浦城县2022—2023学年第二学期期中考试高二生物试题
（考试时间：75分钟 满分：100分）
一、单选题（1-12题每题2分，13-16题每题4分，共40分）
1.《齐民要术》中记载了二十三种利用谷物酿制食醋的工艺。通常经历的三个主要发酵过程
为：糖化→酒化→醋化。下列相关说法正确的是
A. 利用果酒制作果醋时会产生气泡，同时会产生由醋酸菌形成的菌膜
B. 食醋制作过程中酒化是不可缺少的一个环节
C. 酵母菌将谷物中的糖转化为酒精的酶只存在于细胞质基质中
D. 利用酵母菌进行醋化时，温度应控制在18～30℃
2. 下列关于微生物培养和发酵工程的相关叙述正确的是
A. 在液体培养基中培养细菌时，一定要通入无菌空气
B. 减少菌种的传代次数能减小菌种发生自发突变的概率
C. 监控发酵过程的营养供给、氧气、温度、pH等是发酵工程的前提条件
D. 将单菌落接种到培养基上形成的菌落均是由一个细胞分裂形成的细胞集团
3. 有关泡菜中亚硝酸盐含量的研究表明，亚硝酸盐的含量高低和亚硝酸盐含量峰值时间的早
晚与食盐的浓度有关（见下图），下列有关叙述不正确的是
A. 所用的食盐水经煮沸后可除去水中的氧气并杀灭杂菌
B. 制作泡菜“咸而不酸”的原因可能与食盐浓度过高，温度过低导致不能正常发酵有关
C. 食盐的浓度越高，亚硝酸盐生成快，亚硝酸盐含量峰值出现得早
D. 取食泡菜时，时间别太长，防止空气进入
4. 右图所示的是利用废纸浆（主要成分是木质纤维）生产
乙醇的基本工艺流程。下列叙述，不正确的是
A. ①过程所需的微生物是纤维素分解菌
B. ②过程获得的酶是纤维素酶
C. ④物过程接种的微生物X是酵母菌
D. 用溴麝香草酚蓝溶液可以检验发酵后是否有酒精产生
5. 细菌放在固体培养基上培养，它会繁殖并形成菌落，下图哪项实验设计最适合用来检验两
种抗生素的杀菌效用
(
A B C D
)
6. 某些病毒感染会严重影响葡萄的产量和品质。某科研团队采用脱毒技术快速繁殖“阳光玫瑰”
葡萄品种，具体流程如下图所示，其中①、②为植物组织培养过程。下列叙述错误的是
A. 图中的X可指试管苗的茎尖
B. 推测热处理的基本原理是植物细胞比病毒更耐高温
C. 过程①、②所用的MS培养基无需另外添加植物激素
D. 可通过PCR、抗原-抗体杂交等方法对再生植株进行病毒检测
7. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列相关叙述正确的是
A. PCR仪实质上就是一台能自动调控温度的仪器，但在使用时需根据扩增的DNA片段
以及引物的情况人工设定合适的温度
B. PCR反应体系中的10倍浓缩的扩增缓冲液中含有、4种脱氧核糖核苷酸等成分
C. 为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水和移
液器等在使用前都必须进行高压灭菌处理
D. 电泳时，电泳缓冲液不能没过凝胶以免凝胶加样孔中的电泳样液流出
8. 2018年，中国研究团队报道了克隆猴“中中”和“华华”的诞生，标志着世界上首次非人
灵长类体细胞核移植的成功。下列叙述错误的是
A. 供体细胞核DNA碱基序列改变，使其恢复到分化前的功能状态
B. 与胚胎细胞相比，体细胞分化程度高使其全能性更加难以实现
C. 该克隆过程涉及细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等操作
D. 上述成果解决了缺乏遗传背景几乎一致的灵长类动物模型的问题
9. PCR引物的端为结合模板DNA的关键碱基；端无严格限制，可用于添加限制酶切点
等序列。下列相关分析错误的是
A. 四种脱氧核苷酸作为原料会依次连接到引物的端
B. TaqDNA聚合酶催化相邻的脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键
C. 用图示引物扩增至少两个循环后才能获得目的产物
D. 在PCR的循环过程中，图示过程需要的温度最低
10. 大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，
质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产
物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述正确的是
A. 提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的DNA等物质溶解
B. 将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定
C. 电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相同的电极移动的原理
D. 根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶I和II的切割位点，而有限制酶III的切割位点
11. 精子载体法（SMGT）是将精子适当处理，使其携带外源基因，通过人工授精或体外受
精等途径获得转基因动物的方法。下图是某研究所利用SMGT法获得转基因鼠的过程，
下列叙述正确的是
A. ①过程将标记的外源基因直接导入成熟精子即可
B. ②过程需将成熟精子放入ATP溶液中进行获能处理
C. 若需要对③产生的早期胚胎进行分割，可选择桑葚胚或囊胚
D. 进行过程④操作前，需要对代孕母体进行免疫抑制剂处理
12. 生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述属于理性看待生物技术的是
A. 某些转基因食品会引起过敏反应，要禁止转基因技术的应用
B. 生殖性克隆、治疗性克隆都要用到细胞核移植技术
C. 转基因致病菌易造成人、畜大规模死亡的原因是人、畜不会对它们产生免疫反应
D. 试管婴儿和设计试管婴儿都涉及的技术有体外受精、胚胎移植、基因组编辑
13. 人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药，
改造后的t-PA蛋白能显著降低出血副作用。下图表示构建含t-PA改良基因重组质粒的
过程示意图。相关说法错误的是
A. 构建重组质粒时，选用的限制酶是XmaⅠ和NheⅠ
B. 需要DNA连接酶将t-PA改良基因与质粒连接
C. 新霉素抗性基因的作用是便于将导入质粒的大肠杆菌筛选出来
D. 在加入新霉素的培养基中选择呈白色的菌落选育工程菌株
14. 野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突
变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨
酸营养缺陷突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关
说法正确是
A. 野生型大肠杆菌能够合成所需的全部氨基酸，因此培养基中无需提供氮源
B. 需将①中的菌液适当稀释后，用接种环蘸取菌液在②上进行划线接种
C. ①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸
D. 从④培养基中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需突变株
15. 蛋白质工程中可以利用引物引导的方法对DNA进行定点突变，进而改变蛋白质的特定氨
基酸。图示为这种定点诱变方法的实验流程。据图分析，下列叙述错误的是
A. 待突变质粒的甲基化修饰不会影响PCR扩增
B. 用于突变的两条引物之间不能发生碱基互补配对
C. 图中所示限制酶能够识别质粒中发生甲基化的位点
D. 突变质粒缺口补齐依赖于大肠杆菌DNA连接酶的作用
16. 为探究海鲷催乳素启动子（psbPRL）的关键功能位点，将启动子区域序列进行分段截短，
分别构建含荧光素酶基因的重组质粒，检测启动子的启动能力，结果如下图。下列叙述
错误的是
A. 将启动子序列插入荧光素酶基因的上游
B. 用限制酶和DNA连接酶构建重组质粒
C. 150-700bp之间具有提高启动能力的序列
D. 荧光值越高代表启动子的启动能力越强
二、非选择题（共5题，共60分）
17.（12分）青蒿素是黄花蒿叶片细胞的代谢产物，能杀死红细胞内的疟原虫，是非常有效
的抗疟疾药物。目前可利用植物组织培养技术生产青蒿素。回答下列问题：
（1）植物组织培养技术中建立无菌体系非常重要，其中对外植体则需进行 处理，
培养基需用 法灭菌。组织培养过程中获得愈伤组织的过程称为 ，
研究人员发现愈伤组织中没有青蒿素，其根本原因是 。
可推测青蒿素是黄花蒿叶片细胞的 （填“初生”或“次生”）代谢产物。
（2）经植物组织培养可再生出新的植株，目前还不能用类似方法获得完整的动物个体。克
隆的动物，实际是通过 来实现的。
（3）近来有科学家利用基因工程的方法在细菌（工程菌）中重建“植物代谢过程”，利用
工程菌进行发酵生产大量植物代谢产物，该过程涉及到的变异类型是 。
与植物细胞工程生产植物稀有化合物相比，利用工程菌生产稀有化合物的优点在于
（答1点）。
（4）植物组织培养的不同阶段需要换瓶培养，换瓶的主要目的有 （答2点）。
组织培养过程除需及时调整培养基的成分外，还要控制的外界条件主要有 。
18.（12分）干扰素在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病，目前科学家通过构建基因工
程菌来获得干扰素，下图示为干扰素基因及几种限制酶的识别位点。回答下列问题：
（1）常利用PCR技术扩增干扰素基因，PCR的原理是 ；为确保成
功获得基因工程菌，图中引物应选择 ，PCR过程中延伸阶段选用72℃
而非95℃综合考虑了两个因素，这两个因素是 。
（2）设计引物是PCR技术中至关重要的一环。下图所示的引物中，其中一种设计不合理，
原因是 。
（3）强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被 识别并结合，驱动基因
的持续转录。为使干扰素基因在菌体中超量表达，并避免目的基因的反向连接，应选
用限制酶 和 切割图中DNA片段。
（4）生产干扰素的工程菌可选用大肠杆菌或酵母菌，选用酵母菌作为受体细胞的优势是 。
（5）干扰素在体外保存相当困难，但如果将其分子上一个半胱氨酸变成丝氨酸，那么在-70℃
的条件下，可以保存半年。请根据蛋白质工程的原理设计实验对干扰素进行改造，使其
保存时间延长，则改造思路是 。
19.（12分）CAR—T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导入癌症患者的T细胞中，使其转
化为CAR—T细胞，CAR—T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活
CAR—T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆，主要过程如下图。
请回答：
（1）要获取CAR基因，可采取PCR技术进行大量扩增，前提是 。
（2）将CAR基因导入患者T细胞前,需完成过程① ，该过程所需要的酶
有 ，连接形成pCDH—CAR上除了目的基因外，还有一些必须的
部分，比如启动子和终止子，其中终止子的作用是 。
（3）完成过程②常用方法是 法。此外，还可以先将CAR基因整合到逆转录病毒载
体中，再利用病毒的 性导入并将CAR基因整合到T细胞的 上。
（4）检测CAR—T细胞中的CAR基因是否转录出了mRNA所采用的方法是 。
（5）在将CAR—T细胞输给病人进行治疗之前，还需在实验室内进行细胞扩增培养。体外
培养CAR—T细胞的培养液中除合成培养基的成分外，一般还需添加 等天然成分，
需要定期更换培养液,这样做的目的是 。
20.（12分）全人源化抗体是指将人体抗体基因通过转基因技术，转移至抗体基因缺失的其
他动物中，使其表达人类抗体，达到抗体全人源化的目的。新型冠状病毒可通过表面的
刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体而引起肺炎。
利用转基因鼠进行全人源化抗S蛋白单克隆抗体的制备流程如图所示。其中a-d代表物
质或细胞，①-⑥代表过程。
（1）上述实验必须给小鼠注射物质a，物质a表示 ，该处理的目的是 。
（2）过程⑤筛选的方法是 ，细胞c的特点是 。
（3）过程⑥需要将细胞c接种到多孔培养板上，取 作为待测样本进行抗体阳性检
测，检测原理如下图所示。
加入酶标抗体一段时间后，需要将未与 结合的酶标抗体洗脱。据图可知在抗体检测中，杂交瘤细胞呈阳性的判断依据为 。
21.（12分）为探究细菌间的相互作用，科研人员利用基因工程技术，对无法利用乳糖的大
肠杆菌进行改造。将乳糖酶基因转入大肠杆菌，获得营养菌（能利用乳糖）；将抗生素
CRO降解酶基因转入大肠杆菌，获得抗性菌。回答下列问题：
（1）将得到的两种菌分别接种于
培养基进行扩大培养。
（2）为了解大肠杆菌的繁殖速度，可用
法对其进行计数。
(
（注：→代表混合菌液培养板上细菌的存活率相对值为1，即与0h数量相同。→以上数值越大，细菌数量越大；→以下表示存活率降低。）
)将培养到某一时期的培养液制备成
10-4的稀释液，每次取0.1mL进行
涂布分离，三个培养皿生长的
菌落数依次为35个、31个，33个，
则培养液中的大肠杆菌数量为
个/mL。
（3）若将两种菌混合接种，培养一段时
间后，培养皿中有菌落长出，且同
时含有两种菌，推测两种菌实现了
“互利共生”。为进一步探究上述
现象的原因,科研人员设计了如图1
所示装置进行实验。
①在接种了营养菌和抗性菌混合菌
液的培养板左侧，加入以 为唯一碳源并含 的培养基，培养基可从左
侧逐渐扩散到混合菌液培养板上。定期检测混合菌液培养板上两种菌的数量，得到
如图2所示结果。
② 0～10h，营养菌的数量变化是：近培养基端（相对距离0～500之间） ，
远培养基端（相对距离500～1000之间） 。
③ 10～45h，营养菌和抗性菌的数量变化趋势是 ，
并逐渐向 方向增殖，其原因是 。浦城县2022—2023学年第二学期期中考试高二生物试题
参考答案
一、单选题（1-12题每题2分，13-16题每题4分，共40分）
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
答案 C B C D C C A A C B C B A C B C
二、非选择题（共5题，共60分，除标注外，每空1分）
17.（12分）
（1）消毒 湿热灭菌（或高压蒸汽灭菌） 脱分化
与青蒿素合成相关的基因在愈伤组织中没有表达（基因的选择性表达）（2分） 次生
（2）核移植（细胞核移植)
（3）基因重组 细菌培养更简单（产物的提取更方便、工程菌繁殖速度快）
（4）提供营养物质、改变激素的浓度（比例）（2分） 温度（或光照）
18.（12分）
（1）DNA半保留复制 E、C（同时写对才得分）
防止DNA变性（保证引物与模板结合）和保证Taq酶所需温度条件（2分）
（2）引物Ⅰ折叠后会发生碱基互补配对（形成发夹结构）（2分）
（3）RNA聚合酶 EcoRⅠ SmaⅠ
（4）酵母菌含有内质网和高尔基体，可对蛋白质进行加工和修饰
（5）将基因中一个编码半胱氨酸的碱基序列替换成编码丝氨酸的碱基序列（2分）
19.（12分）
（1）CAR基因序列已知（2分）
（2）基因表达载体的构建 限制酶和DNA连接酶 使转录在需要的地方停止下来
（3）显微注射法 侵染 染色体DNA
（4）PCR等技术
（5）动物血清 清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害（2分）
20.（12分）
（1）S蛋白 诱导小鼠产生能抗S蛋白抗体的B淋巴细胞（2分）
（2）用特定的选择培养基进行筛选（2分） 既能迅速大量增殖，又能产生抗体（2分）
（3）上清液（培养液） 抗S蛋白抗体（2分）
酶促反应底物由无色变为蓝色（2分）
21.（12分）
（1）液体 （2）稀释涂布平板 3.3×106 （2分）
（3）①乳糖 CRO ②数量显著减少 略有增长
③二者均显著增加 近培养基端（相对距离0的方向）
抗性菌增殖，降解了CRO，使营养菌能存活并增殖；营养菌增殖，分解乳糖，代谢产物为抗性菌生长提供碳源（2分）
