1、基因工程的工具
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课件23张PPT。基因工程概念辨析狭义的遗传工程：基因工程或重组DNA技术或DNA重组技术或转基因技术
广义的遗传工程：把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体或DNA等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达基因工程诞生的理论基础DNA是遗传物质的发现
DNA双螺旋结构的确立
遗传信息传递方式的认定基因工程的原理基因重组
跨越物种的界限
能定向改造生物（定向变异）
不能造就新的物种基因工程诞生的技术保障限制性核酸内切酶的发现
DNA连接酶的发现
质粒载体的发现基因工程的基本工具准确切割DNA的工具（“分子手术刀”）
DNA片段的连接工具（“分子缝合针”）
基因转移工具（“分子运输车”） 基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶。4000种。形成两个黏性末端一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 限制酶切割DNA后形成的末端——黏性末端是如何形成的？重播什么叫黏性末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。想一想为什么说限制性核酸内切酶具有专一性？
2、基因的针线──DNA连接酶切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接，你觉得可以用什么酶？DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？3、基因进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入细胞的工具就是载体。作为载体的必要条件能自我复制
有切割位点
能与目的基因结合
能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达；
有遗传标记基因
对受体细胞无害
比较容易得到常用的载体—质粒主要存在于细菌细胞内的一种能自我复制的环状双链DNA分子，能稳定且独立的存在于染色体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染色体上。
现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的，常含抗生素抗性基因，是重组DNA技术中重要的工具。 练习在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ）
同种限制酶 B. 两种限制酶
同种连接酶 D. 两种连接酶A不属于质粒被选为基因运载体的理由是
A、能复制 （ ）
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNAD练习3) 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ）
A、人工合成目的基因
B、目的基因与运载体结合
C、将目的基因导入受体细胞
D、目的基因的检测和表达C练习标记基因已知效应的基因，能够使个体具备特定的特征并且通过生理学、形态学、生物化学或分子生物学检测能够发现其存在的基因。
选择标记基因主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因，这种基因在执行其选择功能时，通常存在检测慢（蛋白酶作用需要时间）、依赖外界筛选压力（如抗生素、除草剂）等缺陷。
报告标记基因则是指其编码产物能够被快速测定、且不依赖于外界压力的一类基因。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因（cat）、荧光素酶基因（luc）、β-葡萄糖苷酸酶基因（gus）等。
广义的遗传工程：把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体或DNA等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达基因工程诞生的理论基础DNA是遗传物质的发现
DNA双螺旋结构的确立
遗传信息传递方式的认定基因工程的原理基因重组
跨越物种的界限
能定向改造生物（定向变异）
不能造就新的物种基因工程诞生的技术保障限制性核酸内切酶的发现
DNA连接酶的发现
质粒载体的发现基因工程的基本工具准确切割DNA的工具（“分子手术刀”）
DNA片段的连接工具（“分子缝合针”）
基因转移工具（“分子运输车”） 基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶。4000种。形成两个黏性末端一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 限制酶切割DNA后形成的末端——黏性末端是如何形成的？重播什么叫黏性末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。想一想为什么说限制性核酸内切酶具有专一性？
2、基因的针线──DNA连接酶切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接，你觉得可以用什么酶？DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？3、基因进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入细胞的工具就是载体。作为载体的必要条件能自我复制
有切割位点
能与目的基因结合
能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达；
有遗传标记基因
对受体细胞无害
比较容易得到常用的载体—质粒主要存在于细菌细胞内的一种能自我复制的环状双链DNA分子，能稳定且独立的存在于染色体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染色体上。
现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的，常含抗生素抗性基因，是重组DNA技术中重要的工具。 练习在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ）
同种限制酶 B. 两种限制酶
同种连接酶 D. 两种连接酶A不属于质粒被选为基因运载体的理由是
A、能复制 （ ）
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNAD练习3) 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ）
A、人工合成目的基因
B、目的基因与运载体结合
C、将目的基因导入受体细胞
D、目的基因的检测和表达C练习标记基因已知效应的基因，能够使个体具备特定的特征并且通过生理学、形态学、生物化学或分子生物学检测能够发现其存在的基因。
选择标记基因主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因，这种基因在执行其选择功能时，通常存在检测慢（蛋白酶作用需要时间）、依赖外界筛选压力（如抗生素、除草剂）等缺陷。
报告标记基因则是指其编码产物能够被快速测定、且不依赖于外界压力的一类基因。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因（cat）、荧光素酶基因（luc）、β-葡萄糖苷酸酶基因（gus）等。