临沂市六县联考2022-2023学年高二下学期期中考试
生 物
注意事项：
1.本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。 满分 100 分。 考试用时 90 分钟。
2.答题前，考生务必用 0.5 毫米黑色签字笔将自己的姓名、座号、考生号、县区和科类填写到答题卡规定的位置上；或将考生条形码黏贴到相应位置上。
3.第Ⅰ卷每小题选出答案后，用 2B 铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。
4.第Ⅱ卷必须用 0.5 毫米黑色签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应的位置；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新的答案；不能使用涂改液、胶带纸、修正带。 不按以上要求作答的答案无效。
第Ⅰ卷 选择题（45分）
一、选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。 每小题给出的四个选项中，只有一个选项最符合题目要求。）
1.白酒、啤酒和果酒的生产均需经过发酵过程，下列叙述错误的是
A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定量的氧气
B.白酒、啤酒和果酒的发酵过程也是微生物生长繁殖的过程
C.葡萄糖转化为酒精所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体
D.生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌
2.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术在生产、生活和科研实践中有着广泛的应用。下列叙述正确的是
A.动植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行
B.微生物、动物细胞培养基（液）中需添加一定量的抗生素以防止污染
C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D.用紫外线进行消毒时，适量喷洒石炭酸等消毒液可以加强消毒效果
3.聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由某些嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，具有类似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具备的生物可降解性，可用于制造无污染的“绿色塑料”。 科学家从某咸水湖中寻找生产 PHA 菌种的流程图如下。 下列说法正确的是
A.步骤①取湖水接种到含合成塑料的选择培养基上进行筛选
B.步骤②如用稀释涂布平板法接种，需用涂布器蘸取少量湖水均匀地涂布在培养基的表面
C.步骤③应将培养基置于 37℃恒温下培养，长出的菌落均能够合成 PHA
D.步骤④挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的 PHA 含量
4.为了探究日常售卖的冰激凌中大肠杆菌含量是否超标，某生物兴趣小组设计了如下实验： 制备伊红－亚甲蓝琼脂培养基（生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色）→取 10ml刚融化的同种冰激凌作为原液→用稀释涂布平板法接种→适宜条件下培养、观察→出现了不同形态、颜色的菌落。 下列说法错误的是
A.配制培养大肠杆菌的培养基时先灭菌再调节pH至弱酸性
B.用稀释涂布平板法接种后，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少
C.该实验制备的培养基为鉴别培养基，需要设计不接种的空白培养基作为对照组
D.培养基上出现了不同形态、颜色的菌落说明除了大肠杆菌之外还有其他杂菌污染
5.发酵工程在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用。 下列叙述错误的是
A.食用酱油的制作以大豆为主要原料，利用能产生蛋白酶的黑曲霉将蛋白质分解成小分子
的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制而成
B.啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成
C.谷氨酸的发酵生产在中性和微碱性条件下积累谷氨酸，在酸性条件下容易形成谷氨酰胺
和 Ｎ－乙酰谷胺酰胺
D.在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力
6.科研人员利用茎尖培育脱毒马铃薯，测得马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响如图。 下列叙述正确的是
A.脱毒苗具有抗病毒的能力
B.培育脱毒苗需要使用纤维素酶和果胶酶
C.该实验涉及到 1 个自变量，2 个因变量
D.根据本实验可知，大规模生产脱毒苗时茎尖越小越好
7.下列关于植物体细胞杂交与动物细胞融合比较的叙述，正确的是
A.过程中都涉及细胞膜流动性，都需要酶将细胞分散成单个细胞
B.都可以用PEG融合法或灭活病毒诱导法诱导融合
C.两种杂交细胞都能获得杂交前 2 个细胞的全部优势
D.前者主要是为了获得杂种植株，后者主要是为了获得细胞产品
8.下图为某哺乳动物受精作用及胚胎发育过程示意图。 下列叙述错误的是
A.卵子成熟和①过程发生在雌性动物的输卵管中
B.②③④过程都发生有丝分裂，B时期胚胎发生孵化
C.桑葚胚细胞具有全能性，ａ时期细胞开始出现分化
D.在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，是完成受精的标志
9.下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列叙述错误的是
A.①过程需在通入较高氧气的培养箱培养，培养液中需要CO2维持pH
B.②过程的细胞通常是次级卵母细胞，常使用显微操作去核
C.可通过电融合法使细胞融合，③过程可用Ca2+载体激活重构胚
D.分割囊胚时要保证内细胞团均等分割，应取滋养层细胞鉴定性别
10.关于生物技术与工程的应用，下列不符合人类伦理道德观念的是
A.利用克隆技术为不孕不育患者克隆人
B.利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人
C.利用现代生物技术有效确认身份和侦破案件
D.设计试管婴儿，避免遗传病患儿的出生
11.下面是几种不同限制性内切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。 下列叙述错误的是
A.以上DNA片段由 4 种限制酶切割后产生
B.②片段是在识别序列为的限制酶作用下形成的
C.①和④两个片段在 Ｔ4DNA连接酶的作用下不能连接形成重组DNA分子
D.限制酶、DNA 连接酶和DNA聚合酶作用的部位都是磷酸二酯键
12.某细菌质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转入成功。 外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，如图所示是外源基因插入位置（插入点有ａ、B、ｃ）示意图。 请根据表中提供的细菌生长情况，推测①②③三种重组质粒的外源基因插入点，正确的一组是
A.①是 A和 B；②是 ａ；③是 B B.①是 A和 B；②是 B；③是 A
C.①是 ｃ；②是 B；③是 A
D.①是 ｃ；②是 ａ；③是 B
13.下图是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，质粒 Ｐ0 有四环素抗性基因（tetr）和氨苄青霉素抗性基因（ampr），EcoRV酶切位点为 。 下列说法错误的是
A.EcoRV酶切出来的线性载体 P1两端为平末端
B.载体 P1 需要添加与目的基因片段两端互补的脱氧核苷酸才能与其连接
C.目的基因与 P2可能反向连接会导致目的基因产物不能合成
D.只有成功导入 P3的受体细胞才能在含有氨苄青霉素的培养基上增殖
14.RE-PCR是以提取的RNA为模板，经逆转录获得与之互补的 DNA（cDNA） 序列，再以cDNA序列为模板进行目的片段的扩增。 具体过程如图所示。 下列叙述正确的是
A.过程 1 需要使用耐高温的DNA聚合酶
B.过程 2 中的引物 B 可与 ｍＲＮA互补配对
C.游离的脱氧核苷酸只能加到引物的 5′端
D.RE-PCR可用于对RNA病毒的检测与鉴定
15.基因工程提供了新的育种方法。 抗逆转基因作物的培育与推广带来了巨大的经济和社会效益。 下列说法错误的是
A.在一定程度上使作物摆脱了土壤和气候条件的限制
B.减少了化肥的制造和使用量，有利于环境保护
C.减少了化学农药对环境的污染和人畜的危害
D.使得作物在不良环境下更好地生长，提高产量
二、不定项选择题：（本题共 5 小题，每小题 3 分，共 15 分。 每小题给出的四个选项中，有的只有一个选项正确，有的有多个选项正确，全部选对的得 3 分，选对但不全的得 1 分，有选错的得 0 分。）
16.泡菜古称“菹”，制作工艺历史悠久。 在制作传统泡菜时，可以向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”，下列叙述错误的是
A.“泡菜坛”装置可以进行果酒的发酵
B.制作泡菜时加入的“陈泡菜水”需要煮沸，目的是减少杂菌
C.发酵过程中泡菜水的表面出现“白膜”可能是由于乳酸菌大量繁殖所致
D.腌制方法、时间长短和温度高低均会影响泡菜中亚硝酸盐的含量
17.有机物 Ｘ 含 Ｃ、Ｈ、Ｏ、Ｎ 等元素，因难以降解会对环境造成污染。 Ｘ 在培养基中达到一定浓度时，培养基表现为不透明。 某研究小组在从土壤中分离能降解 Ｘ 的细菌（目标菌）的过程中，发现培养基上出现甲、乙两个菌落（如图所示）。 下列分析正确的是
A.配制的培养基中的物质 Ｘ 是唯一的碳源和氮源
B.该培养基属于选择培养基，培养基组分中需要加入凝固剂
C.如果要获得目标菌种，应该选择乙菌落进行进一步纯化
D.可以用图中培养基进一步扩大培养目标菌种
18.科学家用植物体细胞杂交的方法得到番茄—马铃薯杂种植株，但是杂种植株没有如科学家想象的那样地上结番茄地下长马铃薯。 下列说法正确的是
A.番茄—马铃薯杂种植株使番茄和马铃薯之间可以进行基因交流
B.番茄—马铃薯杂种植株没有同时体现出马铃薯和番茄的形态特征
C.杂种植株没有达到理想结果可能是因为遗传物质的表达相互干扰
D.利用嫁接技术可以得到地上结番茄，地下长马铃薯的结果
19.如图表示牛胚胎移植的流程，其中①～④表示相应的操作过程。 下列叙述正确的是
A.①过程使受体母牛同期发情，主要为了保证犊牛有足够的的母乳
B.②过程是通过注射性激素，达到超数排卵
C.③过程中精子需要培养在获能液中获能后才能受精
D.④过程是为了避免受体母牛对外来胚胎产生免疫排斥
20.基因工程是一种DNA操作技术，其表达载体的构建和检测筛选是两个重要步骤。 图 1 为 某种质粒简图。 已知目的基因 Ｘ 的两端分别有 ＥｃｏＲⅠ、BａｍＨⅠ的酶切位点。 图 2 表示运用影印培养法（指在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法）检测表达载体是否导入大肠杆菌。 下列叙述错误的是
A.同时使用 ＥｃｏＲⅠ和 BａｍＨⅠ切割质粒，可避免酶切后质粒的自身环化
B.转化方法是将质粒表达载体溶于缓冲液后与经Ca2+处理的大肠杆菌混合
C.培养基 A和培养基 B 分别含有四环素和青霉素
D.从筛选结果分析，菌落 1、2、3、5 含目的基因 Ｘ
第Ⅱ卷 非选择题（55 分）
21.（11 分）啤酒是以大麦芽、啤酒花、水为主要原料，经酵母发酵作用酿制而成的饱含二 氧化碳的低酒精度酒。 啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在体内产生大量的热量，被称为“液体面包”。 图 1 是啤酒生产工艺流程简图。
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（1）图中焙烤的目的是降低麦芽水分，并 ，然后去根制成成品麦芽。 将粉碎的麦芽等原料用温水分别在糊化罐、糖化罐中混合，调节温度以制造麦汁，加水糊化之前粉碎成品麦芽的目的是 。
（2）发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节。 麦汁冷却后再加入啤酒酵母使其发酵，冷却的目的是 。 在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程；并及时添加必需的营养物质组分，其目的是 ；还要严格控制 等 发酵条件 （至少写出 3 个），以获得所需的发酵产物。
（3）现代发酵工程使用的大型发酵罐均具有计算机控制系统，能使发酵全过程处于最佳状态，图 2 为发酵罐示意简图。 发酵过程有机物分解释放的能量会引起发酵罐温度升高，常用冷却水对发酵罐进行温度的调节，冷却水进入口和排出口分别是 （填图 2 中的标号，下同）。 酵母菌酒精发酵过程中要“先通气后密封”，通过空气入口 来控制溶解氧。 发酵还需要用排气管调节罐压，原因是 。
22.(11分)某生物兴趣小组开展了“分离土壤中分解尿素的细菌并进行计数”的实验,主
要过程如下。
I.配制尿素固体培养基。配方:水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、NaH2PO4尿素、酚红、琼脂糖。(酚红是一种酸碱指示剂,在酸性时呈黄色,碱性时呈红色;琼脂糖是-种链状多糖,35~40℃时形成凝胶,90℃以上溶解;琼脂主要成分是琼脂糖和果胶，还有少量含氮化合物)
Ⅱ.取施用尿素的农田土壤1g装人事先灭过菌的锥形瓶中。然后进行梯度稀释和接种培养,如下图。
（1）从功能上看，该固体培养基属于 培养基，理由是 。
（2）培养基中添加一定量的K2HPO4、NaH2PO4，它们的作用是 （至少说出两点）。 尿素固体培养基需用琼脂糖做凝固剂而不用琼脂的原因是 。
（3）实验中用酚红指示剂鉴别的原理是以尿素为氮源的微生物培养一段时间后，细菌产生的 （填物质名称）向周围扩散，将培养基中的尿素分解，产生的 使培养基中的酚红由黄色变成红色。
（4）据上图分析，接种所用的方法是 。 若 Ｃ 试管和 Ｄ 试管对应平板上菌落数分别为 135 个、133 个、134 个和 25 个、23 个、24 个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为 个。 该实验需要设置的对照组是 。
23.（11 分）研究者以某品种月季嫩芽为外植体，探究细胞分裂素和生长素诱导愈伤组织
分化生芽的机制。
（1）月季嫩芽接种前需要一般先用酒精消毒，立即用 清洗 2 ～ 3 次，然后再用次氯酸钠消毒，并做同样的清洗过程。 嫩芽需经过 形成愈伤组织，该过程是否体现了基因的选择性表达？ 。 判断依据是 。
（2）不同激素比例的培养基上的愈伤组织的芽分化率（％）结果如表。
据表中数据可知， 是细胞分裂素类激素， 是实验处理中芽分化的最佳组合。
（3） 愈伤组织生芽过程与 A基因和 Ｗ 基因有关。 为探讨其中关系，将 A基因功能缺失突变体（突变体 ａ）和野生型月季的愈伤组织分别置于高 6－BA培养基中诱导生芽，在此过程中测定 Ｗ 基因的相对表达量如图：
由图可知，野生型的 Ｗ 基因表达量与高 6－BA诱导时间的关系是 。 此外，在高 6－BA诱导下 A基因能促进 Ｗ 基因表达，该结论的依据为 ：与野生型相比， 。
24.（11 分）在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗适用于肿瘤晚期患者，主要分为单克隆抗 体治疗和过继性细胞治疗两类。利用单克隆抗体和高效细胞毒类药物结合生产的药物ADC可以有效杀伤肿瘤细胞。 ADC的作用机制和过继性细胞治疗相关过程如下图所示。 回答下列问题：
（1）在单克隆抗体制备过程中，初步筛选出来的杂交瘤细胞进行 和 才可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（2）图 1 中，表示单克隆抗体是 （填数字），与单纯使用细胞毒类药物相比，利用ADC治疗肿瘤的优势是 。
（3）图 2 所示过继性细胞治疗中，可以用 （实验器材）将从肿瘤患者体内获取多种免疫细胞一一分离，对这些分离的细胞进行单克隆培养过程中会出现分裂受阻，其原因主要有 （答出 2 点），还有可能发生接触抑制现象。
（4）过继性细胞治疗最后得到的能够特异性地识别并处理肿瘤细胞的免疫细胞是 ， 这些细胞回输后能有效避免免疫排斥的原因是 。
25.（11 分）甘蓝型油菜中，抑制PEP基因的表达可提高油菜籽的含油量。 通过基因工程将PEP基因反向连接在启动子后，构建转反义PEP基因油菜是提高油菜籽含油量的常用技术路径。 请回答下列问题：
（1）为将PEP基因反向连接在启动子后，构建反义PEP基因，需要将限制酶酶切位点设计在引物上，ＰＥＰ 基因的上游引物和下游引物中应分别引入 酶切位点。
（2）该实验选用Ti质粒作为载体，除了它具有启动子等基因表达载体必备结构外，还因为 。 用激光照射油菜愈伤组织时，可在细胞膜上打出一个穿孔，带有转反义PEP基因的Ti质粒由此小孔进入油菜细胞，几秒钟后小孔封闭，该过程体现了细胞膜具有 。
筛选时，在激光照射下，Ti质粒导入成功的细胞一般会发出 。
（3）为检测反义PEP基因是否进入细胞，研究者通常检测细胞中是否存在ntp基因，而不检测PEP基因，其原因是 。已知PEP基因的转录模板链为 A链，则反义PEP基因的转录模板为 。 转反义PEP基因油菜中PEP基因的表达受阻，原因是 。生物试题参考答案及评分标准 ２０２３ ４
一、选择题（４５ 分。 １－１５ 题每题 ２ 分，共 ３０ 分；１６－２０ 题每题 ３ 分，共 １５ 分）
１．Ｃ ２．Ｄ ３．Ｄ ４．Ａ ５．Ｂ ６．Ｃ ７．Ｄ ８．Ｂ ９．Ａ １０．Ａ １１．Ｂ １２．Ｃ １３．Ｄ １４．Ｄ
１５．Ｂ １６．ＢＣ １７．ＡＢＣ １８．ＣＤ １９．Ｃ ２０．ＣＤ
二、非选择题（５５ 分）
２１．（除注明外，每空 １ 分，共 １１ 分）
（１）加热杀死大麦种子胚但不使淀粉酶失活（２ 分） 破碎有利于淀粉酶与淀粉充分接
触，提升反应速率
（２）防止接种时酵母菌被杀死 延长菌体生长稳定期的时间，以得到更多的发酵产物
温度、ｐＨ、溶解氧、通气量与搅拌（２ 分）
（３）③④ ⑤ 防止酵母菌无氧呼吸产生的 ＣＯ２ 气体将发酵罐中的液体培养基溢出，防
止罐体气压过高引起爆裂（２ 分）
２２．（除注明外，每空 １ 分，共 １１ 分）
（１）选择 尿素是唯一氮源，只允许能分解尿素的微生物生长
（２）为微生物提供无机盐，维持培养基的 ｐＨ 稳定 琼脂含有少量含氮化合物，为其他不
能以尿素为氮源的微生物提供氮源，干扰筛选尿素分解菌（２ 分）
（３）脲酶 ＮＨ３
（４）稀释涂布平板法 １．３４×１０７ 不接种样品稀释液的平板（包括尿素培养基平板和牛
肉膏蛋白胨培养基），接种样品稀释液的牛肉膏蛋白胨培养基（２ 分）
２３．（除注明外，每空 １ 分，共 １１ 分）
（１）无菌水 脱分化 是 月季嫩芽和愈伤组织的遗传物质相同，但是形态和结构有很
大不同（２ 分）
（２）６－ＢＡ ２．０ ｍｇ·Ｌ－１ ６－ＢＡ 和 ０．２ ｍｇ·Ｌ－１ ＩＢＡ
（３）随着高 ６－ＢＡ 诱导时间的延长，野生型的 Ｗ 基因表达量显著升高（２ 分）
随着高 ６－ＢＡ 诱导时间的延长，突变体的 Ｗ 基因表达量低于野生型。 （２ 分）
生物参考答案 第 １ 页（共 ２ 页）
２４．（除注明外，每空 １ 分，共 １１ 分）
（１）克隆化培养 抗体检测
（２）① ＡＤＣ 能通过实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，不对健康细胞造成伤害（２ 分）
（３）９６ 孔板 细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏（２ 分）
（４）细胞毒性 Ｔ 细胞 这些免疫细胞来自自体，与人体细胞的组织相容性抗原相同（２
分）
２５．（除注明外，每空 １ 分，共 １１ 分）
（１）ＳｃａⅠ、ＢａｍＨⅠ（２ 分）
（２）进入细胞后，Ｔｉ 质粒上的 Ｔ－ＤＮＡ 能整合到油菜细胞的染色体上（２ 分） 流动性 绿
色荧光
（３）油菜细胞的基因组中本身有 ＰＥＰ 基因（２ 分） Ｂ 链 以 Ｂ 链为模板转录出的 ＲＮＡ
与以 Ａ 链为模板转录出的 ＲＮＡ 配对形成双链，抑制了 ＰＥＰ 基因的翻译过程（２ 分）
生物参考答案 第 ２ 页（共 ２ 页）
