山西省太原市2021-2022学年高二下学期期中生物试卷
1．（2022高二下·太原期中）制作果酒、果醋两个实验的共同点是（ ）
A．菌种为异养原核生物 B．将原料灭菌后再发酵
C．保证无氧环境下发酵 D．发酵液最终呈现酸性
【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、制作果酒、果醋的实验所用菌种分别为酵母菌、醋酸菌，其中醋酸菌属于细菌，为原核生物，而酵母菌属于真菌，为真核生物，错误；
B、这两个实验都利用了自然界中的菌种（即原料上携带的菌种），不能将原料灭菌，否则将无法实现发酵，错误；
C、制作果醋时所用的醋酸菌属好氧细菌，即制作果醋需在有氧环境下发酵；酒精发酵和乳酸发酵在无氧的环境下发酵，错误；
D项，利用酵母菌发酵制作果酒时会产生，会使发酵液呈酸性；果醋制作时，生产出的果醋呈酸性，导致发酵液最终呈酸性，正确。
故答案为：D。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。
2．（2022高二下·太原期中）变酸的酒表面有一层膜、泡菜坛表面有一层白膜、腐乳外面有一层致密的皮，它们分别是（ ）
A．醋酸菌、乳酸菌、毛霉菌丝 B．醋酸菌、毛霉菌丝、毛霉菌丝
C．醋酸菌、酵母菌、毛霉菌丝 D．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
【答案】C
【知识点】果酒果醋的制作；腐乳的制作
【解析】【解答】解：①在氧气充足的条件下，能将乙醇转化成醋酸，变酸酸的酒表面的一层菌膜，主要与醋酸菌有关；
②泡菜坛液面的一层白膜，主要是成膜酵母繁殖的结果；
③腐乳表面一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的．
故选：C．
【分析】醋酸菌是好氧菌，在氧气充足的条件下可以将乙醇转化成醋酸；
泡菜制作的原理是乳酸菌发酵，在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，成膜酵母生长繁殖会在泡菜坛液面的形成一层白膜；
腐乳表面的一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的，它能形成腐乳的体，使腐乳成型．
3．（2022高二下·太原期中）苹果醋因其原料丰富、用途广泛，已成为果醋家族中重要一员，以下是苹果醋生产加工流程图，相关叙述错误的是（ ）
A．过程①需要对苹果进行选择、清洗
B．过程②的温度要求低于过程③
C．过程③需要在无氧条件下进行
D．过程④需要进行调配、杀菌等操作
【答案】C
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、过程①需要对苹果进行选择、清洗，去除浮尘，A正确；
B、②酒精发酵的最适温度是18℃-25℃，③醋酸发酵的最适温度是30℃-35℃，过程②的温度要求低于过程③，B正确；
C、③醋酸发酵所需菌种醋酸菌属于严格好氧菌，醋酸发酵需要持续通入无菌空气，C错误；
D、过程④需要进行调配、杀菌等操作，以防止杂菌污染，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。
4．（2022高二下·太原期中）下列关于泡菜制作的说法，错误的是（ ）
A．家庭中制作泡菜选用新鲜的蔬菜，可以减少亚硝酸盐的含量
B．泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了解乳酸菌的生长状况
C．发酵泡菜所用的微生物是乳酸菌，在无氧条件下将葡萄糖分解为乳酸
D．若泡菜咸而不酸，可能是食盐过多，抑制了乳酸菌的发酵
【答案】B
【知识点】泡菜的制作
【解析】【解答】A、家庭制作泡菜应该选择新鲜的蔬菜，减少亚硝酸盐的含量，A正确；
B、泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了把握取食泡菜的最佳时机，B错误；
C、发酵泡菜利用的微生物是乳酸菌，在无氧条件下将葡萄糖分解为乳酸，C正确；
D、若泡菜咸而不酸，可能是食盐过多，抑制了乳酸菌的发酵，从而降低了乳酸的产生，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、泡菜的制作使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。
2、泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为4：1的比例配制盐水，将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配置好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。 3、泡菜中的亚硝酸盐含量可以用比色法测定，即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，重氮盐与结合形成玫瑰红色染料。
5．（2022高二下·太原期中）下列有关描述，错误的是（ ）
A．酵母菌含有线粒体，可以进行有氧呼吸和无氧呼吸
B．乳酸杆菌在细胞质基质中产生乳酸
C．分解尿素的细菌可以利用尿素作为氮源
D．牛肉膏蛋白胨培养基可以直接用来培养噬菌体
【答案】D
【知识点】原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同；病毒
【解析】【解答】A、酵母菌是真核生物，有线粒体，为兼性厌氧型，能进行有氧呼吸和无氧呼吸，A正确；
B、乳酸杆菌是厌氧型生物，其无氧呼吸的产物为乳酸，场所在细胞质基质，B正确；
C、分解尿素的细菌属于原核生物，其可以利用葡萄糖作为碳源，尿素主要作为氮源，C正确；
D、噬菌体属于病毒，无细胞结构，必须寄生在活细胞内才能增殖，不能直接用培养基进行培养，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、无细胞结构的生物病毒：（1）生活方式：寄生在活细胞。（2）分类：DNA病毒、RNA病毒。（3）遗传物质：或只是DNA，或只是RNA（一种病毒只含一种核酸）。
2、原核细胞、真核细胞的比较
原核细胞 真核细胞
主要区别 无以核膜为界限的细胞核 有以核膜为界限的细胞核
遗传物质 都是DNA
细胞核 无核膜、核仁，遗传物质DNA分布的区域称拟核；无染色体 有核膜和核仁；核中DNA与蛋白质结合成染色体
细胞器 只有核糖体，无其他细胞器 有线粒体、叶绿体、高尔基体等复杂的细胞器
细胞壁 细胞壁不含纤维素，主要成分是糖类和蛋白质形成的肽聚糖 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，真菌细胞壁的主要成分是几丁质
举例 放线菌、蓝藻、细菌、衣原体、支原体 动物、植物、真菌、原生生物(草履虫、变形虫)等
增殖方式 一般是二分裂 无丝分裂、有丝分裂、减数分裂
6．（2022高二下·太原期中）在微生物培养实验中，分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的灭菌处理，这些方法依次可用于杀灭什么部位的杂菌（ ）
A．接种环、手、培养基 B．培养容器、手、微生物菌种
C．接种针、手、高压锅 D．培养基、手、接种针
【答案】D
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】高压蒸汽气灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环、接种环等金属用具，即D正确。
故答案为：D。
【分析】消毒和灭菌
消毒 灭菌
概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
7．（2022高二下·太原期中）做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）
A．高压灭菌加热结束时，立即开启锅盖，拿出培养基和工具待用
B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】解：A、到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降（不需打开放气阀），当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，拿出培养基和工具待用，A错误；
B、倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；
C、接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落，C错误；
D、标记菌落时应用记号笔标记在皿底上，D正确．
故选：D．
【分析】本题主要考查微生物的分离与培养的相关实验操作，回顾和梳理微生物的培养与分离的基本操作知识，即可正确作答．
8．（2022高二下·太原期中）下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（ ）
A．分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同
C．测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法
D．接种土壤微生物稀释液时，平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布
【答案】B
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，其中的微生物全部死亡，不能得到尿素分解菌，A错误；土壤中各类微生物的数量不同，为了获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，可见，测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围也不同，B正确；测定土壤样品中的活菌数目，常用菌落计数法，一般不常用显微镜直接计数法，C错误；接种土壤微生物稀释液时，可借助平板划线法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，但并不是使微生物均匀分布，D错误。
【分析】 1、土壤微生物具有避高温、趋湿、避光等特点。
2、 测定土壤样品中的活菌数目 ，不同细菌大小、数目和生活习性、种类等存在差异，统计方法可能不同。
3、平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。方法作用:可用于分离细菌，不能计数。
9．（2022高二下·太原期中）实验室中要筛选出目的菌，抑制或阻止其他种类微生物生长的方法不包括（ ）
A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基
B．根据微生物所需生长因子的种类，在培养基中添加不同的生长因子
C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸
D．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素
【答案】C
【知识点】培养基对微生物的选择作用
【解析】【解答】A、根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基，能筛选出目的菌，例如培养自养型的菌，在培养基中不需加入有机碳源，A不符合题意；
B、不同的微生物需要不同的生长因子，根据目的菌的需要在培养基中加入相应的生长因子进行分离，B不符合题意；
C、根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸（DNA和RNA），它不会直接影响到微生物自身的遗传组成，即使被微生物利用，也是被分解为核苷酸后利用，所以培养基中加入不同比例的核酸，不会对微生物起选择作用，C符合题意；
D、根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素可起到选择作用，如培养真菌时可以在培养基中加入青霉素来抑制细菌的生长，D不符合题意；
故答案为：C。
【分析】选择优良的单一纯种，就是在许多微生物中，杀死其它微生物，使某种特定的微生物存活下来。可以采用特定的培养基获得纯种，如根据微生物对碳源需要的差别、微生物缺乏生长因子的种类、微生物对抗菌素敏感性的差异等来配制培养基获得单一纯种。
10．（2022高二下·太原期中）发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，下列哪项不是发酵过程中要完成的操作（ ）
A．随时检测培养液中的产物浓度等
B．不断添加菌种
C．及时添加必需的营养组分
D．严格控制发酵条件
【答案】B
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、发酵过程中要随时取样，检测培养液的细菌数目、产物浓度等，以了解发酵进程，A错误；
B、发酵罐内微生物在适宜的条件下会迅速繁殖，因此，发酵过程中不需要不断的添加菌种，B正确；
C、在发酵过程中需要向装置中及时添加必需的培养液组分，以保证发酵的最佳条件，C错误；
D、要严格控制温度、pH溶解氧、通气量与转速等条件等环境因素，因为环境条件不仅会影响微生物的繁殖，还会影响发酵产物的形成，D错误。
故答案为：B。
【分析】发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养成分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。
11．（2022高二下·太原期中）下列关于细胞工程发展历程的叙述，错误的是（ ）
A．我国科学家首次培育了体细胞克隆猴
B．Ti质粒的发现，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合
C．胡萝卜体细胞可分化为胚的发现，为细胞全能性理论提供了有力支持
D．日本科学家首次成功获得了诱导多能干细胞并用这种细胞培育出小鼠
【答案】D
【知识点】细胞工程的概述
【解析】【解答】A、2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴，这两只克隆猴名字叫“中中”和“华华”，寓“中华”之意，A正确；
B、Ti质粒的实质是小型环状DNA，可作为运载体，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合，B正确；
C、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，胡萝卜体细胞可分化为胚的发现，为细胞全能性理论提供了有力支持，C正确；
D、日本科学家首次成功获得了诱导多能干细胞，但没有用这种细胞培育出小鼠，D错误；
故答案为：D。
【分析】 1、2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。
2、1974年，土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后，该质粒应用于植物分子生物学领域，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合。
3、1958年，斯图尔德等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚，为细胞全能性理论提供了强有力的支持。
4、日本科学家首次成功获得了诱导多能干细胞。
12．（2022高二下·太原期中）科学家利用核移植技术克隆出了多种动物。下列关于动物核移植技术的叙述，正确的是（ ）
A．胚胎细胞核移植比体细胞核移植难度大
B．核移植过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核
C．核移植时，提供细胞核和去核卵细胞的动物都应为雌性
D．通过核移植方法培育的克隆动物遗传物质全部来自供体细胞核
【答案】B
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】A、由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，A错误；
B、在核移植过程中，可通过显微操作去除卵细胞中的细胞核，获得去核卵母细胞，B正确；
C、核移植时，提供细胞核的动物可以是雌性和雄性，但提供去核卵细胞的只能是雌性，C错误；
D、通过核移植方法培育的克隆动物，其细胞核的遗传物质全部来自供体细胞核，但细胞质中的遗传物质则来自提供去核卵细胞的雌性，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、体细胞核移植技术：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞核的全能性。
2、体细胞核移植过程：
13．（2022高二下·太原期中）通过植物体细胞杂交，科学家培育出了白菜—甘蓝植株，下列相关叙述错误的是（ ）
A．在进行植物体细胞杂交之前，需要先获得原生质体
B．人工诱导原生质体融合，可以采取物理法和化学法
C．植物体细胞杂交只适用于染色体数目一致的两个物种
D．植物体细胞杂交技术能打破生殖隔离，培育出新品种
【答案】C
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；细胞融合的方法
【解析】【解答】A、在进行植物体细胞杂交之前，先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，A正确；
B、人工诱导原生质体融合，可以采取物理法（离心、振动、电激）和化学法（聚乙二醇），B正确；
C、植物体细胞杂交后的染色体数目是亲本的染色体数目之和，且植物体细胞杂交可克服远缘杂交不亲和的障碍，故其也适用于染色体数目不一致的两个物种，C错误；
D、植物体细胞杂交技术能打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出新品种，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、植物体细胞杂交包括植物细胞融合和植物组织培养两个阶段，原理为细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。2、可用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁，获得原生质体。
14．（2022高二下·太原期中）在进行动物细胞培养时，下列操作正确的是（ ）
A．用胃蛋白酶处理获得单细胞悬液
B．分瓶后的细胞培养就是原代培养
C．动物细胞培养需要的气体环境是95%O2和5%CO2
D．在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集
【答案】D
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理以获得单细胞悬液，A错误；
B、分瓶后的培养属于传代培养，B错误；
C、动物细胞培养应在含5%CO2和95%的空气组成的混合气体恒温培养箱中进行，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH，C错误；
D、在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，D正确。
故答案为：D。
【分析】动物细胞培养：
1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2、动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
3、动物培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
15．（2022高二下·太原期中）2020年初，荷兰某研究所利用蛇干细胞培养出可分泌毒液的蛇毒腺微型组织，使获取毒素的途径更加安全和简单。下列叙述正确的是（ ）
A．培养蛇干细胞时，所需的营养物质与植物细胞培养相同
B．蛇毒腺微型组织中的细胞基因的表达与蛇胚胎干细胞不完全相同
C．人工诱导蛇胚胎干细胞大量增殖即可直接获得大量分泌毒液的细胞
D．培养蛇毒腺微型组织与培养哺乳动物细胞的条件完全相同
【答案】B
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、培养蛇干细胞时，所需的营养物质与植物细胞培养不完全相同，动物细胞培养需加入葡萄糖、血清等，植物细胞培养需加入蔗糖、植物激素等，A错误；
B、不同细胞中基因的表达情况不同，因此蛇毒腺微型组织基因的表达与蛇胚胎干细胞不完全相同，B正确；
C、分泌毒液的蛇毒腺微型组织细胞是蛇胚胎干细胞分裂分化形成的，蛇胚胎干细胞不能分泌毒液，C错误；
D、由于不同细胞的结构和功能不同，因此培养蛇毒腺微型组织与哺乳动物细胞培养的条件不完全相同，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、动物培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
2、动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
16．（2022高二下·太原期中）下列关于利用胚胎工程技术进行人类试管婴儿培育的叙述，错误的是（ ）
A．采集到的成熟精子经获能处理后才具有受精能力
B．经促排卵处理后，从卵巢中取出的卵母细胞需要经过培养成熟才能受精
C．利用药物改善子宫内膜的机能，可提高胚胎的着床率
D．试管婴儿受精卵中的染色体和DNA均由精子和卵子各提供一半
【答案】D
【知识点】精子、卵子的发生和体内受精；体外受精
【解析】【解答】A、根据分析可知，采集到的成熟精子经获能处理后才具有受精能力，A正确；
B、在输卵管中，是未成熟的卵母细胞，需体外培养成熟至减数第二次分裂中期才能与获能的精子结合，B正确；
C、利用药物改善子宫内膜的机能，可提高胚胎的着床率，C正确；
D、受精卵中的染色体由精子和卵细胞各提供一半，但DNA来自卵细胞的多于来自精子的，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段。
（1）准备阶段1精子获能。刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力。
（2）准备阶段2卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。
2、试管婴儿技术是指通过人工操作是卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
17．（2022高二下·太原期中）人造皮肤的构建需要使用动物细胞培养技术，下列相关叙述正确的是（ ）
A．培养动物细胞所需的基本条件与细胞所处的内环境理化条件接近
B．只要进行好消毒，动物细胞培养可以在恒温培养箱进行
C．贴壁细胞在分裂生长到出现接触抑制后会分化为不同类型
D．人造皮肤实现了动物细胞的全能性
【答案】A
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、培养动物细胞所需的基本条件与细胞所处的内环境理化条件接近，如温度为36.5℃±0.5℃，pH为7.2～7.4，都与人体内环境的理化性质接近，A正确；
B、动物细胞培养时应注意无菌技术，且需要定期更换培养液，故不能在恒温培养箱进行，B错误；
C、接触抑制是指贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，该过程中不会发生细胞分化，C错误；
D、细胞的全能性判断标准是发育为完整个体，而人造皮肤没有发育为完整个体，故不能体现全能性，D错误。
故答案为：A。
【分析】动物细胞培养：
1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2、动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
3、动物培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
4、注意事项：（1）动物细胞连续培养50代左右，会出现大量细胞死亡而只有少量细胞生存的现象，这少数细胞的遗传物质发生变化，往往具有癌变的特点。（2）动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官。（3）动物组织处理使细胞分散后的初次培养称为原代培养， 。
18．（2022高二下·太原期中）下列不属于动物细胞工程应用的是（ ）
A．生产食品添加剂、香料等 B．增加濒危物种的存活数量
C．生产珍贵的医用蛋白 D．加速家畜遗传改良进程
【答案】A
【知识点】动物细胞工程的常用技术与应用
【解析】【解答】A、大规模生产食品添加剂、杀虫剂等是植物细胞工程的应用，A符合题意；
B、采用核移植技术等可增加濒危物种的存活数量，B不符合题意；
C、生产许多有价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产，是动物细胞工程的应用，C不符合题意；
D、利用胚胎移植技术，可以加快优良种畜的繁殖，也属于动物细胞工程的应用，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】1、体细胞核移植技术的应用：（1）加速家畜遗传优良进程、促进优良畜群繁育。（2）增加濒危物种的存活数量。（3）利用核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白。
2、胚胎移植技术的应用：促进优良动物品种的繁殖，产生的遗传性状相同的后代是进行遗传学研究的宝贵材料。
19．（2022高二下·太原期中）下图是胚胎发育过程中某阶段示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A．胚胎从①中伸展出来的过程叫孵化
B．图中②将发育为胎膜和胎盘
C．图中③可发育成胎儿的各种组织
D．胚胎分割要注意将②均等分割
【答案】D
【知识点】动物胚胎发育的过程
【解析】【解答】A、胚胎从透明带中伸展出来的过程叫做孵化，A正确；
B、滋养层将发育为胎膜和胎盘，B正确；
C、内细胞团将来可以发育为胎儿的各种组织，是囊胚中最重要的结构，C正确；
D、胚胎分割要注意将③内细胞团均等分割，D错误。
故答案为：D。
【分析】动物胚胎发育的基本过程：
（1）受精场所是母体的输卵管上段。
（2）卵裂期：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。
（3）桑椹胚：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹，是全能细胞。
（4）囊胚：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，中间的空腔称为囊胚腔。
（5）原肠胚：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。
20．（2022高二下·太原期中）嵌合体在免疫学上的含义是指一个机体身上有两种或两种以上染色体组成不同的细胞系同时存在，彼此能够耐受，不产生排斥反应，相互间处于嵌合状态。如图表示构建嵌合体小鼠的实验，下列叙述错误的是（ ）
A．过程①中的培养液需要适时更换
B．代孕母鼠对早期胚胎基本不发生免疫排斥反应
C．嵌合体幼鼠的一个细胞中同时有白鼠和黑鼠的基因
D．囊胚中分离的胚胎干细胞经诱导可发育成多种组织
【答案】C
【知识点】动物细胞培养技术；动物胚胎发育的过程；胚胎移植
【解析】【解答】A、过程①为早期胚胎培养，为防止培养过程中细胞代谢废物对细胞的毒害作用，需要对培养液适时更换，A正确；
B、代孕母鼠对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能，B正确；
C、嵌合体幼鼠是由两种受精卵合并（但没有融合）发育而来的，故一个细胞中只有白鼠或黑鼠的基因，不会两种基因同时存在，C错误；
D、囊胚中分离的胚胎干细胞是指囊胚中的内细胞团细胞，其经诱导能发育成各种组织，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、动物培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
2、胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。
3、囊胚：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，中间的空腔称为囊胚腔。
21．（2022高二下·太原期中）玉米是一种主要的农作物，为了提高玉米的产量，科学家在玉米育种和栽培中作了大量的研究。如图是关于玉米培养的过程，据图判断下列说法错误的是（ ）
A．从繁殖原理上分析，A→D属于无性生殖
B．植株D和G中的染色体组数相同
C．E→G不能体现细胞的全能性
D．E→F过程中获得的植株一般不直接用于大田生产
【答案】B,C
【知识点】植物组织培养的过程；单倍体育种
【解析】【解答】A、A→D是植物组织培养过程，从繁殖原理上分析，属于无性生殖，A正确；
B、植株D是二倍体植株，植株G是单倍体植株，体内的染色体组数不同，B错误；
C、E→G表示花药离体培养形成单倍体幼苗的过程，该过程体现了植物细胞（生殖细胞）的全能性，C错误；
D、E→F过程中获得的植株是单倍体植株，高度不育，一般没有直接的使用价值，不直接用于大田生产，D正确。
故答案为：BC。
【分析】1、植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。嫩枝或分化程度较低的部位的细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，故外植体一般选用嫩枝或分化程度较低的部位成功率更高。
2、单倍体是指体细胞中含有本物种配子中染色体组的个体。单倍体的特点是植株矮小瘦弱，一般高度不育。单倍体育种的过程一般是首先花药离体培养，从而获得单倍体植株，然后进行秋水仙素加倍，从而获得所需性状的纯合个体。单倍体育种的优点是能迅速获得纯合体，加快育种进程，依据的原理是染色体变异。
22．（2022高二下·太原期中）用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验，是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示为培养的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列分析错误的是（ ）
A．在图示固体培养基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种病原菌
B．未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异
C．形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物较敏感
D．不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响
【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、图示固体培养基上需要菌液均匀分布，故在该固体培养基上采用的是稀释涂布平板法，不能使用平板划线法，A错误；
B、未出现抑菌圈可能的原因是该病原菌对该抗生素不敏感，这种变异不是在接触抗生素后存在的，抗生素只能起着选择作用，B错误；
C、形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物敏感度小，C错误；
D、 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会导致距离抗生素最远的微生物先大量繁殖，对实验结果造成影响，D正确。
故答案为：D。
【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
23．（2022高二下·太原期中）为给工厂化繁殖脱毒甘薯苗提供技术支持，科研人员利用植物组织培养技术研究甘薯茎尖（外植体）大小对诱导分化苗和脱毒苗的影响，结果如表所示，下列相关叙述正确的是（ ）
茎尖大小 外植体数/个 分化苗数/苗 脱毒苗数/苗
小于0.3mm 20 1 1
0.3~0.5mm 20 10 7
大于0.5mm 20 13 4
A．不同培养阶段培养基中激素的浓度和比例等应适时调整
B．脱分化过程中应给予充足光照使其进行光合作用
C．本实验的自变量为茎尖的大小和脱毒苗数
D．0.3~0.5mm大小的茎尖有利于脱毒甘薯苗的培养
【答案】A,D
【知识点】植物组织培养的过程；组织培养基的成分及作用
【解析】【解答】A、不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同，故不同培养阶段培养基中激素种类和比例应适时调整，A正确；
B、脱分化时，愈伤组织的诱导往往需要暗培养，不能给予适宜光照，B错误；
C、本实验的自变量是茎尖大小，脱毒苗数目属于因变量，C错误；
D、根据表格中数据可知，0.3-0.5mm大小的茎尖，脱毒苗数最多，因此有利于培养脱毒甘薯，D正确。
故答案为：AD。
【分析】1、植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。嫩枝或分化程度较低的部位的细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，故外植体一般选用嫩枝或分化程度较低的部位成功率更高。
2、植物组织培养的流程为：制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移裁→栽培。
3、植物组织培养的注意事项：（1）接种时应注意的事项：①接种室要消毒；②无菌操作；接种时要防止交叉污染；③接种完立刻盖好瓶口。（2）外植体接种前，需要将接种室、接种箱灭菌和对外植体消毒的操作：①接种前一天，将接种室的四个角落用甲醛溶液和高锰酸钾重蒸。②接种前1小时，在接种室内用喷雾器喷洒来苏水；桌椅也用来苏水擦拭；接种箱内用甲醛溶液和高锰酸钾重蒸。③将灭菌室和接种箱内用紫外灯灭菌。④接种前，操作者用肥皂清洗双手，擦干，再用酒精棉球擦拭双手。⑤用次氯酸钠溶液将外植体消毒。
4、在离体的植物器言、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度； ④充足的养料。
5、影响植物组织培养的因素：①培养基配制；②外植体选取；③激素的运用；④消毒；⑤温度、pH、光照。
6、植物组织培养中植物激素使用：植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。
24．（2022高二下·太原期中）甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。下列叙述正确的是（ ）
A．为了培育该新型药用植物，取甲和乙的叶片，先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁
B．用化学诱导剂PEG诱导二者原生质体的融合
C．AB融合细胞培养形成愈伤组织，再诱导形成完整植株，此过程利用植物组织培养技术
D．上述杂种植株属于二倍体
【答案】A,B,C
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，利用纤维素酶和果胶酶可以除去植物细胞壁，获得具有活力的原生质体，A正确；
B、可用化学诱导剂PEG诱导原生质体融合，B正确；
C、形成的融合细胞经植物组织培养，脱分化形成愈伤组织之后经过再分化过程形成植株，C正确；
D、甲、乙都是二倍体，体细胞杂交得到的是四倍体，D错误。
故答案为：ABC。
【分析】1、进行植物体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁，进行植物原生质体的融合，形成杂种细胞，再通过植物的组织培养将杂种细胞培育成杂种植株。不同种的植物之间具有生殖隔离，该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍。
2、植物体细胞杂交的具体过程：
25．（2022高二下·太原期中）著名物理学家霍金患有肌肉萎缩性侧索硬化症，即“渐冻症”。有研究表明该病是由于突变的基因使运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（iPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述正确的是（ ）
A．植入由iPS细胞诱导分化成的神经干细胞可能起到一定的治疗作用
B．将控制合成破坏运动神经元的毒蛋白基因替换，可以起到一定的治疗作用
C．iPS细胞分化成的多种细胞中核遗传物质不相同
D．iPS细胞的分化实质是基因的选择性表达，细胞种类增多
【答案】A,B,D
【知识点】细胞分化及其意义
【解析】【解答】A、“渐冻症”是由于突变的基因使运动神经元受损，所以植入由iPS细胞诱导分化成的神经干细胞可以分化形成运动神经元，可能起到一定的治疗作用，A正确；
B、该病是由于某种毒蛋白阻碍了轴突内营养物质的流动引起的，所以若将控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，或许可以起到治疗该病的作用，B正确；
C、细胞分化的实质是基因的选择性表达，所以iPS细胞分化成的多种细胞中核遗传物质相同 ，C错误；
D、细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多，D正确。
故答案为：ABD。
【分析】细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质是基因的选择性表达。细胞分化的意义：是生物个体发育的基础；使多细胞生物中的细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。在细胞分化过程中，细胞的遗传信息和细胞的数量不变。
26．（2022高二下·太原期中）在传统发酵食品的制作过程中，人类利用了天然存在的菌种。请回答：
（1）果酒制作离不开酵母菌，其中酿酒酵母被人类利用的历史已有近万年，被称为“第一种家养微生物”，其代谢类型为 ；在无氧条件下进行酒精发酵，反应简式为 。
（2）醋酸菌可用于制作各种风味的醋。利用果酒进行果醋的制作其原理为（反应简式） ，温度应控制在 ℃。在工业大规模生产果醋时，需要安装搅拌器，以保证醋酸菌对 的需求。
（3）腐乳制作过程中起主要作用的微生物是 ；传统泡菜是利用植物体表面天然的 来进行发酵的。这两类微生物在结构上的本质区别是 。
【答案】（1）异养兼性厌氧；C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量
（2）C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量；30～35℃；氧气（和营养物质）
（3）毛霉；乳酸菌；乳酸菌无以核膜为界限的细胞核
【知识点】原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同；果酒果醋的制作；腐乳的制作
【解析】【解答】(1)酵母菌是一类异养兼性厌氧型微生物，在有氧条件下进行有氧呼吸，无氧条件下进行无氧呼吸；无氧条件下进行酒精发酵，将葡萄糖分解为酒精和二氧化碳，反应简式为C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。
(2)在果酒制作的基础上进行果醋发酵的反应式为：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量；果醋制作时温度应控制在30～35℃；在果醋发酵过程中，需要安装搅拌器以保证醋酸菌对于氧气和营养物质的需求。
(3)腐乳制作过程中，豆腐发酵主要利用毛霉产生的蛋白酶和脂肪酶；传统泡菜是利用植物体表面天然的酸菌来进行发酵的；毛霉属于真核生物，乳酸菌属于原核生物，两者的本质区别在于原核生物无以核膜为界限的细胞核。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
2、.醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。
3、腐乳制作的过程中其主要作用的微生物是毛霉；泡菜的制作使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。
4、原核细胞、真核细胞的比较
原核细胞 真核细胞
主要区别 无以核膜为界限的细胞核 有以核膜为界限的细胞核
遗传物质 都是DNA
细胞核 无核膜、核仁，遗传物质DNA分布的区域称拟核；无染色体 有核膜和核仁；核中DNA与蛋白质结合成染色体
细胞器 只有核糖体，无其他细胞器 有线粒体、叶绿体、高尔基体等复杂的细胞器
细胞壁 细胞壁不含纤维素，主要成分是糖类和蛋白质形成的肽聚糖 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，真菌细胞壁的主要成分是几丁质
举例 放线菌、蓝藻、细菌、衣原体、支原体 动物、植物、真菌、原生生物(草履虫、变形虫)等
增殖方式 一般是二分裂 无丝分裂、有丝分裂、减数分裂
27．（2022高二下·太原期中）酒精凝胶类免洗洗手液含有70%~75%的酒精。为检测某品牌凝胶洗手液的清洗效果，研究人员测定了凝胶洗手前后，手部细菌的含量，检测流程如下图。回答下列问题：
（1）实验室常用牛肉膏蛋白胨培养基培养常见细菌。其中牛肉膏主要为微生物提供 ，蛋白胨主要提供 。培养基还需满足微生物生长对 、 以及氧气的需求。如培养乳酸杆菌，需要在培养基中添加 。
（2）为统计洗手前手部细菌的数目，应选择的方法是 （填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”）。
（3）根据上图所示的步骤得出的实验结果可信度较低，为了提高实验结果的可信度，请给出两点建议： 。
（4）培养一段时间后可根据 （至少答出2点）等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。
【答案】（1）碳源、氮源、磷酸盐和维生素；碳源、氮源和维生素；pH；特殊营养物质；维生素
（2）稀释涂布平板法
（3）①同一种稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值；②设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰。
（4）菌落的大小、形状、颜色
【知识点】测定某种微生物的数量；培养基概述及其分类
【解析】【解答】(1)牛肉膏可以为生物的生长提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素；蛋白胨可以为微生物生长提供碳源、氮源和维生素；培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的需求，培养乳酸杆菌，需要在培养基中添加维生素。
(2)统计细菌的数目，应选择的方法是稀释涂布平板法。
(3)实验设计需要遵循对照原则和平行重复原则，因此需要的改进措施有：①同一种稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值；②设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰。
(4)不同菌体的菌落的大小、形状、颜色可能不同，所以可根据菌落的大小、形状、颜色等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。
【分析】1、培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。培养基按物理性质可分为固体培养基和液体培养基，液体培养基中加入凝固剂可以制成固体培养基；固体培养基一般用于微生物的鉴别、分离和计数，液态培养基常用于扩大化生产，观察细菌运动。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分为选择培养基、鉴别培养基。
2、稀释涂布平板操作的步骤：①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中；②取少量菌液，滴加到培养基表面；③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10s；④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
28．（2022高二下·太原期中）培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示。回答下列问题。
（1）上图过程 属于脱分化（填序号），过程 属于再分化（填序号）。用高度分化的植物细胞可以培养成完整的植株，这是因为植物细胞一般具有 。
（2）愈伤组织是 。
（3）步骤⑤要进行适当照光培养，其作用是 。
（4）植物组织培养一般需要用到的培养基属于 （按物理性质划分）培养基，培养基中加入蔗糖的目的是 。
（5）经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的 ，这种繁殖方式 繁殖。
【答案】（1）④；⑤；全能性
（2）不定形的薄壁细胞
（3）诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
（4）固体；提供营养并维持渗透压
（5）优良性状；无性
【知识点】植物组织培养的过程；培养基概述及其分类
【解析】【解答】 (1)结合分析可知，④属于脱分化过程，是由外植体形成愈伤组织的过程；⑤表示再分化，是由愈伤组织分化形成试管苗的过程；高度分化的植物细胞可以培养成完整的植株，这是因为植物细胞一般具有该生物的全部遗传信息，即植物细胞有全能性。
(2)愈伤组织是离体植物细胞经过脱分化形成的，是一团不定形的薄壁细胞。
(3)步骤⑤再分化过程要进行照光培养，其作用是诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用。
(4)植物组织培养一般需要用到的培养基属于固体培养基；植物组织培养的培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。
(5)经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的优良特性，该繁殖方式属于无性繁殖。
【分析】1、植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。嫩枝或分化程度较低的部位的细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，故外植体一般选用嫩枝或分化程度较低的部位成功率更高。
2、植物组织培养的流程为：外植体经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整的植株。
3、培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。培养基按物理性质可分为固体培养基和液体培养基，液体培养基中加入凝固剂可以制成固体培养基；固体培养基一般用于微生物的鉴别、分离和计数，液态培养基常用于扩大化生产，观察细菌运动。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分为选择培养基、鉴别培养基。
29．（2022高二下·太原期中）如图为单克隆抗体制备流程示意图。
（1） 技术是单克隆抗体技术的基础，此过程还用到的重要技术是 。
（2）细胞融合是随机的过程，使用HAT培养基进行培养的结果是 。
（3）在多孔细胞培养板上选出的杂交瘤细胞具备 特点。
（4）给小鼠多次注射特定抗原的目的是要得到 。
【答案】（1）动物细胞培养；动物细胞融合
（2）筛选得到杂交瘤细胞
（3）大量繁殖且产生特异性抗体
（4）更多的B细胞
【知识点】单克隆抗体的制备过程
【解析】【解答】 (1)单克隆抗体技术能够制备单抗，需要动物细胞培养技术对细胞进行培养，因此动物细胞培养技术是单克隆抗体技术的基础；单抗制备也需要动物细胞融合技术将B细胞与骨髓瘤细胞进行融合。
(2)细胞融合的结果有B细胞+B细胞、B细胞+骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞，用HAT培养基能筛选到杂交瘤细胞。据图分析，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，所以骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞也不能在该培养基上存活；淋巴细胞和淋巴细胞自身融合的细胞能在HAT培养基上正常生活，但不能增殖，所以经过培养后，HAT培养基上没有淋巴细胞和淋巴细胞自身融合的细胞；骨髓瘤细胞与淋巴细胞之间形成的杂交瘤细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖。
(3)在多孔细胞培养板上选出的杂交瘤细胞具备大量繁殖（骨髓瘤细胞能无限增殖）产生特异性抗体的特点。
(4)给小鼠注射特定抗原能产生特异性的记忆B细胞和抗体，多次注射能产生更多特定的记忆B细胞。
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
30．（2022高二下·太原期中）在英国，每6500个儿童中就有1个身患遗传性疾病。每年约有10例英国患者希望采用“线粒体替换”疗法，避免夫妻把生理缺陷遗传给孩子。英国以医学手段培育“三亲婴儿”，三亲婴儿的培育过程如下图所示的技术路线。
（1）女性的自然周期产生的卵子少，捐献者在取卵前通常需要注射 激素，促使一次有更多的卵泡发育。
（2）卵母细胞需培养到 期才具备受精的能力，体外培养时所需的气体主要有O2和CO2，CO2的主要作用是 。
（3）在使用合成培养基培养早期胚胎细胞时，通常需加入 等天然物质。同时需要定期更换培养液，目的是 。
（4）利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中 （填“捐献者”、“母亲”或“父亲”）中的 （填“常染色体上”、“性染色体上”或“线粒体中”）的基因缺陷传给孩子，而 （填“能”或“不能”）避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。
（5）“三亲婴儿”的生殖方式属于 生殖（填“有性”或“无性”）
【答案】（1）促性腺激素
（2）MⅡ中；维持培养液的pH
（3）血清；清除代谢产物，防止代谢产物积累
（4）母亲；线粒体中；不能
（5）有性
【知识点】动物细胞培养技术；胚胎移植
【解析】【解答】 (1)可以通过向女性注射促性腺激素促进女性超数排卵。
(2)卵母细胞需培养到MⅡ中期时才具备与精子受精的能力，重组卵母细胞体外培养实质是动物细胞培养技术，所需的气体主要有O2和CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。
(3)在使用合成培养基时，通常还需加入血清等天然物质后再进行培养。在培养过程中，需要适时更换培养液，以清除代谢产物，防止代谢产物积累对早期胚胎造成危害。
(4)利用三亲婴儿培育技术培育的子代，该过程中是用捐献者的卵细胞的细胞质和母亲的卵细胞的核重组，形成的重组卵再和父亲的精子结合，利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中母亲中的线粒体中的基因缺陷传给孩子；
由于红绿色盲基因位于细胞核的X染色体上，而细胞核来自母亲卵母细胞，因此不能避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。
(5)三亲婴儿的生殖还是需要经过精卵融合，属于有性生殖。
【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氨中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。
2、动物培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO（维持培养液的pH）。
31．（2022高二下·太原期中）和牛是世界公认的高档肉牛品种，下图是通过胚胎工程培育试管和牛的过程。请回答下列问题：
（1）为了使成熟和牛排出更多的卵子，可以注射 ，但只有发育到 期的卵子才能与精子结合。体外受精前要对精子进行获能处理，常用的方法有 和 。
（2）获能的精子与卵子相遇时，首先发生 反应，使顶体内的酶释放出来。受精完成的标志是 。
（3）在胚胎移植过程中，移入子宫的胚胎能在受体内存活的生理学基础是 。
（4）为了进一步提高和牛的产子率，科学家用了胚胎分割技术，应选择发育良好形态正常的 胚进行分割。如需对初期胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的 细胞进行鉴定。
【答案】（1）促性腺激素；MⅡ中；培养法；化学诱导法
（2）顶体；雌雄原核的融合
（3）受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生排斥反应
（4）桑椹胚或囊；滋养层
【知识点】胚胎移植；胚胎分割；体外受精
【解析】【解答】(1)促性腺激素的作用是促进雌性个体超数排卵，发育到减数第二次分裂中期才能进行受精。精子体外获能处理的方法有培养法和化学诱导法，化学诱导法一般将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187。
(2)获能的精子与卵子相遇时，首先发生反应顶体反应，使顶体内的酶释放出来，将透明带溶出一条通道，使精子可以前进。受精完成的标志是雌雄原核的融合。
(3)在胚胎移植过程中，移入子宫的胚胎能在受体内存活的生理学基础是受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生排斥反应，如果有排斥反应，就会导致胚胎移植失败。
(4)胚胎分割技术，应选择发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚进行分割，此时细胞全能性高，分割容易成功，但注意要将囊胚内细胞团均等分割；如需对初期胚胎进行性别鉴定，则需要获取胚胎细胞，囊胚期已经出现内细胞团和滋养层两类细胞，滋养层细胞后来发育成胎膜和胎盘，所以宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定。
【分析】1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
（1）卵母细胞的采集和培养：①主要方法是：用促性腺激素处理使其超数排卵，然后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，叫活体采卵
（2）精子的采集和获能：①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。
（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
2、胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。
4、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行分割，要注意将内细胞团均等分割。如需对胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定。
1 / 1山西省太原市2021-2022学年高二下学期期中生物试卷
1．（2022高二下·太原期中）制作果酒、果醋两个实验的共同点是（ ）
A．菌种为异养原核生物 B．将原料灭菌后再发酵
C．保证无氧环境下发酵 D．发酵液最终呈现酸性
2．（2022高二下·太原期中）变酸的酒表面有一层膜、泡菜坛表面有一层白膜、腐乳外面有一层致密的皮，它们分别是（ ）
A．醋酸菌、乳酸菌、毛霉菌丝 B．醋酸菌、毛霉菌丝、毛霉菌丝
C．醋酸菌、酵母菌、毛霉菌丝 D．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
3．（2022高二下·太原期中）苹果醋因其原料丰富、用途广泛，已成为果醋家族中重要一员，以下是苹果醋生产加工流程图，相关叙述错误的是（ ）
A．过程①需要对苹果进行选择、清洗
B．过程②的温度要求低于过程③
C．过程③需要在无氧条件下进行
D．过程④需要进行调配、杀菌等操作
4．（2022高二下·太原期中）下列关于泡菜制作的说法，错误的是（ ）
A．家庭中制作泡菜选用新鲜的蔬菜，可以减少亚硝酸盐的含量
B．泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了解乳酸菌的生长状况
C．发酵泡菜所用的微生物是乳酸菌，在无氧条件下将葡萄糖分解为乳酸
D．若泡菜咸而不酸，可能是食盐过多，抑制了乳酸菌的发酵
5．（2022高二下·太原期中）下列有关描述，错误的是（ ）
A．酵母菌含有线粒体，可以进行有氧呼吸和无氧呼吸
B．乳酸杆菌在细胞质基质中产生乳酸
C．分解尿素的细菌可以利用尿素作为氮源
D．牛肉膏蛋白胨培养基可以直接用来培养噬菌体
6．（2022高二下·太原期中）在微生物培养实验中，分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的灭菌处理，这些方法依次可用于杀灭什么部位的杂菌（ ）
A．接种环、手、培养基 B．培养容器、手、微生物菌种
C．接种针、手、高压锅 D．培养基、手、接种针
7．（2022高二下·太原期中）做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）
A．高压灭菌加热结束时，立即开启锅盖，拿出培养基和工具待用
B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
8．（2022高二下·太原期中）下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（ ）
A．分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同
C．测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法
D．接种土壤微生物稀释液时，平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布
9．（2022高二下·太原期中）实验室中要筛选出目的菌，抑制或阻止其他种类微生物生长的方法不包括（ ）
A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基
B．根据微生物所需生长因子的种类，在培养基中添加不同的生长因子
C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸
D．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素
10．（2022高二下·太原期中）发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，下列哪项不是发酵过程中要完成的操作（ ）
A．随时检测培养液中的产物浓度等
B．不断添加菌种
C．及时添加必需的营养组分
D．严格控制发酵条件
11．（2022高二下·太原期中）下列关于细胞工程发展历程的叙述，错误的是（ ）
A．我国科学家首次培育了体细胞克隆猴
B．Ti质粒的发现，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合
C．胡萝卜体细胞可分化为胚的发现，为细胞全能性理论提供了有力支持
D．日本科学家首次成功获得了诱导多能干细胞并用这种细胞培育出小鼠
12．（2022高二下·太原期中）科学家利用核移植技术克隆出了多种动物。下列关于动物核移植技术的叙述，正确的是（ ）
A．胚胎细胞核移植比体细胞核移植难度大
B．核移植过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核
C．核移植时，提供细胞核和去核卵细胞的动物都应为雌性
D．通过核移植方法培育的克隆动物遗传物质全部来自供体细胞核
13．（2022高二下·太原期中）通过植物体细胞杂交，科学家培育出了白菜—甘蓝植株，下列相关叙述错误的是（ ）
A．在进行植物体细胞杂交之前，需要先获得原生质体
B．人工诱导原生质体融合，可以采取物理法和化学法
C．植物体细胞杂交只适用于染色体数目一致的两个物种
D．植物体细胞杂交技术能打破生殖隔离，培育出新品种
14．（2022高二下·太原期中）在进行动物细胞培养时，下列操作正确的是（ ）
A．用胃蛋白酶处理获得单细胞悬液
B．分瓶后的细胞培养就是原代培养
C．动物细胞培养需要的气体环境是95%O2和5%CO2
D．在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集
15．（2022高二下·太原期中）2020年初，荷兰某研究所利用蛇干细胞培养出可分泌毒液的蛇毒腺微型组织，使获取毒素的途径更加安全和简单。下列叙述正确的是（ ）
A．培养蛇干细胞时，所需的营养物质与植物细胞培养相同
B．蛇毒腺微型组织中的细胞基因的表达与蛇胚胎干细胞不完全相同
C．人工诱导蛇胚胎干细胞大量增殖即可直接获得大量分泌毒液的细胞
D．培养蛇毒腺微型组织与培养哺乳动物细胞的条件完全相同
16．（2022高二下·太原期中）下列关于利用胚胎工程技术进行人类试管婴儿培育的叙述，错误的是（ ）
A．采集到的成熟精子经获能处理后才具有受精能力
B．经促排卵处理后，从卵巢中取出的卵母细胞需要经过培养成熟才能受精
C．利用药物改善子宫内膜的机能，可提高胚胎的着床率
D．试管婴儿受精卵中的染色体和DNA均由精子和卵子各提供一半
17．（2022高二下·太原期中）人造皮肤的构建需要使用动物细胞培养技术，下列相关叙述正确的是（ ）
A．培养动物细胞所需的基本条件与细胞所处的内环境理化条件接近
B．只要进行好消毒，动物细胞培养可以在恒温培养箱进行
C．贴壁细胞在分裂生长到出现接触抑制后会分化为不同类型
D．人造皮肤实现了动物细胞的全能性
18．（2022高二下·太原期中）下列不属于动物细胞工程应用的是（ ）
A．生产食品添加剂、香料等 B．增加濒危物种的存活数量
C．生产珍贵的医用蛋白 D．加速家畜遗传改良进程
19．（2022高二下·太原期中）下图是胚胎发育过程中某阶段示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A．胚胎从①中伸展出来的过程叫孵化
B．图中②将发育为胎膜和胎盘
C．图中③可发育成胎儿的各种组织
D．胚胎分割要注意将②均等分割
20．（2022高二下·太原期中）嵌合体在免疫学上的含义是指一个机体身上有两种或两种以上染色体组成不同的细胞系同时存在，彼此能够耐受，不产生排斥反应，相互间处于嵌合状态。如图表示构建嵌合体小鼠的实验，下列叙述错误的是（ ）
A．过程①中的培养液需要适时更换
B．代孕母鼠对早期胚胎基本不发生免疫排斥反应
C．嵌合体幼鼠的一个细胞中同时有白鼠和黑鼠的基因
D．囊胚中分离的胚胎干细胞经诱导可发育成多种组织
21．（2022高二下·太原期中）玉米是一种主要的农作物，为了提高玉米的产量，科学家在玉米育种和栽培中作了大量的研究。如图是关于玉米培养的过程，据图判断下列说法错误的是（ ）
A．从繁殖原理上分析，A→D属于无性生殖
B．植株D和G中的染色体组数相同
C．E→G不能体现细胞的全能性
D．E→F过程中获得的植株一般不直接用于大田生产
22．（2022高二下·太原期中）用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验，是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示为培养的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列分析错误的是（ ）
A．在图示固体培养基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种病原菌
B．未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异
C．形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物较敏感
D．不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响
23．（2022高二下·太原期中）为给工厂化繁殖脱毒甘薯苗提供技术支持，科研人员利用植物组织培养技术研究甘薯茎尖（外植体）大小对诱导分化苗和脱毒苗的影响，结果如表所示，下列相关叙述正确的是（ ）
茎尖大小 外植体数/个 分化苗数/苗 脱毒苗数/苗
小于0.3mm 20 1 1
0.3~0.5mm 20 10 7
大于0.5mm 20 13 4
A．不同培养阶段培养基中激素的浓度和比例等应适时调整
B．脱分化过程中应给予充足光照使其进行光合作用
C．本实验的自变量为茎尖的大小和脱毒苗数
D．0.3~0.5mm大小的茎尖有利于脱毒甘薯苗的培养
24．（2022高二下·太原期中）甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。下列叙述正确的是（ ）
A．为了培育该新型药用植物，取甲和乙的叶片，先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁
B．用化学诱导剂PEG诱导二者原生质体的融合
C．AB融合细胞培养形成愈伤组织，再诱导形成完整植株，此过程利用植物组织培养技术
D．上述杂种植株属于二倍体
25．（2022高二下·太原期中）著名物理学家霍金患有肌肉萎缩性侧索硬化症，即“渐冻症”。有研究表明该病是由于突变的基因使运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（iPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述正确的是（ ）
A．植入由iPS细胞诱导分化成的神经干细胞可能起到一定的治疗作用
B．将控制合成破坏运动神经元的毒蛋白基因替换，可以起到一定的治疗作用
C．iPS细胞分化成的多种细胞中核遗传物质不相同
D．iPS细胞的分化实质是基因的选择性表达，细胞种类增多
26．（2022高二下·太原期中）在传统发酵食品的制作过程中，人类利用了天然存在的菌种。请回答：
（1）果酒制作离不开酵母菌，其中酿酒酵母被人类利用的历史已有近万年，被称为“第一种家养微生物”，其代谢类型为 ；在无氧条件下进行酒精发酵，反应简式为 。
（2）醋酸菌可用于制作各种风味的醋。利用果酒进行果醋的制作其原理为（反应简式） ，温度应控制在 ℃。在工业大规模生产果醋时，需要安装搅拌器，以保证醋酸菌对 的需求。
（3）腐乳制作过程中起主要作用的微生物是 ；传统泡菜是利用植物体表面天然的 来进行发酵的。这两类微生物在结构上的本质区别是 。
27．（2022高二下·太原期中）酒精凝胶类免洗洗手液含有70%~75%的酒精。为检测某品牌凝胶洗手液的清洗效果，研究人员测定了凝胶洗手前后，手部细菌的含量，检测流程如下图。回答下列问题：
（1）实验室常用牛肉膏蛋白胨培养基培养常见细菌。其中牛肉膏主要为微生物提供 ，蛋白胨主要提供 。培养基还需满足微生物生长对 、 以及氧气的需求。如培养乳酸杆菌，需要在培养基中添加 。
（2）为统计洗手前手部细菌的数目，应选择的方法是 （填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”）。
（3）根据上图所示的步骤得出的实验结果可信度较低，为了提高实验结果的可信度，请给出两点建议： 。
（4）培养一段时间后可根据 （至少答出2点）等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。
28．（2022高二下·太原期中）培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示。回答下列问题。
（1）上图过程 属于脱分化（填序号），过程 属于再分化（填序号）。用高度分化的植物细胞可以培养成完整的植株，这是因为植物细胞一般具有 。
（2）愈伤组织是 。
（3）步骤⑤要进行适当照光培养，其作用是 。
（4）植物组织培养一般需要用到的培养基属于 （按物理性质划分）培养基，培养基中加入蔗糖的目的是 。
（5）经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的 ，这种繁殖方式 繁殖。
29．（2022高二下·太原期中）如图为单克隆抗体制备流程示意图。
（1） 技术是单克隆抗体技术的基础，此过程还用到的重要技术是 。
（2）细胞融合是随机的过程，使用HAT培养基进行培养的结果是 。
（3）在多孔细胞培养板上选出的杂交瘤细胞具备 特点。
（4）给小鼠多次注射特定抗原的目的是要得到 。
30．（2022高二下·太原期中）在英国，每6500个儿童中就有1个身患遗传性疾病。每年约有10例英国患者希望采用“线粒体替换”疗法，避免夫妻把生理缺陷遗传给孩子。英国以医学手段培育“三亲婴儿”，三亲婴儿的培育过程如下图所示的技术路线。
（1）女性的自然周期产生的卵子少，捐献者在取卵前通常需要注射 激素，促使一次有更多的卵泡发育。
（2）卵母细胞需培养到 期才具备受精的能力，体外培养时所需的气体主要有O2和CO2，CO2的主要作用是 。
（3）在使用合成培养基培养早期胚胎细胞时，通常需加入 等天然物质。同时需要定期更换培养液，目的是 。
（4）利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中 （填“捐献者”、“母亲”或“父亲”）中的 （填“常染色体上”、“性染色体上”或“线粒体中”）的基因缺陷传给孩子，而 （填“能”或“不能”）避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。
（5）“三亲婴儿”的生殖方式属于 生殖（填“有性”或“无性”）
31．（2022高二下·太原期中）和牛是世界公认的高档肉牛品种，下图是通过胚胎工程培育试管和牛的过程。请回答下列问题：
（1）为了使成熟和牛排出更多的卵子，可以注射 ，但只有发育到 期的卵子才能与精子结合。体外受精前要对精子进行获能处理，常用的方法有 和 。
（2）获能的精子与卵子相遇时，首先发生 反应，使顶体内的酶释放出来。受精完成的标志是 。
（3）在胚胎移植过程中，移入子宫的胚胎能在受体内存活的生理学基础是 。
（4）为了进一步提高和牛的产子率，科学家用了胚胎分割技术，应选择发育良好形态正常的 胚进行分割。如需对初期胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的 细胞进行鉴定。
答案解析部分
1．【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、制作果酒、果醋的实验所用菌种分别为酵母菌、醋酸菌，其中醋酸菌属于细菌，为原核生物，而酵母菌属于真菌，为真核生物，错误；
B、这两个实验都利用了自然界中的菌种（即原料上携带的菌种），不能将原料灭菌，否则将无法实现发酵，错误；
C、制作果醋时所用的醋酸菌属好氧细菌，即制作果醋需在有氧环境下发酵；酒精发酵和乳酸发酵在无氧的环境下发酵，错误；
D项，利用酵母菌发酵制作果酒时会产生，会使发酵液呈酸性；果醋制作时，生产出的果醋呈酸性，导致发酵液最终呈酸性，正确。
故答案为：D。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。
2．【答案】C
【知识点】果酒果醋的制作；腐乳的制作
【解析】【解答】解：①在氧气充足的条件下，能将乙醇转化成醋酸，变酸酸的酒表面的一层菌膜，主要与醋酸菌有关；
②泡菜坛液面的一层白膜，主要是成膜酵母繁殖的结果；
③腐乳表面一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的．
故选：C．
【分析】醋酸菌是好氧菌，在氧气充足的条件下可以将乙醇转化成醋酸；
泡菜制作的原理是乳酸菌发酵，在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，成膜酵母生长繁殖会在泡菜坛液面的形成一层白膜；
腐乳表面的一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的，它能形成腐乳的体，使腐乳成型．
3．【答案】C
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、过程①需要对苹果进行选择、清洗，去除浮尘，A正确；
B、②酒精发酵的最适温度是18℃-25℃，③醋酸发酵的最适温度是30℃-35℃，过程②的温度要求低于过程③，B正确；
C、③醋酸发酵所需菌种醋酸菌属于严格好氧菌，醋酸发酵需要持续通入无菌空气，C错误；
D、过程④需要进行调配、杀菌等操作，以防止杂菌污染，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。
4．【答案】B
【知识点】泡菜的制作
【解析】【解答】A、家庭制作泡菜应该选择新鲜的蔬菜，减少亚硝酸盐的含量，A正确；
B、泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了把握取食泡菜的最佳时机，B错误；
C、发酵泡菜利用的微生物是乳酸菌，在无氧条件下将葡萄糖分解为乳酸，C正确；
D、若泡菜咸而不酸，可能是食盐过多，抑制了乳酸菌的发酵，从而降低了乳酸的产生，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、泡菜的制作使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。
2、泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为4：1的比例配制盐水，将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配置好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。 3、泡菜中的亚硝酸盐含量可以用比色法测定，即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，重氮盐与结合形成玫瑰红色染料。
5．【答案】D
【知识点】原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同；病毒
【解析】【解答】A、酵母菌是真核生物，有线粒体，为兼性厌氧型，能进行有氧呼吸和无氧呼吸，A正确；
B、乳酸杆菌是厌氧型生物，其无氧呼吸的产物为乳酸，场所在细胞质基质，B正确；
C、分解尿素的细菌属于原核生物，其可以利用葡萄糖作为碳源，尿素主要作为氮源，C正确；
D、噬菌体属于病毒，无细胞结构，必须寄生在活细胞内才能增殖，不能直接用培养基进行培养，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、无细胞结构的生物病毒：（1）生活方式：寄生在活细胞。（2）分类：DNA病毒、RNA病毒。（3）遗传物质：或只是DNA，或只是RNA（一种病毒只含一种核酸）。
2、原核细胞、真核细胞的比较
原核细胞 真核细胞
主要区别 无以核膜为界限的细胞核 有以核膜为界限的细胞核
遗传物质 都是DNA
细胞核 无核膜、核仁，遗传物质DNA分布的区域称拟核；无染色体 有核膜和核仁；核中DNA与蛋白质结合成染色体
细胞器 只有核糖体，无其他细胞器 有线粒体、叶绿体、高尔基体等复杂的细胞器
细胞壁 细胞壁不含纤维素，主要成分是糖类和蛋白质形成的肽聚糖 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，真菌细胞壁的主要成分是几丁质
举例 放线菌、蓝藻、细菌、衣原体、支原体 动物、植物、真菌、原生生物(草履虫、变形虫)等
增殖方式 一般是二分裂 无丝分裂、有丝分裂、减数分裂
6．【答案】D
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】高压蒸汽气灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环、接种环等金属用具，即D正确。
故答案为：D。
【分析】消毒和灭菌
消毒 灭菌
概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
7．【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】解：A、到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降（不需打开放气阀），当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，拿出培养基和工具待用，A错误；
B、倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；
C、接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落，C错误；
D、标记菌落时应用记号笔标记在皿底上，D正确．
故选：D．
【分析】本题主要考查微生物的分离与培养的相关实验操作，回顾和梳理微生物的培养与分离的基本操作知识，即可正确作答．
8．【答案】B
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，其中的微生物全部死亡，不能得到尿素分解菌，A错误；土壤中各类微生物的数量不同，为了获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，可见，测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围也不同，B正确；测定土壤样品中的活菌数目，常用菌落计数法，一般不常用显微镜直接计数法，C错误；接种土壤微生物稀释液时，可借助平板划线法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，但并不是使微生物均匀分布，D错误。
【分析】 1、土壤微生物具有避高温、趋湿、避光等特点。
2、 测定土壤样品中的活菌数目 ，不同细菌大小、数目和生活习性、种类等存在差异，统计方法可能不同。
3、平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。方法作用:可用于分离细菌，不能计数。
9．【答案】C
【知识点】培养基对微生物的选择作用
【解析】【解答】A、根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基，能筛选出目的菌，例如培养自养型的菌，在培养基中不需加入有机碳源，A不符合题意；
B、不同的微生物需要不同的生长因子，根据目的菌的需要在培养基中加入相应的生长因子进行分离，B不符合题意；
C、根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸（DNA和RNA），它不会直接影响到微生物自身的遗传组成，即使被微生物利用，也是被分解为核苷酸后利用，所以培养基中加入不同比例的核酸，不会对微生物起选择作用，C符合题意；
D、根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素可起到选择作用，如培养真菌时可以在培养基中加入青霉素来抑制细菌的生长，D不符合题意；
故答案为：C。
【分析】选择优良的单一纯种，就是在许多微生物中，杀死其它微生物，使某种特定的微生物存活下来。可以采用特定的培养基获得纯种，如根据微生物对碳源需要的差别、微生物缺乏生长因子的种类、微生物对抗菌素敏感性的差异等来配制培养基获得单一纯种。
10．【答案】B
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、发酵过程中要随时取样，检测培养液的细菌数目、产物浓度等，以了解发酵进程，A错误；
B、发酵罐内微生物在适宜的条件下会迅速繁殖，因此，发酵过程中不需要不断的添加菌种，B正确；
C、在发酵过程中需要向装置中及时添加必需的培养液组分，以保证发酵的最佳条件，C错误；
D、要严格控制温度、pH溶解氧、通气量与转速等条件等环境因素，因为环境条件不仅会影响微生物的繁殖，还会影响发酵产物的形成，D错误。
故答案为：B。
【分析】发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养成分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。
11．【答案】D
【知识点】细胞工程的概述
【解析】【解答】A、2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴，这两只克隆猴名字叫“中中”和“华华”，寓“中华”之意，A正确；
B、Ti质粒的实质是小型环状DNA，可作为运载体，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合，B正确；
C、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，胡萝卜体细胞可分化为胚的发现，为细胞全能性理论提供了有力支持，C正确；
D、日本科学家首次成功获得了诱导多能干细胞，但没有用这种细胞培育出小鼠，D错误；
故答案为：D。
【分析】 1、2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。
2、1974年，土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后，该质粒应用于植物分子生物学领域，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合。
3、1958年，斯图尔德等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚，为细胞全能性理论提供了强有力的支持。
4、日本科学家首次成功获得了诱导多能干细胞。
12．【答案】B
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】A、由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，A错误；
B、在核移植过程中，可通过显微操作去除卵细胞中的细胞核，获得去核卵母细胞，B正确；
C、核移植时，提供细胞核的动物可以是雌性和雄性，但提供去核卵细胞的只能是雌性，C错误；
D、通过核移植方法培育的克隆动物，其细胞核的遗传物质全部来自供体细胞核，但细胞质中的遗传物质则来自提供去核卵细胞的雌性，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、体细胞核移植技术：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞核的全能性。
2、体细胞核移植过程：
13．【答案】C
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；细胞融合的方法
【解析】【解答】A、在进行植物体细胞杂交之前，先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，A正确；
B、人工诱导原生质体融合，可以采取物理法（离心、振动、电激）和化学法（聚乙二醇），B正确；
C、植物体细胞杂交后的染色体数目是亲本的染色体数目之和，且植物体细胞杂交可克服远缘杂交不亲和的障碍，故其也适用于染色体数目不一致的两个物种，C错误；
D、植物体细胞杂交技术能打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出新品种，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、植物体细胞杂交包括植物细胞融合和植物组织培养两个阶段，原理为细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。2、可用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁，获得原生质体。
14．【答案】D
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理以获得单细胞悬液，A错误；
B、分瓶后的培养属于传代培养，B错误；
C、动物细胞培养应在含5%CO2和95%的空气组成的混合气体恒温培养箱中进行，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH，C错误；
D、在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，D正确。
故答案为：D。
【分析】动物细胞培养：
1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2、动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
3、动物培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
15．【答案】B
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、培养蛇干细胞时，所需的营养物质与植物细胞培养不完全相同，动物细胞培养需加入葡萄糖、血清等，植物细胞培养需加入蔗糖、植物激素等，A错误；
B、不同细胞中基因的表达情况不同，因此蛇毒腺微型组织基因的表达与蛇胚胎干细胞不完全相同，B正确；
C、分泌毒液的蛇毒腺微型组织细胞是蛇胚胎干细胞分裂分化形成的，蛇胚胎干细胞不能分泌毒液，C错误；
D、由于不同细胞的结构和功能不同，因此培养蛇毒腺微型组织与哺乳动物细胞培养的条件不完全相同，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、动物培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
2、动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
16．【答案】D
【知识点】精子、卵子的发生和体内受精；体外受精
【解析】【解答】A、根据分析可知，采集到的成熟精子经获能处理后才具有受精能力，A正确；
B、在输卵管中，是未成熟的卵母细胞，需体外培养成熟至减数第二次分裂中期才能与获能的精子结合，B正确；
C、利用药物改善子宫内膜的机能，可提高胚胎的着床率，C正确；
D、受精卵中的染色体由精子和卵细胞各提供一半，但DNA来自卵细胞的多于来自精子的，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段。
（1）准备阶段1精子获能。刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力。
（2）准备阶段2卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。
2、试管婴儿技术是指通过人工操作是卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
17．【答案】A
【知识点】动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、培养动物细胞所需的基本条件与细胞所处的内环境理化条件接近，如温度为36.5℃±0.5℃，pH为7.2～7.4，都与人体内环境的理化性质接近，A正确；
B、动物细胞培养时应注意无菌技术，且需要定期更换培养液，故不能在恒温培养箱进行，B错误；
C、接触抑制是指贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，该过程中不会发生细胞分化，C错误；
D、细胞的全能性判断标准是发育为完整个体，而人造皮肤没有发育为完整个体，故不能体现全能性，D错误。
故答案为：A。
【分析】动物细胞培养：
1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2、动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
3、动物培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
4、注意事项：（1）动物细胞连续培养50代左右，会出现大量细胞死亡而只有少量细胞生存的现象，这少数细胞的遗传物质发生变化，往往具有癌变的特点。（2）动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官。（3）动物组织处理使细胞分散后的初次培养称为原代培养， 。
18．【答案】A
【知识点】动物细胞工程的常用技术与应用
【解析】【解答】A、大规模生产食品添加剂、杀虫剂等是植物细胞工程的应用，A符合题意；
B、采用核移植技术等可增加濒危物种的存活数量，B不符合题意；
C、生产许多有价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产，是动物细胞工程的应用，C不符合题意；
D、利用胚胎移植技术，可以加快优良种畜的繁殖，也属于动物细胞工程的应用，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】1、体细胞核移植技术的应用：（1）加速家畜遗传优良进程、促进优良畜群繁育。（2）增加濒危物种的存活数量。（3）利用核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白。
2、胚胎移植技术的应用：促进优良动物品种的繁殖，产生的遗传性状相同的后代是进行遗传学研究的宝贵材料。
19．【答案】D
【知识点】动物胚胎发育的过程
【解析】【解答】A、胚胎从透明带中伸展出来的过程叫做孵化，A正确；
B、滋养层将发育为胎膜和胎盘，B正确；
C、内细胞团将来可以发育为胎儿的各种组织，是囊胚中最重要的结构，C正确；
D、胚胎分割要注意将③内细胞团均等分割，D错误。
故答案为：D。
【分析】动物胚胎发育的基本过程：
（1）受精场所是母体的输卵管上段。
（2）卵裂期：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。
（3）桑椹胚：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹，是全能细胞。
（4）囊胚：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，中间的空腔称为囊胚腔。
（5）原肠胚：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。
20．【答案】C
【知识点】动物细胞培养技术；动物胚胎发育的过程；胚胎移植
【解析】【解答】A、过程①为早期胚胎培养，为防止培养过程中细胞代谢废物对细胞的毒害作用，需要对培养液适时更换，A正确；
B、代孕母鼠对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能，B正确；
C、嵌合体幼鼠是由两种受精卵合并（但没有融合）发育而来的，故一个细胞中只有白鼠或黑鼠的基因，不会两种基因同时存在，C错误；
D、囊胚中分离的胚胎干细胞是指囊胚中的内细胞团细胞，其经诱导能发育成各种组织，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、动物培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
2、胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。
3、囊胚：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，中间的空腔称为囊胚腔。
21．【答案】B,C
【知识点】植物组织培养的过程；单倍体育种
【解析】【解答】A、A→D是植物组织培养过程，从繁殖原理上分析，属于无性生殖，A正确；
B、植株D是二倍体植株，植株G是单倍体植株，体内的染色体组数不同，B错误；
C、E→G表示花药离体培养形成单倍体幼苗的过程，该过程体现了植物细胞（生殖细胞）的全能性，C错误；
D、E→F过程中获得的植株是单倍体植株，高度不育，一般没有直接的使用价值，不直接用于大田生产，D正确。
故答案为：BC。
【分析】1、植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。嫩枝或分化程度较低的部位的细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，故外植体一般选用嫩枝或分化程度较低的部位成功率更高。
2、单倍体是指体细胞中含有本物种配子中染色体组的个体。单倍体的特点是植株矮小瘦弱，一般高度不育。单倍体育种的过程一般是首先花药离体培养，从而获得单倍体植株，然后进行秋水仙素加倍，从而获得所需性状的纯合个体。单倍体育种的优点是能迅速获得纯合体，加快育种进程，依据的原理是染色体变异。
22．【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、图示固体培养基上需要菌液均匀分布，故在该固体培养基上采用的是稀释涂布平板法，不能使用平板划线法，A错误；
B、未出现抑菌圈可能的原因是该病原菌对该抗生素不敏感，这种变异不是在接触抗生素后存在的，抗生素只能起着选择作用，B错误；
C、形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物敏感度小，C错误；
D、 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会导致距离抗生素最远的微生物先大量繁殖，对实验结果造成影响，D正确。
故答案为：D。
【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
23．【答案】A,D
【知识点】植物组织培养的过程；组织培养基的成分及作用
【解析】【解答】A、不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同，故不同培养阶段培养基中激素种类和比例应适时调整，A正确；
B、脱分化时，愈伤组织的诱导往往需要暗培养，不能给予适宜光照，B错误；
C、本实验的自变量是茎尖大小，脱毒苗数目属于因变量，C错误；
D、根据表格中数据可知，0.3-0.5mm大小的茎尖，脱毒苗数最多，因此有利于培养脱毒甘薯，D正确。
故答案为：AD。
【分析】1、植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。嫩枝或分化程度较低的部位的细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，故外植体一般选用嫩枝或分化程度较低的部位成功率更高。
2、植物组织培养的流程为：制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移裁→栽培。
3、植物组织培养的注意事项：（1）接种时应注意的事项：①接种室要消毒；②无菌操作；接种时要防止交叉污染；③接种完立刻盖好瓶口。（2）外植体接种前，需要将接种室、接种箱灭菌和对外植体消毒的操作：①接种前一天，将接种室的四个角落用甲醛溶液和高锰酸钾重蒸。②接种前1小时，在接种室内用喷雾器喷洒来苏水；桌椅也用来苏水擦拭；接种箱内用甲醛溶液和高锰酸钾重蒸。③将灭菌室和接种箱内用紫外灯灭菌。④接种前，操作者用肥皂清洗双手，擦干，再用酒精棉球擦拭双手。⑤用次氯酸钠溶液将外植体消毒。
4、在离体的植物器言、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度； ④充足的养料。
5、影响植物组织培养的因素：①培养基配制；②外植体选取；③激素的运用；④消毒；⑤温度、pH、光照。
6、植物组织培养中植物激素使用：植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。
24．【答案】A,B,C
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，利用纤维素酶和果胶酶可以除去植物细胞壁，获得具有活力的原生质体，A正确；
B、可用化学诱导剂PEG诱导原生质体融合，B正确；
C、形成的融合细胞经植物组织培养，脱分化形成愈伤组织之后经过再分化过程形成植株，C正确；
D、甲、乙都是二倍体，体细胞杂交得到的是四倍体，D错误。
故答案为：ABC。
【分析】1、进行植物体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁，进行植物原生质体的融合，形成杂种细胞，再通过植物的组织培养将杂种细胞培育成杂种植株。不同种的植物之间具有生殖隔离，该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍。
2、植物体细胞杂交的具体过程：
25．【答案】A,B,D
【知识点】细胞分化及其意义
【解析】【解答】A、“渐冻症”是由于突变的基因使运动神经元受损，所以植入由iPS细胞诱导分化成的神经干细胞可以分化形成运动神经元，可能起到一定的治疗作用，A正确；
B、该病是由于某种毒蛋白阻碍了轴突内营养物质的流动引起的，所以若将控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，或许可以起到治疗该病的作用，B正确；
C、细胞分化的实质是基因的选择性表达，所以iPS细胞分化成的多种细胞中核遗传物质相同 ，C错误；
D、细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多，D正确。
故答案为：ABD。
【分析】细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质是基因的选择性表达。细胞分化的意义：是生物个体发育的基础；使多细胞生物中的细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。在细胞分化过程中，细胞的遗传信息和细胞的数量不变。
26．【答案】（1）异养兼性厌氧；C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量
（2）C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量；30～35℃；氧气（和营养物质）
（3）毛霉；乳酸菌；乳酸菌无以核膜为界限的细胞核
【知识点】原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同；果酒果醋的制作；腐乳的制作
【解析】【解答】(1)酵母菌是一类异养兼性厌氧型微生物，在有氧条件下进行有氧呼吸，无氧条件下进行无氧呼吸；无氧条件下进行酒精发酵，将葡萄糖分解为酒精和二氧化碳，反应简式为C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。
(2)在果酒制作的基础上进行果醋发酵的反应式为：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量；果醋制作时温度应控制在30～35℃；在果醋发酵过程中，需要安装搅拌器以保证醋酸菌对于氧气和营养物质的需求。
(3)腐乳制作过程中，豆腐发酵主要利用毛霉产生的蛋白酶和脂肪酶；传统泡菜是利用植物体表面天然的酸菌来进行发酵的；毛霉属于真核生物，乳酸菌属于原核生物，两者的本质区别在于原核生物无以核膜为界限的细胞核。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
2、.醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。
3、腐乳制作的过程中其主要作用的微生物是毛霉；泡菜的制作使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。
4、原核细胞、真核细胞的比较
原核细胞 真核细胞
主要区别 无以核膜为界限的细胞核 有以核膜为界限的细胞核
遗传物质 都是DNA
细胞核 无核膜、核仁，遗传物质DNA分布的区域称拟核；无染色体 有核膜和核仁；核中DNA与蛋白质结合成染色体
细胞器 只有核糖体，无其他细胞器 有线粒体、叶绿体、高尔基体等复杂的细胞器
细胞壁 细胞壁不含纤维素，主要成分是糖类和蛋白质形成的肽聚糖 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，真菌细胞壁的主要成分是几丁质
举例 放线菌、蓝藻、细菌、衣原体、支原体 动物、植物、真菌、原生生物(草履虫、变形虫)等
增殖方式 一般是二分裂 无丝分裂、有丝分裂、减数分裂
27．【答案】（1）碳源、氮源、磷酸盐和维生素；碳源、氮源和维生素；pH；特殊营养物质；维生素
（2）稀释涂布平板法
（3）①同一种稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值；②设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰。
（4）菌落的大小、形状、颜色
【知识点】测定某种微生物的数量；培养基概述及其分类
【解析】【解答】(1)牛肉膏可以为生物的生长提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素；蛋白胨可以为微生物生长提供碳源、氮源和维生素；培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的需求，培养乳酸杆菌，需要在培养基中添加维生素。
(2)统计细菌的数目，应选择的方法是稀释涂布平板法。
(3)实验设计需要遵循对照原则和平行重复原则，因此需要的改进措施有：①同一种稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值；②设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰。
(4)不同菌体的菌落的大小、形状、颜色可能不同，所以可根据菌落的大小、形状、颜色等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。
【分析】1、培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。培养基按物理性质可分为固体培养基和液体培养基，液体培养基中加入凝固剂可以制成固体培养基；固体培养基一般用于微生物的鉴别、分离和计数，液态培养基常用于扩大化生产，观察细菌运动。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分为选择培养基、鉴别培养基。
2、稀释涂布平板操作的步骤：①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中；②取少量菌液，滴加到培养基表面；③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10s；④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
28．【答案】（1）④；⑤；全能性
（2）不定形的薄壁细胞
（3）诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
（4）固体；提供营养并维持渗透压
（5）优良性状；无性
【知识点】植物组织培养的过程；培养基概述及其分类
【解析】【解答】 (1)结合分析可知，④属于脱分化过程，是由外植体形成愈伤组织的过程；⑤表示再分化，是由愈伤组织分化形成试管苗的过程；高度分化的植物细胞可以培养成完整的植株，这是因为植物细胞一般具有该生物的全部遗传信息，即植物细胞有全能性。
(2)愈伤组织是离体植物细胞经过脱分化形成的，是一团不定形的薄壁细胞。
(3)步骤⑤再分化过程要进行照光培养，其作用是诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用。
(4)植物组织培养一般需要用到的培养基属于固体培养基；植物组织培养的培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。
(5)经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的优良特性，该繁殖方式属于无性繁殖。
【分析】1、植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。嫩枝或分化程度较低的部位的细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，故外植体一般选用嫩枝或分化程度较低的部位成功率更高。
2、植物组织培养的流程为：外植体经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整的植株。
3、培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。培养基按物理性质可分为固体培养基和液体培养基，液体培养基中加入凝固剂可以制成固体培养基；固体培养基一般用于微生物的鉴别、分离和计数，液态培养基常用于扩大化生产，观察细菌运动。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分为选择培养基、鉴别培养基。
29．【答案】（1）动物细胞培养；动物细胞融合
（2）筛选得到杂交瘤细胞
（3）大量繁殖且产生特异性抗体
（4）更多的B细胞
【知识点】单克隆抗体的制备过程
【解析】【解答】 (1)单克隆抗体技术能够制备单抗，需要动物细胞培养技术对细胞进行培养，因此动物细胞培养技术是单克隆抗体技术的基础；单抗制备也需要动物细胞融合技术将B细胞与骨髓瘤细胞进行融合。
(2)细胞融合的结果有B细胞+B细胞、B细胞+骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞，用HAT培养基能筛选到杂交瘤细胞。据图分析，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，所以骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞也不能在该培养基上存活；淋巴细胞和淋巴细胞自身融合的细胞能在HAT培养基上正常生活，但不能增殖，所以经过培养后，HAT培养基上没有淋巴细胞和淋巴细胞自身融合的细胞；骨髓瘤细胞与淋巴细胞之间形成的杂交瘤细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖。
(3)在多孔细胞培养板上选出的杂交瘤细胞具备大量繁殖（骨髓瘤细胞能无限增殖）产生特异性抗体的特点。
(4)给小鼠注射特定抗原能产生特异性的记忆B细胞和抗体，多次注射能产生更多特定的记忆B细胞。
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
30．【答案】（1）促性腺激素
（2）MⅡ中；维持培养液的pH
（3）血清；清除代谢产物，防止代谢产物积累
（4）母亲；线粒体中；不能
（5）有性
【知识点】动物细胞培养技术；胚胎移植
【解析】【解答】 (1)可以通过向女性注射促性腺激素促进女性超数排卵。
(2)卵母细胞需培养到MⅡ中期时才具备与精子受精的能力，重组卵母细胞体外培养实质是动物细胞培养技术，所需的气体主要有O2和CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。
(3)在使用合成培养基时，通常还需加入血清等天然物质后再进行培养。在培养过程中，需要适时更换培养液，以清除代谢产物，防止代谢产物积累对早期胚胎造成危害。
(4)利用三亲婴儿培育技术培育的子代，该过程中是用捐献者的卵细胞的细胞质和母亲的卵细胞的核重组，形成的重组卵再和父亲的精子结合，利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中母亲中的线粒体中的基因缺陷传给孩子；
由于红绿色盲基因位于细胞核的X染色体上，而细胞核来自母亲卵母细胞，因此不能避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。
(5)三亲婴儿的生殖还是需要经过精卵融合，属于有性生殖。
【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氨中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。
2、动物培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO（维持培养液的pH）。
31．【答案】（1）促性腺激素；MⅡ中；培养法；化学诱导法
（2）顶体；雌雄原核的融合
（3）受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生排斥反应
（4）桑椹胚或囊；滋养层
【知识点】胚胎移植；胚胎分割；体外受精
【解析】【解答】(1)促性腺激素的作用是促进雌性个体超数排卵，发育到减数第二次分裂中期才能进行受精。精子体外获能处理的方法有培养法和化学诱导法，化学诱导法一般将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187。
(2)获能的精子与卵子相遇时，首先发生反应顶体反应，使顶体内的酶释放出来，将透明带溶出一条通道，使精子可以前进。受精完成的标志是雌雄原核的融合。
(3)在胚胎移植过程中，移入子宫的胚胎能在受体内存活的生理学基础是受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生排斥反应，如果有排斥反应，就会导致胚胎移植失败。
(4)胚胎分割技术，应选择发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚进行分割，此时细胞全能性高，分割容易成功，但注意要将囊胚内细胞团均等分割；如需对初期胚胎进行性别鉴定，则需要获取胚胎细胞，囊胚期已经出现内细胞团和滋养层两类细胞，滋养层细胞后来发育成胎膜和胎盘，所以宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定。
【分析】1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
（1）卵母细胞的采集和培养：①主要方法是：用促性腺激素处理使其超数排卵，然后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，叫活体采卵
（2）精子的采集和获能：①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。
（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
2、胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。
4、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行分割，要注意将内细胞团均等分割。如需对胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定。
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