山东省青岛市名校2022-2023学年高三上学期11月期中考试生物学试题 Word版无答案

2022—2023 学年第一学期期中考试
——高三试题 (生物)
第 Ⅰ卷 (选择题 共 45 分)
一、单项选择题：本题 15 小题，每题 2 分，共 30 分。每小题只有一项符合要求。
1 ．细胞内的分子伴侣可识别并结合含有短肽序列 KFERQ 的目标蛋白，从而形成复合体，该复合体 与溶酶体膜上的受体 L 结合后， 目标蛋白进入溶酶体被降解。该过程可通过降解α-酮戊二酸合成酶 来调控细胞内α-酮戊二酸的含量，从而促进胚胎干细胞分化。下列说法错误的是 ( )
A ．α-酮戊二酸合成酶中可能含有短肽序列 KFERQ
B ．细胞内分子伴侣与目标蛋白的结合遵循碱基互补配对原则
C ．胚胎干细胞分化期间，受体 L 的相关基因的表达比较旺盛
D ．α-酮戊二酸合成酶的含量升高不利于胚胎干细胞的分化
2 ．炎症反应是临床常见的一个病理过程,可以发生于机体各部位的组织和器官。炎症状态下，损伤 或濒死细胞可释放大量 ATP 到细胞外，作用于靶细胞膜上的 P2X7 受体，促进靶细胞产生并分泌细 胞因子等物质，促进炎症反应。一种纳米抗体可以阻断炎症并减轻疼痛，其作用机理如图。下列分 析错误的是 ( )
A ．图中ATP 作用的靶细胞可能是辅助性 T 细胞
B ．坏死细胞释放大量 ATP ，使靶细胞内渗透压降低
C．纳米抗体可以减少 ATP 与 P2X7 受体结合的机会
D．ATP 是人体细胞的直接能源物质,也是一些细胞的 调节类物质
3．在有丝分裂中期，若出现单附着染色体 (染色体的着丝粒只与一侧的纺锤丝相连，如图所示)， 细胞将延缓后期的起始，直至该染色体与另一极的纺锤丝相连，并正确排列在赤道板上。此过程 受到位于前期和错误排列的中期染色体上的 MAD2 蛋白的监控，正确排列的中期染色体上没有 MAD2 蛋白。用玻璃微针勾住单附着染色体，模拟施加来自对极的正常拉力时，细胞会进入分裂 后期。下列说法错误的是 ( )
A ．细胞分裂能否进入到后期与来自两极纺锤丝的均衡拉力有关
B ．当所有染色体上的 MAD2 蛋白都消失后细胞才能进入分裂后期
C ．癌细胞的染色体排布异常时仍然能继续分裂可能与监控缺失有关
D ．MAD2 蛋白功能异常，细胞将在染色体错误排列时停止在分裂中期
4 ．研究人员用小鼠进行实验，发现卵母细胞减数分
裂时，同源染色体着丝粒大小有所不同，着丝粒较大
的染色体更易与酪氨酸化(Tyr)纺锤丝分离，并与去
酪氨酸化(dTyr)的纺锤丝结合，从而有更多的机会进
入卵细胞(如图) 。下列说法错误的是( )
A ．图示过程发生在减数分裂 Ⅰ后期，同源染色体进行分离
B ．图中细胞分裂后，有 dTyr 纺锤丝微管的一端将形成次级卵母细胞
C ．图中同源染色体分别向细胞的两极移动需要纺锤丝的牵引
D ．与卵细胞同时形成的极体中着丝粒小的染色体较多
5．果蝇的灰身与黑身是一对相对性状(相关基因用 B、b 表示) 、刚毛与截毛是另一 对相对性状(相关基因用 E 、e 表示) 。为探究两对相对性状的遗传规律，进行如下 实验。提示：如图为果蝇 X、Y 染色体同源区段( Ⅰ 区段)和非同源区段(Ⅱ、Ⅲ区段)， Ⅰ 、 Ⅱ 、Ⅲ区段上基因所控制性状的遗传均为伴性遗传。
组别 亲本组合 F1 表型 F2 表型及比例
实验一 灰身刚毛(♀)× 黑身截毛(♂) 灰身刚毛 灰身 灰身 灰身 黑身 黑身 黑身 刚毛 刚毛 截毛 刚毛 刚毛 截毛 ♀ ♂ ♂ ♀ ♂ ♂ 6 ∶ 3 ∶ 3 ∶ 2 ∶ 1 ∶ 1
实验二 灰身刚毛(♂)× 黑身截毛(♀) 灰身刚毛 灰身 灰身 灰身 黑身 黑身 黑身 刚毛 刚毛 截毛 刚毛 刚毛 截毛 ♂ ♀ ♀ ♂ ♀ ♀ 6 ∶ 3 ∶ 3 ∶ 2 ∶ 1 ∶ 1
下列选项不正确的是 ( )
A ．根据实验，可以推断果蝇灰身性状的遗传方式为常染色体显性遗传
B ．果蝇这两对相对性状的遗传遵循基因的自由组合定律
C ．实验二 F2 的灰身刚毛果蝇中，杂合子所占比例为 8/9
D ．实验一和实验二中 F1 雄果蝇的基因型相同
6 ．MPP-9 是一种明胶酶，能促进肿瘤细胞的浸润、转移。科研人员通过人工合成与 MPP-9 基因互 补的双链 RNA ，利用脂质体转入低分化胃腺癌细胞中，干扰细胞中 MMP-9 基因的表达，从而达到 一定的疗效，部分图示如下。据图分析，下列说法正确的是 ( )
A ．过程①需要的酶是解旋酶和RNA 聚合酶，需要的原料是核糖核苷酸
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B ．过程②表示转录形成的mRNA 通过核孔进入细胞
质，该过程不需要消耗能量，穿过 0 层核膜
C．过程③表示单链 RNA 与mRNA 互补配对，从而干
扰了基因表达的翻译过程，最终使得细胞中 MMP-9
的含量减少
D．上述技术具有广泛的应用前景，如用于乙型肝炎的
治疗时，可以先分析乙肝病毒基因中的碱基序列，据
此通过人工合成双链 DNA ，注入被乙肝病毒感染的细胞，可抑制乙肝病毒的繁殖
7 ． 以小鼠为研究对象，对两种菊苣提取物(T1 和 T2)降低血脂(TG ，甘油三酯)效果开展研究，结果 如图甲所示。图中 N 表示正常小鼠、M 表示不作处理的高血脂实验小鼠、M-T1 和 M-T2 分别表示 M 服用 T1 或 T2 后的实验小鼠。进一步研究发现，菊苣提取物对脂肪酸合成酶(FAS)和糖类代谢过 程中促进三羧酸循环的关键酶(GAPDH)的活性具影响作用，FAS 和 GAPDH 的部分作用机制如图乙
所示，图中虚线箭头代表多步反应。据图推测下列说法不正确的是 ( )
A ．菊苣提取物 T1 降低 TG 的效果更好
B ．GAPDH 活性升高，通过丙酮酸生成甘油可能增多
C ．菊苣提取物能提高 FAS 的活性
D ．图中可知糖类和脂质代谢过程是相互联系的
8．γ-氨基丁酸和某种局部麻醉药在神经兴奋传递过程中的作用机理如图 1 所示。此种局麻药单独使 用时不能通过细胞膜，如与辣椒素同时注射才会发生如图 2 所示效果。下列分析不正确的是 ( )
A ．膜外钠离子的浓度会影响神经细胞的兴奋性
B ．局麻药和γ-氨基丁酸的作用机理不一 致，前者不属于神经递质
C．γ-氨基丁酸与突触后膜的受体结合，促 进 Cl- 内流，抑制突触后膜产生兴奋
D．局麻药作用于突触后膜通道，阻碍 Na+ 外流，抑制突触后膜产生兴奋
9 ．帕金森病主要临床表现为静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态障碍，主要与黑质损伤、退 变和多巴胺合成减少有关。 甲图是帕金森病患者的脑与脊髓调节关系示意图，脑内纹状体与黑质之
间存在调节环路，其中“-”表示抑制。乙图是患者用
某种特效药后的效果图。下列叙述错误的是 ( )
A ．脑内纹状体和黑质之间相互抑制，为负反馈调节
B ．静止性震颤可能是 b 神经元释放乙酰胆碱过多导 致的
C ．黑质通过神经元 a 释放的多巴胺对脊髓运动神经 元起抑制作用
D ．使用该特效药后，多巴胺的合成、分泌增多，乙酰胆碱的合成、分泌减少
10．化感作用指植物通过向外分泌化学物质对其他植物产生的影响。制备入侵植物薇甘菊及近邻种 葛藤和鸡矢藤的叶水提液 (供体) ，分别处理三种植物幼苗 (受体) ，60 天后测定植株干重并计算化 感作用效应指数 (R=处理值/对照值- 1) ，相关叙述错误的是 ( )
A ．化感作用存在于植物种间和种内 B ．在薇甘菊种内存在化感促进作用
C ．鸡矢藤对其他种生长均表现为抑制 D ．化感作用影响植物群落的种类组成
11．田鼠是导致水稻减产的主要动物，为防治农田鼠害，科研人员选择若干大小相似、开放的稻田， 在边界上每隔一定距离设置适宜高度的模拟树桩，为处于食物链顶端的肉食性猛禽提供栖息场所。 设桩一段时间后，测得稻田中田鼠种群密度的变化如下图所示。下列选项表述错误的是 ( )
A．田鼠的种群密度是田鼠种群数量的基本特征，由出 生率和死亡率、迁入率和迁出率决定
B ．猛禽同化量的一部分在呼吸作用中以热能形式散 失，一部分流向下一营养级 ，剩下的流入分解者体内
C ．与曲线 II 相比， 曲线 Ⅰ所示环境中猛禽的密度可 能更大
D．b 点以后田鼠种群密度大幅上升与株冠形成有利于 躲避天敌和食物来源逐渐增多有关
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12．下图表示生态系统中各营养级能量的类型和去向 (d 表示该营养级未被利用的能量) 。下列叙 述正确的是 ( )
A ．在食物链中，各营养级获得能量的方式及能量的用途相同
B ．图中的 a 、b 、c 可分别代表每个营养级的呼吸量、流入下一营养级的能量和流入分解者的能量
C ．生产者到初级消费者的能量传递效率可表示为 b1/ ( a1＋b1 ＋c1＋d1 ) ×100%
D ．消费者从生产者摄取的能量数值可用b1 表示，且此部分能量存在于有机物中
13．DHA (二十二碳六烯酸) 俗称脑黄金，是神经系统细胞生长及维持的一种主要元素，是大脑和 视网膜的重要构成脂肪酸。DHA 藻油提取自海洋微藻，未经食物链的传递，相对更安全。现在某研 究欲以 A 、B 两种单细胞真核藻为亲本，利用细胞融合技术选育高产 DHA 融合藻。两种藻特性如 表所示。以获得的融合藻为材料进行甲、乙、丙三组实验，结果如柱形图所示。请据此分析，下列 叙述不正确的是 ( )
A ．获得的融合藻既能自养，又能产生 DHA ，还能较快速生长
B ．诱导融合前，需用纤维素酶分别处理 A 、B 两种藻， 目的是为了获得原生质体
C ．据柱形图分析，实际生产中往往采用甲组的培养条件，不仅可降低成本，也可防止杂菌生长
D ．单克隆抗体技术和高产 DHA 融合藻技术所使用的操作流程完全相同
14．如图为某同学构建的细胞工程知识框架。以下相关说法正确的 是 ( )
A ．图中②属于分子水平上的生物工程技术
B ．体外培养的动物细胞大多数都需要贴附于某些基质表面才能生 长增殖
C ．动物细胞培养液不需要定期更换，只需要定期添加营养物
D ．植物组织培养和动物细胞培养依据的原理都是细胞的全能性
15．在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。相关叙述正确的是 ( )
A ．在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具不可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌
B ．消毒是用强烈的理化方法杀死物体内外的所有微生物
C ．配制好培养基后，先高压蒸汽灭菌，后定容
D ．采用紫外线照射照射消毒前，适量喷洒石炭酸，可强化消毒效果
二、不定项选择题：本题共 5 小题，每题 3 分，共 15 分。在每小题给出的四个选项中，至少有一 项符合题目要求，全部选对得 3 分，选对但不全的得 1 分，有选错的得 0 分。
16．科学家通过实验观察到，正在进行光合作用的叶片突然停止光照后，短时间内会释放出大量的 CO2 ，这一现象被称为“CO2 的猝发” 。下图为适宜条件下某植物叶片遮光前 CO2 吸收速率和遮光后 CO2 释放速率随时间变化的曲线，图中 CO2 吸收或释放速率是指单位面积叶片在单位时间内吸收或 释放 CO2 的量，单位：μmolm-2 S- 1 。下列说法错误的是 ( )
A ．突然遮光，短时间内叶绿体中 C3 的含量会上升
B ．光照条件下该植物产生 CO2 的途径不只有细胞呼吸
C ．若降低光照强度，则图形 A 、B 的面积均变小
D ．该植物在光照条件下叶绿体固定 CO2 的速率为 10μmolm-2 S- 1
17．某植物为二倍体雌雄同株植物，花为两性花。现有四个该植物浅绿叶突变体 I 、II 、III 、IV ，这 些突变体的浅绿叶性状均为单基因隐性突变 (显性基因突变为隐性基因) 导致。为判断这四个突变 体所含的浅绿叶基因之间的位置关系，育种人员进行了杂交实验，杂交组合及 F1 叶色见下表。(注
意，实验过程中不考虑基因突变、染色体变异和互换) ，根据实验结果，下列说法错误的是 ( )
实验分组 母本 父本 F1 叶色 实验分组 母本 父本 F1 叶色
第 1 组 I II 浅绿 第 4 组 II III 绿
第 2 组 I III 绿 第 5 组 II IV 绿
第 3 组 I IV 绿 第 6 组 III IV 绿
A ．若将 I 与野生型纯合绿叶某植物杂交，F1 自交，F2 的表现型及比例为绿叶：浅绿叶=3 ：1
B ．实验结果表明，I 的浅绿叶基因与突变体 III 、IV 的浅绿叶基因属于非等位基因
C ．将第 4 、5 、6 三组实验的 F1 自交，若三组 F2 均为绿叶：浅绿叶=1 ：1 ，无法判断突变体 II 、III、 IV 的浅绿叶基因是否在同一对染色体上
D ．将第 4 、5 、6 三组实验的 F1 自交，若第 4 组 F2 中绿叶：浅绿叶=1 ：1 ；第 5 组和第 6 组 F2 中绿 叶：浅绿叶=9 ：7 ，则突变体 II 、III 的浅绿叶基因在同一对染色体上，IV 的浅绿叶基因在另外一对 染色体上
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18．每年的 7~9 月为某品种苹果果实的成熟期。研究人员在此期间，每隔 10 天采摘果实并测定其 中几种激素的含量，结果见下图。下列叙述不正确的是( )
A ．果实的成熟期细胞分裂素含量下降，使细胞有丝分裂减弱，细胞体积增大减缓
B ．果实的成熟与脱落酸和生长素的含量增加有关，也可能与乙烯的含量增加有关
C ．苹果果实体积增大与赤霉素、脱落酸、细胞分裂素促进细胞的分裂和伸长有关
D ．根据曲线可以推测出，生长素和脱落酸在苹果果实的成熟期中始终起主导作用
19．为了推进乡村振兴，科技人员在某村引进赤松茸，推广“稻菇轮作”露地栽培模式，如下图所示， 相关叙述正确的是 ( )
A ．当地农田生态系统中引进的赤松茸属于分解者，可 以实现该生态系统中能量的多级利用
B ．该模式沿袭了“无废弃农业”的传统，菌糠和秸秆由 废弃物变为了生产原料
C ．该模式充分利用了水稻秸秆中的能量，提高了能量 传递效率
D ．该模式既让土地休养生息，又增加了生态效益和经济效益，遵循了生态工程中的循环原理和整 体原理
20．某研究小组欲采用小型发酵罐 (如图) 进行果酒的主发酵中试研究。中试是指产品正式投产前 的试验，是产品在大规模量产前的较小规模试验。下列相关叙述合理的
是 ( )
A ．若要在夏季发酵果酒，常需要对罐体进行相应降温处理
B ．乙醇为挥发性物质，因此在发酵过程中的空气进气量不宜太大
C ．可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度，决定何时终止发酵
D ．为了缩短发酵时间，确保品质稳定，工业上大规模生产时，通常会 先通过微生物培养技术获得单一菌种，再将它们接种到物料中进行发酵
第Ⅱ卷 (非选择题 共 55 分)
三、非选择题：本部分 5 道小题，共 55 分。
21．(10 分) 农作物的生长受外界环境因素的影响很大，在长期进化过程中，农作物对各种胁迫具 有了一定的应激反应。科研工作者为探究干旱、冷害等胁迫对玉米幼苗代谢活动的影响进行了相关
实验，对胁迫期和恢复期进行了相关指标的测量，结果如图 1 所示。图 2 为光反应示意图。回答下 列问题：
(1) 图 1 对玉米幼苗进行了三种不同的处理，在恢复期，植物的净光合速率没有明显改变的组是 _____ 。研究表明，玉米幼苗对低温较敏感，单一冷害胁迫会对光系统 Ⅰ和光系统Ⅱ造成极大损伤， 请据此分析其，单一冷害胁迫条件下玉米幼苗的净光合速率下降的原因：_____。
(2) 据图 2 可知，类囊体内高浓度的 H+来源于_____过程。类囊体内产生的高浓度的 H+ 的作用是 _____ 。据图所示，能量的变化为 。
(3) 玉米叶肉细胞中的 P 蛋白是一种水通道蛋白， 由 P 基因编码，在干旱胁迫的条件下，其对水 分的吸收具有重要的调节功能。研究过程中，科研工作者得到 P 蛋白超量表达的突变株系 M 。正常 种植条件下，野生型玉米和突变株系 M 的气孔开放程度基本相同，但突变株系 M 具有较高的光合 效率，推测其叶绿体膜上超量表达的 P 蛋白能促进 CO2 的吸收。请设计实验来验证上述推测 (检测 方法不做要求，只写出检测指标即可)。
实验设计：____________________________________________。
预期实验结果：_____________________________________ 。
22．(12 分) 以一个有正常叶舌的高梁纯系种子为材料，进行辐射处理。处理后将种子单独隔离种 植，发现其中有两株(甲、乙)的后代分离出无叶舌突变株，且正常株与突变株的分离比例均接近 3 ∶ 1 ，这些叶舌突变型都能真实遗传。请回答：
(1) 辐射处理正常叶舌的高粱纯系种子，其后代分离出无叶舌突变株，该育种方式是________。该 过程需要用到大量的种子，其原因是基因突变具有__________和低频性。甲和乙的后代均出现 3 ∶1 的分离比，表明辐射处理最可能导致甲、乙中各有________(填“一”“二”或“多”)个基因发生突变。
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(2) 无叶舌突变基因在表达时，与基因启动部位结合的酶是__________________。如图是正常叶舌 基因中的部分碱基序列，其编码的蛋白质中部分氨基酸序列为“ … … 甲硫氨酸—丝氨酸—谷氨酸— 丙 氨酸—天冬氨酸—酪氨酸 … …” (甲硫氨酸的密码子是 AUG ，丝氨酸的密码子是 UCU 、UCC 、UCA、 UCG ，酪氨酸的密码子是 UAC 、UAU ，终止密码子是 UAA 、UAG 、UGA) 。研究发现，某突变株 的形成是由于该片段方框2 处的 C∥G 替换成了A∥T，结果导致基因表达时____________________。
(3) 将甲株的后代种植在一起，让其随机传粉，只收获正常株上所结的种子，若每株的受粉率和结 籽率相同，则其中无叶舌突变类型的比例为________。
(4) 现要研究甲、乙两株叶舌突变是发生在一对基因上，还是分别发生在独立遗传的两对基因上， 可选甲、乙后代的无叶舌突变株进行单株杂交，统计 F1 的表型及比例进行判断：
①若___________________________________________ ，则甲乙两株叶舌突变是发生在一对基因上；
②若______________________________________ ，则甲乙两株叶舌突变是发生在两对基因上。
23．(9 分) 2021 年，我国科学家在《自然》杂志上发表论文，证明针灸的现代化模式—— 电针刺小 鼠后肢的足三里 (ST36) 穴位，可在细菌多糖 (LPS) 引起的炎症反应中发挥抗炎作用，其神经生 理学机制如下。
(1) 低强度电针刺 ST36 通过激活迷走神经—— 肾上腺轴发挥抗炎作用，迷走神经是从脑干发出的 可参与调节内脏活动的神经，属于神经系统中的_____________ (中枢/外周) 神经系统。
(2) 研究发现针刺小鼠腹部天枢穴不能发挥抗炎作用，为探究其原因，科研人员利用敲除 PROKR2 感觉神经元的小鼠进行研究，确定 PROKR2 神经元是激活迷走神经—— 肾上腺通路的关键神经元， 支持该结论的实验结果是：针刺敲除 PROKR2 神经元小鼠的 ST36_____________ (能/不能) 激活 迷走神经—— 肾上腺通路。
(3) 为进一步验证针刺 ST36 的抗炎机制，科研人员通过遗传学手段获得在 PROKR2 神经元中特异 性表达光敏蛋白 C 的小鼠，通过蓝光光纤激活该神经元，检测相关指标如下图 1 图 2。
①光敏蛋白C 为光敏感离子通道蛋白，蓝光激活后阳离子_____________ ，PROKR2 神经元产生兴 奋，使肾上腺释放去甲肾上腺素 (NA) 等物质、激活淋巴细胞发生免疫反应。
②检测去甲肾上腺素 (NA)、促炎症因子 IL—6 的含量，结果如图 2 ，请简述针刺 ST36 发生抗 LPS 诱发的炎症反应的机制____。
③综上所述，电针刺 ST36 抑制LPS 诱发的炎症反应的结构路径是： 电针刺 ST36→_________→脊 髓→_____→迷走神经→ 肾上腺
(4) 从结构与功能的角度分析，针刺小鼠腹部天枢穴不能激活该通路进行抗炎反应可能的原因___。
24．(12 分) 在寻求降低大气中二氧化碳含量，实现人类社会永续发展的过程中，绿色植物因其独 特的代谢类型而被寄予厚望。
(1) 森林中的全部生物构成了一个______。绿色植物在生态系统的成分中属于________，它能通过 光合作用将大气中的碳存储在________ 中， 以减少大气中二氧化碳。
(2) 为研究乔木丰富度与森林碳存储能力间的关系，我国科学家选取 42 种乔木，在一片约 600 亩 的空地上设立了 566 个面积为 1 亩的样地，每个样地中随机种植植株数量相同，物种数目不同的乔 木，连续 5 年测定样地中的生物量 (干重) ，结果如图 1 和图 2。
①图 1 中各年份调查结果均显示，乔木丰富度越高，__________ ，且这种差异随年份的增加逐渐 增大。生物量的年增量与生物量总量随乔木丰富度水平变化的趋势__________ 。
②本研究表明，增加乔木丰富度可以__________ 。
③研究人员尝试用下图来解释上述结果出现的部分原因
请选取下列合适的选项填在上图中相应的位置上， 以使上图的逻辑自洽。
a ．样地乔木丰富度水平高b ．各类资源利用更充分
c ．不同生长周期的乔木搭配d ．喜阴与喜阳的乔木搭配
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e ．相对较高的乔木与相对较矮的乔木搭配 f．时间利用更充分
g ．垂直空间利用更充分h ．水平空间利用更充分
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i ．树种间存在“优势互补”的效应
(3) 达尔文在《物种起源》中介绍了 19 世纪初的一项类似实验，有人在一块土地上播种一个草种，
同时在另一块相像的土地上播种若干不同属的草种。最终，后一块土地上能生长出更多的植物，收 获的干草也更多。本实验与 (2) 中的研究相比，主要的不足有________ (请至少写出 2 点)
(4) 上述研究提醒我们在退耕还林、还草的具体操作过程中应__________ ，以实现保护生物多样 性和减少温室气体的双赢。
25．( 12 分) PCR 技术是一种用于放大扩增特定的DNA 片段的分子生物学技术，其最大的特点是 能将微量的 DNA 大幅增加。
【I】如果已知一小段 DNA 的序列，可采用 PCR 的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体 流程如图 1 (以 EcoR I 酶切为例) 所示。
(1) 步骤Ⅱ中所用的 DNA 连接酶的作用是催化形成____________ ，从而形成环状 DNA。
(2)步骤Ⅲ中的复性温度设定是成败的关键，温度过高会破坏______________________ 的碱基配对。
(3) 若下表所列为已知的 DNA 序列和设计的一些 PCR 引物，步骤Ⅲ选用的 PCR 引物必须是 __________ (填数字“①、②、③、④”)。
【II】我国在新冠疫情方面取得了显著的成效，但全球疫情形势仍然非常严峻，尤其是病毒出现了 新变异株——德尔塔、奥密克戎，更是威胁着全人类的生命健康。目前，可以运用PCR 技术进行检 测。
(4)新冠病毒核酸定性检测原理：先以病毒 RNA 为模板利用__________酶合成 cDNA，再通过 PCR 技术扩增相应的 DNA 片段，然后在扩增产物中加入特异的核酸探针。如果检测到特异的杂交分子 则核酸检测为阳性。此方法为 RT-PCR 技术。
(5) 如果探针是带有荧光标记的，即为“实时荧光 RT-PCR 技术” 。在 PCR 反应体系中，加入的荧 光探针与模板 DNA 的某条链互补结合，探针完整时，报告荧光基团发射的荧光信号被淬灭荧光基 团吸收。当子链延伸至探针处，探针被 TaqDNA 聚合酶降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离， 从而发出荧光 (如图2 所示) 。即每扩增 1 个 DNA 分子，就有 1 个荧光分子形成，实现了荧光信号 的累积与 PCR 产物形成完全同步。
①若最初该反应体系中只有 1 个 DNA 分子模板，进行第 4 次循环时，需要消耗荧光探针______个。
②检测时，荧光强度一般要达到或超过阈值才能确诊。若检测出现假阴性，推测可能的一个原因
。
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