参考答案
1、答案：A
2、答案：C
3、答案：B
4、答案：D
5、答案：D
6、答案：C
7、答案：D
8、答案：C
9、答案：D
10、答案：C
11、答案：B
12、答案：A
13、答案：B
14、答案：D
15、答案：B
16、答案：D
17、答案：D
解析：D项，用EcoR处理后产生的的片段，进一步被Not酶切为和的片段，可以得知Not切点与EcoR切点的最短距离为，故D项说法错误。
A项和B项，用EcoR处理和利用EcoR和Not双酶切时产生的结果不同，说明DNA含有Not酶切位点，因为用Not处理只产生了一个的条带，所以该分子必须是环状的，且长度一定是，故A项、B项均说法正确。
C项，因为用Not处理只产生了一个的条带，说明该环状DNA上含有一个Not切割位点，单用EcoR处理后产生了和两条带，说明该环状DNA上含有2个EcoR切割位点，故C项说法正确。
注意本题要选择的是说法错误的选项，故本题正确答案为D。
18、答案：C
解析：A、酶与b酶切断的化学键相同，都是磷酸二酯键，而不是氢键，A错误；
B、据图分析，酶a的识别序列是-GATC-，酶b识别序列是GGATCC-，酶b的识别序列包含酶a的序列，故能被b酶识别并切割的列也能被a切割，但能被a酶识别并切割的序列不一定能被b酶切制，B错误;
C、a酶的识别序列比b酶短，识别列越短，含有的识别位点就越多，因此在相同的DNA分子中酶的识别位点明显多于b酶，被a酶切割的概率一般高于b酶，C正确;
D、为防止限制酶切制后的质粒自身环化，在基因工程中通常使用两种切制后产生不同黏性未端的限制酶切制同一质粒，D错误。
故选C。
19、答案：C
解析：S蛋白的RBD可与ACE2受体结合，人工合成的LCB1可与S蛋白的RBD结合，故LCB1的结构可以依据S蛋白的RBD和人体细胞ACE2受体的结构进行设计，A正确；
由题意可知，LCB1的结构可能与ACE2受体的结构相似，且设计LCB1属于蛋白质工程，故LCB1的生产可通过直接改造人的某些基因（如ACE2受体基因）来实现，B正确；
LCB1是人工设计并合成的一种自然界不存在的蛋白质，但合成蛋白质所需的氨基酸是自然界存在的，C错误；
LCB1的设计和合成属于蛋白质工程，蛋白质工程遵循中心法则，D正确。
20、答案：C
解析：基因表达载体的构建的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用，A正确；质粒上的标记基因有的是固有的，也可以是人为加上去的，B正确；一个基因表达载体一般包括目的基因、标记基因、启动子和终止子等结构，C错误；复制原点是DNA复制的起点，D正确。
21、答案：D
解析：猪的成熟红细胞无细胞器和细胞核，不能作为提取DNA的材料，A错误；DNA鉴定时，加入二苯胺试剂后需沸水浴加热才可观察到颜色反应，B错误；0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度较小，一般用2 mol/L的NaCl溶液溶解DNA，C错误；DNA粗提取实验中，可根据DNA不溶于酒精但某些蛋白质溶于酒精的原理初步分离DNA与蛋白质，D正确。
22、答案：A
解析：高度分化的动物体细胞不能继续分裂，无法获得大量的细胞，A错误；去核的卵母细胞能够激发体细胞核全能性，而且含有细胞发育需要的早期营养物质，因此选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率，B正确；植物的愈伤组织还没有经过分化，进行诱变处理，再进行人工选择，可获得优质的突变体，C正确；茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D正确。
23、答案：C
解析：A、硝化细菌属于化能合成型自养微生物，因此制备筛选、培养硝化细菌的培养基不需要添加碳源，但需要添加氨源，A错误；B、固体培养基中的琼脂是作为凝固剂，是培养基凝固为固体培养基，不能为微生物生长提供碳源，B错误；C、由于液体培养基可以增加菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和繁殖提供更多的营养和空间，因此在进行微生物的富集培养时常选用液体培养基，C正确；D、在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，故培养基中加入刚果红可用于纤维素分解菌的鉴定，D错误。故选：C。
24、答案：B
解析：
25、答案：D
解析：
26、答案：C
解析：A 、植组织培养获得的植株茎尖切段需用70％的酒精和5％的次氯酸钠进行消毒处理，清洗时用无菌水， A 正确；
B 、生产脱毒苗和培养克隆动物所依据的原理不同，前者是细胞的全能性，后者是动物细胞核的全能性， B 正确；
C 、形成愈伤组织的过程是脱分化，可能会发生染色体变异、基因突变，但不会发生细胞分化， C 错误；
D 、利用组织培养技术可以快速生产出脱毒苗，脱毒苗不含病毒（或病毒含量极少），但不具有抗病毒的性状，D 正确。
故选C。
27、答案：B
解析：对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的，故本题中对T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程的范畴，A正确。
蛋白质工程直接改造的对象为基因（DNA），通过改造T4溶菌酶mRNA得到的改造蛋白质不能遗传，B错误。
改造前组成T4溶菌酶的氨基酸中就包括半胱氨酸，改造后组成T4溶菌酶的氨基酸中可能仍包括异亮氨酸，因此参与新的T4溶菌酶合成的tRNA种类可能不变，C正确。
改造后的T4溶菌酶替换了一个氨基酸，氨基酸总数不变，且替换前后的两个氨基酸R基上都不含羧基或氨基，所以肽键数不变；二硫键使T4溶菌酶的耐热性提高，DNA分子中氢键越多，DNA分子的热稳定性越强，故二硫键和DNA分子中氢键的作用类似，D正确。
28、答案：B
解析：从土壤中取样后，由于土壤中菌的数量较多，需要用无菌水对土壤菌液进行梯度稀释，A错误；不同的微生物培养需要的pH不同，培养细菌时需将培养基的pH调至中性或弱碱性，B正确；由题意可知，解磷菌能分解含磷化合物使得菌落周围出现透明圈，透明圈越大，说明其分解磷的能力越强，C培养基中②的透明圈最大，该菌分解磷的能力最强，C错误；操作Ⅱ所使用的工具是涂布器，所使用的接种方法是稀释涂布平板法，D错误。
29、答案：C
30、答案：B
31、答案：（1）油污土壤或水体中所含脂肪较多
（2）以脂肪作为唯一碳源；允许产脂肪酶的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长（2分）
（3）稀释涂布平板法；固体培养基；大；无菌落（2分）；判断选择培养基是否起到了选择作用（2分）
（4）诱变
32、答案： （1）变性、复性、延伸（2分）
（2）基因表达载体的构建（2分）； 限制； 启动子、终止子、复制原点（2分）
（3）显微注射；受精卵；抗原—抗体杂交
33、
（1）答案：逆转录酶（或反转录酶）
（2）答案：一段特定的核苷酸序列；复性
（3）答案：该人近期可能感染过新冠病毒，经自身免疫系统的作用，体内病毒被消灭，但体内产生的抗体尚未消失；
该人感染了新冠病毒，且机体免疫系统产生了相应抗体，但还未将病毒完全消灭（2分）
（4）答案：目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定（2分）
34、答案：（1）乳酸菌
（2）青梅皮上附着的酵母菌；；重铬酸钾
（3）关闭；18-25°C；无氧、呈酸性、含酒精；不会；醋酸菌发酵温度为30-35℃，还需通入无菌空气（2分）
35、答案：(1)特定抗原；脾脏；灭活病毒诱导法；
（2）选择培养基；杂交瘤；抗原-抗体杂交；能产生特定抗体的杂交瘤细胞（2分）；
既能产生特定的抗体，而且还能无限增殖（2分）绝密★启用前
大地中学校2022-2023学年高二下学期5月月考
生物
（考试时间：90分钟 试卷满分：100分）
注意事项：
1. 本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名. 准考证号填写在答题卡上。
2. 回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。
3. 回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
4. 考试结束后，将答题卡交回。
第Ⅰ卷
一. 选择题：本题共30个小题，1-10题，每小题1分，11-30题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 下列关于果酒和果醋的制作原理. 发酵过程的叙述中,错误的是
A. 果酒和果醋的发酵菌种不同,但代谢类型相同
B. 制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒
C. 变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落
D. 果酒和果醋的制作可用同一装置,但需控制不同发酵条件
2. 有关平板划线操作的叙述，错误的是
A. 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面
B. 每次划线前，灼烧接种环待其冷却后再划线
C. 在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自菌液
D. 每次划三至五条平行线，注意用力大小要适当，不要划破培养基
3. 将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是
A. 对比观察培养基有没有被微生物利用 B. 对比分析培养基上是否生有杂菌
C. 没必要放入未接种的培养基 D. 为了下次接种时再使用
4. 获得纯净培养物的关键是
A. 将用于微生物培养的器皿. 接种用具和培养基等器具进行灭菌
B. 接种纯种细菌
C. 适宜环境条件下培养
D. 防止外来杂菌的入侵
5. 平板冷凝后,要将平板倒置,其原因是
A. 接种时再拿起来方便 B. 在皿底上标记日期等方便
C. 正着放置容易破碎 D. 防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染
6. 下图为酱油的制作流程，其中米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油所需的蛋白酶. 脂肪酶等，该过程需要提供营养物质. 通入空气。下列说法错误的是
A. 米曲霉发酵过程中，大豆中蛋白质可为米曲霉的生长提供氮源
B. 米曲霉分泌的酶可将大分子有机物水解为小分子有机物
C. 发酵池发酵阶段应密封进行，酵母菌与米曲霉对氧气需求相同
D. 发酵池中两种主要微生物产生的酒精. 乳酸可以抑制杂菌生长
7. 某同学将1 mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0. 1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是
A. 可得出土壤样液中活菌数大约为5. 7×107个/L
B. 此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低
C. 一般选择菌落数在30－300的平板进行计数
D. 显微镜直接计数法统计的都是稀释液中活菌数
8. 下列有关动物细胞核移植和克隆动物的叙述，错误的是
A. 胚胎细胞核移植的难度明显低于体细胞核移植
B. 用于核移植的卵母细胞需要在体外培养到MⅡ期
C. 核移植后形成的重构胚可以直接移入受体动物体内
D. 克隆动物和体细胞供体动物的性状基本相同
9. 下列有关细胞工程的叙述，正确的是
A. 动物细胞培养应置于含95%O2和5%CO2的培养箱中进行
B. 动物细胞培养和植物组织培养都利用了细胞全能性的原理
C. 愈伤组织培养过程中加入聚乙二醇，即可获得染色体加倍的细胞
D. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性
10. 两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图所示。下列说法错误的是
A. 过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞
B. 过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂
C. 过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合
D. 耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段
11. 下列关于植物细胞工程应用的叙述，错误的是
A. 植物微型繁殖具有高效. 快速的特点
B. 在紫草宁的工厂化生产的过程中使用的是固体培养基
C. 对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种
D. 利用植物组织培养技术培育的脱毒苗具有不含或很少含病毒的特点
12. 人心肌细胞中的肌钙蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。下列有关叙述错误的是
A. 反复给小鼠注射cTnI的目的是让小鼠体内产生更多的抗体
B. 人工诱导细胞融合获得甲常用的方法可用灭活的病毒诱导
C. 经检测. 筛选后的丙，既能无限增殖又可分泌特异性抗体
D. 抗cTnI单克隆抗体检测心肌损伤具有特异性强. 灵敏度高的特点
13. 如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是
A. 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B. 过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体
C. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D. 过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
14. 下图为科学家制备诱导多能干细胞(iPS细胞)的操作流程图。下列叙述错误的是
A. 该项技术可用于器官的再生研究
B. 诱导多能干细胞分化程度较低，具有分裂和分化的能力
C. 诱导多能干细胞分化成表皮细胞是基因选择性表达的结果
D. 诱导多能干细胞应用前景不如胚胎干细胞
15. 下列有关限制性内切核酸酶的叙述，正确的是
A. 用限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个
B. 限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大
C. —CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接
D. 只有用相同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒
16. 基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ. EcoR Ⅰ和Sau3A Ⅰ。下列分析错误的是
A. 构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
B. 构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
C. 图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
D. 用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA
17. 一种双链 DNA 分子被三种不同的限制酶切割（每种限制酶切割后得到的不同大小的 DNA片段各一个），切割产物通过电泳分离，用大小已知的DNA片段的电泳结果作为分子量标记（右图左边一列）。关于该双链 DNA，下列说法不正确的是
A. 呈环状结构
B. 分子质量大小为10kb
C. 有1个NotI和2个EcoRI切点
D. 其NotI切点与EcoRI切点的最短距离为2kb
18. 限制酶a和b的识别序列与切割位点如下图所示。下列叙述正确的是
A. a酶、b酶均能切割氢键和磷酸二酯键
B. 能被a酶识别并切割的序列也能被b酶切割
C. 相同DNA分子被a酶切割的概率一般高于b酶
D. 基因工程中只要用两种酶切割质粒就能防止其自身环化
19. 新型冠状病毒借助表面的刺突蛋白（S蛋白）的受体结合区域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体结合而感染细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1，其可与S蛋白的RBD更为紧密地结合，以干扰新型冠状病毒的感染。下列有关说法错误的是
A. LCB1结构的设计可参考S蛋白的RBD和人体细胞ACE2受体的结构进行
B. LCB1的生产可通过直接改造人的某些基因来实现
C. LCB1的基本组成单位中可能含有自然界不存在的氨基酸
D. LCB1的设计和合成也遵循中心法则
20. 基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，是成功的关键，下列相关说法不正确的是
A. 构建基因表达载体的目的包括使目的基因在受体细胞中能稳定存在且遗传给下一代
B. 基因工程中使用的标记基因有许多种，有的标记基因是质粒上固有的
C. 一个基因表达载体一般包括目的基因. 标记基因. 起始密码和终止密码等结构
D. 基因表达载体中的复制原点是质粒DNA的复制的起点
21. 下列有关DNA粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是
A. 酵母菌. 菜花和猪的成熟红细胞都可作为提取DNA的材料
B. 溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂后在常温下颜色变蓝
C. 一般用0. 14 mol/L的NaCl溶液溶解DNA
D. 粗提取DNA实验中利用了DNA不溶于酒精的特点
22. 细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述不正确的是
A. 选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞
B. 选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率
C. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得突变体
D. 选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
23. 下列有关培养基的叙述正确的是
A. 筛选、培养硝化细菌的培养基中不能加入氮源
B. 固体培养基中的琼脂能为微生物生长提供碳源
C. 在进行微生物的富集培养时常选用液体培养基
D. 培养基中加入刚果红可用于尿素分解菌的鉴定
24. 航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是
A. 培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌
B. 人心脏的跳动受到自主神经系统的调控
C. 心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖
D. 培养心肌细胞时，需要O2但不需要CO2
25. 羊在畜牧生产和生物医学模型方面都具有重要价值，因此与羊相关的基础生物学研究也格外受到关注。科学家通过胚胎工程的方法繁育肉羊。下列相关叙述错误的是
A. 从雌性肉羊卵巢内取出的卵母细胞不可直接进行体外受精
B. 可用普通雌性羊作为受体进行胚胎移植但需生理状态相同
C. 可以通过胚胎分割技术，得到更多遗传性状相同的肉羊后代
D. 在胚胎移植前，需要对体外培养的原肠胚进行质量筛查
26. 利用组织培养技术可以快速生产出脱毒苗。下列叙述错误的是
A. 获取的植株茎尖切段需用70％的酒精和5％的次氯酸钠进行消毒处理
B. 生产脱毒苗和培养克隆动物所依据的原理不同
C. 形成愈伤组织的过程中，可能会发生染色体变异. 基因突变及细胞分化
D. 利用植株茎尖细胞培育的脱毒苗不能抗病毒
27. T4溶菌酶来源于T4噬菌体（以DNA为遗传物质），是重要的工业用酶。科学家通过一定技术使T4噬菌体产生的T4溶菌酶的第3位异亮氨酸变为半胱氨酸（二者R基上都不含氨基. 羧基，异亮氨酸的密码子是AUU. AUC. AUA，半胱氨酸的密码子是UGU. UGC），于是该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，从而使T4溶菌酶的耐热性得到了提高。下列对上述过程的有关叙述，错误的是
A. 上述对T4溶菌酶进行的改造属于蛋白质工程的范畴
B. 上述过程通过直接改造T4溶菌酶mRNA上的2个碱基实现
C. 参与新的T4溶菌酶合成的tRNA种类可能不变
D. 改造后的T4溶菌酶肽键数不变，二硫键的作用类似于DNA中的氢键
28. 解磷菌是一种能将土壤中植物不能利用的磷转化为植物可以利用的磷的微生物（主要为细菌），其在提高土壤中有效磷含量. 促进磷循环方面发挥着重要作用。解磷菌能分解含磷化合物使得菌落周围会出现透明圈。如图为从某植物根际土壤中筛选出高效解磷菌的部分流程示意图，下列叙述正确的是
A. 取样后用生理盐水将土壤菌液进行系列梯度稀释
B. 配制培养基时应将培养基的pH调至中性或弱碱性
C. 若筛选更高效解磷菌，应挑选培养基C中①号菌落
D. 操作Ⅱ使用的工具和接种方法分别是接种环和平板划线法
29. 下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是
成分 含量 成分 含量
NaNO2 3 g FeSO4 0. 01 g
K2HPO4 1 g 葡萄糖 30 g
琼脂 15 g H2O 1 000 mL
MgSO4·7H2O 0. 5 g 青霉素 0. 1万单位
A. 依物理性质划分，该培养基属于固体培养基
B. 由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉
C. 本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求
D. 若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3，并应加入尿素
30. 研究发现，无机盐离子的特殊配比可促使犬早期胚胎的基因组激活，而添加新鲜的维生素. 组织液提取物等物质则可帮助犬早期胚胎维持正常的形态和细胞分化。下列有关胚胎工程的叙述，错误的是
A. 可对犬注射一定量的促性腺激素使其超数排卵来获得多个犬卵母细胞
B. 可选择桑葚胚. 囊胚和原肠胚时期的胚胎进行胚胎分割以获得多个胚胎
C. 早期胚胎的体外培养液中还要注意气体条件且应该加入血清等成分
D. 囊胚期胚胎细胞开始分化出现了内细胞团和滋养层细胞
第Ⅱ卷
二. 非选择题：本大题共4个小题，共50分。
31. （12分，除标注外每空1分）
生物柴油是以野生油料植物. 废餐饮油等为原料，通过化学反应制成的可供内燃机使用的燃料，是一种绿色能源，其中微生物脂肪酶在催化生产生物柴油中起着重要作用。为筛选产脂肪酶的微生物，石河子大学的科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：
（1）产脂肪酶的微生物主要从油污土壤或水体中寻找，原因是_________。
（2）为确保能够分离得到产脂肪酶的微生物，常将土壤或水体稀释液先进行选择培养，该培养基的碳源要求为_________，该培养基具有选择作用的原理是_________。
（3）分离、纯化培养时，可采用_________法接种，从而得到分布均匀的单菌落﹔从物理形态角度考虑，该培养基属于_________培养基。培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径_________的菌落进行纯化培养。为提高该步操作的可信度，设置了如下对照实验：
对照组 作用 应出现的现象
未接种的选择培养基 判断选择培养基是否被污染 ①_________
接种的牛肉膏蛋白胨培养基 ②_________ 对照组培养基上的菌落数大于选择培养基上的菌落数
（4）从自然界中筛选得到的产脂肪酶的微生物产酶能力普遍较差，可采用_________育种技术改良，获得有应用价值的高产菌株。
32. （10分，除标注外每空1分）
转基因三文鱼已经走上人类的餐桌。普通的大西洋三文鱼生长缓慢，需要3年左右才能长大上市。转基因三文鱼的生产过程中其中一项就是对普通三文鱼植入了生长激素基因，转入了这种基因后，三文鱼只要18个月就能长大，而且个头也比同类非转基因三文鱼要大；因而可以更快. 更多地满足人们的消费需求。请回答下列问题：
（1）用PCR技术扩增生长激素基因时，PCR 扩增的一般步骤是__________________。
（2）_____________________是该工程的核心。为获得生长激素基因表达载体，需用___________酶对该基因和载体进行切割。除此之外，该表达载体还必须含有______________________. 标记基因等调控组件。
（3）通过___________的方法将重组的表达载体导入三文鱼___________细胞中。最后用___________技术检测是否有生长激素的合成。
33. （8分，除标注外每空1分）
新冠疫情出现后，病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用。回答下列问题。
（1）新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA(核酸检测)可以采取RT-PCR法。这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA，这一过程需要的酶是_________，再通过PCR技术扩增相应的DNA片段。根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。
（2）为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的_________来进行。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是_________。
（3）某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测(检测体内是否有新冠病毒抗体)，若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明_________(答出1种情况即可)；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明_________。
（4）常见的病毒疫苗有灭活疫苗. 蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S(具有抗原性)的编码序列(目的基因)。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是_________。
34. （10分，除标注外每空1分）
青梅果肉营养丰富，成熟的青梅果实易腐烂，不易运输保存。进行青梅果酒和果醋研究可提高青梅资源利用率，又可提高产品附加值。图1是制作青梅酒和青梅醋的流程图。图2是发酵过程中用到的一种发酵罐示意图，回答下列问题:
（1）传统发酵是利用天然微生物的代谢活动制造或生产某些产品例如果酒. 果醋. 泡菜等，泡菜制作需要的主要微生物是___。
（2）图1中，家庭酿造青梅酒时不需要添加酵母菌菌种，菌种来源是___。写出酵母菌产生酒精的反应式:___。在酸性条件下，用___检测有无酒精的产生。
（3）图2装置进行青梅酒发酵时，应保证进气口___。(填“打开”或“关闭”)在发酵过程中，一般将温度控制在___，发酵的___条件会抑制杂菌的生长。若发酵时间过长，产酒率不再增加，但会增加被杂菌污染的风险，若被醋酸菌污染，___(填“会”或“不会”)发酵产生醋酸，原因___。
35. （10分，除标注外每空1分）
如图所示为某厂家生产的新冠抗原检测试剂盒，其工作原理为胶体金免疫层析法，即将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条，使用十分方便。请回答下列问题：
抗原检测试剂盒的生产依赖于新型冠状病毒单克隆抗体的制备。制取新型冠状病毒S蛋白的单克隆抗体部分过程如下图。
①图中a操作是指往小鼠体内注射______，之后一般从该小鼠的______中提取淋巴细胞，并在体外让淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。与诱导植物原生质体融合相比，诱导这两种细胞融合的特有方法是______。
②诱导融合后至少要经过两次筛选，图中的筛选1是指利用______将______细胞筛选出来；筛选2是利用______的原理将______细胞筛选出来，这类细胞具有______的特点，可直接用于生成单克隆抗体。
