四川省德阳市第五高级中学2022-2023学年高二下学期3月月考生物学试题（含解析）
文档属性
| 名称 | 四川省德阳市第五高级中学2022-2023学年高二下学期3月月考生物学试题（含解析） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 728.5KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2023-03-25 07:48:46 | ||
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文档简介
德阳市第五高级中学2022-2023学年高二下学期3月月考
生物试卷
一、单项选择题
1. 下列产醋最多的措施是（ ）
A. 将果酒中加入食醋，并通气
B. 将果酒中加入变酸的酒表面的菌膜，并通气
C. 将果酒暴露在空气中
D. 将果酒中加入冲洗葡萄的水，并通气
2. 下列关于我国传统黄酒发酵的叙述，错误的是（ ）
A. 黄酒中的酒精是糖类经酵母菌无氧呼吸产生的代谢产物
B. 在黄酒的酿造过程中酵母菌的有氧和无氧呼吸都会发生
C. 酵母菌发酵生成的酒精会抑制发酵容器中微生物的生长
D. 酒精生成过程合成ATP的能量来自于丙酮酸中的化学能
3. 下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（ ）
A. 液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒
B. 培养基、接种环可用干热灭菌法灭菌
C. 消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子
D. 干热灭菌需将条件控制在121℃加热1~2h
4. 下列关于培养基中营养物质的说法，正确的是（ ）
A. 通常情况下，琼脂既可作为凝固剂也可作为微生物的碳源
B. 蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素
C. 培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加特殊营养物质维生素
D. 同一种物质不可能既作为碳源又作为氮源和能源物质
5. 某同学在制作腐乳的过程中，发现豆腐腐败变质，下列不属于其原因的是
A. 用盐腌制时，加盐量太少 B. 用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒
C. 制作卤汤时，料酒加量较多 D. 装瓶后，没有将瓶口密封
6. 下列关于果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程的叙述正确的是
A. 发酵菌群均为原核细胞 B. 均需高温高压灭菌
C. 均可以使用自然菌种 D. 均需控制无氧条件
7. 测定亚硝酸盐含量的有关叙述，不正确的是（ ）
A. 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，需在盐酸酸化条件下
B. 重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料
C. 制备样品处理液时加入氢氧化铝乳液的目的是中和氢氧化钠
D. 制备样品处理液时加入提取剂是为了增加亚硝酸盐的溶解度
8. 与下列几种微生物有关的叙述中正确的是（ ）
①酵母菌 ②乳酸菌 ③硝化细菌 ④蓝藻 ⑤烟草花叶病毒
A. 从生态系统中的成分看，①②③是分解者，④是生产者
B. 从同化作用类型看，②是厌氧型，③④是需氧型
C. 从异化作用类型看，①②异养型，③④是自养型
D. 从结构和成分看，①具有核膜包围的典型细胞核，⑤的遗传物质中不含胸腺嘧啶
9. 下列有关培养基制备的叙述，正确的是（ ）
A. 培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分
B. 在溶化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生糊底
C. 在微生物的实验室培养中，培养皿可用70%酒精擦拭灭菌
D. 倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板
10. 获得纯净培养物的关键是（ ）
A. 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B. 接种纯种细菌
C. 适宜环境条件下培养
D. 防止外来杂菌的入侵
11. 关于菌种保藏叙述不正确的是（ ）
A. 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B. 长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法
C. 临时保藏的菌种容易被污染或产生变异，因此保存时间不长
D. 临时保藏的菌种，可以将菌落长成后的试管放入-4℃的冰箱中保藏
12. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（ ）
A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板后要进行高压蒸汽灭菌
B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
C. 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时
D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的实验组平板进行计数
13. 用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌，二者得共同点有（ ）
①可以用相同得培养基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌
A. ①② B. ③④ C. ①③ D. ②④
14. 下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是（ ）
A. 固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
B. 接种前需对接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
C. 大肠杆菌的纯化培养包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段
D. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的碳源和氮源
15. 燕窝是中国人的传统保健品，近年来被传为珍稀滋补品的“血燕”更是价格高昂。但浙江曾在某次抽查时发现，主要产自马来西亚的3万余盏血燕亚硝酸盐最高超标350多倍。以下说法错误的是（ ）
A. “血燕”中的亚硝酸盐在人体内主要以“过客”的形式随尿排出
B. “血燕”中的亚硝酸盐是一种强致癌物
C. 检测“血燕”中亚硝酸盐的含量需将“血燕”制成样品处理液
D. “血燕”中的亚硝酸盐含量越多与对氨基苯磺酸及N 1 萘基乙二胺盐酸盐溶液反应产生的玫瑰红颜色越深
16. 下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是（ ）
A. 用全营养培养基牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌
B. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌不一定能分解尿素
C. 含酚红的尿素培养基可初步鉴定能分解尿素的菌株
D. 可以利用高温条件筛选出耐高温的Taq细菌
17. 需要在火焰旁操作的有（ ）
①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养
A. ①②③④⑤ B. ②③④ C. ③④⑤ D. ②③④⑤
18. 现有酵母菌和细菌的混合菌种，欲单独分离出酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为
A. 伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B. 含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C. 含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D. 含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
19. 关于微生物的实验室培养技术，下列表述正确的是（ ）
A. 溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上取下倒入烧杯
B. 常见的消毒方法包括灼烧、煮沸、紫外线和喷洒化学试剂等
C. 培养结核杆菌和乳酸菌时需要为其提供无氧的培养条件
D. 用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀
20. 利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖
B. 酵母菌和醋酸杆菌均以二分裂方式进行增殖
C. 酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D. 接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度
21. 某兴趣小组查阅资料得到有关泡菜制作的曲线图，下列有相关叙述错误的是（ ）
A. 乳酸菌发酵的产物是乳酸和亚硝酸盐
B. 用水密封泡菜坛的目的是为了创造无氧环境
C. 与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用
D. pH呈下降趋势的原因是乳酸菌发酵产物的积累
22. 传统发酵技术在我国应用广泛，某学生认为果酒制作的流程中存在一些问题，并提出了自己的改进方法。下列描述正确的有（ ）
①发酵容器要清洗干净并用70%的酒精消毒②葡萄要先除去枝梗再充分洗净③人为添加酵母菌种可以缩短发酵时间，实验更易成功④建议改用“泡菜坛”装置进行果酒的发酵⑤放气过程中可能会进入空气，造成污染⑥正午暴晒冲洗的葡萄，充分干燥后再酿制
A. ①②③④ B. ①②④⑥ C. ①③④⑤ D. ②③⑤⑥
23. 甜酒酿是用蒸熟的糯米拌上酿酒酵母发酵而成的一种甜米酒，其制作流程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
浸米→蒸米→凉饭→拌酿酒酵母→发酵→检查→甜酒酿
A. 蒸米既可以将米粒上的微生物杀死，又有利于淀粉的快速糖化
B. 蒸米后凉饭的目的是防止酿酒酵母被高温杀死
C. 发酵时应将拌有酿酒酵母的凉饭装满密闭的容器，发酵过程中适时排气
D. 发酵时将温度控制在18-25℃以便于酿酒酵母进行酒精发酵
24. 日常生活中的泡菜、酸奶、果醋等许多食物和饮品都是由发酵技术获得的。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 进行泡菜、酸奶、果醋发酵的微生物均通过有丝分裂进行增殖
B. 泡菜制作过程中，泡菜坛内增加的液体主要由微生物代谢产生
C. 家庭自制瓶装酸奶时，需对鲜奶进行高温灭菌，并定期拧松瓶盖
D. 制作果醋时，可利用果酒作为醋酸菌发酵所需要的碳源
二、单项选择题
25. 传统发酵技术是人类在生活过程中，对微生物的有意或无意运用。下列有关发酵技术主要原理的叙述中，错误的是（ ）
A. 面包制作：酵母菌无氧呼吸产生CO2，CO2遇热膨胀
B. 果醋制作：醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸
C. 腐乳制作：毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶等促进豆腐中相关物质水解
D. 泡菜制作：乳酸菌厌氧发酵产生乳酸，后者使蔬菜具有特别风味
26. 图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内装置中相关物质含量的变化如曲线乙所示，下列关于传统发酵技术的叙述错误的是（ ）
A. 利用装置甲进行果酒发酵时，通过排气管可排出CO2
B. 利用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀a、阀b
C. 图乙中曲线①、②可分别表示装置甲中O2浓度，酒精含量
D. 发酵过程中酵母菌细胞内产生CO2和酒精的场所相同
27. 下图为酱油的制作流程，其中米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油所需的蛋白酶、脂肪酶等，该过程需要提供营养物质、通入空气。下列说法错误的是（ ）
A. 米曲霉发酵过程中，大豆中蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源
B. 米曲霉分泌的酶可将大分子有机物水解为小分子有机物
C. 发酵池发酵阶段应密封进行，酵母菌与米曲霉对氧气需求相同
D. 发酵池中两种主要微生物产生的酒精、乳酸可以抑制杂菌生长
28. 急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施，如图表示检验微生物的简要步骤，以下叙述正确的是（ ）
A. 根据图1的微生物接种方法，可得到图2所示的四种菌落分布图
B. 为保证统计的菌落更加准确，同一稀释度下需要培养三个培养皿
C. 培养基的配制需考虑微生物的适宜pH，应在灭菌后进行pH调整
D. 可用滤膜法对大肠杆菌进行鉴定和计数，同时抑制杂菌的生长
29. 图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法操作结果。下列叙述中错误的是（ ）
A. 甲图中涂布前要将沾有少量酒精的涂布器引燃，冷却后才能涂布
B. 为避免空气中杂菌的污染，进行甲操作时不可转动培养皿
C. 乙中第二次以及以后的划线的起点均是上一次划线的末端
D. 完成整个乙操作过程需取菌种1次、灼烧接种环6次
30. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如图2所示情况。下列选项错误的是（ ）
A. 过程①②合称为稀释涂布平板法
B. 甲乙试管中的液体均为选择培养基
C. Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法
D. 图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
三、非选择题
31. 泡菜是深受四川人民喜爱的开胃菜，如图是利用萝卜制作泡菜的一般流程，请据图回答下列有关问题：
（1）制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是______。如果在腌制过程中，加入一些已经腌制过的陈年泡菜水效果会更好，原因是______。
（2）腌制过程加入的盐水量不能过满，否则会出现溢坛现象，原因是______，盐和水的质量比是______。泡菜腌制过程中，温度过高、食盐用量过低、______，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，通常用______法检测亚硝酸盐含量。
（3）发酵过程主要利用了______和假丝酵母对萝卜中有机物的分解作用，产生乳酸和醇类物质，使萝卜更可口美味。同时在生产过程中通过多种措施控制其他杂菌的繁殖，以保证产品的质量，下列不属于此种措施的是______（单选）
A．加盐 B．加白酒 C．加水密封 D．加糖
（4）制备样品处理液过程中，加入氢氧化铝乳液的目的是______。
32. 由于近年来医学界普遍认为成人高血压症与食盐的摄取有关，所以如何降低腐乳的盐分，同时保持其产品质量与风味就显得尤为重要。如图为某兴趣小组制作普通腐乳和低盐腐乳的过程中测得腐乳样品中的相关数据。普通腐乳要经过盐腌阶段得到盐坯：低盐腐乳的制作过程中毛坯不含盐，在后期发酵中向发酵液中添加质量分数为10%的盐水。回答下列问题：
（1）家庭制作腐乳，豆腐块上的毛霉来自于______，腐乳外部有一层致密的“皮”，“皮”是前期发酵时在豆腐表面生长的______，前期发酵的温度应控制在______℃，并保持一定的湿度，所以一般选择含水量为______的豆腐来做腐乳。
（2）盐在腐乳制作中的作用是______（填序号）（多选）
①析出豆腐中水分 ②防腐杀菌 ③作为反应物 ④调节口味
卤汤直接关系着腐乳的色香味，是由酒和香辛料配制而成的，酒的含量一般控制在______，酒精含量过高，______；酒精含量过低，______，可能导致豆腐腐败变质。
（3）图1中低盐腐乳盐含量的增加幅度比普通腐乳盐含量的降低幅度要大，其原因可能是普通腐乳毛坯与发酵液间的渗透压差值比低盐腐乳的______（填“大”或“小”）。
（4）氨基酸态氮含量是判断腐乳是否成熟的标准，标准中规定腐乳中氨基酸态氮的含量应不低于0.35g/100g，由图2可知低盐腐乳的优点是______（答出一点即可）。
（5）图2中低盐腐乳中氨基酸态氮增长趋势为先快后慢，结合图1和图2分析其原因可能是受盐含量的影响，蛋白酶的活性变化为______。
33. 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答与检验饮用水有关的问题。
（1）在配制培养细菌培养基的过程中，具有如下步骤：①溶化②灭菌③计算④倒平板⑤称量，正确的顺序为______；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是______。
（2）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为________通过该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目______，原因是______。
（3）如果分别取0.1ml已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为______个。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是______，此对照试验的目的是______。
（4）在待检水样过程中可以用______培养基鉴别是否含有大肠杆菌，如果培养基中出现______色菌落，则样品中含有大肠杆菌。
34. 化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见下表，回答下列问题：
碳源 细胞干重（g/L） S产量（g/L）
葡萄糖 3.12 015
淀粉 0.01 0.00
制糖废液 2.30 0.18
（1）通常在实验室培养微生物时，需要对制备的培养基和所用的玻璃器皿进行灭菌，最好选择的灭菌的方法分别是______、______。
（2）由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是S产量（g/L）；用菌株C生产S的最适碳源是______。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______（答出2点即可）等营养物质。
（3）由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是______。
（4）若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：______。
35. 幽门螺杆菌（Hp）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因子，能分泌X酶分解对热不稳定的尿素，某同学欲从患者胃黏膜提取物中分离出幽门螺杆菌并培养检测，请回答问题：
（1）筛选Hp的培养基成分应具有的主要特点是______。培养基中还应加入KH2PO4，和Na2HPO4，作用是______和维持培养基的pH稳定。尿素应在培养基灭菌冷却后添加，获得无菌尿素的方法可用______法。
（2）Hp的培养条件应选择______（填“有氧”或“无氧”）条件，原因是______。
（3）该同学在显微镜下用血细胞计数板（25×16）对幽门螺杆菌进行直接计数，取稀释倍数为103倍的菌液观察，测得5个中方格的数目分别为17、29、23、19、22，则每毫升样品中的细菌数为______。
（4）若比较两种抗生素A和B抑制幽门螺杆菌能力的强弱，请完善以下实验设计：在两组培养基中分别添加______，在两组平板上______，在______的条件下培养一段时间后，统计和比较两组平板上的______。
德阳市第五高级中学2022-2023学年高二下学期3月月考
生物试卷 答案解析
一、单项选择题
1. 下列产醋最多的措施是（ ）
A. 将果酒中加入食醋，并通气
B. 将果酒中加入变酸的酒表面的菌膜，并通气
C. 将果酒暴露在空气中
D. 将果酒中加入冲洗葡萄的水，并通气
【答案】B
【解析】
【分析】
【详解】A、因食醋经灭菌不含有菌种，所以A项错误；
B、变酸的果酒表面的菌膜中含有大量的醋酸菌，将其接种到果酒中将会产醋最多，故B项正确。
CD、空气中和冲洗葡萄的水中可能有醋酸菌，但数量不大，故C、D项错误；
故选B
【点睛】
2. 下列关于我国传统黄酒发酵的叙述，错误的是（ ）
A. 黄酒中的酒精是糖类经酵母菌无氧呼吸产生的代谢产物
B. 在黄酒的酿造过程中酵母菌的有氧和无氧呼吸都会发生
C. 酵母菌发酵生成的酒精会抑制发酵容器中微生物的生长
D. 酒精生成过程合成ATP的能量来自于丙酮酸中的化学能
【答案】D
【解析】
【分析】果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：
（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。
（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。
（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。
（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约1/3的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃～25℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃～35℃，时间控制在前7～8d左右，并注意适时通过充气口充气。
【详解】A、酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，A正确；
B、在黄酒的酿造初期，酵母菌可进行有氧呼吸进行大量繁殖，氧气消耗尽之后，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，B正确；
C、酵母菌发酵过程产生的酒精，抑制其它微生物生长，C正确；
D、无氧呼吸第一阶段释放能量，合成ATP，丙酮酸转变为酒精是无氧呼吸第二阶段不合成ATP，D错误。
故选D。
【点睛】
3. 下列关于无菌操作技术说法，正确的是（ ）
A. 液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒
B. 培养基、接种环可用干热灭菌法灭菌
C. 消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子
D. 干热灭菌需将条件控制在121℃加热1~2h
【答案】A
【解析】
【分析】消毒和灭菌的区别
消毒 灭菌
概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
【详解】A、液态的牛奶不耐高温，可用巴氏消毒法消毒，可杀死牛奶中的微生物，并且使牛奶的营养成分不被破坏，A正确；B、培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，而接种环用灼烧灭菌，B错误；
C、消毒能杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，不包括芽孢和孢子，C错误；
D、干热灭菌要在160～170℃，当温度升到150℃左右时，保持此温度3～4h，D错误。
故选A。
4. 下列关于培养基中营养物质的说法，正确的是（ ）
A. 通常情况下，琼脂既可作为凝固剂也可作为微生物的碳源
B. 蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素
C. 培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加特殊营养物质维生素
D. 同一种物质不可能既作为碳源又作为氮源和能源物质
【答案】C
【解析】
【分析】 培养基中主要的营养物质有碳源、氮源、无机盐和水，琼脂一般充当凝固剂，有时在提供以上营养物质的基础上，还需要满足微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求等。
【详解】A、一般情况下，琼脂可以作为凝固剂，但不能作为微生物的碳源，A错误；
B、蛋白胨可以为微生物的生长主要提供氮源和维生素等，不能提供磷酸盐，B错误；
C、为了满足乳酸杆菌对营养物质的要求，保证乳酸杆菌能正常生长繁殖，培养乳酸杆菌的时候需要在培养基中添加维生素，C正确；
D、同一物质，例如糖类等，既可以作为碳源又可以作为能源物质，D错误。
故选C。
5. 某同学在制作腐乳的过程中，发现豆腐腐败变质，下列不属于其原因的是
A. 用盐腌制时，加盐量太少 B. 用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒
C. 制作卤汤时，料酒加的量较多 D. 装瓶后，没有将瓶口密封
【答案】C
【解析】
【详解】用盐腌制，能使得豆腐块变硬，同时能抑制杂菌生长，如加盐量太少，豆腐腐败变质；故A错误；用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒，杂菌滋生，豆腐块腐败变质；故B错误；制作卤汤时，料酒加的量较多，腐乳成熟期延后，但能抑制杂菌生长，不会变质；故C正确；密封时，将瓶口通过酒精灯的火焰，再用胶条密封瓶口，能防止杂菌污染；故D错误。
【点睛】豆腐腐败变质是杂菌繁殖造成的，用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒，装瓶后，没有将瓶口密封，用盐腌制时，加盐量太少或制作卤汤时加料酒量太少都会致使杂菌大量繁殖．相反，如果料酒加入过多，不会致使杂菌大量繁殖。
6. 下列关于果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程的叙述正确的是
A. 发酵菌群均为原核细胞 B. 均需高温高压灭菌
C. 均可以使用自然菌种 D. 均需控制无氧条件
【答案】C
【解析】
【分析】
【详解】果醋发酵利用的是醋酸菌，为原核生物，果酒的制作利用酵母菌的无氧发酵、腐乳的制作需要多种霉共同作用，但毛霉起主要作用，都是是真核生物，泡菜的制作原理是乳酸菌的厌氧发酵，乳酸菌是原核生物。腐乳的制作不需要高温即可，可以使用自然菌种。制作果醋不仅需要高温高压灭菌，还需要氧气。故选C
【点睛】
7. 测定亚硝酸盐含量的有关叙述，不正确的是（ ）
A. 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，需在盐酸酸化条件下
B. 重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料
C. 制备样品处理液时加入氢氧化铝乳液的目的是中和氢氧化钠
D. 制备样品处理液时加入提取剂是为了增加亚硝酸盐的溶解度
【答案】C
【解析】
【分析】测定亚硝酸盐含量的方法是比色法，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N- 1 -萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
【详解】A、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，A正确；
B、亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N- 1 -萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，B正确；
C、制备样品处理液时加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质，得到澄清溶液，C错误；
D、氯化镉、氯化钡溶于蒸馏水后作为亚硝酸盐的提取剂，能增加亚硝酸盐的溶解度，有利于泡菜中亚硝酸盐的提取，D正确。
故选C。
8. 与下列几种微生物有关的叙述中正确的是（ ）
①酵母菌 ②乳酸菌 ③硝化细菌 ④蓝藻 ⑤烟草花叶病毒
A. 从生态系统中的成分看，①②③是分解者，④是生产者
B. 从同化作用类型看，②是厌氧型，③④是需氧型
C. 从异化作用类型看，①②是异养型，③④是自养型
D. 从结构和成分看，①具有核膜包围的典型细胞核，⑤的遗传物质中不含胸腺嘧啶
【答案】D
【解析】
【详解】A、从生态系统的成分看，①②是分解者，③④是生产者，A错误；
B、从异化作用类型看，①是兼性厌氧性，②是厌氧型，③④是需氧型，B错误；
C、从同化作用类型看，①②是异养型，③④是自养型，C错误；
D、从结构和成分看，①是真核细胞，具有成形的细胞核，⑤是RNA病毒，其遗传物质是RNA，不含胸腺嘧啶，D正确。
故选D。
9. 下列有关培养基制备的叙述，正确的是（ ）
A. 培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分
B. 在溶化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生糊底
C. 在微生物的实验室培养中，培养皿可用70%酒精擦拭灭菌
D. 倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板
【答案】B
【解析】
【分析】
培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；培养基的配制过程中，操作顺序如下：称量、溶化、调节pH、分装、加棉塞、包扎，灭菌等。
【详解】A、微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等，培养一些自养生物时，可以不加碳源或氮源，A错误；
B、在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊，B正确；
C、在微生物的实验室培养中，培养皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，C错误；
D、倒平板时需待培养基冷却至50度左右而不是室温，并在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。
故选B。
【点睛】
10. 获得纯净培养物的关键是（ ）
A. 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B. 接种纯种细菌
C. 适宜环境条件下培养
D. 防止外来杂菌的入侵
【答案】D
【解析】
【分析】获得纯净培养物的关键是无菌技术，即防止外来杂菌的入侵。
【详解】将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌只是无菌技术的一个方面，不是无菌技术的全部，A错误；接种纯种细菌是获得纯净培养物的前提，B错误；适宜条件下培养只能提供微生物生长的条件，不能防止杂菌的污染，C错误；防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键，D正确。
11. 关于菌种保藏叙述不正确的是（ ）
A. 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B. 长期保存菌种，可以采用甘油管藏的方法
C. 临时保藏菌种容易被污染或产生变异，因此保存时间不长
D. 临时保藏的菌种，可以将菌落长成后的试管放入-4℃的冰箱中保藏
【答案】D
【解析】
【分析】对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，对于需要长期保存的菌种，采用甘油管藏的方法，可以将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于-20℃冷冻箱内保存,。
【详解】A、对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，A正确；
B、对于需要长期保存的菌种，可以将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于冷冻箱内保存，采用甘油管藏的方法，B正确；
C、临时保藏的菌种由于频繁转种，容易被污染或产生变异，因此保存时间不长，C正确；
D、临时保藏的菌种，可以将菌落长成后的试管放入4℃的冰箱中保藏，D错误。
故选D。
12. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（ ）
A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板后要进行高压蒸汽灭菌
B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
C. 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时
D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的实验组平板进行计数
【答案】A
【解析】
【分析】检测细菌总数，用蒸馏水配制培养基，培养基灭菌后，取104、 105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组放置适宜条件培养，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的一组平板为代表进行计数，取平均值，最后根据公式即可计算出土壤细菌总数。
【详解】A、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，应该先进行高压蒸汽灭菌然后再倒平板，A错误；
B、测定土壤中细菌总数利用稀释涂布平板法，即取104、105、 106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，B正确；
C、平板倒置后，将实验组和对照组在37℃恒温培养24~48小时，定期观察菌落的形成情况，C正确；
D、确定对照组无菌后，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，D正确。
故选A。
13. 用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌，二者得共同点有（ ）
①可以用相同得培养基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌
A. ①② B. ③④ C. ①③ D. ②④
【答案】C
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：
1、平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。不能用于计数。
2、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。可用于菌落计数。
【详解】①平板划线法或稀释涂布平板法都是在固体培养基上进行的，①正确；
②平板划线法接种用接种环，稀释涂布平板法接种要用涂布器，②错误；
③不论是平板划线法还是稀释涂布平板法都需要进行无菌操作，在酒精灯火焰旁进行，③正确；
④平板划线法不能用于计数活菌，只能用于纯化菌种；稀释涂布平板法可以用来计数活菌，④错误。
故选C。
14. 下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是（ ）
A. 固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
B. 接种前需对接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
C. 大肠杆菌的纯化培养包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段
D. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的碳源和氮源
【答案】C
【解析】
【分析】 微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，故实验室培养时需严格无菌操作，对培养基用高压蒸汽灭菌、培养皿用干热灭菌，接种环用灼烧灭菌，实验者的双手用酒精擦拭消毒处理。
【详解】A、固体培养基和液体培养基中都含有水，在液体培养基中加入一定量的凝固剂如琼脂可形成固体培养基，固体培养基中加入少量水不可配制成液体培养基，A错误；
B、接种前需对培养基、培养皿、接种环等进行严格的灭菌处理，但对实验操作者的双手应该进行消毒处理，B错误；
C、在实验室中根据大肠杆菌对生存条件的要求将其纯化出来，纯化大肠杆菌包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段，C正确；
D、要获得分解尿素的细菌，需在以尿素为唯一的氮源培养基中培养，碳源主要是糖类，D错误。
故选C。
15. 燕窝是中国人的传统保健品，近年来被传为珍稀滋补品的“血燕”更是价格高昂。但浙江曾在某次抽查时发现，主要产自马来西亚的3万余盏血燕亚硝酸盐最高超标350多倍。以下说法错误的是（ ）
A. “血燕”中的亚硝酸盐在人体内主要以“过客”的形式随尿排出
B. “血燕”中的亚硝酸盐是一种强致癌物
C. 检测“血燕”中亚硝酸盐的含量需将“血燕”制成样品处理液
D. “血燕”中的亚硝酸盐含量越多与对氨基苯磺酸及N 1 萘基乙二胺盐酸盐溶液反应产生的玫瑰红颜色越深
【答案】B
【解析】
【分析】膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，但是，当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3--0.5克时，会引起中毒，当摄入总量达到3克时，会引起死亡。同时，膳食中的亚硝酸盐绝大多数在人体内以“过客”的形式随尿排出，只有在特定条件下（适宜的pH、温度和一定的微生物作用），才会转变成致癌物---亚硝胺。因此，不必太在意。
【详解】A、“血燕”中的亚硝酸盐在人体内主要以“过客”的形式随尿排出，A正确；
B、“血燕”中的亚硝酸盐一般无致癌作用，但在一定条件下会转化为致癌物质，B错误；
C、检测“血燕”中亚硝酸盐的含量需将“血燕”制成样品处理液，C正确；
D、“血燕”中的亚硝酸盐含量越多与对氨基苯磺酸及N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液反应产生的玫瑰红颜色越深，D正确。
故选B。
16. 下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是（ ）
A. 用全营养培养基牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌
B. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌不一定能分解尿素
C. 含酚红的尿素培养基可初步鉴定能分解尿素的菌株
D. 可以利用高温条件筛选出耐高温的Taq细菌
【答案】A
【解析】
【分析】微生物筛选的关键是选择培养基的使用，通过选择培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他微生物在选择培养基上是不能生存或生存受到抑制。
【详解】A、在全营养牛肉膏蛋白胨培养基上多种微生物都能生长，不能筛选出大肠杆菌，A错误；
B、以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌，还有可能是自生固氮菌，因此需要对筛选的尿素分解菌进行鉴定，B正确；
C、尿素分解菌可以将尿素分解成氨使酚红指示剂呈红色，因此用含酚红的尿素培养基筛选出能分解尿素的菌株，C正确；
D、利用高温培养条件可筛选出耐热的Taq细菌，其它不耐热的微生物无法在此环境下生存，D正确。
故选A。
17. 需要在火焰旁操作的有（ ）
①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养
A. ①②③④⑤ B. ②③④ C. ③④⑤ D. ②③④⑤
【答案】B
【解析】
【分析】土壤中尿素分解菌的分离与计数中，除土壤取样外（取样用的小铁铲和信封需要灭菌）其余均需要无菌操作。
【详解】在土壤中尿素分解菌的分离与计数中，取样用的小铁铲和信封需要灭菌，所取的土壤样品不能灭菌，称取土壤样品时和进行梯度稀释及涂布平板时需要在酒精灯火焰旁进行，所以②③④操作需要在火焰旁进行。
故选B。
18. 现有酵母菌和细菌的混合菌种，欲单独分离出酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为
A. 伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B. 含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C. 含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D. 含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
【答案】B
【解析】
【分析】选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。酵母菌属于异养兼性厌氧型真核生物，硝化细菌属于自养需氧型原核生物。
【详解】伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，A错误；细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母菌，硝化细菌可以将环境中的氨氧化为硝酸根而利用其释放的能量合成有机物，故含氨的无机培养基可以筛选硝化细菌，B正确；酵母菌是异养生物，不能用含氨的无机培养基筛选，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，C错误；细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母菌，伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，D错误。
19. 关于微生物的实验室培养技术，下列表述正确的是（ ）
A. 溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上取下倒入烧杯
B. 常见的消毒方法包括灼烧、煮沸、紫外线和喷洒化学试剂等
C. 培养结核杆菌和乳酸菌时需要为其提供无氧的培养条件
D. 用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀
【答案】D
【解析】
【分析】常见的灭菌方法由高压蒸汽灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌。
【详解】 A、溶化时将称好的牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯中，A错误；
B、灼烧是常见的灭菌方法，不是消毒方法，B错误；
C、乳酸菌属于厌氧菌，培养乳酸菌时需要为其提供无氧的培养条件，而结合杆菌不是厌氧菌，不能提供无氧环境，C错误；
D、在系列稀释操作过程中用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀，提高实验结果的准确性，D正确。
故选D。
20. 利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖
B. 酵母菌和醋酸杆菌均以二分裂的方式进行增殖
C. 酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D. 接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度
【答案】B
【解析】
【分析】1、果酒制作的菌种是酵母菌，来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，原理是酵母菌在无氧环境下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸醋菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理是当氧气、糖源都充足时，醋酸醋菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸醋菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、当缺少糖源时，醋酸醋菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，同时乙醇还可以抑制杂菌繁殖，A正确；
B、酵母菌为真核生物，一般以出芽的方式繁殖，醋酸杆菌为原核生物，以二分裂的方式进行增殖，B错误；
C、酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖，再密闭发酵产乙醇；醋酸杆菌为好氧菌，需持续通入无菌氧气，C正确；
D、酵母菌适宜温度低于醋酸杆菌最适温度，果酒发酵结束接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度，D正确。
故选B。
21. 某兴趣小组查阅资料得到有关泡菜制作的曲线图，下列有相关叙述错误的是（ ）
A. 乳酸菌发酵的产物是乳酸和亚硝酸盐
B. 用水密封泡菜坛的目的是为了创造无氧环境
C. 与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用
D. pH呈下降趋势的原因是乳酸菌发酵产物的积累
【答案】A
【解析】
【分析】分析曲线图：制作泡菜过程中亚硝酸盐含量先升高后降低，过多的亚硝酸盐对人体有害，因此取食泡菜应该选取亚硝酸盐含量低时取食，pH先下降后保持相对稳定，乳酸菌的数量先增多后降低。
【详解】A、乳酸菌发酵的产物是乳酸，形成亚硝酸盐的细菌主要是杂菌例如亚硝化细菌，A错误；
B、乳酸菌是厌氧菌，制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封以达到隔绝空气、为乳酸菌提供无氧环的目的，B正确；
C、据图曲线分析，与第3天相比，第8天后的泡菜中亚硝酸盐含量明显降低，更适于食用，C正确；
D、据图曲线分析，随乳酸菌数量增加，pH不断下降，可见pH呈下降趋势是因为乳酸菌产生的乳酸积累的结果，D正确。
故选A。
22. 传统发酵技术在我国应用广泛，某学生认为果酒制作的流程中存在一些问题，并提出了自己的改进方法。下列描述正确的有（ ）
①发酵容器要清洗干净并用70%的酒精消毒②葡萄要先除去枝梗再充分洗净③人为添加酵母菌种可以缩短发酵时间，实验更易成功④建议改用“泡菜坛”装置进行果酒的发酵⑤放气过程中可能会进入空气，造成污染⑥正午暴晒冲洗的葡萄，充分干燥后再酿制
A. ①②③④ B. ①②④⑥ C. ①③④⑤ D. ②③⑤⑥
【答案】C
【解析】
【分析】果酒制作的原理是在无氧条件下，酵母菌利用葡萄糖进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
【详解】①为了避免杂菌污染，发酵容器要清洗干净并用70%的酒精消毒，①正确；
②葡萄清洗时，不能先除去枝梗，会导致杂菌污染、营养流失，而是应该先冲洗后去除枝梗，②错误；
③人为添加酵母菌菌种，酵母菌数量增多，可以缩短发酵时间，③正确；
④泡菜坛水槽注满水可以制造一个无氧环境，有利于酵母菌进行无氧呼吸，故可改用“泡菜坛”装置进行果酒的发酵，④正确；
⑤放气时有可能会进入空气，空气中的杂菌可能进入发酵瓶造成污染，⑤正确；
⑥冲洗后的葡萄不可在正午时进行暴晒，紫外线具有消毒杀菌的作用，会杀死葡萄皮上的酵母菌，影响发酵效果，⑥错误。
综上所述，①③④⑤正确。
故选C。
23. 甜酒酿是用蒸熟的糯米拌上酿酒酵母发酵而成的一种甜米酒，其制作流程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
浸米→蒸米→凉饭→拌酿酒酵母→发酵→检查→甜酒酿
A. 蒸米既可以将米粒上的微生物杀死，又有利于淀粉的快速糖化
B. 蒸米后凉饭的目的是防止酿酒酵母被高温杀死
C. 发酵时应将拌有酿酒酵母的凉饭装满密闭的容器，发酵过程中适时排气
D. 发酵时将温度控制在18-25℃以便于酿酒酵母进行酒精发酵
【答案】C
【解析】
【分析】参与甜酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。原理是：在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳
【详解】A、在酿酒时要先将糯米蒸熟，有两个好处，一是熟糯米比生糯米更容易被微生物分解，有利于淀粉的快速糖化，利于发酵，二是蒸熟了可以高温杀菌，避免了其它杂菌的污染，其中主要目的是杀菌，A正确；
B、凉饭使温度降低，其目的是防止温度过高使酒曲中的酿酒酵母死亡，影响发酵效果，B正确；
C、发时应将拌有酿酒酵母的凉饭装在密闭的容器中，但是不能装满容器，应该适当留出一定空间(约1/3)，发酵过程中要适时排气，C错误；
D、酵母菌的最适生长温度为20℃，因此发酵时将温度控制在18-25℃以便于酿酒酵母进行酒精发酵，D正确。
故选C。
24. 日常生活中的泡菜、酸奶、果醋等许多食物和饮品都是由发酵技术获得的。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 进行泡菜、酸奶、果醋发酵的微生物均通过有丝分裂进行增殖
B. 泡菜制作过程中，泡菜坛内增加的液体主要由微生物代谢产生
C. 家庭自制瓶装酸奶时，需对鲜奶进行高温灭菌，并定期拧松瓶盖
D. 制作果醋时，可利用果酒作为醋酸菌发酵所需要的碳源
【答案】D
【解析】
【分析】果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物，适宜酵母菌生长的温度范围是18~25°C；果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或者乙醇转化成醋酸，醋酸菌无核膜包被的细胞核，是原核生物，属于好氧菌，醋酸菌适宜生长的温度范围是30-35°C。
【详解】A、有丝分裂是真核生物体细胞的增殖方式，泡菜、酸奶的菌种乳酸菌、果醋的菌种醋酸菌，均为原核生物，进行二分裂，A错误；
B、泡菜制作过程中，泡菜坛内增加的液体主要由植物细胞中的水，B错误；
C、酸奶是乳酸菌进行乳酸发酵的产物，乳酸菌为厌氧菌，因此不能定期拧松瓶盖，C错误；
D、果醋发酵的菌种为醋酸菌，可以利用酒精产生醋酸，D正确。
故选D。
二、单项选择题
25. 传统发酵技术是人类在生活过程中，对微生物的有意或无意运用。下列有关发酵技术主要原理的叙述中，错误的是（ ）
A. 面包制作：酵母菌无氧呼吸产生CO2，CO2遇热膨胀
B. 果醋制作：醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸
C. 腐乳制作：毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶等促进豆腐中相关物质水解
D. 泡菜制作：乳酸菌厌氧发酵产生乳酸，后者使蔬菜具有特别风味
【答案】A
【解析】
【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。
2、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
3、泡菜的制作原理：起作用的乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型。
4、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、面包制作中主要利用酵母菌有氧呼吸产生CO2，后者遇热膨胀的原理，A错误；
B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧微生物，醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸，B正确；
C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶等促进豆腐中相关物质水解，C正确；
D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，使蔬菜具有特别风味，D正确。
故选A。
26. 图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内装置中相关物质含量的变化如曲线乙所示，下列关于传统发酵技术的叙述错误的是（ ）
A. 利用装置甲进行果酒发酵时，通过排气管可排出CO2
B. 利用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀a、阀b
C. 图乙中曲线①、②可分别表示装置甲中O2浓度，酒精含量
D. 发酵过程中酵母菌细胞内产生CO2和酒精的场所相同
【答案】D
【解析】
【分析】1、题图分析：图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，其中充气口a是在连接充气泵进行充气用的；排气口b是在酒精发酵时用来排出CO2的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是防止空气中微生物的污染。
2、图乙表示图甲发酵装置中相关物质含量的变化。①物质随发酵时间延长逐渐下降，②物质随发酵时间延长逐渐上升。
详解】A、用装置甲发酵时，需定时打开阀b释放CO2，A正确；
B、果醋发酵时需要氧气，因此用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀a、b，B正确；
C、.酵母菌开始进行有氧呼吸，不断消耗氧气，因此曲线①表示装置甲中O2浓度的变化，酵母菌发酵过程中不断产生酒精，因此曲线②表示装置甲中酒精浓度的变化，C正确；
D、发酵过程中酵母菌细胞内产生CO2前期来自于线粒体，后期来自于细胞质基质，酒精的产生场所是细胞质基质，产生CO2和酒精的场所不相同，D错误。
故选D。
27. 下图为酱油的制作流程，其中米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油所需的蛋白酶、脂肪酶等，该过程需要提供营养物质、通入空气。下列说法错误的是（ ）
A. 米曲霉发酵过程中，大豆中蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源
B. 米曲霉分泌的酶可将大分子有机物水解为小分子有机物
C. 发酵池发酵阶段应密封进行，酵母菌与米曲霉对氧气需求相同
D. 发酵池中两种主要微生物产生的酒精、乳酸可以抑制杂菌生长
【答案】C
【解析】
【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。
2、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、大豆中的蛋白质含有N，可为米曲霉的生长提供氮源，A正确；
B、米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的蛋白酶、脂肪酶能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，B正确；
C、米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气，由此可以判断米曲霉属于异养好氧型，而酵母菌属于兼性厌氧生物，C错误；
D、发酵池中两种主要微生物产生的酒精具有抑制杂菌的作用，产生的乳酸会营造酸性环境，也可以抑制杂菌生长，D正确。
故选C。
28. 急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施，如图表示检验微生物的简要步骤，以下叙述正确的是（ ）
A. 根据图1的微生物接种方法，可得到图2所示的四种菌落分布图
B. 为保证统计的菌落更加准确，同一稀释度下需要培养三个培养皿
C. 培养基的配制需考虑微生物的适宜pH，应在灭菌后进行pH调整
D. 可用滤膜法对大肠杆菌进行鉴定和计数，同时抑制杂菌的生长
【答案】B
【解析】
【分析】据图1分析：表示稀释涂布平板法纯化大肠杆菌的过程。
据图2分析：a、b、c三个培养皿属于稀释涂布平板法接种，d培养皿属于平板划线法接种。
【详解】A、图1所用的接种方法为稀释涂布平板法，而图2所示的四种菌落分布图中，a、b、c三个培养皿属于稀释涂布平板法接种，d培养皿属于平板划线法接种，A错误；
B、同一稀释度下需要培养三个培养皿，分别计数3次，取平均值，以保证统计的菌落更加准确，B正确；
C、培养基的配制需考虑微生物的适宜pH，有利于微生物的生长，但是应在灭菌前进行pH调整，以防止杂菌污染，C错误；
D、滤膜法可对大肠杆菌进行计数，同时抑制杂菌的生长，但是不能对大肠杆菌进行鉴定，伊红-美蓝可对大肠杆菌进行鉴定，D错误。
故选B。
29. 图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法操作结果。下列叙述中错误的是（ ）
A. 甲图中涂布前要将沾有少量酒精的涂布器引燃，冷却后才能涂布
B. 为避免空气中杂菌的污染，进行甲操作时不可转动培养皿
C. 乙中第二次以及以后的划线的起点均是上一次划线的末端
D. 完成整个乙操作过程需取菌种1次、灼烧接种环6次
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分微生物往往连在一起生长， 随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2） 稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、甲图中的接种方法为稀释涂布平板法，采用的工具是涂布器，涂布前要将沾有少量酒精的涂布器引燃、灼烧，冷却后才能将菌液涂布均匀，A正确；
B、涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀，B错误；
C、乙中除第一次外，第二次以及以后的连续划线的起点是均是上一次划线的末端， 这样能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落，C正确；
D、利用平板划线法接种时需要蘸取菌液1次，乙培养基中有5个划线区域，蘸取菌液之前以及每次划线后均需要灼烧灭菌，一共需要灼烧接种环6次，D正确。
故选B。
30. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如图2所示情况。下列选项错误的是（ ）
A. 过程①②合称为稀释涂布平板法
B. 甲乙试管中的液体均为选择培养基
C. Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法
D. 图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
【答案】B
【解析】
【分析】接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法；稀释涂布线法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养；平板划线法由接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。
【详解】A、根据I号培养基上菌落分布均匀，可知①②过程为稀释涂布平板法，A正确；
B、甲乙试管中的液体是用于样品稀释，应为无菌水，B错误；
C、由Ⅱ号培养基上的划线区域可知从I号培养基上挑选的菌落进行接种的方法是平板划线法，C正确；
D、淀粉与碘液反应呈蓝色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶将淀粉水解后就不能呈蓝色，因此周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，D正确。
故选B。
三、非选择题
31. 泡菜是深受四川人民喜爱的开胃菜，如图是利用萝卜制作泡菜的一般流程，请据图回答下列有关问题：
（1）制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是______。如果在腌制过程中，加入一些已经腌制过的陈年泡菜水效果会更好，原因是______。
（2）腌制过程加入的盐水量不能过满，否则会出现溢坛现象，原因是______，盐和水的质量比是______。泡菜腌制过程中，温度过高、食盐用量过低、______，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，通常用______法检测亚硝酸盐含量。
（3）发酵过程主要利用了______和假丝酵母对萝卜中有机物的分解作用，产生乳酸和醇类物质，使萝卜更可口美味。同时在生产过程中通过多种措施控制其他杂菌的繁殖，以保证产品的质量，下列不属于此种措施的是______（单选）
A．加盐 B．加白酒 C．加水密封 D．加糖
（4）制备样品处理液过程中，加入氢氧化铝乳液的目的是______。
【答案】（1） ①. 亚硝酸盐含量低 ②. 陈年泡菜水含有大量乳酸菌，能增加乳酸菌菌种，缩短发酵时间
（2） ①. 外界溶液浓度高，导致植物细胞渗透失水 ②. 1∶10 ③. 腌制时间过短 ④. 比色
（3） ①. 乳酸菌 ②. D
（4）作为吸附剂，使泡菜滤液脱色变澄清
【解析】
【分析】泡菜的制作所利用的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖分解为乳酸。制作泡菜时，需要控制的主要因素有腌制时间、温度和食盐的用量等。
【小问1详解】
由于新鲜的蔬菜亚硝酸盐含量低，而亚硝酸盐在特定条件下会转变成致癌物质—亚硝胺，因此制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜。制作泡菜的原理是乳酸菌在无氧条件下大量繁殖并发酵产生乳酸，在制作泡菜时加入“陈泡菜水"的作用是增加发酵液中乳酸菌含量，以缩短制作时间。
【小问2详解】
腌制泡菜的盐水浓度高于蔬菜细胞液的浓度，这样会使植物细胞渗透失水，发酵液体积增加，如果装坛时盐水太多，就会出现溢出现象。在泡菜的制作过程中，按照盐与清水的质量比为1:10的比例配制盐水，以抑制其他微生物生长。泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量一般先增加后下降，若操作过程中温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，导致亚硝酸盐含量增加，不利于人体健康。一般用比色法检测亚硝酸盐含量，原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1 萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐的含量。
【小问3详解】
制作泡菜的原理是乳酸菌在无氧条件下大量繁殖并发酵产生乳酸。泡菜制作过程中，加盐可以制造一个高渗的外界溶液环境，使其他杂菌失水而死亡，加白酒可以杀死部分杂菌，加水密封可以产生一个缺氧环境，使部分好氧菌无法生存，而加糖的目的是加速发酵速率，但不能抑制其他杂菌的繁殖，ABC错误，D正确。
故选D。
【小问4详解】
为使泡菜提滤液变得无色透明，以便在测定亚硝酸盐含量过程中便于比色，在泡菜提取的滤液中应加入氢氧化铝，氢氧化铝作为吸附剂，使泡菜滤液脱色变澄清。
32. 由于近年来医学界普遍认为成人高血压症与食盐的摄取有关，所以如何降低腐乳的盐分，同时保持其产品质量与风味就显得尤为重要。如图为某兴趣小组制作普通腐乳和低盐腐乳的过程中测得腐乳样品中的相关数据。普通腐乳要经过盐腌阶段得到盐坯：低盐腐乳的制作过程中毛坯不含盐，在后期发酵中向发酵液中添加质量分数为10%的盐水。回答下列问题：
（1）家庭制作腐乳，豆腐块上的毛霉来自于______，腐乳外部有一层致密的“皮”，“皮”是前期发酵时在豆腐表面生长的______，前期发酵的温度应控制在______℃，并保持一定的湿度，所以一般选择含水量为______的豆腐来做腐乳。
（2）盐在腐乳制作中的作用是______（填序号）（多选）
①析出豆腐中水分 ②防腐杀菌 ③作为反应物 ④调节口味
卤汤直接关系着腐乳的色香味，是由酒和香辛料配制而成的，酒的含量一般控制在______，酒精含量过高，______；酒精含量过低，______，可能导致豆腐腐败变质。
（3）图1中低盐腐乳盐含量的增加幅度比普通腐乳盐含量的降低幅度要大，其原因可能是普通腐乳毛坯与发酵液间的渗透压差值比低盐腐乳的______（填“大”或“小”）。
（4）氨基酸态氮含量是判断腐乳是否成熟的标准，标准中规定腐乳中氨基酸态氮的含量应不低于0.35g/100g，由图2可知低盐腐乳的优点是______（答出一点即可）。
（5）图2中低盐腐乳中氨基酸态氮的增长趋势为先快后慢，结合图1和图2分析其原因可能是受盐含量的影响，蛋白酶的活性变化为______。
【答案】（1） ①. 空气中的毛霉孢子 ②. 菌丝 ③. 15-18°C ④. 70%
（2） ①. ①②④ ②. 12% ③. 腐乳成熟的时间将会延长 ④. 不足以抑制微生物生长 （3）小
（4）低盐能使腐乳的发酵时间缩短；氨基酸的含量增加 （5）先强到弱
【解析】
【分析】发酵腐乳的主要菌种为毛霉，毛霉属于异养型真核生物，产生的蛋白酶能将蛋白质水解成小分子肽和氨基酸，产生的脂肪酶能将脂肪水解成甘油和脂肪酸，其发酵过程为：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。
【小问1详解】
家庭传统工艺制作腐乳，无需人工接种毛霉菌，豆腐块上的毛霉来自空气中的毛霉孢子，现代工艺生产腐乳是在严格无菌的条件下，将优良的毛霉菌种直接接种在豆腐上，从而保证腐乳的质量和风味。腐乳外部有一层致密的“皮”是发酵前期豆腐表面生长的菌丝，这些菌丝是毛霉产生的，对人体无害，可以食用。毛霉的最适生长繁殖温度为15-18°C，故前期发酵让豆腐上长出毛霉时，温度控制在15-18°C。一般选择含水量为70%的豆腐来制作腐乳，含水量太高的豆腐在制作过程中容易破碎，不易成形。
【小问2详解】
在加盐腌制环节中要逐层加盐，接近瓶口表面的盐要铺厚些，加盐的目的是析出豆腐中水分，让豆腐变硬，在后期的制作过程终不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，防腐杀菌，避免豆腐变质，还能调节口味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，卤汤中加酒的作用一是可以抑制微生物的生长，二是使腐乳具有独特的香味。卤汤中酒的含量一般控制在12%左右，酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败变质。
【小问3详解】
分析题意和图1可知，普通腐乳要经过盐腌阶段得到盐坯，而低盐腐乳的制作过程中毛坯不含盐，在后期发酵中向发酵液中添加质量分数为10%的盐水，结果显示，低盐腐乳盐含量的增加幅度比普通腐乳盐含量的降低幅度要大，且低盐腐乳的含盐量均低于普通腐乳，可能原因是普通腐乳毛坯与发酵液间的渗透压差值低于低盐腐乳的渗透压差值。
【小问4详解】
由图2可知低盐腐乳氨基酸态氮含量先达到0.35g/100g，所以成熟较早，缩短了发酵时间，同时氨基酸态氮含量也比普通腐乳高。
【小问5详解】
氨基酸由蛋白酶分解蛋白质得到，故图2中低盐腐乳中氨基酸态氮的增长趋势为先快后慢的原因可能是盐含量增大使蛋白酶的活性变化为由强到弱。
33. 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答与检验饮用水有关的问题。
（1）在配制培养细菌培养基的过程中，具有如下步骤：①溶化②灭菌③计算④倒平板⑤称量，正确的顺序为______；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是______。
（2）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为________通过该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目______，原因是______。
（3）如果分别取0.1ml已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为______个。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是______，此对照试验的目的是______。
（4）在待检水样过程中可以用______培养基鉴别是否含有大肠杆菌，如果培养基中出现______色菌落，则样品中含有大肠杆菌。
【答案】（1） ①. ③⑤①②④ ②. 防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，避免培养基上的水分过快蒸发
（2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 少 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落
（3） ①. 5.6×108 ②. 未接种的空白培养基 ③. 检查培养基是否被杂菌污染，以确保实验结果的准确
（4） ①. 伊红美蓝 ②. 黑##紫黑
【解析】
【分析】大肠杆菌的分离与培养，可采用稀释涂布平板法或划线平板法，根据菌落数与稀释倍数可以换算出水样中的大肠杆菌密度。用加伊红美蓝的固体培养基是否出现黑色菌落可以鉴别是否含有大肠杆菌。
【小问1详解】
在培养基的配制过程中，根据微生物的生长需要，计算后称量不同的营养物质，然后溶化、调整pH、培养基的分装、加棉塞、包扎、灭菌、倒平板等，所以正确的顺序是③⑤①②④。微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染，平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，避免培养基上的水分过快蒸发。
【小问2详解】
对微生物的分离常用稀释涂布平板法和平板划线法进行接种，题干中提到梯度稀释和涂布器涂布平板，且能用于计数菌落数目，说明这种方法是稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落。
【小问3详解】
如分别取0.1mL已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数=（55+56+57）÷3×103÷0.1×103=5.6×108个，还应设置的一组对照实验是将未接种的空白培养基置于相同条件下培养，此对照实验的目的是检查培养基是否被杂菌污染，以确保实验结果的准确。
【小问4详解】
若要鉴别所分离的细菌是否为大肠杆菌，则应在培养基中加入伊红和美蓝，如果有大肠杆菌，则其菌落呈紫黑色。
34. 化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见下表，回答下列问题：
碳源 细胞干重（g/L） S产量（g/L）
葡萄糖 3.12 0.15
淀粉 0.01 0.00
制糖废液 2.30 0.18
（1）通常在实验室培养微生物时，需要对制备的培养基和所用的玻璃器皿进行灭菌，最好选择的灭菌的方法分别是______、______。
（2）由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是S产量（g/L）；用菌株C生产S的最适碳源是______。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______（答出2点即可）等营养物质。
（3）由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是______。
（4）若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：______。
【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌法 ②. 干热灭菌法
（2） ①. 制糖废液 ②. 氮源、无机盐、水
（3）菌株C不能合成淀粉酶或菌株C不能分泌淀粉酶，因而不能利用淀粉
（4）要测定生产S的最适制糖废液为碳源的浓度，实验自变量为制糖废液的浓度，可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度
【解析】
【分析】1、实验室常用的灭菌方法：
（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌；
（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min。
2、培养基的营养构成：各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【小问1详解】
通常在实验室培养微生物时，为防止实验用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培养物，需要使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子；对所需培养基最好选择高压蒸汽灭菌法；玻璃器皿常用的灭菌的方法有干热灭菌法。
小问2详解】
由实验结果可知，以制糖废液为碳源时，用菌株C生产S的产量高于以葡萄糖为碳源时的产量，说明最适于生产S的碳源是制糖废液。微生物的生长一般都需要水、碳源、氮源和无机盐，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求，故菌株C的生长除需要碳源外，还需要氮源、无机盐、水等营养物质。
【小问3详解】
分析题图表格可以看出在以淀粉为碳源的培养基中，菌株C不能生长，原因可能是菌株C不能合成淀粉酶或菌株C不能分泌淀粉酶，因而不能利用淀粉。
【小问4详解】
要测定生产S的最适制糖废液为碳源的浓度，实验自变量为制糖废液的浓度，可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度。
35. 幽门螺杆菌（Hp）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因子，能分泌X酶分解对热不稳定的尿素，某同学欲从患者胃黏膜提取物中分离出幽门螺杆菌并培养检测，请回答问题：
（1）筛选Hp的培养基成分应具有的主要特点是______。培养基中还应加入KH2PO4，和Na2HPO4，作用是______和维持培养基的pH稳定。尿素应在培养基灭菌冷却后添加，获得无菌尿素的方法可用______法。
（2）Hp的培养条件应选择______（填“有氧”或“无氧”）条件，原因是______。
（3）该同学在显微镜下用血细胞计数板（25×16）对幽门螺杆菌进行直接计数，取稀释倍数为103倍的菌液观察，测得5个中方格的数目分别为17、29、23、19、22，则每毫升样品中的细菌数为______。
（4）若比较两种抗生素A和B抑制幽门螺杆菌能力的强弱，请完善以下实验设计：在两组培养基中分别添加______，在两组平板上______，在______的条件下培养一段时间后，统计和比较两组平板上的______。
【答案】（1） ①. 以尿素为唯一氮源 ②. 提供无机盐 ③. 过滤除菌
（2） ①. 无氧 ②. Hp生活在胃部的无氧环境中，属于厌氧菌
（3）5.5×109 （4） ①. 等量的抗生素A和B ②. 涂布等量的Hp菌液 ③. 相同且适宜 ④. 菌落数目
【解析】
【分析】筛选出幽门螺杆菌（Hp）的思路是在培养基中添加尿素为唯一氮源时， 只有幽门螺杆菌才能分解尿素，以尿素作为氮源，其他微生物由于不能分解尿素而缺乏氮源，所以不能生长、繁殖，所以用此培养基就能够筛选出幽门螺杆菌。
【小问1详解】
幽门螺杆菌是能分解尿素的细菌，筛选Hp的培养基成分应具有的主要特点是以尿素为唯一氮源，保证幽门螺杆菌能利用尿素可以正常生长繁殖，而其他微生物不能利用尿素而不能正常生长。培养基中加入KH2PO4、和Na2HPO4，既能为幽门螺杆菌的生长繁殖提供无机盐，又能维持培养基的pH稳定，以保证幽门螺杆菌正常生长繁殖。培养基配制和灭菌时，应考虑到尿素具有热不稳定的性质，灭菌与添加尿素的先后顺序是先灭菌再添加尿素，尿素的灭菌方法可用过滤除菌法，避免受热分解。
【小问2详解】
幽门螺杆菌原本生活在胃部的无氧环境中，属于厌氧型细菌，故在配制培养基以及培养过程中应为Hp提供无氧环境。
【小问3详解】
血细胞计数板测得每毫升样品中的菌落数为每小格内平均细菌数×400×104×稀释倍数=每中格内平均细菌数×25×104×稀释倍数=(17+29+23+ 19+22)÷5×25×104×103=5.5×109个。
【小问4详解】
若要比较两种抗生素A和B抑制幽门螺杆菌能力的强弱，实验自变量为抗生素种类，因变量为菌落生长情况，实验思路为在两组培养基中分别添加等量的抗生素A和B，在两组平板上涂布等量的幽门螺杆菌菌液，在相同且适宜的条件培养一段时间后，统计两组平板上的菌落数目。若含抗生素A的平板上菌落数目较多，则说明抗生素A抑制Hp的能力强于抗生素B；若含抗生素A的平板上菌落数目较少，则说明抗生素A抑制Hp的能力低于抗生素B；若含两种平板上菌落数目相当，则说明抗生素A抑制Hp的能力与抗生素B相当。
生物试卷
一、单项选择题
1. 下列产醋最多的措施是（ ）
A. 将果酒中加入食醋，并通气
B. 将果酒中加入变酸的酒表面的菌膜，并通气
C. 将果酒暴露在空气中
D. 将果酒中加入冲洗葡萄的水，并通气
2. 下列关于我国传统黄酒发酵的叙述，错误的是（ ）
A. 黄酒中的酒精是糖类经酵母菌无氧呼吸产生的代谢产物
B. 在黄酒的酿造过程中酵母菌的有氧和无氧呼吸都会发生
C. 酵母菌发酵生成的酒精会抑制发酵容器中微生物的生长
D. 酒精生成过程合成ATP的能量来自于丙酮酸中的化学能
3. 下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（ ）
A. 液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒
B. 培养基、接种环可用干热灭菌法灭菌
C. 消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子
D. 干热灭菌需将条件控制在121℃加热1~2h
4. 下列关于培养基中营养物质的说法，正确的是（ ）
A. 通常情况下，琼脂既可作为凝固剂也可作为微生物的碳源
B. 蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素
C. 培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加特殊营养物质维生素
D. 同一种物质不可能既作为碳源又作为氮源和能源物质
5. 某同学在制作腐乳的过程中，发现豆腐腐败变质，下列不属于其原因的是
A. 用盐腌制时，加盐量太少 B. 用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒
C. 制作卤汤时，料酒加量较多 D. 装瓶后，没有将瓶口密封
6. 下列关于果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程的叙述正确的是
A. 发酵菌群均为原核细胞 B. 均需高温高压灭菌
C. 均可以使用自然菌种 D. 均需控制无氧条件
7. 测定亚硝酸盐含量的有关叙述，不正确的是（ ）
A. 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，需在盐酸酸化条件下
B. 重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料
C. 制备样品处理液时加入氢氧化铝乳液的目的是中和氢氧化钠
D. 制备样品处理液时加入提取剂是为了增加亚硝酸盐的溶解度
8. 与下列几种微生物有关的叙述中正确的是（ ）
①酵母菌 ②乳酸菌 ③硝化细菌 ④蓝藻 ⑤烟草花叶病毒
A. 从生态系统中的成分看，①②③是分解者，④是生产者
B. 从同化作用类型看，②是厌氧型，③④是需氧型
C. 从异化作用类型看，①②异养型，③④是自养型
D. 从结构和成分看，①具有核膜包围的典型细胞核，⑤的遗传物质中不含胸腺嘧啶
9. 下列有关培养基制备的叙述，正确的是（ ）
A. 培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分
B. 在溶化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生糊底
C. 在微生物的实验室培养中，培养皿可用70%酒精擦拭灭菌
D. 倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板
10. 获得纯净培养物的关键是（ ）
A. 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B. 接种纯种细菌
C. 适宜环境条件下培养
D. 防止外来杂菌的入侵
11. 关于菌种保藏叙述不正确的是（ ）
A. 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B. 长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法
C. 临时保藏的菌种容易被污染或产生变异，因此保存时间不长
D. 临时保藏的菌种，可以将菌落长成后的试管放入-4℃的冰箱中保藏
12. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（ ）
A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板后要进行高压蒸汽灭菌
B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
C. 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时
D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的实验组平板进行计数
13. 用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌，二者得共同点有（ ）
①可以用相同得培养基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌
A. ①② B. ③④ C. ①③ D. ②④
14. 下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是（ ）
A. 固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
B. 接种前需对接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
C. 大肠杆菌的纯化培养包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段
D. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的碳源和氮源
15. 燕窝是中国人的传统保健品，近年来被传为珍稀滋补品的“血燕”更是价格高昂。但浙江曾在某次抽查时发现，主要产自马来西亚的3万余盏血燕亚硝酸盐最高超标350多倍。以下说法错误的是（ ）
A. “血燕”中的亚硝酸盐在人体内主要以“过客”的形式随尿排出
B. “血燕”中的亚硝酸盐是一种强致癌物
C. 检测“血燕”中亚硝酸盐的含量需将“血燕”制成样品处理液
D. “血燕”中的亚硝酸盐含量越多与对氨基苯磺酸及N 1 萘基乙二胺盐酸盐溶液反应产生的玫瑰红颜色越深
16. 下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是（ ）
A. 用全营养培养基牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌
B. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌不一定能分解尿素
C. 含酚红的尿素培养基可初步鉴定能分解尿素的菌株
D. 可以利用高温条件筛选出耐高温的Taq细菌
17. 需要在火焰旁操作的有（ ）
①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养
A. ①②③④⑤ B. ②③④ C. ③④⑤ D. ②③④⑤
18. 现有酵母菌和细菌的混合菌种，欲单独分离出酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为
A. 伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B. 含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C. 含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D. 含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
19. 关于微生物的实验室培养技术，下列表述正确的是（ ）
A. 溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上取下倒入烧杯
B. 常见的消毒方法包括灼烧、煮沸、紫外线和喷洒化学试剂等
C. 培养结核杆菌和乳酸菌时需要为其提供无氧的培养条件
D. 用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀
20. 利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖
B. 酵母菌和醋酸杆菌均以二分裂方式进行增殖
C. 酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D. 接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度
21. 某兴趣小组查阅资料得到有关泡菜制作的曲线图，下列有相关叙述错误的是（ ）
A. 乳酸菌发酵的产物是乳酸和亚硝酸盐
B. 用水密封泡菜坛的目的是为了创造无氧环境
C. 与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用
D. pH呈下降趋势的原因是乳酸菌发酵产物的积累
22. 传统发酵技术在我国应用广泛，某学生认为果酒制作的流程中存在一些问题，并提出了自己的改进方法。下列描述正确的有（ ）
①发酵容器要清洗干净并用70%的酒精消毒②葡萄要先除去枝梗再充分洗净③人为添加酵母菌种可以缩短发酵时间，实验更易成功④建议改用“泡菜坛”装置进行果酒的发酵⑤放气过程中可能会进入空气，造成污染⑥正午暴晒冲洗的葡萄，充分干燥后再酿制
A. ①②③④ B. ①②④⑥ C. ①③④⑤ D. ②③⑤⑥
23. 甜酒酿是用蒸熟的糯米拌上酿酒酵母发酵而成的一种甜米酒，其制作流程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
浸米→蒸米→凉饭→拌酿酒酵母→发酵→检查→甜酒酿
A. 蒸米既可以将米粒上的微生物杀死，又有利于淀粉的快速糖化
B. 蒸米后凉饭的目的是防止酿酒酵母被高温杀死
C. 发酵时应将拌有酿酒酵母的凉饭装满密闭的容器，发酵过程中适时排气
D. 发酵时将温度控制在18-25℃以便于酿酒酵母进行酒精发酵
24. 日常生活中的泡菜、酸奶、果醋等许多食物和饮品都是由发酵技术获得的。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 进行泡菜、酸奶、果醋发酵的微生物均通过有丝分裂进行增殖
B. 泡菜制作过程中，泡菜坛内增加的液体主要由微生物代谢产生
C. 家庭自制瓶装酸奶时，需对鲜奶进行高温灭菌，并定期拧松瓶盖
D. 制作果醋时，可利用果酒作为醋酸菌发酵所需要的碳源
二、单项选择题
25. 传统发酵技术是人类在生活过程中，对微生物的有意或无意运用。下列有关发酵技术主要原理的叙述中，错误的是（ ）
A. 面包制作：酵母菌无氧呼吸产生CO2，CO2遇热膨胀
B. 果醋制作：醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸
C. 腐乳制作：毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶等促进豆腐中相关物质水解
D. 泡菜制作：乳酸菌厌氧发酵产生乳酸，后者使蔬菜具有特别风味
26. 图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内装置中相关物质含量的变化如曲线乙所示，下列关于传统发酵技术的叙述错误的是（ ）
A. 利用装置甲进行果酒发酵时，通过排气管可排出CO2
B. 利用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀a、阀b
C. 图乙中曲线①、②可分别表示装置甲中O2浓度，酒精含量
D. 发酵过程中酵母菌细胞内产生CO2和酒精的场所相同
27. 下图为酱油的制作流程，其中米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油所需的蛋白酶、脂肪酶等，该过程需要提供营养物质、通入空气。下列说法错误的是（ ）
A. 米曲霉发酵过程中，大豆中蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源
B. 米曲霉分泌的酶可将大分子有机物水解为小分子有机物
C. 发酵池发酵阶段应密封进行，酵母菌与米曲霉对氧气需求相同
D. 发酵池中两种主要微生物产生的酒精、乳酸可以抑制杂菌生长
28. 急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施，如图表示检验微生物的简要步骤，以下叙述正确的是（ ）
A. 根据图1的微生物接种方法，可得到图2所示的四种菌落分布图
B. 为保证统计的菌落更加准确，同一稀释度下需要培养三个培养皿
C. 培养基的配制需考虑微生物的适宜pH，应在灭菌后进行pH调整
D. 可用滤膜法对大肠杆菌进行鉴定和计数，同时抑制杂菌的生长
29. 图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法操作结果。下列叙述中错误的是（ ）
A. 甲图中涂布前要将沾有少量酒精的涂布器引燃，冷却后才能涂布
B. 为避免空气中杂菌的污染，进行甲操作时不可转动培养皿
C. 乙中第二次以及以后的划线的起点均是上一次划线的末端
D. 完成整个乙操作过程需取菌种1次、灼烧接种环6次
30. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如图2所示情况。下列选项错误的是（ ）
A. 过程①②合称为稀释涂布平板法
B. 甲乙试管中的液体均为选择培养基
C. Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法
D. 图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
三、非选择题
31. 泡菜是深受四川人民喜爱的开胃菜，如图是利用萝卜制作泡菜的一般流程，请据图回答下列有关问题：
（1）制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是______。如果在腌制过程中，加入一些已经腌制过的陈年泡菜水效果会更好，原因是______。
（2）腌制过程加入的盐水量不能过满，否则会出现溢坛现象，原因是______，盐和水的质量比是______。泡菜腌制过程中，温度过高、食盐用量过低、______，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，通常用______法检测亚硝酸盐含量。
（3）发酵过程主要利用了______和假丝酵母对萝卜中有机物的分解作用，产生乳酸和醇类物质，使萝卜更可口美味。同时在生产过程中通过多种措施控制其他杂菌的繁殖，以保证产品的质量，下列不属于此种措施的是______（单选）
A．加盐 B．加白酒 C．加水密封 D．加糖
（4）制备样品处理液过程中，加入氢氧化铝乳液的目的是______。
32. 由于近年来医学界普遍认为成人高血压症与食盐的摄取有关，所以如何降低腐乳的盐分，同时保持其产品质量与风味就显得尤为重要。如图为某兴趣小组制作普通腐乳和低盐腐乳的过程中测得腐乳样品中的相关数据。普通腐乳要经过盐腌阶段得到盐坯：低盐腐乳的制作过程中毛坯不含盐，在后期发酵中向发酵液中添加质量分数为10%的盐水。回答下列问题：
（1）家庭制作腐乳，豆腐块上的毛霉来自于______，腐乳外部有一层致密的“皮”，“皮”是前期发酵时在豆腐表面生长的______，前期发酵的温度应控制在______℃，并保持一定的湿度，所以一般选择含水量为______的豆腐来做腐乳。
（2）盐在腐乳制作中的作用是______（填序号）（多选）
①析出豆腐中水分 ②防腐杀菌 ③作为反应物 ④调节口味
卤汤直接关系着腐乳的色香味，是由酒和香辛料配制而成的，酒的含量一般控制在______，酒精含量过高，______；酒精含量过低，______，可能导致豆腐腐败变质。
（3）图1中低盐腐乳盐含量的增加幅度比普通腐乳盐含量的降低幅度要大，其原因可能是普通腐乳毛坯与发酵液间的渗透压差值比低盐腐乳的______（填“大”或“小”）。
（4）氨基酸态氮含量是判断腐乳是否成熟的标准，标准中规定腐乳中氨基酸态氮的含量应不低于0.35g/100g，由图2可知低盐腐乳的优点是______（答出一点即可）。
（5）图2中低盐腐乳中氨基酸态氮增长趋势为先快后慢，结合图1和图2分析其原因可能是受盐含量的影响，蛋白酶的活性变化为______。
33. 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答与检验饮用水有关的问题。
（1）在配制培养细菌培养基的过程中，具有如下步骤：①溶化②灭菌③计算④倒平板⑤称量，正确的顺序为______；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是______。
（2）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为________通过该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目______，原因是______。
（3）如果分别取0.1ml已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为______个。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是______，此对照试验的目的是______。
（4）在待检水样过程中可以用______培养基鉴别是否含有大肠杆菌，如果培养基中出现______色菌落，则样品中含有大肠杆菌。
34. 化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见下表，回答下列问题：
碳源 细胞干重（g/L） S产量（g/L）
葡萄糖 3.12 015
淀粉 0.01 0.00
制糖废液 2.30 0.18
（1）通常在实验室培养微生物时，需要对制备的培养基和所用的玻璃器皿进行灭菌，最好选择的灭菌的方法分别是______、______。
（2）由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是S产量（g/L）；用菌株C生产S的最适碳源是______。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______（答出2点即可）等营养物质。
（3）由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是______。
（4）若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：______。
35. 幽门螺杆菌（Hp）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因子，能分泌X酶分解对热不稳定的尿素，某同学欲从患者胃黏膜提取物中分离出幽门螺杆菌并培养检测，请回答问题：
（1）筛选Hp的培养基成分应具有的主要特点是______。培养基中还应加入KH2PO4，和Na2HPO4，作用是______和维持培养基的pH稳定。尿素应在培养基灭菌冷却后添加，获得无菌尿素的方法可用______法。
（2）Hp的培养条件应选择______（填“有氧”或“无氧”）条件，原因是______。
（3）该同学在显微镜下用血细胞计数板（25×16）对幽门螺杆菌进行直接计数，取稀释倍数为103倍的菌液观察，测得5个中方格的数目分别为17、29、23、19、22，则每毫升样品中的细菌数为______。
（4）若比较两种抗生素A和B抑制幽门螺杆菌能力的强弱，请完善以下实验设计：在两组培养基中分别添加______，在两组平板上______，在______的条件下培养一段时间后，统计和比较两组平板上的______。
德阳市第五高级中学2022-2023学年高二下学期3月月考
生物试卷 答案解析
一、单项选择题
1. 下列产醋最多的措施是（ ）
A. 将果酒中加入食醋，并通气
B. 将果酒中加入变酸的酒表面的菌膜，并通气
C. 将果酒暴露在空气中
D. 将果酒中加入冲洗葡萄的水，并通气
【答案】B
【解析】
【分析】
【详解】A、因食醋经灭菌不含有菌种，所以A项错误；
B、变酸的果酒表面的菌膜中含有大量的醋酸菌，将其接种到果酒中将会产醋最多，故B项正确。
CD、空气中和冲洗葡萄的水中可能有醋酸菌，但数量不大，故C、D项错误；
故选B
【点睛】
2. 下列关于我国传统黄酒发酵的叙述，错误的是（ ）
A. 黄酒中的酒精是糖类经酵母菌无氧呼吸产生的代谢产物
B. 在黄酒的酿造过程中酵母菌的有氧和无氧呼吸都会发生
C. 酵母菌发酵生成的酒精会抑制发酵容器中微生物的生长
D. 酒精生成过程合成ATP的能量来自于丙酮酸中的化学能
【答案】D
【解析】
【分析】果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：
（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。
（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。
（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。
（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约1/3的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃～25℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃～35℃，时间控制在前7～8d左右，并注意适时通过充气口充气。
【详解】A、酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，A正确；
B、在黄酒的酿造初期，酵母菌可进行有氧呼吸进行大量繁殖，氧气消耗尽之后，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，B正确；
C、酵母菌发酵过程产生的酒精，抑制其它微生物生长，C正确；
D、无氧呼吸第一阶段释放能量，合成ATP，丙酮酸转变为酒精是无氧呼吸第二阶段不合成ATP，D错误。
故选D。
【点睛】
3. 下列关于无菌操作技术说法，正确的是（ ）
A. 液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒
B. 培养基、接种环可用干热灭菌法灭菌
C. 消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子
D. 干热灭菌需将条件控制在121℃加热1~2h
【答案】A
【解析】
【分析】消毒和灭菌的区别
消毒 灭菌
概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
【详解】A、液态的牛奶不耐高温，可用巴氏消毒法消毒，可杀死牛奶中的微生物，并且使牛奶的营养成分不被破坏，A正确；B、培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，而接种环用灼烧灭菌，B错误；
C、消毒能杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，不包括芽孢和孢子，C错误；
D、干热灭菌要在160～170℃，当温度升到150℃左右时，保持此温度3～4h，D错误。
故选A。
4. 下列关于培养基中营养物质的说法，正确的是（ ）
A. 通常情况下，琼脂既可作为凝固剂也可作为微生物的碳源
B. 蛋白胨为微生物的生长主要提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素
C. 培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加特殊营养物质维生素
D. 同一种物质不可能既作为碳源又作为氮源和能源物质
【答案】C
【解析】
【分析】 培养基中主要的营养物质有碳源、氮源、无机盐和水，琼脂一般充当凝固剂，有时在提供以上营养物质的基础上，还需要满足微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求等。
【详解】A、一般情况下，琼脂可以作为凝固剂，但不能作为微生物的碳源，A错误；
B、蛋白胨可以为微生物的生长主要提供氮源和维生素等，不能提供磷酸盐，B错误；
C、为了满足乳酸杆菌对营养物质的要求，保证乳酸杆菌能正常生长繁殖，培养乳酸杆菌的时候需要在培养基中添加维生素，C正确；
D、同一物质，例如糖类等，既可以作为碳源又可以作为能源物质，D错误。
故选C。
5. 某同学在制作腐乳的过程中，发现豆腐腐败变质，下列不属于其原因的是
A. 用盐腌制时，加盐量太少 B. 用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒
C. 制作卤汤时，料酒加的量较多 D. 装瓶后，没有将瓶口密封
【答案】C
【解析】
【详解】用盐腌制，能使得豆腐块变硬，同时能抑制杂菌生长，如加盐量太少，豆腐腐败变质；故A错误；用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒，杂菌滋生，豆腐块腐败变质；故B错误；制作卤汤时，料酒加的量较多，腐乳成熟期延后，但能抑制杂菌生长，不会变质；故C正确；密封时，将瓶口通过酒精灯的火焰，再用胶条密封瓶口，能防止杂菌污染；故D错误。
【点睛】豆腐腐败变质是杂菌繁殖造成的，用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒，装瓶后，没有将瓶口密封，用盐腌制时，加盐量太少或制作卤汤时加料酒量太少都会致使杂菌大量繁殖．相反，如果料酒加入过多，不会致使杂菌大量繁殖。
6. 下列关于果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程的叙述正确的是
A. 发酵菌群均为原核细胞 B. 均需高温高压灭菌
C. 均可以使用自然菌种 D. 均需控制无氧条件
【答案】C
【解析】
【分析】
【详解】果醋发酵利用的是醋酸菌，为原核生物，果酒的制作利用酵母菌的无氧发酵、腐乳的制作需要多种霉共同作用，但毛霉起主要作用，都是是真核生物，泡菜的制作原理是乳酸菌的厌氧发酵，乳酸菌是原核生物。腐乳的制作不需要高温即可，可以使用自然菌种。制作果醋不仅需要高温高压灭菌，还需要氧气。故选C
【点睛】
7. 测定亚硝酸盐含量的有关叙述，不正确的是（ ）
A. 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，需在盐酸酸化条件下
B. 重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料
C. 制备样品处理液时加入氢氧化铝乳液的目的是中和氢氧化钠
D. 制备样品处理液时加入提取剂是为了增加亚硝酸盐的溶解度
【答案】C
【解析】
【分析】测定亚硝酸盐含量的方法是比色法，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N- 1 -萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
【详解】A、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，A正确；
B、亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N- 1 -萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，B正确；
C、制备样品处理液时加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质，得到澄清溶液，C错误；
D、氯化镉、氯化钡溶于蒸馏水后作为亚硝酸盐的提取剂，能增加亚硝酸盐的溶解度，有利于泡菜中亚硝酸盐的提取，D正确。
故选C。
8. 与下列几种微生物有关的叙述中正确的是（ ）
①酵母菌 ②乳酸菌 ③硝化细菌 ④蓝藻 ⑤烟草花叶病毒
A. 从生态系统中的成分看，①②③是分解者，④是生产者
B. 从同化作用类型看，②是厌氧型，③④是需氧型
C. 从异化作用类型看，①②是异养型，③④是自养型
D. 从结构和成分看，①具有核膜包围的典型细胞核，⑤的遗传物质中不含胸腺嘧啶
【答案】D
【解析】
【详解】A、从生态系统的成分看，①②是分解者，③④是生产者，A错误；
B、从异化作用类型看，①是兼性厌氧性，②是厌氧型，③④是需氧型，B错误；
C、从同化作用类型看，①②是异养型，③④是自养型，C错误；
D、从结构和成分看，①是真核细胞，具有成形的细胞核，⑤是RNA病毒，其遗传物质是RNA，不含胸腺嘧啶，D正确。
故选D。
9. 下列有关培养基制备的叙述，正确的是（ ）
A. 培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分
B. 在溶化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生糊底
C. 在微生物的实验室培养中，培养皿可用70%酒精擦拭灭菌
D. 倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板
【答案】B
【解析】
【分析】
培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；培养基的配制过程中，操作顺序如下：称量、溶化、调节pH、分装、加棉塞、包扎，灭菌等。
【详解】A、微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等，培养一些自养生物时，可以不加碳源或氮源，A错误；
B、在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊，B正确；
C、在微生物的实验室培养中，培养皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，C错误；
D、倒平板时需待培养基冷却至50度左右而不是室温，并在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。
故选B。
【点睛】
10. 获得纯净培养物的关键是（ ）
A. 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B. 接种纯种细菌
C. 适宜环境条件下培养
D. 防止外来杂菌的入侵
【答案】D
【解析】
【分析】获得纯净培养物的关键是无菌技术，即防止外来杂菌的入侵。
【详解】将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌只是无菌技术的一个方面，不是无菌技术的全部，A错误；接种纯种细菌是获得纯净培养物的前提，B错误；适宜条件下培养只能提供微生物生长的条件，不能防止杂菌的污染，C错误；防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键，D正确。
11. 关于菌种保藏叙述不正确的是（ ）
A. 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B. 长期保存菌种，可以采用甘油管藏的方法
C. 临时保藏菌种容易被污染或产生变异，因此保存时间不长
D. 临时保藏的菌种，可以将菌落长成后的试管放入-4℃的冰箱中保藏
【答案】D
【解析】
【分析】对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，对于需要长期保存的菌种，采用甘油管藏的方法，可以将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于-20℃冷冻箱内保存,。
【详解】A、对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，A正确；
B、对于需要长期保存的菌种，可以将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于冷冻箱内保存，采用甘油管藏的方法，B正确；
C、临时保藏的菌种由于频繁转种，容易被污染或产生变异，因此保存时间不长，C正确；
D、临时保藏的菌种，可以将菌落长成后的试管放入4℃的冰箱中保藏，D错误。
故选D。
12. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（ ）
A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板后要进行高压蒸汽灭菌
B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
C. 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时
D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的实验组平板进行计数
【答案】A
【解析】
【分析】检测细菌总数，用蒸馏水配制培养基，培养基灭菌后，取104、 105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组放置适宜条件培养，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的一组平板为代表进行计数，取平均值，最后根据公式即可计算出土壤细菌总数。
【详解】A、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，应该先进行高压蒸汽灭菌然后再倒平板，A错误；
B、测定土壤中细菌总数利用稀释涂布平板法，即取104、105、 106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，B正确；
C、平板倒置后，将实验组和对照组在37℃恒温培养24~48小时，定期观察菌落的形成情况，C正确；
D、确定对照组无菌后，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，D正确。
故选A。
13. 用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌，二者得共同点有（ ）
①可以用相同得培养基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌
A. ①② B. ③④ C. ①③ D. ②④
【答案】C
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：
1、平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。不能用于计数。
2、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。可用于菌落计数。
【详解】①平板划线法或稀释涂布平板法都是在固体培养基上进行的，①正确；
②平板划线法接种用接种环，稀释涂布平板法接种要用涂布器，②错误；
③不论是平板划线法还是稀释涂布平板法都需要进行无菌操作，在酒精灯火焰旁进行，③正确；
④平板划线法不能用于计数活菌，只能用于纯化菌种；稀释涂布平板法可以用来计数活菌，④错误。
故选C。
14. 下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是（ ）
A. 固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
B. 接种前需对接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
C. 大肠杆菌的纯化培养包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段
D. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的碳源和氮源
【答案】C
【解析】
【分析】 微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，故实验室培养时需严格无菌操作，对培养基用高压蒸汽灭菌、培养皿用干热灭菌，接种环用灼烧灭菌，实验者的双手用酒精擦拭消毒处理。
【详解】A、固体培养基和液体培养基中都含有水，在液体培养基中加入一定量的凝固剂如琼脂可形成固体培养基，固体培养基中加入少量水不可配制成液体培养基，A错误；
B、接种前需对培养基、培养皿、接种环等进行严格的灭菌处理，但对实验操作者的双手应该进行消毒处理，B错误；
C、在实验室中根据大肠杆菌对生存条件的要求将其纯化出来，纯化大肠杆菌包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段，C正确；
D、要获得分解尿素的细菌，需在以尿素为唯一的氮源培养基中培养，碳源主要是糖类，D错误。
故选C。
15. 燕窝是中国人的传统保健品，近年来被传为珍稀滋补品的“血燕”更是价格高昂。但浙江曾在某次抽查时发现，主要产自马来西亚的3万余盏血燕亚硝酸盐最高超标350多倍。以下说法错误的是（ ）
A. “血燕”中的亚硝酸盐在人体内主要以“过客”的形式随尿排出
B. “血燕”中的亚硝酸盐是一种强致癌物
C. 检测“血燕”中亚硝酸盐的含量需将“血燕”制成样品处理液
D. “血燕”中的亚硝酸盐含量越多与对氨基苯磺酸及N 1 萘基乙二胺盐酸盐溶液反应产生的玫瑰红颜色越深
【答案】B
【解析】
【分析】膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，但是，当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3--0.5克时，会引起中毒，当摄入总量达到3克时，会引起死亡。同时，膳食中的亚硝酸盐绝大多数在人体内以“过客”的形式随尿排出，只有在特定条件下（适宜的pH、温度和一定的微生物作用），才会转变成致癌物---亚硝胺。因此，不必太在意。
【详解】A、“血燕”中的亚硝酸盐在人体内主要以“过客”的形式随尿排出，A正确；
B、“血燕”中的亚硝酸盐一般无致癌作用，但在一定条件下会转化为致癌物质，B错误；
C、检测“血燕”中亚硝酸盐的含量需将“血燕”制成样品处理液，C正确；
D、“血燕”中的亚硝酸盐含量越多与对氨基苯磺酸及N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液反应产生的玫瑰红颜色越深，D正确。
故选B。
16. 下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是（ ）
A. 用全营养培养基牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌
B. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌不一定能分解尿素
C. 含酚红的尿素培养基可初步鉴定能分解尿素的菌株
D. 可以利用高温条件筛选出耐高温的Taq细菌
【答案】A
【解析】
【分析】微生物筛选的关键是选择培养基的使用，通过选择培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他微生物在选择培养基上是不能生存或生存受到抑制。
【详解】A、在全营养牛肉膏蛋白胨培养基上多种微生物都能生长，不能筛选出大肠杆菌，A错误；
B、以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌，还有可能是自生固氮菌，因此需要对筛选的尿素分解菌进行鉴定，B正确；
C、尿素分解菌可以将尿素分解成氨使酚红指示剂呈红色，因此用含酚红的尿素培养基筛选出能分解尿素的菌株，C正确；
D、利用高温培养条件可筛选出耐热的Taq细菌，其它不耐热的微生物无法在此环境下生存，D正确。
故选A。
17. 需要在火焰旁操作的有（ ）
①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养
A. ①②③④⑤ B. ②③④ C. ③④⑤ D. ②③④⑤
【答案】B
【解析】
【分析】土壤中尿素分解菌的分离与计数中，除土壤取样外（取样用的小铁铲和信封需要灭菌）其余均需要无菌操作。
【详解】在土壤中尿素分解菌的分离与计数中，取样用的小铁铲和信封需要灭菌，所取的土壤样品不能灭菌，称取土壤样品时和进行梯度稀释及涂布平板时需要在酒精灯火焰旁进行，所以②③④操作需要在火焰旁进行。
故选B。
18. 现有酵母菌和细菌的混合菌种，欲单独分离出酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为
A. 伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B. 含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C. 含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D. 含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
【答案】B
【解析】
【分析】选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。酵母菌属于异养兼性厌氧型真核生物，硝化细菌属于自养需氧型原核生物。
【详解】伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，A错误；细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母菌，硝化细菌可以将环境中的氨氧化为硝酸根而利用其释放的能量合成有机物，故含氨的无机培养基可以筛选硝化细菌，B正确；酵母菌是异养生物，不能用含氨的无机培养基筛选，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，C错误；细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母菌，伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，D错误。
19. 关于微生物的实验室培养技术，下列表述正确的是（ ）
A. 溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上取下倒入烧杯
B. 常见的消毒方法包括灼烧、煮沸、紫外线和喷洒化学试剂等
C. 培养结核杆菌和乳酸菌时需要为其提供无氧的培养条件
D. 用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀
【答案】D
【解析】
【分析】常见的灭菌方法由高压蒸汽灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌。
【详解】 A、溶化时将称好的牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯中，A错误；
B、灼烧是常见的灭菌方法，不是消毒方法，B错误；
C、乳酸菌属于厌氧菌，培养乳酸菌时需要为其提供无氧的培养条件，而结合杆菌不是厌氧菌，不能提供无氧环境，C错误；
D、在系列稀释操作过程中用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀，提高实验结果的准确性，D正确。
故选D。
20. 利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖
B. 酵母菌和醋酸杆菌均以二分裂的方式进行增殖
C. 酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同
D. 接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度
【答案】B
【解析】
【分析】1、果酒制作的菌种是酵母菌，来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，原理是酵母菌在无氧环境下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸醋菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理是当氧气、糖源都充足时，醋酸醋菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸醋菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、当缺少糖源时，醋酸醋菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，同时乙醇还可以抑制杂菌繁殖，A正确；
B、酵母菌为真核生物，一般以出芽的方式繁殖，醋酸杆菌为原核生物，以二分裂的方式进行增殖，B错误；
C、酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖，再密闭发酵产乙醇；醋酸杆菌为好氧菌，需持续通入无菌氧气，C正确；
D、酵母菌适宜温度低于醋酸杆菌最适温度，果酒发酵结束接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度，D正确。
故选B。
21. 某兴趣小组查阅资料得到有关泡菜制作的曲线图，下列有相关叙述错误的是（ ）
A. 乳酸菌发酵的产物是乳酸和亚硝酸盐
B. 用水密封泡菜坛的目的是为了创造无氧环境
C. 与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用
D. pH呈下降趋势的原因是乳酸菌发酵产物的积累
【答案】A
【解析】
【分析】分析曲线图：制作泡菜过程中亚硝酸盐含量先升高后降低，过多的亚硝酸盐对人体有害，因此取食泡菜应该选取亚硝酸盐含量低时取食，pH先下降后保持相对稳定，乳酸菌的数量先增多后降低。
【详解】A、乳酸菌发酵的产物是乳酸，形成亚硝酸盐的细菌主要是杂菌例如亚硝化细菌，A错误；
B、乳酸菌是厌氧菌，制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封以达到隔绝空气、为乳酸菌提供无氧环的目的，B正确；
C、据图曲线分析，与第3天相比，第8天后的泡菜中亚硝酸盐含量明显降低，更适于食用，C正确；
D、据图曲线分析，随乳酸菌数量增加，pH不断下降，可见pH呈下降趋势是因为乳酸菌产生的乳酸积累的结果，D正确。
故选A。
22. 传统发酵技术在我国应用广泛，某学生认为果酒制作的流程中存在一些问题，并提出了自己的改进方法。下列描述正确的有（ ）
①发酵容器要清洗干净并用70%的酒精消毒②葡萄要先除去枝梗再充分洗净③人为添加酵母菌种可以缩短发酵时间，实验更易成功④建议改用“泡菜坛”装置进行果酒的发酵⑤放气过程中可能会进入空气，造成污染⑥正午暴晒冲洗的葡萄，充分干燥后再酿制
A. ①②③④ B. ①②④⑥ C. ①③④⑤ D. ②③⑤⑥
【答案】C
【解析】
【分析】果酒制作的原理是在无氧条件下，酵母菌利用葡萄糖进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
【详解】①为了避免杂菌污染，发酵容器要清洗干净并用70%的酒精消毒，①正确；
②葡萄清洗时，不能先除去枝梗，会导致杂菌污染、营养流失，而是应该先冲洗后去除枝梗，②错误；
③人为添加酵母菌菌种，酵母菌数量增多，可以缩短发酵时间，③正确；
④泡菜坛水槽注满水可以制造一个无氧环境，有利于酵母菌进行无氧呼吸，故可改用“泡菜坛”装置进行果酒的发酵，④正确；
⑤放气时有可能会进入空气，空气中的杂菌可能进入发酵瓶造成污染，⑤正确；
⑥冲洗后的葡萄不可在正午时进行暴晒，紫外线具有消毒杀菌的作用，会杀死葡萄皮上的酵母菌，影响发酵效果，⑥错误。
综上所述，①③④⑤正确。
故选C。
23. 甜酒酿是用蒸熟的糯米拌上酿酒酵母发酵而成的一种甜米酒，其制作流程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
浸米→蒸米→凉饭→拌酿酒酵母→发酵→检查→甜酒酿
A. 蒸米既可以将米粒上的微生物杀死，又有利于淀粉的快速糖化
B. 蒸米后凉饭的目的是防止酿酒酵母被高温杀死
C. 发酵时应将拌有酿酒酵母的凉饭装满密闭的容器，发酵过程中适时排气
D. 发酵时将温度控制在18-25℃以便于酿酒酵母进行酒精发酵
【答案】C
【解析】
【分析】参与甜酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。原理是：在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳
【详解】A、在酿酒时要先将糯米蒸熟，有两个好处，一是熟糯米比生糯米更容易被微生物分解，有利于淀粉的快速糖化，利于发酵，二是蒸熟了可以高温杀菌，避免了其它杂菌的污染，其中主要目的是杀菌，A正确；
B、凉饭使温度降低，其目的是防止温度过高使酒曲中的酿酒酵母死亡，影响发酵效果，B正确；
C、发时应将拌有酿酒酵母的凉饭装在密闭的容器中，但是不能装满容器，应该适当留出一定空间(约1/3)，发酵过程中要适时排气，C错误；
D、酵母菌的最适生长温度为20℃，因此发酵时将温度控制在18-25℃以便于酿酒酵母进行酒精发酵，D正确。
故选C。
24. 日常生活中的泡菜、酸奶、果醋等许多食物和饮品都是由发酵技术获得的。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 进行泡菜、酸奶、果醋发酵的微生物均通过有丝分裂进行增殖
B. 泡菜制作过程中，泡菜坛内增加的液体主要由微生物代谢产生
C. 家庭自制瓶装酸奶时，需对鲜奶进行高温灭菌，并定期拧松瓶盖
D. 制作果醋时，可利用果酒作为醋酸菌发酵所需要的碳源
【答案】D
【解析】
【分析】果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物，适宜酵母菌生长的温度范围是18~25°C；果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或者乙醇转化成醋酸，醋酸菌无核膜包被的细胞核，是原核生物，属于好氧菌，醋酸菌适宜生长的温度范围是30-35°C。
【详解】A、有丝分裂是真核生物体细胞的增殖方式，泡菜、酸奶的菌种乳酸菌、果醋的菌种醋酸菌，均为原核生物，进行二分裂，A错误；
B、泡菜制作过程中，泡菜坛内增加的液体主要由植物细胞中的水，B错误；
C、酸奶是乳酸菌进行乳酸发酵的产物，乳酸菌为厌氧菌，因此不能定期拧松瓶盖，C错误；
D、果醋发酵的菌种为醋酸菌，可以利用酒精产生醋酸，D正确。
故选D。
二、单项选择题
25. 传统发酵技术是人类在生活过程中，对微生物的有意或无意运用。下列有关发酵技术主要原理的叙述中，错误的是（ ）
A. 面包制作：酵母菌无氧呼吸产生CO2，CO2遇热膨胀
B. 果醋制作：醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸
C. 腐乳制作：毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶等促进豆腐中相关物质水解
D. 泡菜制作：乳酸菌厌氧发酵产生乳酸，后者使蔬菜具有特别风味
【答案】A
【解析】
【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。
2、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
3、泡菜的制作原理：起作用的乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型。
4、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、面包制作中主要利用酵母菌有氧呼吸产生CO2，后者遇热膨胀的原理，A错误；
B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧微生物，醋酸菌在有氧条件下将糖或酒精转化为醋酸，B正确；
C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶等促进豆腐中相关物质水解，C正确；
D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，使蔬菜具有特别风味，D正确。
故选A。
26. 图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内装置中相关物质含量的变化如曲线乙所示，下列关于传统发酵技术的叙述错误的是（ ）
A. 利用装置甲进行果酒发酵时，通过排气管可排出CO2
B. 利用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀a、阀b
C. 图乙中曲线①、②可分别表示装置甲中O2浓度，酒精含量
D. 发酵过程中酵母菌细胞内产生CO2和酒精的场所相同
【答案】D
【解析】
【分析】1、题图分析：图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，其中充气口a是在连接充气泵进行充气用的；排气口b是在酒精发酵时用来排出CO2的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是防止空气中微生物的污染。
2、图乙表示图甲发酵装置中相关物质含量的变化。①物质随发酵时间延长逐渐下降，②物质随发酵时间延长逐渐上升。
详解】A、用装置甲发酵时，需定时打开阀b释放CO2，A正确；
B、果醋发酵时需要氧气，因此用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀a、b，B正确；
C、.酵母菌开始进行有氧呼吸，不断消耗氧气，因此曲线①表示装置甲中O2浓度的变化，酵母菌发酵过程中不断产生酒精，因此曲线②表示装置甲中酒精浓度的变化，C正确；
D、发酵过程中酵母菌细胞内产生CO2前期来自于线粒体，后期来自于细胞质基质，酒精的产生场所是细胞质基质，产生CO2和酒精的场所不相同，D错误。
故选D。
27. 下图为酱油的制作流程，其中米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油所需的蛋白酶、脂肪酶等，该过程需要提供营养物质、通入空气。下列说法错误的是（ ）
A. 米曲霉发酵过程中，大豆中蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源
B. 米曲霉分泌的酶可将大分子有机物水解为小分子有机物
C. 发酵池发酵阶段应密封进行，酵母菌与米曲霉对氧气需求相同
D. 发酵池中两种主要微生物产生的酒精、乳酸可以抑制杂菌生长
【答案】C
【解析】
【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。
2、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、大豆中的蛋白质含有N，可为米曲霉的生长提供氮源，A正确；
B、米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的蛋白酶、脂肪酶能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，B正确；
C、米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气，由此可以判断米曲霉属于异养好氧型，而酵母菌属于兼性厌氧生物，C错误；
D、发酵池中两种主要微生物产生的酒精具有抑制杂菌的作用，产生的乳酸会营造酸性环境，也可以抑制杂菌生长，D正确。
故选C。
28. 急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施，如图表示检验微生物的简要步骤，以下叙述正确的是（ ）
A. 根据图1的微生物接种方法，可得到图2所示的四种菌落分布图
B. 为保证统计的菌落更加准确，同一稀释度下需要培养三个培养皿
C. 培养基的配制需考虑微生物的适宜pH，应在灭菌后进行pH调整
D. 可用滤膜法对大肠杆菌进行鉴定和计数，同时抑制杂菌的生长
【答案】B
【解析】
【分析】据图1分析：表示稀释涂布平板法纯化大肠杆菌的过程。
据图2分析：a、b、c三个培养皿属于稀释涂布平板法接种，d培养皿属于平板划线法接种。
【详解】A、图1所用的接种方法为稀释涂布平板法，而图2所示的四种菌落分布图中，a、b、c三个培养皿属于稀释涂布平板法接种，d培养皿属于平板划线法接种，A错误；
B、同一稀释度下需要培养三个培养皿，分别计数3次，取平均值，以保证统计的菌落更加准确，B正确；
C、培养基的配制需考虑微生物的适宜pH，有利于微生物的生长，但是应在灭菌前进行pH调整，以防止杂菌污染，C错误；
D、滤膜法可对大肠杆菌进行计数，同时抑制杂菌的生长，但是不能对大肠杆菌进行鉴定，伊红-美蓝可对大肠杆菌进行鉴定，D错误。
故选B。
29. 图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法操作结果。下列叙述中错误的是（ ）
A. 甲图中涂布前要将沾有少量酒精的涂布器引燃，冷却后才能涂布
B. 为避免空气中杂菌的污染，进行甲操作时不可转动培养皿
C. 乙中第二次以及以后的划线的起点均是上一次划线的末端
D. 完成整个乙操作过程需取菌种1次、灼烧接种环6次
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分微生物往往连在一起生长， 随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2） 稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、甲图中的接种方法为稀释涂布平板法，采用的工具是涂布器，涂布前要将沾有少量酒精的涂布器引燃、灼烧，冷却后才能将菌液涂布均匀，A正确；
B、涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀，B错误；
C、乙中除第一次外，第二次以及以后的连续划线的起点是均是上一次划线的末端， 这样能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落，C正确；
D、利用平板划线法接种时需要蘸取菌液1次，乙培养基中有5个划线区域，蘸取菌液之前以及每次划线后均需要灼烧灭菌，一共需要灼烧接种环6次，D正确。
故选B。
30. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如图2所示情况。下列选项错误的是（ ）
A. 过程①②合称为稀释涂布平板法
B. 甲乙试管中的液体均为选择培养基
C. Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法
D. 图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
【答案】B
【解析】
【分析】接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法；稀释涂布线法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养；平板划线法由接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。
【详解】A、根据I号培养基上菌落分布均匀，可知①②过程为稀释涂布平板法，A正确；
B、甲乙试管中的液体是用于样品稀释，应为无菌水，B错误；
C、由Ⅱ号培养基上的划线区域可知从I号培养基上挑选的菌落进行接种的方法是平板划线法，C正确；
D、淀粉与碘液反应呈蓝色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶将淀粉水解后就不能呈蓝色，因此周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，D正确。
故选B。
三、非选择题
31. 泡菜是深受四川人民喜爱的开胃菜，如图是利用萝卜制作泡菜的一般流程，请据图回答下列有关问题：
（1）制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是______。如果在腌制过程中，加入一些已经腌制过的陈年泡菜水效果会更好，原因是______。
（2）腌制过程加入的盐水量不能过满，否则会出现溢坛现象，原因是______，盐和水的质量比是______。泡菜腌制过程中，温度过高、食盐用量过低、______，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，通常用______法检测亚硝酸盐含量。
（3）发酵过程主要利用了______和假丝酵母对萝卜中有机物的分解作用，产生乳酸和醇类物质，使萝卜更可口美味。同时在生产过程中通过多种措施控制其他杂菌的繁殖，以保证产品的质量，下列不属于此种措施的是______（单选）
A．加盐 B．加白酒 C．加水密封 D．加糖
（4）制备样品处理液过程中，加入氢氧化铝乳液的目的是______。
【答案】（1） ①. 亚硝酸盐含量低 ②. 陈年泡菜水含有大量乳酸菌，能增加乳酸菌菌种，缩短发酵时间
（2） ①. 外界溶液浓度高，导致植物细胞渗透失水 ②. 1∶10 ③. 腌制时间过短 ④. 比色
（3） ①. 乳酸菌 ②. D
（4）作为吸附剂，使泡菜滤液脱色变澄清
【解析】
【分析】泡菜的制作所利用的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖分解为乳酸。制作泡菜时，需要控制的主要因素有腌制时间、温度和食盐的用量等。
【小问1详解】
由于新鲜的蔬菜亚硝酸盐含量低，而亚硝酸盐在特定条件下会转变成致癌物质—亚硝胺，因此制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜。制作泡菜的原理是乳酸菌在无氧条件下大量繁殖并发酵产生乳酸，在制作泡菜时加入“陈泡菜水"的作用是增加发酵液中乳酸菌含量，以缩短制作时间。
【小问2详解】
腌制泡菜的盐水浓度高于蔬菜细胞液的浓度，这样会使植物细胞渗透失水，发酵液体积增加，如果装坛时盐水太多，就会出现溢出现象。在泡菜的制作过程中，按照盐与清水的质量比为1:10的比例配制盐水，以抑制其他微生物生长。泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量一般先增加后下降，若操作过程中温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，导致亚硝酸盐含量增加，不利于人体健康。一般用比色法检测亚硝酸盐含量，原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1 萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐的含量。
【小问3详解】
制作泡菜的原理是乳酸菌在无氧条件下大量繁殖并发酵产生乳酸。泡菜制作过程中，加盐可以制造一个高渗的外界溶液环境，使其他杂菌失水而死亡，加白酒可以杀死部分杂菌，加水密封可以产生一个缺氧环境，使部分好氧菌无法生存，而加糖的目的是加速发酵速率，但不能抑制其他杂菌的繁殖，ABC错误，D正确。
故选D。
【小问4详解】
为使泡菜提滤液变得无色透明，以便在测定亚硝酸盐含量过程中便于比色，在泡菜提取的滤液中应加入氢氧化铝，氢氧化铝作为吸附剂，使泡菜滤液脱色变澄清。
32. 由于近年来医学界普遍认为成人高血压症与食盐的摄取有关，所以如何降低腐乳的盐分，同时保持其产品质量与风味就显得尤为重要。如图为某兴趣小组制作普通腐乳和低盐腐乳的过程中测得腐乳样品中的相关数据。普通腐乳要经过盐腌阶段得到盐坯：低盐腐乳的制作过程中毛坯不含盐，在后期发酵中向发酵液中添加质量分数为10%的盐水。回答下列问题：
（1）家庭制作腐乳，豆腐块上的毛霉来自于______，腐乳外部有一层致密的“皮”，“皮”是前期发酵时在豆腐表面生长的______，前期发酵的温度应控制在______℃，并保持一定的湿度，所以一般选择含水量为______的豆腐来做腐乳。
（2）盐在腐乳制作中的作用是______（填序号）（多选）
①析出豆腐中水分 ②防腐杀菌 ③作为反应物 ④调节口味
卤汤直接关系着腐乳的色香味，是由酒和香辛料配制而成的，酒的含量一般控制在______，酒精含量过高，______；酒精含量过低，______，可能导致豆腐腐败变质。
（3）图1中低盐腐乳盐含量的增加幅度比普通腐乳盐含量的降低幅度要大，其原因可能是普通腐乳毛坯与发酵液间的渗透压差值比低盐腐乳的______（填“大”或“小”）。
（4）氨基酸态氮含量是判断腐乳是否成熟的标准，标准中规定腐乳中氨基酸态氮的含量应不低于0.35g/100g，由图2可知低盐腐乳的优点是______（答出一点即可）。
（5）图2中低盐腐乳中氨基酸态氮的增长趋势为先快后慢，结合图1和图2分析其原因可能是受盐含量的影响，蛋白酶的活性变化为______。
【答案】（1） ①. 空气中的毛霉孢子 ②. 菌丝 ③. 15-18°C ④. 70%
（2） ①. ①②④ ②. 12% ③. 腐乳成熟的时间将会延长 ④. 不足以抑制微生物生长 （3）小
（4）低盐能使腐乳的发酵时间缩短；氨基酸的含量增加 （5）先强到弱
【解析】
【分析】发酵腐乳的主要菌种为毛霉，毛霉属于异养型真核生物，产生的蛋白酶能将蛋白质水解成小分子肽和氨基酸，产生的脂肪酶能将脂肪水解成甘油和脂肪酸，其发酵过程为：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。
【小问1详解】
家庭传统工艺制作腐乳，无需人工接种毛霉菌，豆腐块上的毛霉来自空气中的毛霉孢子，现代工艺生产腐乳是在严格无菌的条件下，将优良的毛霉菌种直接接种在豆腐上，从而保证腐乳的质量和风味。腐乳外部有一层致密的“皮”是发酵前期豆腐表面生长的菌丝，这些菌丝是毛霉产生的，对人体无害，可以食用。毛霉的最适生长繁殖温度为15-18°C，故前期发酵让豆腐上长出毛霉时，温度控制在15-18°C。一般选择含水量为70%的豆腐来制作腐乳，含水量太高的豆腐在制作过程中容易破碎，不易成形。
【小问2详解】
在加盐腌制环节中要逐层加盐，接近瓶口表面的盐要铺厚些，加盐的目的是析出豆腐中水分，让豆腐变硬，在后期的制作过程终不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，防腐杀菌，避免豆腐变质，还能调节口味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，卤汤中加酒的作用一是可以抑制微生物的生长，二是使腐乳具有独特的香味。卤汤中酒的含量一般控制在12%左右，酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败变质。
【小问3详解】
分析题意和图1可知，普通腐乳要经过盐腌阶段得到盐坯，而低盐腐乳的制作过程中毛坯不含盐，在后期发酵中向发酵液中添加质量分数为10%的盐水，结果显示，低盐腐乳盐含量的增加幅度比普通腐乳盐含量的降低幅度要大，且低盐腐乳的含盐量均低于普通腐乳，可能原因是普通腐乳毛坯与发酵液间的渗透压差值低于低盐腐乳的渗透压差值。
【小问4详解】
由图2可知低盐腐乳氨基酸态氮含量先达到0.35g/100g，所以成熟较早，缩短了发酵时间，同时氨基酸态氮含量也比普通腐乳高。
【小问5详解】
氨基酸由蛋白酶分解蛋白质得到，故图2中低盐腐乳中氨基酸态氮的增长趋势为先快后慢的原因可能是盐含量增大使蛋白酶的活性变化为由强到弱。
33. 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答与检验饮用水有关的问题。
（1）在配制培养细菌培养基的过程中，具有如下步骤：①溶化②灭菌③计算④倒平板⑤称量，正确的顺序为______；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是______。
（2）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为________通过该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目______，原因是______。
（3）如果分别取0.1ml已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为______个。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是______，此对照试验的目的是______。
（4）在待检水样过程中可以用______培养基鉴别是否含有大肠杆菌，如果培养基中出现______色菌落，则样品中含有大肠杆菌。
【答案】（1） ①. ③⑤①②④ ②. 防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，避免培养基上的水分过快蒸发
（2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 少 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落
（3） ①. 5.6×108 ②. 未接种的空白培养基 ③. 检查培养基是否被杂菌污染，以确保实验结果的准确
（4） ①. 伊红美蓝 ②. 黑##紫黑
【解析】
【分析】大肠杆菌的分离与培养，可采用稀释涂布平板法或划线平板法，根据菌落数与稀释倍数可以换算出水样中的大肠杆菌密度。用加伊红美蓝的固体培养基是否出现黑色菌落可以鉴别是否含有大肠杆菌。
【小问1详解】
在培养基的配制过程中，根据微生物的生长需要，计算后称量不同的营养物质，然后溶化、调整pH、培养基的分装、加棉塞、包扎、灭菌、倒平板等，所以正确的顺序是③⑤①②④。微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染，平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，避免培养基上的水分过快蒸发。
【小问2详解】
对微生物的分离常用稀释涂布平板法和平板划线法进行接种，题干中提到梯度稀释和涂布器涂布平板，且能用于计数菌落数目，说明这种方法是稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落。
【小问3详解】
如分别取0.1mL已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数=（55+56+57）÷3×103÷0.1×103=5.6×108个，还应设置的一组对照实验是将未接种的空白培养基置于相同条件下培养，此对照实验的目的是检查培养基是否被杂菌污染，以确保实验结果的准确。
【小问4详解】
若要鉴别所分离的细菌是否为大肠杆菌，则应在培养基中加入伊红和美蓝，如果有大肠杆菌，则其菌落呈紫黑色。
34. 化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见下表，回答下列问题：
碳源 细胞干重（g/L） S产量（g/L）
葡萄糖 3.12 0.15
淀粉 0.01 0.00
制糖废液 2.30 0.18
（1）通常在实验室培养微生物时，需要对制备的培养基和所用的玻璃器皿进行灭菌，最好选择的灭菌的方法分别是______、______。
（2）由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是S产量（g/L）；用菌株C生产S的最适碳源是______。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______（答出2点即可）等营养物质。
（3）由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是______。
（4）若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：______。
【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌法 ②. 干热灭菌法
（2） ①. 制糖废液 ②. 氮源、无机盐、水
（3）菌株C不能合成淀粉酶或菌株C不能分泌淀粉酶，因而不能利用淀粉
（4）要测定生产S的最适制糖废液为碳源的浓度，实验自变量为制糖废液的浓度，可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度
【解析】
【分析】1、实验室常用的灭菌方法：
（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌；
（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min。
2、培养基的营养构成：各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【小问1详解】
通常在实验室培养微生物时，为防止实验用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培养物，需要使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子；对所需培养基最好选择高压蒸汽灭菌法；玻璃器皿常用的灭菌的方法有干热灭菌法。
小问2详解】
由实验结果可知，以制糖废液为碳源时，用菌株C生产S的产量高于以葡萄糖为碳源时的产量，说明最适于生产S的碳源是制糖废液。微生物的生长一般都需要水、碳源、氮源和无机盐，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求，故菌株C的生长除需要碳源外，还需要氮源、无机盐、水等营养物质。
【小问3详解】
分析题图表格可以看出在以淀粉为碳源的培养基中，菌株C不能生长，原因可能是菌株C不能合成淀粉酶或菌株C不能分泌淀粉酶，因而不能利用淀粉。
【小问4详解】
要测定生产S的最适制糖废液为碳源的浓度，实验自变量为制糖废液的浓度，可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度。
35. 幽门螺杆菌（Hp）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因子，能分泌X酶分解对热不稳定的尿素，某同学欲从患者胃黏膜提取物中分离出幽门螺杆菌并培养检测，请回答问题：
（1）筛选Hp的培养基成分应具有的主要特点是______。培养基中还应加入KH2PO4，和Na2HPO4，作用是______和维持培养基的pH稳定。尿素应在培养基灭菌冷却后添加，获得无菌尿素的方法可用______法。
（2）Hp的培养条件应选择______（填“有氧”或“无氧”）条件，原因是______。
（3）该同学在显微镜下用血细胞计数板（25×16）对幽门螺杆菌进行直接计数，取稀释倍数为103倍的菌液观察，测得5个中方格的数目分别为17、29、23、19、22，则每毫升样品中的细菌数为______。
（4）若比较两种抗生素A和B抑制幽门螺杆菌能力的强弱，请完善以下实验设计：在两组培养基中分别添加______，在两组平板上______，在______的条件下培养一段时间后，统计和比较两组平板上的______。
【答案】（1） ①. 以尿素为唯一氮源 ②. 提供无机盐 ③. 过滤除菌
（2） ①. 无氧 ②. Hp生活在胃部的无氧环境中，属于厌氧菌
（3）5.5×109 （4） ①. 等量的抗生素A和B ②. 涂布等量的Hp菌液 ③. 相同且适宜 ④. 菌落数目
【解析】
【分析】筛选出幽门螺杆菌（Hp）的思路是在培养基中添加尿素为唯一氮源时， 只有幽门螺杆菌才能分解尿素，以尿素作为氮源，其他微生物由于不能分解尿素而缺乏氮源，所以不能生长、繁殖，所以用此培养基就能够筛选出幽门螺杆菌。
【小问1详解】
幽门螺杆菌是能分解尿素的细菌，筛选Hp的培养基成分应具有的主要特点是以尿素为唯一氮源，保证幽门螺杆菌能利用尿素可以正常生长繁殖，而其他微生物不能利用尿素而不能正常生长。培养基中加入KH2PO4、和Na2HPO4，既能为幽门螺杆菌的生长繁殖提供无机盐，又能维持培养基的pH稳定，以保证幽门螺杆菌正常生长繁殖。培养基配制和灭菌时，应考虑到尿素具有热不稳定的性质，灭菌与添加尿素的先后顺序是先灭菌再添加尿素，尿素的灭菌方法可用过滤除菌法，避免受热分解。
【小问2详解】
幽门螺杆菌原本生活在胃部的无氧环境中，属于厌氧型细菌，故在配制培养基以及培养过程中应为Hp提供无氧环境。
【小问3详解】
血细胞计数板测得每毫升样品中的菌落数为每小格内平均细菌数×400×104×稀释倍数=每中格内平均细菌数×25×104×稀释倍数=(17+29+23+ 19+22)÷5×25×104×103=5.5×109个。
【小问4详解】
若要比较两种抗生素A和B抑制幽门螺杆菌能力的强弱，实验自变量为抗生素种类，因变量为菌落生长情况，实验思路为在两组培养基中分别添加等量的抗生素A和B，在两组平板上涂布等量的幽门螺杆菌菌液，在相同且适宜的条件培养一段时间后，统计两组平板上的菌落数目。若含抗生素A的平板上菌落数目较多，则说明抗生素A抑制Hp的能力强于抗生素B；若含抗生素A的平板上菌落数目较少，则说明抗生素A抑制Hp的能力低于抗生素B；若含两种平板上菌落数目相当，则说明抗生素A抑制Hp的能力与抗生素B相当。
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