2022-2023学年天津三中高二（下）期中生物试卷（含解析）

2022-2023学年天津三中高二（下）期中生物试卷
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
第I卷（选择题）
一、单选题（本大题共14小题，共56.0分）
1. 紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物，具有高抗癌活性，如图是利用植物细胞工程技术获得紫杉醇的工厂化途径。下列相关叙述错误的是（　　）
A. ③过程细胞进行的是有丝分裂
B. 紫杉醇不是红豆杉生长和生存所必需的代谢物
C. ①、③过程所用的培养基物理性质不同
D. 可将高产细胞群直接置于低渗溶液中，使其涨破后提取紫杉醇
2. 如图是对基因型为Aabb的玉米所作的处理，据图分析下列叙述错误的是（　　）
A. 过程a所采取的技术手段是花药离体培养
B. 过程b用秋水仙素处理后可以得到2种基因型的玉米
C. c和d分别是再分化和脱分化过程，需要一定的植物激素诱导
D. 图中过程a或过程c、d能够说明植物细胞具有全能性
3. 中国科学院团队对雌性猕猴进行克隆，成功获得“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理研发诊治药物带来光明前景。如图为“中中”和“华华”培育的流程，相关叙述不正确的是（　　）
A. 这说明已分化的动物体细胞的细胞核是具有全能性的
B. 该过程属于无性生殖，图中的卵子实际上是次级卵母细胞
C. 图中的③过程是指动物胚胎的体外培养过程
D. 中中、华华的性别由纤维细胞的遗传物质决定
4. 科研人员在制备杂交瘤细胞的基础上，获得了能够产生双特异性抗体（BsAb）的双杂交瘤细胞。BsAb可以同时结合两种抗原，拓展了抗EGFR（表皮生长因子受体）单克隆抗体的临床应用范围，其原理如图所示。下列说法不正确的是（　　）
A. 制备和筛选双杂交瘤细胞所依据的原理是抗原抗体反应的特异性
B. BsAb能与T细胞表面抗原CD3结合，激活T细胞发挥细胞免疫
C. BsAb能与肿瘤细胞表面的EGFR结合，诱导肿瘤细胞凋亡
D. 抗原部分结构改变后可能会出现原双特异性抗体中一种单抗失效
5. 新冠病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体从而引起肺炎。单克隆抗体可阻断病毒的黏附或入侵，抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。如图为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。下列相关叙述正确的是（　　）
A. 注射S蛋白对小鼠进行免疫，目的是要从该小鼠的脾脏中得到相应的抗体
B. 在产生免疫反应的小鼠脾脏中提取B淋巴细胞并诱导其与骨髓瘤细胞融合
C. 用HAT培养基可筛选出能产生抗S蛋白抗体的杂交瘤细胞
D. 可制备单克隆抗体—药物偶联物（ADC）来治疗癌症，其原因是单克隆抗体能杀伤癌细胞
6. 我国科学家成功将小鼠的颗粒细胞（卵泡中卵母细胞周围的细胞）转化为GV卵母细胞，进而恢复减数分裂并顺利培育出健康后代。下列相关叙述错误的是（　　）
A. 过程①类似于再分化，其实质是基因选择性表达
B. 过程③，受精后的X细胞会再释放出一个极体
C. 过程②表示减数分裂Ⅰ，GV卵母细胞不具备受精能力
D. 上述过程③中涉及的技术有体外受精、早期胚胎培养
7. 2018年3月，最后一头雄性北方白犀牛去世，至此世界上仅剩两头雌性个体。如今，科研团队拟采用提前保存的北方白犀牛冷冻精子借助核移植、体外受精等技术，以南方白犀牛作为代孕母畜人工繁育北方白犀牛。下列叙述合理的是（　　）
A. 须注射免疫抑制剂以减弱代孕母畜对植入胚胎的免疫排斥反应
B. 冷冻保存的精子需培养成熟后，再经获能处理才可用于体外受精
C. 若取雌性白犀牛的体细胞进行核移植，获得的克隆后代可繁衍为一个种群
D. 理论上可取4细胞期胚胎用酶处理成单个细胞分别培养，以提高胚胎的利用率
8. 我国研究人员创造出一种新型干细胞——异源杂合二倍体胚胎干细胞AdESCs,具体研究过程如图所示，下列叙述正确的是（　　）
A. 单倍体囊胚2最可能是由精子发育而来的，单倍体ES应取自囊胚的内细胞团
B. 孤雌单倍体ES细胞经培养分化可得到正常的雌性小鼠
C. 异源杂合二倍体干细胞能够分化形成各种类型的大鼠或小鼠体细胞
D. AdESCs的染色体组数与大鼠——小鼠体细胞融合的杂种细胞相同
9. 根据图片判断，下列有关工具酶功能的叙述，错误的是（　　）
A. DNA连接酶可以连接b处 B. DNA聚合酶可以连接a处
C. 解旋酶可以使b处解开 D. 限制酶可以切断a处
10. 某线性DNA分子含有3000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表所示。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是（　　）
a酶切割产物（bp） b酶再次切割产物（bp）
1600；1100；300 800；300
A. 在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个
B. a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接
C. a酶与b酶切断的化学键不相同
D. 用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，序列会明显增多
11. 如图为四种不同限制性核酸内切酶识别的序列及切割位置图示，下列叙述错误的是（　　）
A. 若DNA上的碱基随机排列，理论上每4096个碱基对会有一个BamHI限制酶识别位点
B. 作为优质的基因工程的通用载体，质粒上应具有同种限制酶的多个酶切位点
C. BamHⅠ限制酶切割得到的目的基因可以与BglⅡ限制酶切割后的质粒相连
D. 若DNA上的碱基随机排列，NotI限制酶切割位点出现频率低于其他三种限制酶
12. 某一质粒载体如图甲所示，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tett表示四环素抗性基因。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后，与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化后得到多种大肠杆菌，并利用培养基乙和丙筛选出导入重组质粒的大肠杆菌。下列叙述错误的是（　　）
A. 图甲所示的质粒中还应含有复制原点和终止子等结构
B. 将经转化处理后的大肠杆菌菌液接种至培养基乙使用的是稀释涂布平板法
C. 配制培养基乙时应加入青霉素
D. 培养基丙中生长的菌落即为导入重组质粒的大肠杆菌
13. 当M基因的启动子序列发生碱基对的增添、缺失或替换时，下列有关叙述正确的是（　　）
A. mRNA的碱基序列发生变化 B. M蛋白的数量可能减少或增加
C. M蛋白的空间结构发生变化 D. 细胞中基因的种类不变
14. 为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作（如图所示）。含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列叙述错误的是（　　）
A. T-DNA可将基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上
B. 利用物质K和抗生素进行筛选1，可获得农杆菌的蓝色菌落
C. 利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株
D. 愈伤组织重新分化为芽、根等器官的过程中，需要添加植物激素
第II卷（非选择题）
二、探究题（本大题共3小题，共44.0分）
15. 电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物，此类靶向药物可称为“生物导弹”。利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段，如图为单克隆抗体制备流程图：
（1）若用该图中的单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为其 。
（2）图中诱导细胞融合时需要采用 诱导法、聚乙二醇融合法或电融合法等方法诱导，杂交瘤细胞的特点是 。
（3）用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞后进行 ，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）近年来，科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响，某科研小组进行了相关实验，结果如表所示：
注：表中比值表示抗体效价，“1：#”中“#”值越高表明越有利于抗体的产生。
丁酸钠的浓度（mmol/L） 时间（h）
48 96 144
0 1：320 1：640 1：1200
0.25 1：320 1：1280 1：2500
0.5 1：160 1：2500 1：2500
0.75 1：320 1：320 1：640
该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中，CO2的主要作用是 ，该实验的自变量为 。
16. 杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示，请据图回答问题：
（1）获取得到的卵（母）细胞，需要体外培养至 ______ 时期。采集的精子需要经过 ______ ，才具备受精能力。判断卵细胞是否受精的重要标志是 ______ 。
（2）在胚胎移植前要对提供胚胎的杜泊羊进行 ______ 处理，接受胚胎的当地普通绵羊进行 ______ 处理。代孕母羊对置入子宫的早期胚胎基本上不发生 ______ ，这就为早期胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。
（3）卵裂期进行的分裂方式为 ______ 。采用胚胎分割技术能得到“同卵多胞胎”，对囊胚期的胚胎进行分割时，要特别注意将 ______ 均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。
（4）在繁育过程中，出现了一只体型特别大的良种奶牛，若要快速地大量繁殖出同样大体型的个体，可采用的技术是 ______ 。
17. 如图为“乙肝基因工程疫苗”生产过程图解，质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中lacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal,产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。请回答下列问题：
回答下列问题。
（1）过程①选用限制酶的最佳方案是 。
A.只有BamHⅠ
B.BamHⅠ和EcoRⅠ
C.EcoRⅤ和BamHⅠ
D.EcoRⅤ和EcoRⅠ
（2）构建基因表达载体时，一般将目的基因插在启动子和终止子之间。启动子的作用是 。
（3）过程②需要先将大肠杆菌用 处理，目的是 。
（4）为了筛选含目的基因表达载体的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的通用培养基中额外加入 ，培养一段时间后挑选出 （填“蓝色”或“白色”）的菌落进一步培养，从而获得大量目的菌。
（5）目的基因导入受体细胞后，常用 技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳。
答案和解析
1.【答案】D
【解析】解：A、③过程是由单个细胞获得细胞群的过程，该过程中细胞进行的是有丝分裂，A正确；
B、紫杉醇属于次生代谢物，次生代谢物不是生物生长所必需的，B正确；
C、①过程获得愈伤组织所用的是固体培养基，③获得高产细胞群所用培养基为液体培养基，C正确；
D、植物细胞有细胞壁，具有支持和保护细胞形态的作用，放到低渗溶液中会膨胀但不会涨破，可通过研磨使其破碎再提取紫杉醇，D错误。
故选：D。
1、植物组织培养的流程是：离体的植物器官、组织或细胞经脱分化形成愈伤组织，经再分化形成芽、根或胚状体，进而形成完整植株。植物组织培养技术在微型繁殖、制造人工种子、作物脱毒等方面具有广泛的应用。微型繁殖属于无性生殖的范畴，能够保持亲本的优良特性，实现种苗的快速大量繁殖。人工种子是以通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，其中的如果胚乳可为“种子”的萌发提所需的供营养物质。以无病毒或病毒极少的茎尖为材料进行组织培养可获得高产优质的无病毒植株。
2、初生代谢物是维持细胞生命活动所必需基本代谢物。如糖类、脂质、蛋白质及核酸等。次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物。
本题考查植物组织培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
2.【答案】C
【解析】解：A、a过程由花粉粒变为单倍体植株，要经过花药离体培养，A正确；
B、基因型为Aabb的玉米能产生2种基因型的花粉：Ab和ab,经花药离体培养后可得到2种单倍体幼苗，幼苗再经秋水仙素处理后得到AAbb和aabb,2种基因型的可育玉米，B正确；
C、c是叶肉细胞培养成为愈伤组织的过程，是脱分化过程，d是愈伤组织形成胚状体的过程，表示再分化，两者均需要一定的植物激素诱导，C错误；
D、细胞具有全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成各种其他细胞的潜能。过程a或过程c、d是植物细胞培育成了植物个体，故能够说明植物细胞具有全能性，D正确。
故选：C。
1、花药离体培养是指将发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花药内花粉粒的发育程序，形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化成植株。
2、细胞具有全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成各种其他细胞的潜能。
本题考查植物组织培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
3.【答案】C
【解析】解：A、该过程没有经过精卵的结合，属于无性繁殖过程，重组细胞能发育成完整个体说明动物体细胞的细胞核具有全能性，A正确；
B、该过程没有经过精卵的结合，属于无性繁殖过程，体外培养到减数第二次分裂中期的卵子才能参与受精，图中的卵子实际上是处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞，B正确；
C、图中的③过程是指动物胚胎的移植到受体母猴的子宫内的过程，即胚胎移植过程，C错误；
D、中中、华华是由重组细胞发育而来，其细胞核内的遗传物质来自纤维细胞，因此性别由纤维细胞的遗传物质决定，D正确。
故选：C。
动物细胞核移植技术是将动物的细胞核移入一个去核卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。分析图示可知，①为将纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②为对重组细胞进行体外培养，发育成新胚胎，再进行③胚胎移植过程，最终获得克隆猴。
本题考查了细胞核移植技术、动物胚胎移植，要求学生识记动物胚胎移植的过程，掌握细胞核移植技术的过程，明确克隆动物遗传物质的来源，并结合所学知识准确判断各项。
4.【答案】A
【解析】解：A、制备双杂交瘤细胞所依据的基本原理有动物细胞增殖和细胞膜的流动性，筛选过程利用了抗原抗体反应的特异性原理及培养基的选择，A错误；
B、据图可知，BsAb能与T细胞表面抗原CD3结合，同时能与肿瘤细胞的EGFR结合，该过程会激活T细胞，释放颗粒酶穿孔素，使肿瘤细胞凋亡，发挥了细胞免疫作用，B正确；
C、据图可知，BsAb能与肿瘤细胞表面的表皮生长因子受体EGFR结合，在T细胞释放的颗粒酶穿孔素作用下，诱导癌细胞凋亡，C正确；
D、抗原和抗体可特异性结合，抗原的部分结构改变后，可能会出现原双特异性抗体中一种单抗失效而另一种单抗仍有效应的情况，D正确。
故选：A。
单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；将杂交瘤细胞用培养基培养或注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
本题结合图解，考查单克隆抗体及其应用，要求考生识记单克隆抗体的制备过程，掌握单克隆抗体的应用，能联系实际问题准确答题，属于考纲理解和应用层次的考查。
5.【答案】B
【解析】
【分析】
本题考查单克隆抗体的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
【解答】
A.研制抗S蛋白单克隆抗体，需注射刺突蛋白对小鼠进行免疫，其目的是要从该小鼠的脾脏中得到具有免疫能力的B淋巴细胞，A错误；
B.向小鼠体内注射特定的抗原，并在在产生免疫反应的小鼠脾脏中提取B淋巴细胞并诱导其与骨髓瘤细胞融合，B正确；
C.HAT培养基能筛选出杂交瘤细胞，去掉同种融合的细胞和未融合的细胞，再通过抗原—抗体杂交技术，才能筛选出能产生抗S蛋白抗体的杂交瘤细胞，C错误；
D.单克隆抗体可用来制备抗体—药物偶联物（ADC）来治疗癌症，是因为单克隆抗体能将药物定向带到癌细胞所在的位置，D错误。
故选B。
6.【答案】A
【解析】解：A、过程①类似于脱分化（将分化的细胞诱导为分化程度较低的干细胞），使细胞重新获得分裂分化的能力，A错误；
B、过程③，受精后的X细胞会再释放出一个极体，形成雌原核，B正确；
C、过程②表示减数分裂Ⅰ，GV卵母细胞是初级卵母细胞，不具备受精能力，C正确；
D、上述过程中③是体外受精，受精后的受精卵需经早期胚胎培养才能移植到母鼠体内发育产生幼鼠，D正确。
故选：A。
根据图解分析，小鼠的颗粒细胞（卵泡中卵母细胞周围的细胞）经过化学诱导，可转化为多能干细胞，重新获得分裂分化的能力，从而形成GV卵母细胞，并受精培养为健康幼鼠。
本题考查干细胞培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
7.【答案】B
【解析】解：A、代孕母羊对植入胚胎基本上不会产生免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，A错误；
B、冷冻保存的精子需培养成熟后，在人工配制的获能液中使其获能处理才可用于体外受精，B正确；
C、用雌性白犀牛体细胞进行核移植克隆出多头子代，获得的克隆后代均为雌性，不能繁衍为一个种群，C错误；
D、理论上可取4细胞期胚胎进行胚胎分割，以提高胚胎的利用率，D错误。
故选：B。
1、动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。
2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或者8等份等，经移植获得同卵双胎或者多胎的技术。
3、胚胎移植的生理基础：
（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；
（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；
（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。
本题考查细胞核移植技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术等，要求考生识记细胞核移植技术的过程及应用；识记胚胎移植的生理学基础；识记胚胎分割的概念及注意事项，能结合所学的知识准确答题。
8.【答案】A
【解析】解：A、由图可知，单倍体囊胚2能发育成孤雄单倍体胚胎干细胞，因此单倍体囊胚2最可能是由大鼠的精子发育而来，单倍体ES应取自囊胚的内细胞团，A正确；
B、孤雌单倍体ES细胞只含有小鼠卵细胞内的遗传物质，染色体数为正常鼠体细胞的一半，因此经培养分化不能得到正常的雌性小鼠，B错误；
C、由图示可知，异源杂合二倍体中的干细胞都是单倍体干细胞，分别由一个精子或一个卵细胞分裂形成，因此孤雌单倍体ES与孤雄单倍体ES细胞融合形成的异源二倍体ES细胞内遗传物质相同，因此不能分化形成各种类型的大鼠或小鼠体细胞，C错误；
D、AdESCs是由小鼠的孤雌单倍体胚胎干细胞和大鼠的孤雄单倍体胚胎干细胞融合形成的，细胞内染色体数目是大鼠——小鼠体细胞融合的杂种细胞的一半，因此染色体组数也是大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞的一半，D错误。
故选：A。
分析题图：小鼠的卵细胞体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体胚胎干细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体胚胎干细胞，两种胚胎融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞。
本题主要考查的是干细胞的培养和应用的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
9.【答案】A
【解析】解：A、DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间磷酸二酯键，而b是氢键，A错误；
B、DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸连接到DNA片段上，形成磷酸二酯键（a处），B正确；
C、解旋酶能解开DNA分子的双螺旋结构，同时能使氢键（b）断裂，C正确；
D、限制性内切酶和DNA连接酶都作用于磷酸二酯键（a处），其中限制性内切酶可以切断a处，D正确。
故选：A。
1、DNA聚合酶：在DNA复制中起作用，是以一条单链DNA为模板，将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链，形成链与母链构成一个DNA分子。
2、解旋酶：作用于氢键，是一类解开氢键的酶，打开DNA双链。
3、DNA连接酶：其功能是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，连接两个DNA片段。
4、限制性内切核酸酶（简称限制酶）：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子，是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶（“分子手术刀”）。
本题结合图解，考查酶的相关知识，要求考生识记生物工程中涉及的酶及其作用，能结合所学的知识准确答题。
10.【答案】D
【解析】解：A、由以上分析可知，a酶的识别序列有2个，b酶的识别序列有2个，A错误；
B、a酶与b酶切出的黏性末端相同，用DNA连接酶可以将它们连接起来，B错误；
C、限制酶切割的化学键都是磷酸二酯键，C错误；
D、a酶和b酶切割后形成的黏性末端相同，在DNA连接酶的作用下可连接形成，所以用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，所得DNA分子中序列会明显增多，D正确。
故选：D。
分析题图：a酶和b酶识别的脱氧核苷酸序列不同，但切割后产生的黏性末端相同。
分析表格：a酶可以把原有DNA切成3段，说明有该DNA分子上有2个切口，即a酶的识别序列有2个；b酶把大小是1600的DNA切成大小分别为800和800两个片段，b酶把大小是1100的DNA切成大小分别为800和300两个片段，且a酶和b酶的识别位点不同，说明b酶的识别序列有2个。
本题结合图表，考查基因工程的原理及技术，重点考查限制酶的相关知识，要求考生识记限制酶的特点及作用，能比较图中a酶和b酶的识别序列，明确两者切割后产生的黏性末端相同；能分析表中数据，明确a酶有3个识别位点，b酶有2个识别位点，再结合所学的知识准确判断各选项。
11.【答案】B
【解析】A、若DNA上的碱基随机排列，出现GGATCC碱基排列序列的概率为（）6=，即理论上每4096个碱基对会有一个BamHⅠ限制酶识别位点，A正确；
B、作为运载体的质粒，应有多个限制性酶的切割位点，以便插入目的基因，B错误；
C、BamHⅠ限制性核酸内切酶切割后的末端与BglⅡ切割的末端是相同的，故用BamHⅠ限制性核酸内切酶切割后的DNA能够连接到用BglⅡ切割的载体DNA中，C正确；
D、EcoRⅠ、BamHⅠ、BglⅡ都是由六个碱基对构成，而NotⅠ由8个碱基对构成，若DNA上的碱基随机排列，NotⅠ限制性核酸内切酶切割位点出现频率低于其他三种限制性核酸内切酶，D正确。
故选：B。
作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。
本题考查基因工程的中的限制酶，要求考生识记限制酶的作用原理，掌握在基因工程中的用法，能结合图中所给信息，综合所学的知识准确判断各选项。
12.【答案】D
【解析】解：A、质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有具有标记基因、具有一个或多个限制酶切点、能在受体细胞中复制（复制原点），若是同时作为表达载体，还需要具有启动子和终止子等结构，A正确；
B、稀释涂布平板法可以用于微生物的分离计数，题中培养基乙后需要影印接种，可以使用稀释涂布平板法接种转化处理后的大肠杆菌的菌液，B正确；
C、配制培养基乙时应加入青霉素，使转化环状目的基因的大肠杆菌筛选掉，C正确；
D、培养基乙中生长的菌落为转化质粒载体或者含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌；培养基丙中生长的菌落为导入质粒载体的大肠杆菌，故不能在培养基丙中生长的菌落即为导入重组质粒的大肠杆菌，D错误。
故选：D。
1、根据题意四环素抗性基因中有BamHI酶切位点，将此质粒载体用BamHI酶切后，四环素抗性基因被破坏。
2、用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是：含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。大肠杆菌中含有质粒载体的，有两种抗性；含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌，有氨苄青霉素抗性，但没有四环素抗性；含有环状目的基因的大肠杆菌，没有抗性。
本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及操作步骤，掌握各操作工具的作用及各操作步骤中需要注意的细节，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。
13.【答案】B
【解析】解：A、启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录。由于启动子部位不进行转录，故不影响RNA的碱基序列，A错误；
B、当M基因的启动子序列发生碱基对的增添、缺失或替换时，可能会影响基因的表达次数以及是否表达，即影响M蛋白的数量，B正确；
C、启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录。由于启动子部位不进行转录，故不影响蛋白质的空间结构，C错误；
D、启动子属于基因的结构，故该部位发生碱基对的增添、缺失或替换属于基因突变，即产生了新基因，D错误。
故选：B。
启动子是位于基因首端的特殊的碱基序列，是RNA聚合酶识别的部位，其功能是驱动基因的转录。
本题考查基因突变、遗传信息的转录和翻译的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
14.【答案】B
【解析】解：A、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因（基因G）插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因（基因G）整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，A正确；
B、农杆菌属于原核生物，含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，故不会出现农杆菌的蓝色菌落，B错误；
C、根据题意可知，报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色，而愈伤组织表面残留的农杆菌会导致未转化的愈伤组织能在含除草剂的培养基中生长，因此利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株，C正确；
D、愈伤组织重新分化为芽、根等器官的过程中，需要添加植物激素，如生长素和细胞分裂素，D正确。
故选：B。
1、农杆菌转化法的具体过程：
（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上。
（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内。
（3）利用土壤农杆菌感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内。
（4）含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包含了目的基因。
2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。
3、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。
4、转化：目的基因插入Ti质粒的T-DNA上农杆菌 →导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
本题主要考查基因工程的操作过程，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力，能够运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中。
15.【答案】选择性杀伤肠癌细胞，既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量 灭活病毒 既能大量增殖，又能产生特异性抗体 克隆化培养和抗体阳性检测 维持培养液的pH 丁酸钠的浓度和培养时间
【解析】解：（1）图中的单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，由于靶向药物选择性杀伤肠癌细胞，既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量，所以其比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小。
（2）图中诱导细胞融合时需要采用灭活病毒诱导法、聚乙二醇融合法或物理法等方法诱导，杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生特异性抗体。
（3）用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞后，再进行克隆化培养和抗体阳性检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。根据表格可知，该实验的自变量为丁酸钠的浓度和培养时间。
故答案为：
（1）选择性杀伤肠癌细胞，既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量
（2）灭活病毒 　既能大量增殖，又能产生特异性抗体
（3）克隆化培养和抗体阳性检测
（4）维持培养液的pH 　丁酸钠的浓度和培养时间
1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
3、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
4、诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。
5、单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备。
6、生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。
本题结合图解，考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。
16.【答案】减数分裂Ⅱ中期 获能 在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体（或雌雄原核） 超数排卵 同期发情 免疫排斥反应 有丝分裂 内细胞团 核移植
【解析】解：（1）采集的卵子到减数分裂Ⅱ中期才具备受精能力，而采集的精子需要通过获能处理才具有受精能力；判断卵细胞是否受精的重要标志是在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体或雌雄原核。
（2）在胚胎移植前要对提供胚胎的杜泊羊进行超数排卵处理，以获得更多的卵子；对接受胚胎的当地普通绵羊即受体进行同期发情处理，使它们的生理状态相同；由于免疫豁免现象的存在，代孕母羊对置入子宫的早期胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这就为早期胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。
（3）卵裂期的细胞分裂方式是有丝分裂；内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，故对囊胚期的胚胎进行分割时，要特别注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。
（4）若要快速地大量繁殖出同样大体型的个体，可采用的技术是核移植技术，该技术属于克隆技术。
故答案为：
（1）减数分裂Ⅱ中期 获能 在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体（或雌雄原核）
（2）超数排卵 同期发情 免疫排斥反应
（3）有丝分裂 内细胞团
（4）核移植
核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。
本题考查胚胎工程的流程图，要求学生识记胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理学基础和意义，能结合所学知识准确答题。
17.【答案】B RNA聚合酶识别和结合位点，驱动转录的进行 Ca2+ 将大肠杆菌变成感受态细胞，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化 X-gal 白色 抗原—抗体杂交
【解析】解：（1）构建基因表达载体最佳方法是使用双酶切法处理目的基因和载体，使其产生相同的黏性末端，进而通过DNA连接酶构建基因表达载体，选择限制酶的要求是不能破坏目的基因，故不选择EcoRV，可以选择BamHI和EcoRI处理目的基因和质粒。
故选：B。
（2）启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合位点，驱动转录的开始。
（3）将重组质粒导入大肠杆菌中，使用钙离子（Ca2+）处理，目的是将大肠杆菌变成感受态细胞，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化。
（4）LacZ基因编码的酶可使X-gal分解，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色。构建基因表达载体时，目的基因的插入使LacZ基因破坏，不能表达出相应的酶，进而不能使培养基中X-gal分解，因此菌落呈现白色。
（5）目的基因导入受体细胞后，常用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳。如果目的基因表达，是可以检测到相应的蛋白质。
故答案为：
（1）B
（2）RNA聚合酶识别和结合位点，驱动转录的进行
（3）Ca2+ 将大肠杆菌变成感受态细胞，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化
（4）X-gal 白色
（5）抗原—抗体杂交
基因工程基本操作程序：
1、目的基因的获取：方法有PCR、化学方法人工合成、DNA合成仪合成。
2、基因表达载体的构建：基因表达载体的组成有目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点。
3、将目的基因导入受体细胞：导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法；导入动物细胞的方法是显微注射法；导入微生物的方法：感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平检测：①DNA分子杂交检测目的基因是否插入到转基因生物的DNA上；②分子杂交检测目的基因是否转录出mRNA；③抗原—抗体杂交检测目的基因是否翻译出蛋白质；（2）个体生物学水平检测：抗虫抗病接种实验等。
本题考查基因工程的相关知识，要求考生理解并识记有关的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。
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