(共25张PPT)
第3节 DNA的复制
第三章 基因的本质
沃森和克里克在发表DNA双螺旋结构的那篇著名短文的结尾处写道:“值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能的机制。”
思考
碱基互补配对原则暗示DNA的复制机制可能是怎样的?
目录
一、DNA半保留复制的实验证据
二、DNA复制的过程
三、DNA复制相关计算
一、DNA半保留复制的实验证据
最早提出的DNA复制模型有三种:
1.全保留复制:新复制出的分子直接形成,完全没有旧的部分;
复制一次
2.半保留复制:形成的分子一半是新的,一半是旧的;
复制一次
3.分散复制:新复制的分子中新旧都有,但分配是随机组合的
复制一次
关于DNA半保留复 制的假说
复制一次
沃森和克里克在提出DNA分子双螺旋结构后又提出DNA分子复制方式是半保留复制的假说
如何来证明这个观点是正确的呢?
只能用实验来证明
1958年,美国生物学家梅塞尔森和斯塔尔运用同位素标记技术,设计了一个巧妙的实验,证明DNA是通过半保留方式复制的。他们是如何设计实验的呢?请同学们自主学习教材P54,思考、讨论下列问题:
1.大肠杆菌首先是在什么培养液中培养的?然后又 马 转移到什么培养液中培养?
先在含有15NH4Cl的培养液中培养,又转移到有含14NH4Cl的普通培养液中培养
2.细胞分裂一次,提取DNA,离心。如果是半保留复制,离心后试管中应该出现几条带?各带在试管中的分布如何?如果是全保留复制或弥散复制,情况又将如何呢?
如果是半保留复制,离心后试管中只有一条带,位置居中;如果是全保留复制,离心后试管中出现两条带,一条带靠近试管底部,另一条带位置靠上;如果是弥散复制,离心后试管中只有一条带,位置居中
3.细胞再分裂一次,提取DNA,离心。如果是半保留复制,离心后试管中应该出现几条带?各带在试管中的分布如何?如果是全保留复制或弥散复制,情况又将如何呢?
如果是半保留复制,离心后试管中有两条带,一条位置居中,一条位置靠上;如果是全保留复制,离心后试管中有两条带,一条位置靠近试管底部,一条位置靠上;如果是弥散复制,可能出现4条带,位置靠上
4.实验结论是什么?
DNA是通过半保留的方式复制的
归纳总结
1.实验方法
同位素标记法、密度梯度离心法
2.实验过程
以含15NH4Cl的培养液来培养大肠杆菌,让大肠杆菌繁殖几代,再将大肠杆菌转移到含14NH4Cl的普通培养液中。在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA,制 将提取的DNA进行密度梯度离心,记录离心后试管中DNA的位置。
15N
14N
——密度大
——密度小
3、实验结果
大肠杆菌 在试管中的位置 DNA
亲代 下层 15N/15N-DNA
第1代 中层 15N/14N-DNA
第2代 中层、上层 中层15N/14N-DNA
上层14N/14N-DNA
第3代 中层、上层 中层15N/14N-DNA
上层14N/14N-DNA
3、实验结论
DNA复制为半保留复制
5. 假说—演绎过程分析
(1)提出假说:DNA复制是半保留复制
(2)演绎推理:子代DNA可能的情况及如何设计实验
亲 代
子一代
子二代
15N
15N
15N
15N
15N
15N
14N
14N
14N
14N
14N
14N
14N
14N
(3)验证假说:通过实验进行验证
大肠杆菌在含15NH4Cl的培养液中生长若干代
转移到含14NH4Cl的培养液中
15N/15N
DNA
亲 代
子一代
子二代
15N/14N
DNA
14N/14N
DNA
15N/14N
DNA
结论:
复制方式是半保留复制
二、DNA复制的过程
1.概念:
2.时间:
是指以亲代DNA为模板
合成子代DNA的过程。
细胞有丝分裂的间期和
减数第一次分裂的间期
3.场所:
真核生物:细胞核(主要)、线粒体、叶绿体
原核生物:拟核
病毒:活的宿主细胞
解旋酶,DNA聚合酶等。
酶:
模板:
4.条件:
(亲代DNA分子的)两条母链。
细胞中游离的4种脱氧核苷酸。
ATP。
能量:
原料:
解旋酶的作用位点:氢键
DNA聚合酶的作用位点:游离的脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键
解旋酶催化
解旋
模板
合成子链
以母链为模板进行碱基配对(在DNA聚合酶的催化下,利用游离的脱氧核苷酸进行)
母链(旧链)
子链(新链)
子代DNA:
同时进行
组成
形成新的DNA分子
作用:把单个脱氧核苷酸连接成链(形成磷酸二酯键)
复制过程
5.过程:
6.特点
(1)边解旋边复制(子链的延伸方向为5’→3’-端)
(2)半保留复制(即在子代双链DNA分子中,有一条链是亲代原有的链,另一条链则是新合成的)。
7.准确复制的原因
(1)DNA 独特的双螺旋结构,为复制提供了精确的模板;
(2)碱基互补配对,使复制准确无误。
8.结果
一个DNA分子形成两个完全相同的DNA分子。
9.意义
DNA通过复制,将遗传信息从亲代细胞传给子代细胞,从而保持了遗传信息的连续性。
三、DNA复制的相关计算
DNA的复制方式为半保留复制。若将一个被15N标记的DNA转移到含14N的培养液中培养(复制)n代,其结果分析如右图所示。
从图中可以得到如下规律:
(1)DNA分子数
①子n代DNA分子总数为2n个。
②含15N的DNA分子数为2个。
③含14N的DNA分子数为2n个。
④只含15N的DNA分子数为0个。
⑤只含15N的DNA分子数为(2n-2)个。
(2)脱氧核苷酸链数
①子代DNA中脱氧核酸链数=2n+1条。
②亲代(含15N)脱氧核酸链数=2条。
③新合成(含14N)的脱氧核酸链数=2n+1-2条。
(3)消耗的脱氧核苷酸数
①若一亲代DNA分子含有某种脱氧核酸m个,经过n次复制需要消耗该脱氧核昔酸数为m·(2n-1)个。
②若一亲代DNA分子含有某种脱氧核酸m个,在第n次复制时,共需消耗游离的该脱氧核昔酸m·2n-1个。
课后总结
一、DNA半保留复制的实验证据
二、DNA复制的过程
时间
场所
条件
原则
过程
特点
结果
意义
三、DNA复制相关计算
本节背诵内容
1、DNA复制的方式
2、DNA复制的时间
3、DNA复制的场所
4、DNA复制的条件
5、DNA复制的原则
6、DNA复制的过程
7、DNA复制的特点
8、DNA复制的结果
9、DNA复制的意义
10、子链的延伸方向
11、DNA能够准确复制的原因
12、解旋酶的作用位点
13、DNA聚合酶的作用位点