2023年3月份第1周 生物好题推荐
学校:___________姓名:___________班级:___________考号:___________
一、单选题
1、结肠癌是指起源于结肠黏膜上皮的恶性肿瘤,药物奥沙利铂可抑制肿瘤生长。香砂六君子汤出自《古今名医方论》,具有益气化痰、理气畅中的功效。为探究香砂六君子汤对患有结肠癌小鼠的调控作用,将小鼠结肠癌细胞经传代培养后,于裸鼠(无胸腺)颈部背侧皮下接种,构建肿瘤模型。建模成功后,将其随机均等分成5组,即模型组、阳性组(化疗药物奥沙利铂,1mg:kg)及香砂六君子汤低、中、高剂量组(5.4g·kg-1、10.8g·kg-1、21.6g·kg-1)。一段时间后,检测相关指标,部分结果见下表。下列相关叙述不正确的是( )
序号 组别 肿瘤质量(mg) 抑瘤率%
1 模型组 1.58 0
2 阳性组 0.75 52.53
3 香砂六君子汤低剂量组 1.02 35.44
4 香砂六君子汤中剂量组 0.74 53.16
5 香砂六君子汤高剂量组 0.5 68.35
A. 裸鼠作为实验对象,避免了自身免疫系统杀伤癌细胞干扰实验结果
B. 阳性组作为对照组,为其他实验组提供了抑制肿瘤效果的参照标准
C. 中剂量组结果表明,香砂六君子汤与奥沙利铂抑制肿瘤的机理相同
D. 低中高剂量组结果表明,香砂六君子汤抑制肿瘤的最适浓度不一定为21.6g·kg-1)
2、野生型水稻(2n=24)的穗色为绿穗(RR),科研人员在研究中获得了水稻紫穗(rr)植株突变体,为了对紫穗基因进行染色体定位,研究人员利用单体(2n-1)定位法对紫穗基因进行定位(假设水稻单体减数分裂I后期,未配对的染色体随机分配)。其方法是:以表型为野生型绿穗(RR)的植株为材料人工构建水稻的单体系(即仅丢失某一条染色体的水稻植株),将紫穗水稻(rr)与水稻单体系中的全部单体分别杂交,收获子代独立种植并观察穗色。据材料分析,下列叙述错误的是( )
A. 科学家需要构建的绿穗水稻的单体共有12种
B. 科学家构建的绿穗水稻的单体减数分裂时可形成12个四分体
C. 若子代全为绿穗,说明紫穗基因不位于该单体所缺少的染色体上
D. 若子代绿穗:紫穗约为1:1,说明紫穗基因位于该单体所缺少的染色体上
3、2022年12月2日晚,神舟十四号、神舟十五号航天员乘组进行在轨交接仪式,中国空间站正式开启长期有人驻留模式。到2024年国际空间站退役并坠毁时,中国有可能成为全球唯一拥有空间站的国家。航天员在太空失重环境会引起骨无机盐的代谢紊乱,从而引起骨质疏松。航天员工作任务重,消耗能量大,航天饮食必须有足够的蛋白质、糖类、脂质、无机盐等营养物质,以确保生命活动的正常进行。下列相关叙述错误的是( )
A. 煮熟以后的蛋白质类食物,仍能与双缩脲试剂产生紫色反应
B. 胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分,磷脂是构成细胞膜的重要成分
C. 食物中应富含钙等无机盐,同时适当补充鱼肝油,可在一定程度上预防骨质疏松
D. 若宇航员没有及时进食,血液中的葡萄糖含量低于正常值时,肝脏和肌肉中的糖原便分解产生葡萄糖及时补充
4、美国白蛾原产于北美,是重要的国际性检疫害虫,入侵后已对我国农林业生态系统造成了严重危害。美国白蛾的防治措施主要以人工、物理、生物和化学防治为主,以下关于防治措施解释错误的是( )
A. 利用频振式杀虫灯进行诱杀——特定的光波属于物理信息,能引诱美国白蛾
B. 喷洒高效灭虫剂氯氰菊酯——造成环境污染,会伤害美国白蛾天敌及其它昆虫
C. 释放寄生天敌周氏啮小蜂——降低环境容纳量,将美国白蛾数量控制在较低水平
D. 施用致病性强的苏云金杆菌制剂——产生Bt抗虫蛋白,可杀灭环境中的各类昆虫
5、“加法原理”和“减法原理”是实验设计过程中控制自变量的两种原理,下列叙述正确的是( )
A.艾弗里证明DNA是遗传物质的实验采用了“加法原理”
B.探究落叶是否在土壤微生物作用下腐烂的实验采用了“加法原理”
C.验证Mg是植物生活的必需元素实验采用了“减法原理”和“加法原理”
D.比较过氧化氢在不同条件下分解实验采用了“减法原理”
6、中心体由两个相互垂直的中心粒和周围的一些蛋白质构成。从横切面看,每个中心粒是由9组微管组成,微管属于细胞骨架。细胞分裂时,中心体也进行复制,结果每个子代中心粒与原中心粒成为一组新的中心体行使功能。中心粒能使细胞产生纤毛和鞭毛,并影响其运动能力,在超微结构的水平上调节着细胞的运动。下列关于中心体的叙述错误的是( )
A.中心体是由蛋白质构成的,不具备膜结构
B.中心体在分裂期复制,两个中心粒分别来自亲代和子代
C.中心体功能障碍,将影响动物细胞正常的有丝分裂
D.气管上皮细胞中心体异常,易引发慢性支气管炎
7、下列有关“骨架”或“支架”的叙述,错误的是( )
A.细胞膜和细胞器膜的基本支架都是磷脂和蛋白质
B.脱氧核糖和磷酸交替连接,排列在外侧,构成DNA分子的基本骨架
C.细胞骨架由蛋白质纤维构成,与细胞的分化、胞内运输、信息传递有关
D.单糖是以碳链作为基本骨架,多糖也是以碳链作为基本骨架
8、烟草的烟雾含有几千种化学物质,其中不少物质会影响减数分裂,影响精子和卵细胞的形成。下列关于精子和卵细胞及其形成的叙述,正确的是( )
A. 若烟雾中的某物质能阻止某对同源染色体分离,则精子或卵细胞中一定少一条染色体
B. 在减数分裂I和减数分裂II过程中都有同源染色体配对和着丝粒分裂现象
C. 一个精原细胞经减数分裂只能形成2种精细胞、4 个精细胞
D. 一个卵原细胞经减数分裂只能形成1种卵细胞、1个卵细胞
9、当细胞受到某些外界刺激后,细胞质基质中的蛋白质X会与细胞器膜上的抗凋亡蛋白发生作用,导致抗凋亡蛋白丧失了对细胞凋亡的抑制作用,引起细胞器功能的丧失和各种凋亡因子的释放,最终导致细胞凋亡。下列有关叙述正确的是( )
A.蛋白质X的合成过程中不会生成水
B.蛋白质X实质上是一种促凋亡蛋白,具有促进细胞凋亡的作用
C.蛋白质X的构象发生变化会直接破坏线粒体、核糖体等细胞器
D.凋亡因子引起细胞凋亡不利于机体维持内部环境的相对稳定
10、果蝇(2n=8)的染色体包括X、Y、II、III、IV,裂翅黑腹果蝇(L)以杂合子形式存在,裂翅基因(L)对野生型为显性,与之连锁的致死基因(s)为隐性,裂翅基因位点与隐性致死基因位点在遗传过程中完全连锁不交换,只有s和L基因同时为杂合时,其后代才能存活。下列叙述错误的是( )
A.通过裂翅与野生型正反交实验判断裂翅果蝇的基因是否位于性染色体上
B.假如裂翅基因位于III号染色体,裂翅雌雄果蝇自由交配所产生的F1中裂翅比例为1/4
C.假如裂翅基因位于II号染色体,野生型雄果蝇与裂翅雌果蝇杂交所产生的F1中裂翅比例为1/2
D.假如裂翅基因仅位于X号染色体,野生型雄果蝇与裂翅雌果蝇杂交所产生的F1中裂翅比例为1/3
二、实验题
11、“良药苦口”并非谬论。研究表明,苦味中药可以激活舌头上某些味觉细胞和肠道内某些分泌细胞表面的苦味受体(TAS2Rs),进而刺激肠道内分泌细胞(L细胞)分泌GLP1,可起到降低血糖的作用,广泛用于Ⅱ型糖尿病的防治。针对这一机理,某研究小组进行了系列实验。请回答下列问题:
(1)实验一:让实验小鼠口服苦参碱(苦味中药成分),结果发现正常实验小鼠分泌CLP-1,而敲除TAS2Rs基因的实验小鼠几乎不分泌GLP-1。
①有同学认为,该实验可证明舌头上存在TAS2Rs。你认同这一观点吗?请说明理由。___
②为进一步确定TAS2Rs存在的部位,可在实验一的基础上进行的实验是______________。
(2)实验二:已知苦参碱可刺激小鼠肠道内分泌细胞分泌GLP-1,为了验证“随苦参碱浓度增加促进GLP1释放作用有增强趋势”,设计实验如下:
①选取小鼠肠内分泌细胞进行体外培养,筛选获得(能接受苦参碱刺激并分泌GLP-1的)细胞株,并将筛选产物随机分为3组。
②___________________
③每隔一段时间测定三组培养液中GLP-1的含量的相对值,并分析结果。
(3)实验三:为了证实其他哺乳动物的TAS2Rs也有相似作用,可行的做法是从该种动物的基因文库中获取TAS2Rs基因,然后以__________的小鼠受精卵为受体细胞,导入该基因序列,检测发育出的小鼠相关指标的恢复程度。
(4)科学家构建模型是研究抽象生命现象常用的方法和手段。为了进一步研究胰岛B细胞,某研究小组构建了一个“类细胞”模型,它由外面的膜和内部的填充物(含细胞骨架和驱动蛋白等,作为运动的结构基础)构成。它能像活细胞一样自主移动和改变形态。该“类细胞”模型的类型属于__________模型。向该“类细胞”模型内部填充物添加ATP后,它即可像活细胞一样自主移动和改变形态的原因是_________。
三、多选题
12、大麦种子发芽时赤霉素诱发胚乳中淀粉分解,促进种子萌发,过程如图。下列叙述正确的是( )
A.赤霉素能促进细胞伸长,不能促进细胞分裂与分化
B.大麦种子萌发时,GA从胚移动到糊粉层,诱导α淀粉酶和β淀粉酶的合成
C. α淀粉酶和β淀粉酶一起催化淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,运至胚满足代谢需要
D.萌动的胚中赤霉素的合成、分泌增加与幼苗发育过程中旺盛的营养需求相适应
13、某昆虫的绿眼和白眼是受一对等位基因控制的相对性状,白眼基因是由于控制绿眼的基因中间缺失一段较长的脱氧核苷酸序列所致,且该对等位基因的长度已知。以绿眼雌昆虫与白眼雄昆虫为亲本进行杂交,绘制部分后代的系谱图(不考虑致死、突变和X、Y染色体同源区段的情况)。利用PCR及电泳技术确定白眼性状的遗传方式时,以Ⅱ-3为材料,仅扩增控制该对性状的完整基因序列,电泳检测PCR产物。下列叙述正确的是( )
A.眼色遗传有常染色体显性遗传、常染色体隐性遗传和伴X染色体隐性遗传3种可能
B.利用Ⅱ-1或Ⅱ-2或Ⅱ-4与Ⅱ-3杂交,观察子代表型均可确定白眼性状的遗传方式
C.白眼基因比绿眼基因短,可通过对Ⅱ-3PCR扩增的条带数量确定白眼性状的遗传方式
D.若PCR扩增后电泳的产物有两条显示带,则白眼性状的遗传为常染色体隐性遗传
14、造血干细胞的功能受细胞周期调控,细胞周期中三种蛋白质(P16、CDK、Cyclin)调控方式如图1科研人员探究黄芪多糖对衰老小鼠造血干细胞(HSC)细胞周期相关蛋白的影响,将生理状况相似的60只小鼠随机分成三组:模型组采用D-半乳糖皮下注射建立小鼠衰老模型;干预组在造模的基础上给予黄芪多糖灌胃;对照组和模型组给予等剂量生理盐水灌胃。细胞周期相关蛋白表达情况如图2。下列叙述正确的是( )
A.D-半乳糖可能通过增强衰老小鼠HSC中P16蛋白的表达,导致细胞停滞于G1期
B.黄芷多糖可能通过降低P16的表达来增加CDK的形成,促进HSC完成分裂对抗衰老
C.经黄芷多糖干预后衰老小鼠HSC中CDK和Cyclin的表达均增强,进入S期细胞比例增加
D.黄芷多糖可通过增强三种蛋白的表达延缓HSC衰老,可用于开发防治老年性疾病的药物
四、读图填空题
15、人们发现有机磷化合物能有效抑制生物体内的乙酰胆碱酯酶,从而表现出很好的杀虫、灭鼠效果,但是有机磷化合物会严重破坏生态环境。甲基对硫磷水解酶(mph)能特异性地与有机磷化合物结合,研究人员利用转基因技术实现了大肠杆菌高效表达甲基对硫磷水解酶(mph),如图所示。请根据基因工程过程回答以下问题:
(1)构建一株具有全细胞催化活性的大肠杆菌工程菌的关键步骤是要构建pET23a-gfp-mph-r的____构建pET23a-gfp-mph-r过程中应用____处理使之成为
感受态细胞。研究人员不直接将目的基因mph-r导入大肠杆菌的原因是____。
(2)图中T7启动子的功能为____gfp作为一种融合标签,能很好地提高蛋白的表达量,因此还添加了TEV蛋白酶切位点(TEVsite),其目的是____。
(3)为了筛选出具有目的基因的大肠杆菌,应将常规转化后的菌液涂布到含____的LB固体培养基上。
(4)测序成功的表达质粒转化大肠杆菌用SDS-PAGE电泳检测全细胞蛋白表达情况,如图所示,第4泳道为mph-r单独表达的表达情况,第5泳道为gfp单独表达的表达情况,请问:1至3泳道哪一个为融合gfp标签的mph-r蛋白?为什么?
___。
参考答案
1、答案:C
解析:A、裸鼠无胸腺,T淋巴细胞无发育场所,无T淋巴细胞不能进行特异性免疫,避免了自身免疫系统杀伤癌细胞干扰实验结果, A正确;
B、模型组作为空白对照组,阳性组为其他实验组提供了抑制肿瘤效果的参照标准,B正确;
C、中剂量组抑瘤率为53.16%,奥沙利铂抑瘤率为52.53%,香砂六君子汤与奥沙利铂抑制肿瘤的效果接近,抑制肿瘤的机理未知,C错误;
D、实验剂量未设置多组梯度,就表格组数香砂六君子汤抑制肿瘤的最适浓度未知,D正确。
故选C。
2、答案:B
解析:A、水稻有12对同源染色体,紫穗基因可能位于其中任意一对染色体上,故需要构建的绿穗水稻的单体共有12种,A正确;
B、由于单体少一条染色体,单体减数分裂时只能形成11个四分体+1条独立的染色体,B错误;
C、若子代全为绿穗,说明亲代绿穗水稻只产生了一种配子,推测紫穗基因不位于该单体所缺少的染色体上,C正确;
D、若子代绿穗:紫穗约为1:1,说明亲代绿穗水稻产生了两种配子,推测紫穗基因位于该单体所缺少的染色体上,D正确。
故选B。
3、答案:D
解析: A蛋白质类食物加热煮熟过程中,蛋白质空间结构发生改变,没有引起肽键断裂,因此能与双缩脲试剂产生紫色反应:B.固醇类物质包括胆固醇、性激素和维生素D等,胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分,磷脂是构成细胞膜的重要成分;C食物中应富含钙等无机盐,同时适当补充鱼肝油,因为鱼肝油中含有维生素D能促进肠道对钙、磷的吸收,因而可在一定程度上预防骨质疏松:D.若宇航员没有及时进食血糖低于正常值时,肝脏中的糖原分解产生葡萄糖及时补充,肌肉中的糖原不能分解产生葡萄糖补充。
4、答案:D
解析:A、结合分析可知,特定的光波属于物理信息,因此利用振式杀虫灯进行诱杀美国白蛾,是利用了生态系统信息传递的物理传递方式,A正确; B、农药是用来影响和调控有害生物生长发育或繁殖的特殊功能分子。喷洒高效灭虫剂氯氰菊酯等农药,会造成环境污染,会伤害美国白蛾天敌及其它昆虫,B正确; C、环境容纳量是在环境条件不受破坏情况下,一定空间中所能维持的种群最大数量。释放寄生天敌周氏啮小蜂,会降低环境容纳量,将美国白蛾数量控制在较低水平,C正确; D、苏云金杆菌产生Bt抗虫蛋白,能杀灭鳞翅目害虫,而非所有昆虫,D错误。
故选:D。
5、答案:C
解析:在艾弗里肺炎链球菌转化实验中,实验组添加各种酶的目的是通过酶解去除其中相应的成分,采用了“减法原理”,A错误;在探究落叶是否在土壤微生物的作用下腐烂的实验中,实验组土壤进行灭菌处理,目的是去除土壤中的微生物,采用了“减法原理”,B错误;在验证Mg是植物生活的必需元素的实验中,实验组中缺Mg的不完全培养液,采用了“减法原理”,待植株出现相应症状后,再补充Mg缓解植物症状,应用了“加法原理”,所以本实验中两种原理均有体现,C正确;在比较过氧化氢在不同条件下的分解实验中,实验组人为加热、滴加FeCl3溶液、滴加肝脏研磨液等处理采用了“加法原理”,D错误。
6、答案:B
解析:A、中心体没有生物膜结构,是由两个垂直排列的中心粒和周围物质组成,A正确; B、中心体在分裂间期复制,B错误; C、在细胞分裂前期,中心体发出星射线组成纺锤体,所以如果中心体功能障碍,将影响动物细胞正常的有丝分裂,C正确; D、中心体异常会造成纤毛运动能力过弱,会使气管的病原体不易被清除,从而易患慢性支气管炎,D正确。
故选:B。
7、答案:A
解析:A、细胞膜和细胞器膜的基本支架都是磷脂双分子层,A错误;B、脱氧核糖和磷酸交替连接,排列在外侧,构成DNA分子的基本骨架,碱基对排列在内侧,B正确;C、细胞骨架与细胞的分化、胞内运输、信息传递有关,C正确;D、单糖、二糖、多糖都是以碳链作为基本骨架,D正确。故选:A。
8、答案:D
解析:若烟雾中的某物质能阻止某对同源染色体分离,则精子或卵细胞中可能少一条染色体也可能多一条染色体,减 数分裂Ⅱ过程中无同源染色体、也无同源染色体配对。如果发生互换,一个精原细胞经减数分裂能形成4种精细胞、4 个精细胞。
9、答案:B
解析:A、氨基酸脱水缩合形成蛋白质,故蛋白质X的合成过程中会生成水,A错误; B、由题意可知,蛋白质X最终导致细胞调亡,蛋白质X实质上是一种促凋亡蛋白,具有促进细胞凋亡的作用,B正确; C、蛋白质X会与细胞器膜上的抗凋亡蛋白发生作用,故蛋白质X的构象发生变化不会直接破坏核糖体等无膜细胞器,C错误; D、细胞调亡有利于维持机体内环境的稳定,对机体有积极作用,D错误。
故选:B。
10、答案:B
解析:本题考查基因在染色体上关于致死基因的相关变式。在裂翅与野生型杂交F1代果蝇中,不论正反交,裂翅和野生型中雌雄比例都符合1:1,即后代表型与性别无关,可推断裂翅基因不在性染色体上,否则可能在性染色体上,A正确;假如裂翅基因(L)位于Ⅲ号染色体,裂翅基因型为L1Ss自交,后代LLss致死,后代L1Ss占2/3,B错误;假如裂翅基因(L)位于Ⅱ号染色体上,Ls连锁在同一染色体上,且有任一基因纯合致死,则裂翅基因型为L1Ss,野生型为SS,两者杂交,后代只有L1Ss和11SS两种表现型,裂翅比例为1/2,C正确;假如裂翅基因(L)仅位于X号染色体,野生型雄果蝇XlsY和裂翅雌果蝇XLsXls,后代XLsY致死,只出现裂翅雌性,比例为1/3,D正确。故选B。
11、答案:(1)①. 不认同因为通过口服的方式给药,苦参碱接触了舌头及肠道,无法确定TAS2Rs的分布
②. 用少量苦参碱擦拭小鼠舌头(或灌胃苦参碱)
(2)三组中分别加入等量适量的低、中、高3个浓度苦参碱溶液
(3)敲除TAS2Rs基因
(4)①. 物理
②. 细胞骨架和驱动蛋白等,作为运动的结构基础;ATP提供能量;外面的膜具有流动性
解析:(1)①因为通过口服的方式给药,苦参碱接触了舌头及肠道,无法确定TAS2Rs的分布,所以不同意该同学的观点。
②用少量苦参碱擦拭小鼠舌头(或灌胃苦参碱),可进一步探究TAS2Rs存在的部位。
(2)实验目的是“随苦参碱浓度增加促进GLP1释放作用有增强趋势”,则实验的自变量为苦参碱浓度,则过程②为三组中分别加入等量适量的低、中、高3个浓度苦参碱溶液。
(3)为了验证其他哺乳动物的TAS2Rs也有相以作用,实验自变量为TAS2Rs基因的有无,则可通过敲除TAS2Rs基因的小鼠受精卵为受体细胞,导入该基因序列,检测发育出的小鼠相关指标的恢复程度来验证。
(4)“类细胞”模型,它由膜外壳和填入物(含细胞骨架和驱动蛋白等,作为运动的结构基础)构成,属于物理模型。类细胞的细胞骨架和驱动蛋白等,作为运动的结构基础;ATP提供能量;外面的膜具有流动性,所以向该“类细胞”模型内部填充物添加ATP后,它即可像活细胞一样自主移动和改变形态。
12、答案:CD
解析:赤霉素既能促进细胞伸长,又能促进细胞分裂与分化,A错误;大麦种子萌发时,GA从胚移动到糊粉层,诱导α淀粉酶和β淀粉酶的合成,蛋白酶促进。淀粉酶的活化,B错误;α淀粉酶和β淀粉酶一起催化淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,运至胚满足代谢需要,C正确;萌动的胚中赤霉素的合成、分泌增加与幼苗发育过程中旺盛的营养需求相适应,D正确
13、答案:ABD
解析:不考虑致死、突变和X、Y同源区段遗传,昆虫的绿眼与白眼可能是常染色体显性、常染色体隐性、伴X染色体显性、伴X染色体隐性遗传或伴Y染色体遗传。系谱图中雄性昆虫性状不同可排除伴Y染色体遗传,雄性白眼昆虫的子代雌性为绿眼,可排除伴X染色体显性遗传的可能,A正确;利用Ⅱ-1或Ⅱ-2或II-4与Ⅱ-3杂交,若子代全为绿眼昆虫,则为常染色体显性遗传;若子代出现白眼雌昆虫,则为常染色体隐性遗传;若子代白眼昆虫全为雄性,则为伴X染色体隐性遗传,B正确;白眼性状产生的分子机制是由绿眼基因缺失一段脱氧核苷酸序列所致,则白眼基因的长度比绿眼基因短。若白眼性状的遗传为伴X隐性遗传,Ⅱ-3的基因型为XAY,PCR扩增后电泳的产物只有一条显示带(A为绿眼基因);若白眼性状的遗传为常染色体显性遗传,II-3的基因型为aa,PCR扩增后电泳的产物也有一条显示带(a为绿眼基因),两者位置相同,根据电泳结果不能确定白眼性状的遗传方式,C错误;若白眼性状的遗传为常染色体隐性遗传,II-3的基因型为Aa,PCR扩增后电泳的产物有两条显示带,D正确。
14、答案:ABC
解析:由图分析可知,经D-半乳糖处理后,可能通过增强衰老小鼠HSC中P16蛋白的表达,减弱CDK和Cyclin的表达,A正确;黄芪多糖可能通过降低P16的表达来增加CDK的形成,使细胞顺利由G1期进入S期,完成分裂,从而对抗衰老,B正确;经黄芪多糖干预后衰老小鼠HSC中P16蛋白的表达减弱,CDK4和Cyclin的表达均增强,细胞从G1期进入S期,C正确;黄芪多糖可通过调节相关蛋白的表达,其中P16蛋白的表达减弱,延缓HSC衰老,可用于开发防治老年性疾病的药物,D错误。
15、答案:(1)基因表达载体(重组DNA分子);Ca2+;使目的基因mph-r能在受体细胞中稳定存在和表达
(2)RNA聚合酶识别和结合位点并驱动基因转录出mRNA;通过TEV蛋白酶去掉g币融合标签得到大量纯的mph-r蛋白
(3)氨节青霉素(AmpΥ)
(4)第1泳道,根据第4泳道mph-r蛋白大小约35kD,而第5泳道gfp蛋白大小约30kD,融合gfp标签的mph-r蛋白约为65kD,第3泳道不符合。根据题意,融合gfp标签后的mph-r的表达量得到显著提高,所以蛋白表达量更大,应为第1泳道。
解析:(1)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体,其组成必须有目的基因、启动子、终止子以及标记基因等。转化前,用含Ca2+(CaCl2)的溶液处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞。构建基因表达载体的目的一是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代;二是使目的基因能够表达和发挥作用。否则,非常容易被大肠杆菌的内切酶切掉。
(2)启动子在基因的首段,它是RNA聚合酶的识别、结合位点,能控制着转录的开始。gfp在大肠杆菌表达系统中能作为一种融合标签,能很好地促进蛋白的表达,提高蛋白的表达量,实现难表达蛋白的高效表达,但是这并不是目的基因,因此还添加了TEV蛋白酶切位点,目的就是在能提高其表达量的同时,也能方便去掉GFP融合标签蛋白得到大量纯的mph-r蛋白。
(3)重组质粒上含有氨苄青霉素抗性基因,在含氨苄青霉素的LB固体平板上含重组质粒的菌株可以生长,因此应在含氨苄青霉素的LB固体平板上初步筛选出含重组质粒的目的菌株。
(4)测序成功的表达质粒转化大肠杆菌用SDS-PAGE电泳检测全细胞蛋白表达情况,第4泳道为mph-r单独表达的表达情况,其蛋白大小约为35kD;第5泳道gfp单独表达的表达情况,其蛋白大小约为30kD,所以,含融合gfp标签的mph-r蛋白大小约65kD,第3泳道只有45kD左右,不符合条件。第1泳道比第2泳道更宽,说明蛋白含量更高,这跟融合gfp中标签能够促进mph-r表达的事实更符合,因此第1泳道是融合gfp中标签的mph-r蛋白。