山东省临沂2022-2023学年高二下学期期中质量检测生物模拟试题（有解析）

山东省临沂2022-2023学年高二下学期期中质量检测生物模拟试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．白萝卜、红萝卜、小黄瓜等均可作为泡菜的原料，经发酵后在口感上比新鲜蔬菜更爽脆，既好吃，又助消化。下列关于泡菜制作的叙述，错误的是（ ）
A．热水短时处理原料可抑制果胶酶的活性，使成品泡菜口感较脆
B．腌制方法、时间长短和温度高低均会影响泡菜中亚硝酸盐的含量
C．利用水密封泡菜坛的目的是给泡菜坛内创造无氧环境
D．坛盖边沿的水槽“泡”中的气体由乳酸菌细胞呼吸产生
2．下列关于制作传统发酵食品的叙述，错误的是（ ）
A．制作腐乳利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶
B．发酵温度过低可能会导致制泡菜“咸而不酸”
C．制作果酒时，需每隔一定时间打开瓶盖放气
D．制作果醋时，醋酸杆菌能以乙醇作为碳源和能源
3．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是
A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
4．下列关于发酵工程的叙述错误的是（ ）
A．将血红蛋白基因转入青霉素生产菌来提高菌体对氧的吸收和利用率
B．在果酒发酵过程中，葡萄汁装入发酵瓶需留大约1/3的空间，温度应控制在18~30℃
C．啤酒酿造中发芽的大麦和啤酒花释放的淀粉酶可将淀粉进行糖化
D．谷氨酸发酵生产在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸
5．下列有关发酵工程及其应用的叙述 ，错误的是 （ ）
A．通过发酵工程生产微生物农药 ，可利用微生物或其代谢物来防治病虫害
B．发酵罐培养的环境条件会影响微生物的生长繁殖 ，也会影响微生物代谢产物的形成
C．分离、提纯产物可以获得微生物细胞本身或其代谢产物是发酵工程的中心环节
D．发酵工程的菌种可以从自然界中筛选出来 ，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得
6．下列有关生物工程描述正确的有（ ）
①依据植物细胞的全能性，可利用花药进行单倍体育种②依据基因重组原理，可利用植物细胞进行微型繁殖③依据基因突变原理，可利用射线处理愈伤组织获得作物新品种④依据膜的通透性，可利用海藻酸钠作材料包裹愈伤组织获得人工种子⑤制备单抗时先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞⑥制备的单抗可以用来直接杀死癌细胞⑦体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加抗生素保证无毒条件
A．一项 B．两项 C．三项 D．四项
7．关于“菊花的组织培养”实验，下列说法正确的是（ ）
A．菊花外植体需要用乙醇和次氯酸钠混合液进行消毒
B．诱导脱分化和再分化的培养基可以混用
C．脱分化和再分化过程都存在基因的选择性表达
D．幼苗移栽时，根部带有少量培养基可以提高存活率
8．为研究治疗性克隆技术能否用于治疗糖尿病，科研人员利用人糖尿病模型鼠进行如图所示实验。下列有关叙述正确的是（ ）
A．过程①中选用小鼠的皮肤细胞有利于细胞核全能性的恢复
B．获得的重组细胞经过程②后可直接获得胚胎干细胞悬浮液
C．过程③是诱导胚胎干细胞脱分化定向增殖生成胰岛B细胞
D．过程④移植前，不需要对受体A鼠注射免疫抑制剂
9．如果用动物的细胞进行核移植实验，不应该选择的供体细胞是（　　）
A．乳腺细胞 B．卵细胞 C．胚胎干细胞 D．囊胚细胞
10．在核移植获得的重构胚中，初级合子基因激活基因（minorZGA）不能正常表达，导致重构胚难以发育。研究者发现，提前去除供体细胞核中的黏连蛋白可以显著提高重构胚发育为囊胚的成功率。下列分析正确的是（ ）
A．minorZGA只存在于重构胚中且只在重构胚中表达
B．只将供体细胞核注入到去核卵母细胞中能克服重构胚难以发育的情况
C．黏连蛋白可能是导致重构胚中minorZGA不能被激活的关键物质
D．若要提高雌性动物的产出率，可以切取原肠胚的外胚层细胞进行性别鉴定
11．新冠病毒对小鼠的感染率极低。为了建立新冠肺炎模型小鼠，研究人员将人的ACF2基因转入小鼠体内，再用病毒感染小鼠，结果小鼠的感染率升高。进一步研究发现，感染后的老年小鼠比感染后的年轻小鼠淋巴结中的树突状细胞（DC）少，科学家提出两种假设：假设一：老年小鼠淋巴结中的DC增殖能力弱于年轻小鼠的。假设二：老年小鼠血浆中的DC迁移至淋巴结的能力弱于年轻小鼠的。研究者用荧光分子CFSE标记细胞DC细胞膜后，将其分别注射到年轻和老年小鼠静脉中，用流式细胞仪检测淋巴结中不同荧光强度的DC数量，结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．ACF2基因表达的产物最可能是新冠病毒表面蛋白识别的受体
B．老年小鼠体细胞中不同荧光强度的DC细胞的比例和数量均不同于年轻小鼠的
C．树突状细胞对抗原的摄取、处理、呈递属于人体的第三道防线
D．上述实验结果支持假设二，不支持假设一
12．下列关于植物组织培养及其应用的叙述，正确的是（ ）
A．离体的植物组织、器官必须经过灭菌才能接种到组织培养基中
B．植物原生质体融合与动物细胞融合的原理不同
C．以人工膜包裹植物愈伤组织和营养物质可制得人工种子
D．生长素、细胞分裂素的协同调节作用在组织培养中非常重要
13．EPO是人体肾脏分泌的一种肽类激素，能使骨髓生成红细胞的量增加，提高血红蛋白含量，增加血液携氧、供氧能力，是临床上一种治疗肾性贫血的药物。下图是采用中国仓鼠卵巢细胞表达系统来生产EPO的过程。下列相关叙述错误的是（ ）
A．在③之前，可以对精子用含有Ca2+载体的获能液处理，使其获得受精的能量
B．在③过程，精子需要依次穿越卵母细胞的透明带和卵细胞膜
C．在⑥之前，需要割取囊胚的部分滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别
D．甲乙丙丁是同一物种，但只有丁获得了人类的EPO基因
14．荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是：在PCR反应体系中加入与某条模板链互补的TaqMan荧光探针，当Taq酶在延伸子链时遇到探针，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即荧光每扩增一次，就有一个荧光分子生成。下列叙述错误的是（ ）
A．每次模板DNA的扩增都需要用到一对碱基序列互补的引物
B．Taq酶催化DNA的合成方向总是从子链5'端到3'端延伸
C．引物与探针均具特异性，与模板结合时都遵循碱基互补配对原则
D．若用cDNA作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平
15．双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）与脱氧核苷三磷酸（dNTP）的结构如图所示。已知ddNTP按碱基互补配对的方式加到正在复制的DNA子链中后，子链的延伸立即终止。现通过PCR技术获得被标记且以碱基“T”为末端的、不同长度的DNA子链片段。在反应管中已经有单链模板、引物、相关的酶和相应的缓冲液等，还需加入的原料是（ ）
①dCTP，dGTP，dATP ②dGTP，dATP，dTTP，dCTP
③α位被32P标记的ddTTP ④γ位被32P标记的ddTTP
A．①③ B．①④ C．②③ D．②④
16．2020年诺贝尔生理学或医学奖授予发现丙肝病毒的三位科学家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝癌。下图为利用小鼠甲为实验材料研制丙肝病毒的单克隆抗体的实验流程。下列叙述错误的是（ ）
A．在动物细胞培养时，培养液中除营养物质外还要添加一定量的血清
B．动物细胞培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将其置于含有95%O2加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养
C．图中筛选1的目的是获得杂交瘤细胞
D．若B淋巴细胞的基因型为HH，骨髓癌细胞的基因型为SS，在两两融合后基因型可能有HHSS、HHHH、SSSS
17．在基因工程中常使用噬菌体作为载体。M13噬菌体与噬菌体均能侵染大肠杆菌，但被M13噬菌体侵染的大肠杆菌不发生裂解。科研小组欲将目的基因的特定序列和基因编辑酶基因与噬菌体DNA进行重组，进而对大肠杆菌进行基因编辑。下列说法错误的是（ ）
A．噬菌体载体上需要含有标记基因和多个限制酶切割位点
B．与噬菌体相比，M13噬菌体更适合作为转化大肠杆菌的载体
C．将目的基因导入受体细胞时，必须先用处理大肠杆菌
D．噬菌体重组DNA能在大肠杆菌中复制和表达才可实现对大肠杆菌的基因编辑
二、多选题
18．在微生物培养和分离的叙述，错误的是（ ）
A．实验中使用后的培养基丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境
B．吸管和培养皿可以采用干热灭菌法
C．利用稀释涂布平板法能分离微生物
D．在牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏只能提供碳源，蛋白胨只能提供氮源
19．下列关于生物工程相关知识的叙述错误的是（　　）
A．植物组织培养过程中愈伤组织的代谢类型是自养需氧型
B．淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，在聚乙二醇诱导下，融合成的细胞即杂交瘤细胞
C．植物体细胞杂交，能打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育出新品种植株
D．在植物体细胞杂交中，可采用质壁分离实验检测制备的原生质体的活性情况
20．DNA的粗提取实验中，可以去除DNA中混有的蛋白质的方法有（ ）
A．盐析法 B．酶解法 C．高温变性 D．溶解法
三、综合题
21．泡菜是一种传统美食，生物兴趣小组自制泡菜，对其中的微生物进行了筛选，并对有害物质的含量进行测定，回答下列问题：
（1）制作泡菜的原理是_________。在制作泡菜时，盐水需煮沸冷却后使用，原因是_________。
（2）兴趣小组用_________培养基检测泡菜汁中大肠杆菌含量。从物理性质看，该培养基属于_________（液体/固体）培养基。某同学在计数操作过程中，发现培养基上的菌落连成一片，为避免此现象发生，正确的操作方法是_________。
（3）培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测培养基是否被污染，检测方法是_________。
22．如图是科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠的流程。回答下列有关问题：
(1)图中黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的________过程类似。该过程结束后，细胞的全能性_________（填“提高”或“降低”）。
(2)从黑鼠体内获得体细胞培养时，必须保证环境是__________的，培养液需定期更换，原因是_________。将它们置于含有_________的混合气体的CO2培养箱中进行培养
(3)将重组囊胚移入白鼠子宫内的技术为_________，克隆鼠X的体色为_________。科学家又利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不完全相同，若不考虑环境因素的影响，造成该现象的原因可能是________。
23．福橘是我国的传统名果，科研人员以航天搭载的福橘茎尖为材料，进行了研究。
(1)福橘茎尖经组织培养后可形成完整的植株，原因是_____。
(2)为探索航天搭载对细胞有丝分裂的影响，科研人员对组织培养的福橘茎尖细胞进行显微观察。
①制作茎尖临时装片需要经过______等步骤。显微镜下观察时，应先在低倍镜下找到呈正方形、排列紧密的根尖______细胞，在高倍镜下观察，判断这些细胞处于哪个时期的依据是：____。
②观察时拍摄的两幅显微照片如图。
照片a和b中的细胞分别处于有丝分裂的______期和______期。正常情况下，染色体会先移至细胞中央赤道板附近，之后______。
③图中箭头所指位置出现了落后的染色体。有丝分裂过程中，染色体在______的牵引下运动，平均分配到细胞两极，落后染色体的出现很可能是该结构异常导致的。
(3)研究人员发现，变异后的细胞常会出现染色质凝集等现象，最终自动死亡，这种现象称为细胞______。该过程对生物体的意义是______。因此，若要保留更多的变异类型，还需进一步探索适当的方法。
24．Gateway克隆技术是一种快速，高效地构建基因表达载体的方法，是基于λ噬菌体可以和大肠杆菌DNA的特定位点发生互换的特点设计的。Gateway克隆技术依赖于BP反应和LR反应，通过BP反应将目的基因连接到质粒1上，获得克隆质粒2，再通过LR反应将目的基因连接到载体质粒3上，获得表达载体，如图所示。请回答下列问题：
(1)为构建基因表达载体，需先设计引物，通过PCR特异性扩增目的基因，用于扩增目的基因的引物需满足的条件是______，为使PCR产物能参与后续交换，需要分别在2种引物上添加相应的attB1和attB2序列，该序列应添加在引物的______（填“3 端”或“5 端”）。
(2)BP反应中，将带有attB1和attB2序列的目的基因与质粒1混合，加入BP克隆酶，attB和attP位点之间会发生互换。该反应体系中可能含有未交换的质粒1和交换后的质粒2，为从体系中筛选出质粒2，使混合体系中的质粒分别转化用Ca2+处理的大肠杆菌，并涂布到含有青霉素的平板上。Ca2+处理的目的是______。理论上，在平板上长出菌落的大肠杆菌中含有的质粒即为质粒2，理由是______。
(3)LR反应中，将质粒2和质粒3混合，加入LR克隆酶，attL和attR位点之间会发生互换。为从反应体系中筛选出最终的基因表达载体，应将转化后的大肠杆菌涂布到含有______的平板上。获得的基因表达载体除含有图示的目的基因和卡那霉素抗性基因外，还必须有______等。
(4)在LR反应体系中，相应片段发生互换后，所得产物______（填“能”或“不能”）再次互换回到初始状态，原因是______。
25．新冠病毒是一种带包膜的RNA病毒，膜表面的刺突蛋白（S蛋白）与宿主细胞膜表面的受体ACE2结合，介导病毒进入宿主细胞。进一步研究发现，RBD是S蛋白中负责和受体ACE2结合的关键蛋白。基于以上研究，某科研团队研发了一种重组新冠病毒疫苗，制备过程如图所示。请回答下列问题：
(1)为获得更多的RBD蛋白基因，可利用PCR技术进行扩增，该技术需要设计一对引物（引物1和引物2），引物的作用是_________，PCR过程完成三次循环所需引物的数目共为________个。六次循环后，产生的双链等长的DNA片段数目是________。
(2)逆转录获得的RBD蛋白基因不含有限制酶识别序列，这就需要在对目的基因进行PCR扩增时，在设计的目的基因引物的一端加装限制酶的识别序列，应加在引物的________（填“3'”或“5'”）端，为了避免目的基因自身环化，最好在两种引物的一端加装　　　　　（填“相同”或“不同”）的限制酶的识别序列。
(3)为了确定目的基因是否表达，应先从受体细胞中提取_________（填“RBD蛋白”或“所有蛋白质”），再利用抗原-抗体杂交法来检测。
(4)下图所示的引物中，引物__________设计不合理，原因是________。
试卷第1页，共3页
试卷第1页，共3页
参考答案：
1．D
【分析】制作泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌是一种细菌，在无氧的条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜呈现一种特殊的风味，还不改变菜的品质，故泡菜坛盖的周围要用水密封。
【详解】A、植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，而果胶酶可以瓦解植物细胞壁，用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生果胶酶，从而使成品泡菜口感较脆，A正确；
B、亚硝酸盐的含量影响泡菜的质量，在泡菜腌制过程中，腌制方法、时间长短和温度高低等都会影响亚硝酸盐的含量，B正确；
C、泡菜制作时所需的菌种是乳酸菌，乳酸菌是严格厌氧微生物，制作泡菜时用水密封泡菜坛，其目的是保持无氧的环境，C正确；
D、乳酸菌是厌氧生物，其无氧呼吸的产物是乳酸，不含气体，D错误。
故选D。
2．C
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。
【详解】A、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，制作腐乳利用了毛霉等产生的蛋白酶、脂肪酶，A正确；
B、泡菜“咸而不酸”可能是食盐浓度过高，发酵温度过低抑制乳酸菌产生乳酸所致，B正确；
C、果酒发酵时，为了排出产生的气体，需要将瓶盖拧松放气，但不能打开，否则会被杂菌污染，C错误；
D、制作果醋时，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，该过程中醋酸杆菌能以乙醇作为碳源和能源，D正确。
故选C。
3．D
【分析】基因的表达即控制蛋白质的合成，只有合成了相应的蛋白质才能证明目的基因完成了在受体细胞中的表达．此题的重点就看是否产生相应的蛋白质。
【详解】A、检测到细菌的抗虫基因并未产生蛋白质，A错误；
B、检测到人胰岛素基因及其mRNA并未产生蛋白质，错误；
C、检测到人生长激素DNA序列并未产生蛋白质，C错误；
D、提取到人干扰素蛋白，是蛋白质，D正确。
故选D。
4．C
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。
【详解】A、青霉素发酵是高耗氧过程，可以用基因工程的方法，将血红蛋白基因转入青霉素生产菌来提高菌体对氧的吸收和利用率，A正确；
B、在果酒发酵过程中，葡萄汁装入发酵瓶需留大约1/3的空间，目的是先让酵母菌进行有氧呼吸，快速繁殖，防止发酵过程中产生的二氧化碳造成发酵液溢出，温度应控制在18~30℃，B正确；
C、糖化是淀粉分解，形成糖浆。酒酿造中发芽的大麦释放的淀粉酶可将淀粉进行糖化，C错误；
D、谷氨酸的发酵生产在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸；在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷胺酰胺，D正确。
故选C。
5．C
【分析】1、性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。生产柠檬酸就需要筛选产酸量高的黑曲霉。在啤酒生产中，使用基因工程改造的啤酒酵母，可以加速发酵过程，缩短生产周期。
2、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。
【详解】A、发酵工程应用于现代农牧业的很多方面，如生产微生物农药，与传统的化学农药不同，微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的，A正确；
BC、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，发酵罐培养的环境条件会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢产物的形成，B正确，C错误；
D、性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，如生产柠檬酸就需要筛选产酸量高的黑曲霉，D正确。
故选C。
6．C
【分析】植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培养（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】①依据植物细胞的全能性，可利用花药离体培养获得单倍体幼苗，①正确；
②利用植物细胞进行微型繁殖，是依据细胞的全能性，②错误；
③依据基因突变原理，可利用射线处理愈伤组织获得作物新品种，③正确；
④依据膜的通透性，可利用海藻酸钠作材料包裹胚状体获得人工种子，④错误；
⑤制备单抗时先利用特定的抗原蛋白注射到小鼠体内，再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞，⑤错误；
⑥利用单克隆抗体将药物定向带到癌细胞所在位置，不是用来直接杀死癌细胞，⑥错误；
⑦体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加抗生素可以保证无毒条件，⑦正确。
C正确，ABD错误。
故选C。
7．C
【分析】植物组织培养技术：（1）过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。（2）原理：植物细胞的全能性。（3）条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【详解】A、外植体消毒，先用70%乙醇，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗，A错误；
B、诱导脱分化和再分化的培养基中激素含量差别较大，因此不能混用，B错误；
C、脱分化是已经分化的细胞形成愈伤组织的过程，再分化是在愈伤组织基础上形成根、芽等过程，两个过程都存在基因的选择性表达，C正确；
D、试管苗移栽时，应将根部的培养基处理干净，D错误。
故选C。
8．D
【分析】动物胚胎发育的基本过程：（1）受精场所是母体的输卵管。（2）卵裂期：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。（3）桑葚胚：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是全能细胞。（4）囊胚：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。（5）原肠胚：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。
【详解】A、过程①选用卵母细胞，因为卵母细胞中含激发细胞核全能性的物质，核移植过程中选择MII中期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复，A错误；
B、获得的重组细胞经过程②后需要用胰蛋白酶消化后将细胞分散开，获得胚胎干细胞悬浮液，B错误；
C、过程③是诱导分化过程，其关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达，C错误；
D、过程④移植的神经元细胞是取自该小鼠自身细胞诱导分化而来，不会发生免疫排斥反应，故过程④移植前，不需要对受体A鼠注射免疫抑制剂，D正确。
故选D。
9．B
【分析】细胞核移植技术，就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体，使得核供体的基因得到完全复制。
【详解】哺乳动物核移植可以分为胚胎核移植和体细胞核移植，卵细胞为生殖细胞，细胞核内只有正常体细胞中遗传物质的一半，不适合用作核移植的供体，B符合题意，ACD不符合题意。
故选B。
10．C
【分析】试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。动物核移植将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。
【详解】A、minorZGA在重构胚和供体细胞中都存在，A错误；
B、不仅需将供体细胞核注入去核卵细胞，也需提前去除供体细胞核中的黏连蛋白，B错误；
C、由题意可知，黏连蛋白可能是导致重构胚中minorZGA不能被激活的关键物质，C正确；
D、外胚层细胞形成表皮和神经组织，不能进行性别鉴定，若要对早期胚胎进行性别鉴定，可以取滋养层细胞进行DNA分析，D错误。
故选C。
11．B
【分析】抗原呈递细胞（APC）是指能够摄取、加工处理抗原，并将处理过的抗原呈递给辅助性T细胞的一类免疫细胞。APC主要包括巨噬细胞、树突状细胞、B细胞。
【详解】A、将ACF2基因转入小鼠体内，用新冠病毒感染小鼠，小鼠的感染率升高，说明该基因表达的产物最可能是新冠病毒表面蛋白识别的受体，A正确；
B、由图可知，在曲线横坐标接近105时，老年小鼠体细胞中不同荧光强度的DC细胞的比例和年轻小鼠相同，B错误；
C、树突状细胞对抗原的摄取、处理、呈递属于人体的第三道防线，属于特异性免疫，C正确。
D、据图可知，年老小鼠与年轻小鼠相比，不同应该强度的细胞所占的比例相同，说明与分裂无关，细胞增殖能力相同，不支持假设一；但老年小鼠的荧光强度细胞数比年轻小鼠的细胞数量低，说明老年小鼠DC迁移至淋巴结的能力弱于年轻小鼠，D正确。
故选B。
12．D
【分析】植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞(外植体)脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，最终发育成完整的植株(新植体)。
【详解】A、离体的植物组织、器官必需经过消毒才能接种到组织培养基中，A错误；
B、植物原生质体融合与动物细胞融合的原理都是细胞膜的流动性，B错误；
C、以人工膜包裹胚状体和营养物质可制得人工种子，C错误；
D、生长素、细胞分裂素的协同调节作用在组织培养中非常重要，比例适中诱导形成愈伤组织，生长素比例高诱导生根，生长素比例低诱导生芽，D正确。
故选D。
13．A
【分析】图中①表示卵母细胞的采集和培养，②为精子的采集和获能，③为体外受精，④为目的基因导入受体细胞，⑤为胚胎的早期培养，⑥为胚胎移植，⑦为转EPO基因仓鼠的生长发育过程，⑧为检测目的基因EPO是否表达出EPO活性成分。
【详解】A、对于仓鼠而言，应采用培养法，即将精子放于人工配制的获能液中，培养一段时间后，精子就可获能；对于牛、羊等家畜的精子而言，可将精子放在含有Ca2+载体的获能液处理，但不是使其获得受精的能量，A错误；
B、③为体外受精，受精时，精子需要依次穿越卵母细胞的透明带和卵细胞膜，B正确；
C、根据题意“采用中国仓鼠卵巢细胞表达系统来生产EPO的过程”，⑥为胚胎移植，在此之前需要割取囊胚的部分滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别，C正确；
D、由图示可知，甲乙丙丁仍是同一物种，但只有丁通过转基因技术获得了人类的EPO基因，D正确。
故选A。
14．A
【分析】PCR技术：
(1)概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；
(2)原理：DNA双链复制；
(3)前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物；
(4)条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)；
(5)过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、PCR中所用的引物只能与相应模板链的3'端互补，两个引物之间不能互补，否则体系中加入引物后，引物之间形成杂合链，会影响引物与模板链的结合，不能正常扩增，A错误；
B、Taq酶可以催化子链沿着5’→3方向延伸，B正确；
C、引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则，C正确；
D、若用cDNA作模板，荧光定量PCR技术也可检测某基因的转录水平，D正确。
故选A。
15．C
【分析】1、DNA分子复制的场所、过程和时间：（1）DNA分子复制的场所：细胞核、线粒体和叶绿体。（2）DNA分子复制的过程：①解旋：在解旋酶的作用下，把两条螺旋的双链解开。②合成子链：以解开的每一条母链为模板，以游离的四种脱氧核苷酸为原料，遵循碱基互补配对原则，在有关酶的作用下，各自合成与母链互补的子链。③形成子代DNA：每条子链与其对应的母链盘旋成双螺旋结构。从而形成2个与亲代DNA完全相同的子代DNA分子。（3）DNA分子复制的时间：有丝分裂的间期和减数第一次分裂前的间期。
2、PCR条件包括：模板、引物、耐高温DNA聚合酶、四种脱氧核苷三磷酸（dNTP），还需要一定的离子浓度等。
【详解】由题意可知，该同学的目的是为得到放射性标记T为末端的、不同长度的子链DNA片段。则必须提供四种dNTP，如果没有dTTP则所有片段长度均一致，因为所有子链在合成时均在第一个T处掺入双脱氧的T而停止复制，故选②。由图可知，ddTTP要作为DNA复制的原料则需要脱去两个磷酸基团，故应将放射性32P标记于α位，故选③。C正确。
故选C。
16．B
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，注入小鼠腹腔中培养或者体外培养，最后从小鼠腹水或者培养液中获取单克隆抗体。单克隆抗体制备过程中至少涉及两次筛选，第一次是利用选择性培养基进行初步筛选出杂交瘤细胞，第二次是利用克隆化培养和抗体检测的方法筛选出既能大量增殖，又能产生所需抗体的杂交瘤细胞。
【详解】A、为了更好地促进动物细胞的培养，尽可能模拟细胞在体内的生活环境，培养液中除营养物质外还要添加一定量的血清、血浆，A正确；
B、动物细胞培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将其置于含有95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH，B错误；
C、融合后的体系中含有多种细胞，未融合的同种细胞，融合的具有同种核的细胞，还有杂交瘤细胞，筛选1的目的是为了获得杂交瘤细胞，C正确；
D、二者的融合细胞的种类可能有B淋巴细胞+B淋巴细胞、骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞+B淋巴细胞，基因型可能是HHHH、SSSS、HHSS，D正确。
故选B。
17．C
【分析】“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶），能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。常用的载体有质粒、动植物病毒、λ噬菌体的衍生物等。基因表达载体常包括目的基因、启动子、终止子、标记基因。题中基因编辑能将目的基因整合到受体细胞DNA的特定位置。
【详解】A、噬菌体载体上含有标记基因，可鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。噬菌体载体有多个限制酶切割位点，才具有携带多种目的基因的能力，A正确；
B、被M13噬菌体侵染的大肠杆菌不发生裂解，才能得到导入目的基因的大肠杆菌，B正确；
C、将目的基因导入微生物细胞时，常常先用 Ca2+ 处理大肠杆菌使其转化为感受态细胞。电击法也能达到相同效果，C错误；
D、噬菌体重组DNA能在大肠杆菌中复制和表达，基因编辑酶基因表达后才能产生基因编辑酶，进而进行基因编辑，D正确。
故选C。
18．AD
【分析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。
消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
【详解】A、实验中使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，A错误；
B、常用的灭菌方法有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌和干热灭菌等，吸管和培养皿可以采用干热灭菌法，B正确；
C、分离微生物的方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法，C正确；
D、在牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏和蛋白胨都能提供氮源和碳源，D错误。
故选AD。
19．ABD
【分析】1、单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与浆细胞结合，经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞，经专一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞，即可得单克隆抗体。
2、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】A、愈伤组织是由外植体通过脱分化形成的，没有叶绿体，其代谢类型是异养需氧型，A错误；
B、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合形成的细胞有三种：B淋巴细胞的自身融合细胞、骨髓瘤细胞的自身融合细胞以及B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的杂交瘤细胞，B错误；
C、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株，所以植物体细胞杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出新品种植株，C正确；
D、原生质体是指去除细胞壁的植物细胞，所以不存在质壁分离的现象，D错误。
故选ABD。
20．ABCD
【分析】在DNA粗提取中，选择适当的盐溶液就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。还可以使用酒精进一步将DNA和某些蛋白质分离。
【详解】AB、DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，调节NaCl溶液浓度可以除去DNA样品中的部分杂质，加入木瓜蛋白酶也可以除去DNA样品中的蛋白质杂质，AB正确；
C、蛋白质在高温条件下会因为空间结构不同而发生变性，利用此原理可去除DNA中混有的蛋白质，C正确；
D、在DNA粗提取中，选择适当的盐溶液就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，D正确。
故选ABCD。
21． 无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸 煮沸是灭菌处理杀死杂菌，冷却是为了防止高温杀死乳酸菌 伊红美蓝 固体 对菌液进行梯度稀释（加大稀释倍数） 将未接种的培养基在适宜的条件下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落出现
【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。泡菜的制作流程是原料的休整、洗涤、晾晒、切分等加工过程+泡菜盐水→加入调味料装坛→发酵→成品。
2、微生物接种常用的两种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养，在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】（1）泡菜制作的原理是乳酸菌发酵，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧条件下，乳酸发酵将葡萄糖分解产生乳酸，形成一种独特的风味；泡菜制作所使用的微生物是乳酸菌，配制泡菜的盐水要先煮沸以杀死细菌，使用泡菜水前需冷却可使乳酸菌等微生物的生命活动不受温度过高的影响。
（2）检测泡菜汁中大肠杆菌的含量，利用的伊红美蓝培养基；从物理性质看是固体培养基；对菌液进行梯度稀释（加大稀释倍数），浓度较低可避免培养基上的菌落连成一片。
（3）检测培养基是否被污染，检测方法是将未接种的培养基在适宜的条件下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落出现。
【点睛】本题结合泡菜的制作及微生物鉴别的知识，考生识记泡菜制作的原理，理解微生物接种的知识。
22．(1) 脱分化 提高
(2) 无菌、无毒 细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 95%空气+5%CO2
(3) 胚胎移植 黑鼠 核移植技术需要卵细胞，卵细胞的细胞质基因对性状有一定影响
【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。
2、胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
【详解】（1）黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似，是组织细胞恢复分裂能力的过程。iPS细胞与小鼠内细胞团一样，具有全能性，该过程结束后，细胞的全能性提高。
（2）细胞培养过程中首先要保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境中，培养液中除了营养物质外还要添加一定量的血清、血浆等天然成分；培养过程中，培养液需定期更换，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，细胞培养时，将其置于含有95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
（3）将重组囊胚移入白鼠子宫内的技术为胚胎移植，克隆属于无性繁殖，iPS细胞来自黑鼠，克隆鼠X的体色为黑色，上述技术流程中提供胚胎的灰鼠和代孕白鼠都是雌鼠，可以是雄鼠的是体细胞供体黑鼠和克隆鼠X，其颜色都是黑色。若要利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，不考虑环境因素的影响，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不是完全相同，因为克隆鼠X的细胞质基因来源于黑鼠的卵细胞，克隆鼠Y的细胞质基因来源于灰鼠的卵细胞，卵细胞的细胞质基因对性状有一定影响。
23．(1)植物细胞具有全能性
(2) 解离、漂洗、染色和制片 分生区 各个时期细胞内染色体的存在状态和分布 中 后 着丝粒（点）分裂，姐妹染色单体分开，两条子染色体移向两极 纺锤丝
(3) 凋亡 对于多细胞生物体完成正常发育，维持内部环境的稳定，以及抵御外界各种因素的干扰都起着非常关键的作用
【分析】1.细胞凋亡是由基因决定的细胞自动结束生命的过程，也称为细胞编程性死亡，是细胞和生物体的正常的生命现象，与细胞坏死不同。2.观察细胞有丝分裂实验的步骤：解离、漂洗、染色、制片和观察。
【详解】（1）由于植物细胞具有全能性，所以利用福橘茎尖经组织培养可获得完整的植株。
（2）①制作茎尖临时装片的步骤为：解离、漂洗、染色和制片等步骤。观察植物细胞的有丝分裂，一般选用根尖的分生区，分生区的细胞分裂旺盛呈正方形且排列紧密，在显微镜下通过观察各个时期细胞内的染色体的存在状态和分布来判断细胞处于哪个时期。
②观察拍摄的两幅显微照片，照片a中的细胞处于有丝分裂的中期，因为染色体的着丝点排在细胞中央赤道板的部位，而b中的细胞处于有丝分裂后期，此时细胞中的行为变化是着丝点一分为二，染色单体分开，染色体数目加倍，两条子染色体移向两极。
③有丝分裂过程中，染色体在纺锤丝的牵引下运动，平均分配到细胞两极，而图中箭头所指位置出现了落后的染色体，故可推测该落后染色体的出现很可能是该结构异常导致的。
（3）研究人员发现，变异后的细胞常会出现染色质凝集等现象，最终自动死亡，由于该现象是自动死亡，又因细胞凋亡是基因决定的细胞自动结束生命的过程，所以这种现象称为细胞凋亡。细胞凋亡不同于细胞坏死，没有炎症反应，对于多细胞生物体完成正常发育，维持内部环境的稳定，以及抵御外界各种因素的干扰都起着非常关键的作用。
24．(1) 能与目的基因两端的碱基序列互补配对 5 端
(2) 使大肠杆菌处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 质粒2含有青霉素抗性基因且不具有ccdB基因，导入该质粒的大肠杆菌能在含青霉素的平板上增殖；而质粒1含有ccdB基因，其表达的产物能抑制大肠杆菌的增殖
(3) 卡那霉素 启动子和终止子
(4) 不能 attL与attR序列互换后序列发生改变，而体系中的LR克隆酶具有专一性
【分析】PCR过程：①变性：当温度上升到90℃以上时，DNA解旋为单链；②温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对分别与两条单链DNA结合；③延伸：再将温度上升到72℃左右，反应体系中的4种脱氧核苷酸在耐高温的TaqDNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
【详解】（1）引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核苷酸序列，并依赖其完整的3 —OH实现子链的延伸，因此用于扩增目的基因的引物需要与目的基因两端的碱基序列互补配对。
DNA聚合酶延伸DNA子链时，是将脱氧核苷酸加到。引物的3 端，为了不破坏目的基因，attB1和attB2序列应添加在引物的5 端。
（2）用Ca2+处理后的大肠杆菌会处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。题图中质粒2含有青霉素抗性基因且不具有ccdB基因，导入该质粒的大肠杆菌能在含有青霉素的平板上增殖；而质粒1含有ccdB基因，其表达的产物能抑制大肠杆菌的增殖，因此，理论上在平板上长出菌落的大肠杆菌中含有的质粒即为质粒2。
（3）题图中质粒1和质粒3中均含有ccdB基因，其表达的产物能抑制大肠杆菌的增殖；质粒2只含有青霉素抗性基因而不含卡那霉素抗性基因，因而含有该质粒的大肠杆菌不能在含有卡那霉素的平板上生存；质粒4含有卡那霉素抗性基因且不含有ccdB基因，因而含有该质粒的大肠杆菌能在含有卡那霉素的平板上增殖。获得的基因表达载体必须含有目的基因、标记基因、启动子和终止子等。
（4）LR反应体系中，attL与attR序列交换后序列变为attP与attB序列，体系中的LR克隆酶具有专一性，不能催化attP与attB序列之间的互换，故所得产物不能再次回到初始状态。
25．(1) 使DNA聚合酶能够从引物的3端开始连接脱氧核糖核苷酸 14 52
(2) 5' 不同
(3)所有蛋白质
(4) 引物I 引物I折叠后会发生碱基互补配对形成发夹结构
【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品；基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
PCR技术中有关计算规律：
【详解】（1）引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核糖核苷酸。PCR过程完成第一次循环产生两个DNA分子，所需引物为2个，完成第二次循环产生四个DNA分子，所需引物为4个，完成第三次循环产生8个DNA分子，所需引物为8个，所以PCR过程完成三次循环所需引物的数目共为14（2+4+8=14）个；PCR扩增体系会产生三种双链DNA片段分别是长-中链、中-短链和短-短链，长-中链无论复制多少次均是两个，中-短链复制n次的条数为2n-2，短-短链在第三次循环才出现，n次循环一共有2n个DNA，短-短链（双链等长的DNA）的个数=DNA的总数-长-中链的个数-中-短链的个数=2n-2-（2n-2）=2n-2n，当n等于6时，短-短链（双链等长的DNA）的个数=26-2×6=52个。
（2）PCR过程中，DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核糖核苷酸延伸子链，所以应在设计的目的基因引物的5'端加装限制酶的识别序列。为了避免目的基因自身环化，最好在两种引物的5''端加装不同的限制酶的识别序列。
（3）为了确定目的基因是否表达，需对RBD蛋白进行检测，应先从受体细胞中提取所有蛋白质，再利用抗原一抗体杂交法来检测RBD蛋白，若出现杂交带，则表明RBD蛋白成功表达。
（4）图所示的引物中，引物I折叠后会发生碱基互补配对形成发夹结构，从而会影响其与目的位点结合，设计不合理。
答案第1页，共2页
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