(共27张PPT)
2001年2月2日,杭州西湖区西溪路某公司附近发生一起杀人分尸案。现场只发现了两块非常细小的尸块,此外并未留下任何痕迹。由于获得的DNA片段过少,未能证实这两块尸块到底是不是同一人的。
在本案中, PCR仪器起到了什么作用?
技术人员DNA片段送到刑侦支队利用一种叫PCR的仪器获得了大量的DNA系列。这为后来的鉴定和同一认定开启了大门。8天后,凶犯杨某被抓获归案。
使DNA进行大量复制
第3节 DNA的复制
最早提出的DNA复制模型有两种:
一、对DNA复制的推测
1、全保留复制:新复制出的分子直接形成,完全没有旧的部分;
2、半保留复制:形成的分子一半是新的,一半是旧的;
复制一次
复制一次
一、对DNA分子复制的推测
半保留复制
全保留复制
考点三、DNA分子复制
沃森和克里克推测是半保留复制模型
这些观点各有不同,如何来证明哪个观点是正确的?
只能用实验来证明。
你打算如何设计实验来探究DNA是如何复制的?
1、从结果入手:
若子代DNA两条链___________________________,为半保留复制
若子代DNA两条链_____________________________,为全保留复制
都是母链或都是子链
一条母链一条子链
2、如何区分母链和子链
复制一次
复制一次
红色为母链
蓝色为子链
验证子代DNA两条链的来源
2、如何区分母链和子链
同位素标记法
密度梯度离心
3、如何将不同标记的DNA分开呢?
6
提取DNA,进行密度梯度离心
15N标记母链,14N标记子链
复制一次
复制一次
红色为母链
蓝色为子链
选取15N作为标记(15N为14N的同位素)
4、若以大肠杆菌为原料,如何让亲代DNA获得15N标记?
5、如何让子代DNA获得14N标记?
将大肠杆菌放入含15NH4CL培养若干代
将上述亲代大肠杆菌转入含14NH4CL培养基中
大肠杆菌 细胞
材料
大肠杆菌
分裂快,约20分钟分裂一次
子一代:
子二代:
亲 代:
15N/14N-DNA (全部)
14N/14N-DNA(1/2)
15N/14N-DNA(1/2)
15N/15N-DNA (全部)
3
演绎推理一
亲代DNA分子
半 保 留
二.DNA复制方式的验证
(1)半保留复制实验结果
全重
全中
14N/14N
15N/14N
15N/15N
世代 0 1 2
轻
中
重
结果:三条带
1/2轻1/2中
子一代:
子二代:
亲 代:
15N/15N-DNA (1/2)
14N/14N-DNA(3/4)
15N/15N-DNA(1/4)
15N/15N-DNA (全部)
3
演绎推理二
亲代DNA分子
全 保 留
二.DNA复制方式的验证
14N/14N-DNA (1/2)
(2)全保留复制实验结果
全重
14N/14N
15N/14N
15N/15N
世代 0 1 2
轻
中
重
结果:两条带
1/2轻1/2重
3/4轻1/4重
重带(下部)
15N//15N
中带(中间)
15N//14N
轻带(上部)
14N//14N
中带(中间)
15N //14N
提出假说
演绎推理
验证假说
假说演绎
(1)DNA的复制是半保留复制
(2)子代DNA可能的情况及如何设计实验验证这种现象
(3)通过实验进行验证
小结
得出结论
问题:
若将1个全部被15N标记的DNA分子放入含14N的培养基中培养,则复制n次后:
1.子代DNA分子总数为_______;
2.子代中含15N的DNA分子数为_______;
3.子代中含14N的DNA分子数为_______;
4.子代中只含15N的DNA分子数为_______;
5.子代中只含14N的DNA分子数为_______;
6.子代中含15N的DNA分子数占总数的_______ 。
2n
2
2n
0
2n-2
2/2n
1/2n-1
DNA的复制为半保留复制,一个DNA分子复制n次,则有:
(1)子代DNA分子数为:2n个。
①无论复制多少次,含有15N的DNA始终是2个。
②含14N有的有2n个,只含14N的有(2n-2)个,做题时看准是“含”还是“只含”。
(2)子代DNA分子总链数为: 2n╳2=2n+1条。
①无论复制多少次,含15N的链始终是2条。做题时应看准是“DNA分子数”还是“链数”。
②含14N的链数是 :(2n+1-2)条。
规律:一个15N/15N-DNA连续复制n次后:
①DNA分子总数:
脱氧核苷酸链数:
②含15N的DNA分子数是:
含15N的脱氧核苷酸链数:
③只含15N的DNA分子数是:
④含14N的DNA分子数是:
含14N的脱氧核苷酸链数:
⑤只含14N的DNA分子数是:
⑥既含有14N又含15N的杂种DNA分子数是:
2个
2n个
0个
2个
2n-2个
2n+1-2条
2条
2n+1条
2n个
:解旋酶催化
解旋
模板
(在DNA聚合酶的催化下,利用游离的脱氧核苷酸进行)
复制
:以母链为模板进行碱基配对
母链(旧链)
子链(新链)
:组成
复制后的DNA
同时进行
复制过程
①解旋
②复制子链
③组合成子代DNA
解旋:
碱基配对:
(复制)
螺旋化:
DNA利用能量,在解旋酶的作用下,把两条螺旋的双链解开。
以解开的每一段母链为模板,在DNA聚合酶等酶的作用下,利用细胞中游离的4种脱氧核苷酸为原料,按碱基互补配对原则,各自合成与母链互补的一段子链。
随着模板链的解旋,新合成的子链不断延伸。同时,每条新链与对应的模板链盘绕成双螺旋结构。一个DNA形成两个完全相同的子代DNA分子。
三、DNA分子复制的过程
阅读P.54 第1-5段,思考下列问题:
1.DNA复制的概念是什么?
2.DNA复制发生在什么时期?
3.DNA复制发生的场所在哪里?
4、DNA复制的条件有哪些?
5、DNA复制的过程包括几步?
6. DNA复制的特点是什么?
7. DNA复制的结果?
9、复制的生物学意义?
8、DNA复制为何能保持如此精确?
10、影响DNA复制的外界条件有哪些?
1.概念:
2.时间:
总结:DNA分子复制的过程
是指以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。
有丝分裂的间期和减数第一次分裂的间期
3.场所:
4、条件:
(1) 模板:
(2) 原料:
(3) 酶:
(4) 能量: ATP (呼吸作用提供)
亲代DNA的两条链(两条母链)
四种脱氧核苷酸
解旋酶、 DNA聚合酶等
真核生物(在细胞核,线粒体,叶绿体)
原核生物(细胞质)
DNA病毒(宿主细胞)都能进行DNA复制
①解旋:
②合成子链:
③形成子代DNA:
5、过程:
边解旋边复制
6. 特点:
半保留复制
7. DNA复制的结果:
1DNA→2DNA
能量,解旋酶,双链解开
模板,四种脱氧核苷酸、碱基互补配对原则
每一条子链与对应的母链盘旋成双螺旋结构
9、复制的生物学意义:
高
原因:
①DNA具有独特的双螺旋结构,能为复制提供模板
②碱基具有互补配对的能力,能够使复制准确无误。
8、复制的精确性:
将遗传信息从亲代传给了子代,从而保持了遗传信息的连续性
10、影响DNA复制的外界条件
A
C
T
T
G
A
C
G
A
T
G
A
A
C
T
G
C
T
A
C
T
T
G
A
C
G
A
T
G
A
A
C
T
G
C
T
T
G
A
A
C
T
G
C
T
A
C
T
T
G
A
C
G
A
复制
染色体数目不变
DNA数目加倍
DNA复制与染色体复制的关系:
(1)复制n次之后消耗的脱氧核苷酸数:
①若一亲代DNA分子含有某种脱氧核苷酸m个,经过n次复制需要消耗该脱氧核苷酸数为m·(2n-1)个。
②第n次复制所需该脱氧核苷酸数为m·2n-1。
(2)一定数量的碱基对所能构成的DNA分子种类=4n(n为碱基对数)
规律
THANKS