江苏省连云港市重点中学2022-2023学年高二下学期期中学业质量监测生物学试题（Word版含答案）
文档属性
| 名称 | 江苏省连云港市重点中学2022-2023学年高二下学期期中学业质量监测生物学试题（Word版含答案） |  | |
| 格式 | doc | ||
| 文件大小 | 2.7MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2023-04-15 18:58:29 | ||
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文档简介
连云港市重点中学2022-2023学年高二下学期期中学业质量监测
生物
一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。
1．下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是（ ）
A．传统发酵的操作过程都需要经过严格的灭菌处理，防止杂菌污染
B．果酒制作时，葡萄中的葡萄糖可以为微生物的发酵提供碳源和氮源
C．果醋发酵液中，液面处醋酸菌的密度大于瓶底处的密度
D．泡菜制作时只能装八成满，所留空间的氧气可促进主要发酵菌种的增殖
2．下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是（ ）
A．筛选硝化细菌的选择培养基中需添加碳源
B．稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数
C．巴氏消毒法能杀死牛奶中所有微生物且不破坏牛奶的营养成分
D．微生物实验中，使用过的培养基丢弃前需消毒处理，以免污染环境
3．下列关于发酵工程及其应用，叙述正确的是（ ）
A．发酵工程的中心环节是分离和提纯产物
B．发酵工程所用的菌种都是从自然界中筛选的性状优良的单一菌种
C．可通过过滤发酵液、离心去除固体杂质，采用蒸馏法等进一步纯化目标产品
D．啤酒、味精、赤霉素等的生产属于厌氧发酵产品
4．下列关于天竺葵的组织培养叙述正确的是（ ）
A．外植体用酒精消毒30min，再用无菌水冲洗2-3次
B．灭过菌的培养基自然冷却后需至于30℃的培养室中观察3d后备用
C．在外植体放入无菌培养基时，一般将天竺葵叶正面接触培养基
D．与分化芽的培养基相比，分化根的培养基中细胞分裂素与生长素的比例更高
5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．选取的幼年动物组织块用胃蛋白酶处理使其分散成单个细胞
B．充入5%的CO2刺激细胞正常呼吸
C．为减少杂菌污染，添加的血清需要经过高压蒸汽灭菌处理
D．定期更换培养液可以补充营养成分并清除代谢废物
6．下图表示通过相关技术获得高产奶牛的流程，下列叙述正确的是（ ）
A．A表示细胞核，其供体可选用XX或XY性染色体的个体
B．从牛卵巢中采集的卵母细胞需经过获能处理才可用于①过程
C．可利用显微操作的方法将A注射到去核的卵母细胞中
D．进行过程②前必须对受体动物注射适量免疫抑制剂
7．下列关于培养基类型的叙述错误的是（ ）
A．天然培养基由动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成
B．合成培养基的优点是化学成分明确，配制过程简单，成本较低
C．牛肉膏蛋白胨培养基既是一种天然培养基又是一种基础培养基
D．选择培养基可以将某种或者某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来
8．生物兴趣小组利用苹果进行“DNA粗提取与鉴定”的实验，相关操作正确的是（ ）
A．苹果组织研磨前经液氮冷冻处理可提高DNA的提取量
B．提取DNA时加入酒精目的是使不溶于酒精的蛋白质等析出
C．研磨液中的洗涤剂SDS能瓦解细胞壁，有利于细胞破裂
D．鉴定时将DNA粗提物溶于二苯胺试剂，沸水浴加热待试管冷却观察颜色变化
9．下列关于高压蒸汽灭菌锅的使用叙述正确的是（ ）
A．加水是指使用前在灭菌桶内加适量的水，水达到水位标记线即可
B．装锅是指将待灭菌物品装满灭菌桶，盖好锅盖，依此旋紧锅盖四周的螺栓
C．加热后，随着锅内压力逐渐增加，须打开排气阀，排出锅内残留的冷空气
D．出锅是指关闭电源后，旋开固定螺栓，开盖取出灭菌物品
10．下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是（ ）
A．用NaCl处理细菌B使其处于感受态可吸收重组质粒
B．将完成导入的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌
C．将完成导入的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，含有重组质粒的细菌无法生长
D．可利用PCR技术检测人的生长激素基因是否在工程菌中转录和翻译
11．下图是小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程，相关叙述错误的是（ ）
A．过程①体外受精过程中精子会发生顶体反应，顶体反应主要发生在精子的头部
B．通过直接培养图中的卵母细胞也可获得小鼠的孤雌单倍体胚胎干细胞
C．过程②中，经历了有丝分裂和分化，不同阶段表达的基因存在差异
D．“早期胚胎”最可能是囊胚，其中的内细胞团细胞具有全能性
12．引物的设计是影响PCR扩增反应的效率和特异性的关键因素，相关叙述正确的是（ ）
A．DNA聚合酶能够从引物的5'端开始连接脱氧核苷酸
B．要尽量避免引物内部或引物之间存在碱基互补序列
C．PCR过程中使用的引物一般为单链RNA片段
D．引物的GC含量越高，结合特异性越强，越利于目标DNA的扩增
13．下列关于蛋白质工程及其应用的说法，错误的是（ ）
A．蛋白质工程能定向改造蛋白质分子结构，使之更加符合人类需要
B．蛋白质工程首先需要获得和分析目标蛋白质的相关信息
C．蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程
D．蛋白质工程技术中的操作对象是蛋白质或控制蛋白质合成的基因
14．研究人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A．马铃薯的茎尖经过灭菌后才能用于脱毒苗培育
B．利用组织培养技术获得的脱毒苗，是具有抗病毒的新品种
C．茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类相同
D．马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm
二、多项选择题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
15．研究人员拟从土壤样品中分离出高效降解甲醇的酵母并进行大量培养。操作流程如下，据图分析相关叙述正确的是
A．过程③是指将50℃左右的培养基倒入含有菌液的培养皿中
B．平板浇注分离法适宜于厌氧型或兼性厌氧型的微生物的分离和计数
C．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
D．扩大培养时，可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
16．下列关于干细胞技术及其应用叙述正确的是（ ）
A．胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离出来的一种高度未分化的细胞系
B．骨髓多能造血干细胞可分化出多种细胞具有发育成完整个体的潜能
C．上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞属于多能干细胞
D．利用培植皮肤干细胞的技术可以治疗大面积烧伤的患者
17．PGS技术又名“胚胎植入前染色体病筛查”，是在胚胎移植前对发育到一定阶段的胚胎进行染色体检查。胚胎嵌合体中含有两种或两种以上遗传组成的细胞。如下图所示为某胚胎嵌合体，浅色是正常细胞，深色是染色体异常细胞。下列说法正确的是（ ）
A．PGS技术可降低单基因遗传病患儿出生的概率
B．图示胚胎所有细胞中的染色体数目都相同
C．PGS结果正常的胚胎仍有患某些染色体病的风险
D．PGS技术有效降低了异常胚胎被移植的概率
18．科研人员用PCR扩增某抗虫基因，其研究了不同循环次数对扩增产物的影响，下图是扩增产物的电泳结果图，相关叙述正确的是（ ）
A．凝胶中DNA分子通过染色，可以在紫外灯下被检测出来
B．在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小有关
C．1、2、3泳道中得到的产物的核苷酸序列都相同
D．实验结果表明最适宜的循环次数为18
19．免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述错误的是（ ）
A．抗体1和抗体2是由同一种浆细胞分泌的两种不同抗体
B．如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象
C．图示中的DNA是牛乳基因中的DNA片段
D．PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈负相关
三、非选择题：本部分包括5题，共计57分。
20．（11分）猪流行性腹泻是由腹泻病毒（PEDV）引起的，PEDV是一种有囊膜的单股正链RNA病毒，S蛋白是PEDV表面的一种蛋白质，在病毒入侵过程中S蛋白与其特异性受体结合引起膜融合过程。下图1是S基因克隆表达流程，下图2是制备针对S蛋白的单克隆抗体的流程图。请回答：
（1）图1中PEDV增殖过程用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养Vero细胞，选择Vero细胞是因为其表面有______，10%胎牛血清的作用是______。为了使得Vero细胞分散可以在培养液中添加______。第一链cDNA的合成过程中需要______酶。
（2）图2中与直接注射灭活的PEDV相比，注射纯化后的S蛋白的优点是______。经过过程③HAT培养基的培养可以将______细胞筛选出来。
（3）图2中过程⑤阳性检测的原理是______，过程⑥阳性克隆扩大培养的方法有______。（2分）
（4）右图是对分离提纯的单克隆抗体的特异性反应检测，M泳道表示加入不同大小已知分子量的蛋白，2号泳道表示加入单克隆抗体与感染PEDV的Vero细胞发生特异性反应产物，则1号泳道表示加入______。（2分）
21．（12分）酥梨的糖分含量比柚子高，而柚子具有独特的香味，以酥梨柚子发酵而成的复合果醋，在滋味、香气方面二者可互补协调。下图是以新鲜酥梨、柚子为原材料，经过酒精发酵和醋酸发酵酿造酥梨柚子复合果醋的流程图，请回答：
（1）酵母菌进行无氧呼吸的场所在______，产物是______。
（2）实验前要将发酵瓶、榨汁机等器具要体积分数为______的酒精消毒。酒精发酵过程中发酵瓶要留有1/3的空间，原因是______。（2分）
（3）酒精发酵结束后，接入醋酸菌，同时加入柠檬酸/碳酸氢钾的目的是______，温度一般控制在______℃，同时进行220r·min-1的摇瓶振荡培养的目的是______。
（4）科研人员还研究了酵母接种量以及V（酥梨汁）：V（柚子汁）的比值对酒精发酵的影响，实验结果如下图：
①图2中V（酥梨汁）：V（柚子汁）比值过大酒精度下降的原因是______（2分）
②根据图1和图2实验结果可以得出最佳的发酵条件是______（2分）
22．（11分）豆科牧草二倍体沙打旺（2n=16）具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，同源四倍体紫花苜蓿（4n=32）固氮能力较强，科研人员利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如下，请回答：
（1）通过植物体细胞杂交技术可以克服______，获得兼具两者优良性状的豆科牧草，这种牧草属于______倍体。
（2）过程I用______处理获得原生质体。已知红色荧光染料能使得植物细胞质呈现红色，绿色荧光染料能使得细胞核呈现绿色，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，当观察到______现象时，可判断该原生质体是由沙打旺和紫花苜蓿融合而成的。
（3）过程IV脱分化形成的愈伤组织的特点为______，过程V中的培养基中常添加的植物激素有______。
（4）待幼苗长出较为发达的根系后进行移栽炼苗，炼苗的目的是______。
（5）科研人员研究了不同浓度的聚乙二醇（PEG）对沙打旺和紫花苜蓿原生质体融合率的影响，实验结果如下图，异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率，已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用：
①诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外还有______。
②实验结果表明诱导苜蓿与沙打旺原生质体融合的最佳PEG浓度为______，理由是______（2分）。
23．（11分）目前可溶性磷元素的缺乏已经成为制约植物生长的关键因素。解磷菌可以将土壤中难溶性的无机磷分解成可溶性的无机磷供植物吸收利用，目前的研究主要集中在常温下解磷菌筛选，而在低温环境下这些解磷菌则不能发挥作用。科员人员从南极企鹅岛土壤中尝试筛选耐低温的解磷菌，请回答：
（1）常规微生物实验中，常用______法对培养基进行灭菌。选择从南极企鹅岛土壤分离耐低温的解磷菌的原因是______。（2分）
（2）步骤④中的培养基的成分是：葡萄糖、（NH4）2SO4、NaCl、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4 7H2O、MnSO4、Ca3（PO4）2、琼脂粉等，其中做氮源的是______，琼脂粉作为______。
（3）步骤⑤是将具有明显溶磷圈的菌落多次重复______法以得到纯净的单一菌落，该过程使用的接种工具是______。
（4）初步筛选出3种能够在10℃条件下溶解无机磷培养基中难溶性无机磷而产生溶磷圈的低温解磷菌，结果如下图1，根据图1可知三株菌株中______的解磷能力最强，判断的理由是______。
（5）将初步筛选出的3株解磷细菌在液体培养基中进行复筛，180r/min的转速培养3d后菌液中的可溶性磷含量即可达到最高值，最高值的结果如图2，复筛的培养温度为______，根据实验结果可知______为最佳目标菌株。
24．（12分）科研人员克隆了猪白细胞抗原基因（SLA-2基因），构建了该基因的真核表达载体，进行了猪肾上皮细胞表达研究。实验的主要流程如下。请回答：
限制酶 BclI NotI XbaI Sau3AI
识别序列及切割位点 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
（1）过程①需要在PCR反应体系中添加的物质有______（2分）以及引物、DNA模板、缓冲液和Mg2+等，为了使得SLA-2基因能定向插入质粒A中，设计引物时需要在5′端添加______、______（填限制酶的名称）识别序列。
（2）过程②将重组质粒导入大肠杆菌的目的是______，该过程需要用______处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，然后将大肠杆菌涂布在含有______（抗生素）的培养基上培养。
（3）过程⑦研究人员用小鼠抗SLA抗原肽单克隆抗体检测肾上皮细胞生产的抗原肽，单克隆抗体能检测其是否具有正确的______，从而是否具有生物活性。
（4）科研人员将单个突变碱基引入SLA-2基因组cDNA质粒克隆中，流程如下图。已知在细菌体内合成的DNA分子有甲基化修饰，通过PCR扩增的DNA链无甲基化修饰。
①DpnI识别甲基化的GATC四个碱基序列，因此其能将______水解消化掉。在大肠杆菌细胞内完成缺刻修复需要______酶。
②已知质粒A为n个，经过程①扩增18个循环，需要突变引物______个，将过程②形成的产物全部转入大肠杆菌后复制a轮，得到双链突变的DNA______个。
生物参考答案及阅卷建议
一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。
1C 2.B 3.C 4. B 5.D 6.C 7.B
8.A 9.C 10.C 11.B 12.B 13.D 14.D
二、多项选择题：本部分包括5题,每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得 3 分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
15.ABD 16.AD 17.CD 18.ABD 19.ACD
三、非选择题：本部分包括5题，共计57分。
20.（11分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）特异性受体满足动物细胞培养的营养需要（补充未知的营养物质） 胰蛋白酶逆转录酶
（2）小鼠体内产生目标B淋巴细胞的概率更高（答案合理即可）杂交瘤
（3）抗原抗体特异性结合体内培养（注射到小鼠腹腔）或体外动物细胞培养（2分）（写对1点得1分）
（4）单克隆抗体与未感染PEDV的Vero细胞发生特异性反应（2分）（仅写“单克隆抗体”得1分）
21.（12分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）细胞质基质 酒精和二氧化碳（C2H5OH和CO2）
（2）70%便于酵母菌有氧呼吸大量增殖，防止发酵旺盛时发酵液的溢出（2分）（写对1点得1分）
（3）维持pH呈现酸性（维持pH稳定）30-35增加溶解氧（增加溶解氧、增加与营养物质的接触）
（4）①酥梨汁较柚子汁的含糖量高，糖度过高产生的高渗会抑制酵母菌的活性（2分）（写对1点得1分）
②酵母接种量为0.2%，V（酥梨汁）：V（柚子汁）=2：1（2分）（写对1点得1分）
22.（11分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）远缘杂交不亲和的障碍（异源）六倍体
（2）纤维素酶和果胶酶 发两种荧光
（3）不定型的薄壁组织团（没有特定形态、结构和功能的薄壁细胞） 细胞分裂素和生长素
（4）让其适应自然环境
（5）①物理融合法（电融合法） ②35%
该浓度下异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低对细胞的毒害作用较小（2分）（写对1点得1分）
23.（11分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） 南极企鹅岛气温较低分离到耐低温的解磷菌的概率较大（2分）（仅写“南极企鹅岛气温较低”得1分）
（2）（NH4）2SO4凝固剂
（3）平板划线法接种环
（4）Pd11溶磷圈直径与菌落直径的比最大
（5）10℃ Pd12
24.（12分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）、dNTP（2分）（写对1点得1分）
Not I Xba I（顺序可颠倒）
（2）让其在大肠杆菌中复制、保存Ca2+（CaCl2） 氨苄青霉素
（3）空间结构
（4）①a、b链（模板链） DNA连接酶 ②18n 18n·2a-1
生物
一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。
1．下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是（ ）
A．传统发酵的操作过程都需要经过严格的灭菌处理，防止杂菌污染
B．果酒制作时，葡萄中的葡萄糖可以为微生物的发酵提供碳源和氮源
C．果醋发酵液中，液面处醋酸菌的密度大于瓶底处的密度
D．泡菜制作时只能装八成满，所留空间的氧气可促进主要发酵菌种的增殖
2．下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是（ ）
A．筛选硝化细菌的选择培养基中需添加碳源
B．稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数
C．巴氏消毒法能杀死牛奶中所有微生物且不破坏牛奶的营养成分
D．微生物实验中，使用过的培养基丢弃前需消毒处理，以免污染环境
3．下列关于发酵工程及其应用，叙述正确的是（ ）
A．发酵工程的中心环节是分离和提纯产物
B．发酵工程所用的菌种都是从自然界中筛选的性状优良的单一菌种
C．可通过过滤发酵液、离心去除固体杂质，采用蒸馏法等进一步纯化目标产品
D．啤酒、味精、赤霉素等的生产属于厌氧发酵产品
4．下列关于天竺葵的组织培养叙述正确的是（ ）
A．外植体用酒精消毒30min，再用无菌水冲洗2-3次
B．灭过菌的培养基自然冷却后需至于30℃的培养室中观察3d后备用
C．在外植体放入无菌培养基时，一般将天竺葵叶正面接触培养基
D．与分化芽的培养基相比，分化根的培养基中细胞分裂素与生长素的比例更高
5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．选取的幼年动物组织块用胃蛋白酶处理使其分散成单个细胞
B．充入5%的CO2刺激细胞正常呼吸
C．为减少杂菌污染，添加的血清需要经过高压蒸汽灭菌处理
D．定期更换培养液可以补充营养成分并清除代谢废物
6．下图表示通过相关技术获得高产奶牛的流程，下列叙述正确的是（ ）
A．A表示细胞核，其供体可选用XX或XY性染色体的个体
B．从牛卵巢中采集的卵母细胞需经过获能处理才可用于①过程
C．可利用显微操作的方法将A注射到去核的卵母细胞中
D．进行过程②前必须对受体动物注射适量免疫抑制剂
7．下列关于培养基类型的叙述错误的是（ ）
A．天然培养基由动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成
B．合成培养基的优点是化学成分明确，配制过程简单，成本较低
C．牛肉膏蛋白胨培养基既是一种天然培养基又是一种基础培养基
D．选择培养基可以将某种或者某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来
8．生物兴趣小组利用苹果进行“DNA粗提取与鉴定”的实验，相关操作正确的是（ ）
A．苹果组织研磨前经液氮冷冻处理可提高DNA的提取量
B．提取DNA时加入酒精目的是使不溶于酒精的蛋白质等析出
C．研磨液中的洗涤剂SDS能瓦解细胞壁，有利于细胞破裂
D．鉴定时将DNA粗提物溶于二苯胺试剂，沸水浴加热待试管冷却观察颜色变化
9．下列关于高压蒸汽灭菌锅的使用叙述正确的是（ ）
A．加水是指使用前在灭菌桶内加适量的水，水达到水位标记线即可
B．装锅是指将待灭菌物品装满灭菌桶，盖好锅盖，依此旋紧锅盖四周的螺栓
C．加热后，随着锅内压力逐渐增加，须打开排气阀，排出锅内残留的冷空气
D．出锅是指关闭电源后，旋开固定螺栓，开盖取出灭菌物品
10．下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是（ ）
A．用NaCl处理细菌B使其处于感受态可吸收重组质粒
B．将完成导入的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌
C．将完成导入的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，含有重组质粒的细菌无法生长
D．可利用PCR技术检测人的生长激素基因是否在工程菌中转录和翻译
11．下图是小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程，相关叙述错误的是（ ）
A．过程①体外受精过程中精子会发生顶体反应，顶体反应主要发生在精子的头部
B．通过直接培养图中的卵母细胞也可获得小鼠的孤雌单倍体胚胎干细胞
C．过程②中，经历了有丝分裂和分化，不同阶段表达的基因存在差异
D．“早期胚胎”最可能是囊胚，其中的内细胞团细胞具有全能性
12．引物的设计是影响PCR扩增反应的效率和特异性的关键因素，相关叙述正确的是（ ）
A．DNA聚合酶能够从引物的5'端开始连接脱氧核苷酸
B．要尽量避免引物内部或引物之间存在碱基互补序列
C．PCR过程中使用的引物一般为单链RNA片段
D．引物的GC含量越高，结合特异性越强，越利于目标DNA的扩增
13．下列关于蛋白质工程及其应用的说法，错误的是（ ）
A．蛋白质工程能定向改造蛋白质分子结构，使之更加符合人类需要
B．蛋白质工程首先需要获得和分析目标蛋白质的相关信息
C．蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程
D．蛋白质工程技术中的操作对象是蛋白质或控制蛋白质合成的基因
14．研究人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A．马铃薯的茎尖经过灭菌后才能用于脱毒苗培育
B．利用组织培养技术获得的脱毒苗，是具有抗病毒的新品种
C．茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类相同
D．马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm
二、多项选择题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
15．研究人员拟从土壤样品中分离出高效降解甲醇的酵母并进行大量培养。操作流程如下，据图分析相关叙述正确的是
A．过程③是指将50℃左右的培养基倒入含有菌液的培养皿中
B．平板浇注分离法适宜于厌氧型或兼性厌氧型的微生物的分离和计数
C．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
D．扩大培养时，可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
16．下列关于干细胞技术及其应用叙述正确的是（ ）
A．胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离出来的一种高度未分化的细胞系
B．骨髓多能造血干细胞可分化出多种细胞具有发育成完整个体的潜能
C．上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞属于多能干细胞
D．利用培植皮肤干细胞的技术可以治疗大面积烧伤的患者
17．PGS技术又名“胚胎植入前染色体病筛查”，是在胚胎移植前对发育到一定阶段的胚胎进行染色体检查。胚胎嵌合体中含有两种或两种以上遗传组成的细胞。如下图所示为某胚胎嵌合体，浅色是正常细胞，深色是染色体异常细胞。下列说法正确的是（ ）
A．PGS技术可降低单基因遗传病患儿出生的概率
B．图示胚胎所有细胞中的染色体数目都相同
C．PGS结果正常的胚胎仍有患某些染色体病的风险
D．PGS技术有效降低了异常胚胎被移植的概率
18．科研人员用PCR扩增某抗虫基因，其研究了不同循环次数对扩增产物的影响，下图是扩增产物的电泳结果图，相关叙述正确的是（ ）
A．凝胶中DNA分子通过染色，可以在紫外灯下被检测出来
B．在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小有关
C．1、2、3泳道中得到的产物的核苷酸序列都相同
D．实验结果表明最适宜的循环次数为18
19．免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述错误的是（ ）
A．抗体1和抗体2是由同一种浆细胞分泌的两种不同抗体
B．如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象
C．图示中的DNA是牛乳基因中的DNA片段
D．PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈负相关
三、非选择题：本部分包括5题，共计57分。
20．（11分）猪流行性腹泻是由腹泻病毒（PEDV）引起的，PEDV是一种有囊膜的单股正链RNA病毒，S蛋白是PEDV表面的一种蛋白质，在病毒入侵过程中S蛋白与其特异性受体结合引起膜融合过程。下图1是S基因克隆表达流程，下图2是制备针对S蛋白的单克隆抗体的流程图。请回答：
（1）图1中PEDV增殖过程用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养Vero细胞，选择Vero细胞是因为其表面有______，10%胎牛血清的作用是______。为了使得Vero细胞分散可以在培养液中添加______。第一链cDNA的合成过程中需要______酶。
（2）图2中与直接注射灭活的PEDV相比，注射纯化后的S蛋白的优点是______。经过过程③HAT培养基的培养可以将______细胞筛选出来。
（3）图2中过程⑤阳性检测的原理是______，过程⑥阳性克隆扩大培养的方法有______。（2分）
（4）右图是对分离提纯的单克隆抗体的特异性反应检测，M泳道表示加入不同大小已知分子量的蛋白，2号泳道表示加入单克隆抗体与感染PEDV的Vero细胞发生特异性反应产物，则1号泳道表示加入______。（2分）
21．（12分）酥梨的糖分含量比柚子高，而柚子具有独特的香味，以酥梨柚子发酵而成的复合果醋，在滋味、香气方面二者可互补协调。下图是以新鲜酥梨、柚子为原材料，经过酒精发酵和醋酸发酵酿造酥梨柚子复合果醋的流程图，请回答：
（1）酵母菌进行无氧呼吸的场所在______，产物是______。
（2）实验前要将发酵瓶、榨汁机等器具要体积分数为______的酒精消毒。酒精发酵过程中发酵瓶要留有1/3的空间，原因是______。（2分）
（3）酒精发酵结束后，接入醋酸菌，同时加入柠檬酸/碳酸氢钾的目的是______，温度一般控制在______℃，同时进行220r·min-1的摇瓶振荡培养的目的是______。
（4）科研人员还研究了酵母接种量以及V（酥梨汁）：V（柚子汁）的比值对酒精发酵的影响，实验结果如下图：
①图2中V（酥梨汁）：V（柚子汁）比值过大酒精度下降的原因是______（2分）
②根据图1和图2实验结果可以得出最佳的发酵条件是______（2分）
22．（11分）豆科牧草二倍体沙打旺（2n=16）具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，同源四倍体紫花苜蓿（4n=32）固氮能力较强，科研人员利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如下，请回答：
（1）通过植物体细胞杂交技术可以克服______，获得兼具两者优良性状的豆科牧草，这种牧草属于______倍体。
（2）过程I用______处理获得原生质体。已知红色荧光染料能使得植物细胞质呈现红色，绿色荧光染料能使得细胞核呈现绿色，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，当观察到______现象时，可判断该原生质体是由沙打旺和紫花苜蓿融合而成的。
（3）过程IV脱分化形成的愈伤组织的特点为______，过程V中的培养基中常添加的植物激素有______。
（4）待幼苗长出较为发达的根系后进行移栽炼苗，炼苗的目的是______。
（5）科研人员研究了不同浓度的聚乙二醇（PEG）对沙打旺和紫花苜蓿原生质体融合率的影响，实验结果如下图，异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率，已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用：
①诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外还有______。
②实验结果表明诱导苜蓿与沙打旺原生质体融合的最佳PEG浓度为______，理由是______（2分）。
23．（11分）目前可溶性磷元素的缺乏已经成为制约植物生长的关键因素。解磷菌可以将土壤中难溶性的无机磷分解成可溶性的无机磷供植物吸收利用，目前的研究主要集中在常温下解磷菌筛选，而在低温环境下这些解磷菌则不能发挥作用。科员人员从南极企鹅岛土壤中尝试筛选耐低温的解磷菌，请回答：
（1）常规微生物实验中，常用______法对培养基进行灭菌。选择从南极企鹅岛土壤分离耐低温的解磷菌的原因是______。（2分）
（2）步骤④中的培养基的成分是：葡萄糖、（NH4）2SO4、NaCl、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4 7H2O、MnSO4、Ca3（PO4）2、琼脂粉等，其中做氮源的是______，琼脂粉作为______。
（3）步骤⑤是将具有明显溶磷圈的菌落多次重复______法以得到纯净的单一菌落，该过程使用的接种工具是______。
（4）初步筛选出3种能够在10℃条件下溶解无机磷培养基中难溶性无机磷而产生溶磷圈的低温解磷菌，结果如下图1，根据图1可知三株菌株中______的解磷能力最强，判断的理由是______。
（5）将初步筛选出的3株解磷细菌在液体培养基中进行复筛，180r/min的转速培养3d后菌液中的可溶性磷含量即可达到最高值，最高值的结果如图2，复筛的培养温度为______，根据实验结果可知______为最佳目标菌株。
24．（12分）科研人员克隆了猪白细胞抗原基因（SLA-2基因），构建了该基因的真核表达载体，进行了猪肾上皮细胞表达研究。实验的主要流程如下。请回答：
限制酶 BclI NotI XbaI Sau3AI
识别序列及切割位点 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
（1）过程①需要在PCR反应体系中添加的物质有______（2分）以及引物、DNA模板、缓冲液和Mg2+等，为了使得SLA-2基因能定向插入质粒A中，设计引物时需要在5′端添加______、______（填限制酶的名称）识别序列。
（2）过程②将重组质粒导入大肠杆菌的目的是______，该过程需要用______处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，然后将大肠杆菌涂布在含有______（抗生素）的培养基上培养。
（3）过程⑦研究人员用小鼠抗SLA抗原肽单克隆抗体检测肾上皮细胞生产的抗原肽，单克隆抗体能检测其是否具有正确的______，从而是否具有生物活性。
（4）科研人员将单个突变碱基引入SLA-2基因组cDNA质粒克隆中，流程如下图。已知在细菌体内合成的DNA分子有甲基化修饰，通过PCR扩增的DNA链无甲基化修饰。
①DpnI识别甲基化的GATC四个碱基序列，因此其能将______水解消化掉。在大肠杆菌细胞内完成缺刻修复需要______酶。
②已知质粒A为n个，经过程①扩增18个循环，需要突变引物______个，将过程②形成的产物全部转入大肠杆菌后复制a轮，得到双链突变的DNA______个。
生物参考答案及阅卷建议
一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。
1C 2.B 3.C 4. B 5.D 6.C 7.B
8.A 9.C 10.C 11.B 12.B 13.D 14.D
二、多项选择题：本部分包括5题,每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得 3 分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
15.ABD 16.AD 17.CD 18.ABD 19.ACD
三、非选择题：本部分包括5题，共计57分。
20.（11分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）特异性受体满足动物细胞培养的营养需要（补充未知的营养物质） 胰蛋白酶逆转录酶
（2）小鼠体内产生目标B淋巴细胞的概率更高（答案合理即可）杂交瘤
（3）抗原抗体特异性结合体内培养（注射到小鼠腹腔）或体外动物细胞培养（2分）（写对1点得1分）
（4）单克隆抗体与未感染PEDV的Vero细胞发生特异性反应（2分）（仅写“单克隆抗体”得1分）
21.（12分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）细胞质基质 酒精和二氧化碳（C2H5OH和CO2）
（2）70%便于酵母菌有氧呼吸大量增殖，防止发酵旺盛时发酵液的溢出（2分）（写对1点得1分）
（3）维持pH呈现酸性（维持pH稳定）30-35增加溶解氧（增加溶解氧、增加与营养物质的接触）
（4）①酥梨汁较柚子汁的含糖量高，糖度过高产生的高渗会抑制酵母菌的活性（2分）（写对1点得1分）
②酵母接种量为0.2%，V（酥梨汁）：V（柚子汁）=2：1（2分）（写对1点得1分）
22.（11分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）远缘杂交不亲和的障碍（异源）六倍体
（2）纤维素酶和果胶酶 发两种荧光
（3）不定型的薄壁组织团（没有特定形态、结构和功能的薄壁细胞） 细胞分裂素和生长素
（4）让其适应自然环境
（5）①物理融合法（电融合法） ②35%
该浓度下异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低对细胞的毒害作用较小（2分）（写对1点得1分）
23.（11分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） 南极企鹅岛气温较低分离到耐低温的解磷菌的概率较大（2分）（仅写“南极企鹅岛气温较低”得1分）
（2）（NH4）2SO4凝固剂
（3）平板划线法接种环
（4）Pd11溶磷圈直径与菌落直径的比最大
（5）10℃ Pd12
24.（12分，除特别注明外，其它每空1分）
（1）热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）、dNTP（2分）（写对1点得1分）
Not I Xba I（顺序可颠倒）
（2）让其在大肠杆菌中复制、保存Ca2+（CaCl2） 氨苄青霉素
（3）空间结构
（4）①a、b链（模板链） DNA连接酶 ②18n 18n·2a-1
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