高考生物二轮重点讲练：第17讲 基因工程和细胞工程(共111张PPT)
文档属性
| 名称 | 高考生物二轮重点讲练：第17讲 基因工程和细胞工程(共111张PPT) |  | |
| 格式 | ppt | ||
| 文件大小 | 6.7MB | ||
| 资源类型 | 试卷 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2023-02-01 11:26:44 | ||
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文档简介
(共111张PPT)
第17讲 基因工程和细胞工程
DNA连接酶
基因表达载体的构建
基因
细胞的全能性、细胞膜的流动性
细胞增殖
动物细胞核的全能性
给小鼠注射抗原
产生专一抗体的杂交瘤细胞
√
√
×
√
√
×
×
×
×
√
√
×
×
√
×
×
×
×
×
√
√
×
ＥｃｏＲⅠ和ＰｓｔⅠ
ＥｃｏＲⅠ、ＳｍａⅠ、ＰｓｔⅠ、ＥｃｏＲ Ｖ
磷酸二酯键
自我复制
一个至多个限制酶切割位点
用含某种抗生素的培养基培养宿主细胞，能够增殖的即为含有质粒载体的宿主细胞
一段有特殊结构的ＤＮＡ片段，位于基因的首端，是ＲＮＡ聚合酶识别和结合的部位
④②③①
热稳定ＤＮＡ聚合酶（或Ｔａｑ酶）
延伸
引物通过碱基互补配对与单链ＤＮＡ结合
病原菌ＤＮＡ
在生物体外大量快速扩增特定ＤＮＡ片段的技术
从基因文库中获取、人工合成
酶解法、氯仿抽提之后离心
感受态
抗原—抗体杂交法
不能获得肌醇或肌醇产量较低
基因的结构
ＥｃｏＲⅠ、ＢａｍＨⅠ
ＳｍａⅠ会破坏目的基因
鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来
Ｔ-ＤＮＡ
染色体ＤＮＡ中
再分化
人工诱导染色体数目加倍（或用秋水仙素处理）
显微注射法
Ｓａｕ3ＡⅠ
启动子和终止子
氨苄青霉素
ＡＣＴＡＧＧＴＧＡＴＣＣ（或ＣＣＴＡＧＴＧＧＡＴＣＡ）
都不能
桑椹胚或囊胚
人的胃液呈酸性；肠道细胞没有与有毒多肽结合的特异性受体
Ｔ-ＤＮＡ
染色体的ＤＮＡ
使Ｂｔ毒蛋白基因的遗传特性得以稳定维持和表达
无菌
分化
诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需激素种类及比例不同
抗虫接种
热稳定ＤＮＡ聚合酶（Ｔａｑ酶）
荧光标记的新冠病毒核酸探针
4
使热稳定ＤＮＡ聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸
试剂盒中的原料（引物、探针）数量一定，超出一定的循环数后，荧光标记的“杂交双链”不再增加
阳
甲样本中的新冠病毒核酸含量更高，达到阈值所需的循环数更少
定期更换培养液
特异性强、灵敏度高、可大量制备
Ｃ→Ｂ→Ｅ→Ｄ→Ａ
利用ＤＮＡ在不同浓度的ＮａＣｌ溶液中溶解度的不同，去除杂质
析出并获得较纯净的ＤＮＡ
ＤＮＡ不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精
二苯胺
沸水浴加热
蓝色
洗涤剂
溶解细胞膜
羊血含ＤＮＡ太少（或成熟的红细胞没有细胞核）
限制性核酸内切酶（或限制酶）
磷酸二酯键
清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成损伤
体细胞分化程度高，细胞核全能性较低
细胞体积小、细胞核大、核仁明显
发育的全能性
Ｂ
取克隆动物Ａ，提取其肝脏研磨液，与Ｍ蛋白的单
克隆抗体进行抗原—抗体杂交实验，如果出现抗原—抗体凝集反应，那么Ｍ基因没有失活；如果没有出
现抗原—抗体的凝集反应，那么Ｍ基因已经失活
诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒Ａ抗体的Ｂ淋巴细胞
取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液
选择培养基
只有杂交瘤细胞能够生存
抗原与抗体的反应具有特异性
将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养
全能性（或形成完整植株所需的全部基因）
形成层容易诱导形成愈伤组织
诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的激素的种类及比例不同
分化（或再分化）
诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
遗传特性
无性
不同种植物
纤维素酶、果胶
离心、振动、电激
融合的杂种细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光
再生出新的细胞壁
可克服远缘杂交不亲和的障碍
新生营养芽细胞分裂能力强、分化程度低，容易诱导形成愈伤组织
脱分化
再分化
快
保持植物原有的遗传特性
秋水仙素
龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）
限制酶和ＤＮＡ连接
农杆菌转化法
在适宜的条件下，肝癌细胞能够无限增殖；肝癌细胞的形态结构发生显著变化；肝癌细胞的表面发生了变化
蛋白质
多数细胞生存的适宜ｐＨ为7．2～7．4，而胃蛋白酶作用的适宜ｐＨ约为2，胃蛋白酶在此环境中没有活性
幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝
分裂旺盛，老龄动物的细胞则相反（或一般来说，幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培养）
Ｏ2
供细胞代谢利用
基因表达载体
Ｃａ2+（或ＣａＣｌ2）
ＨＡＴ培养基
淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，故不能在ＨＡＴ
培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在ＨＡＴ培养基中因ＤＮＡ合成途径被氨基喋呤阻
断而不能进行ＤＮＡ复制，而不生长
标记
②
双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞
治疗疾病
细胞代谢产物的积累
防止培养过程中被污染
显微注射
卵细胞膜与透明带
10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型
卵母细胞中含有的细胞质成分能促进细胞核全能性的表达；卵母细胞体积大，易操作
将动物的一个细胞的细胞核移入去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个
新的胚胎最终发育为动物个体
体细胞分化程度高
不变
第17讲 基因工程和细胞工程
DNA连接酶
基因表达载体的构建
基因
细胞的全能性、细胞膜的流动性
细胞增殖
动物细胞核的全能性
给小鼠注射抗原
产生专一抗体的杂交瘤细胞
√
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×
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ＥｃｏＲⅠ和ＰｓｔⅠ
ＥｃｏＲⅠ、ＳｍａⅠ、ＰｓｔⅠ、ＥｃｏＲ Ｖ
磷酸二酯键
自我复制
一个至多个限制酶切割位点
用含某种抗生素的培养基培养宿主细胞，能够增殖的即为含有质粒载体的宿主细胞
一段有特殊结构的ＤＮＡ片段，位于基因的首端，是ＲＮＡ聚合酶识别和结合的部位
④②③①
热稳定ＤＮＡ聚合酶（或Ｔａｑ酶）
延伸
引物通过碱基互补配对与单链ＤＮＡ结合
病原菌ＤＮＡ
在生物体外大量快速扩增特定ＤＮＡ片段的技术
从基因文库中获取、人工合成
酶解法、氯仿抽提之后离心
感受态
抗原—抗体杂交法
不能获得肌醇或肌醇产量较低
基因的结构
ＥｃｏＲⅠ、ＢａｍＨⅠ
ＳｍａⅠ会破坏目的基因
鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来
Ｔ-ＤＮＡ
染色体ＤＮＡ中
再分化
人工诱导染色体数目加倍（或用秋水仙素处理）
显微注射法
Ｓａｕ3ＡⅠ
启动子和终止子
氨苄青霉素
ＡＣＴＡＧＧＴＧＡＴＣＣ（或ＣＣＴＡＧＴＧＧＡＴＣＡ）
都不能
桑椹胚或囊胚
人的胃液呈酸性；肠道细胞没有与有毒多肽结合的特异性受体
Ｔ-ＤＮＡ
染色体的ＤＮＡ
使Ｂｔ毒蛋白基因的遗传特性得以稳定维持和表达
无菌
分化
诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需激素种类及比例不同
抗虫接种
热稳定ＤＮＡ聚合酶（Ｔａｑ酶）
荧光标记的新冠病毒核酸探针
4
使热稳定ＤＮＡ聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸
试剂盒中的原料（引物、探针）数量一定，超出一定的循环数后，荧光标记的“杂交双链”不再增加
阳
甲样本中的新冠病毒核酸含量更高，达到阈值所需的循环数更少
定期更换培养液
特异性强、灵敏度高、可大量制备
Ｃ→Ｂ→Ｅ→Ｄ→Ａ
利用ＤＮＡ在不同浓度的ＮａＣｌ溶液中溶解度的不同，去除杂质
析出并获得较纯净的ＤＮＡ
ＤＮＡ不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精
二苯胺
沸水浴加热
蓝色
洗涤剂
溶解细胞膜
羊血含ＤＮＡ太少（或成熟的红细胞没有细胞核）
限制性核酸内切酶（或限制酶）
磷酸二酯键
清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成损伤
体细胞分化程度高，细胞核全能性较低
细胞体积小、细胞核大、核仁明显
发育的全能性
Ｂ
取克隆动物Ａ，提取其肝脏研磨液，与Ｍ蛋白的单
克隆抗体进行抗原—抗体杂交实验，如果出现抗原—抗体凝集反应，那么Ｍ基因没有失活；如果没有出
现抗原—抗体的凝集反应，那么Ｍ基因已经失活
诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒Ａ抗体的Ｂ淋巴细胞
取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液
选择培养基
只有杂交瘤细胞能够生存
抗原与抗体的反应具有特异性
将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养
全能性（或形成完整植株所需的全部基因）
形成层容易诱导形成愈伤组织
诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的激素的种类及比例不同
分化（或再分化）
诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
遗传特性
无性
不同种植物
纤维素酶、果胶
离心、振动、电激
融合的杂种细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光
再生出新的细胞壁
可克服远缘杂交不亲和的障碍
新生营养芽细胞分裂能力强、分化程度低，容易诱导形成愈伤组织
脱分化
再分化
快
保持植物原有的遗传特性
秋水仙素
龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）
限制酶和ＤＮＡ连接
农杆菌转化法
在适宜的条件下，肝癌细胞能够无限增殖；肝癌细胞的形态结构发生显著变化；肝癌细胞的表面发生了变化
蛋白质
多数细胞生存的适宜ｐＨ为7．2～7．4，而胃蛋白酶作用的适宜ｐＨ约为2，胃蛋白酶在此环境中没有活性
幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝
分裂旺盛，老龄动物的细胞则相反（或一般来说，幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培养）
Ｏ2
供细胞代谢利用
基因表达载体
Ｃａ2+（或ＣａＣｌ2）
ＨＡＴ培养基
淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，故不能在ＨＡＴ
培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在ＨＡＴ培养基中因ＤＮＡ合成途径被氨基喋呤阻
断而不能进行ＤＮＡ复制，而不生长
标记
②
双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞
治疗疾病
细胞代谢产物的积累
防止培养过程中被污染
显微注射
卵细胞膜与透明带
10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型
卵母细胞中含有的细胞质成分能促进细胞核全能性的表达；卵母细胞体积大，易操作
将动物的一个细胞的细胞核移入去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个
新的胚胎最终发育为动物个体
体细胞分化程度高
不变
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