山东省菏泽市2021-2022学年高二下学期期中考试生物（A）试卷（含解析）

山东省菏泽市2021-2022学年高二下学期期中考试生物（A）试卷
学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1、发酵工程以其生产条件温和，原料来源丰富且价格低廉，产物专一，废弃物对环境污染小和容易处理等特点，在医药工业、食品工业、环境保护等许多领域得到了广泛的应用。下列关于发酵工程的说法错误的是( )
A.发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
B.发酵工程相比传统发酵技术，其获得的产品产量和质量明显提升
C.利用发酵工程生产的微生物农药可以作为生物防治的重要手段
D.以淀粉、纤维素的水解液等为原料，通过发酵工程可以从菌体中获取单细胞蛋白
2、《诗经》云:“中田有庐，疆埸有瓜。是剥是菹，献之皇祖。”这里的“菹”，就是指的泡菜。东坡至味，人间清欢，要想成就一坛绝味泡菜，不仅需要肥嫩鲜美的蔬菜和得天独厚的地理与气候，更需要代代相传的“老母水”。下列有关泡菜制作的说法正确的是( )
A.传统泡菜制作的菌种主要来源于空气
B.添加“老母水”的目的是接种乳酸菌
C.在乳酸菌的作用下亚硝酸盐的含量会先升高后下降
D.制作过程中产生气泡主要是因为乳酸菌发酵产生了CO2
3、枯草芽孢杆菌，是一种需氧菌，可利用蛋白质和多种糖，分解色氨酸形成吲哚，在遗传学研究中也有广泛应用。下列关于枯草芽孢杆菌纯培养过程，说法正确的是( )
A.使用液体培养基并震荡处理，更利于枯草芽孢杆菌的增殖
B.在灭菌时，培养皿应先用牛皮纸包紧再放入干热灭菌箱中
C.将冷却的培养液倒入平板后，接着将培养皿倒过来放置
D.若采用稀释涂布平板法接种，涂布完成后需在培养皿盖上做好标记
4、某植物有A、B两品种。科研人员在设计品种A组织培养实验时，参照品种B的最佳激素配比（见下表）进行预实验。下列说法错误的是( )
品种B组织培养阶段 细胞分裂素浓度/μmol·L-1 生长素浓度/mol·L-1
I诱导形成愈伤组织 m1 n1
Ⅱ诱导形成芽 m2 n2
Ⅲ诱导生根 m3 n3
A. I阶段选取植物幼嫩部位比成熟部位容易诱导成功
B. I、II、III阶段中发生基因选择性表达的是Ⅱ、Ⅲ阶段
C.若要大幅度改良品种A的蛋白质含量，可以用X射线照射I阶段的愈伤组织
D.若以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，则Ⅱ阶段生长素最高浓度应设为n2+1.0
5、科学家用动物细胞培养的方法生产了第一块人造肉，这块肉是通过干细胞在富含氨基酸、脂质、维生素的培养液中培养而成。下列说法错误的是( )
A.生产人造肉的原理是细胞增殖和细胞分化
B.干细胞具有分化为成年动物体内任何一种类型细胞的潜能
C.生产人造肉的干细胞可以从动物早期胚胎或成体的组织、器官内获得
D.生产人造肉不需养殖动物且同时减少了激素和抗生素的使用，前景广阔
6、哺乳动物B细胞的发育阶段：祖B细胞→前B细胞→未成熟B细胞→成熟B细胞→活化B细胞→浆细胞。研究证实，小鼠注射抗原7-8天后浆细胞产生达到高峰，但此时和骨髓瘤细胞融合效率很低；免疫3天后B细胞处于从成熟B细胞向浆细胞分化的时期，此时融合效率最高。下列说法正确的是( )
A.一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体
B.单克隆抗体制备过程中从小鼠的骨髓中取B淋巴细胞
C.体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对某种抗原的单克隆抗体
D.单克隆抗体制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合
7、下图为利用小白鼠（基因型为cc）和小黑鼠（基因型为CC）形成人工嵌合体小鼠的实验，相关说法错误的是( )
A.图中嵌合体小鼠的基因型为Cc
B.过程①早期胚胎培养时需模拟体内环境
C.代孕母鼠需用激素进行同期发情处理
D.人工嵌合体小鼠含有四个亲本的遗传物质
8、卵母细胞成熟包括“细胞核成熟”和“细胞质成熟”两个方面。研究人员利用基因敲除技术敲除小鼠的Btg4基因，发现Btg4敲除的卵母细胞虽能正常成熟和受精，但形成的早期胚胎却全部阻滞在1到2细胞阶段，造成雌性不育。胚胎停止发育原因是卵母细胞中的mRNA不能被及时降解。下列说法错误的是( )
A.若输卵管阻塞，则精卵细胞结合和胚胎早期发育均不能完成
B.该实验的目的是探究Btg4基因在卵母细胞和早期胚胎中的作用
C.卵母细胞中mRNA的及时降解是启动早期胚胎基因组激活的前提条件
D.Btg4基因与卵母细胞中mRNA降解有关，可促使卵母细胞的细胞核成熟
9、原肠运动是指囊胚细胞有规则地移动，使未来的内胚层和中胚层细胞迁入胚胎内部，而未来的外胚层细胞铺展在胚胎的表面，从而形成原肠胚，是早期胚胎发育最特殊的阶段，细胞会从几百个增加到几千、几万个。下列说法正确的是( )
A.卵裂期胚胎中细胞数量不断增加，胚胎总体积不断增大
B.如果早期胚胎不能正常孵化，胚胎就无法继续发育
C.取原肠胚外胚层细胞做染色体分析鉴定胚胎的性别
D.囊胚细胞在胚胎发育时的分化程度是最大的
10、基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的，正是这些学科的理论基础和相关技术的发展催生了基因工程。下列有关基因工程发展史的说法正确的是( )
A.肺炎链球菌的转化实验证明了DNA是主要的遗传物质，且DNA可在同种生物不同个体间转移
B.1972年，伯格首先在体外进行了DNA改造，构建成了第一个体外重组DNA分子
C.基因工程诞生的理论基础包括DNA双螺旋结构的确立、遗传密码的破译、工具酶的发现等
D.尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的密码子为基因复制提供了理论依据
11、2022年3月8日下午，首位接受猪心脏移植的患者去世，虽然只存活了两个多月但该手术仍被视为医学重大进展。将经过基因改造的猪心脏移植入体内，该手术为全球首例，并且手术后在最关键的48小时内并未发生任何异常，这为解决人体移植器官短缺的问题带来了曙光。下列说法错误的是( )
A.与灵长类动物相比，猪体内隐藏的、可导致人类疾病的病毒少
B.基因改造的猪心脏可能导入了某种调节因子抑制抗原决定基因的表达
C.基因改造过程中可能用到了限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶等
D.理论上可以利用病人体内的iPS细胞诱导形成心脏，这样可以避免免疫排斥
12、人葡葡糖脑苷脂酶（hGC）缺乏症是一种常染色体隐性遗传病，患者因缺乏hGC基因而不能合成hGC，导致牌脏肿大、梗死和破裂，所以通常活不过10岁。传统的治疗方法是从人的胎盘中提取hGC 后注入人体，治疗价格十分昂贵。科学家现已将hGC基因通过农杆菌转化法成功转入烟草中，并高效表达，其过程如下图所示。下列说法正确的是( )
A.转化是指将hGC基因导入烟草细胞的过程
B.过程③一般采用显微注射将农杆菌导入烟草细胞
C.从含重组Ti质粒的农杆菌中获取hGC基因的表达产物可直接用于疾病治疗
D.从愈伤组织中提取蛋白质作为抗原进行抗原一抗体杂交检测hGC基因是否翻译
13、枯草杆菌蛋白酶能催化蛋白质水解为氨基酸，在有机溶剂中也能催化多肚的合成。这些碱性蛋白酶具有重要的应用价值，被广泛应用于洗涤剂、制革及丝绸工业。1987年福什特通过将枯草杆菌蛋白酶分子表面的Asp（99）和Glu（156）改成Lys，而导致了活性中心His（64）质子pKa从7下降到6，使酿在pH=6时的活力提高10倍。下列说法正确的是( )
A.完成氨基酸的替换需要通过改造基因实现
B.该成果体现了蛋白质工程在培育新物种方面具有独特的优势
C.经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶活性提高这一性状不可遗传
D.蛋白质工程最终要达到的目的是获取编码蛋白质的基因序列信息
14、下图表示“DNA的粗提取与鉴定”实验中的部分操作步骤，相关说法正确的是( )
A.为避免颜色干扰，实验中不能采用菠菜叶片作为实验材料
B.过程③所示操作中加入的试剂甲应是0.14mol/L的NaC1溶液
C.A组为对照组，B组为实验组，该实验自变量为是否加入了DNA
D.过程④加入二苹按试剂沸水浴后即可观察到较为明显的颜色反应
15、下列关于生物技术安全性与伦理问题的说法，正确的是( )
A.只要有证据表明产品有害，就应该禁止转基因技术的应用
B.将玉米的α - 淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，可以防止基因污染
C.生殖性克隆是利用克隆技术产生特定的细胞来修复或替代受损的细胞
D.试管婴儿需要对植入前胚胎进行遗传学诊断，有可能得到智力超群的“完美婴儿”
16、为了探究日常售卖的冰激凌中大肠杆菌含量是否超标，某生物兴趣小组设计了如下实验:
制备伊红-亚甲蓝琼脂培养基（生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色）→取10mL刚融化的同种冰激凌作为原液→用稀释涂布平板法接种→适宜条件下培养、观察→出现了不同形态、颜色的菌落。提示：我国卫生部规定了饮用水标准为1L自来水中大肠杆菌不能超过3个。下列说法正确的是( )
A.制备培养基的基本过程为:配制培养基→定容→灭菌→调pH
B.可以用显微镜直接计数法来检测培养基上生长的大肠杆菌数量
C.该实验制备的培养基为鉴别培养基，需要设计接种的完全培养基作为对照组
D.培养基上出现了不同形态、颜色的菌落说明除了大肠杆菌之外还有其他杂菌污染
二、多选题
17、愈伤组织生芽过程中，细胞分裂素（CK）通过A基因和W基因起作用。为探究A基因与W基因在愈伤组织生芽过程中的关系，科研人员做了如下实验：①将A基因功能缺失突变体a和野生型的愈伤组织分别置于CK与生长素比例高的（高CK）培养基中诱导生芽，在此过程中测定的W基因表达量如图1；②用转入A基因的方法使上述突变体a中过量表达W基因，获得材料甲。将材料甲、突变体a和野生型三组的愈伤组织在高CK培养基中培养，三组愈伤组织分化生芽的比例如图2。下列说法错误的是( )
A.一定范围内，高CK诱导时间越长野生型W基因表达量越高
B.在高CK诱导下，W基因促进A基因表达
C.缺失A基因时，W基因表达不能促进愈伤组织分化生芽
D.过量表达W基因，不会使愈伤组织分化生芽时间提前
18、青蒿素是治疗疟疾的重要药物，研究人员已弄清青蒿细胞中青蒿素的合成途径（图中实线方框内所示），并发现酵母细胞也能产生合成青蒿素的中间产物FPP（图中虚线方框内所示）。下列说法正确的是( )
A.利用植物组织培养技术生产青蒿素时，常用紫外线对接种室灭菌
B.将ADS基因导入酵母细胞，可以培育生产青蒿素的转基因酵母菌
C.可利用PCR和电泳等技术检测转基因酵母是否转录出ADS基因的mRNA
D.抑制FPP转化为固醇的途径，可以提高转基因酵母生产青蒿素的产量
19、糖蛋白NMB（GPNMB）在包括乳腺癌在内的多种不同肿瘤中均有高表达，目前已被公认为是乳腺癌细胞恶性行为的启动子。在癌细胞中，GPNMB主要位于细胞膜上，而在正常细胞中GPNMB更多的是细胞内的，这使得GPNMB成为ADC药物的理想靶标，科学家将单克隆抗GPNMB抗体与抗癌药物结合形成的抗体-药物偶联物（ADC）导入小鼠模型上进行临床前研究，取得了良好的效果。下列说法正确的是( )
A.癌细胞调亡是细胞主动死亡的过程，其过程存在基因的选择性表达
B.单克隆抗GPNMB抗体与癌细胞膜上的GPNMB特异性结合后，不能直接诱导癌细胞调亡
C.将GPNMB反复注射到小鼠体内，从小鼠的血清中也可直接获取单克隆抗GPNMB抗体
D.用单克隆抗GPNMB抗体制备的ADC只能特异性杀死癌细胞，对正常细胞无毒害作用
20、图1表示限制上和限制上的识别序列和切割位点，图2表示某环状DNA分子（长度为5000b）先用限制酶甲完全切割，再把得到产物用限制上完全切割后的片段电泳结果。下列说法错误的是( )
A.限制酶断裂磷酸二酯键后，还需解旋酶断裂氢键才能形成黏性末端
B.在该环状DNA分子中，限制酶甲和限制上的识别序列分别有4个和6个
C.该环状DNA分子被限制酶甲切割后，含有4个游离的磷酸基团
D.限制酶甲和乙切割形成的黏性末端再重组的DNA分子不能再被限制酶甲或乙所识别
三、实验题
21、发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。青霉素是产黄青霉菌在有氧条件下产生的一种非常重要的抗菌药物，生产青霉素的发酵工程流程如下图所示。
图示生产青霉素的发酵过程中，对产黄青霉菌进行分离纯化采用了____法，其可以用来计数的原理为____。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至________性。分离得到菌种后“摇瓶”培养的目的是______________________________________________（至少答2点）。
（3）发酵过程中，为了解某时刻产黄青霉菌的数量，取10ml菌液加入到90ml无菌水中，混匀，将0.1mL稀释液接种于培养基上。105倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为68、76和78，则每毫升菌液中产黄青霉数量为__________个。待完全发酵结束后，采用__________ 等方法将菌体分离。
（4）若“纯粹分离”的平板上混入了一些乳酸菌，请依据其代谢类型设计一个简单实验区分乳酸菌和产黄青霉菌，写出实验思路和预期结果。
实验思路：____。
预期结果：____。
22、应用体细胞核移植技术，我国已成功地克隆了牛、羊、猪和猴等多种哺乳动物。下图为高产奶牛的体细胞核移植流程图。
（1）从牛卵巢采集的卵母细胞，需在体外培养到M期用于核移植，原因是______________
_____________________________________。目前普遍使用的去核方法是________________。
（2）供体细胞培养时需放置于37℃的CO2培养箱中，其中的气体条件是_______________；细胞培养一段时间后常会出现分裂停止的现象，原因可能是___________________________。
（3）为了探究蛋白酶抑制剂MG-132在高产奶牛核移植过程中的作用，研究人员在核移植整个过程中添加 5μmol·L-1MG-132，操作结束后再进行激活，实验结果如下表。
MG-132添加 核移植细胞个数 卵裂率 桑葚胚率 囊胚率
-：不添加 50 35/50 25/35 7/25
+：添加 50 37/50 29/37 11/29
注:同列数据之间差值< 0.05表示差异不显著，> 0.05表示差异显著
分析表中数据，该实验的结论可表述为_____________________________________________。
四、读图填空题
23、运用植物体细胞杂交技术，可以跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，培育出新的作物类型，也可以让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞。下图表示两种生物细胞融合的示意图。
（1）若A、B分别为海滩正常生长的大米草和抗稻瘟病水稻的原生质体，目的是培育在盐碱地正常生长且抗稻瘟病的大米草-水稻。诱导A、B细胞融合的化学方法有PEG融合法、___________法等，由D细胞培养成杂种植株需要的条件有___________________________，筛选出杂种植株的方法是_____________________________________。
（2）紫杉醇是从红豆杉属植物中提取出来的抗癌药物，传统方法不仅产量低还会严重破坏这一濒危物种。若A为红豆杉细胞，在离体条件下将其诱导形成愈伤组织，进而制成细胞悬液使其增殖的技术叫_______________，获得的紫杉醇属于_________代谢物。
（3）若A、B分别为小鼠的骨髓细细胞和B淋巴细胞，要想获得足够数量的能分泌所需抗体的D细胞，需对选择培养的融合细胞进行_________________________的多次筛选。最终筛选的D细胞产生的抗体与血清抗体相比，具有_________________________的优点。但小鼠的单克隆抗体会使人产生免疫反应，从而导致它的治疗效果大大降低。请利用蛋白质工程设计降低小鼠单克隆抗体在人体上产生的免疫反应，设计思路是____________________________。
24、把某种生物的基因组DNA切成适当大小，分别与载体组合后导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，也就是说这个群体包含了这种生物的所有基因，叫做这种生物的基因组文库。图1表示用λ噬菌体载体和限制性内切核酸酶部分消化法构建基因组文库的部分过程，图2表示用核酸杂交法（用放射性标记的特异DNA探针）从基因文库中筛选目的基因的过程。
（1）图1中c过程表示________________过程，其必须包括的结构有________________。
（2）图1中用BamHⅠ与Sau3A两种限制酶切割产生的DNA片段能够相连接，原因是 ________________________，其缺点是_____________________________________________。
（3）图2中将硝酸纤维素膜覆盖于菌落上，目的是__________________________________。原来的菌落平板是否需要保留，并阐释你的理由_____________________________________。
（4）取已长有菌落的膜，用碱液处理，使菌落发生裂解，DNA随之变性。接着用蛋白酶处理硝酸纤维素膜去除蛋白质，形成菌落DNA印记。80℃烘烤滤膜，将DNA固定在膜上，DNA探针与之杂交会形成黑色斑点。请据此写出筛选出目的基因的菌落的过程：_______________
________________________________________________________________________。
25、融合PCR技术（fusionPCR）采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来，为同源重组片段的构建提供了快速简捷的途径。图1表示融合PCR技术的过程示意图（P1-P4表示引物），图2表示融合后产物的电泳图。
（1）从化学本质上来说，引物是____________________作用是________________________________________________________。
（2）图1过程设计的P2与P3引物的添加序列必须能够发生________________。融合PCR步骤1中，至少进行________循环才能获得基因A的PCR产物。
（3）融合PCR步骤2中基因A、B融合形成一个基因的机制是________________________________________________________________________________________________________。
若要对A、B融合基因继续进行PCR扩增，则图1中的M、N处位置所需要的引物分别是________。
（4）图2中电泳图中________号条带最可能表示融合后片段，若PCR反应没有扩增出任何产物，则可能的原因是________________________________________________（至少两点）。
参考答案
1、答案：D
解析：A、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，A正确； B、与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高，B正确； C、微生物农药是利用微生物或其代谢产物来防治农林害虫的。微生物农药作为生物防治的重要手段，将在农业的可持续发展方面发挥越来越重要的作用，C正确； D、微生物含有丰富的蛋白质，以淀粉或纤维素的水解液，制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得了大量的微生物菌体，即单细胞蛋白就是微生物菌体，D错误。
故选：D。
2、答案：B
解析：在泡菜制作过程中，菌种主要来源于附着在蔬菜表面的野生乳酸菌以及代代相传的“老母水”，A错误。代代相传的“老母水”中含有乳酸菌，因此添加“老母水”的目的是增加乳酸菌含量，有利于泡菜发酵，B正确。泡菜发酵过程中，由于蔬菜表面带有微生物，腌制初期不抗酸的微生物大量繁殖，硝酸还原酶活性高，将泡菜中的硝酸盐还原成亚硝酸盐，亚硝酸盐含量升高；乳酸菌分解亚硝酸盐，同时乳酸含量增加（pH下降），抑制了不抗酸的微生物的繁殖，硝酸还原酶活性降低，亚硝酸盐含量减少，故亚硝酸盐含量变化的直接原因是杂菌代谢，C错误。乳酸菌进行无氧呼吸，产物为乳酸，不产生CO2，D错误。
3、答案：B
解析：A、使用液体培养基并搅拌处理，更利于枯草芽孢杆菌的增殖，A错误； B、在灭菌时，培养皿应先分装并用牛皮纸包紧再放入干热灭菌箱中，B正确； C、将培养基冷却到50℃左右倒入平板，待其凝固后，将培养皿倒过来放置，C错误； D、若采用稀释涂布平板法接种，涂布完成后需在培养皿盖底做好标记，D错误。
故选：B。
4、答案：B
解析：
5、答案：B
解析：A、人造肉是干细胞在体外增殖和分化形成的，因此生产人造肉的原理是细胞增殖和细胞分化，A正确； B、干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞，胚胎干细胞分化程度低，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞的潜能，而成体干细胞只能分化为特定的组织，不具有分化为成年动物体内任何一种类型细胞的潜能，B错误； C、干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，因此生产人造肉的干细胞可以从动物早期胚胎或成体的组织、器官内获得，C正确； D、人造肉是通过干细胞在富含氨基酸、脂质、维生素的培养液中培养而成的，不需养殖动物且同时减少了激素和抗生素的使用，前景广阔，D正确。
故选：B。
6、答案：A
解析：A、B淋巴细胞实际上就是浆细胞，一种浆细胞只能分泌一种特异性抗体，A正确； B、单克隆抗体制备过程中从免疫小鼠的脾脏中取B淋巴细胞，B错误； C、体外培养单个B淋巴细胞，还需经过阳性检测，以获得针对某种抗原的单克隆抗体，C错误;D、单克隆抗体制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养，加入促融剂聚乙二醇，D错误。
故选：A。
7、答案：A
解析：A、图中嵌合体小鼠是由两部分不同细胞共同发育形成的，其体细胞中部分细胞基因型为CC，部分细胞的基因型为cc,A错误； B、过程①早期胚胎培养时需模拟体内环境，以保证胚胎的正常发育所需要的条件，B正确；C、代孕母鼠需用激素进行同期发情处理，使其生理状态具备受孕的基础，C正确； D、由于人工嵌合体小鼠是由两个受精卵发育形成的早期胚胎合并后发育形成的，而每个受精卵中的遗传物质涉及父本和母本共两个亲本，因此人工嵌合体小鼠含有四个亲本的遗传物质，D正确。
故选：A。
8、答案：D
解析：A、精卵结合和胚胎早期发育是在输卵管中进行的，故若输卵管阻塞，则精卵细胞结合和胚胎早期发育均不能完成，A正确； B、分析题意可知，本实验利用基因敲除技术敲除小鼠的Btg4基因后观察其早期胚胎发育情况和育性，故该实验的目的是探究Btg4基因在卵母细胞和早期胚胎中的作用，B正确； C、结合题意“胚胎停止发育原因是卵母细胞中的mRNA不能被及时降解”可知，卵母细胞中mRNA的及时降解是启动早期胚胎基因组激活的前提条件，C正确； D、Btg4基因敲除后卵母细胞能正常成熟和受精，说明该基因与细胞核成熟无关，而形成的早期胚胎却全部阻滞在1到2细胞阶段，推测可能是Btg4基因能促使细胞质成熟，D错误。故选：D。
9、答案：B
解析：A、胚胎发育的卵裂期的胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加或略有缩小， A错误； B、囊胚内部逐渐出现囊胚腔，囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化。故囊胚在细胞分化过程中须发生孵化，否则将无法继续发育，B正确； C、切取囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定，C错误； D、个体发育中，胚胎期参与分化的细胞比例最高，所以达到最大限度，D错误。
故选：B。
10、答案：B
解析：A、肺炎链球菌的转化实验证明了DNA是遗传物质，没有证明DNA是主要的遗传物质，A错误； B、1972年伯格首先在体外进行了DNA改造的研究，成功地构建了第一个体外重组DNA分子，B正确； C、基因工程诞生的理论基础包括：DNA是遗传物质的证明；DNA双螺旋结构和中心法则的确立；遗传密码的破译，而工具酶的发现是基因工程的条件，不是理论基础，C错误； D、尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的密码子为基因的表达提供了理论依据，D错误。
故选：B。
11、答案：D
解析：A、与灵长类动物相比，猪体内隐藏的、可导致人类疾病的病毒少，因此猪更适合用于解决人类移植器官短缺的问题，A正确； B、科学家还试图利用基因工程方法对猪的器官进行改造，将器官供体基因组中导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官，B正确;C、基因改造过程涉及基因工程技术，因此可能会用到限制酶和DNA连接酶，该过程也会进行DNA复制，则可能也会用到DNA聚合酶，C正确； D、iPS细胞能诱导形成多种细胞，但还不能诱导形成心脏，D错误。
故选：D。
12、答案：D
解析：A、转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，故转化是指将hGC基因导入烟草细胞，并且在烟草细胞内维持稳定和表达的过程，A错误； B、过程③一般采用含重组质粒的农杆菌感染烟草细胞，B错误； C、应农杆菌属于原核生物，不含内质网和高尔基体，所表达的蛋白质还不具有相应的空间结构，没有活性，从含重组Ti质粒的农杆菌中获取hGC基因的表达产物需加工后才可用于疾病治疗，C错误； D、分子水平的检测之一，可从愈伤组织中提取蛋白质作为抗原进行抗原-抗体杂交检测hGC基因是否翻译，D正确。
故选：D。
13、答案：A
解析：A、氨基酸的排列顺序是由基因决定的，因此完成氨基酸的替换需要通过改造基因实现， A正确； B、该成果培育了新品种，而不是新物种，B错误； C、经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶的基因发生了改变，因此经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶活性提高这一性状可以遗传， C错误； D、蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的，它最终要达到的目的是改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求，D错误。
故选：A。
14、答案：C
解析：A、由于酒精能够溶解菠菜叶中的叶绿素，同时还会进行过滤操作，故菠菜叶片可作为实验材料，但哺乳动物的成熟红细胞不能作为实验材料，A错误； B、结合分析可知，过程③所示操作中加入的试剂甲应是二苯胺溶液，B错误； C、结合分析可知，若要鉴定是否有DNA，需取两只试管分别加入NaCl溶液，在其中一只试管中加入丝状物或沉淀物（DNA），然后加入二苯胺进行沸水加热鉴定，故该实验的自变量为是否加入DNA,C正确； D、过程④加入二苯胺试剂沸水浴5min，冷却后可观察到较为明显的颜色反应，D错误。
故选：C。
15、答案：B
解析：A、科技是把双刃剑，要发展有利的一面，限制有危害的一面，不能因噎废食，A错误； B、将玉米的α-淀粉酶基因与目的基因转入植物中，由于α-淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏而使花粉失活，因此可以防止转基因花粉的传播，B正确； C、生殖性克隆是通过克隆技术产生独立生存的新个体，C错误； D、试管婴儿对植入前胚胎一般不需要进行遗传学诊断，而设计试管婴儿往往为了避免后代患某种遗传病，需要进行遗传学诊断，D错误。
故选：B。
16、答案：D
解析：A、制备培养基的基本过程为：配制培养基→调pH→定容→灭菌→倒平板，A错误； B、可以用稀释涂布平板法来检测培养基上生长的大肠杆菌数量，显微直接计数通常无法辨别大肠杆菌的活性，B错误； C、该实验制备的培养基为鉴别培养基，需要设计不接种的空白培养基作为对照组，C错误； D、培养基上出现了不同形态、颜色的菌落说明培养基中有多种微生物，即除了大肠杆菌之外还有其他杂菌污染，因为菌落的特征是鉴别菌种的标志，D正确。
故选：D。
17、答案：BD
解析：A、如图可知，一定范围内，高CK诱导时间越长野生型W基因表达量越高，两者成正相关，A正确； B、在高CK诱导下，转入A基因的方法使上述突变体a中过量表达W基因，B错误； C、如图2可知，A基因功能缺失突变体a愈伤组织分化未生芽，C正确； D、如图2可知，过量表达W基因，愈伤组织分化生芽时间提前，D错误。
故选：BD。
18、答案： BCD
解析：A、利用植物组织培养技术生产青蒿素时，常用紫外线对接种室消毒，A错误； B、将ADS基因导入酵母细胞，可以培育生产青蒿素的转基因酵母菌，从而实现青蒿素的产业化生产，B正确； C、可利用PCR和电泳等技术检测转基因酵母是否转录出ADS基因的mRNA：若出现杂交带，则证明转录成功，C正确； D、据图可知，抑制FPP转化为固醇的途径，可以促进ADS酶转化为青蒿酸前体进而转变为青蒿素的途径，进而提高转基因酵母生产青蒿素的产量，D正确。
故选：BCD。
19、答案：AB
解析：A、细胞凋亡与基因选择性表达有关，癌细胞的调亡属于细胞主动死亡，A正确； B、GPNMB主要位于细胞膜上，单克隆抗GPNMB抗体与癌细胞膜上的GPNMB特异性结合后，属于间接诱导细胞调亡，B正确； C、将GPNMB反复注射到小鼠体内，从小鼠的血清中可获取GPNMB抗体，但不是属于单克隆抗体，C错误； D、正常细胞中GPNMB更多的是细胞内的，说明有部分正常细胞的GPNMB也在细胞膜上，可能存在毒害作用，D错误。
故选：AB。
20、答案：ABC
21、答案：（1）稀释涂布平板；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；酸
（2）提高培养液中溶解氧；使产黄青霉菌充分接触营养物质，提高营养物质利用率
（3）7.4×107；过滤、沉淀
（4）实验思路:将平板至于置于无氧环境中继续培养，观察菌落形态大小的变化
预期结果:若菌落继续生长，则为乳酸菌；若菌落不能继续生长，则为产黄青霉菌
解析：（1）图示生产青霉素的发酵过程中，根据平板中菌落的分布可知，对产黄青霉菌进行分离纯化采用了稀释涂布平板法，该方法还可以用来计数，因为该接种方法中当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，因此可根据菌落数确定菌体的数目。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至酸性，因为霉菌适宜在酸性条件下生存。
（2）分离得到菌种后，需要进行“摇瓶”培养，这是因为产黄青霉菌是需氧型微生物，而摇瓶能提高培养液中溶解氧；使产黄青霉菌充分接触营养物质，提高营养物质利用率，从而达到高产的目的。
（3）发酵过程中，为了解某时刻产黄青霉菌的数量，取10ml菌液加入到90ml无菌水中，混匀，将0.1mL稀释液接种于培养基上。105倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为68、76和78，则每毫升菌液中产黄青霉菌数量为（68+76+78）÷3÷0.1×105=7.4×107个。待完全发酵结束后，可采用过滤、沉淀等方法获得微生物菌体。
（4）若“纯粹分离”的平板上混入了一些乳酸菌，乳酸菌是厌氧微生物，而产黄青霉菌为需氧型微生物，据此可将两者分开，相应的实验设计思路为将平板至于置于无氧环境中继续培养，观察菌落形态大小的变化，由于乳酸菌适宜在无氧条件下生存，所以菌落继续生长的为乳酸菌；菌落不能继续生长为产黄青霉菌，据此可将二者分离开来。
22、答案：（1）MⅡ期卵母细胞的细胞质中含有使细胞核表达全能性的物质；显微操作法
（2）95%空气和5%CO2；细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏和细胞发生接触抑制现象
（3）蛋白酶抑制剂MG-132对核移植细胞的卵裂率无显著影响，但可以显著提高核移植细胞的桑葚胚率和囊胚率
解析：（1）由于MⅡ期卵母细胞的细胞质中含有使细胞核表达全能性的物质，故从牛卵巢采集的卵母细胞，需在体外培养到MⅡ期用于核移植；目前普遍使用的去核方法是显微操作法。
（2）动物细胞培养过程中需要营造的气体条件是95%空气和5%CO2由于细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏和细胞发生接触抑制现象，细胞培养一段时间后常会出现分裂停止的现象。
（3）分析表格数据可知，与不添加MG-132相比，蛋白酶抑制剂MG-132对核移植细胞的卵裂率无显著影响，但可以显著提高核移植细胞的桑甚胚率和囊胚率。
23、答案：（1）高Ca2+-高pH融合；适宜的外界条件、一定的营养物质和植物激素；用一定浓度的盐水浇灌植物并做稻瘟病菌的接种实验
（2）植物细胞培养；次生
（3）克隆化培养和抗体检测；能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备；利用蛋白质工程将小鼠抗体上结合抗原区域的基因拼接到人抗体的基因上构建基因表达载体，转入适当的宿主细胞中表达人鼠嵌合的抗体
解析：（1）人工诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法等。在植物体细胞杂交中，融合后得到的杂种细胞在适宜的外界条件、一定的营养物质和植物激素条件下，经过诱导可形成愈伤组织，并可进一步发育成完整的杂种植株。由题意可知，该过程的目的是培育在盐碱地正常生长且抗稻瘟病的大米草-水稻，获得的杂种植株必须能够适应盐碱地的条件，而且能够抗稻瘟，因此需要用一定浓度的盐水浇灌植物并做稻瘟病菌的接种实验。
（2）由分析可知，制备植物细胞悬液使其增殖的技术叫植物细胞培养，通过该培养可提取植物的次生代谢物。
（3）由题意结合分析可知，D细胞为杂交瘤细胞，在获取杂交瘤细胞的过程中需要进行克隆化培养和抗体检测。由D细胞产生的抗体为单克隆抗体，具有能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备的优点。分析题意可知，小鼠的单克隆抗体会使人产生免疫反应，治疗效果会降低，但其特异性应该没有变化，说明该抗体上结合抗原的区域不会激起人体免疫反应，因此可利用蛋白质工程，将小鼠抗体上结合抗原区域的基因拼接到人抗体的基因上构建基因表达载体，然后转入适当的宿主细胞中表达人鼠嵌合的抗体。
24、答案：（1）基因表达载体的构建；启动子、终止子、标记基因、目的基因
（2）切割产生了相同的黏性末端；可能造成载体与载体之间、目的基因与目的基因之间的自身连接，也可能造成目的基因与载体之间的反向连接
（3）将待筛选菌落从其生长的平板上转移至硝酸纤维膜上；需要保留，原来的菌落平板要作为对照，从对应位置上找到含目的基因的菌落
（4）用放射性32P标记的特异DNA探针与滤膜上DNA杂交，通过放射性自显影显示杂交结果，黑色斑点就是要寻找的目的基因，再通过对应于平板上的位置找到目的基因的菌落
解析：（1）分析图1可知，c过程表示基因表达载体的构建，基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（2）用BamHⅠ与Sau3A两种限制酶切割产生了相同的黏性末端，故用BamHI与Sau3A两种限制酶切制产生的DNA片段能够相连接，其缺点是可能造成载体与载体之间、目的基因与目的基因之间的自身连接，也可能造成目的基因与载体之间的反向连接。
（3）为了将待筛选菌落从其生长的平板上转移至硝酸纤维膜上，故需将硝酸纤维素膜覆盖于菌落上。需要保留原来的菌落平板要作为对照，从对应位置上找到含目的基因的菌落。
（4）用放射性32P标记的特异DNA探针与滤膜上DNA杂交，通过放射性自显影显示杂交结果，黑色斑点就是要寻找的目的基因，再通过对应于平板上的位置找到目的基因的菌落。
25、答案：（1）一小段单链DNA或RNA；使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸
（2）碱基互补配对；2
（3）引物P2与P3添加序列的互补链发生碱基互补配对，然后在TaqDNA聚合酶的作用下向两边延伸，基因A、B完成融合；P1、P4
（4）4；复性温度太高；引物设计不合理无法与目的基因结合