海头高级中学2022-2023学年高二下学期5月测试七生物学试题
单项选择题：本部分包括 18 题，每题 2 分，共计 36分。每题只有一个选项最符合题意。
1．下列关于果酒、果醋和泡菜制作的叙述，正确的是( )
A．制作果酒时，反复冲洗葡萄以避免杂菌污染
B．控制好温度和酸碱度既有利于目的菌的繁殖，又可抑制杂菌的生长
C．制作果醋和泡菜的主要微生物是原核生物，呼吸类型相同
D．发酵过程中所有材料都需要进行严格的灭菌处理， 以免杂菌污染
2．苹果醋是以苹果为原料经甲、乙两个阶段发酵而成的，下列说法错误的是
A．甲阶段的发酵温度低于乙阶段的发酵温度
B．过程①②在酵母菌细胞的细胞质基质进行，③在线粒体进行
C．根据醋酸菌的呼吸作用类型，乙过程需要在无氧条件下完成
D．甲乙两阶段完成后溶液 pH 均降低
3．下列有关平板划线操作的叙述，不正确的是( )
A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种
C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液
D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免微生物污染环境和感染操作者
4．大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌，在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌 数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流程如下图所示。大肠杆菌的代谢物能与伊红—亚甲蓝(EMB培养基的指示剂)反应，菌落呈深紫色。下列对该实验操作的分析，错误的是( )
A．测定前，滤杯、滤膜和滤瓶均可用干热灭菌法灭菌处理
B．过滤操作要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染
C．将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作
D．EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能正常生长并形成深紫色菌落
5．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是( )
A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边， 以免培养基溅到皿盖上
C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
6．发酵工程的内容包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵和产品的分离、提纯等方面。下列关于发酵工程的认识不科学的是( )
A．发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点
B．发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身
C．通常所指的发酵条件包括温度控制、溶氧控制、pH控制
D．发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵
7．关于DNA重组技术中基本工具的叙述，正确的是( )
A．限制性内切酶的作用部位是特定的两个核苷酸之间的氢键
B．目的基因经限制性内切酶切割后一定会形成黏性末端
C．DNA连接酶用来连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键
D．质粒DNA分子上一定含有抗四环素基因
8．下表所示为动物细胞培养与植物组织培养的比较，错误的是( )
选项 项目 动物细胞培养 植物组织培养
A 原理 动物细胞核的全能性 植物细胞的全能性
B 培养基 液体培养基 固体培养基
C 主要过程 原代培养，传代培养 脱分化，再分化，形成完整植株
D 主要应用 获得大量细胞或细胞产物 植物快速繁殖、获得脱毒苗等
9．植物组织培养技术常用于商业化生产,其过程一般为:无菌培养物建立-培养物增殖-生根培养-试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是( )
A．为获得无菌培养物,外植体要消毒处理后才可接种培养
B．组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成,直接形成胚状体等结构
C．提高培养基中生长素与细胞分裂素的比值,有利于诱导生根
D．用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异
10．下图所示的黏性末端属于同一种限制酶切割产生的是( )
A.①② B . ①③ C . ②④ D . ③④
11．下列有关生物工程技术的描述，正确的是( )
A.植物组织培养是指离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成新个体的过程
B.动物克隆的技术基础是动物细胞培养
C.人工诱变、细胞工程等只能用于对微生物进行定向改造
D.动物细胞融合技术的主要用途是培养具有双亲优良性状的经济动物
12 ．下列关于细胞工程的叙述，正确的是( )
A.利用花药培养得到单倍体植株，从紫草细胞中提取紫草宁，利用细胞工程培育“番茄—马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术
B.在进行植物组织培养时， 由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，不可能会发生细胞脱分化和基因突变，而可能发生细胞分化和基因重组
C.动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体
D.动物难以克隆的根本原因是动物细胞中的基因不完整
13.良种试管牛的繁殖过程：用激素促进甲牛多排卵，然后在体外用人工采集的乙牛的精子与甲牛卵子进行受精，在特定培养基中培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛
的子宫内，孕育成试管牛。下列相关叙述错误的是( )
A ．精卵结合前都需进行培养
B.“促进甲牛多排卵” 的激素是孕激素
C.甲牛、乙牛对试管牛核遗传物质的贡献相同
D.该技术可应用于加快优良种畜的繁殖
14 ．下列有关“DNA 精提取与鉴定 ”实验原理的叙述正确的是 ( )
A．DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度，随 NaCl 溶液浓度的降低而减小
B．利用 DNA 不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到 DNA
C．DNA 是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂
D．在沸水中，DNA 遇二苯胺会出现紫色反应
15.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是( )
A.目的基因导入受体细胞后即可成功表达
B.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶、运载体
C.限制酶能识别特定的脱氧核苷酸序列
D.基因工程具有较大危害性，所以应该禁止进行转基因技术
16.下列属于基因运载体所必须具有的条件是( )
①具有某些标记基因 ②具有多种限制性内切酶
③具有环状的DNA分子 ④能够在宿主细胞内复制
A. ①③ B. ②④ C. ①④ D. ③④
17.下列有关“DNA粗提取与鉴定 ”实验的叙述，正确的是( )
A.提取的DNA量偏少可能是因为选用了新鲜幼嫩的植物材料
B.可利用DNA溶于酒精而其他物质的特性提纯DNA
C.鉴定DNA时将丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴
D.植物材料需先用洗涤剂破坏细胞膜，释放DNA
18.下列生物工程技术应用的组合错误的是( )
A.转基因牛培育：基因工程+早期胚胎培养+胚胎移植
B.克隆牛培养：动物细胞培养+核移植+早期胚胎培养+胚胎移植
C.试管牛：动物细胞培养+胚胎移植
D.植物体细胞杂交：酶工程（酶降解）十体细胞杂交+植物组织培养
二、多项选择题：本部分包括 5 题，每题 3 分，共计 15 分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得 3 分，选对但不全的得 1 分，错选或不答的得 0 分。
19．在制作泡菜并检测亚硝酸盐含量的实验中，下列说法错误的是
A．随着泡制时间的延长，泡菜中的亚硝酸盐含量逐渐降低
B．该实验中利用的乳酸菌是一种好氧菌
C．制作过程中温度过高，食盐用量过低，都易造成细菌大量繁殖
D．可通过比色法测定泡菜中亚硝酸盐的含量
20．下图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图。下列相关叙述正确的是( )
A．改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响
B．果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸
C．果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关
D．气体入口与气体出口可以交换使用
21．通过体细胞核移植技术培育克隆牛的过程中，涉及的操作是
A．用显微操作技术处理次级卵母细胞，去除细胞核
B．将精子放入适宜的培养液中培养至可以受精
C．用物理或化学方法激活重构胚，使其完成发育进程
D．选择合适时期的胚胎进行移植，使其发育成完整个体
22．为提高一株石油降解菌的净化能力,将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上, 以致死率为 90%的辐照剂量诱变处理。下列叙述不合理的是( )
A．将培养基分装于培养皿中后灭菌,可降低培养基污染的概率
B．涂布用的菌浓度应控制在30~300 个/ mL
C．需通过预实验考察辐照时间对存活率的影响,以确定最佳诱变时间
D．挑取培养基上长出的较大单菌落,纯化后进行降解效率分析
23．科学家将4个关键基因导入已分化的肌肉细胞中并表达，使这个细胞成为多能干细胞(iPS细胞)，该实验过程如图所示。下列有关叙述正确的是( )
A．应用该技术可提高器官移植的成功率
B．iPS 细胞所带遗传信息与肌肉细胞相同
C．关键基因表达使细胞功能趋向专门化，增加了细胞的分化程度
D．图示过程体现了 iPS 细胞的全能性
三、非选择题：本部分包括 5 题，每空 1 分，共计 49 分。
24. （9 分）泡菜传统自然发酵方式的发酵周期相对较长，生产效率低。研究人员欲从泡菜中分离筛选出高产酸乳酸菌，为泡菜工厂化生产提供依据。请分析并回答下列问题：
（1）配制 CaCO3-MRS 培养基。成分：蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、磷酸氢二钾、葡萄糖、琼脂粉、碳酸钙等。
①根据物理性质分类，该培养基属于 培养基，为乳酸菌种提供氮源的成分是
②培养过程中，乳酸菌产生乳酸溶解碳酸钙，形成溶钙圈，便于 。
（2）高产乳酸菌的培养与分离。其部分实验目的与具体操作如下所示，请完成下表。
实验目的 简要操作过程
梯度稀释 在无菌条件下取样品中泡菜汁 1mL ，加入① 进行 10 倍梯度稀释，依次得到 10-5 、10-6 、10-7 的稀释液。
接种培养 取上述稀释液 1mL 分别加入无菌培养皿中，然后将 CaCO3-MRS 培养基浇注混匀冷凝后，将培养皿② , 并连续培养 48h。
分离纯化 挑取③ 进行平板划线培养。
长期保存 将菌种加入 30％的甘油中在-20℃保存。
（3）高产酸乳酸菌的鉴定。提取筛选乳酸菌的 DNA ，通常采用 16SrDNA（编码 rRNA 对 应的 DNA 序列）的通用引物进行 PCR 扩增并测序鉴定。以 16SrDNA 作为细菌分类依据的原因是不同菌属的 16SrDNA 具有 （4）高产酸乳酸菌发酵效果检测。研究人员研究了两种高产酸乳酸菌（乳酸菌 A50f7 和A50b9）在发酵泡菜过程中 pH 的变化，结果如下图所示。据图分析，该研究实验的自变量是 ，可以看出，接种两种乳酸菌效果相近，其相近之处表现为均能快速降低 ，且接种量越大作用效果越明显。
25.（9 分）科研人员通过转基因技术培育出超量表达 P 蛋白的转基因甜玉米。在超量表达P 基因载体的构建中，含 P 基因的DNA 片段以及 Ti质粒的酶切位点如下图所示，其中强启动子能驱动基因的持续转录。
请回答下列问题。
限制酶 识别序列
Cla Ⅰ 5 ′AT↓CGAT3′
BamHⅠ 5 ′G↓GATCC3′
HindⅢ 5 ′A↓AGCTT3′
EcoRⅠ 5 ′G↓AATTC3′
Kpn Ⅰ 5 ′GGTAC↓C3′
Sac Ⅰ 5 ′GAGCT↓C3′
（1）以RNA 为模板，通过 RT-PCR 技术可获取P基因。进行RT–PCR 时一般要加入4种 脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）而不是脱氧核苷酸，其原因是dNTP能够为子链延伸过程中提供 和 ，同时需加入的酶有 。
（2）在构建基因表达载体时，应优先选用的限制酶是 和 ， 这样操作不仅使P基因在玉米植株中超量表达，还可利用T-DNA的 特性，最终使 P 基因 。
（3）将农杆菌液浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养时，培养基中需加入 ，筛选出的愈伤组织经再分化过程形成丛芽，最终获得转基因玉米植株。
（4）对转基因再生玉米植株进行鉴定时发现，有些植株虽有 P 基因，但几乎没有 P 蛋白，造成该现象的原因可能有 。
26.（10分）抗体药物偶联物（ADC）是一类通过连接头将细胞毒性药物连接到单克隆抗体的靶向生物药剂，能对靶向细胞进行选择性杀伤。第三代 ADC 具有更低的偶联脱落速度，更高的药物活性以及低抗原水平下的高细胞活性。ADC 通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。
（1）ADC 药物所需抗体分子的基本要求是优先结合靶细胞上的抗原，从而将细胞毒药物浓 缩在肿瘤部位，即单克隆抗体要具有 的特点。药物在靶细胞内释放并起作用，同时诱导 破裂，加速了癌细胞的凋亡。
（2）我国科兴及北京生物两款新冠灭活疫苗均使用 Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞系）进行病毒扩增培养（见图）。
①动物细胞工程常用的技术手段有多种，其中
是其他动物细胞工程技术的基础。Vero细胞的培养应在培养箱中进行，箱内的气体环境条件为_______________
②Vero 细胞的传代培养过程中需要使用 酶使细胞分散，并在合成培养基中加入 等天然成分。此外，在培养过程中，应定期更换培养液，目的是 。
③将已对新冠病毒发生免疫的 B 淋巴细胞和 Vero细胞系获得杂交细胞，再经过 筛选、克隆化培养和 检测，获得产生特定抗体的 ，用以生产单克隆抗体。
27（10 分）如图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题
（1）A细胞是 ，为了一次获得多个细胞A，需向供体内注射
（2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是
（3）在体外培养细胞用于时，除了给予一定量的 O2 进行 外，还需要提供 CO2 气体以____ __。
（4）①指的是 。进行胚胎分割时，应选择发育到 时期的胚胎进行操作，在对上图的胚胎进行分割时，应注意 。
（5）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 。
（6）为了保证供、受体的生理状态相同，用相关激素进行 处理。
28．(11 分)野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利 用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株。用一定剂量的紫外线处理黑芥原 生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，流程如下图。据图回答：
(1)该过程用到的细胞工程技术有 、 。
(2)过程①所需的酶是 ，过程②中PEG的作用是 ，经过②操作后，需筛选出融 合的杂种细胞，显微镜下观察融合的活细胞中有黑芥叶肉细胞的 (填写细胞器名称)存在可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的 以维持原生质体的形态和活性。原生质体经过 再生，进而脱分化形成 ，（需要/不需要） 光照条件。
(4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片，在 显微镜下观察并比较染色体的形态和 。对杂种植株进行 的接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。海头高级中学2022-2023学年高二下学期5月测试七生物学试题
参考答案
单选36分，多选15分
1-5BCCDD 6-10DCADC 11-15BABBC 16-18CDC
19-23AB ABC ACD AB AC
填空49分
24、（9分）（1）①.固体 蛋白胨、牛肉膏、酵母粉 ②. 筛选高产酸乳酸菌
（2）①. 1ml无菌水 ②. 倒置 ③. 有明显溶钙圈
（3）差（特）异性
（4）乳酸菌种类和接种量（发酵时间） 泡菜发酵过程中的pH值
25、（9分）（1）①.能量 ②.原料 ③.逆转录酶（和Taq酶）
（2） ①. BamHI ②. Sac I ③. 可转移 ④. 整合到玉米细胞染色体上
（3）潮霉素 （4）没有表达（只要符合要求就给分）
26、（10分） （1） ①. 特异性强、灵敏度高、可大量制备 ②. 溶酶体
①. 动物细胞培养 ②. 5%CO2、95%空气 ③. 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶) ④. 血清（血浆) ⑤. 清除代谢废物;防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 ⑥. 选择培养基 ⑦. 专一抗体 ⑧. 杂交瘤细胞
27.（10分）
（1）（次级）卵母细胞 促性腺激素
（2）诱导精子获能。
（3）细胞代谢 维持培养液的 pH。
（4）内细胞团 桑葚胚或囊胚 将内细胞团均等分割。
（5）受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应
（6）同期发情
28.（11分）
(1)植物组织培养 植物体细胞杂交
(2) 纤维素酶和果胶酶 促进(或诱导)原生质体的融合 叶绿体
(3)渗透压 细胞壁 愈伤组织 不需要
(4)数目 黑腐病
