四川省成都市重点中学校2022-2023学年高二下学期期中考试生物学试题（Word版含答案）

成都市重点中学校2022-2023学年高二下学期期中考试
生物试题
一、选择题部分（1-20题，每题1分，21-30每题2分，共40分）
1．人们利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史，源远流长。下列关于在果酒、果醋制作过程中的操作和菌种的描述，不正确的是（ ）
A．葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于酵母菌的细胞质基质，也存在于线粒体
B．果酒制作中，应先将新鲜的葡萄冲洗，再去掉葡萄的枝梗以防止杂菌污染
C．发酵条件不当果酒可能变酸，在变酸的酒的表面形成菌膜是醋酸菌大量繁殖而形成的
D．在果汁中加入人工培养的酵母菌可以提高果酒的品质并更好地抑制其他微生物的生长
2．在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行。下图甲是果酒、醋酸发酵装置，乙是培养液pH变化曲线图，下列叙述正确的是（ ）
A．发酵初期不通气，溶液中没有气泡产生
B．中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵
C．后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度
D．图乙中能正确表示pH变化的曲线是③
3．腐乳是我国古代劳动人民创造的一种经过微生物发酵制成的大豆食品。下列说法错误的是（ ）
A．腐乳易于吸收，是因为豆腐中蛋白质被分解为小分子的肽和氨基酚
B．多种微生物参与了豆腐的发酵，如毛霉、曲霉、根霉、酵母菌等
C．毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶参与腐乳发酵
D．腐乳制作过程中，盐、酒以及香辛料都具有防腐杀菌的作用
4．腐乳味道鲜美，易于消化吸收，所以一直受到人们的喜爱。下图为腐乳制作的流程示意图。下列说法错误的是（ ）
A．过程一中，为保证产品的质量，应在严格无菌的条件下，将优良毛霉菌种接种在豆腐上
B．过程二是将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，并逐层加盐，每层添加的盐量相等
C．过程三中卤汤配制所需要的材料有12%左右的酒以及各种香辛料
D．过程四中密封时；将瓶口通过酒精灯的火焰，再用胶条密封瓶口
5．下列是关于泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的描述，其中说法错误的是（ ）
A．制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料原因是亚硝酸盐的含量低
B．制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比为10：1，盐水需煮沸为了杀灭杂菌以及去除水中的氧气
C．发酵不同时期亚硝酸盐的含量会发生变化，及时检测是为了把握取食泡菜的最佳时机
D．温度过高、食盐用量过低、腌制时间过长，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加
6．有关泡菜中亚硝酸盐含量的研究表明，亚硝酸盐的含量高低和亚硝酸盐含量峰值时间的早晚与食盐的浓度有关（见下图），下列有关叙述不正确的是（ ）
A．为使实验结果准确，测定亚硝酸盐含量时应多次测定后取平均值
B．高盐浓度（7%）抑制了杂菌生长繁殖，减缓了硝酸盐还原成亚硝酸盐的反应
C．食盐的浓度越高亚硝酸盐的生成速度越快、含量峰值出现越早
D．据图可知，泡菜腌制时要采用适宜浓度的食盐，且腌制到一定时间才能食用
7．下列有关传统发酵技术的应用说法中正确的是（ ）
A．利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵
B．用白萝卜制作泡菜的过程中，添加已经腌制过的泡菜汁可缩短腌制时间
C．葡萄酒制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加
D．果酒、果醋和泡菜制作中利用的微生物都属于原核生物
8．下列有关培养基的说法正确的是（ ）
A．固体培养基中的琼脂除了凝固作用之外，通常还可以被微生物所利用
B．培养基中含C、H、O、N的有机物，只能作为异养微生物的碳源
C．培养基中的无机盐能调节渗透压，还可作为某些化能自养菌的能源物质
D．选择培养基是根据微生物的代谢产物与培养基中特定试剂反应而设计的
9．下表为培养某种微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是（ ）
成分 NaNO3 K2HPO4 KCl MgSO4·7H2O
含量 3g 1g 0.5g 0.5g
成分 FeSO4 （CH2O） H2O 青霉素
含量 0.01g 30g 1L 0.1万单位
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基
B．依用途划分，该培养基属于选择培养基
C．培养基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3
D．若用该培养基培养纤维素分解菌则应除去（CH2O），仅添加纤维素就可以
10．在生产和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来防止杂菌的污染。下列相关叙述不正确的是（ ）
A．玻璃和金属材质的实验器具可采用干热灭菌法进行灭菌处理
B．利用平板划线法分离菌种时，若在培养基上连续划线5次，接种环灼烧5次即可
C．没有将高压蒸汽灭菌锅内的冷空气排尽将影响培养基的灭菌效果
D．喷洒石炭酸同时配合紫外线照射可提高对超净工作台的消毒效果
11．在纯化培养的过程中，关于倒平板的描述正确的是（ ）
A．等培养基冷却至40℃左右时，方可进行倒平板
B．将灭过菌的培养皿放在桌面上，打开培养皿盖
C．等待平板冷却5~10s，将平板倒过来放置
D．倒平板后无需将培养基进行高压蒸汽灭菌
12．下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（ ）
A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌处理
B．步骤①锥形瓶中的培养基应该在灭菌之前将pH调至酸性
C．步骤②应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落
D．步骤③划线结束后在培养皿盖上做好标注
13．微生物的计数方法有多种，下列有关叙述错误的是（ ）
A．用滤膜法测定饮用水中大肠杆菌数目时，可利用鉴别培养基培养后计数
B．用血细胞计数板进行微生物显微计数时，高倍镜下观察不到完整的计数室
C．用平板划线法和稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际少
D．用已知密度红细胞悬液对待测菌液以比例计数法计数时，两种液体需混合均匀
14．如图所示为分离某种以尿素为氮源的细菌实验过程，下列叙述错误的是（ ）
A．土样从有哺乳动物尿液的地方取，获得目的菌种概率很高
B．为验证尿素固体培养基具有选择作用，可用牛肉膏蛋白陈固体培养基做对照
C．将实验组和对照组37-℃恒温培养24至48h时，需将平板倒置
D．在尿素固体培养基上生长的细菌都是以尿素为氮源的细菌
15．地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维素酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有稻草作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用刚果红处理，看到如图2所示情况，下列有关叙述，正确的是（ ）
A．②过程是涂布器蘸取乙中的菌液均匀地涂布在Ⅰ号培养基表面
B．甲、乙试管中的液体都属于液体培养基，主要作用是稀释菌种
C．可挑取图2中周围出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化
D．若图2中倒平板时加入刚果红染色液，出现透明圈的菌落一定是纤维素分解菌菌落
16．为了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，某研究小组进行了相关药敏实验，图Ⅰ为部分实验器材。将四个大小相同的分别含有相同浓度抗生素Ⅰ~Ⅳ的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，实验结果如图2。下列相关叙述正确的是（ ）
A．为获得长满测试菌的平板，需要使用图1中的器材①②③
B．图2中Ⅱ形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏感
C．图2抑菌圈中的菌落可能是在抗生素Ⅳ作用下产生了突变株
D．不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果
17．下列有关果胶酶及与果胶酶实验探究有关的叙述正确的是（ ）
A．探究果胶酶的最适用量时，pH、温度不影响实验结果
B．果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和葡萄糖异构酶等
C．应将果泥与果胶酶先混合均匀后再放置预设定温度的水浴锅中
D．可以用相同时间内过滤得到的果汁体积来定量表示果胶酶的活性
18．下列关于加酶洗衣粉的叙述，错误的是（ ）
A．加酶洗衣粉中的酶能够耐酸、耐碱、忍受表面活性剂和较高温度
B．洗衣粉中的酶经过特殊化学物质层层包裹，使用后可以回收利用
C．洗涤沾染奶渍的棉织物时，添加适量纤维素酶可提高去污效果
D．加酶洗衣粉中效果最明显的是碱性脂肪酶和碱性蛋白酶
19．在研究不同温度条件下加酶洗衣粉的洗涤效果的实验中，下列有关变量控制方法的叙述，正确的是（ ）
A．实验材料的污染程度属于本研究的无关变量，实验过程中不必考虑
B．若采用手洗法进行去污操作，需尽可能保证各组的洗涤用力程度、时间等基本相同
C．水温属于本实验的变量，实验过程中必须保证各组实验温度相同且恒定
D．水的用量和布料的大小是成正比的，实验用的布料越大、水量越多实验效果越好
20．工业化生产时，往往将酶或细胞固定化处理。下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（ ）
A．固定化细胞技术在催化多步连续反应方面优势明显
B．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧
C．包埋法固定酵母细胞时，海藻酸钠浓度过高，造成包埋的细胞少
D．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类浓度越大，发酵效果越好
21．《本草纲目》中记载了酿制烧酒的过程：以糯米或粳米等蒸熟，“酿瓮中七日……入甑蒸令汽上，用器承取滴露”，“凡酸坏之酒，皆可蒸烧”。下列说法正确的是（ ）
A．为使酵母菌进行酒精发酵，酿制时“瓮”应装满后密封
B．“糯米或粳米”中所含物质只能为微生物提供碳源和氮源
C．在利用酵母菌发酵的“七日”中，水和酒精是同时产生的
D．发酵过程中密封不严，醋酸菌将酒精转化为乙酸使酒“酸坏”
22．我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水：坛口覆一盖，浸于水中，……则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水，用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。……如有霉花，加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列说法不正确的是（ ）
A．“坛口覆一盖。浸于水中”有利于保持坛内的无氧环境
B．“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的之一是消毒杀菌
C．“霉花”主要由酵母菌增殖形成，酵母菌往往来自蔬菜
D．“坛沿外水须隔日一换，勿令其干”以保证坛内适宜湿度
23．兴趣小组为检测某品牌冰淇淋中大肠杆菌的数量是否超标，用培养细菌的基本培养基进行检测，在培养基上涂布适量的冰淇淋原液设为甲组，不涂布冰淇淋原液的培养基设为乙组，经过37℃、24h培养，发现乙组生长有少量菌落。下列相关叙述错误的是（ ）
A．需增设一组涂布大肠杆菌的培养基作为对照组
B．初步判断乙组培养基上菌种的类型，可用肉眼观察菌落特征
C．计数时，应将甲组的菌落数减去乙组的菌落数以消除误差
D．以菌落数代表样品中的大肠杆菌数量，统计结果往往比实际值偏小
24．啤酒生产的主要工艺流程如图所示。啤酒发酵时具有活力的酵母菌需达到一定的数量，故在菌种活化的过程中，需定时取样、检测酵母菌的生长状况。若某次样品经2次10倍稀释后，用台盼蓝染液染色（体积不计），在25×16型血细胞计数板上计数5个中格中的细胞数为144个。下列有关说法不正确的是（ ）
A．赤霉素可诱导淀粉酶合成从而促进种子萌发
B．应计数血细胞计数板上未被染色的细胞
C．样品中酵母菌细胞的密度为7.2×107个细胞/mL
D．糖化后的麦汁煮沸过程属于无菌技术中的消毒
25．下图为酱油的制作流程，其中米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油所需的蛋白酶、脂肪酶等，该过程需要提供营养物质、通入空气。下列说法错误的是（ ）
A．米曲霉发酵过程中，大豆中蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源
B．米曲霉分泌的酶可将大分子有机物水解为小分子有机物
C．发酵池发酵阶段应密封进行，酵母菌与米曲霉对氧气需求相同
D．发酵池中两种主要微生物产生的酒精、乳酸可以抑制杂菌生长
26．肠道菌群与人体健康存在密切关系，实验室常用硫乙醇酸盐流体培养基培养肠道菌群。硫乙醇酸盐流体培养基的主要成分包括胰酪蛋白陈、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化钠、L-胱氨酸、硫乙醇酸钠、琼脂、刃天青等，其中L-胱氨酸、‘硫乙醇酸钠和葡萄糖均可防止因过氧化物的积累而对厌氧细菌产生毒害。培养基的上层、中层、下层部位可以分别提供有氧、弱氧至无氧的梯度环境。下列说法错误的是（ ）
A．厌氧细菌、兼性厌氧细菌和好氧细菌均可在硫乙醇酸盐流体培养基中生长
B．琼脂可以防止液体流动，减少二氧化碳和氧气扩散，有利于厌氧环境的形成
C．胰酪蛋白陈可为厌氧细菌提供氮源以及合成蛋白质必需的各种氨基酸
D．硫乙醇酸盐流体培养基需经高压蒸汽灭菌后使用，接种工作应在超净工作台内完成
27．某工厂新制了50L苹果泥，准备生产果汁，但不知酶的最适用量。为了节约成本，进行了如下探究实验：取8只试管编号1~8，分别加入30mL苹果泥，保温一段时间，然后向各试管加入不同体积的果胶酶溶液，反应一段时间后过滤并记录果汁体积，实验数据如下表所示。下列分析错误的是（ ）
编号 1 2 3 4 5 6 7 8
果胶酶溶液体积（mL） 1 2 3 4 5 6 7 8
果汁体积（mL） 20.6 21.2 21.8 22.4 23 23.4 23.4 23.4
（注：果汁体积均不包含酶溶液体积。）
A．8只试管均需要调节至相同且适宜的温度、pH且反应时间充足
B．本实验的测量指标还可以是苹果泥反应完全时所需要的时间
C．在果汁生产中一般还应加入纤维素酶来充分瓦解细胞壁
D．为得到更准确的最适用量，可以设置5~6mL范围内不同果胶酶用量梯度实验来探究
28．生产上常用淀粉酶替代酸来水解淀粉生产食品。如图为某同学探究不同pH条件下淀粉酶对淀粉的分解作用的实验结果。下列说法错误的是（ ）
A．pH会影响淀粉酶的活性进而影响淀粉分解速率
B．pH为3和9的两支试管中的淀粉酶的活性相同
C．pH为13的试管调到pH为7后淀粉含量基本不变
D．将淀粉酶固定化后进行实验，pH为7的淀粉剩余量可能增加
29．加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。某同学通过实验比较了几种洗衣粉的去渍效果（“+”越多表示去渍效果越好），实验结果见下表。
项目 加酶洗衣粉A 加酶洗衣粉B 加酶洗衣粉C 无酶洗衣粉（对照）
血渍 +++ + +++ +
油渍 + +++ +++ +
下列说法中错误的是（ ）
A．加酶洗衣粉A中添加是蛋白酶，加酶洗衣粉B中添加的是脂肪酶
B．表中各种组的水量、水质、水温应保持相同且适宜
C．表中不宜用于洗涤蚕丝织物的洗衣粉是加酶洗衣粉A
D．加酶洗衣粉C不能对所有类型的污渍都有很好的去渍效果
30．某同学欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验，图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是进行葡萄糖发酵的装置（a是固定化酵母细胞，b是反应柱，c是分布着小孔的筛板）。下列叙述正确的是（ ）
A．刚浴溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液
B．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用仅是作'为反应底物
C．图1中将酵母细胞与海藻酸钠溶液混匀后快速注入CaCl2溶液中，会观察到有凝胶珠形成
D．图2装置中的长导管主要是排出CO2，防止空气中的杂菌进入反应柱
二、非选择题部分（本部分共4小题，每题5分，共60分）
31．（15分）发酵能让食物改头换面，拥有全新的模样和味道。利用不同微生物的发酵作用制作食品历史悠久，遍布民间，称为传统发酵技术。利用传统发酵技术制作的果酒、果醋、腐乳、泡菜极大地丰富了人们的饮食。请回答下列问题：
（1）果酒和果醋的制作：
①果酒发酵利用的微生物是酵母菌，其代谢类型是___________。
②果酒发酵结束后，接种醋酸菌可将果酒转变成果醋，其总反应式为____________。
（2）腐乳的制作：
将长出毛霉的豆腐装瓶加盐腌制一段时间后，最上层的豆腐块长出了黑毛和绿毛，原因可能是___________。在加卤汤装瓶阶段，若制作的卤汤中酒精含量过高，则会导致腐乳___________。市面上有近百种不同风味的腐乳，可能的原因是___________（答出2点）。
（3）泡菜的制作：
①泡菜制作离不开乳酸菌，常见的乳酸菌有___________。
②泡菜中的亚硝酸盐在特定条件下（适宜的pH、温度和一定的微生物的作用），可能转变成致癌物___________。
③若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是___________。
32．（15分）尿素[CO（NH2）2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氨肥，但只有当其被细菌分解成铵态氮后，才能更好地被植物吸收。请回答下列问题：
（1）某研究小组认为根据下表成分配置的培养基不能用于筛选分离尿素分解菌，理由是___________，若要筛选并鉴定该种细菌，需要对下表培养基的成分进行修改，具体修改措施为___________，并根据菌落周围出
现___________鉴定该菌。
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 蒸馏水
1.4 g 2.1 g 0.2 g 1.0 g 10.0 g 1.0 g 定容至1000mL
（2）图1表示该研究小组对尿素分解菌进行分离、计数的实验流程，经适当培养后，5个平板上的菌落数分别为155、175、150、41、160个，分析第4个平板菌落数较低的原因可能是___________，1g土壤中的活菌数约为__________个（保留小数点后两位），用这种方法统计得到的数值往往偏小，原因是___________。
（3）该研究小组将分离到的尿素分解菌在最适培养温度条件下进行振荡培养，并测定其生长曲线如图2所示。说明：OD600为样品中蛋白质、核酸的浓度，用此指标来代表细菌浓度；A点为培养10h时的细菌浓度。
振荡培养的目的是__________，通常在培养末期细菌的数量会显著减少，但图中研究人员实际测得的细菌浓度下降较慢，最可能的原因是__________。
33．（15分）反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮气（2NO3-+10e-+12H+→…N2O→N2），在处理工业污水、治理水体富营养化中具有重要作用。科研人员想从一污水处理厂的活性污泥中筛选分离出耐高温（42℃）的反硝化细菌（目的菌），用于提升温度较高的工业污水的脱氮效率，具体流程如图所示（BTB培养基初始pH=6.8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色）：
（1）BTB培养基灭菌后待平板凝固后，应倒置放在超净台上，目的是___________。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，目的是___________。
（2）将污泥样品梯度稀释后，使用__________（填工具）将样液均匀涂布在BTB培养基上，放在__________环境中培养2~3天后，挑选周围显__________色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
（3）将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶部检测到N2O，即可鉴定为目的菌。不能依据培养液中硝酸盐的浓度变低来鉴定目的菌，原因是__________。
（4）为保持纯化后的微生物菌种的纯净，需要对菌种进行保藏。临时保藏的方法具有___________等缺点，它比较适合那些使用频率高的菌种的保藏。
（5）C/N（碳氮含量比）对反硝化效率有一定的影响。科研人员测得不同C/N条件下目的菌对硝酸盐的去除率，结果如图所示：
科研人员提出，在利用目的菌株处理工业污水时，需要适当向污水中投放少量淀粉，据图分析这样做的主要目的是__________。
34．（15分）果胶酶广泛应用于果汁和果酒的加工工业。
Ⅰ．某实验小组进行了“探究果胶酶催化果胶水解最适pH”的课题研究。本课题的实验步骤中，在完成“烧杯中分别加入苹果泥，试管中分别注入果胶酶溶液、编号、分组”之后，有下面两种操作：
第一种：将试管中果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥相混合，再把混合液的pH分别调至4、5、6……10。
第二种：将试管中果胶酶溶液和烧杯中苹果泥pH分别调至4、5、6……10，再把pH相等的果胶酶溶液和苹果泥相混合。
（1）请问哪一种操作更科学 ___________。理由是__________。
（2）如果用曲线图的方式记录实验结果。在现有的条件下，实验的操作和记录是比较切实可行的。请画出本实验结果的曲线图，并在图中标注出本实验所获得的最适pH（用m表示）。
Ⅱ．研究人员利用海藻酸钠和CaCl2固定化果胶酶产生菌——黑曲霉菌，研究了固定化黑曲霉菌随着使用次数的增加对苹果汁出汁率的影响，每组测定了苹果原浆的质量（m1）和离心后苹果渣的质量（m2）实验结果如下图所示。回答下列问题：
（3）根据测定结果，各组的出汁率可以用___________（数学表达式）表示，从实验结果可以得出的结论是___________。
（4）固定化黑曲霉菌不宜采用物理吸附法或化学结合法，原因是___________；固定过程中溶化海藻酸钠时应采用___________的方法，以防止焦糊。
（5）制备固定化黑曲霉菌时，海藻酸钠能和CaCl2，反应产生海藻酸钙，而柠檬酸钠能与海藻酸钙反应，使其溶解。请你设计实验测定某凝胶珠中黑曲霉菌的活菌数，简要写出实验思路：
_____________________________________________________________________________。
成都市重点中学校2022-2023学年高二下学期期中考试
生物试题参考答案
一、选择题部分（1-20题，每题1分，21-30每题2分，共40分）
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
A B C B D C B C D B
11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
D C C D C D D B B A
21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
D D C C C C A B C D
二、非选择题部分（本部分共4小题，每题15分，共60分）
31．（15分）
（1）①异养兼性厌氧型（2分）
②C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O（2分）
（2）最上一层加盐偏少导致杂菌污染（2分） 成熟的时间延长（2分）
豆腐含水量不同，发酵条件不同以及装罐时加入的辅料不同（2分）
（3）①乳酸链球菌和乳酸杆菌（2分）
②亚硝胺（1分）
③食盐含量过高，抑制了乳酸菌的代谢，产生的乳酸少（2分）
32．（15分）
（1）培养基中含蛋白陈，尿素不是唯一氮源（培养基中含蛋白陈，蛋白胨中含氮元素）（2分）
去掉蛋白陈并添加琼脂和酚红指示剂（2分） 红色（1分）
（2）涂布器灼烧灭菌后未冷却，导致涂布时部分菌体死亡（2分）
1.60×108（2分）
当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（2分）
（3）增加培养液中溶解氧的含量，利于菌体与营养液的接触（2分）
死亡菌体中的蛋白质、核酸没有分解（或测得的是蛋白质、核酸浓度而不是细胞浓度；或死亡菌体没有自溶，不能与活菌区分）（2分）
33．（15分）
（1）防止皿盖上的水珠落入培养基，避免培养基中的水分过快的挥发（2分）
检测培养基平板灭菌是否合格（2分）
（2）涂布器（1分） 无氧、42℃（2分） 蓝（2分）
（3）其他微生物也能利用硝酸盐进行代谢，硝酸盐浓度同样会降低（2分）
（4）保存时间短、容易被污染或产生变异（2分）
（5）适当提高污水中的C/N，从而提高目的菌对污水中硝酸盐的去除率（2分）
34（15分）
（1）①第二种（1分）
第二种操作能够确保酶的反应环境从一开始便达到实验预设的pH环境（或第一种操作会在达到预定pH之前就发生了酶的催化反应）（2分）
（2）（2分）
（3）（m1-m2）/m1×100%（2分）
随着固定化黑曲霉菌使用次数的增多，苹果果汁的出汁率降低（2分）
（4）细胞体积大，难以被吸附或结合（2分） 小火或间断加热（2分）
（5）将凝胶珠用柠檬酸钠溶液洛解后用无菌水稀释，再用稀释涂布平板法进行计数（2分）