江西省宜丰县中2022-2023学年高二下学期4月期中考试生物学试题（含解析）
文档属性
| 名称 | 江西省宜丰县中2022-2023学年高二下学期4月期中考试生物学试题（含解析） |  | |
| 格式 | doc | ||
| 文件大小 | 3.8MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2023-04-22 22:29:08 | ||
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文档简介
宜丰县中2022-2023学年高二下学期4月期中考试
生物试卷
一、单选题（每小题只有一个正确选项，每小题1.5分，共30分）
1．（错题重现）图1是制作果酒和果醋的简易装置，图2是制作果酒或果醋过程中可能发生的物质变化。下列相关叙述正确的是（ ）
A．果酒发酵阶段，若开错气阀，则会导致发酵液溢出
B．果醋发酵阶段，醋酸菌进行④过程时发酵液中糖类充足
C．制作果酒的主要发酵菌进行①和②过程的场所是线粒体
D．制作果醋的主要发酵菌进行④过程时不需要O2的参与
2．（错题重现）甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图。相关叙述正确的是（ ）
A．细胞甲是能够产生抗甘草酸抗体的B淋巴细胞
B．若小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的染色体数均为40，则杂交瘤细胞的DNA分子数为80
C．过程④利用选择培养基筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞
D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖
3．稻田养蟹模式因操作简单、经济效益显著，在农村大面积推广。稻田为河蟹提供遮蔽活动空间和丰富的天然饵料，河蟹为稻田中耕松土、除虫、除草，且它们在田间的活动能促进水稻充分吸收养料。下列叙述错误的是（ ）
A．该稻田中的河蟹和水稻是一种原始合作关系 B．稻田养蟹模式促进了生态系统能量的循环利用
C．与普通稻田相比，该稻田调整了能量流动关系 D．养蟹的数量不能超过稻田承载力的限度
4．图为某生态系统的能量流动图解（W1为生产者固定的太阳能），下列叙述错误的是（ ）
A．生产者固定的总能量可表示为（A1+B1+C1+A2+B2+C2）
B．现存生产者个体数可小于初级消费者个体数
C．若A1表示生产者呼吸作用散失的能量，则C1可表示生产者流向分解者的能量
D．图解不仅能体现能量单向流动的特点，还能体现逐级递减的特点
5．家庭制作百香果果酒的过程如下：将准备好的新鲜百香果从中间切开，用干净的小勺取出果肉，放入已消毒的玻璃容器中，加入适量冰糖，拌匀，倒入米酒后密封容器口，放在适宜温度下让其自然发酵。下列说法错误的是（ ）
A．家庭制作百香果果酒的菌种主要来源于米酒中的酵母菌
B．将醋酸菌菌种放入果酒瓶中并密封容器口可制作成百香果果醋
C．玻璃容器中发酵液呈酸性，且酒精浓度较高，杂菌难以生存
D．家庭制作果酒果醋前，需要对器具和原料进行消毒
6．A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌(Sau) 引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48 h，结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A．实验中一般采用干热灭菌的方法对培养皿进行灭菌处理
B．四种抗生素中，抗生素A治疗Sau感染引起的肺炎效果最好
C．滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远抗药性越强
D．接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养
7．细菌内某种物质在酶的作用下转变为另一种物质的过程如图所示，其中V、W、X、Y、Z代表生长必需的不同物质，在A酶、C酶失效的情况下，要使细菌正常生长，必需向培养基中添加的物质是（ ）
A．V、W B．W、Z C．V、Y D．W、Y
8．根据食品安全国家标准（GB19645-2010）规定，每毫升合格的牛奶中细菌总数不超过50000个。某兴趣小组利用恒温水浴锅对新鲜牛奶进行消毒后，进行细菌总数测定，主要步骤如下图所示。相关叙述不正确的是 （ ）
A．步骤①中用巴氏消毒法对新鲜牛奶进行消毒，可以减少营养物质的损失
B．步骤②对牛奶进行梯度稀释可以使聚集的微生物分散，便于在培养基表面形成单菌落
C．步骤③中牛肉膏蛋白胨培养基要先高压蒸汽灭菌再调pH，以防止高温影响pH的稳定
D．实验结束时培养基上的菌落可能不止一种，若平均菌落总数少于50个则表明消毒合格
9．下列关于无菌技术的说法，正确的是（ ）
①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对无菌操作的要求非常严格
②对培养基进行湿热灭菌
③对植物材料进行表面消毒时，一方面要考虑药剂的消毒效果，另一方面要考虑植物材料的耐受能力
④所有的接种操作都必须在酒精灯火焰旁进行
⑤对培养的植物材料可进行湿热灭菌 ⑥如果不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃
A．①②③④⑤ B．①②③④ C．①②③④⑥ D．①②③④⑤⑥
10．模型构建是生命科学教学、科研的一种重要方法。下图是生物概念模型，相关分析错误的是（ ）
A．若图示为基因工程程，则C为重组质粒，D为受体细胞
B．若图示为食物网，则D可能是次级消费者、第二营养级
C．若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞
D．若图示为试管婴儿技术，C～D中需要用到胚胎移植技术
11．如图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列有关叙述错误的是（ ）
A．每个脾B淋巴细胞只能产生一种抗体
B．灭活的病毒促融合的效率一般不能达到100%
C．细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上有差异
D．克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象
12．科研人员研究发现，微藻能合成很多独特的对人体非常有益的生物活性物质，如EPA和DHA等不饱和脂肪酸。科研人员将自养的绿色巴夫藻和既可自养又能异养的四鞭藻进行融合，经筛选获得融合藻株。在自养培养条件下，测定它们的生长速率和EPA、DHA产率，如表。下列有关说法不合理的是（ ）
藻体 生长速率（g/L d） EPA（%） DHA（%）
绿色巴夫藻 0.058 0.212 0.073
四鞭藻 0.140 0.058 无
融合藻 0.141 0.067 0.054
A．融合藻具有生长迅速又能合成EPA和DHA的优点
B．诱导融合前用纤维素酶等处理两种藻以获得原生质体
C．细胞诱导融合完成后培养体系中应有3种类型的细胞
D．获得的融合藻还需进行克隆化培养和EPA、DHA检测
13．下列有关哺乳动物的受精卵形成过程的叙述正确的是（ ）
①获能精子与卵子相遇时释放多种酶
②获能精子与卵子相遇时释放的酶可溶解透明带、卵细胞膜
③卵子与精子结合前已完成减数分裂Ⅱ
④精子和卵子的细胞核经过相关生理过程，分别形成雄原核和雌原核
⑤精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带
A．①②⑤ B．②③④ C．①④⑤ D．②④⑤
14．（错题重现）动物细胞培养是动物克隆的基础，如图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③分别表示其结果，请据图回答，下列说法错误的是（ ）
A．若a是动物体细胞核移植技术，①为克隆动物，该技术可体现动物细胞核全能性
B．若b是体外受精技术，②的产生属于有性生殖，该技术可实现良种家畜大量繁殖
C．若c是胚胎分割技术，③中来自同一胚胎的子代具有相同的遗传物质
D．①②③中的受体（代孕母体）均需激素处理，以达到超数排卵和同期发情的目的
15．6–磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如下图所示。有关叙述错误的是（ ）
A．原代培养的细胞中都含XF基因和XS基因
B．单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
C．用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
D．原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞
16．哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段，可以获得孤雌或孤雄单倍体胚胎干细胞，为研究基因功能提供了理想的细胞模型。下图表示研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法，下列说法错误的是（ ）
A．方法一中，研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素，从而获得更多的卵母细胞
B．用SrCl2溶液处理的作用是激活卵母细胞，得到孤雌单倍体胚胎干细胞
C．获得的孤雄单倍体胚胎干细胞需要去除细胞M中的雌原核
D．若研究Y染色体上的相关基因功能，则应用方法一得到胚胎干细胞
17．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（ ）
A．提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解
B．将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定
C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
D．根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶I和II的切割位点，而有限制酶III的切割位点
18．正常小鼠是二倍体。研究发现，小鼠四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育成胎盘等胚胎以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织。下列叙述正确的是（ ）
A．嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型不同
B．嵌合体中的ES具有自我更新能力并只能分化为胎盘等胚外组织
C．嵌合体胚胎发育至原肠胚时需移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可发育
D．将正常小鼠2细胞期胚胎用灭活病毒诱导法使2细胞融合，可得到四倍体胚胎
19．克里斯蒂安森综合征（CS）是一种单基因控制的遗传病，患者发育迟缓、智力障碍。正常基因突变成CS基因后会产生一个限制酶切位点，科研工作者在调查中获得一个如图1所示的家系，并提取家系成员6、8、9控制CS的相关基因，用限制酶处理后进行电泳，结果如图2，以下叙述正确的是（ ）
A．该病可能为常染色体隐性遗传
B．若用限制酶处理2号的相关基因，经电泳可得到4条带
C．成员4号与5号基因型相同
D．成员7患病概率为1/8，且患者一定为男性
20．PCR技术可用于遗传多样性的研究。下图是对两个跳虫（A和B）DNA分析的实验过程，有关叙述错误的是（ ）
A．蛋白酶可以分解组织中的蛋白质，在提取DNA时加入蛋白酶有助于释放出DNA
B．Taq酶能够耐高温，高温下不会变性，常在PCR中用于DNA链的解旋
C．将已知长度的DNA片段装到凝胶上作参照，可用于估测样本DNA片段的大小
D．阴性对照是未加DNA模板但加入PCR扩增过程所需的混合物，以监测试剂是否污染
二、多选题（每小题可能有多个正确选项，每小题4分，错选不给分，少选给1分，共20分）
21．如图是某稻田生态系统碳循环示意图，图中字母表示碳元素转移量。下列相关分析错误的是（ ）
A．碳在乙和丙之间主要以二氧化碳的形式循环
B．丙中的生物都处于第二营养级，其种间关系有捕食和竞争两种
C．水稻生长期，该生态系统碳元素转移量为a>（b＋c＋e）
D．丁中的小动物类群丰富度调查常用样方法
22．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法错误是（ ）
A．①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸
B．野生型大肠杆菌能够合成所需的全部氨基酸，因此培养基中无需提供氮源
C．需将①中的菌液适当稀释后，用接种环蘸取菌液在②上进行涂布接种
D．从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养即可获得所需突变株
23．小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．为获得更多的囊胚，可采用激素注射以促进雄鼠产生更多的精子
B．用胰蛋白酶将细胞间的蛋白纤维消化后可获得分散的胚胎干细胞
C．细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同
D．胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养
24．下图表示用草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗盐新品种的过程。下列叙述正确的是（ ）
A．过程①需要使用相应酶破坏细胞膜以利于②过程进行
B．灭活病毒不能诱导过程②中A和B的融合
C．过程②处理后得到的两两融合原生质体类型可能有3种
D．经过过程④所得到的愈伤组织细胞中一般含有四个染色体组
25．如图表示生物工程中常用的部分技术流程图，据图分析错误的是（ ）
A．若图表示植物体细胞杂交部分流程，1和2通常要用相同方法处理
B．若图中1表示目的基因，2表示质粒，构建3中需要用到3种工具酶
C．若图表示哺乳动物体外受精过程，1、2中的细胞均已完成减数分裂
D．若图表示动物细胞核移植部分流程，3的各种性状由供体核来决定
三、综合题（共50分）
26．在生态系统中，生产者通过光合作用固定的能量称为总初级生产量。生产者固定的能量一部分被自己呼吸作用消耗掉，剩下的可用于生长、发育和繁殖，这部分能量称为净初级生产量。表格列出四个生态系统中总初级生产量与总入射日光量、生产者呼吸消耗量与总初级生产量的比值。(除说明外，每空1分，共9分)
生态系统的类型 玉米田 荒地 A湖 B湖
总初级生产量/总入射日光量 1.6% 1.2% 0.4% 0.1%
生产者呼吸消耗/总初级生产量 23.4% 15.1% 22.3% 21.0%
(1)四个生态系统中，光能利用效率最高的是 ______，总初级生产量转化为净初级生产量比例最高的生态系统是 _____。
(2)如图1表示一个相对稳定的生态系统中四个种群和分解者的能量相对值。请绘制由甲、乙、丙、丁四个种群形成的食物网简图。（2分）
(3)根据第（2）小题的信息，在图2中用箭头和文字补充完成能量流经丙种群的情况。（2分）
(4)由图可知，能量传递效率只有10%﹣20%的原因有：①一部分的能量被各营养级的生物通过 ________消耗；②上一营养级的部分个体 _______；③还有部分能量能量被 _____利用。
27．牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏。（每空1分，共11分）
(1)牛奶在饮用前都要经过__________，以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图操作。用无菌吸管从三角烧瓶中吸取______ mL生牛奶稀释液至盛有________mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10mL生牛奶稀释到10-4浓度后，取0.1mL滴在培养基上。
(2)将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是_______。（填数字）该涂布工具最合适的灭菌方法是_________。（填字母）
(3)消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释培养法检测消毒后牛奶是否含有细菌，则在操作步骤上应作什么改动？_____________。
(4)检测食品中大肠杆菌数量，可评价食品是否受到污染。下表培养基配方中，按照其物理性质②培养基属于___________培养基。下表中大肠杆菌能够生长的培养基有___________（填数字），理由是_______________。
成分及含量（g/L） 蛋白胨 酵母膏 葡萄糖 蔗糖 K2HPO4 NaNO3 MgSO4 NaCl FeSO4 琼脂
① 10 2 2 2 5 10
② 1 3 1 3 0.01 10
③ 10 5 3 5 10
(5)从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入____________，具有_____________________特征可以鉴别大肠杆菌。
28．我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示，请回答下列问题：(除说明外，每空1分，共9分)
(1)卵细胞转化成phFSC相当于植物组织培养中的____________过程，该过程___________（填“存在”或“不存在”）基因的选择性表达。
(2)要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，在对卵母细胞进行去核时，除了显微操作外还可以采用____________、紫外线短时间照射、化学物质处理等方法处理，得到的重构胚通常需要发育到__________阶段才能进行胚胎移植。
孤雄小鼠性染
(3)不考虑致死情况，得到的孤雌小鼠性染色体组成为______________，孤雄小鼠性染色体组成为__________。
(4)在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将_____________，否则会影响胚胎的进一步恢复和发育。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行用于医学研究的优点是______________________________________________。
29．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图，回答下列问题：(除说明外，每空1分，共10分)
(1)制备单克隆抗体过程中要用到______________和____________技术。制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_________，使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。
(2)步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行_____________和____________，该过程一般在多孔细胞培养板上进行。先将细胞悬浮液稀释到7∽10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到____________的目的。
(3)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据此原理，向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤，___________（填“能”或“不能”）筛选出杂交瘤细胞。原因是浆细胞不能__________、骨髓瘤细胞因__________________________而不能增殖、杂交瘤细胞可通过___________________能够增殖。
30．某些老陈醋会出现产气现象，原因是老陈醋中含有产气细菌。产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌，产气菌产生的气体积累会引起胀瓶，影响产品安全。实验小组以瓶装变质老陈醋（胀瓶）、未变质老陈醋为实验材料，筛选出导致老陈醋产气的细菌。回答下列问题：(除说明外，每空1分，共11分)
(1)为了筛选产气细菌，实验人员设置了甲、乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种__________。阐述如何从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株：__________。
(2)实验小组初步筛选出了A1、A2和A3三株疑似的产气细菌，筛选过程如右图所示。
①过程a的接种方法是__________，判断依据是 。
②统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致__________，或培养时间太长导致__________。
③现有5%的过氧化氢溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材。写出判断A1、A2和A3三种菌株是否为产气细菌的实验思路： 。（2分）
(3)分别用三组平板培养A1、A2、A3三种菌株，然后在培养基上分别加入等量一定浓度的青霉素溶液，培养一段时间后可以观察到一圈清晰区（抑菌圈），这是细菌生长被抑制所致。测量清晰区的直径，数据如下表所示：
细菌 不同浓度青霉素条件下清晰区直径/mm
5/（μg·mL-1） 7.5/（μg·mL-1） 10/（μg·mL-1） 15/（μg·mL-1） 20/（μg·mL-1）
A1 0.2 2 8 13 17
A2 7 10 12 15 16
A3 5 6 5 6 6
该实验的目的是__________。从表中数据可以看出，5μg·mL-1青霉素和20μg·mL-1青霉素在抑制A1和A3菌株上的区别是 、 。
宜丰县中2022-2023学年高二下学期4月期中考试
生物参考答案：
一、单选题（每小题只有一个正确选项，每小题1.5分，共30分）
1-5 ADBAB 6-10 CACCB 11-15 DCCDB 16-20 DDDDB
二、多选题（每小题可能有多个正确选项，每小题4分，错选不给分，少选给1分，共20分）
21 ABD 22 BC 23 AC 24 BCD 25 BCD
26．(除说明外，每空1分，共9分)
(1) 玉米田 荒地
(2)（2分）
(3)
（2分）
(4) 呼吸作用 没有被下一营养级捕食 分解者
27．（每空1分，共11分）
(1) 巴氏消毒 1 9
(2) ② A
(3)稀释次数减少
(4) 固体 ①③ 培养基为大肠杆菌生长提供了碳源、氮源和无机盐等
(5) 伊红美蓝 深紫色带有金属光泽
28．(除说明外，每空1分，共9分)
(1) 脱分化 存在
(2) 梯度离心 桑葚胚或囊胚
(3) XX XX，XY或YY
(4) 内细胞团均等分割
可以基本排除由基因不同造成的个体差异，同时可利用这些遗传背景相同的动物通过它们之间的对比来分析致病基因。(2分)
29．(除说明外，每空1分，共10分)
(1) 动物细胞培养 动物细胞融合技术 抗原
(2) 克隆化培养 抗体检测 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
(3) 能 增殖 DNA合成途径被阻断不能增殖 辅助途径合成DNA
30．(除说明外，每空1分，共11分)
(1) 等量的变质老陈醋 对比乙和丙培养基上的菌落形态，从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落
(2) 稀释涂布平板法 培养基中长出的菌落是均匀分布的
遗漏菌落的种类和数目 菌落粘连影响计数（或培养基表面干燥脱水）
将A1、A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上，若产生气泡则为产气细菌（2分）
(3) 探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用
在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好
在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大
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参考答案：
1．A
【详解】A、果酒发酵阶段，开气阀的目的是排气，而排气时应打开气阀b，若错开气阀a，会导致发酵液从进气管溢出，A正确；
B、果醋发酵阶段，醋酸菌在糖类匮乏时能利用酒精经一系列化学反应生成醋酸，B错误；
C、图2中，①过程进行的场所是细胞质基质，C错误；
D、醋酸菌利用酒精生成醋酸时，需要氧气的参与，D错误。
故选A。
2．D
【分析】一、克隆抗体的制备过程：
1、细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。
2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
3、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
4、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。
二、分析图示：①为注射抗原，诱导产生具有免疫能力的B淋巴细胞；②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；③用选择性培养基获得杂交瘤细胞；④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤为提取单克隆抗体。
3．B
【分析】研究能量流动的意义：①研究能量流动可以帮助人们科学规划、设计人工生态系统，使能量得到最有效的利用。②研究能量流用可以帮助人们合理调整生态系统中能量流动的关系，使能量持续高效的流向对人类最有益的部分。
【详解】A、稻田为河蟹提供遮蔽活动空间和丰富的天然饵料，河蟹为稻田中耕松土、除虫、除草，且它们在田间的活动能促进水稻充分吸收养料，稻田中的河蟹和水稻是一种原始合作关系，A正确；
B、稻—蟹农田使能量持续高效地流向了对人类最有益的部分，提高了能量的利用率，能量不能循环利用，B错误；
C、稻—蟹农田中蟹能以稻田中的杂草浮游植物为食，有利于水稻的生长，同时蟹又能够成为人类的食物来源，稻田养蟹调整了能量流动的关系，实现了对生态系统中浮游动物底栖动物等生物的物质和能量的利用，C正确；
D、生物数量超过了环境的承载力后，违背了协调与平衡原理，故养蟹的数量不能超过稻田承载力的限，D正确。
故选B。
4．A
【分析】生态系统中能量流动是单向的。在生态系统中，能量流动只能从第一营养级流向第二营养级，再依次流向后面的各个营养级，不可逆转，也不能循环流动。能量在流动过程中逐级递减。输入到一个营养级的能量不可能百分之百地流入下一个营养级，能量在沿食物链流动的过程中是逐级减少的。
【详解】A、生产者固定的总能量可表示为（A1+B1+C1+D1)，而D1=A2+B2+C2+D2是流入下一营养级的能量，故生产者固定的总能量可表示为（A1+B1+C1+A2+B2+C2+D2)，A错误；
B、现存生产者个体数可小于初级消费者个体数，如一棵树和这棵树上的昆虫，B正确；
C、题图中A1与C1代表呼吸作用散失的能量与流入分解者的能量，若A1表示生产者呼吸作用散失的能量，则C1可表示生产者流向分解者的能量，C正确；
D、能量流动是单向流动的：沿着食物链向高营养级传递，而不能倒过来流动；逐级递减：前一种生物所包含的能只有10%~20％能够传给下一种生物，其他的能量都损耗掉了，图解体现了能量单向流动的特点，还体现了逐级递减的特点，D正确。
故选A。
5．B
【分析】在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～30℃，pH最好是弱酸性。
醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
【详解】A、根据题干信息可知，在制作果酒时倒入了米酒，所以家庭制作百香果果酒的菌种主要来源于米酒中的酵母菌，A正确；
B、醋酸菌为好氧型细菌，将醋酸菌菌种放入果酒瓶中，不需要进行密封，B错误；
C、酒精发酵的产物是酒精和CO2，会导致发酵液呈酸性，且酒精浓度较高，杂菌难以在这种环境中生存，C正确；
D、家庭制作果酒果醋前，需要对器具和原料进行消毒，这样防止杂菌污染，D正确。
故选B。
6．C
【分析】实验室常用的灭菌方法：
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。
③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术，可以对培养皿进行灭菌处理，A正确；
B、据抑菌圈的大小，抗生素D的抑菌圈最小，治疗Sau感染引起的肺炎效果最差；而抗生素A抑菌圈最大，则治疗Sau感染引起的肺炎效果最好，B正确；
C、滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远，药性变弱，说明菌落抗药性越弱，C错误；
D、接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养，防止冷凝水滴落引发杂菌污染，D正确。
故选C。
7．A
【分析】图中物质①A酶作用下转变为物质②，物质②在B酶作用下转变为物质③，在D酶作用下转变为物质⑤，物质③和物质⑤分别在C酶和E酶作用下转变为物质④。
【详解】正常情况下，在细菌培养基中添加物质V就足够其生长，但由于A酶失效不能合成W，因此需要添加物质W，而物质Z的合成途径有两条，虽然C酶失效，但可以通过W→Y→Z的途径合成物质Z，同样满足细菌生长，因此添加物质V、W细菌能够正常生长，A正确，BCD错误。
故选A。
8．C
【分析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）的手段，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法；灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
【详解】A、80℃、15min～30min处理新鲜牛奶属于巴氏消毒法，采用短时高温处理的目的是尽量减少食物中营养物质的损失，A正确；
B、步骤②将牛奶进行梯度稀释的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培养基表面形成单个菌落，B正确；
C、牛肉膏蛋白胨培养基配制时应先调pH再灭菌，C错误；
D、由于生牛奶中的微生物可能不止一种，而牛肉膏蛋白胨培养基属于天然培养基，细菌、真菌等均可生长，因此，在实验中，培养基上可能不止出现一种菌落；依据样品液稀释1000倍，接种液体积为1mL，计算推测若平均菌落总数少于50个，则表明灭菌后牛奶中细菌总数不超过50000个，灭菌合格，D正确。
故选C。
9．C
【分析】无菌操作是植物组织培养技术的关键，如果灭菌不好就会导致整个技术的失败；对于整个操作过程中的凡是和植物组织接触的材料、用具和试剂都要进行灭菌消毒；但不同的用具、材料要用不同的方法进行灭菌，如培养基的灭菌用湿热灭菌，而植物组织用消毒液进行杀菌而不能用湿热灭菌。
【详解】①植物组织培养所利用的植物材料体积小，抗性差，灭菌不彻底就会导致整个实验的失败，①正确；
②在进行植物组织培养时，对培养基及其他器械要用湿热灭菌，②正确；
③对植物材料进行表面消毒时，一方面要考虑药剂的消毒效果，另一方面要考虑植物材料的耐受能力，培养中不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待，③正确；
④所有的接种操作必须在酒精灯火焰旁进行，④正确；
⑤对植物材料不能用湿热灭菌，应该用消毒液对其表面消毒，⑤错误；
⑥如果不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃，导致整个实验的失败，⑥正确。
综上分析①②③④⑥正确，即C正确。
故选C。
10．B
【分析】试管婴儿是体外受精+胚胎移植技术的俗称，是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。
【详解】A、若图示为基因工程，则C为重组质粒，是目的基因和载体相连形成的，D为受体细胞，为重组质粒的表达提供条件，A正确；
B、若图示为食物网，则D可能是次级消费者、第三营养级，B错误；
C、动物核移植，经常移植到去核卵母细胞中，若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞，此时A可能是细胞核供体细胞，C正确；
D、若图示为试管婴儿技术，C为早期胚胎培养，D为胚胎移植，D正确。
故选B。
11．D
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、抗体是由浆细胞产生，浆细胞是由B细胞或者记忆细胞经抗原刺激产生的，只能产生针对该抗原的抗体，因此一般情况下，一种浆细胞只能产生一种抗体，A正确；
B、灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，因此灭活的病毒促融合的效率一般不能达到100%，B正确；
C、细胞筛选时获得杂交瘤细胞需要在选择培养基上筛选，细胞融合时所用的培养液需要在加入诱导剂，两者的成分上有差异，C正确；
D、杂交瘤细胞具有无限增殖的特点，相当于癌细胞，无接触抑制现象，因此该细胞克隆化培养过程中不会出现接触抑制，D错误。
故选D。
12．C
【分析】根据表格信息可知，绿色巴夫藻能合成EPA和DHA，而四鞭藻不能合成DHA，融合藻可合成EPA和DHA。融合藻的生长速率与四鞭藻接近，但大于绿色巴夫藻。
【详解】A、根据表格可知，融合藻生长速率最大，且能合成EPA和DHA，A正确；
B、诱导两种藻细胞融合前需先用纤维素酶等处理以获得原生质体，便于细胞膜融合，B正确；
C、细胞诱导融合完成后培养体系中应有未融合的绿色巴夫藻细胞、四鞭藻细胞以及两个绿色巴夫藻细胞融合体、两个四鞭藻细胞融合体、一个四鞭藻细胞和一个绿色巴夫藻细胞融合体，共5种类型的细胞，C错误；
D、获得的融合藻还需进行克隆化培养和EPA、DHA检测，以便获得符合要求的融合细胞，D正确。
故选C。
13．C
【分析】1、受精作用过程：a、顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠；b、透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应（它是防止多精子入卵受精的第一道屏障）；c、卵细胞膜反应：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程（它是防止多精子入卵受精的第二道屏障）；d、精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核；e、雌、雄原核融合形成合子。2、胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
【详解】①精子与卵子接触，释放多种酶，以溶解卵细胞膜外的结构（如透明带等），①正确；
②获能精子与卵子相遇时释放的酶可溶解放射冠、透明带，②错误；
③卵子与精子结合前已完成减数分裂Ⅰ，③错误；
④受精过程中，精子的核变成雄原核、卵子的核成为雌原核，④正确；
⑤透明带反应是指当精子越过放射冠，进入透明带并接触卵细胞膜的瞬间，卵子发出指令，产生阻止后续的精子进入透明带的生理反应，⑤正确。
故选C。
14．D
【分析】1.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多，营养丰富。卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达。（3）体细胞核移植的大致过程是：将供体体细胞核导入受体去核卵母细胞，形成重组细胞，用电脉冲刺激形成早期胚胎，导入代孕母羊的子宫，妊娠、出生后即克隆动物。
2.胚胎分割1.概念：采用机械方法将早期胚胎切割成2、4或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。2.仪器设备：实体显微镜和显微操作仪 3.意义：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖。4.操作程序：（1）选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，移入盛有操作液的培养皿 （2）用分割针或分割刀切开胚胎，吸出半个，注入空透明带或直接将裸半胚移植给受体。分割囊胚时要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此时还可用分割针分割滋养层，做胚胎DNA分析性别鉴定。
【详解】A、若a是动物体细胞核移植技术，将体细胞细胞核移入去核卵母细胞，得到重构胚，发育得到的①为克隆动物，该技术可体现动物细胞核全能性，A正确；
B、若b是体外受精技术，体外模拟体内受精，②的产生属于有性生殖，该技术可实现良种家畜大量繁殖，B正确；
C、若c是胚胎分割技术，胚胎中细胞都是有丝分裂行程的，③中来自同一胚胎的子代具有相同的遗传物质，C正确；
D、①②③中的受体（代孕母体）均需激素处理，以达到同期发情的目的，D错误。
故选D。
15．B
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、由题意可知，原代培养细胞是基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理得到的，都含有XF和XS，A正确；
B、单克隆培养的细胞，是通过有丝分裂得到的增殖的细胞，故单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7，所含基因相同，表达的基因不一定相同，B错误；
C、动物细胞之间的蛋白质，被胰蛋白酶或胶原蛋白酶分解，分散成单个细胞，C正确；
D、结合题干，基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体会有一个随机失活，故一个细胞中6-磷酸葡萄糖脱氢酶，电泳后只显示一个条带，原代培养的细胞电泳有2个条带，故同时检测了多个细胞，D正确。
故选B。
16．D
【分析】受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带(透明带反应) →卵细胞膜反应(卵黄膜封闭作用) →卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】A、方法一中，给小鼠注射促性腺激素可促使其超数排卵，可以获得更多的卵母细胞，A正确；
B、用SrCl2溶液处理的作用是激活卵母细胞，使其发育形成孤雌单倍体胚胎干细胞，B正确；
C、方法二雌雄个体杂交获得受精卵M，去除细胞M中的雌原核，可获得孤雄单倍体胚胎干细胞，C正确；
D、若研究Y染色体上相关基因功能，应用方法二得到的孤雄单倍体胚胎干细胞，而方法一得到的是孤雌单倍体胚胎干细胞，D错误。
故选D。
17．D
【分析】DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、DNA在冷酒精中溶解度很低，提取DNA时加入酒精，是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确；
B、将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B正确；
C、DNA带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；
D、因为质粒的本质是环状的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。
故选D。
18．D
【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。嵌合体-遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体。
【详解】A、四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织，所以嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型相同，A错误；
B、嵌合体中的ES具有自我更新能力，很难分化形成胎盘，可分化为处胎盘以外的所有细胞类型，B错误；
C、嵌合体胚胎发育至桑椹（桑葚）胚或囊胚期再移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可以进一步发育，C错误；
D、正常小鼠是二倍体，所以两个2细胞期胚胎用灭活病毒等诱导法使细胞融合，可得到一个含四个染色体组的细胞，再经胚胎的早期培养可得到四倍体胚胎，D正确。
故选D。
17．D
【分析】据图分析，图中的5和6正常，但有患病的子代，根据“无中生有为隐性”判断为隐性遗传病。设相关基因是B/b，据此分析作答。
【详解】A、结合图1可知，图中的5号和6号正常，但子代有患病个体，说明该病是隐性遗传病，再结合图2可知，8号和9号患病，而6号正常，且6号只有一条条带，说明致病基因位于X染色体上，A错误；
B、据图可知，6号正常，其对应的1200bp是正常基因B所在条带，则b基因是700bp和500bp，由于8号患病，其致病基因是Xb来自5号，5号的致病基因来自2号，则2号的 基因型是XBXb，若用限制酶切割，能得到3条带，B错误；
C、5号基因型是XBXb，4号基因型可能是XBXB或XBXb，两者基因型不一定相同，C错误；
D、3号基因型是XBY，4号基因型是1/2XBXB、1/2XBXb，子代只有男性XbY会患病，致病几率=1/4Xb×1/2Y=1/8，D正确。
故选D。
20．B
【分析】PCR技术的原理是细胞内DNA复制，需要模板、原料、能量、酶、引物等条件。PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性、延伸三步。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应。引物是一小段DNA或RNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。
【详解】A、蛋白酶可以分解组织中的蛋白质而不能分解DNA，在提取DNA时加入蛋白酶有助于释放出DNA ，A正确；
B、Taq酶能够耐高温，高温下不会变性，常在PCR中用于DNA子链的延伸 ，B错误；
C、将已知长度的DNA片段装到凝胶上作参照，在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的速度、DNA分子的大小和构象等有关，可用于估测样本DNA片段的大小 ，C正确；
D、阴性对照是未加DNA模板但加入PCR扩增过程所需的混合物，也完成PCR过程，通过凝胶电泳检测是否扩增出DNA，以监测试剂是否污染 ，D正确。
故选B。
21．ABD
【分析】生态系统碳循环是指组成生物体的碳元素在生物群落和无机环境之间循环往复的过程。
【详解】A、碳在乙和丙之间主要以有机物形式传递，A错误；
B、丙中的生物不一定都处于第二营养级，例如青蛙处于第三营养级，有的鱼也是第三营养级，丙中生物种间有捕食和竞争等关系，B错误；
C、水稻生长期，有机物积累量大于0，该生态系统碳元素转移量为a>（b+c+e），C正确；
D、小动物类群丰富度调查常用取样器取样法，D错误。
故选ABD。
22．BC
【分析】微生物的诱变育种常常需要使用理化因子对微生物进行处理，微生物会发生基因突变。
培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。培养基种类 培养基按照物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。微生物的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
【详解】A、紫外线照射菌液，使大肠杆菌产生基因突变，便于筛选赖氨酸营养缺陷突变株，由于基因突变频率较低，且不定向，因此发生突变的菌种不多，因此需要在①中添加赖氨酸来增大该突变株浓度，以便进行稀释涂布操作，②④中添加赖氨酸目的是使赖氨酸营养缺陷突变株能够在该培养基上生长，③不添加赖氨酸，赖氨酸营养缺陷突变株不能在其上繁殖形成菌落，通过③④对比，选择能在④中生长但是不能在③中生长的菌落即为赖氨酸营养缺陷突变株，故①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸，A正确；
B、野生型大肠杆菌不能够合成所需的全部氨基酸，并且还有别的有机物需要氮元素，因此培养基中需要提供氮源，B错误；
C、需将①中的菌液适当稀释后，用微量移液器吸取少量菌液，用涂布器在②上进行涂布接种，C错误；
D、③中未添加赖氨酸，④中添加赖氨酸，经③④对比，④上的甲菌落为赖氨酸营养缺陷突变株形成的菌落，因此从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养即可获得所需突变株，D正确。
故选BC。
23．AC
【分析】据图分析：a表示内细胞团细胞，b表示滋养层细胞。
【详解】A、获得更多的囊胚，可采用激素注射以促进雌鼠产生更多的生殖细胞，A错误；
B、用胰蛋白酶将细胞间的蛋白纤维消化，使细胞分散开，可获得分散的胚胎干细胞，B正确；
C、a表示内细胞团细胞，b表示滋养层细胞，是由同一个受精卵分裂分化形成的，所含核基因相同，C错误；
D、胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养，以维持培养液的pH，D正确。
故选AC。
24．BCD
【分析】分析图解：图中①过程是用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁，②过程是原生质体的融合过程，③过程是融合细胞再生出细胞壁，④过程是植物组织培养的脱分化形成愈伤组织。
【详解】A、由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性可知，应用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁以利于②过程进行，A错误；
B、灭活病毒可用于诱导动物细胞融合，但不能诱导②原生质体融合，B正确；
C、过程②处理后得到的两两融合原生质体类型可能有3种，分别是黄芪-黄芪、木本霸王-木本霸王、木本霸王-黄芪类型，C正确；
D、该题中的两个植物细胞，各有两个染色体组，并且两个植物细胞体内的染色体组不相同，故两细胞融合形成的细胞内含四个染色体组，D正确。
故选BCD。
25．BCD
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。其中去细胞壁的方法：酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。
【详解】A、若图表示植物体细胞杂交部分流程，1和2表示不同的植物细胞，通常要用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体，A正确；
B、若图中1表示目的基因，2表示质粒，构建2中需要用到2种工具酶（限制性内切酶和DNA连接酶），B错误；
C、在哺乳动物体外受精过程，1或2中的卵子未完成减数分裂，C错误；
D、若图表示动物细胞核移植部分流程，生物性状由供体核和受体质共同决定，D错误。
故选BCD。
24．(1) 玉米田 荒地
(2)
(3)
(4) 呼吸作用 没有被下一营养级捕食 分解者
【分析】生态系统中能量的输入、传递、转化和散失的过程，称为生态系统的能量流动。每一营养级能量的去向有：被下一级同化（最高营养级没有）、呼吸作用热能散失、流向分解者。输入生态系统的总能量：生产者固定的太阳能的能量。流入某一营养级的能量（同化量）＝呼吸作用散失的能量＋用于生长发育、繁殖的能量（以有机物形式储存起来）＝呼吸作用散失的能量＋（被同化）流向下一营养级的能量＋流向分解者的能量＋（未利用的能量）。生态系统中生产者和消费者之间由于食物关系会形成一定的营养结构。食物链和（食物链交织而成的）食物网是由生产者和消费者之间存在食物关系形成的。相邻养级之间的能量传递效率=下一级同化的能量/上一级同化的能量×100%。
【详解】（1）据图可知，玉米田的总初级生产量/总入射日光量比例最大，说明玉米田对光能的利用率高；净初级生产量等于总初级生产量﹣生产者呼吸作用的量，因此总初级生产量转化为净初级生产量比例等于1﹣生产者呼吸消耗/总初级生产量，根据表格数据可知，荒地的生产者呼吸消耗/总初级生产量比值最小，说明荒地的总初级生产量转化为净初级生产量比例最高；玉米田的生物种类多，形成的营养结构复杂，抵抗力稳定性高。
（2）根据图1中的能量值可知，甲的能量最高，处于第一营养级，乙和丁的能量基本相同，要远高于丙，说明乙和丁处于同一营养级，因此丙是第三营养级，所以由甲、乙、丙、丁形成的食物网如下图：
（3）摄入量等于同化量+未同化量（粪便），其中同化量有两部分作用：一是自身呼吸消耗，二是积累在体内用于生长发育繁殖，后者中的能量一部分传递给下一营养级，一部分被分解者分解．补充能量流经丙种群的情况如下图：
（4）由图2可知，能量传递效率只有10%﹣20%的原因有：①一部分的能量被各营养级的生物通过呼吸消耗消耗；②上一营养级的部分个体没有被下一营养级捕食；③还有部分能量能量被分解者利用。
27．(1) 巴氏消毒 1 9
(2) ② A
(3)稀释次数减少
(4) 固体 ①③ 培养基为大肠杆菌生长提供了碳源、氮源和无机盐等
(5) 伊红美蓝 深紫色带有金属光泽
【分析】微生物的营养物质及其作用：①碳源：构成生物体细胞的物质和一些代谢废物；既是碳源又是能源（有机碳源）。②氮源：合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。③水：不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定。④无机盐：细胞内的组成成分，生理调节物质，酶的激活剂等。
【详解】（1）牛奶消毒灭菌的方法是巴氏消毒法。稀释涂布平板法的具体操作如图为：用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中，以此依次稀释。
（2）稀释涂布平板法所用的接种工具是涂布器，即图2中的②。为防止杂菌污染，该工具应浸泡于酒精中，涂布前应将涂布器引燃（灼烧）后待冷却，故选A。
（3）由于消毒后牛奶中绝大部分的细菌已经被杀死，所以用稀释培养法时，可以将稀释的次数减少。
（4）②培养基含有琼脂，属于固体培养基。培养基中的主要营养物质有水、碳源、氮源、无机盐，分析表格可知，①③培养基为大肠杆菌生长提供了碳源、氮源（和无机盐），大肠杆菌能够生长。
（5）在鉴别培养基中含有伊红美蓝，则可以鉴别大肠杆菌，菌落呈黑色，故检测大肠杆菌的方法是在培养基中加入伊红美蓝，菌落具有金属光泽的黑色特征，可以认定为大肠杆菌。
28．(1) 脱分化 存在
(2) 梯度离心 桑葚胚或囊胚
(3) XX XX，XY或YY
(4) 内细胞团均等分割 可以基本排除由基因不同造成的个体差异，同时可利用这些遗传背景相同的动物通过它们之间的对比来分析致病基因。
【分析】题图分析，卵细胞被激活转化成phFSC，通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC，获得甲，从而得到孤雌小鼠；精子激活转化成ahFSC，通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC，获得乙，从而得到孤雄小鼠。
【详解】（1）卵细胞是高度分化的细胞，转化为孤雌胚胎干细胞phFSC相当于植物组织培养中的脱分化阶段，这个过程也存在某些基因的表达和某些基因的关闭，所以存在基因的选择性表达。
（2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，在对卵母细胞进行去核时，除了显微操作外，还可以采用梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理等方法处理，得到的重构胚通常需要发育到桑葚胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植，因为此时的胚胎易操作，且处于游离状态。
（3）不考虑致死，孤雌小鼠具有双母亲来源，因此其染色体组成为XX，而孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以其性染色体可能是XX、XY或YY。
（4）在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的进一步恢复和发育。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，这些小鼠遗传物质相同，所以作为实验材料可以排除由基因的差异造成的个体差异，进而可以通过这些遗传背景相同的个体来对比来分析致病基因。
29．(1) 动物细胞培养 动物细胞融合技术 抗原
(2) 克隆化培养 抗体检测 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
(3) 能 增殖 DNA合成途径被阻断不能增殖 辅助途径合成DNA
(4) 灵敏度高 特异性强
【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞，最后获取单克隆抗体。
【详解】（1）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。制备单克隆抗体时，需先将抗原物质注入小鼠体内，引发免疫反应，使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。所以给小鼠注射的HCG相当于抗原。
（2）由图可知，步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞在多孔细胞培养板上进行克隆化培养及抗体检测，经过多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。为了使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的，需先稀释细胞悬液，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液。
（3）氨基蝶呤可以阻断细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA的途径，又因为骨髓瘤细胞的DNA合成没有辅助途径。若向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基蝶呤能筛选杂交瘤细胞，因为浆细胞不能增殖，骨髓瘤细胞中的DNA合成途径被阻断不能增殖，杂交瘤细胞可通过辅助途径合成DNA，能够增殖。
（4）单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。
30．(1) 等量的变质老陈醋 对比乙和丙培养基上的菌落形态，从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落
(2) 稀释涂布平板法 培养基中长出的菌落是均匀分布的 遗漏菌落的种类和数目 菌落粘连影响计数（或培养基表面干燥脱水） 将A1、A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上，若产生气泡则为产气细菌
(3) 探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用 在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好 在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大
【分析】题中用瓶装变质老陈醋（胀瓶）、未变质老陈醋为实验材料，经过分离、纯化、并初步筛选出A1、A2和A3三株疑似的产气细菌，进一步探究了不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用，表中数据所示的清晰区直径（抑菌圈）越大，代表该菌种生长受到的抑制作用越强。
【详解】（1）为了筛选产气细菌，实验人员设置了甲、乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种等量的变质老陈醋，对比乙和丙培养基上的菌落形态，从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落，可以从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株。
（2）①过程a所得待测培养基中菌落的分布较为均匀，据此判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法。
②区分菌落种类的依据是菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征，统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，能有效防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目；或培养时间太长导致菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水影响菌落数目的统计。
③因为老陈醋中的产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌，若有5%的过氧化氢溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材，可以将A1、A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上，观察是否产生气泡，若产生气泡则为产气细菌。
（3）根据题意和表格信息分析可知，该实验的目的是探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用。在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好；在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大。
生物试卷
一、单选题（每小题只有一个正确选项，每小题1.5分，共30分）
1．（错题重现）图1是制作果酒和果醋的简易装置，图2是制作果酒或果醋过程中可能发生的物质变化。下列相关叙述正确的是（ ）
A．果酒发酵阶段，若开错气阀，则会导致发酵液溢出
B．果醋发酵阶段，醋酸菌进行④过程时发酵液中糖类充足
C．制作果酒的主要发酵菌进行①和②过程的场所是线粒体
D．制作果醋的主要发酵菌进行④过程时不需要O2的参与
2．（错题重现）甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图。相关叙述正确的是（ ）
A．细胞甲是能够产生抗甘草酸抗体的B淋巴细胞
B．若小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的染色体数均为40，则杂交瘤细胞的DNA分子数为80
C．过程④利用选择培养基筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞
D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖
3．稻田养蟹模式因操作简单、经济效益显著，在农村大面积推广。稻田为河蟹提供遮蔽活动空间和丰富的天然饵料，河蟹为稻田中耕松土、除虫、除草，且它们在田间的活动能促进水稻充分吸收养料。下列叙述错误的是（ ）
A．该稻田中的河蟹和水稻是一种原始合作关系 B．稻田养蟹模式促进了生态系统能量的循环利用
C．与普通稻田相比，该稻田调整了能量流动关系 D．养蟹的数量不能超过稻田承载力的限度
4．图为某生态系统的能量流动图解（W1为生产者固定的太阳能），下列叙述错误的是（ ）
A．生产者固定的总能量可表示为（A1+B1+C1+A2+B2+C2）
B．现存生产者个体数可小于初级消费者个体数
C．若A1表示生产者呼吸作用散失的能量，则C1可表示生产者流向分解者的能量
D．图解不仅能体现能量单向流动的特点，还能体现逐级递减的特点
5．家庭制作百香果果酒的过程如下：将准备好的新鲜百香果从中间切开，用干净的小勺取出果肉，放入已消毒的玻璃容器中，加入适量冰糖，拌匀，倒入米酒后密封容器口，放在适宜温度下让其自然发酵。下列说法错误的是（ ）
A．家庭制作百香果果酒的菌种主要来源于米酒中的酵母菌
B．将醋酸菌菌种放入果酒瓶中并密封容器口可制作成百香果果醋
C．玻璃容器中发酵液呈酸性，且酒精浓度较高，杂菌难以生存
D．家庭制作果酒果醋前，需要对器具和原料进行消毒
6．A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌(Sau) 引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48 h，结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A．实验中一般采用干热灭菌的方法对培养皿进行灭菌处理
B．四种抗生素中，抗生素A治疗Sau感染引起的肺炎效果最好
C．滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远抗药性越强
D．接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养
7．细菌内某种物质在酶的作用下转变为另一种物质的过程如图所示，其中V、W、X、Y、Z代表生长必需的不同物质，在A酶、C酶失效的情况下，要使细菌正常生长，必需向培养基中添加的物质是（ ）
A．V、W B．W、Z C．V、Y D．W、Y
8．根据食品安全国家标准（GB19645-2010）规定，每毫升合格的牛奶中细菌总数不超过50000个。某兴趣小组利用恒温水浴锅对新鲜牛奶进行消毒后，进行细菌总数测定，主要步骤如下图所示。相关叙述不正确的是 （ ）
A．步骤①中用巴氏消毒法对新鲜牛奶进行消毒，可以减少营养物质的损失
B．步骤②对牛奶进行梯度稀释可以使聚集的微生物分散，便于在培养基表面形成单菌落
C．步骤③中牛肉膏蛋白胨培养基要先高压蒸汽灭菌再调pH，以防止高温影响pH的稳定
D．实验结束时培养基上的菌落可能不止一种，若平均菌落总数少于50个则表明消毒合格
9．下列关于无菌技术的说法，正确的是（ ）
①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对无菌操作的要求非常严格
②对培养基进行湿热灭菌
③对植物材料进行表面消毒时，一方面要考虑药剂的消毒效果，另一方面要考虑植物材料的耐受能力
④所有的接种操作都必须在酒精灯火焰旁进行
⑤对培养的植物材料可进行湿热灭菌 ⑥如果不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃
A．①②③④⑤ B．①②③④ C．①②③④⑥ D．①②③④⑤⑥
10．模型构建是生命科学教学、科研的一种重要方法。下图是生物概念模型，相关分析错误的是（ ）
A．若图示为基因工程程，则C为重组质粒，D为受体细胞
B．若图示为食物网，则D可能是次级消费者、第二营养级
C．若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞
D．若图示为试管婴儿技术，C～D中需要用到胚胎移植技术
11．如图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列有关叙述错误的是（ ）
A．每个脾B淋巴细胞只能产生一种抗体
B．灭活的病毒促融合的效率一般不能达到100%
C．细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上有差异
D．克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象
12．科研人员研究发现，微藻能合成很多独特的对人体非常有益的生物活性物质，如EPA和DHA等不饱和脂肪酸。科研人员将自养的绿色巴夫藻和既可自养又能异养的四鞭藻进行融合，经筛选获得融合藻株。在自养培养条件下，测定它们的生长速率和EPA、DHA产率，如表。下列有关说法不合理的是（ ）
藻体 生长速率（g/L d） EPA（%） DHA（%）
绿色巴夫藻 0.058 0.212 0.073
四鞭藻 0.140 0.058 无
融合藻 0.141 0.067 0.054
A．融合藻具有生长迅速又能合成EPA和DHA的优点
B．诱导融合前用纤维素酶等处理两种藻以获得原生质体
C．细胞诱导融合完成后培养体系中应有3种类型的细胞
D．获得的融合藻还需进行克隆化培养和EPA、DHA检测
13．下列有关哺乳动物的受精卵形成过程的叙述正确的是（ ）
①获能精子与卵子相遇时释放多种酶
②获能精子与卵子相遇时释放的酶可溶解透明带、卵细胞膜
③卵子与精子结合前已完成减数分裂Ⅱ
④精子和卵子的细胞核经过相关生理过程，分别形成雄原核和雌原核
⑤精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带
A．①②⑤ B．②③④ C．①④⑤ D．②④⑤
14．（错题重现）动物细胞培养是动物克隆的基础，如图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③分别表示其结果，请据图回答，下列说法错误的是（ ）
A．若a是动物体细胞核移植技术，①为克隆动物，该技术可体现动物细胞核全能性
B．若b是体外受精技术，②的产生属于有性生殖，该技术可实现良种家畜大量繁殖
C．若c是胚胎分割技术，③中来自同一胚胎的子代具有相同的遗传物质
D．①②③中的受体（代孕母体）均需激素处理，以达到超数排卵和同期发情的目的
15．6–磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如下图所示。有关叙述错误的是（ ）
A．原代培养的细胞中都含XF基因和XS基因
B．单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
C．用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
D．原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞
16．哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段，可以获得孤雌或孤雄单倍体胚胎干细胞，为研究基因功能提供了理想的细胞模型。下图表示研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法，下列说法错误的是（ ）
A．方法一中，研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素，从而获得更多的卵母细胞
B．用SrCl2溶液处理的作用是激活卵母细胞，得到孤雌单倍体胚胎干细胞
C．获得的孤雄单倍体胚胎干细胞需要去除细胞M中的雌原核
D．若研究Y染色体上的相关基因功能，则应用方法一得到胚胎干细胞
17．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（ ）
A．提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解
B．将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定
C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
D．根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶I和II的切割位点，而有限制酶III的切割位点
18．正常小鼠是二倍体。研究发现，小鼠四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育成胎盘等胚胎以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织。下列叙述正确的是（ ）
A．嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型不同
B．嵌合体中的ES具有自我更新能力并只能分化为胎盘等胚外组织
C．嵌合体胚胎发育至原肠胚时需移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可发育
D．将正常小鼠2细胞期胚胎用灭活病毒诱导法使2细胞融合，可得到四倍体胚胎
19．克里斯蒂安森综合征（CS）是一种单基因控制的遗传病，患者发育迟缓、智力障碍。正常基因突变成CS基因后会产生一个限制酶切位点，科研工作者在调查中获得一个如图1所示的家系，并提取家系成员6、8、9控制CS的相关基因，用限制酶处理后进行电泳，结果如图2，以下叙述正确的是（ ）
A．该病可能为常染色体隐性遗传
B．若用限制酶处理2号的相关基因，经电泳可得到4条带
C．成员4号与5号基因型相同
D．成员7患病概率为1/8，且患者一定为男性
20．PCR技术可用于遗传多样性的研究。下图是对两个跳虫（A和B）DNA分析的实验过程，有关叙述错误的是（ ）
A．蛋白酶可以分解组织中的蛋白质，在提取DNA时加入蛋白酶有助于释放出DNA
B．Taq酶能够耐高温，高温下不会变性，常在PCR中用于DNA链的解旋
C．将已知长度的DNA片段装到凝胶上作参照，可用于估测样本DNA片段的大小
D．阴性对照是未加DNA模板但加入PCR扩增过程所需的混合物，以监测试剂是否污染
二、多选题（每小题可能有多个正确选项，每小题4分，错选不给分，少选给1分，共20分）
21．如图是某稻田生态系统碳循环示意图，图中字母表示碳元素转移量。下列相关分析错误的是（ ）
A．碳在乙和丙之间主要以二氧化碳的形式循环
B．丙中的生物都处于第二营养级，其种间关系有捕食和竞争两种
C．水稻生长期，该生态系统碳元素转移量为a>（b＋c＋e）
D．丁中的小动物类群丰富度调查常用样方法
22．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法错误是（ ）
A．①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸
B．野生型大肠杆菌能够合成所需的全部氨基酸，因此培养基中无需提供氮源
C．需将①中的菌液适当稀释后，用接种环蘸取菌液在②上进行涂布接种
D．从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养即可获得所需突变株
23．小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．为获得更多的囊胚，可采用激素注射以促进雄鼠产生更多的精子
B．用胰蛋白酶将细胞间的蛋白纤维消化后可获得分散的胚胎干细胞
C．细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同
D．胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养
24．下图表示用草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗盐新品种的过程。下列叙述正确的是（ ）
A．过程①需要使用相应酶破坏细胞膜以利于②过程进行
B．灭活病毒不能诱导过程②中A和B的融合
C．过程②处理后得到的两两融合原生质体类型可能有3种
D．经过过程④所得到的愈伤组织细胞中一般含有四个染色体组
25．如图表示生物工程中常用的部分技术流程图，据图分析错误的是（ ）
A．若图表示植物体细胞杂交部分流程，1和2通常要用相同方法处理
B．若图中1表示目的基因，2表示质粒，构建3中需要用到3种工具酶
C．若图表示哺乳动物体外受精过程，1、2中的细胞均已完成减数分裂
D．若图表示动物细胞核移植部分流程，3的各种性状由供体核来决定
三、综合题（共50分）
26．在生态系统中，生产者通过光合作用固定的能量称为总初级生产量。生产者固定的能量一部分被自己呼吸作用消耗掉，剩下的可用于生长、发育和繁殖，这部分能量称为净初级生产量。表格列出四个生态系统中总初级生产量与总入射日光量、生产者呼吸消耗量与总初级生产量的比值。(除说明外，每空1分，共9分)
生态系统的类型 玉米田 荒地 A湖 B湖
总初级生产量/总入射日光量 1.6% 1.2% 0.4% 0.1%
生产者呼吸消耗/总初级生产量 23.4% 15.1% 22.3% 21.0%
(1)四个生态系统中，光能利用效率最高的是 ______，总初级生产量转化为净初级生产量比例最高的生态系统是 _____。
(2)如图1表示一个相对稳定的生态系统中四个种群和分解者的能量相对值。请绘制由甲、乙、丙、丁四个种群形成的食物网简图。（2分）
(3)根据第（2）小题的信息，在图2中用箭头和文字补充完成能量流经丙种群的情况。（2分）
(4)由图可知，能量传递效率只有10%﹣20%的原因有：①一部分的能量被各营养级的生物通过 ________消耗；②上一营养级的部分个体 _______；③还有部分能量能量被 _____利用。
27．牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏。（每空1分，共11分）
(1)牛奶在饮用前都要经过__________，以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图操作。用无菌吸管从三角烧瓶中吸取______ mL生牛奶稀释液至盛有________mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10mL生牛奶稀释到10-4浓度后，取0.1mL滴在培养基上。
(2)将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是_______。（填数字）该涂布工具最合适的灭菌方法是_________。（填字母）
(3)消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释培养法检测消毒后牛奶是否含有细菌，则在操作步骤上应作什么改动？_____________。
(4)检测食品中大肠杆菌数量，可评价食品是否受到污染。下表培养基配方中，按照其物理性质②培养基属于___________培养基。下表中大肠杆菌能够生长的培养基有___________（填数字），理由是_______________。
成分及含量（g/L） 蛋白胨 酵母膏 葡萄糖 蔗糖 K2HPO4 NaNO3 MgSO4 NaCl FeSO4 琼脂
① 10 2 2 2 5 10
② 1 3 1 3 0.01 10
③ 10 5 3 5 10
(5)从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入____________，具有_____________________特征可以鉴别大肠杆菌。
28．我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示，请回答下列问题：(除说明外，每空1分，共9分)
(1)卵细胞转化成phFSC相当于植物组织培养中的____________过程，该过程___________（填“存在”或“不存在”）基因的选择性表达。
(2)要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，在对卵母细胞进行去核时，除了显微操作外还可以采用____________、紫外线短时间照射、化学物质处理等方法处理，得到的重构胚通常需要发育到__________阶段才能进行胚胎移植。
孤雄小鼠性染
(3)不考虑致死情况，得到的孤雌小鼠性染色体组成为______________，孤雄小鼠性染色体组成为__________。
(4)在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将_____________，否则会影响胚胎的进一步恢复和发育。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行用于医学研究的优点是______________________________________________。
29．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图，回答下列问题：(除说明外，每空1分，共10分)
(1)制备单克隆抗体过程中要用到______________和____________技术。制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_________，使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。
(2)步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行_____________和____________，该过程一般在多孔细胞培养板上进行。先将细胞悬浮液稀释到7∽10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到____________的目的。
(3)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据此原理，向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤，___________（填“能”或“不能”）筛选出杂交瘤细胞。原因是浆细胞不能__________、骨髓瘤细胞因__________________________而不能增殖、杂交瘤细胞可通过___________________能够增殖。
30．某些老陈醋会出现产气现象，原因是老陈醋中含有产气细菌。产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌，产气菌产生的气体积累会引起胀瓶，影响产品安全。实验小组以瓶装变质老陈醋（胀瓶）、未变质老陈醋为实验材料，筛选出导致老陈醋产气的细菌。回答下列问题：(除说明外，每空1分，共11分)
(1)为了筛选产气细菌，实验人员设置了甲、乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种__________。阐述如何从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株：__________。
(2)实验小组初步筛选出了A1、A2和A3三株疑似的产气细菌，筛选过程如右图所示。
①过程a的接种方法是__________，判断依据是 。
②统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致__________，或培养时间太长导致__________。
③现有5%的过氧化氢溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材。写出判断A1、A2和A3三种菌株是否为产气细菌的实验思路： 。（2分）
(3)分别用三组平板培养A1、A2、A3三种菌株，然后在培养基上分别加入等量一定浓度的青霉素溶液，培养一段时间后可以观察到一圈清晰区（抑菌圈），这是细菌生长被抑制所致。测量清晰区的直径，数据如下表所示：
细菌 不同浓度青霉素条件下清晰区直径/mm
5/（μg·mL-1） 7.5/（μg·mL-1） 10/（μg·mL-1） 15/（μg·mL-1） 20/（μg·mL-1）
A1 0.2 2 8 13 17
A2 7 10 12 15 16
A3 5 6 5 6 6
该实验的目的是__________。从表中数据可以看出，5μg·mL-1青霉素和20μg·mL-1青霉素在抑制A1和A3菌株上的区别是 、 。
宜丰县中2022-2023学年高二下学期4月期中考试
生物参考答案：
一、单选题（每小题只有一个正确选项，每小题1.5分，共30分）
1-5 ADBAB 6-10 CACCB 11-15 DCCDB 16-20 DDDDB
二、多选题（每小题可能有多个正确选项，每小题4分，错选不给分，少选给1分，共20分）
21 ABD 22 BC 23 AC 24 BCD 25 BCD
26．(除说明外，每空1分，共9分)
(1) 玉米田 荒地
(2)（2分）
(3)
（2分）
(4) 呼吸作用 没有被下一营养级捕食 分解者
27．（每空1分，共11分）
(1) 巴氏消毒 1 9
(2) ② A
(3)稀释次数减少
(4) 固体 ①③ 培养基为大肠杆菌生长提供了碳源、氮源和无机盐等
(5) 伊红美蓝 深紫色带有金属光泽
28．(除说明外，每空1分，共9分)
(1) 脱分化 存在
(2) 梯度离心 桑葚胚或囊胚
(3) XX XX，XY或YY
(4) 内细胞团均等分割
可以基本排除由基因不同造成的个体差异，同时可利用这些遗传背景相同的动物通过它们之间的对比来分析致病基因。(2分)
29．(除说明外，每空1分，共10分)
(1) 动物细胞培养 动物细胞融合技术 抗原
(2) 克隆化培养 抗体检测 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
(3) 能 增殖 DNA合成途径被阻断不能增殖 辅助途径合成DNA
30．(除说明外，每空1分，共11分)
(1) 等量的变质老陈醋 对比乙和丙培养基上的菌落形态，从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落
(2) 稀释涂布平板法 培养基中长出的菌落是均匀分布的
遗漏菌落的种类和数目 菌落粘连影响计数（或培养基表面干燥脱水）
将A1、A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上，若产生气泡则为产气细菌（2分）
(3) 探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用
在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好
在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大
第2页，共17页
参考答案：
1．A
【详解】A、果酒发酵阶段，开气阀的目的是排气，而排气时应打开气阀b，若错开气阀a，会导致发酵液从进气管溢出，A正确；
B、果醋发酵阶段，醋酸菌在糖类匮乏时能利用酒精经一系列化学反应生成醋酸，B错误；
C、图2中，①过程进行的场所是细胞质基质，C错误；
D、醋酸菌利用酒精生成醋酸时，需要氧气的参与，D错误。
故选A。
2．D
【分析】一、克隆抗体的制备过程：
1、细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。
2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
3、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
4、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。
二、分析图示：①为注射抗原，诱导产生具有免疫能力的B淋巴细胞；②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；③用选择性培养基获得杂交瘤细胞；④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤为提取单克隆抗体。
3．B
【分析】研究能量流动的意义：①研究能量流动可以帮助人们科学规划、设计人工生态系统，使能量得到最有效的利用。②研究能量流用可以帮助人们合理调整生态系统中能量流动的关系，使能量持续高效的流向对人类最有益的部分。
【详解】A、稻田为河蟹提供遮蔽活动空间和丰富的天然饵料，河蟹为稻田中耕松土、除虫、除草，且它们在田间的活动能促进水稻充分吸收养料，稻田中的河蟹和水稻是一种原始合作关系，A正确；
B、稻—蟹农田使能量持续高效地流向了对人类最有益的部分，提高了能量的利用率，能量不能循环利用，B错误；
C、稻—蟹农田中蟹能以稻田中的杂草浮游植物为食，有利于水稻的生长，同时蟹又能够成为人类的食物来源，稻田养蟹调整了能量流动的关系，实现了对生态系统中浮游动物底栖动物等生物的物质和能量的利用，C正确；
D、生物数量超过了环境的承载力后，违背了协调与平衡原理，故养蟹的数量不能超过稻田承载力的限，D正确。
故选B。
4．A
【分析】生态系统中能量流动是单向的。在生态系统中，能量流动只能从第一营养级流向第二营养级，再依次流向后面的各个营养级，不可逆转，也不能循环流动。能量在流动过程中逐级递减。输入到一个营养级的能量不可能百分之百地流入下一个营养级，能量在沿食物链流动的过程中是逐级减少的。
【详解】A、生产者固定的总能量可表示为（A1+B1+C1+D1)，而D1=A2+B2+C2+D2是流入下一营养级的能量，故生产者固定的总能量可表示为（A1+B1+C1+A2+B2+C2+D2)，A错误；
B、现存生产者个体数可小于初级消费者个体数，如一棵树和这棵树上的昆虫，B正确；
C、题图中A1与C1代表呼吸作用散失的能量与流入分解者的能量，若A1表示生产者呼吸作用散失的能量，则C1可表示生产者流向分解者的能量，C正确；
D、能量流动是单向流动的：沿着食物链向高营养级传递，而不能倒过来流动；逐级递减：前一种生物所包含的能只有10%~20％能够传给下一种生物，其他的能量都损耗掉了，图解体现了能量单向流动的特点，还体现了逐级递减的特点，D正确。
故选A。
5．B
【分析】在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～30℃，pH最好是弱酸性。
醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
【详解】A、根据题干信息可知，在制作果酒时倒入了米酒，所以家庭制作百香果果酒的菌种主要来源于米酒中的酵母菌，A正确；
B、醋酸菌为好氧型细菌，将醋酸菌菌种放入果酒瓶中，不需要进行密封，B错误；
C、酒精发酵的产物是酒精和CO2，会导致发酵液呈酸性，且酒精浓度较高，杂菌难以在这种环境中生存，C正确；
D、家庭制作果酒果醋前，需要对器具和原料进行消毒，这样防止杂菌污染，D正确。
故选B。
6．C
【分析】实验室常用的灭菌方法：
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。
③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术，可以对培养皿进行灭菌处理，A正确；
B、据抑菌圈的大小，抗生素D的抑菌圈最小，治疗Sau感染引起的肺炎效果最差；而抗生素A抑菌圈最大，则治疗Sau感染引起的肺炎效果最好，B正确；
C、滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远，药性变弱，说明菌落抗药性越弱，C错误；
D、接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养，防止冷凝水滴落引发杂菌污染，D正确。
故选C。
7．A
【分析】图中物质①A酶作用下转变为物质②，物质②在B酶作用下转变为物质③，在D酶作用下转变为物质⑤，物质③和物质⑤分别在C酶和E酶作用下转变为物质④。
【详解】正常情况下，在细菌培养基中添加物质V就足够其生长，但由于A酶失效不能合成W，因此需要添加物质W，而物质Z的合成途径有两条，虽然C酶失效，但可以通过W→Y→Z的途径合成物质Z，同样满足细菌生长，因此添加物质V、W细菌能够正常生长，A正确，BCD错误。
故选A。
8．C
【分析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）的手段，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法；灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
【详解】A、80℃、15min～30min处理新鲜牛奶属于巴氏消毒法，采用短时高温处理的目的是尽量减少食物中营养物质的损失，A正确；
B、步骤②将牛奶进行梯度稀释的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培养基表面形成单个菌落，B正确；
C、牛肉膏蛋白胨培养基配制时应先调pH再灭菌，C错误；
D、由于生牛奶中的微生物可能不止一种，而牛肉膏蛋白胨培养基属于天然培养基，细菌、真菌等均可生长，因此，在实验中，培养基上可能不止出现一种菌落；依据样品液稀释1000倍，接种液体积为1mL，计算推测若平均菌落总数少于50个，则表明灭菌后牛奶中细菌总数不超过50000个，灭菌合格，D正确。
故选C。
9．C
【分析】无菌操作是植物组织培养技术的关键，如果灭菌不好就会导致整个技术的失败；对于整个操作过程中的凡是和植物组织接触的材料、用具和试剂都要进行灭菌消毒；但不同的用具、材料要用不同的方法进行灭菌，如培养基的灭菌用湿热灭菌，而植物组织用消毒液进行杀菌而不能用湿热灭菌。
【详解】①植物组织培养所利用的植物材料体积小，抗性差，灭菌不彻底就会导致整个实验的失败，①正确；
②在进行植物组织培养时，对培养基及其他器械要用湿热灭菌，②正确；
③对植物材料进行表面消毒时，一方面要考虑药剂的消毒效果，另一方面要考虑植物材料的耐受能力，培养中不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待，③正确；
④所有的接种操作必须在酒精灯火焰旁进行，④正确；
⑤对植物材料不能用湿热灭菌，应该用消毒液对其表面消毒，⑤错误；
⑥如果不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃，导致整个实验的失败，⑥正确。
综上分析①②③④⑥正确，即C正确。
故选C。
10．B
【分析】试管婴儿是体外受精+胚胎移植技术的俗称，是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。
【详解】A、若图示为基因工程，则C为重组质粒，是目的基因和载体相连形成的，D为受体细胞，为重组质粒的表达提供条件，A正确；
B、若图示为食物网，则D可能是次级消费者、第三营养级，B错误；
C、动物核移植，经常移植到去核卵母细胞中，若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞，此时A可能是细胞核供体细胞，C正确；
D、若图示为试管婴儿技术，C为早期胚胎培养，D为胚胎移植，D正确。
故选B。
11．D
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、抗体是由浆细胞产生，浆细胞是由B细胞或者记忆细胞经抗原刺激产生的，只能产生针对该抗原的抗体，因此一般情况下，一种浆细胞只能产生一种抗体，A正确；
B、灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，因此灭活的病毒促融合的效率一般不能达到100%，B正确；
C、细胞筛选时获得杂交瘤细胞需要在选择培养基上筛选，细胞融合时所用的培养液需要在加入诱导剂，两者的成分上有差异，C正确；
D、杂交瘤细胞具有无限增殖的特点，相当于癌细胞，无接触抑制现象，因此该细胞克隆化培养过程中不会出现接触抑制，D错误。
故选D。
12．C
【分析】根据表格信息可知，绿色巴夫藻能合成EPA和DHA，而四鞭藻不能合成DHA，融合藻可合成EPA和DHA。融合藻的生长速率与四鞭藻接近，但大于绿色巴夫藻。
【详解】A、根据表格可知，融合藻生长速率最大，且能合成EPA和DHA，A正确；
B、诱导两种藻细胞融合前需先用纤维素酶等处理以获得原生质体，便于细胞膜融合，B正确；
C、细胞诱导融合完成后培养体系中应有未融合的绿色巴夫藻细胞、四鞭藻细胞以及两个绿色巴夫藻细胞融合体、两个四鞭藻细胞融合体、一个四鞭藻细胞和一个绿色巴夫藻细胞融合体，共5种类型的细胞，C错误；
D、获得的融合藻还需进行克隆化培养和EPA、DHA检测，以便获得符合要求的融合细胞，D正确。
故选C。
13．C
【分析】1、受精作用过程：a、顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠；b、透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应（它是防止多精子入卵受精的第一道屏障）；c、卵细胞膜反应：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程（它是防止多精子入卵受精的第二道屏障）；d、精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核；e、雌、雄原核融合形成合子。2、胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
【详解】①精子与卵子接触，释放多种酶，以溶解卵细胞膜外的结构（如透明带等），①正确；
②获能精子与卵子相遇时释放的酶可溶解放射冠、透明带，②错误；
③卵子与精子结合前已完成减数分裂Ⅰ，③错误；
④受精过程中，精子的核变成雄原核、卵子的核成为雌原核，④正确；
⑤透明带反应是指当精子越过放射冠，进入透明带并接触卵细胞膜的瞬间，卵子发出指令，产生阻止后续的精子进入透明带的生理反应，⑤正确。
故选C。
14．D
【分析】1.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多，营养丰富。卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达。（3）体细胞核移植的大致过程是：将供体体细胞核导入受体去核卵母细胞，形成重组细胞，用电脉冲刺激形成早期胚胎，导入代孕母羊的子宫，妊娠、出生后即克隆动物。
2.胚胎分割1.概念：采用机械方法将早期胚胎切割成2、4或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。2.仪器设备：实体显微镜和显微操作仪 3.意义：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖。4.操作程序：（1）选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，移入盛有操作液的培养皿 （2）用分割针或分割刀切开胚胎，吸出半个，注入空透明带或直接将裸半胚移植给受体。分割囊胚时要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此时还可用分割针分割滋养层，做胚胎DNA分析性别鉴定。
【详解】A、若a是动物体细胞核移植技术，将体细胞细胞核移入去核卵母细胞，得到重构胚，发育得到的①为克隆动物，该技术可体现动物细胞核全能性，A正确；
B、若b是体外受精技术，体外模拟体内受精，②的产生属于有性生殖，该技术可实现良种家畜大量繁殖，B正确；
C、若c是胚胎分割技术，胚胎中细胞都是有丝分裂行程的，③中来自同一胚胎的子代具有相同的遗传物质，C正确；
D、①②③中的受体（代孕母体）均需激素处理，以达到同期发情的目的，D错误。
故选D。
15．B
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、由题意可知，原代培养细胞是基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理得到的，都含有XF和XS，A正确；
B、单克隆培养的细胞，是通过有丝分裂得到的增殖的细胞，故单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7，所含基因相同，表达的基因不一定相同，B错误；
C、动物细胞之间的蛋白质，被胰蛋白酶或胶原蛋白酶分解，分散成单个细胞，C正确；
D、结合题干，基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体会有一个随机失活，故一个细胞中6-磷酸葡萄糖脱氢酶，电泳后只显示一个条带，原代培养的细胞电泳有2个条带，故同时检测了多个细胞，D正确。
故选B。
16．D
【分析】受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带(透明带反应) →卵细胞膜反应(卵黄膜封闭作用) →卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】A、方法一中，给小鼠注射促性腺激素可促使其超数排卵，可以获得更多的卵母细胞，A正确；
B、用SrCl2溶液处理的作用是激活卵母细胞，使其发育形成孤雌单倍体胚胎干细胞，B正确；
C、方法二雌雄个体杂交获得受精卵M，去除细胞M中的雌原核，可获得孤雄单倍体胚胎干细胞，C正确；
D、若研究Y染色体上相关基因功能，应用方法二得到的孤雄单倍体胚胎干细胞，而方法一得到的是孤雌单倍体胚胎干细胞，D错误。
故选D。
17．D
【分析】DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、DNA在冷酒精中溶解度很低，提取DNA时加入酒精，是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确；
B、将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B正确；
C、DNA带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；
D、因为质粒的本质是环状的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。
故选D。
18．D
【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。嵌合体-遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体。
【详解】A、四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织，所以嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型相同，A错误；
B、嵌合体中的ES具有自我更新能力，很难分化形成胎盘，可分化为处胎盘以外的所有细胞类型，B错误；
C、嵌合体胚胎发育至桑椹（桑葚）胚或囊胚期再移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可以进一步发育，C错误；
D、正常小鼠是二倍体，所以两个2细胞期胚胎用灭活病毒等诱导法使细胞融合，可得到一个含四个染色体组的细胞，再经胚胎的早期培养可得到四倍体胚胎，D正确。
故选D。
17．D
【分析】据图分析，图中的5和6正常，但有患病的子代，根据“无中生有为隐性”判断为隐性遗传病。设相关基因是B/b，据此分析作答。
【详解】A、结合图1可知，图中的5号和6号正常，但子代有患病个体，说明该病是隐性遗传病，再结合图2可知，8号和9号患病，而6号正常，且6号只有一条条带，说明致病基因位于X染色体上，A错误；
B、据图可知，6号正常，其对应的1200bp是正常基因B所在条带，则b基因是700bp和500bp，由于8号患病，其致病基因是Xb来自5号，5号的致病基因来自2号，则2号的 基因型是XBXb，若用限制酶切割，能得到3条带，B错误；
C、5号基因型是XBXb，4号基因型可能是XBXB或XBXb，两者基因型不一定相同，C错误；
D、3号基因型是XBY，4号基因型是1/2XBXB、1/2XBXb，子代只有男性XbY会患病，致病几率=1/4Xb×1/2Y=1/8，D正确。
故选D。
20．B
【分析】PCR技术的原理是细胞内DNA复制，需要模板、原料、能量、酶、引物等条件。PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性、延伸三步。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应。引物是一小段DNA或RNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。
【详解】A、蛋白酶可以分解组织中的蛋白质而不能分解DNA，在提取DNA时加入蛋白酶有助于释放出DNA ，A正确；
B、Taq酶能够耐高温，高温下不会变性，常在PCR中用于DNA子链的延伸 ，B错误；
C、将已知长度的DNA片段装到凝胶上作参照，在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的速度、DNA分子的大小和构象等有关，可用于估测样本DNA片段的大小 ，C正确；
D、阴性对照是未加DNA模板但加入PCR扩增过程所需的混合物，也完成PCR过程，通过凝胶电泳检测是否扩增出DNA，以监测试剂是否污染 ，D正确。
故选B。
21．ABD
【分析】生态系统碳循环是指组成生物体的碳元素在生物群落和无机环境之间循环往复的过程。
【详解】A、碳在乙和丙之间主要以有机物形式传递，A错误；
B、丙中的生物不一定都处于第二营养级，例如青蛙处于第三营养级，有的鱼也是第三营养级，丙中生物种间有捕食和竞争等关系，B错误；
C、水稻生长期，有机物积累量大于0，该生态系统碳元素转移量为a>（b+c+e），C正确；
D、小动物类群丰富度调查常用取样器取样法，D错误。
故选ABD。
22．BC
【分析】微生物的诱变育种常常需要使用理化因子对微生物进行处理，微生物会发生基因突变。
培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。培养基种类 培养基按照物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。微生物的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
【详解】A、紫外线照射菌液，使大肠杆菌产生基因突变，便于筛选赖氨酸营养缺陷突变株，由于基因突变频率较低，且不定向，因此发生突变的菌种不多，因此需要在①中添加赖氨酸来增大该突变株浓度，以便进行稀释涂布操作，②④中添加赖氨酸目的是使赖氨酸营养缺陷突变株能够在该培养基上生长，③不添加赖氨酸，赖氨酸营养缺陷突变株不能在其上繁殖形成菌落，通过③④对比，选择能在④中生长但是不能在③中生长的菌落即为赖氨酸营养缺陷突变株，故①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸，A正确；
B、野生型大肠杆菌不能够合成所需的全部氨基酸，并且还有别的有机物需要氮元素，因此培养基中需要提供氮源，B错误；
C、需将①中的菌液适当稀释后，用微量移液器吸取少量菌液，用涂布器在②上进行涂布接种，C错误；
D、③中未添加赖氨酸，④中添加赖氨酸，经③④对比，④上的甲菌落为赖氨酸营养缺陷突变株形成的菌落，因此从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养即可获得所需突变株，D正确。
故选BC。
23．AC
【分析】据图分析：a表示内细胞团细胞，b表示滋养层细胞。
【详解】A、获得更多的囊胚，可采用激素注射以促进雌鼠产生更多的生殖细胞，A错误；
B、用胰蛋白酶将细胞间的蛋白纤维消化，使细胞分散开，可获得分散的胚胎干细胞，B正确；
C、a表示内细胞团细胞，b表示滋养层细胞，是由同一个受精卵分裂分化形成的，所含核基因相同，C错误；
D、胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养，以维持培养液的pH，D正确。
故选AC。
24．BCD
【分析】分析图解：图中①过程是用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁，②过程是原生质体的融合过程，③过程是融合细胞再生出细胞壁，④过程是植物组织培养的脱分化形成愈伤组织。
【详解】A、由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性可知，应用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁以利于②过程进行，A错误；
B、灭活病毒可用于诱导动物细胞融合，但不能诱导②原生质体融合，B正确；
C、过程②处理后得到的两两融合原生质体类型可能有3种，分别是黄芪-黄芪、木本霸王-木本霸王、木本霸王-黄芪类型，C正确；
D、该题中的两个植物细胞，各有两个染色体组，并且两个植物细胞体内的染色体组不相同，故两细胞融合形成的细胞内含四个染色体组，D正确。
故选BCD。
25．BCD
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。其中去细胞壁的方法：酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。
【详解】A、若图表示植物体细胞杂交部分流程，1和2表示不同的植物细胞，通常要用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体，A正确；
B、若图中1表示目的基因，2表示质粒，构建2中需要用到2种工具酶（限制性内切酶和DNA连接酶），B错误；
C、在哺乳动物体外受精过程，1或2中的卵子未完成减数分裂，C错误；
D、若图表示动物细胞核移植部分流程，生物性状由供体核和受体质共同决定，D错误。
故选BCD。
24．(1) 玉米田 荒地
(2)
(3)
(4) 呼吸作用 没有被下一营养级捕食 分解者
【分析】生态系统中能量的输入、传递、转化和散失的过程，称为生态系统的能量流动。每一营养级能量的去向有：被下一级同化（最高营养级没有）、呼吸作用热能散失、流向分解者。输入生态系统的总能量：生产者固定的太阳能的能量。流入某一营养级的能量（同化量）＝呼吸作用散失的能量＋用于生长发育、繁殖的能量（以有机物形式储存起来）＝呼吸作用散失的能量＋（被同化）流向下一营养级的能量＋流向分解者的能量＋（未利用的能量）。生态系统中生产者和消费者之间由于食物关系会形成一定的营养结构。食物链和（食物链交织而成的）食物网是由生产者和消费者之间存在食物关系形成的。相邻养级之间的能量传递效率=下一级同化的能量/上一级同化的能量×100%。
【详解】（1）据图可知，玉米田的总初级生产量/总入射日光量比例最大，说明玉米田对光能的利用率高；净初级生产量等于总初级生产量﹣生产者呼吸作用的量，因此总初级生产量转化为净初级生产量比例等于1﹣生产者呼吸消耗/总初级生产量，根据表格数据可知，荒地的生产者呼吸消耗/总初级生产量比值最小，说明荒地的总初级生产量转化为净初级生产量比例最高；玉米田的生物种类多，形成的营养结构复杂，抵抗力稳定性高。
（2）根据图1中的能量值可知，甲的能量最高，处于第一营养级，乙和丁的能量基本相同，要远高于丙，说明乙和丁处于同一营养级，因此丙是第三营养级，所以由甲、乙、丙、丁形成的食物网如下图：
（3）摄入量等于同化量+未同化量（粪便），其中同化量有两部分作用：一是自身呼吸消耗，二是积累在体内用于生长发育繁殖，后者中的能量一部分传递给下一营养级，一部分被分解者分解．补充能量流经丙种群的情况如下图：
（4）由图2可知，能量传递效率只有10%﹣20%的原因有：①一部分的能量被各营养级的生物通过呼吸消耗消耗；②上一营养级的部分个体没有被下一营养级捕食；③还有部分能量能量被分解者利用。
27．(1) 巴氏消毒 1 9
(2) ② A
(3)稀释次数减少
(4) 固体 ①③ 培养基为大肠杆菌生长提供了碳源、氮源和无机盐等
(5) 伊红美蓝 深紫色带有金属光泽
【分析】微生物的营养物质及其作用：①碳源：构成生物体细胞的物质和一些代谢废物；既是碳源又是能源（有机碳源）。②氮源：合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。③水：不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定。④无机盐：细胞内的组成成分，生理调节物质，酶的激活剂等。
【详解】（1）牛奶消毒灭菌的方法是巴氏消毒法。稀释涂布平板法的具体操作如图为：用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中，以此依次稀释。
（2）稀释涂布平板法所用的接种工具是涂布器，即图2中的②。为防止杂菌污染，该工具应浸泡于酒精中，涂布前应将涂布器引燃（灼烧）后待冷却，故选A。
（3）由于消毒后牛奶中绝大部分的细菌已经被杀死，所以用稀释培养法时，可以将稀释的次数减少。
（4）②培养基含有琼脂，属于固体培养基。培养基中的主要营养物质有水、碳源、氮源、无机盐，分析表格可知，①③培养基为大肠杆菌生长提供了碳源、氮源（和无机盐），大肠杆菌能够生长。
（5）在鉴别培养基中含有伊红美蓝，则可以鉴别大肠杆菌，菌落呈黑色，故检测大肠杆菌的方法是在培养基中加入伊红美蓝，菌落具有金属光泽的黑色特征，可以认定为大肠杆菌。
28．(1) 脱分化 存在
(2) 梯度离心 桑葚胚或囊胚
(3) XX XX，XY或YY
(4) 内细胞团均等分割 可以基本排除由基因不同造成的个体差异，同时可利用这些遗传背景相同的动物通过它们之间的对比来分析致病基因。
【分析】题图分析，卵细胞被激活转化成phFSC，通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC，获得甲，从而得到孤雌小鼠；精子激活转化成ahFSC，通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC，获得乙，从而得到孤雄小鼠。
【详解】（1）卵细胞是高度分化的细胞，转化为孤雌胚胎干细胞phFSC相当于植物组织培养中的脱分化阶段，这个过程也存在某些基因的表达和某些基因的关闭，所以存在基因的选择性表达。
（2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，在对卵母细胞进行去核时，除了显微操作外，还可以采用梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理等方法处理，得到的重构胚通常需要发育到桑葚胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植，因为此时的胚胎易操作，且处于游离状态。
（3）不考虑致死，孤雌小鼠具有双母亲来源，因此其染色体组成为XX，而孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以其性染色体可能是XX、XY或YY。
（4）在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的进一步恢复和发育。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，这些小鼠遗传物质相同，所以作为实验材料可以排除由基因的差异造成的个体差异，进而可以通过这些遗传背景相同的个体来对比来分析致病基因。
29．(1) 动物细胞培养 动物细胞融合技术 抗原
(2) 克隆化培养 抗体检测 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
(3) 能 增殖 DNA合成途径被阻断不能增殖 辅助途径合成DNA
(4) 灵敏度高 特异性强
【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞，最后获取单克隆抗体。
【详解】（1）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。制备单克隆抗体时，需先将抗原物质注入小鼠体内，引发免疫反应，使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。所以给小鼠注射的HCG相当于抗原。
（2）由图可知，步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞在多孔细胞培养板上进行克隆化培养及抗体检测，经过多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。为了使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的，需先稀释细胞悬液，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液。
（3）氨基蝶呤可以阻断细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA的途径，又因为骨髓瘤细胞的DNA合成没有辅助途径。若向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基蝶呤能筛选杂交瘤细胞，因为浆细胞不能增殖，骨髓瘤细胞中的DNA合成途径被阻断不能增殖，杂交瘤细胞可通过辅助途径合成DNA，能够增殖。
（4）单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。
30．(1) 等量的变质老陈醋 对比乙和丙培养基上的菌落形态，从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落
(2) 稀释涂布平板法 培养基中长出的菌落是均匀分布的 遗漏菌落的种类和数目 菌落粘连影响计数（或培养基表面干燥脱水） 将A1、A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上，若产生气泡则为产气细菌
(3) 探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用 在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好 在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大
【分析】题中用瓶装变质老陈醋（胀瓶）、未变质老陈醋为实验材料，经过分离、纯化、并初步筛选出A1、A2和A3三株疑似的产气细菌，进一步探究了不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用，表中数据所示的清晰区直径（抑菌圈）越大，代表该菌种生长受到的抑制作用越强。
【详解】（1）为了筛选产气细菌，实验人员设置了甲、乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种等量的变质老陈醋，对比乙和丙培养基上的菌落形态，从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落，可以从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株。
（2）①过程a所得待测培养基中菌落的分布较为均匀，据此判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法。
②区分菌落种类的依据是菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征，统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，能有效防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目；或培养时间太长导致菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水影响菌落数目的统计。
③因为老陈醋中的产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌，若有5%的过氧化氢溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材，可以将A1、A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上，观察是否产生气泡，若产生气泡则为产气细菌。
（3）根据题意和表格信息分析可知，该实验的目的是探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用。在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好；在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大。
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