c培养瓶中的X溶液要有一定的浓度梯度
D．筛选过程中，若培养基中的X浓度过高，某菌株对X的降解量可能下降
18．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
19．（2022高二下·郑州期中）用加酶洗衣粉洗涤衣物时，下列说法正确的是（ ）
A．可用加碱性蛋白酶的洗衣粉洗涤毛料衣服
B．一般先用热水浸开，然后调至适宜温度
C．水温太低使洗衣粉中的酶丧失活性后不能再恢复
D．使用添加了碱性蛋白酶的洗衣粉洗衣服后应立即冲洗双手
20．（2022高二下·郑州期中）下列有关酶的叙述，错误的是（ ）
A．果胶酶是一类酶的总称，探究果胶酶的最适温度时，需将底物和酶分别在同等温度下处理后再混合
B．低温和高温对酶活性的影响是相同的，而过酸过碱对酶活性的影响是不同的
C．探究果胶酶的最适温度和最适pH实验中应严格控制酶作用时间，因此待酶作用完后立即煮沸失活
D．解旋酶作用于碱基对间的氢键
21．（2019高二下·吉林月考）在探究果胶酶最适用量的实验中，下列说法不正确的是( )
A．实验时可配制不同浓度的果胶酶溶液
B．当底物浓度一定时，酶用量越大，滤出的果汁越多
C．本实验应控制在适宜温度和pH下
D．反应溶液的pH必须相同
22．（2022高二下·郑州期中）下面制备固定化酵母细胞的正确步骤是（ ）
①配制 CaCl2 溶液 ②配制海藻酸钠溶液 ③海藻酸钠溶液与酵母细胞混合
④酵母细胞活化 ⑤固定化酵母细胞
A．①②③④⑤ B．④①③②⑤ C．④⑤②①③ D．④①②③⑤
23．（2022高二下·郑州期中）下列有关利用固定化酶技术生产高果糖浆的说法不正确的是（ ）
A．葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成的是果糖
B．从固定化酶反应柱下端流出的不只有果糖
C．高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管疾病，对人类的健康更有益
D．酶溶解于葡萄糖溶液后，可从糖浆中回收
24．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的分离过程可表示为下列哪一项（ ）
A． B． C． D．
25．（2022高二下·郑州期中）在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡存在的原因是（ ）
A．气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果
B．气泡阻碍蛋白质的运动
C．气泡能与蛋白质发生化学反应
D．气泡会在装填凝胶的时候使凝胶不紧密
26．对凝胶电泳的相关认识错误的是（ ）
A．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只取决于分子的大小
B．蛋白质在SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小
C．SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离
D．凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响
27．提取的植物芳香油具有很强的挥发性，其组成比较复杂，主要包括( )
A．蛋白质和糖 B．核酸和蛋白质
C．脂肪和蛋白质 D．萜类化合物及其衍生物
28．（2022高二下·郑州期中）提取玫瑰精油的过程中，油水混合物中要加入氯化钠，下列不属于其目的的是（ ）
A．增大玫瑰精油的溶解度 B．盐析，使玫瑰精油和水分开
C．利于玫瑰精油的纯化 D．利于玫瑰精油的回收
29．（2022高二下·郑州期中）制取橘皮精油的过程中，需先后进行a、b两次过滤，则橘皮精油为（ ）
A．经过a过滤后的滤液
B．经过a过滤后的滤液和b过滤后的滤液
C．经过b过滤后的滤液
D．经过a过滤后静置处理吸出的上清液和b过滤后的滤液
30．（2022高二下·郑州期中）关于蒸馏装置进水口和出水口的说法正确的是（ ）。
A．水充满冷凝管后，要封闭进水口和出水口
B．出水口的位置高于进水口
C．进水口的水温高于出水口
D．玫瑰油从进水口进入，从出水口排出
二、综合题
31．（2022高二下·郑州期中）高果糖家具有甜度高、热量低、风味好，有民疗保健作用等优点，其生产工艺流程如下，请回答下列问题：
（1）筛选白色链荐菌时可以观察菌落特征，菌落特征包括菌落的形状、大小、 等方面，筛选步骤需要使用 （填“固体”或“液体”）培养基；得到菌种后，为了增加白色链霉菌的数量，应转移到 （填“固体”或“液体”）培养基中培养。
（2）与固定化酶技术相比，固定化细胞技术的优势是 ，固定化细胞常采用图中的是 （填序号）方式。
（3）从反应柱下端收集到的某批次糖液变质，检查发现原因是酵母菌污染。生产设备中的残留糖液为酵母菌的入侵和迅速繁殖提供了 这一主要营养物质。除了酵母菌，芽孢杆菌也是主要的污染微生物，必须在固定化细胞灌柱前对反应柱做的处理是
32．（2022高二下·郑州期中）曲门螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：
请回答：
（1）在配制培养基时，要加入尿素和盼红指示剂，这是因为Hp含有 ，它能以尿素作为氮源：若有Hp，则菌落周围会出现 色环带。
（2）下列对培养基进行灭菌的最适的方法是____灭菌。
A．高压蒸汽 B．紫外灯照射
C．70%酒精浸泡 D．过滤
（3）步骤X表示 。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液 到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得 菌落。
（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在 中。若不倒置培养，将导致 。
（5）临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的尿素分解为NH3和
33．（2022高二下·郑州期中）某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下：
请回答下列有关问题：
（1）样品处理中红细胞的洗涤要用 反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是 。
（2）血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是 ，若要尽快达到理想的透析效果，可以 （写出一种方法）。
（3）电泳利用了待分离样品中各种分子的 等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。
（4）一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有 种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是 。
三、实验题
34．（2022高二下·郑州期中）番茄红素是一种类胡萝卜素，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，化学性质稳定。番茄红素可以从番茄中提取，具有抗氧化、抗癌与抑癌的功效。某科研小组按如下步骤进行了相关实验：
①提取番茄红素；②将等量癌细胞分别接种在甲、乙两组培养瓶内，适宜条件下培养24h后除去上清液；③向两组培养瓶中分别加入适量番茄红素培养液和等量生理盐水，适宜条件下继续培养；
④2h后统计并计算两组的癌细胞增殖抑制率。回答下列问题：
（1）提取番茄红素时不宜使用水蒸气蒸馏法，原因是 。根据番茄红素易溶于有机溶剂的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，为了提高萃取效果，应对番茄进行 后用有机溶剂进行浸泡提取。根据番茄红素化学性质，在乙醇和石油醚两种溶剂中，应选择 作为番茄红素的萃取剂。
（2）根据步骤②～④分析，科研小组的探究目的是 。若要进一步探究番茄红素的浓度与细胞增殖抑制率的关系，请写出简要实验思路： 。
（3）新技术新工艺——超临界CO2萃取法：利用超临界状态下的CO2流体对天然有机物具有特殊溶解作用而进行，具有无需高温加热、无残留等特点。其过程如下：
番茄粉碎，干燥→通入超临界CO2进行萃取→粗产品→无水乙醇→真空抽滤→高纯度番茄红素据题干分析可知，超临界CO2替代传统有机溶剂的突出优点是能避免 （填一点即可）。
（4）对提取的粗品进行鉴定时，可以采用的方法是 。现有两份不同的番茄红素萃取样品鉴定结果（如图所示）。由图可知， （填“B”或“C”）萃取样品纯度更高。
答案解析部分
1．【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】解：A、醋酸菌是嗜热菌，果醋发酵所需的最适温度较高，A错误；
B、进行果酒、果醋发酵实验，要先进行隔绝空气果酒发酵，再供氧进行果醋发酵，B错误；
C、人工接种菌种品质更好，且不容易存在杂菌污染，C错误；
D、适当加大接种量，让菌体快速形成优势菌群，可以抑制杂菌生长，提高发酵速率，D正确．
故选：D．
【分析】酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵．在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵.20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性．
醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸．醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃．
2．【答案】D
【知识点】原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同
【解析】【解答】酵母菌为由真核细胞构成的真核生物，醋酸菌为由原核细胞构成的原核生物。醋酸菌是一种好氧细菌，无线粒体，通过有氧呼吸获得能量，A项错误；醋酸菌有核糖体，依靠自身细胞合成蛋白质，B项正确；醋酸菌无细胞核，通过二分裂方式繁殖后代，C项正确；醋酸菌无染色体，其可遗传变异的来源只有基因突变，即只能在DNA水平上产生可遗传变异，D项正确。
【分析】原核生物与真核生物的比较；
原核生物 真核生物
细胞壁 主要成分是肽聚糖 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，大多数真菌细胞壁的主要成分是几丁质
细胞膜 都含有磷脂和蛋白质
细胞器 只有核糖体 有核糖体和其他细胞器
细胞核 无核膜、核仁 有核膜、核仁
DNA的存在形式 拟核：大型环状（裸露存在） 质粒：小型环状（裸露存在） 细胞核：与蛋白质等形成染色体（质） 细胞质：裸露存在
分裂方式 二分裂 无丝分裂、有丝分裂、减数分裂
变异类型 基因突变 基因突变、基因重组、染色体变异
3．【答案】A
【知识点】腐乳的制作
【解析】【解答】毛霉属于霉菌，霉菌是真核生物，具有成形的细胞核，也具有以几丁质为主要成分的细胞壁。其代谢类型为异养需氧型，在生态系统中属于分解者。其菌丝有直立菌丝和匍匐菌丝，豆腐上长出的白毛主要是毛霉的直立菌丝，A错误，BCD正确。
故答案为：A。
【分析】毛霉营腐生生活，代谢类型为异养需氧型，在生态系统中属于分解者；毛霉进行无性生殖，因此其变异来源只有基因突变和染色体变异两种；毛霉的生殖方式为孢子生殖。
4．【答案】C
【知识点】腐乳的制作
【解析】【解答】卤汤中酒可以抑制微生物的生长，防止杂菌污染，由于酒中特别是黄酒中含酵母菌，经发酵可产生醇，并与有机酸结合形成酯，产生特殊的香味，C符合题意，ABD不符合题意。
故答案为：C。
【分析】腐乳发酵：
（1）让豆腐上长出微生物（如酵母、曲霉、毛霉等）；
（2）加盐腌制，析出豆腐中的水分，抑制微生物的生长；
（3）加卤汤装瓶（卤汤成分：①酒：含量12%左右，抑制微生物生长，使腐乳具有独特的味道。②香辛料：调味、防腐杀菌。）
（4）密封腌制：用酒精灯对瓶口灭菌后密封。
5．【答案】C
【知识点】腐乳的制作
【解析】【解答】①用盐腌制时，注意盐的用量，盐的浓度过低，不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败变质，盐的浓度过高，会影响腐乳的口味，①正确；
②酒能抑制微生物的繁殖，同时使得腐乳具有独特的香味，酒的种类和用量影响腐乳的风味，②正确；
③毛霉生长的最适温度一般是15-18℃，因此发酵温度会影响腐乳风味和质量，③正确；
④发酵时间决定了腐乳是否成熟，也能影响腐乳的风味和质量，④正确；
⑤豆腐若含水量过多，会由于湿度过大而抑制毛霉的生长，从而影响腐乳风味和质量，⑤正确；
⑥盛豆腐的容器大小与腐乳风味无关，⑥错误。
C正确。
【分析】腐乳发酵：
（1）让豆腐上长出微生物（如酵母、曲霉、毛霉等）；
（2）加盐腌制，析出豆腐中的水分，抑制微生物的生长；
（3）加卤汤装瓶（卤汤成分：①酒：含量12%左右，抑制微生物生长，使腐乳具有独特的味道。②香辛料：调味、防腐杀菌。）
（4）密封腌制：用酒精灯对瓶口灭菌后密封。
6．【答案】C
【知识点】腐乳的制作
【解析】【解答】毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些物质易于消化、吸收，因此腐乳中含有的主要营养成分有小分子的肽、氨基酸、甘油和脂肪酸，故C符合题意。
故答案为：C
【分析】腐乳的制作原理是利用毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；产生的脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸；这些小分子有机物既利于消化吸收，有具有特殊的鲜美味道。
7．【答案】D
【知识点】亚硝酸盐含量的测定
【解析】【解答】泡菜中亚硝酸盐含量的测定原理是在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐形成玫瑰红色染料，因此亚硝酸盐含量的测定的实验步骤是：配制溶液→制备标准显色液→制备泡菜样品处理液→比色，因此A、B、C三项均错误，D项正确。
故答案为：D。
【分析】亚硝酸盐含量的测定：
（1）亚硝酸盐的产生：由硝酸盐还原菌促进硝酸盐还原形成。
（2）亚硝酸盐的危害：在特定情况下可转变成致癌物亚硝胺。
（3）亚硝酸盐含量的测定：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐先与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，然后与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色产物，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
（4）泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量是先增加后减少。
8．【答案】C
【知识点】亚硝酸盐含量的测定
【解析】【解答】制备样品处理液时，要先在泡菜汁中加提取剂，接着加氢氧化钠过滤，过滤后再加氢氧化铝乳液再过滤。
故答案为：C。
【分析】亚硝酸盐含量的测定：
（1）亚硝酸盐的产生：由硝酸盐还原菌促进硝酸盐还原形成。
（2）亚硝酸盐的危害：在特定情况下可转变成致癌物亚硝胺。
（3）亚硝酸盐含量的测定：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐先与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，然后与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色产物，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
9．【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【分析】在微生物的培养过程中，除了要将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌外，最关键的是要无菌操作，以防止外来杂菌的入侵。
【点评】本题难度一般，要求学生识记微生物培养的相关知识，考查学生对获得纯净培养物方式的理解。
10．【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】AB、对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上培养，然后将试管放入4℃的冰箱中保藏，AB正确；
C、临时保藏菌种容易被污染或产生变异，C正确；
D、对于需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存，称为甘油管藏法，D错误。
故答案为：D。
【分析】关于菌种的保存有以下几种方式：
（1）对于频繁使用的菌种：可以采用临时保藏的方法。临时保藏方法：将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中保藏。以后每3-6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移新鲜的培养基上。这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。
（2）对于需要长期保存的菌种：可以采用甘油管藏的方法，在甘油瓶中装入1 mL 甘油后灭菌将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在﹣20℃的冷冻箱中保存（或将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后放在﹣20℃的冷冻箱中保存）。但是，应该先将甘油瓶及甘油灭菌后与菌液混合，而不可混合后经高压蒸汽灭菌。斜面培养基能增大接种面积，创造合适的条件微生物就能生长，可用作菌种保存。
11．【答案】A
【知识点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误；将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，C正确；待平板冷却凝固约5 l0min后将平板倒过来放置，,以防止水蒸气凝集滴入培养基，D正确。
【分析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏融化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却至50℃时，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于融化状态时进行倒平板。平板冷却凝固约5~10min后还需要倒置。
12．【答案】B
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】A、灭菌是指采用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；
B、消毒是指杀死物体表面或内部一部分微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是要将所有的微生物全部杀灭，以达到无菌的目的，灭菌一定可以达到消毒的目的，但消毒不一定能达到灭菌的效果，B错误；
C、接种环常用灼烧法灭菌，即通过酒精灯火焰灼烧的方式去掉接种环上的微生物，C正确；
D、煮沸法、紫外线法、化学药品法都属于常用的消毒方法，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、灭菌的方法：（1）灼烧灭菌：应用于接种工具及试管口、瓶口等的灭菌。 （2）干热灭菌：应用于玻璃器皿、金属用具的灭菌。 （3）湿热灭菌：应用于培养基等的灭菌。
2、消毒的方法：（1）煮沸消毒法：杀死微生物的营养组织和一部分芽孢。（2）巴氏消毒法：不耐高温的液体。（3）化学药物消毒法：酒精擦拭双手、氯气消毒水源等。（4）紫外线消毒法：接种台、接种箱和超净工作台的消毒。
13．【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【分析】平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。
14．【答案】B
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】将接种后的培养基和未接种的培养基同时放入37℃恒温箱，目的是作为空白对照，判断培养基是否被污染．一段时间后若未接种的培养基有菌落说明培养基被污染，则培养基不能使用，若无菌落说明培养基没有被污染，可以使用，故答案为：B。
【分析】通过设计对照实验，目的是为了检测培养基制备是否成功，即是否污染了杂菌。
15．【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】①自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感，①错误；
②自生固氮微生物属于细菌，对抗生素敏感，培养基不能添加抗生素，②正确；
③自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，③错误；
④自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，④正确；
⑤自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑤正确；
⑥自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑥错误；
⑦自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑦错误；
⑧自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑧正确。
故答案为：C。
【分析】选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。
16．【答案】B
【知识点】测定某种微生物的数量
【解析】【解答】某同学在101、102、103倍稀释的平均菌落数为2760、295和46，应选择在菌落数在30～300的平板进行计数，故数值为295，稀释倍数为102，则每毫升菌落总数为295×102÷0.1=2.95×105个/mL。
故答案为：B。
【分析】1、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。2、计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
17．【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养；培养基对微生物的选择作用
【解析】【解答】A、甲、乙培养基均只含有机物X，属于选择培养基，乙培养基组分中除了X外，还加入了Y物质琼脂，从而获得固体培养基，A正确；
B、若要筛选高效降解X的细菌菌株，需要甲、乙培养基中的X是唯一提供碳源的有机物，B正确；
C、步骤⑤中自变量是挑取的不同的菌落，各培养瓶中的X溶液的浓度应该是一致的，C错误；
D、步骤⑤的筛选过程中，若培养基中的X浓度过高，则会导致菌体失水影响菌体的正常生长，因此某菌株对X的降解量可能下降，D正确。
故答案为：C。
【分析】 分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以 S 为唯一碳源和氮源的选择培养基上，其中 Y 为琼脂，④为挑取单菌落接种，⑤用以 X 为唯一碳源和氮源的选择培养基进一步筛选。
18．【答案】D
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】首先要进行培养基的制备、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，A正确；然后对土壤稀释液进行涂布于各组平板上，B正确；将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，C正确；确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数，D错误。
【分析】本题主要考查微生物的分离和计数的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解把握知识间内在联系的能力。
19．【答案】D
【知识点】加酶洗衣粉的洗涤效果及其影响因素
【解析】【解答】A、毛料的主要成分是蛋白质，加酶洗衣粉中含有蛋白酶，会破坏毛料衣服，A错误；
B、一般用温水浸泡，水温太高会使酶失活，B错误；
C、水温太低会抑制酶的活性，但不会使酶失活，活性可以恢复，C错误；
D、用含碱性蛋白酶的洗衣粉洗涤衣物后，需要彻底清洗双手是因为皮肤细胞中含蛋白质，若不彻底洗手，就会使手部皮肤受到损伤，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、加酶洗衣粉中酶的种类：
种类 洗涤原理 洗涤的物质种类
蛋白酶 蛋白质→小分子肽或氨基酸 血渍、奶渍等
脂肪酶 脂肪→甘油和脂肪酸 食品的油渍、人体皮脂、口红等
淀粉酶 淀粉→麦芽糖、葡萄糖 来自面条等的污垢
纤维素酶 使纤维的结构变得蓬松 棉纺品的表面浮毛
2、在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高。温度和pH偏高和偏低，酶活性都会明显降低。过酸、过碱或温度过高，会使酶的空间结构遭到破坏，使酶永久失活。
20．【答案】B
【知识点】酶活力测定的一般原理和方法；果胶酶的活性测定
【解析】【解答】将底物和酶分别在设定的同等温度下处理后再混合，才能保证酶在特定温度下反应。A正确；
B、低温使酶活性降低但不会失活，温度过高会使酶失去活性，过酸过碱都会使酶失活，B错误；
C、因酶具有高效性，探究果胶酶的最适温度和最适pH实验中应严格控制酶作用时间，待酶作用完后立即煮沸失活，C正确；
D、解旋酶作用于DNA双螺旋结构之间的氢键，使双螺旋解开成两条单链，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、果胶酶：（1）成分：是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。 （2）作用：果胶可溶性半乳糖醛酸。 （3）应用：降低果汁的黏度，有助于压榨，还能起到澄清作用。
2、在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高。温度和pH偏高和偏低，酶活性都会明显降低。过酸、过碱或温度过高，会使酶的空间结构遭到破坏，使酶永久失活。底物浓度和酶浓度也会影响酶促反应的速率。
21．【答案】B
【知识点】果胶酶的活性测定；固定化酶及其应用
【解析】【解答】解：本实验的自变量是不同浓度的果胶酶溶液，故需要配置不同浓度的果胶酶溶液，A正确；当底物浓度一定时，当酶的量增加到某个值后，再增加酶量，果汁体积不再改变，B错误；本实验温度和pH均为无关变量，故应控制在适宜温度和pH下，C正确；该实验中，反应溶液的pH是无关变量，必须相同，D正确。故答案为：B。
【分析】果胶酶不特指一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。
22．【答案】D
【知识点】固定化细胞及其应用
【解析】【解答】制备固定化酵母细胞的步骤为：酵母细胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。
故答案为：D。
【分析】固定化酵母细胞：
（1）酵母细胞的活化：1g干酵母+10mL蒸馏水搅拌均匀，放置1h左右，使其活化。
（2）配置0.05mol/L的CaCl2溶液：无水CaCl20.83g+150mL蒸馏水充分溶解，待用。
（3）配置海藻酸钠溶液：0.7g的海藻酸钠+10mL水，小火或间断加热，边加热边搅拌，直至完全溶化，加蒸馏水定容至10mL。
（4）海藻酸钠溶液与酵母细胞混合：将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入以活化的酵母细胞，充分搅拌使其混合均匀，在转移至注射器中。
（5）固定化酵母细胞：以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到配置好的CaCl2溶液中，形成凝胶珠，使凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡约30min。
（6）冲洗：凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次，除去表面的CaCl2溶液。
（7）发酵：将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移至200mL的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25℃下发酵24h。
23．【答案】D
【知识点】固定化酶及其应用
【解析】【解答】A、生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出，A正确；
B、用固定化酶生产高果糖浆过程中，反应柱下端的筛板不允许固定化酶颗粒通过，但是不影响反应物和产物的通过，由于葡萄糖异构酶催化效率并非100%，因此下端流出的既有果糖，又有没反应完的葡萄糖，B正确；
C、高果糖浆是指果糖含量为42％左右的糖浆，作为蔗糖的替代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病，对人类的健康更有益，C正确；
D、反应柱下端的筛板不允许固定化酶颗粒通过，但是不影响反应物和产物的通过，因此下端流出的既有果糖，又有没反应完的葡萄糖，但没有固定化酶颗粒，即固定化酶颗粒不进入糖浆中，故可反复利用，大大降低了生产成本，D错误。
故答案为：D。
【分析】 生产高果糖浆时所用的酶应为葡萄糖异构酶，将这种酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入。使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化萄萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本。
24．【答案】B
【知识点】蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】解：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢．选项中的B图符合．
故选：B．
【分析】凝胶色谱法（分配色谱法）：①原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢．②凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖．③分离过程：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子
洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动．④作用：分离蛋白质，测定生物大分子分子量，蛋白质的脱盐等．
25．【答案】A
【知识点】蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】装填凝胶色谱柱时，若产生气泡，则其会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，从而影响分离效果，A正确，B、C、D均错误。
故答案为：A。
【分析】凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。
26．【答案】A
【知识点】蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】解：A、蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只决于分子的大小和所带电荷等，A错误；
B、由于加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质﹣SDS复合物”，蛋白质在SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小，B正确；
C、SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离，C正确；
D、凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小．D正确．
故选：A．
【分析】凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同．（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等．（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质﹣SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小．
27．【答案】D
【知识点】芳香油的提取
【解析】【解答】植物芳香油主要成分是萜类化合物及其衍生物，所以D正确。
【分析】本题考查植物芳香油的内容，意在考查考生对所学知识的理解并把握知识间的内在联系。
28．【答案】A
【知识点】芳香油的提取
【解析】【解答】A、加入氯化钠的目的是促进油水分层，便于除去水分获得玫瑰油，不是为了增大玫瑰油的溶解度，A正确；
B、油水混合物中加入氯化钠，通过盐析使玫瑰油和水分开，B错误；
C、加入氯化钠的目的是促进油水分层，便于除去水分获得纯度较高的玫瑰油，有利于玫瑰油的纯化，C错误；
D、加入氯化钠的目的是促进油水分层，便于除去水分获得纯度较高的玫瑰油，有利于玫瑰液的回收，D错误。
故答案为：A。
【分析】玫瑰精油的提取：
（1）方法：常用水蒸气蒸馏法。
（2）原理：利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。
（3）步骤：鲜玫瑰花+清水水蒸气蒸馏油水混合物分离油层除水玫瑰油。
29．【答案】D
【知识点】芳香油的提取
【解析】【解答】制取橘皮精油时，为了提高出油率，首先将橘皮去水干燥，然后用石灰水浸泡，经漂洗、压榨得到压榨液后，用布袋过滤除去固体物和残渣（第一次过滤），对滤液进行离心进一步除去较小的残留固体物，再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮精油分离出来，然后在5℃～10℃下静置5～7天，使果蜡等杂质沉淀，用吸管吸出上层澄清橘皮油，其余部分通过滤纸过滤（第二次过滤），滤液与吸出的上层橘皮油合并后成为最终的橘皮精油，即橘皮精油是经过第一次a过滤后静置处理的上清液和第二次b过滤后的滤液，D正确，ABC错误。
故答案为：D。
【分析】橘皮精油的提取：
（1）方法：压榨法。
（2）原理：通过机械加压，提取出果皮中的芳香油。
（3）步骤：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油。
30．【答案】B
【知识点】芳香油的提取
【解析】【解答】冷水源源不断地从进水口进入，吸收了蒸馏气的热量后，从出水口源源不断地排出，所以，出水口的水温高于进水口，AC错误；出水口的位置高于进水口，B正确；冷凝管中的水通道和蒸馏气通道并不相通，玫瑰精油不能从进水口进入，D错误。
【分析】蒸馏装置图：
31．【答案】（1）隆起程度和颜色；固体；液体
（2）成本更低，操作更容易；③
（3）碳源；彻底清洗并用蒸汽灭菌
【知识点】微生物的分离和培养；固定化酶及其应用；固定化细胞及其应用
【解析】【解答】(1)一般来说，在一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征。这些特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面；不同菌体的菌落特征不同，菌落只能在固体培养基上形成，因此筛选白色链霉菌的培养基为含琼脂的固体培养基；为了增加白色链霉菌数量，需要用液体培养基培养，因为液体培养基有利于菌体与培养基中营养成分的充分接触，可加速菌种繁殖。
(2)固定化酶的过程中需要先提取制备酶产品再固定，而固定化细胞则是直接将细胞进行固定，所以固定化细胞的成本更低，操作更容易；由于细胞个大，难以被吸附或结合，所以常用包埋法固定细胞（图中③）。图中①为交联法，②为吸附法。
(3)糖液中的糖可为异养的酵母菌提供碳源和能源；为了保证发酵过程中不被微生物污染，必须在固定化细胞灌柱前对反应柱彻底清洗并用蒸汽灭菌。
【分析】1、固定化酶与固定化细胞的比较：
固定化酶 固定化细胞
固定酶的种类 一种 一系列
适用方法 化学结合法、物理吸附法 包埋法
特点 优点 酶既可与反应物结合，又可与产物分离，固定在载体上的酶可反复利用 成本低，操作容易
缺点 一种酶只能催化一种或一类化学反应 可能导致反应效率下降
2、菌落的特征包括：菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面；筛选步骤需要使用固体培养基；扩增目的菌应该采用液体培养基，因为液体培养基有利于菌体与培养基中营养成分的充分接触，加速菌种繁殖；
32．【答案】（1）脲酶；红
（2）A
（3）接种；涂布；单
（4）恒温培养箱；无法形成单菌落
（5）14CO2
【知识点】微生物的分离和培养；培养基概述及其分类；灭菌技术
【解析】【解答】(1)幽门螺杆菌含有脲酶，能分解尿素为菌体提供氮源，因此在配制培养基时要加入尿素；加入酚红指示剂的目的是检验是否有Hp存在，若有Hp存在会分解尿素，培养基pH会升高，酚红指示剂将变红，则菌落周围会出现红色环带。
(2)培养基的灭菌方法通常是高压蒸汽灭菌法，故答案为：A。
(3)微生物的分离和培养步骤是：配制培养基→灭菌、倒平板→接种→培养，故步骤X表示接种；接种时先将菌液稀释，目的是获得单一菌落，然后再涂布到培养基平面上。
(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中；倒置培养的目的主要是防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，若不倒置培养，将导致无法形成单菌落。
(5)如果人体感染了Hp，Hp能将尿素分解为NH3和14CO2，故而用14C标记尿素中的C，可通过呼吸产物来判断是否感染Hp。
【分析】1、培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。培养基按物理性质可分为固体培养基和液体培养基，液体培养基中加入凝固剂可以制成固体培养基；固体培养基一般用于微生物的鉴别、分离和计数，液态培养基常用于扩大化生产，观察细菌运动。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分为选择培养基、鉴别培养基。 2、消毒和灭菌
消毒 灭菌
概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
3、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
33．【答案】（1）生理盐水；渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破）
（2）除去小分子杂质；增加缓冲液的量或及时更换缓冲液
（3）带电性质以及分子大小、形状
（4）2；携带者具有（控制血红蛋白的）一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质
【知识点】蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】（1）样洗涤红细胞可以用生理盐水。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，其原理是渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破）。
（2）透析的目的是除去小分子杂质；若要尽快达到理想的透析效果，可以增加缓冲液的量或及时更换缓冲液。
（3）电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。
（4）由图可知携带者有2种血红蛋白，原因是携带者具有（控制血红蛋白的）一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质。
【分析】血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
34．【答案】（1）番茄红素不易挥发；粉碎、干燥；石油醚
（2）探究番茄红素对癌细胞的增殖是否有抑制作用；用不同浓度的番茄红素分别处理癌细胞，统计各组的癌细胞增殖抑制率。
（3）有机溶剂残留/有机溶剂易燃易爆/产品纯度低/高温下有效成分分解/溶剂污染环境
（4）纸层析法；C
【知识点】胡萝卜素的提取
【解析】【解答】（1）提取番茄红素时不宜使用水蒸气蒸馏法，原因是番茄红素不易挥发。根据番茄红素易溶于有机溶剂的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，为了提高萃取效果，应对番茄进行粉碎、干燥后用有机溶剂进行浸泡提取。根据番茄红素化学性质，在乙醇和石油醚两种溶剂中，乙醇与水互溶，应选择石油醚作为番茄红素的萃取剂。
（2）由题意可知，科研小组的探究目的是探究番茄红素对癌细胞的增殖是否有抑制作用。可以设计不同浓度的番茄红素分别处理癌细胞，统计各组的癌细胞增殖抑制率，探究番茄红素的最适浓度。
（3）由题意可知，超临界CO2替代传统有机溶剂的突出优点是能避免高温下有效成分分解以及有机溶剂易燃易爆等缺点。
（4）对提取的粗品进行鉴定时，可以采用的方法是纸层析。由图可知，C萃取样品与标样层析结果相同，纯度更高。
【分析】胡萝卜素的提取∶(1)胡萝卜素的性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。(2)胡萝卜素的提取来源∶提取天然胡萝卜素的方法主要有：一是从植物中提取；二是从大面积养殖的岩藻中荻得；三是利用微生物的发酵生产。（3）萃取剂∶最适宜作胡萝卜素萃取剂的是石油醚。（4）实验流程∶胡萝卜一粉碎→干燥→萃取(石油醚）→过滤→浓缩一胡萝卜素→鉴定（纸层析法)。（5）胡萝卜素常用来治疗因缺乏维生素A引起的疾病；还是常用的食品色素；还具有使癌变细胞恢复为正常细胞的作用。
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