元氏县第四中学2022-2023学年高二下学期4月月考
生物试卷
一、单选题
1．桑椹酒是以优质桑椹为原料酿制而成，在我国有2000多年的历史。某研究性学习小组欲以桑椹为材料进行桑椹酒的制作。下列相关叙述错误的是（ ）
A．发酵的菌种来自桑椹所带的野生型酵母菌
B．发酵所需的最适温度在18-25℃左右
C．发酵过程中酵母菌会产生CO2，注意适时排气
D．桑椹汁要进行高压蒸汽灭菌，以抑制杂菌生长繁殖
2．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示,①为土壤样品。下列相关叙述错误的是（ ）
A．使用平板划线法可以在⑥上获得单个菌落
B．如果要测定②中活细菌数量,常采用稀释涂布平板法
C．图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源
D．涂布平板法在③培养皿中长出的菌落数一定等于最初的活菌数
3．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）
A．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应立即去挑取菌落
D．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
4．我国最早的诗集《诗经》中有“中田有庐，疆埸有瓜。是剥是菹，献之皇祖。”的诗句，菹就是现在的泡菜。川渝的人们在制作泡菜时会加入老盐水，即原来的泡菜汁。下列叙述正确的是（ ）
A．需将被腌制的材料做灭菌处理以防止杂菌的污染
B．在菹发酵过程中乳酸菌会发酵产生亚硝酸盐，其含量先上升再下降
C．加入老盐水可缩短腌制时间并保持泡菜的原有风味
D．菹在发酵早期会出现一些气体，需要定期打开坛盖排气
5．限量补充培养法可用于营养缺陷型菌株的检出（如下图）。将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落﹐营养缺陷型菌株生长缓慢，不出现菌落或形成微小菌落。基本培养基中补充精氨酸后，营养缺陷型菌株快速生长。下列叙述正确的是（ ）
A．紫外线照射会破坏野生型菌株吸收利用精氨酸的能力
B．在培养基中添加精氨酸对野生型菌株的增殖没有影响
C．挑取图乙中菌落②可分离精氨酸营养缺陷型菌株
D．图乙中菌落①同时含有野生型和突变型两种细菌
6．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
7．青枯病是马铃薯的常见病害之一，少数马铃薯野生种对青枯病有抗性，但野生种难以与马铃薯栽培种直接杂交繁育。为获得抗青枯病的马铃薯栽培种，研究人员进行了植物体细胞杂交的实验研究，过程如下图所示。下列分析正确的是（ ）
A．常利用纤维素酶和果胶酶在低渗溶液中去除A、B的细胞壁
B．过程①是人工诱导原生质体融合，可采用物理法或化学法
C．细胞C含有A和B的遗传物质，因此培育的杂种植株一定有抗性
D．过程③历经了脱分化和再分化，其本质是基因的选择性表达
8．红豆杉属植物中提取分离出的紫杉醇是一种有效的抗癌药物，传统生产方法是从红豆杉树皮和树叶中提取。如图表示工厂化生产紫杉醇的过程。下列说法正确的是（ ）
A．接种前常用酒精、次氯酸钠对外植体进行灭菌
B．过程①需控制好培养基中植物激素的比例，过程③需使用固体培养基，有利于细胞增殖
C．该途径依据的原理是植物细胞具有全能性
D．可利用传代培养的动物癌细胞来检测紫杉醇抗癌活性
9．2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如图所示技术路线。下列相关叙述错误的是（ ）
A．“三亲婴儿”的遗传物质来自捐献者、母亲及提供精子的男子
B．图中的精子在参与受精前需要进行获能处理
C．该项技术的生物学原理是动物细胞核具有全能性
D．图中受精前的卵母细胞取自卵巢或输卵管
10．试管动物是通过体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，最终在受体子宫内发育而诞生的。相关叙述正确的是（ ）
A．采集来的精子和卵子可以直接用于体外受精
B．精子入卵后，卵细胞膜会发生反应阻止其它精子入卵
C．早期胚胎均需培养至桑椹胚或囊胚阶段后进行胚胎移植
D．胚胎移植产生的后代，其遗传特性与受体保持一致
11．下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列相关说法错误的是（ ）
A．单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的
B．活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程
C．在治疗中，应先注射非活化的磷酸阿霉素，再注射生物导弹
D．单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害
12．“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述错误的是（ ）
A．基因工程中利用标记基因筛选出的细胞不一定含重组质粒
B．在诱变育种中需通过筛选才能得到数量较少的有利变异
C．植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需进行筛选
D．单克隆抗体制备过程中，第一次筛选的目的是获得足够数量的能产生所需抗体的杂交瘤细胞
13．中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是（ ）
A．卵母细胞去核是通过显微操作去除纺锤体
B．兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质
C．重构胚需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程
D．在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现细胞的分化
14．下列有关动物细胞工程操作的叙述，正确的是（ ）
A．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂
B．单克隆抗体制备过程中，第一次筛选的目的是获得足够数量的能产生所需抗体的杂交瘤细胞
C．用动物体细胞核移植方法生产的克隆动物是对核供体进行了100%的复制
D．干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等
15．下图所示为哺乳动物细胞工程育种过程，下列叙述正确的是（ ）
A．①过程常用农杆菌转化法导入目的基因
B．a是处于减数第二次分裂前期的卵母细胞
C．③过程前需要对代孕母畜进行同期发情处理
D．②过程获得的所有细胞都可用于胚胎干细胞研究
16．下列有关基因工程的叙述正确的是（ ）
A．限制酶只存在于原核生物中，只能识别DNA分子的特定核苷酸序列
B．只有同种限制酶切割的末端才能连接，不同限制酶切割的末端不能连接
C．基因工程中，只能利用天然质粒，质粒上的标记基因用于重组DNA的筛选
D．质粒是独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外的环状双链DNA
17．下列关于基因工程与蛋白质工程的说法，正确的是（ ）
A．基因工程是在蛋白质工程的基础上发展起来的
B．基因工程需要对基因进行分子水平的操作，蛋白质工程与基因操作没有关系
C．蛋白质工程与基因工程是相互独立的两项生物工程技术
D．蛋白质工程能产生自然界中不曾存在的新型蛋白质分子
18．下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ）
A．用蒸馏水使家兔的红细胞胀破，可获取富含DNA的滤液
B．植物材料需先用研磨液或者洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破，释放DNA
C．DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2mol/L的NaCl溶液
D．鉴定DNA时，将丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴
19．如图为基因表达载体的模式图，下列叙述错误的是（ ）
A．构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶
B．终止子位于基因的下游，使翻译在所需要的地方停止下来
C．构建成功后可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代
D．抗生素抗性基因作为标记基因，可检测受体细胞中是否导入了目的基因
20．科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中，不合理的是（ ）
A．利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列
B．用编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建表达载体
C．用Ca2＋处理大肠杆菌后，将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中
D．用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌
21．下列有关生物工程的叙述，正确的有（ ）
①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体 ②蛋白质工程可通过直接改造蛋白质的结构从而改变其功能 ③克隆羊的培育涉及细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术 ④PCR技术需要利用限制性核酸内切酶打开DNA双链 ⑤利用核移植技术可以培育试管婴儿 ⑥牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑椹胚→原肠胚→幼体 ⑦植物体细胞杂交的第一步是制备原生质体 ⑧利用植物茎尖培养脱毒苗时，需要对离体的茎尖、培养基等进行灭菌
A．一项 B．两项 C．三项 D．四项
22．基因表达载体的构建是基因工程的核心，根据受体细胞选择适宜的载体。限制酶MunⅠ和限制酶EcoRI的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTGG—和—C↓AATTC—。如图表示四种质粒和含目的基因的DNA片段，其中，箭头所指部位为限制酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是（ ）
B． C． D．
23．下列关于果酒和果醋制作的叙述，错误的是（ ）
A．制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时要打开瓶盖或通气
B．温度对酵母菌酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌的发酵影响不大
C．在变酸的果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的
D．制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒并注意无菌操作
24．下列有关细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合
B．植物原生质体融合的方法有电融合法、PEG融合法、灭活的病毒诱导法
C．骨髓瘤细胞经免疫处理，可直接获得单克隆抗体
D．核移植克隆的动物，其线粒体DNA来自供卵母体
25．下图是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．A为目的基因，可采用PCR技术进行体外扩增
B．基因工程的核心步骤是过程①，C称为重组DNA
C．在基因工程中，用一定的方法处理D，使其处于感受态，提高转化率
D．可采用DNA分子杂交技术检测目的基因是否在工程菌中成功表达
26．下列有关哺乳动物体内受精表达错误的是（ ）
A．精子入卵后，精子的核体积直接变大发育成雄原核
B．精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂II，形成雌原核
C．透明带和卵细胞膜会发生相应反应来防止多精子入卵
D．动物排出的卵子有的可能是初级卵母细胞，有的可能是次级卵母细胞
27．研究表明，类风湿性关节炎与TNF-α（肿瘤坏死因子-α）密切相关，而抗TNF-α单克隆抗体能有效治疗类风湿性关节炎，该单克隆抗体制备的过程如图所示。下列有关说法错误的是（ ）
A．注射抗原A的主要目的是刺激小鼠产生记忆细胞
B．制备细胞悬液的目的是培养产生抗体的B淋巴细胞
C．电刺激和聚乙二醇都能够促使动物细胞融合
D．抗原与抗体的特异性反应是抗体筛选所依据的基本原理
28．早期胚胎细胞具有很强的分裂能力，并保持着细胞全能性，将一个胚胎分割成几份，可以提高胚胎的利用率。下列有关胚胎分割的叙述，错误的是（ ）
A．对于同一种生物来说，四分胚胎比二分胚胎成活率高
B．胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一
C．分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团等分割
D．应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行胚胎分割
29．转基因食品存在“是否安全”的争议，有人认为转基因食品是有害的，比如抗“草甘膦（除草剂）”转基因农作物的种植，使喷洒除草剂的人患癌症。请用已学知识判断，下列说法正确的是（ ）
A．用抗除草剂植物生产的食品会导致人患癌症
B．食用转基因大米一定会对人的健康造成危害
C．严格管理和控制好目的基因的表达部位，则转基因食品安全性可以得到保障
D．食用转基因食品，其中的基因会整合到人的基因组中
30．下列有关设计试管婴儿的说法错误的是( )。
A．不合适的胚胎的处理问题是设计试管婴儿所引发的主要问题之一
B．设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术
C．设计试管婴儿必须得到政府的审批而试管婴儿则不需要，这是因为前者技术复杂有一定的危险性，而后者技术上已经很成熟
D．若将设计试管婴儿技术用于设计婴儿性别也是该技术引发争议的原因之一
二、多选题（每题2分）
31．北京冬奥会食堂餐余垃圾在垃圾集中点处理后可达到无污染的标准。为筛选对抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，研究人员制备餐余垃圾浸出液，进行如图所示操作，下列叙述正确的是（ ）
A．餐余垃圾浸出液在接种前通常需要进行高压蒸汽灭菌处理
B．可用稀释涂布平板法将餐余垃圾浸出液接种在X培养基上
C．X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是不含琼脂的液体培养基
D．图中降解淀粉最高效的微生物是⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型
32．H-Y抗原存在于雄性个体的细胞表面，决定性腺向雄性方向发育。向牛的早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体，用来筛选胚胎进行移植，以利用生物乳腺反应器生产药物。下列叙述正确的是（ ）
A．制备单克隆抗体的杂交瘤细胞，既能产生抗体又能无限增殖
B．培养液中添加H-Y单克隆抗体，根据凝集反应筛选牛的雌性胚胎
C．可取囊胚的内细胞团细胞进行性别鉴定，以筛选出所需胚胎
D．在胚胎移植前，需要对受体牛注射激素进行同期发情处理
33．CRISPR/Cas9是一种生物学工具，能够通过“剪切和粘贴”脱氧核糖核酸（DNA）序列的机制来编辑基因组。这套系统源自细菌的防御机制，是一种对任何生物基因组均有效的基因编辑工具。CRISPR Cas9基因组编辑系统由向导RNA（也叫sgRNA）和Cas9蛋白组成，向导RNA识别并结合靶基因 DNA，Cas9蛋白切断双链DNA形成两个末端。这两个末端通过“断裂修复”重新连接时通常会有个别碱基对的插入或缺失，从而实现基因敲除，如图所示。CRISPR Cas9基因组编辑技术有时存在编辑出错而造成脱靶。下列叙述错误的是（ ）
A．Cas9蛋白相当于限制酶，能作用于脱氧核糖和碱基之间的化学键
B．对不同目标DNA进行编辑时，使用Cas9蛋白和不同的sgRNA进行基因编辑
C．CRISPR Cas9基因组编辑系统使细菌获得抵抗溶菌酶或抗生素的能力
D．其他DNA序列含有与sgRNA互补配对的序列，造成sgRNA错误结合而脱靶
34．下图是4种限制酶所识别的DNA分子序列和切割位点示意图（↓表示切割位点）。下列相关叙述错误的是（ ）
A．这4种限制酶都能识别并切割含有GTAC序列的DNA片段
B．限制酶1和3切割出的黏性末端上的碱基不能互补配对
C．限制酶3和4识别的序列都是由6个脱氧核苷酸对组成的
D．限制酶2和4切割出的黏性末端只能由T4DNA连接酶拼接
35．科学家培育克隆羊时，使用了3种细胞核的供体细胞，分别将这些细胞核移入去核卵母细胞的细胞质中，形成重组细胞，发育成重构胚，这些重构胚的发育情况如下，据此分析错误的是（ ）
细胞核供体细胞类型 妊娠数/受体母羊数
乳腺上皮细胞 1/13
胚胎成纤维细胞 4/10
早期胚胎细胞 14/27
A．细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行
B．重组细胞的发育与去核卵母细胞的细胞质无关
C．早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞时妊娠成功率最高
D．培养动物细胞的培养液中含维生素、动物激素等多种能源物质
36．驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（ ）
A．驱蚊草的培育属于细胞工程育种，优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍
B．驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法
C．驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，无细胞脱分化和再分化的过程
D．驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是基因突变
三、综合题（37题每空1分，38-41题每空2分）
37．荷斯坦奶牛是世界上产奶量最高、饲养数量最多的奶牛品种之一。我国科研人员利用体外受精和胚胎移植等技术成功地培育了大量荷斯坦奶牛，培养的过程如下图所示。请回答下列问题：
(1)哺乳动物的体外受精技术主要包括___________、精子的获取和受精等步骤，采集的精子在受精前需培养在人工配制的获能液中，然后与培养成熟的卵子受精，在实际胚胎工程操作中，常以观察到___________作为受精的标志。
(2）在胚胎移植前应取___________的细胞进行性别鉴定，选择雌性胚胎移入受体母牛的子宫内，但在移植前需对受体母牛进行___________处理。为了提高胚胎利用率，可将胚胎进行分割，但分割时要注意___________，原因是___________。
38．水稻的穗粒数和粒重影响水稻的产量，研究人员将编码不同酶的四个基因OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR分别与叶绿体转运肽基因连接，构建多基因表达载体，利用农杆菌转化法转化到水稻细胞中，在水稻叶绿体内构建了新的代谢途径，基因表达载体如下图所示。农杆菌的T-DNA 序列能随机插入到被侵染植物的核基因中，导致被插入的基因功能丧失。请回答下列问题：
(1)启动子是______识别并结合的位点，由图可知，四种基因进行转录时mRNA链延伸的方向______（填"相同"或"不同"）。
(2)应选用含______的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，原因是______。
(3)扩增过程中需要具有模板DNA、______（写出两种即可）等基本条件才能保证DNA复制顺利进行。
(4)研究者用T一DNA插入法构建水稻突变体库，并从中筛选穗粒数异常突变体。流程为分别用不同的限制酶处理突变体的所有DNA和野生型的所有DNA，处理后进行电泳。电泳后的DNA与DNA 分子探针（含放射性同位素标记的 T一DNA片段）进行杂交，得到如图所示放射性检测结果。（注：T—DNA上没有所示三种限制酶的酶切位点）。实验结果表明T-DNA成功插入到水稻染色体基因组中，原因是__________。通过酶切结果可知突变体中均出现一条杂交带，说明__________。
39．2003年，“非典”流行，这是一种由SARS冠状病毒引起的急性呼吸道传染病，世界卫生组织将其命名为严重急性呼吸综合征。科研人员找到一种抗体能有效治疗抵抗SARS病毒。下图为该单克隆抗体制备过程示意图。
(1)图中的抗原A是____________，图中“（ ）和抗体检测”，括号内应填___________。科研人员利用灭活的病毒作为促融剂，灭活指的是_____________________________。
(2)经过抗体检测后得到的杂交瘤细胞，体外培养杂交瘤细胞时，需要用到____________技术，在培养过程中气体环境___________。
(3)单克隆抗体主要的用途有：_________________、_________________（至少答出两点）。
40．下图为通过植物体细胞杂交培育“番茄-马铃薯”植株的过程，请回答：
（1）图中①②过程处理后可获得具有活力的_____________________。过程③一般可用_____________作为诱导剂来诱导细胞融合。
（2）过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是_______________，其培养时选用的材料通常是分生组织，原因是___________________。
（3）番茄有A、B两品种。科研人员在设计品种A组织培养实验时，参照品种B的最佳激素配比（见下表）进行预实验。
品种B组织培养阶段 细胞分裂素浓度（μmol/L） 生长素浓度（μmol/L）
Ⅰ诱导形成愈伤组织 m1 n1
Ⅱ诱导形成幼芽 m2 n2
Ⅲ诱导生根 m3 n3
在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是________________阶段。为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度，参照品种B的激素配比（m1>2．0），以0．5 μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，细胞分裂素最高浓度应设为________μmol/L。
41．金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌，具有高度耐盐化的特性，在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。某研究小组进行了测定某处土壤中金黄色葡萄球菌数量的实验。回答下列问题：
(1)实验小组选用含7．5%NaCl的牛肉膏蛋白胨培养基培养金黄色葡萄球菌，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是_________（用文字和箭头表示）。培养基中加入7．5%NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选，原因是_________。
(2)土壤是微生物天然的培养基，测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量时，一般采用_________法。为了保证获得菌落数在_________之间适于计数的平板，需要选用一定稀释范围的样品液进行培养。测定土壤中金黄色葡萄球菌、放线菌和真菌的数量时，稀释倍数较低的是_________。实验结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，其原因是_________。参考答案：
1．D【详解】A、果皮表面聚集少量的野生酵母，因此传统发酵技术酿酒的菌种为材料自带，A正确；B、酵母菌发酵所需的最适温度在18-25℃左右，B正确；C、酵母菌无氧呼吸产生酒精的同时会产生二氧化碳，导致发酵装置内压强过大，可能会爆炸，故要适时排气，C正确；D、传统发酵技术酿酒不需要高压蒸汽灭菌，D错误。故选D。
2．D【详解】A、分离单菌落还可以用平板划线法，使用用平板划线法可以在⑥上获得单菌落，A正确；B、测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法，B正确；C、图中②中的选择培养基中应加入苯酚作为碳源，以增大降解苯酚细菌的浓度，C正确；D、当两个或两个以上的活菌聚集在一起时，在培养皿中会形成一个菌落，故涂布平板法在③培养皿中长出的菌落数一般少于最初的活菌数，D错误。
3．A【详解】A、用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上，培养时平板需要倒置，A正确；B、倒平板时，用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（10～20mL）倒入培养皿，立即盖上培养皿的皿盖，而不能打开皿盖放到一边，防止皿盖被杂菌污染，B错误；C、接种环经火焰灭菌后需要冷却后才能挑取菌落，防止高温杀死菌种，C错误；D、高压灭菌加热结束时，需要等到压力降到零后才能打开排气阀，D错误。
4．C【详解】A、对被腌制的材料灭菌处理，会将乳酸菌全部杀死，导致泡菜制作失败，A错误；B、乳酸菌在发酵的过程中产生的是乳酸，而不是亚硝酸盐，亚硝酸盐是其他微生物代谢产生的，B错误；C、老盐水含有大量乳酸菌，故可缩短腌制时间并保持泡菜的原有风味，C正确；D、菹在发酵产的是乳酸，没有气体的产生，所以不需要定期打开坛盖排气，D错误。
5．C【详解】A、根据题干信息“将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落”说明紫外线照射并不会破坏野生型菌株吸收利用精氨酸的能力，A错误；B、图中①表示野生型菌株形成的菌落，将图乙与图甲对比可知，加入精氨酸后促进了野生型菌株的生长，B错误；
C、对比甲和乙可知，加入精氨酸后才出现的菌落②是精氨酸营养缺陷型菌株，所以可以选择菌落②分离获得精氨酸营养缺陷型菌株，C正确；D、图乙中菌落①只含有野生型细菌，D错误。
6．D【详解】检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的一组平板为代表进行计数。所以D不对。
7．B【详解】A、植物细胞去除细胞壁之后，如果处在低渗溶液中，会吸水涨破，所以去壁的过程不能放在低渗溶液中进行，A错误；B、诱导原生质体融合可采用物理法，如振荡、离心等方法，也可以采用化学法，如PEG诱导、灭活的病毒等方法。B正确；C、虽然细胞C含有A和B的遗传物质，但是并不会把A、B两种植株的优良性状都表达出来，而是随机表达，C错误；D、过程③表示从愈伤组织到胚状体，只是经过再分化过程，没有脱分化，D错误。
8．D【详解】A、接种前常用酒精、次氯酸钠对外植体进行消毒，A错误；B、图中①是脱分化过程，而决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，因此该过程需控制好培养基中植物激素的比例，过程③需使用液体培养基有利于细胞增殖，B错误；C、细胞全能性以细胞发育成个体为标志，而图中并没有形成完整植物体，C错误；D、紫杉醇具有抗癌作用，能阻止癌细胞的增殖，因此可利用传代培养的动物癌细胞来检测紫杉醇的抗癌活性，D正确。
9．D【详解】A、由题图分析可知，“三亲婴儿”的遗传物质来自捐献者、母亲及提供精子的男子，其中细胞质中的遗传物质来自捐献者，核遗传物质来自母亲核提供精子的男子，A正确；B、图中的精子参与受精前需经过获能处理才具有受精能力，B正确；C、细胞核移植技术的原理是动物细胞核具有全能性，C正确；D、从题图中可以看出，重组后的卵细胞需要体外培养至MⅡ期，说明卵母细胞不是来自输卵管，因为来自输卵管的卵母细胞已经进入了MⅡ期，D错误。
10．B【详解】A、采集来的精子必须获能之后才具备与卵子完成受精的能力，A错误；B、精子入卵后，卵细胞膜会发生卵细胞膜反应，阻止其它精子的进入，这是防止多精入卵受精的其中一个重要屏障，B正确；C、不同的动物的胚胎移植的时间不同，并不都一定要培养到桑椹胚或囊胚阶段后进行胚胎移植，C错误；D、胚胎移植产生的后代，其遗传特性不受到受体的影响，D错误。
11．C【详解】A、单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的，具有特异性强，灵敏度高等特点，A正确；B、根据题意可知，“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”，因此活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程，B正确；C、在治疗中，应将非活化磷酸阿霉素和生物导弹同时注射，单克隆抗体能与肿瘤细胞特异性结合，而碱性磷酸酶将非活化磷酸阿霉素转化成活化磷酸阿霉素，进而治疗癌症，C错误；D、单克隆抗体特异性强，阿霉素能定位杀死癌细胞，从而减轻阿霉素对正常细胞的伤害，D正确。
12．D【详解】A、标记基因位于质粒上，基因工程中利用标记基因筛选出的细胞不一定都含有重组质粒，也可能只含有普通质粒，A正确；B、诱变育种的原理是基因突变，而基因突变具有不定向性和多害少利性，因此在诱变育种中需要通过筛选才能得到数量较少的有利变异，B正确；
C、植物体细胞杂交过程中，诱导原生质体融合后，可获得多种融合细胞，因此需要对获得的细胞进行筛选，C正确；D、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选出的是杂交瘤细胞，第二次筛选出的是既能迅速大量增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。
13．A【详解】A、MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体，通过显微操作去核法去除卵母细胞核时一并吸出，也可采用紫外光短时间照射、化学物质处理等手段，A错误；B、兔子卵细胞质的作用是激发大熊猫细胞核的全能性，B正确；C、融合后的重组胚胎，需要用物理或化学的方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确；D、胚胎发育过程中早期胚胎具有全能性，还没分化，囊胚期开始出现细胞分化，D正确。
14．D【详解】A、动物细胞培养所用的培养基是液体培养基，不需要添加琼脂，A错误；B、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选是为了获得杂交瘤细胞，但杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，B错误；C、核移植获得的克隆动物细胞质遗传物质来自于去核卵母细胞，故克隆动物并不是对核供体100%的复制，C错误；D、干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，胚胎干细胞具有发育的全能性，D正确。
15．C【详解】A、①过程常用显微注射技术导入目的基因，A错误；B、a是处于减数第二次分裂中期的卵母细胞，B错误；C、③过程前需要对代孕母畜进行同期发情处理，C正确；D、②过程获得的内细胞团细胞可用于胚胎干细胞研究，D错误。
16．D【详解】A、限制酶大多来自于原核生物，只能识别DNA分子的特定核苷酸序列，A错误；
B、不同限制酶切割的黏性末端相同也能连接，B错误；C、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，C错误；D、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA和真核细胞细胞核之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，D正确。
17．D【详解】A、蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出的第二代基因工程，A错误；B、基因工程和蛋白质工程都需对基因进行分子水平的操作，B错误；C、蛋白质工程改造基因后还要通过基因工程实现，因此蛋白质工程被称为第二代基因工程，可见蛋白质工程和基因工程不是两项独立的生物工程技术，C错误；D、蛋白质工程通过基因修饰或基因合成来实现，因而能产生自然界中不曾存在的新型蛋白质分子，D正确。
18．C【详解】A、兔属于哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器，不能用于DNA的粗提取，A错误；B、植物材料需先用洗涤剂溶解细胞膜，B错误；C、DNA不溶于95%的冷酒精和0.14mol/L的NaCl溶液，而溶于2mol/L的NaCl溶液，C正确；D、将丝状物溶于2mol/L的NaCL溶液后加入二苯胺试剂，沸水浴冷却后呈蓝色，D错误。
19．B【详解A、首先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子，A正确；B、终止子位于基因的下游，作用是使转录在相应的地方停止，不是使翻译在所需要的地方停止下来，B错误；C、基因表达载体的构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，C正确；D、抗生素抗性基因作为标记基因，标记基因便于目的基因的鉴定和筛选，可检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。
20．C【详解】A、小鼠DNA分子含有β-珠蛋白基因，可以PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列，A正确。B、目的基因表达载体必须含有目的基因、启动子、终止子、标记基因等，B正确。CD、将表达载体导入没有四环素抗性的大肠杆菌中，才能用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌，C错，D正确。
21．C【详解】①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，①正确；②蛋白质工程是通过改造基因，从而改变蛋白质的结构，改变其功能，②错误；③克隆羊的培育涉及细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，③正确；④PCR技术是利用高温解旋打开DNA双链，④错误；⑤试管婴儿利用了体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，没有用的核移植技术，⑤错误；⑥牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体，⑥错误；⑦植物体细胞杂交的第一步是去除细胞壁，制备原生质体，⑦正确；⑧利用植物茎尖培养脱毒苗时，需要对离体的茎尖、培养基等进行消毒，⑧错误。三项正确，故选C。
22．A【详解】A、质粒上有限制酶的切割位点，有标记基因并没有被破坏，A正确；B、质粒没有标记基因，B错误；C、质粒上有限制酶的切割位点，有标记基因，但是标记基因被破坏，C错误；D、质粒上有限制酶的切割位点，有标记基因，但是标记基因被破坏，D错误。
23．B【详解】A、果酒制作需要缺氧的环境，因此制作果酒时瓶口需密闭；参与果醋制作的醋酸菌是嗜氧菌，因此制作果醋时要打开瓶盖或通气，A正确；B、温度对酵母菌和醋酸菌的发酵都有影响，在制作果酒时温度要控制在18～30℃，而在制作果醋时则要将温度控制在30～35℃，B错误；C、在变酸的果酒表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，C正确；D、制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒，并注意无菌操作，D正确。
24．D【详解】A、PEG是促细胞融合剂，但不能直接诱导植物细胞融合，植物细胞需要先去除细胞壁再诱导融合，A错误；B、植物原生质体融合的方法有电融合法、PEG融合法，灭活的病毒诱导法用于动物细胞的融合，B错误；C、骨髓瘤细胞不能产生抗体，骨髓瘤细胞与浆细胞融合形成的杂交瘤细胞经过筛选后才可获得单克隆抗体，C错误；D、线粒体位于细胞质中，故核移植克隆的动物，其线粒体DNA来自供卵母体，D正确。
25．D【详解】A、A为目的基因，目的基因可采用PCR技术进行体外扩增，A正确；
B、基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，即过程①，C通常称为基因表达载体（或重组DNA），B正确；C、受体细胞为微生物时，常用CaCl2溶液（或Ca2+）处理D，使D处于感受态，以提高转化率，C正确；D、检测目的基因是否已整合到受体细胞染色体DNA上，可采用DNA分子杂交技术，检测目的基因是否在工程菌中成功表达采用抗原-抗体杂交技术，D错误。
26．A【详解】A、精子入卵后，尾部脱离，原有核膜破裂，并且细胞核体积变大形成雄原核，A错误；B、精子入卵后，被激活的卵子卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体，形成雌原核，B正确;C、透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精子入卵的两道屏障，C正确;D、动物排出的卵子还不成熟，可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力，D正确。
27．A【详解】A、注射抗原A的主要目的是刺激小鼠产生免疫反应，从而得到能产生抗体的B淋巴细胞，A错误；B、制备细胞悬液的目的是培养能产生抗体的B淋巴细胞，该过程采用液体培养基，可进行扩大培养，B正确；C、电刺激是物理方法、聚乙二醇是化学试剂，两者都能够促使动物细胞融合，C正确；D、图中克隆化培养时需要多次抗体选，筛选所依据的基本原理是抗原与抗体的特异性反应，D正确。
28．A【详解】A、胚胎分割的分数越多，其成活率越低，因此对于同一种生物来说，四分胚胎比二分胚胎成活率低，A错误；B、胚胎分割获得的是同卵双胎或多胎，因此可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一，B正确；C、内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题，C正确；D、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，D正确。
29．C【详解】A、用抗除草剂植物生产的食品不一定会导致人患癌症，癌变是原癌基因和抑癌基因发生突变导致的，A错误；B、食用转基因大米不一定会对人的健康造成危害，转基因大米中含有益成分，是否有危害不能一概而论，B错误；C、严格管理和控制好目的基因的表达部位，则转基因食品安全性可以得到保障，C正确；D、食用转基因食品，其中的基因会被消化分解，不会整合到人的基因组中，D错误。
30．C【详解】A、不合适的胚胎的处理问题是设计试管婴儿所引发的主要问题之一，A正确；
B、设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术，B正确；C、设计试管婴儿技术必须获得政府部门的相关批准证书，以防该技术的滥用，试管婴儿技术为许多不孕夫妇解决了不育问题，同样也需要得到政府的审批，C错误；D、将设计试管婴儿技术滥用于设计婴儿性别也是该技术引发争议的原因之一，D正确。
31．BCD【详解】A、餐余垃圾浸出液中含有目的菌，因此不能对其进行高压蒸汽灭菌处理，A错误；B、根据培养后培养基上形成的菌落分布可知，将含目的菌的餐余垃圾浸出液接种在X培养基上采用的是稀释涂布平板法，B正确；C、实验目的是筛选对抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，根据图示中在X培养基上滴加碘液后形成了透明圈，说明X培养基上含有淀粉，菌体分解淀粉的能力强，在其周围形成的透明圈就大，同时为了筛选到对抗生素有抗性的菌体，因此X培养基还应该含有抗生素，Y培养基是将筛选到的目的菌扩大培养，为不含琼脂的液体培养基，C正确；
D、碘液遇碘变蓝，淀粉被分解，蓝色消失，图中⑤的透明圈最大，说明菌体降解淀粉的能力最强，不同菌体形成的菌落特征不同，因此可根据菌落特征初步判断微生物类型，D正确。
32．ABD【详解】A、制备单克隆抗体所用的杂交瘤细胞，兼具了浆细胞和骨髓瘤细胞的特点，既能产生抗体又能无限增殖，A正确；B、培养液中添加H-Y单克隆抗体，可以和H-Y抗原特异性结合，从而看根据凝集反应筛选牛的雌性胚胎，B正确；C、为避免对胚胎的发育造成影响，做性别鉴别时应选择囊胚期的滋养层细胞，C错误；D、在胚胎移植前，需要对受体牛注射激素进行同期发情处理，这样可以保证受体母牛为供体胚胎提供相似的发育环境，有利于胚胎的成活，D正确。
33．AC【详解】A、Cas9蛋白识别并切断双链DNA形成两个末端，相当于限制酶，能作用于磷酸二酯键，A错误；B、Cas9蛋白在向导RNA的引导下切割靶基因，sgRNA具有识别作用，在对不同目标DNA进行编辑时，应使用Cas9蛋白和“不同”的sgRNA结合进而实现对不同基因的编辑，B正确；C、噬菌体是通过将自身的DNA注入细菌内，利用细菌内的物质进行自我复制而完成侵染的，而CRISPR Cas9系统可以定向切割外源DNA，故该系统使细菌获得抵抗噬菌体的能力，但不能获得抵抗抗生素和溶菌酶的能力，C错误；D、CRISRP Cas9基因编辑技术有时存在编辑出错而造成脱靶，其最可能的原因是其他DNA序列也含有与向导RNA（sgRNA）互补配对的序列，造成向导RNA（sgRNA）错误结合而脱靶，D正确。
34．ABD详解】A、据图分析可知，限制酶4不能识别并切割含有GTAC序列的DNA片段，A错误；B、据图可知，限制酶1和3切割出的黏性末端相同，均为-GATC，黏性末端上的碱基能互补配对，B错误；C、据图可知，限制酶3和4识别的序列都是由6个脱氧核苷酸对组成的，C正确；D、限制酶2和4切割出的末端分别是黏性末端和平末端，不能由T4DNA连接酶拼接，D错误。
35．ABD【详解】A、细胞核移植主要在同种动物细胞的普通细胞与去核卵细胞之间进行，不是同种组织，A错误；B、去核卵细胞的细胞质才能让重组细胞的发育表达出全能性，B错误；C、早期胚胎细胞分化程度低，作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高，C正确；D、培养动物细胞的培养液中需含维生素、生长因子等物质，但它们不是能源物质，D错误。
36．CD【详解】A、驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的，采用了植物体细胞杂交技术，属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确；
B、要获得天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体，需要采用酶解法（纤维素酶、果胶酶），诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法（PEG等试剂）或物理法（电刺激等），B正确；C、驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，但需要采用植物组织培养技术，因此有细胞脱分化和再分化的过程，C错误；D、驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是染色体数目变异，D错误。
37．(1) 卵母细胞的采集 两个极体或者雌、雄原核
(2) 囊胚 内细胞团 胎儿的各种组织
(3) 滋养层 同期发情 将内细胞团均等分割 避免影响胚胎的恢复和进一步发育
38．(1) RNA聚合酶 不同
(2) 潮霉素 潮霉素抗性基因在T-DNA中
(3) 四种脱氧核糖核苷酸、引物、Taq酶
(4) 杂交结果中突变体均出现杂交带 突变体是T-DNA单个位点插入的
39．(1) SARS病毒外壳蛋白质 克隆化培养 是指用物理或化学手段杀死病毒、细菌等，但是不损害它们体内有用抗原
(2) 动物细胞培养 95%空气和5%的CO2
(3) 诊断试剂 运载药物
40． 原生质体 聚乙二醇（PEG） 植物组织培养 分生组织细胞全能性高（或分化程度低），容易培养形成愈伤组织 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ m1+1．0
41．(1) 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板 7．5%NaC1不影响金黄色葡萄球菌生长的同时会抑制其他杂菌生长
(2) 稀释涂布平板 30～300 真菌 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
