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吉林省吉林市十二中2021-2022学年高二下学期期中生物试题
一、单选题
1．（2022高二下·吉林期中）消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法正确的是（ ）
A．微生物接种技术的方法都相同，其核心就是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度
B．在 100 ℃下煮沸 5～6 min 属于消毒方法，可杀死绝大多数微生物细胞
C．在灭菌后倒平板前，加入一定量的缓冲液以调节培养基的 pH
D．高压蒸汽灭菌，只有当压力表的压力降到一个标准大气压时，才能打开盖子
【答案】B
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】A、微生物接种技术的方法各不相同，但核心都是要防止杂菌污染，保证获得纯净的培养物，A错误；
B、在100℃煮沸5～6分钟属于煮沸消毒法，可杀死大部分微生物，B正确；
C、为防止污染，应在灭菌前，加入一定量的缓冲液以调节培养基的pH值，再灭菌，C错误；
D、高压蒸汽灭菌，只有当压力表的压力降到零时，才能打开排气阀，拧松螺栓，打开盖子，D错误。
故答案为：B。
【分析】消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），而灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）。消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。
2．（2022高二下·吉林期中）下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述，正确的是（ ）
A．倒好的培养基和培养皿要进行消毒处理
B．应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．为防止微生物污染，要在酒精灯火焰旁进行操作
D．倒好培养基的培养皿，要立即将平板倒过来放置
【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、培养基和培养皿要进行灭菌处理，而不是消毒处理，A错误；
B、倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20 mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，不能打开皿盖，B错误；
C、酒精灯火焰旁存在无菌区，为防止微生物污染，要在酒精灯火焰旁进行操作，C正确；
D、倒好培养基的培养皿，等培养基冷凝后将平板倒过来放置，D错误。
故答案为：C。
【分析】培养基配制时的注意事项：
①全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板．可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板．操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基．
③平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染．
④在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生．
3．（2022高二下·吉林期中）微生物接种方法很多，平板划线法是最常用的一种，下列操作方法正确的是（ ）
A．在该操作过程中只需要灼烧接种环5次
B．平板划线后培养微生物时要倒置培养
C．可以将第5区域的划线与第1区域的划线相连
D．划线操作时，如接种环不慎划破培养基，可以继续正常操作
【答案】B
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、在每次划线前后均需要对接种环灼烧灭菌，因此在该操作过程中需要灼烧接种环6次，A错误；
B、用平板培养基培养微生物时，为防止水蒸气凝集滴入培养基造成干扰或污染，应将平板倒过来放置培养，B正确；
C、划线时要避免最后一区的划线与第一区线连。因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，C错误；
D、划线操作时，如接种环不慎划破培养基，则该培养基将不能继续使用，D错误。
故答案为：B。
【分析】平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。
其操作步骤是：
①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。
③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。
④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。
⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线．重复上述过程，完成三、四、五区域内划线．注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。
⑧将平板倒置放在培养箱中培养。
4．（2022高二下·吉林期中）下图表示培养和纯化 X 细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（ ）
A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒处理
B．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置
C．步骤②应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后各划线区均出现单个菌落
D．步骤③划线结束后在培养皿盖上做好标注
【答案】A
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、为了避免杂菌污染，对实验操作的空间、操作者的衣着和手需要进行消毒处理，A正确；
B、倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；
C、各划线区不一定都出现单个菌落，C错误；
D、步骤③划线结束后需在培养基皿底标注菌种及接种日期等信息，而不是在皿盖上做标注，D错误。
故答案为：A。
【分析】1、平板划线的操作的基本步骤是：
（1）右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
（2）左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
（3）烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
（4）将平板倒置，放入培养箱中培养。
2、题图分析：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，而后通过培养可获得单菌落。
5．（2022高二下·吉林期中）在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行。下图甲是醋酸发酵装置，乙是培养液pH变化曲线图，下列叙述正确的是（ ）
A．发酵初期不通气，溶液中没有气泡产生
B．中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵
C．后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度
D．图乙中能正确表示pH变化的曲线是③
【答案】B
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、若发酵初期不通入气体，由于锥形瓶中含有少量空气，溶液中酵母菌也可通过有氧呼吸产生二氧化碳，即使没有空气，酵母菌也能通过无氧呼吸产生二氧化碳，因此有气泡产生，A错误；
B、中期可以闻到酒香，说明有酒精产生，即进行了酒精发酵，B正确；
C、由于醋酸菌是嗜氧菌，也是嗜温菌，因此后期接种醋酸菌，需通气并适当升高温度，C错误；
D、醋酸发酵过程中，发酵液的pH会进一步降低，因此图乙中能正确表示pH变化的曲线是②，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
6．（2022高二下·吉林期中）下列关于果酒和果醋制作的叙述，不正确的是（ ）
A．果酒和果醋的发酵菌种不同，代谢类型也不同
B．在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的
C．温度对酵母菌进行的酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌进行的醋酸发酵的影响不大
D．制作果酒和果醋时都可用体积分数为70%的酒精对发酵瓶进行消毒
【答案】C
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、制作果酒的菌种是酵母菌，是兼性厌氧菌，制作果醋的菌种是醋酸菌，是好氧细菌，A正确；
B、在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，B正确；
C、温度对酵母菌的酒精发酵和醋酸菌的醋酸发酵的影响都很大，C错误；
D、制作果酒和果醋时，发酵瓶要清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒，或用洗洁精洗涤，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
7．（2022高二下·吉林期中）家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节，在发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长。当环境中的乳酸积累到一定浓度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖。下面对这些现象的描述，错误的是（ ）
A．在乳酸菌发酵的初期，种内关系主要表现为种内互助
B．进入乳酸菌发酵的中期，由于营养物质的消耗和代谢产物的积累，种内竞争趋于激烈
C．密闭的发酵环境使乳酸菌在种间竞争中占据优势
D．进入发酵中期，泡菜坛内各种微生物的抵抗力维持在较高的水平
【答案】D
【知识点】泡菜的制作
【解析】【解答】A、在发酵初期，乳酸菌较少，乳酸菌数目增加较快，种内关系主要表现为种内互助，A正确；
B、进入乳酸菌发酵的中期，随着营养物质的消耗，代谢产物积累，种内竞争趋于激烈，B正确；
C、由于发酵液的pH降低，不再适于其他微生物生存，所以密闭的发酵环境使乳酸菌在种间竞争中占据优势，C正确；
D、进入发酵中期，由于乳酸的大量积累，泡菜坛内大部分微生物已严重不适应环境，各种微生物的抵抗力明显下降，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、泡菜发酵的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。
2、泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为10：1的比例配制盐水，将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。
8．（2022高二下·吉林期中）现在市场上流行一种“精酿”啤酒，它的制作工艺与普通啤酒有所不同，下列有关“精酿”啤酒和普通啤酒的叙述，不正确的是（ ）
A．“精酿”啤酒的原料和普通啤酒不同，“精酿”啤酒只使用麦芽、啤酒花、酵母菌和水，普通啤酒除了麦芽、啤酒花、酵母菌和水以外，还有玉米等物质
B．“精酿”啤酒由于原料主要是麦芽，麦芽汁的浓度较高，口味较为浓郁
C．“精酿”啤酒不添加食品添加剂，虽然产量低，价格高，但它也有一定的市场
D．“精酿”啤酒和普通啤酒样可以直接放心饮用
【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用；果酒果醋的制作
【解析】【解答】A“精酿”啤酒的原料和普通啤酒不同，“精酿”啤酒只使用麦芽、啤酒花、酵母菌和水，普通啤酒除了麦芽、啤酒花、酵母菌和水以外，还有玉米、大米、淀粉等物质，A正确；
B“精酿”啤酒由于原料主要是麦芽，麦芽汁的浓度较高，口味较为浓郁，B正确；
C、“精酿”啤酒不添加食品添加剂，虽然产量低，价格高，但它也有一定的市场，C正确；
D、“精酿”啤酒由于不进行过滤和消毒，所以在安全方面可能不如普通啤酒，需检测后饮用，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、“精酿”啤酒不添加食品添加剂，纯麦芽酿造，从这个角度看，“精酿”啤酒饮用起来更健康。但它不进行过滤和消毒，一旦被杂菌污染，也会危害人体健康。“精酿”啤酒由于只是使用麦芽、啤酒花、酵母菌和水进行酿造，发酵时间较长，使得它的麦芽汁浓度更高，口味更加浓郁，虽然产量低、价格高，但却有市场需求；而大规模生产的“工业”啤酒，为了节约生产成本，除了上述原料外，还添加了大量的大米、玉米和淀粉作为替代品，发酵时间也只有7天左右，使得它的麦芽汁浓度较低，口味清淡，但其生产成本低、产量高、价格低，有着更大的市场需求，根据消费者的不同需求，大规模生产和小规模制作都有其存在的必要性。
9．（2022高二下·吉林期中）下列关于菌种的选育的叙述，不正确的是（ ）
A．自然选育菌种费时且盲目性大
B．诱变育种原理的基础是基因突变
C．采用基因工程的方法可构建工程菌
D．传统发酵技术和现代工业发酵都需要选育菌种
【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、自然选育菌种要到相应的环境从众多的微生物中进行筛选所以费时且盲目性大，A正确；
B、菌种的选育可以采用诱变育种的方法，其原理是基因突变，B正确；
C、可以采用基因工程定向构建工程菌的方法获得，C正确；
D、现代工业发酵需要选育菌种，传统发酵技术一般利用自然界中的菌种，不需要选育菌种，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
2、菌种的选育方式有：自然选育、杂交育种、基因工程育种。
10．（2022高二下·吉林期中）下列关于发酵工程的叙述，正确的是（ ）
A．发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵
B．发酵工程的产品就是微生物的各种代谢物
C．发酵过程中发酵条件温度的控制主要是通过发酵罐壁散热
D．发酵过程要及时添加必备营养成分来延长菌体生长稳定期时间，便于得到更多的发酵产物
【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、发酵工程与传统发酵技术都要利用微生物来进行发酵，A错误；
B、发酵工程的产品有两大类：一类是菌体本身，另一类是代谢物，B错误；
C、发酵过程中微生物代谢产热和搅拌产热，使发酵液温度升高，通过发酵罐壁散热达不到散热效果，主要通过向冷却夹层通入冷水来散热降温，C错误；
D、发酵过程为保证获得更多的发酵产物，应及时向发酵罐中添加必备营养成分来延长菌体生长稳定期时间，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。
（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来。
（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
11．（2022高二下·吉林期中）下列关于果酒，果醋制作的说法，错误的是（ ）
A．用酵母菌发酵酿制葡萄酒，可用酸性重铬酸钾检测酒精的产生
B．在果醋发酵过程中，适时通过充气口充入氧气，有利于醋酸菌的代谢
C．控制好温度和酸碱度既有利于目的菌的繁殖，又可抑制杂菌的生长
D．在制作葡萄酒的过程中，酵母菌无氧呼吸产生乳酸使发酵液的pH下降
【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、用酵母菌发酵酿制葡萄酒，可用酸性重铬酸钾检测酒精的产生，酒精和酸性重铬酸钾反应呈灰绿色，A正确；
B、醋酸菌是一种好氧细菌，所以在果醋发酵过程中，适时通过充气口充入氧气，有利于醋酸菌的代谢，B正确；
C、控制好温度和酸碱度给目的菌创造适宜的环境条件，既有利于目的菌的繁殖，又可抑制杂菌的生长，C正确；
D、酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，不产生乳酸，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
12．（2016高二下·河北期中）某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验．下列相关叙述正确的是（ ）
A．酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高
B．先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵
C．与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好
D．适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】解：A、醋酸菌是嗜热菌，果醋发酵所需的最适温度较高，A错误；
B、进行果酒、果醋发酵实验，要先进行隔绝空气果酒发酵，再供氧进行果醋发酵，B错误；
C、人工接种菌种品质更好，且不容易存在杂菌污染，C错误；
D、适当加大接种量，让菌体快速形成优势菌群，可以抑制杂菌生长，提高发酵速率，D正确．
故选：D．
【分析】酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵．在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵.20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性．
醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸．醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃．
13．（2021高二下·武功期中）下图表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养形成植株的过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A．①阶段体现了细胞的全能性
B．②阶段需生长素，而①阶段需细胞分裂素
C．①阶段细胞进行脱分化
D．此兰花经花药培养所得植株为二倍体
【答案】C
【知识点】植物组织培养的过程；组织培养基的成分及作用
【解析】【解答】A、①阶段只是形成愈伤组织，并没有形成完整个体或分化成其他各种细胞，因此不能体现细胞的全能性，A错误；
B、①为脱分化过程，②为再分化过程，这两个过程都需要生长素和细胞分裂素，B错误；
C、①阶段细胞进行脱分化，C正确；
D、此兰花经花药培养所得植株为单倍体，D错误。
故答案为：C。
【分析】分析题图：图示表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养形成植株的过程，其中①为脱分化过程，②为再分化过程，③为植物个体发育过程。
14．（2022高二下·吉林期中）实验人员利用矮牵牛(二倍体，2n＝14)的红色花瓣细胞(液泡呈红色)与枸杞(四倍体，4n＝48)叶肉细 胞，制备了相应的原生质体，并诱导其融合，经筛选、培养获得杂种植株。下列有关叙述错误的是（ ）
A．获得该杂种植株打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种
B．可利用电融合法、离心法等方法诱导原生质体融合
C．可利用光学显微镜观察，筛选出杂种原生质体
D．若原生质体均为两两融合，则融合后的细胞中染色体数目均为 62 条
【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】A、获得该杂种植株的方法是植物体细胞杂交技术，其最大的优点是打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种，A正确；
B、诱导植物原生质体融合时，可利用电融合法、离心法等方法诱导原生质体融合，B正确；
C、杂种原生质体的染色体数目是两种细胞染色体数目之和，可通过光学显微镜观察到染色体数目，从而筛选出杂种原生质体，C正确；
D、若原生质体均为两两融合，则会形成3种细胞，即矮牵牛细胞自身融合的细胞、枸杞细胞自身融合的细胞和杂种细胞，所以融合后的细胞中染色体数目为28条或96条或62条，D错误。
故答案为：D。
【分析】植物体细胞杂交技术：
1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
2、过程：
（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。
（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。
（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。
（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。
3、意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。
15．（2022高二下·吉林期中）下列有关植物组织培养和动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．动物细胞培养和植物组织培养所用都是固体培养基
B．植物韧皮部细胞和小鼠杂交瘤细胞经离体培养均能获得新个体
C．动物细胞培养和植物组织培养都必须在95%空气加5%CO2的混合气体条件下进行
D．植物组织培养技术可用于突变体的培育，动物细胞培养技术可用于筛选抗癌药物
【答案】D
【知识点】植物组织培养的过程；动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、动物细胞培养所用的是液体培养基，植物组织培养所用的是固体培养基，A错误；
B、植物韧皮部细胞经离体培养能获得新个体，小鼠杂交瘤细胞经离体培养不能获得新个体，B错误；
C、动物细胞培养必须在95%空气加5%CO2的混合气体条件下进行，植物组织培养不需要，C错误；
D、植物组织培养技术可用于突变体的培育，动物细胞培养技术可用于筛选抗癌药物，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、动物培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒-一定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。
（2）营养成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。
培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的 CO2主要作用是维持培养液的pH。
2、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
3、在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽．生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成．比值适中时，促进愈伤组织的生长。
4、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
16．（2022高二下·吉林期中）“三亲婴儿”技术是指取出患病母亲卵子的核，导入女性捐赠者的去核卵母细胞中，再将重构细胞和父亲的精子结合。下列有关“三亲婴儿”的叙述，不正确的是（ ）
A．该技术可以有效降低生下线粒体遗传疾病婴儿的概率
B．女性捐赠者提供的遗传物质不遵循孟德尔遗传规律
C．与正常的“双亲婴儿”相比，“三亲婴儿”核 DNA 增加
D．该技术对 DNA 的修改能够遗传，涉及伦理争议
【答案】C
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】A、线粒体遗传疾病是通过母亲遗传给后代的，由题意可知，与“三亲婴儿”发育有关的重构细胞的细胞质主要来自于女性捐赠者，所以该技术可以有效降低生下线粒体遗传疾病婴儿的概率，A正确；
B、女性捐赠者提供的遗传物质来自于女性捐赠者的去核卵母细胞的细胞质中，所以其提供的遗传物质不遵循孟德尔遗传规律，B正确；
C、“三亲婴儿”的核 DNA与正常的“双亲婴儿”的核DNA一样多，均是一半来自父亲、一半来自母亲，C错误；
D、该技术对 DNA 的修改能够遗传，“三亲婴儿”的遗传物质来自一个父亲、两个母亲，涉及伦理争议，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、动物体细胞核移植：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。
2、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
17．（2022高二下·吉林期中）下图为哺乳动物早期胚胎发育的过程，下列有关叙述不正确的是（ ）
A．过程a和b使胚胎中有机物的含量减少
B．Ⅰ、Ⅱ时期的胚胎中都含有全能细胞
C．胚胎移植必须使用处于Ⅱ或Ⅲ时期的胚胎
D．图示过程中，部分细胞中的遗传物质可能发生改变
【答案】C
【知识点】动物胚胎发育的过程
【解析】【解答】A、根据以上分析已知，图中过程a表示卵裂形成桑椹胚，过程b表示桑椹胚形成囊胚，这两个过程细胞均需要消耗能量，故两个过程中胚胎中的有机物的含量均减少，A正确；
B、Ⅰ表示桑椹胚，含有的所有细胞都是全能细胞，Ⅱ表示囊胚，含有的内细胞团细胞为全能细胞，B正确；
C、胚胎移植必须使用处于Ⅰ桑椹胚或Ⅱ囊胚时期的胚胎，C错误；
D、图示过程中，细胞进行有丝分裂，而在间期DNA复制过程中，部分细胞中的遗传物质可能发生改变，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎，之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能，属全能细胞；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
2、据图分析，Ⅰ表示桑葚胚，Ⅱ表示囊胚，Ⅲ表示原肠胚，过程a表示卵裂形成桑葚胚，过程b表示桑葚胚形成囊胚，c表示囊胚形成原肠胚的过程。
18．以下关于胚胎分割移植的说法不正确的是（ ）
A．就目前的胚胎分割移植而言，产生的同卵双胎较多，同卵多胎成功率较低
B．胚胎分割所需要的主要仪器设备为实体显微镜和显微操作仪
C．可在囊胚阶段将胚胎随机分割成两份或多份，然后移植
D．用分割针将桑椹胚均分成两部分，可直接将裸半胚移植入受体
【答案】C
【知识点】胚胎分割
【解析】【解答】解：A、就目前的胚胎分割移植而言，以二分胚的分割和移植效率最高，同卵多胎成功率较低，A正确；B、胚胎分割所需要的主要仪器设备为实体显微镜和显微操作仪，B正确；C、对囊胚阶段的胚胎进行分割时，需要将内细胞团均等分割后移植，C错误；D、用分割针将桑椹胚均分成两部分，可直接将裸半胚移植入受体，D正确．
故选：C．
【分析】胚胎分割：1、特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一．目前以二分胚的分割和移植效率最高.2、主要仪器设备：实体显微镜和显微操作仪3、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.4、存在问题：胚胎分割的分数越多，操作的难度越大，移植的成功率也越低．
19．（2022高二下·吉林期中）研究人员用下图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是（ ）
A．构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindIII两种限制酶
B．使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组
C．能在添加四环素的培养基上生存的一定是含有重组质粒的大肠杆菌
D．利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙
【答案】C
【知识点】基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】A、选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都破坏，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，A正确；
B、酶切后的质粒和目的基因片段要用DNA连接酶连接，构建重组载体，B正确；
C、能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌，C错误；
D、PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙，D正确。
故答案为：C。
【分析】基因工程的基本操作程序：
第一步：目的基因的获取；
第二步：基因表达载体的构建（核心）
1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
第三步：将目的基因导入受体细胞
1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2、常用的转化方法：
将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术，方法的受体细胞多是受精卵。
第四步：目的基因的检测和表达
将目的基因导入细菌：感受态细胞法：用Ca2+处理细胞使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。
2、其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交（DNA-RNA）技术。
3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原—抗体杂交技术。
20．（2022高二下·吉林期中）下列有关植物组织培养技术的叙述，不正确的是（ ）
A．利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体
B．经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞不具有细胞全能性
C．利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株
D．培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向
【答案】B
【知识点】植物细胞的全能性及应用；植物组织培养的过程；植物细胞工程的应用
【解析】【解答】A、利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体，A正确；
B、经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞具有细胞全能性，在一定条件下可培育成植株个体，B错误；
C、利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株，C正确；
D、培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、植物组织培养过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体进一步发育成植株。
2、植物组织培养技术有广泛的应用：植物繁殖的新途径（快繁技术、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
3、植物细胞表现全能性的条件：
①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
21．（2022高二下·吉林期中）中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是（ ）
A．卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法
B．兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质
C．重组胚胎需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程
D．在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现细胞的分化
【答案】A
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】A、卵母细胞去核的方法有显微直接去除、紫外光短时间照射、化学物质处理等方法，A错误；
B、兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质，故可用去核后的兔子卵母细胞作为受体细胞，B正确；
C、去核的卵母细胞与供体细胞通过电刺激后融合，供体核进入受体卵母细胞，构建成重组胚胎，融合后的重组胚胎，需要用物理或化学的方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确；
D、胚胎发育过程中早期胚胎具有全能性，还没分化，囊胚期开始出现细胞分化，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、细胞全能性是指具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。植物细胞具有全能性，动物细胞的细胞核具有全能性。
2、早期胚胎发育的几个阶段：
（1）桑椹胚：指胚胎细胞数目达到32个左右时，形似桑椹，这一阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。
（2）囊胚：①细胞开始分化，其中的内细胞团分化成各种组织；滋养层细胞发育成胎膜，胎盘；
②胚胎内部出现了囊胚腔；
③孵化：囊胚扩大导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来的过程。
（3）原肠胚：囊胚进一步发育，内细胞团的表层细胞形成外胚层，下方细胞形成内胚层，这时的胚胎称为原肠胚，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
22．（2022高二下·吉林期中）动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，A，B，C表示现代工程技术，①、②、③表示其对应的结果，下列说法正确的是（ ）
A．若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性
B．若c是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表现型一定相同
C．①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物
D．若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
【答案】D
【知识点】动物细胞核移植技术；胚胎分割；体外受精
【解析】【解答】A、通过核移植技术获得动物个体只能证明动物细胞的细胞核具有全能性，A错误；
B、胚胎分割技术是将一个囊胚或者桑椹胚分割成多份，获得多个后代个体，属于无性繁殖系，获得的个体的基因型一定相同，但是表现型是基因型和环境条件共同作用的结果，B错误；
C、珍稀的或存量少的雌性动物属于保护动物，不能作为生物工程的受体，应该用本地中数量较多的雌性动物，C错误；
D、若b是体外受精技术，则②为试管动物，这为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、动物细胞核移植技术表明动物细胞核具有全能性。
2、体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。
3、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
4、表现型=基因型+外界环境。
23．（2022高二下·吉林期中）下面为克隆羊的培育流程图，相关说法不正确的是（ ）
A．卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到减数第一次分裂中期
B．从供体羊中取得的上皮细胞需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理
C．用微型吸管将卵母细胞的细胞核和第一极体吸出
D．代孕母羊和供体羊需经过同期发情处理
【答案】A
【知识点】动物体细胞克隆
【解析】【解答】A、从屠宰场中收集的卵母细胞，需在体外培养到减数第二次分裂中期，A错误；
B、动物细胞培养时，需用胰蛋白酶处理组织使其分散成单个细胞，B正确；
C、核移植过程中，通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核，除了将细胞核吸除外，往往还会将第一极体一并吸出，C正确；
D、在胚胎移植的过程中，将重组胚胎发育到一定阶段，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，即代孕母羊和供体羊需经过同期发情处理，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、哺乳动物体外受精的过程是卵母细胞的收集和培养、精子的收集和获能、受精。
2、对不同动物，采取卵母细胞的方法不同：
（1）法一：实验动物（鼠、兔等）和家畜（猪、羊等）用促性腺激素处理，使其超数排卵，从输卵管直接冲取；
（2）法二：大家畜和大型动物（牛），屠宰母畜卵巢中获取；
（3）法三：活体采卵，对充分发挥优良母畜的繁殖潜力具有重要意义。
24．（2022高二下·吉林期中）某制药公司研制了基于DNA的个性化新生抗原靶向疫苗，并用于相关癌症治疗。该公司依据不同癌细胞的特点合成出能编码一个或多个新生抗原的DNA片段。该DNA片段导入人体细胞后，可产生相应的新抗原，新抗原能激活机体的免疫系统，诱导入体产生特异性免疫应答。据此判断，下列叙述错误的是（ ）
A．获取新生抗原基因可在癌细胞内提取相应的mRNA，通过反转录获取cDNA
B．由mRNA在细胞内逆转录获取的cDNA中含内含子
C．利用PCR技术扩增新生抗原基因时需要设计2种引物
D．检测受体细胞中的新生抗原基因是否成功表达可采用抗原-抗体杂交技术
【答案】B
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】A、获取抗原决定基因时，通常是在肿瘤病变细胞内提取mRNA，通过逆转录酶的作用获取cDNA用于PCR扩增，A正确；
B、利用mRNA在逆转录酶的催化作用下形成cDNA，其结构中不含内含子序列，B错误；
C、利用PCR技术扩增新生抗原基因时，由于DNA是两条反向平行的双链结构，用两种引物才能确保DNA两条链同时扩增，C正确；
D、新生抗原基因表达的产物是蛋白质，可用抗原-抗体杂交技术检测，D正确。
故答案为：B。
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
25．（2022高二下·吉林期中）T4溶菌酶在高温时易失去活性。研究人员对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使T4溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成一个二硫键，提高了酶的耐热性。下列相关叙述正确的是（ ）
A．T4溶菌酶耐热性提高的原因是组成该酶的氨基酸种类和数量发生了改变
B．T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程，自然界中的酶都可通过蛋白质工程进行改造
C．蛋白质工程与中心法则的流动方向一致，即DNA→mRNA→蛋白质
D．若高温使蛋白质分子的空间结构发生改变，蛋白质的功能也会受到影响
【答案】D
【知识点】蛋白质工程
【解析】【解答】由题意可知，T4溶菌酶耐热性提高的原因是组成该酶的氨基酸种类及空间结构均发生了改变，A错误；T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程，酶大多是蛋白质，少数是RNA，蛋白质工程只能用于改造蛋白质类，B错误；蛋白质工程与中心法则的流动方向相反，C错误；若高温使蛋白质分子的空间结构发生改变，蛋白质的功能也会受到影响，D正确。故答案为：D。
【分析】蛋白质工程概念及基本原理
（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）
（2）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。
（3）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。
（4）基本途径：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。
26．（2022高二下·吉林期中）下列关于胚胎移植技术应用的叙述，错误的是（ ）
A．应用胚胎移植可大大缩短受体本身的繁殖周期
B．应用胚胎移植可以减少优良种畜的引进，丰富品种资源
C．目前胚胎移植技术在人类中主要用于解决某些不孕症患者的生育问题
D．胚胎移植可充分发挥优良母牛的繁殖潜力，相同时间内可得到较多的良种牛犊
【答案】A
【知识点】胚胎移植
【解析】【解答】胚胎移植可缩短供体本身的繁殖周期，充分发挥优良个体的繁殖潜力，但不能缩短受体本身的繁殖周期，A错误；应用胚胎移植可以减少优良种畜的引进，丰富品种资源，B正确；胚胎移植技术除了快速繁育良种家畜外，还可用于克隆哺乳动物、培育转基因动物、保存珍稀哺乳动物、保护生物多样性、克服人类不孕等，C正确；给受体母牛植入多个胚胎，可增加双胞胎和多胞胎的比例，提高生产能力，D正确。
【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体；用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
2、胚胎移植的意义：加速育种工作和品种改良；大量节省购买种畜的费用；一胎多产；保存品种资源和濒危物种；可充分发挥优秀个体的繁殖潜力（缩短繁殖周期，增加一生繁殖的后代数量）。
27．（2020高三上·沈阳期中）科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚中获得转基因鸡，目的蛋白在输卵管细胞中特异表达，并能在鸡蛋中收集。下列说法错误的是（ ）
A．可从cDNA文库获取人溶菌酶基因
B．RNA聚合酶识别鸡输卵管细胞特异表达的启动子
C．可通过农杆菌转化法将人溶菌酶基因导入鸡胚
D．鸡输卵管细胞可将人溶菌酶分泌到细胞外
【答案】C
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】A、获取目的基因可通过PCR扩增、人工合成和从基因文库中获取，A正确；
B、启动子是转录的起点，也是DNA聚合酶识别和结合位点，B正确；
C、将目的基因导入动物细胞用显微注射技术，C错误；
D、溶菌酶基因可在鸡输卵管细胞表达，合成的溶菌酶是一种分泌蛋白，可分泌到细胞外，D正确。
故答案为：C。
【分析】基因工程技术的基本步骤︰
（1）目的基因的获取︰方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建︰是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。启动子的本质是DNA片段，其为RNA聚合酶识别和结合的位点。
( 3 )将目的基因导入受体细胞∶根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定∶分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定︰抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
28．（2022高二下·吉林期中）科学家利用耐盐碱植物中的耐盐基因，培育出了耐盐水稻新品系，过程如图所示。下列说法不正确的 是（ ）
A．阶段Ⅰ、Ⅱ分别采用重组 DNA 技术、植物组织培养技术
B．可采用抗原—抗体杂交技术对耐盐基因的表达产物进行检测
C．水稻细胞内检测到耐盐基因的表达产物，并不能说明育种已成功
D．常采用显微注射法将目的基因导入水稻细胞
【答案】D
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】A、阶段Ⅰ表示将目的基因导入水稻细胞中，采用了DNA重组技术；阶段Ⅱ表示利用植物组织培养技术将水稻细胞培养成完整植株，采用了植物组织培养技术，A正确；
B、耐盐基因表达产物是蛋白质，可用抗原-抗体杂交技术检测，B正确；
C、水稻细胞内检测到耐盐基因表达产物，并不能说明育种已成功，还要进一步检测该转基因植物是否能够在盐碱地中生长，C正确；
D、通常采用农杆菌转化法将目的基因导入水稻细胞，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2、图示过程表示转基因水稻的培育过程。阶段Ⅰ表示将目的基因导入水稻细胞中，阶段Ⅱ表示利用植物组织培养技术将水稻细胞培养成完整植株。
29．（2022高二下·吉林期中）基因疫苗是将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。下列说法正确的是（ ）
A．疫苗经注射进人人体后，可被人体的浆细胞识别
B．接种基因疫苗只能预防特定微生物的感染
C．基因疫苗是指机体能识别特定的基因，从而引起机体产生免疫反应
D．利用蛋白质工程生产的蛋白质疫苗就是基因疫苗
【答案】B
【知识点】基因工程的应用；体液免疫
【解析】【解答】A、浆细胞不能识别抗原，A错误；
B、基因疫苗发挥作用是促使机体产生抗体作用于相应的抗原，这是属于特异性免疫，因此接种基因疫苗只能预防特定微生物的感染，B正确；
C、基因疫苗是将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答，C错误；
D、基因是具有遗传效应的DNA片段，利用蛋白质工程生产的蛋白质疫苗不是基因疫苗，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品；基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
2、疫苗通常是用灭活的或减毒的病原体制成的生物制品。接种疫苗后，人体内可产生相应的抗体和记忆细胞，从而对特定传染病具有抵抗力。
30．（2022高二下·吉林期中）“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不能筛选成功的是（ ）
A．在牛肉膏蛋白胨培养基中，筛选大肠杆菌
B．在以尿素为唯一氮源的固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物
C．用纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能分解纤维素的微生物
D．在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物
【答案】A
【知识点】培养基对微生物的选择作用
【解析】【解答】A、在牛肉膏蛋白胨培养基中，几乎所有细菌都能生长，不能筛选大肠杆菌，A错误；
B、在以尿素为唯一氮源的固体培养基中，只有能分解尿素的微生物才能生长，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生长，能够筛选分解尿素的微生物，B正确；
C、用纤维素为唯一碳源的培养基，只有能分解纤维素的微生物才能生长，不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长，能筛选分解纤维素的微生物，C正确；
D、在培养基中加入不同浓度的氯化钠，能够筛选出抗盐突变体植物，D正确。
故答案为：A。
【分析】选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抵制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。
选择培养基应用：
①基本的培养基通过加青霉素，实现分离纯化酵母菌、霉菌。
②培养基中加高浓度的食盐分离纯化金黄色葡萄球菌。
③无氮培养基可分离纯化固氮菌。
④不含有机碳的培养基可分离纯化自养型细菌如硝化细菌。
⑤以尿素作为唯一氮源，可选择出只能利用尿素的微生物。
⑥改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。
二、综合题
31．（2022高二下·吉林期中）研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌（目标菌），并对其进行研究。回答下列问题：
（1）在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以 为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有氮源、水、无机盐和 。
（2）进行微生物菌种纯化时，为得到单菌落，最常用的两种接种方法是 。
（3）从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上出现了A、B 和 C 三种菌落（如图1 所示）。如果要得到淀粉酶活力最高的菌株，应该选择 （填“A”“B”或“C”）菌落进一步纯化。A 菌落经检测其为硝化细菌，据此说明 A 菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是：硝化细菌可以利用 而不能利用 。
（4）经筛选获得了一菌株，能同时产两种不同的淀粉酶 X 和 Y，其相对分子量分别为 45 000 和 58 000。采用凝胶色谱法将这两种淀粉酶分离时，先洗脱出来的是淀粉酶 （填“X”或“Y”），其原因是 其 ，无法进入凝胶内部，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速率较 ，所以先洗脱出来。
【答案】（1）淀粉；琼脂（凝固剂）
（2）稀释涂布平板法和平板划线法
（3）B；空气中的二氧化碳合成糖类等有机物；淀粉
（4）Y；相对分子质量大；快
【知识点】微生物的分离和培养；蛋白质的提取和分离；培养基概述及其分类
【解析】【解答】(1)分析题意可知，该实验的目的是欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌，故在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以淀粉为唯一碳源的固体培养基上进行培养，因为是固体培养基，故除碳源外，该培养基还含有氮源、水、无机盐和琼脂（凝固剂）。
(2)最常用的两种微生物接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。
(3)分析题图可知，从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上B菌落的透明圈最大，说明B菌产生的淀粉酶活力最高，故应该选择B菌落进一步纯化。A菌落经检测其为硝化细菌，硝化细菌为自养型细菌，不能利用现成的淀粉，而能利用空气中的二氧化碳合成糖类等有机物，故A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈。
(4)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢；相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离，由于淀粉酶Y的相对分子量比X大，故采用凝胶色谱法将这两种淀粉酶分离时，先洗脱出来的是淀粉酶Y。
【分析】 1、微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2、选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抵制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。
32．（2022高二下·吉林期中）生物工程技术在农牧业生产、医药卫生等领域有广泛的用途。请回答相关问题。
（1）我国体细胞克隆猴“中中”和“华华”的诞生再次说明了 具有全能性。植物组织培养的全过程，证明了植物体细胞具有全能性。所谓全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生 或分化成其他各种细胞的 。
（2）利用植物组织培养技术制造的人工种子具有天然种子不可比拟的特点，人工种子具有的优点：能保持优良品种的 ，生产上不受季节、气候和地域限制，方便 等。
（3）动物细胞融合和植物原生质体融合的原理都是 ，不同的是诱导动物细胞融合时常用的方法是用 诱导。
（4）许多重要的生物制品，如病毒疫苗、单克隆抗体等，都可以借助动物细胞培养技术来大规模生产。 当细胞分裂生长到表面相互接触会发生接触抑制，此时需要用 处理分散成单个细胞，分瓶继续培养。细胞培养液应定期更换，以防止 对细胞自身造成危害。
（5）生物技术革命为人类带来了巨大的社会效益和经济效益，在某些方面对人们传统的观念也造成了巨大的冲击。以下做法中明显违背我国相应法律法规或伦理道德的有 。
①转基因农产品的直接加工品，在产品外包装中标注“加工原料为转基因”标识再上市
②为了避免妊娠过程给自身带来影响，选择用“试管婴儿”技术，并找人代孕以得到孩子
③在实验室中进行冠状病毒基因改造研究，以备在发生战争时用于投放他国
④养牛场中运用胚胎性别鉴定技术，筛选雌性胚胎进行胚胎移植以扩大高产奶牛数量
【答案】（1）动物细胞核；完整有机体；潜能和特性
（2）遗传特性；贮存和运输
（3）细胞膜的流动性；灭活的病毒
（4）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）；细胞代谢产物积累
（5）②③
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；动物细胞核移植技术；细胞融合的方法；生物技术中的伦理问题
【解析】【解答】(1)体细胞克隆猴的诞生利用的核心技术是细胞核移植，说明了动物细胞核具有全能性。所谓全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化其他各种细胞的潜能和特性。
(2)利用植物组织培养技术制造的人工种子，在适宜条件下同样能够萌发成幼苗，与天然种子相比，人工种子具有的优点有：生产不受季节限制、不会出现性状分离、能保持优良品种的遗传特性（因为利用植物组织培养技术制造的人工种子属于无性生殖）、方便贮存和运输、制种过程在实验室进行而不占用大量土地等。
(3)动物细胞融合和植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性，不同的是诱导动物细胞融合时常用的方法是用灭活的病毒诱导，而诱导植物原生质体融合时常用PEG诱导。
(4)发生接触抑制时需要用胰蛋白酶（胶原蛋白酶）处理分散成单个细胞。为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，故动物细胞培养过程中需要定期更换细胞培养液。
(5)①转基因农产品的直接加工品，在产品外包装中标注“加工原料为转基因”标识再上市，尊重消费者的知情权，这不违背我国相应法律法规或伦理道德，①不符合题意；
②为了避免妊娠过程给自身带来影响，选择用“试管婴儿”技术，并找人代孕以得到孩子，这违背我国相应法律法规或伦理道德，②符合题意；
③在实验室中进行冠状病毒基因改造研究，以备在发生战争时用于投放他国，违背法律法规，③符合题意；
④养牛场中运用胚胎性别鉴定技术，筛选雌性胚胎进行胚胎移植以扩大高产奶牛数量，从而可以得到理想性别的牛胚胎，这不违背我国相应法律法规或伦理道德，④不符合题意。
故答案为：②③。
【分析】1、植物体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交是首先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；用物理法（离心、振动、电刺激）或者化学法（聚乙二醇）诱导细胞融合，获得融合的原生质体；原生质体再生出细胞壁，获得杂种细胞；杂种细胞经过脱分化和再分化获得杂种植株。
2、动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性、细胞的增殖，诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产性杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。
3、动物细胞培养的流程：取动物组织块——剪碎组织——用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞——制成细胞悬液——转入培养液中（原代培养）——放入二氧化碳培养箱培养——贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞制成细胞悬液——转入培养液（传代培养）——二氧化碳培养箱。
33．（2022高二下·吉林期中）新冠肺炎目前已成为影响全球的严重肺部传染性疾病，为遏制新冠肺炎传播，必须快速检测出新冠病毒感染者并排除非携带者，同时尽快研制出新冠疫苗，以便采取针对性的预防措施。
（1）目前检测的方法主要是病毒核酸检测，该方法利用核酸强大的体外扩增能力。主要原理：取得咽拭子样本提取出 RNA，并将 RNA 转变为 DNA。接着用 PCR 扩增，最后再用荧光标记的含目的基因的单链 DNA 或 检测病毒 DNA 的存在。其中 RNA 转变为 DNA 的过程需在样本中加入 酶，PCR 需在样本中再加入引物、原料（dNTP）、 ，一般要经历 30 多次循环，每次循环可以分为 三步。
（2）目前研制的新冠疫苗主要是基因工程疫苗。我国陈薇院士团队成功开发了一种以人复制缺陷腺病毒为载体的重组新型冠状病毒疫苗，用来制备该疫苗的目的基因由 的一段无毒序列构成，在构建基因表达载体时，需将目的基因插在腺病毒载体的 之间，构建基因表达载体的目的是：使目的基因在受体细胞中 并且可以遗传给后代，同时使目的基因能够 。
【答案】（1）基因探针；逆转录；耐热的DNA聚合酶（Taq酶）；变性、退火、延伸
（2）病毒基因；启动子和终止子；稳定存在；表达和发挥作用
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】(1)新冠病毒为RNA病毒，需要从样本中提取出RNA，然后逆转录为DNA，PCR扩增后，用含有目的基因的单链DNA或基因探针来检测。RNA逆转录为DNA需要用到逆转录酶。PCR技术需要DNA作为模板、脱氧核苷酸为原料，还需要两种不同的引物以及耐热的DNA聚合酶（Taq酶），因此PCR需在样本中再加入引物，原料（dNTP），耐热的DNA聚合酶（Taq酶）。PCR中每次循环可以分为：变性、退火、延伸，一共三步。
(2)基因工程疫苗需要使用到病毒基因的一段无毒序列构建疫苗的目的基因，构建基因表达载体。构建表达载体时，需要将目的基因插入到载体的启动子和终止子之间，便于表达。构建基因表达载体的目的就是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给后代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。
【分析】1、PCR技术：
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
（2）原理：DNA复制。
（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物。
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。
34．（2022高二下·吉林期中）大肠杆菌β 半乳糖苷酶(Z 酶)可催化底物(X gal)水解产生蓝色物质。在 pUC18 质粒中，lacZ′ 编码 Z 酶氨基端的一个片段(称为α 肽)，该质粒结构及限制酶识别位点如图甲所示。已知α 肽、缺失α 肽的Z 酶片段单独存在时均无Z 酶活性，共同存在时就会表现出 Z 酶活性。利用图乙中的 DNA 片段与pUC18 质粒进行基因工程操作。
（1）限制酶能催化双链 DNA 分子中 (填化学键名称)的断裂。本实验可使用限制酶 处理 pUC18 质粒和图乙中的 DNA 片段，再通过 DNA 连接酶连接，获得含目的基因的重组质粒。
（2）用重组质粒转化大肠杆菌，然后将大肠杆菌接种到含氨苄青霉素的固体培养基上进行培养，由于未发生转化的大肠杆菌没有该质粒，因而不具有 ，在该培养基上不能生长。从功能上划分， 该培养基属于 培养基。
（3）当上述培养基中含有 X gal 时，生长出的菌落有蓝色和白色两种类型，其中含有重组质粒的大肠杆菌的菌落颜色为 ，这是因为目的基因与质粒连接后，使 lacZ′ （能、不能）合成α 肽。
【答案】（1）磷酸二酯键；Sal I
（2）氨苄青霉素抗性；选择
（3）白色；不能
【知识点】基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】(1)限制酶能催化双链DNA分子中磷酸二酯键的断裂。从图中可知，酶HindIII可破坏目的基因，而质粒和目的基因两侧都有酶SalI识别位点，因此本实验可使用限制酶SalI处理pUC18质粒和图乙中的DNA片段，并利用DNA连接酶将两者连接起来形成重组质粒。
(2)重组质粒上有氨苄青霉素抗性基因，由于未发生转化的大肠杆菌没有该质粒，因而不具有氨苄青霉素抗性，在含氨苄青霉素培养基上不能生长。从功能上划分，该培养基属于选择培养基，选择了含重组质粒的大肠杆菌。
(3)从图中可知，重组质粒是用酶SalI分别处理过的质粒和目的基因片段形成的，重组质粒的lacZ′基因被破坏，不能合成β-半乳糖苷酶（Z酶），不能催化底物（X-gal）水解产生蓝色物质，故呈菌落白色。在 pUC18 质粒中，lacZ′ 编码 Z 酶氨基端的一个片段(称为α 肽)，lacZ′基因被破坏，那么不能合成α 肽。
【分析】基因工程的基本操作程序：
第一步：目的基因的获取；
第二步：基因表达载体的构建（核心）
1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
第三步：将目的基因导入受体细胞
1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2、常用的转化方法：
将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术，方法的受体细胞多是受精卵。
第四步：目的基因的检测和表达
将目的基因导入细菌：感受态细胞法：用Ca2+处理细胞使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。
2、其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交（DNA-RNA）技术。
3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原—抗体杂交技术。
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吉林省吉林市十二中2021-2022学年高二下学期期中生物试题
一、单选题
1．（2022高二下·吉林期中）消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法正确的是（ ）
A．微生物接种技术的方法都相同，其核心就是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度
B．在 100 ℃下煮沸 5～6 min 属于消毒方法，可杀死绝大多数微生物细胞
C．在灭菌后倒平板前，加入一定量的缓冲液以调节培养基的 pH
D．高压蒸汽灭菌，只有当压力表的压力降到一个标准大气压时，才能打开盖子
2．（2022高二下·吉林期中）下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述，正确的是（ ）
A．倒好的培养基和培养皿要进行消毒处理
B．应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．为防止微生物污染，要在酒精灯火焰旁进行操作
D．倒好培养基的培养皿，要立即将平板倒过来放置
3．（2022高二下·吉林期中）微生物接种方法很多，平板划线法是最常用的一种，下列操作方法正确的是（ ）
A．在该操作过程中只需要灼烧接种环5次
B．平板划线后培养微生物时要倒置培养
C．可以将第5区域的划线与第1区域的划线相连
D．划线操作时，如接种环不慎划破培养基，可以继续正常操作
4．（2022高二下·吉林期中）下图表示培养和纯化 X 细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（ ）
A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒处理
B．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置
C．步骤②应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后各划线区均出现单个菌落
D．步骤③划线结束后在培养皿盖上做好标注
5．（2022高二下·吉林期中）在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行。下图甲是醋酸发酵装置，乙是培养液pH变化曲线图，下列叙述正确的是（ ）
A．发酵初期不通气，溶液中没有气泡产生
B．中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵
C．后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度
D．图乙中能正确表示pH变化的曲线是③
6．（2022高二下·吉林期中）下列关于果酒和果醋制作的叙述，不正确的是（ ）
A．果酒和果醋的发酵菌种不同，代谢类型也不同
B．在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的
C．温度对酵母菌进行的酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌进行的醋酸发酵的影响不大
D．制作果酒和果醋时都可用体积分数为70%的酒精对发酵瓶进行消毒
7．（2022高二下·吉林期中）家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节，在发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长。当环境中的乳酸积累到一定浓度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖。下面对这些现象的描述，错误的是（ ）
A．在乳酸菌发酵的初期，种内关系主要表现为种内互助
B．进入乳酸菌发酵的中期，由于营养物质的消耗和代谢产物的积累，种内竞争趋于激烈
C．密闭的发酵环境使乳酸菌在种间竞争中占据优势
D．进入发酵中期，泡菜坛内各种微生物的抵抗力维持在较高的水平
8．（2022高二下·吉林期中）现在市场上流行一种“精酿”啤酒，它的制作工艺与普通啤酒有所不同，下列有关“精酿”啤酒和普通啤酒的叙述，不正确的是（ ）
A．“精酿”啤酒的原料和普通啤酒不同，“精酿”啤酒只使用麦芽、啤酒花、酵母菌和水，普通啤酒除了麦芽、啤酒花、酵母菌和水以外，还有玉米等物质
B．“精酿”啤酒由于原料主要是麦芽，麦芽汁的浓度较高，口味较为浓郁
C．“精酿”啤酒不添加食品添加剂，虽然产量低，价格高，但它也有一定的市场
D．“精酿”啤酒和普通啤酒样可以直接放心饮用
9．（2022高二下·吉林期中）下列关于菌种的选育的叙述，不正确的是（ ）
A．自然选育菌种费时且盲目性大
B．诱变育种原理的基础是基因突变
C．采用基因工程的方法可构建工程菌
D．传统发酵技术和现代工业发酵都需要选育菌种
10．（2022高二下·吉林期中）下列关于发酵工程的叙述，正确的是（ ）
A．发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵
B．发酵工程的产品就是微生物的各种代谢物
C．发酵过程中发酵条件温度的控制主要是通过发酵罐壁散热
D．发酵过程要及时添加必备营养成分来延长菌体生长稳定期时间，便于得到更多的发酵产物
11．（2022高二下·吉林期中）下列关于果酒，果醋制作的说法，错误的是（ ）
A．用酵母菌发酵酿制葡萄酒，可用酸性重铬酸钾检测酒精的产生
B．在果醋发酵过程中，适时通过充气口充入氧气，有利于醋酸菌的代谢
C．控制好温度和酸碱度既有利于目的菌的繁殖，又可抑制杂菌的生长
D．在制作葡萄酒的过程中，酵母菌无氧呼吸产生乳酸使发酵液的pH下降
12．（2016高二下·河北期中）某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验．下列相关叙述正确的是（ ）
A．酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高
B．先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵
C．与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好
D．适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
13．（2021高二下·武功期中）下图表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养形成植株的过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A．①阶段体现了细胞的全能性
B．②阶段需生长素，而①阶段需细胞分裂素
C．①阶段细胞进行脱分化
D．此兰花经花药培养所得植株为二倍体
14．（2022高二下·吉林期中）实验人员利用矮牵牛(二倍体，2n＝14)的红色花瓣细胞(液泡呈红色)与枸杞(四倍体，4n＝48)叶肉细 胞，制备了相应的原生质体，并诱导其融合，经筛选、培养获得杂种植株。下列有关叙述错误的是（ ）
A．获得该杂种植株打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种
B．可利用电融合法、离心法等方法诱导原生质体融合
C．可利用光学显微镜观察，筛选出杂种原生质体
D．若原生质体均为两两融合，则融合后的细胞中染色体数目均为 62 条
15．（2022高二下·吉林期中）下列有关植物组织培养和动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．动物细胞培养和植物组织培养所用都是固体培养基
B．植物韧皮部细胞和小鼠杂交瘤细胞经离体培养均能获得新个体
C．动物细胞培养和植物组织培养都必须在95%空气加5%CO2的混合气体条件下进行
D．植物组织培养技术可用于突变体的培育，动物细胞培养技术可用于筛选抗癌药物
16．（2022高二下·吉林期中）“三亲婴儿”技术是指取出患病母亲卵子的核，导入女性捐赠者的去核卵母细胞中，再将重构细胞和父亲的精子结合。下列有关“三亲婴儿”的叙述，不正确的是（ ）
A．该技术可以有效降低生下线粒体遗传疾病婴儿的概率
B．女性捐赠者提供的遗传物质不遵循孟德尔遗传规律
C．与正常的“双亲婴儿”相比，“三亲婴儿”核 DNA 增加
D．该技术对 DNA 的修改能够遗传，涉及伦理争议
17．（2022高二下·吉林期中）下图为哺乳动物早期胚胎发育的过程，下列有关叙述不正确的是（ ）
A．过程a和b使胚胎中有机物的含量减少
B．Ⅰ、Ⅱ时期的胚胎中都含有全能细胞
C．胚胎移植必须使用处于Ⅱ或Ⅲ时期的胚胎
D．图示过程中，部分细胞中的遗传物质可能发生改变
18．以下关于胚胎分割移植的说法不正确的是（ ）
A．就目前的胚胎分割移植而言，产生的同卵双胎较多，同卵多胎成功率较低
B．胚胎分割所需要的主要仪器设备为实体显微镜和显微操作仪
C．可在囊胚阶段将胚胎随机分割成两份或多份，然后移植
D．用分割针将桑椹胚均分成两部分，可直接将裸半胚移植入受体
19．（2022高二下·吉林期中）研究人员用下图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是（ ）
A．构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindIII两种限制酶
B．使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组
C．能在添加四环素的培养基上生存的一定是含有重组质粒的大肠杆菌
D．利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙
20．（2022高二下·吉林期中）下列有关植物组织培养技术的叙述，不正确的是（ ）
A．利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体
B．经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞不具有细胞全能性
C．利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株
D．培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向
21．（2022高二下·吉林期中）中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是（ ）
A．卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法
B．兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质
C．重组胚胎需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程
D．在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现细胞的分化
22．（2022高二下·吉林期中）动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，A，B，C表示现代工程技术，①、②、③表示其对应的结果，下列说法正确的是（ ）
A．若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性
B．若c是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表现型一定相同
C．①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物
D．若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
23．（2022高二下·吉林期中）下面为克隆羊的培育流程图，相关说法不正确的是（ ）
A．卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到减数第一次分裂中期
B．从供体羊中取得的上皮细胞需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理
C．用微型吸管将卵母细胞的细胞核和第一极体吸出
D．代孕母羊和供体羊需经过同期发情处理
24．（2022高二下·吉林期中）某制药公司研制了基于DNA的个性化新生抗原靶向疫苗，并用于相关癌症治疗。该公司依据不同癌细胞的特点合成出能编码一个或多个新生抗原的DNA片段。该DNA片段导入人体细胞后，可产生相应的新抗原，新抗原能激活机体的免疫系统，诱导入体产生特异性免疫应答。据此判断，下列叙述错误的是（ ）
A．获取新生抗原基因可在癌细胞内提取相应的mRNA，通过反转录获取cDNA
B．由mRNA在细胞内逆转录获取的cDNA中含内含子
C．利用PCR技术扩增新生抗原基因时需要设计2种引物
D．检测受体细胞中的新生抗原基因是否成功表达可采用抗原-抗体杂交技术
25．（2022高二下·吉林期中）T4溶菌酶在高温时易失去活性。研究人员对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使T4溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成一个二硫键，提高了酶的耐热性。下列相关叙述正确的是（ ）
A．T4溶菌酶耐热性提高的原因是组成该酶的氨基酸种类和数量发生了改变
B．T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程，自然界中的酶都可通过蛋白质工程进行改造
C．蛋白质工程与中心法则的流动方向一致，即DNA→mRNA→蛋白质
D．若高温使蛋白质分子的空间结构发生改变，蛋白质的功能也会受到影响
26．（2022高二下·吉林期中）下列关于胚胎移植技术应用的叙述，错误的是（ ）
A．应用胚胎移植可大大缩短受体本身的繁殖周期
B．应用胚胎移植可以减少优良种畜的引进，丰富品种资源
C．目前胚胎移植技术在人类中主要用于解决某些不孕症患者的生育问题
D．胚胎移植可充分发挥优良母牛的繁殖潜力，相同时间内可得到较多的良种牛犊
27．（2020高三上·沈阳期中）科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚中获得转基因鸡，目的蛋白在输卵管细胞中特异表达，并能在鸡蛋中收集。下列说法错误的是（ ）
A．可从cDNA文库获取人溶菌酶基因
B．RNA聚合酶识别鸡输卵管细胞特异表达的启动子
C．可通过农杆菌转化法将人溶菌酶基因导入鸡胚
D．鸡输卵管细胞可将人溶菌酶分泌到细胞外
28．（2022高二下·吉林期中）科学家利用耐盐碱植物中的耐盐基因，培育出了耐盐水稻新品系，过程如图所示。下列说法不正确的 是（ ）
A．阶段Ⅰ、Ⅱ分别采用重组 DNA 技术、植物组织培养技术
B．可采用抗原—抗体杂交技术对耐盐基因的表达产物进行检测
C．水稻细胞内检测到耐盐基因的表达产物，并不能说明育种已成功
D．常采用显微注射法将目的基因导入水稻细胞
29．（2022高二下·吉林期中）基因疫苗是将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。下列说法正确的是（ ）
A．疫苗经注射进人人体后，可被人体的浆细胞识别
B．接种基因疫苗只能预防特定微生物的感染
C．基因疫苗是指机体能识别特定的基因，从而引起机体产生免疫反应
D．利用蛋白质工程生产的蛋白质疫苗就是基因疫苗
30．（2022高二下·吉林期中）“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不能筛选成功的是（ ）
A．在牛肉膏蛋白胨培养基中，筛选大肠杆菌
B．在以尿素为唯一氮源的固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物
C．用纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能分解纤维素的微生物
D．在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物
二、综合题
31．（2022高二下·吉林期中）研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌（目标菌），并对其进行研究。回答下列问题：
（1）在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以 为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有氮源、水、无机盐和 。
（2）进行微生物菌种纯化时，为得到单菌落，最常用的两种接种方法是 。
（3）从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上出现了A、B 和 C 三种菌落（如图1 所示）。如果要得到淀粉酶活力最高的菌株，应该选择 （填“A”“B”或“C”）菌落进一步纯化。A 菌落经检测其为硝化细菌，据此说明 A 菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是：硝化细菌可以利用 而不能利用 。
（4）经筛选获得了一菌株，能同时产两种不同的淀粉酶 X 和 Y，其相对分子量分别为 45 000 和 58 000。采用凝胶色谱法将这两种淀粉酶分离时，先洗脱出来的是淀粉酶 （填“X”或“Y”），其原因是 其 ，无法进入凝胶内部，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速率较 ，所以先洗脱出来。
32．（2022高二下·吉林期中）生物工程技术在农牧业生产、医药卫生等领域有广泛的用途。请回答相关问题。
（1）我国体细胞克隆猴“中中”和“华华”的诞生再次说明了 具有全能性。植物组织培养的全过程，证明了植物体细胞具有全能性。所谓全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生 或分化成其他各种细胞的 。
（2）利用植物组织培养技术制造的人工种子具有天然种子不可比拟的特点，人工种子具有的优点：能保持优良品种的 ，生产上不受季节、气候和地域限制，方便 等。
（3）动物细胞融合和植物原生质体融合的原理都是 ，不同的是诱导动物细胞融合时常用的方法是用 诱导。
（4）许多重要的生物制品，如病毒疫苗、单克隆抗体等，都可以借助动物细胞培养技术来大规模生产。 当细胞分裂生长到表面相互接触会发生接触抑制，此时需要用 处理分散成单个细胞，分瓶继续培养。细胞培养液应定期更换，以防止 对细胞自身造成危害。
（5）生物技术革命为人类带来了巨大的社会效益和经济效益，在某些方面对人们传统的观念也造成了巨大的冲击。以下做法中明显违背我国相应法律法规或伦理道德的有 。
①转基因农产品的直接加工品，在产品外包装中标注“加工原料为转基因”标识再上市
②为了避免妊娠过程给自身带来影响，选择用“试管婴儿”技术，并找人代孕以得到孩子
③在实验室中进行冠状病毒基因改造研究，以备在发生战争时用于投放他国
④养牛场中运用胚胎性别鉴定技术，筛选雌性胚胎进行胚胎移植以扩大高产奶牛数量
33．（2022高二下·吉林期中）新冠肺炎目前已成为影响全球的严重肺部传染性疾病，为遏制新冠肺炎传播，必须快速检测出新冠病毒感染者并排除非携带者，同时尽快研制出新冠疫苗，以便采取针对性的预防措施。
（1）目前检测的方法主要是病毒核酸检测，该方法利用核酸强大的体外扩增能力。主要原理：取得咽拭子样本提取出 RNA，并将 RNA 转变为 DNA。接着用 PCR 扩增，最后再用荧光标记的含目的基因的单链 DNA 或 检测病毒 DNA 的存在。其中 RNA 转变为 DNA 的过程需在样本中加入 酶，PCR 需在样本中再加入引物、原料（dNTP）、 ，一般要经历 30 多次循环，每次循环可以分为 三步。
（2）目前研制的新冠疫苗主要是基因工程疫苗。我国陈薇院士团队成功开发了一种以人复制缺陷腺病毒为载体的重组新型冠状病毒疫苗，用来制备该疫苗的目的基因由 的一段无毒序列构成，在构建基因表达载体时，需将目的基因插在腺病毒载体的 之间，构建基因表达载体的目的是：使目的基因在受体细胞中 并且可以遗传给后代，同时使目的基因能够 。
34．（2022高二下·吉林期中）大肠杆菌β 半乳糖苷酶(Z 酶)可催化底物(X gal)水解产生蓝色物质。在 pUC18 质粒中，lacZ′ 编码 Z 酶氨基端的一个片段(称为α 肽)，该质粒结构及限制酶识别位点如图甲所示。已知α 肽、缺失α 肽的Z 酶片段单独存在时均无Z 酶活性，共同存在时就会表现出 Z 酶活性。利用图乙中的 DNA 片段与pUC18 质粒进行基因工程操作。
（1）限制酶能催化双链 DNA 分子中 (填化学键名称)的断裂。本实验可使用限制酶 处理 pUC18 质粒和图乙中的 DNA 片段，再通过 DNA 连接酶连接，获得含目的基因的重组质粒。
（2）用重组质粒转化大肠杆菌，然后将大肠杆菌接种到含氨苄青霉素的固体培养基上进行培养，由于未发生转化的大肠杆菌没有该质粒，因而不具有 ，在该培养基上不能生长。从功能上划分， 该培养基属于 培养基。
（3）当上述培养基中含有 X gal 时，生长出的菌落有蓝色和白色两种类型，其中含有重组质粒的大肠杆菌的菌落颜色为 ，这是因为目的基因与质粒连接后，使 lacZ′ （能、不能）合成α 肽。
答案解析部分
1．【答案】B
【知识点】灭菌技术
【解析】【解答】A、微生物接种技术的方法各不相同，但核心都是要防止杂菌污染，保证获得纯净的培养物，A错误；
B、在100℃煮沸5～6分钟属于煮沸消毒法，可杀死大部分微生物，B正确；
C、为防止污染，应在灭菌前，加入一定量的缓冲液以调节培养基的pH值，再灭菌，C错误；
D、高压蒸汽灭菌，只有当压力表的压力降到零时，才能打开排气阀，拧松螺栓，打开盖子，D错误。
故答案为：B。
【分析】消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），而灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）。消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。
2．【答案】C
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、培养基和培养皿要进行灭菌处理，而不是消毒处理，A错误；
B、倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20 mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，不能打开皿盖，B错误；
C、酒精灯火焰旁存在无菌区，为防止微生物污染，要在酒精灯火焰旁进行操作，C正确；
D、倒好培养基的培养皿，等培养基冷凝后将平板倒过来放置，D错误。
故答案为：C。
【分析】培养基配制时的注意事项：
①全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板．可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板．操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基．
③平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染．
④在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生．
3．【答案】B
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、在每次划线前后均需要对接种环灼烧灭菌，因此在该操作过程中需要灼烧接种环6次，A错误；
B、用平板培养基培养微生物时，为防止水蒸气凝集滴入培养基造成干扰或污染，应将平板倒过来放置培养，B正确；
C、划线时要避免最后一区的划线与第一区线连。因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，C错误；
D、划线操作时，如接种环不慎划破培养基，则该培养基将不能继续使用，D错误。
故答案为：B。
【分析】平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。
其操作步骤是：
①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。
③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。
④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。
⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线．重复上述过程，完成三、四、五区域内划线．注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。
⑧将平板倒置放在培养箱中培养。
4．【答案】A
【知识点】微生物的分离和培养
【解析】【解答】A、为了避免杂菌污染，对实验操作的空间、操作者的衣着和手需要进行消毒处理，A正确；
B、倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；
C、各划线区不一定都出现单个菌落，C错误；
D、步骤③划线结束后需在培养基皿底标注菌种及接种日期等信息，而不是在皿盖上做标注，D错误。
故答案为：A。
【分析】1、平板划线的操作的基本步骤是：
（1）右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
（2）左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
（3）烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
（4）将平板倒置，放入培养箱中培养。
2、题图分析：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，而后通过培养可获得单菌落。
5．【答案】B
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、若发酵初期不通入气体，由于锥形瓶中含有少量空气，溶液中酵母菌也可通过有氧呼吸产生二氧化碳，即使没有空气，酵母菌也能通过无氧呼吸产生二氧化碳，因此有气泡产生，A错误；
B、中期可以闻到酒香，说明有酒精产生，即进行了酒精发酵，B正确；
C、由于醋酸菌是嗜氧菌，也是嗜温菌，因此后期接种醋酸菌，需通气并适当升高温度，C错误；
D、醋酸发酵过程中，发酵液的pH会进一步降低，因此图乙中能正确表示pH变化的曲线是②，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
6．【答案】C
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、制作果酒的菌种是酵母菌，是兼性厌氧菌，制作果醋的菌种是醋酸菌，是好氧细菌，A正确；
B、在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，B正确；
C、温度对酵母菌的酒精发酵和醋酸菌的醋酸发酵的影响都很大，C错误；
D、制作果酒和果醋时，发酵瓶要清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒，或用洗洁精洗涤，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
7．【答案】D
【知识点】泡菜的制作
【解析】【解答】A、在发酵初期，乳酸菌较少，乳酸菌数目增加较快，种内关系主要表现为种内互助，A正确；
B、进入乳酸菌发酵的中期，随着营养物质的消耗，代谢产物积累，种内竞争趋于激烈，B正确；
C、由于发酵液的pH降低，不再适于其他微生物生存，所以密闭的发酵环境使乳酸菌在种间竞争中占据优势，C正确；
D、进入发酵中期，由于乳酸的大量积累，泡菜坛内大部分微生物已严重不适应环境，各种微生物的抵抗力明显下降，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、泡菜发酵的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。
2、泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为10：1的比例配制盐水，将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。
8．【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用；果酒果醋的制作
【解析】【解答】A“精酿”啤酒的原料和普通啤酒不同，“精酿”啤酒只使用麦芽、啤酒花、酵母菌和水，普通啤酒除了麦芽、啤酒花、酵母菌和水以外，还有玉米、大米、淀粉等物质，A正确；
B“精酿”啤酒由于原料主要是麦芽，麦芽汁的浓度较高，口味较为浓郁，B正确；
C、“精酿”啤酒不添加食品添加剂，虽然产量低，价格高，但它也有一定的市场，C正确；
D、“精酿”啤酒由于不进行过滤和消毒，所以在安全方面可能不如普通啤酒，需检测后饮用，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、“精酿”啤酒不添加食品添加剂，纯麦芽酿造，从这个角度看，“精酿”啤酒饮用起来更健康。但它不进行过滤和消毒，一旦被杂菌污染，也会危害人体健康。“精酿”啤酒由于只是使用麦芽、啤酒花、酵母菌和水进行酿造，发酵时间较长，使得它的麦芽汁浓度更高，口味更加浓郁，虽然产量低、价格高，但却有市场需求；而大规模生产的“工业”啤酒，为了节约生产成本，除了上述原料外，还添加了大量的大米、玉米和淀粉作为替代品，发酵时间也只有7天左右，使得它的麦芽汁浓度较低，口味清淡，但其生产成本低、产量高、价格低，有着更大的市场需求，根据消费者的不同需求，大规模生产和小规模制作都有其存在的必要性。
9．【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、自然选育菌种要到相应的环境从众多的微生物中进行筛选所以费时且盲目性大，A正确；
B、菌种的选育可以采用诱变育种的方法，其原理是基因突变，B正确；
C、可以采用基因工程定向构建工程菌的方法获得，C正确；
D、现代工业发酵需要选育菌种，传统发酵技术一般利用自然界中的菌种，不需要选育菌种，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
2、菌种的选育方式有：自然选育、杂交育种、基因工程育种。
10．【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、发酵工程与传统发酵技术都要利用微生物来进行发酵，A错误；
B、发酵工程的产品有两大类：一类是菌体本身，另一类是代谢物，B错误；
C、发酵过程中微生物代谢产热和搅拌产热，使发酵液温度升高，通过发酵罐壁散热达不到散热效果，主要通过向冷却夹层通入冷水来散热降温，C错误；
D、发酵过程为保证获得更多的发酵产物，应及时向发酵罐中添加必备营养成分来延长菌体生长稳定期时间，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。
（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来。
（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
11．【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】A、用酵母菌发酵酿制葡萄酒，可用酸性重铬酸钾检测酒精的产生，酒精和酸性重铬酸钾反应呈灰绿色，A正确；
B、醋酸菌是一种好氧细菌，所以在果醋发酵过程中，适时通过充气口充入氧气，有利于醋酸菌的代谢，B正确；
C、控制好温度和酸碱度给目的菌创造适宜的环境条件，既有利于目的菌的繁殖，又可抑制杂菌的生长，C正确；
D、酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，不产生乳酸，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
12．【答案】D
【知识点】果酒果醋的制作
【解析】【解答】解：A、醋酸菌是嗜热菌，果醋发酵所需的最适温度较高，A错误；
B、进行果酒、果醋发酵实验，要先进行隔绝空气果酒发酵，再供氧进行果醋发酵，B错误；
C、人工接种菌种品质更好，且不容易存在杂菌污染，C错误；
D、适当加大接种量，让菌体快速形成优势菌群，可以抑制杂菌生长，提高发酵速率，D正确．
故选：D．
【分析】酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵．在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵.20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性．
醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸．醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃．
13．【答案】C
【知识点】植物组织培养的过程；组织培养基的成分及作用
【解析】【解答】A、①阶段只是形成愈伤组织，并没有形成完整个体或分化成其他各种细胞，因此不能体现细胞的全能性，A错误；
B、①为脱分化过程，②为再分化过程，这两个过程都需要生长素和细胞分裂素，B错误；
C、①阶段细胞进行脱分化，C正确；
D、此兰花经花药培养所得植株为单倍体，D错误。
故答案为：C。
【分析】分析题图：图示表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养形成植株的过程，其中①为脱分化过程，②为再分化过程，③为植物个体发育过程。
14．【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】A、获得该杂种植株的方法是植物体细胞杂交技术，其最大的优点是打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种，A正确；
B、诱导植物原生质体融合时，可利用电融合法、离心法等方法诱导原生质体融合，B正确；
C、杂种原生质体的染色体数目是两种细胞染色体数目之和，可通过光学显微镜观察到染色体数目，从而筛选出杂种原生质体，C正确；
D、若原生质体均为两两融合，则会形成3种细胞，即矮牵牛细胞自身融合的细胞、枸杞细胞自身融合的细胞和杂种细胞，所以融合后的细胞中染色体数目为28条或96条或62条，D错误。
故答案为：D。
【分析】植物体细胞杂交技术：
1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
2、过程：
（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。
（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。
（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。
（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。
3、意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。
15．【答案】D
【知识点】植物组织培养的过程；动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、动物细胞培养所用的是液体培养基，植物组织培养所用的是固体培养基，A错误；
B、植物韧皮部细胞经离体培养能获得新个体，小鼠杂交瘤细胞经离体培养不能获得新个体，B错误；
C、动物细胞培养必须在95%空气加5%CO2的混合气体条件下进行，植物组织培养不需要，C错误；
D、植物组织培养技术可用于突变体的培育，动物细胞培养技术可用于筛选抗癌药物，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、动物培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒-一定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。
（2）营养成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。
培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的 CO2主要作用是维持培养液的pH。
2、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
3、在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽．生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成．比值适中时，促进愈伤组织的生长。
4、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
16．【答案】C
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】A、线粒体遗传疾病是通过母亲遗传给后代的，由题意可知，与“三亲婴儿”发育有关的重构细胞的细胞质主要来自于女性捐赠者，所以该技术可以有效降低生下线粒体遗传疾病婴儿的概率，A正确；
B、女性捐赠者提供的遗传物质来自于女性捐赠者的去核卵母细胞的细胞质中，所以其提供的遗传物质不遵循孟德尔遗传规律，B正确；
C、“三亲婴儿”的核 DNA与正常的“双亲婴儿”的核DNA一样多，均是一半来自父亲、一半来自母亲，C错误；
D、该技术对 DNA 的修改能够遗传，“三亲婴儿”的遗传物质来自一个父亲、两个母亲，涉及伦理争议，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、动物体细胞核移植：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。
2、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
17．【答案】C
【知识点】动物胚胎发育的过程
【解析】【解答】A、根据以上分析已知，图中过程a表示卵裂形成桑椹胚，过程b表示桑椹胚形成囊胚，这两个过程细胞均需要消耗能量，故两个过程中胚胎中的有机物的含量均减少，A正确；
B、Ⅰ表示桑椹胚，含有的所有细胞都是全能细胞，Ⅱ表示囊胚，含有的内细胞团细胞为全能细胞，B正确；
C、胚胎移植必须使用处于Ⅰ桑椹胚或Ⅱ囊胚时期的胚胎，C错误；
D、图示过程中，细胞进行有丝分裂，而在间期DNA复制过程中，部分细胞中的遗传物质可能发生改变，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎，之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能，属全能细胞；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
2、据图分析，Ⅰ表示桑葚胚，Ⅱ表示囊胚，Ⅲ表示原肠胚，过程a表示卵裂形成桑葚胚，过程b表示桑葚胚形成囊胚，c表示囊胚形成原肠胚的过程。
18．【答案】C
【知识点】胚胎分割
【解析】【解答】解：A、就目前的胚胎分割移植而言，以二分胚的分割和移植效率最高，同卵多胎成功率较低，A正确；B、胚胎分割所需要的主要仪器设备为实体显微镜和显微操作仪，B正确；C、对囊胚阶段的胚胎进行分割时，需要将内细胞团均等分割后移植，C错误；D、用分割针将桑椹胚均分成两部分，可直接将裸半胚移植入受体，D正确．
故选：C．
【分析】胚胎分割：1、特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一．目前以二分胚的分割和移植效率最高.2、主要仪器设备：实体显微镜和显微操作仪3、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.4、存在问题：胚胎分割的分数越多，操作的难度越大，移植的成功率也越低．
19．【答案】C
【知识点】基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】A、选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都破坏，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，A正确；
B、酶切后的质粒和目的基因片段要用DNA连接酶连接，构建重组载体，B正确；
C、能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌，C错误；
D、PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙，D正确。
故答案为：C。
【分析】基因工程的基本操作程序：
第一步：目的基因的获取；
第二步：基因表达载体的构建（核心）
1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
第三步：将目的基因导入受体细胞
1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2、常用的转化方法：
将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术，方法的受体细胞多是受精卵。
第四步：目的基因的检测和表达
将目的基因导入细菌：感受态细胞法：用Ca2+处理细胞使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。
2、其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交（DNA-RNA）技术。
3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原—抗体杂交技术。
20．【答案】B
【知识点】植物细胞的全能性及应用；植物组织培养的过程；植物细胞工程的应用
【解析】【解答】A、利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体，A正确；
B、经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞具有细胞全能性，在一定条件下可培育成植株个体，B错误；
C、利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株，C正确；
D、培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、植物组织培养过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体进一步发育成植株。
2、植物组织培养技术有广泛的应用：植物繁殖的新途径（快繁技术、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
3、植物细胞表现全能性的条件：
①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
21．【答案】A
【知识点】动物细胞核移植技术
【解析】【解答】A、卵母细胞去核的方法有显微直接去除、紫外光短时间照射、化学物质处理等方法，A错误；
B、兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质，故可用去核后的兔子卵母细胞作为受体细胞，B正确；
C、去核的卵母细胞与供体细胞通过电刺激后融合，供体核进入受体卵母细胞，构建成重组胚胎，融合后的重组胚胎，需要用物理或化学的方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确；
D、胚胎发育过程中早期胚胎具有全能性，还没分化，囊胚期开始出现细胞分化，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、细胞全能性是指具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。植物细胞具有全能性，动物细胞的细胞核具有全能性。
2、早期胚胎发育的几个阶段：
（1）桑椹胚：指胚胎细胞数目达到32个左右时，形似桑椹，这一阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。
（2）囊胚：①细胞开始分化，其中的内细胞团分化成各种组织；滋养层细胞发育成胎膜，胎盘；
②胚胎内部出现了囊胚腔；
③孵化：囊胚扩大导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来的过程。
（3）原肠胚：囊胚进一步发育，内细胞团的表层细胞形成外胚层，下方细胞形成内胚层，这时的胚胎称为原肠胚，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
22．【答案】D
【知识点】动物细胞核移植技术；胚胎分割；体外受精
【解析】【解答】A、通过核移植技术获得动物个体只能证明动物细胞的细胞核具有全能性，A错误；
B、胚胎分割技术是将一个囊胚或者桑椹胚分割成多份，获得多个后代个体，属于无性繁殖系，获得的个体的基因型一定相同，但是表现型是基因型和环境条件共同作用的结果，B错误；
C、珍稀的或存量少的雌性动物属于保护动物，不能作为生物工程的受体，应该用本地中数量较多的雌性动物，C错误；
D、若b是体外受精技术，则②为试管动物，这为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、动物细胞核移植技术表明动物细胞核具有全能性。
2、体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。
3、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
4、表现型=基因型+外界环境。
23．【答案】A
【知识点】动物体细胞克隆
【解析】【解答】A、从屠宰场中收集的卵母细胞，需在体外培养到减数第二次分裂中期，A错误；
B、动物细胞培养时，需用胰蛋白酶处理组织使其分散成单个细胞，B正确；
C、核移植过程中，通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核，除了将细胞核吸除外，往往还会将第一极体一并吸出，C正确；
D、在胚胎移植的过程中，将重组胚胎发育到一定阶段，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，即代孕母羊和供体羊需经过同期发情处理，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、哺乳动物体外受精的过程是卵母细胞的收集和培养、精子的收集和获能、受精。
2、对不同动物，采取卵母细胞的方法不同：
（1）法一：实验动物（鼠、兔等）和家畜（猪、羊等）用促性腺激素处理，使其超数排卵，从输卵管直接冲取；
（2）法二：大家畜和大型动物（牛），屠宰母畜卵巢中获取；
（3）法三：活体采卵，对充分发挥优良母畜的繁殖潜力具有重要意义。
24．【答案】B
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】A、获取抗原决定基因时，通常是在肿瘤病变细胞内提取mRNA，通过逆转录酶的作用获取cDNA用于PCR扩增，A正确；
B、利用mRNA在逆转录酶的催化作用下形成cDNA，其结构中不含内含子序列，B错误；
C、利用PCR技术扩增新生抗原基因时，由于DNA是两条反向平行的双链结构，用两种引物才能确保DNA两条链同时扩增，C正确；
D、新生抗原基因表达的产物是蛋白质，可用抗原-抗体杂交技术检测，D正确。
故答案为：B。
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
25．【答案】D
【知识点】蛋白质工程
【解析】【解答】由题意可知，T4溶菌酶耐热性提高的原因是组成该酶的氨基酸种类及空间结构均发生了改变，A错误；T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程，酶大多是蛋白质，少数是RNA，蛋白质工程只能用于改造蛋白质类，B错误；蛋白质工程与中心法则的流动方向相反，C错误；若高温使蛋白质分子的空间结构发生改变，蛋白质的功能也会受到影响，D正确。故答案为：D。
【分析】蛋白质工程概念及基本原理
（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）
（2）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。
（3）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。
（4）基本途径：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。
26．【答案】A
【知识点】胚胎移植
【解析】【解答】胚胎移植可缩短供体本身的繁殖周期，充分发挥优良个体的繁殖潜力，但不能缩短受体本身的繁殖周期，A错误；应用胚胎移植可以减少优良种畜的引进，丰富品种资源，B正确；胚胎移植技术除了快速繁育良种家畜外，还可用于克隆哺乳动物、培育转基因动物、保存珍稀哺乳动物、保护生物多样性、克服人类不孕等，C正确；给受体母牛植入多个胚胎，可增加双胞胎和多胞胎的比例，提高生产能力，D正确。
【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体；用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
2、胚胎移植的意义：加速育种工作和品种改良；大量节省购买种畜的费用；一胎多产；保存品种资源和濒危物种；可充分发挥优秀个体的繁殖潜力（缩短繁殖周期，增加一生繁殖的后代数量）。
27．【答案】C
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】A、获取目的基因可通过PCR扩增、人工合成和从基因文库中获取，A正确；
B、启动子是转录的起点，也是DNA聚合酶识别和结合位点，B正确；
C、将目的基因导入动物细胞用显微注射技术，C错误；
D、溶菌酶基因可在鸡输卵管细胞表达，合成的溶菌酶是一种分泌蛋白，可分泌到细胞外，D正确。
故答案为：C。
【分析】基因工程技术的基本步骤︰
（1）目的基因的获取︰方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建︰是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。启动子的本质是DNA片段，其为RNA聚合酶识别和结合的位点。
( 3 )将目的基因导入受体细胞∶根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定∶分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定︰抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
28．【答案】D
【知识点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】A、阶段Ⅰ表示将目的基因导入水稻细胞中，采用了DNA重组技术；阶段Ⅱ表示利用植物组织培养技术将水稻细胞培养成完整植株，采用了植物组织培养技术，A正确；
B、耐盐基因表达产物是蛋白质，可用抗原-抗体杂交技术检测，B正确；
C、水稻细胞内检测到耐盐基因表达产物，并不能说明育种已成功，还要进一步检测该转基因植物是否能够在盐碱地中生长，C正确；
D、通常采用农杆菌转化法将目的基因导入水稻细胞，D错误。
故答案为：D。
【分析】1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2、图示过程表示转基因水稻的培育过程。阶段Ⅰ表示将目的基因导入水稻细胞中，阶段Ⅱ表示利用植物组织培养技术将水稻细胞培养成完整植株。
29．【答案】B
【知识点】基因工程的应用；体液免疫
【解析】【解答】A、浆细胞不能识别抗原，A错误；
B、基因疫苗发挥作用是促使机体产生抗体作用于相应的抗原，这是属于特异性免疫，因此接种基因疫苗只能预防特定微生物的感染，B正确；
C、基因疫苗是将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答，C错误；
D、基因是具有遗传效应的DNA片段，利用蛋白质工程生产的蛋白质疫苗不是基因疫苗，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品；基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
2、疫苗通常是用灭活的或减毒的病原体制成的生物制品。接种疫苗后，人体内可产生相应的抗体和记忆细胞，从而对特定传染病具有抵抗力。
30．【答案】A
【知识点】培养基对微生物的选择作用
【解析】【解答】A、在牛肉膏蛋白胨培养基中，几乎所有细菌都能生长，不能筛选大肠杆菌，A错误；
B、在以尿素为唯一氮源的固体培养基中，只有能分解尿素的微生物才能生长，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生长，能够筛选分解尿素的微生物，B正确；
C、用纤维素为唯一碳源的培养基，只有能分解纤维素的微生物才能生长，不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长，能筛选分解纤维素的微生物，C正确；
D、在培养基中加入不同浓度的氯化钠，能够筛选出抗盐突变体植物，D正确。
故答案为：A。
【分析】选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抵制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。
选择培养基应用：
①基本的培养基通过加青霉素，实现分离纯化酵母菌、霉菌。
②培养基中加高浓度的食盐分离纯化金黄色葡萄球菌。
③无氮培养基可分离纯化固氮菌。
④不含有机碳的培养基可分离纯化自养型细菌如硝化细菌。
⑤以尿素作为唯一氮源，可选择出只能利用尿素的微生物。
⑥改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。
31．【答案】（1）淀粉；琼脂（凝固剂）
（2）稀释涂布平板法和平板划线法
（3）B；空气中的二氧化碳合成糖类等有机物；淀粉
（4）Y；相对分子质量大；快
【知识点】微生物的分离和培养；蛋白质的提取和分离；培养基概述及其分类
【解析】【解答】(1)分析题意可知，该实验的目的是欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的细菌，故在细菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以淀粉为唯一碳源的固体培养基上进行培养，因为是固体培养基，故除碳源外，该培养基还含有氮源、水、无机盐和琼脂（凝固剂）。
(2)最常用的两种微生物接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。
(3)分析题图可知，从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上B菌落的透明圈最大，说明B菌产生的淀粉酶活力最高，故应该选择B菌落进一步纯化。A菌落经检测其为硝化细菌，硝化细菌为自养型细菌，不能利用现成的淀粉，而能利用空气中的二氧化碳合成糖类等有机物，故A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈。
(4)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢；相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离，由于淀粉酶Y的相对分子量比X大，故采用凝胶色谱法将这两种淀粉酶分离时，先洗脱出来的是淀粉酶Y。
【分析】 1、微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2、选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抵制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。
32．【答案】（1）动物细胞核；完整有机体；潜能和特性
（2）遗传特性；贮存和运输
（3）细胞膜的流动性；灭活的病毒
（4）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）；细胞代谢产物积累
（5）②③
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；动物细胞核移植技术；细胞融合的方法；生物技术中的伦理问题
【解析】【解答】(1)体细胞克隆猴的诞生利用的核心技术是细胞核移植，说明了动物细胞核具有全能性。所谓全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化其他各种细胞的潜能和特性。
(2)利用植物组织培养技术制造的人工种子，在适宜条件下同样能够萌发成幼苗，与天然种子相比，人工种子具有的优点有：生产不受季节限制、不会出现性状分离、能保持优良品种的遗传特性（因为利用植物组织培养技术制造的人工种子属于无性生殖）、方便贮存和运输、制种过程在实验室进行而不占用大量土地等。
(3)动物细胞融合和植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性，不同的是诱导动物细胞融合时常用的方法是用灭活的病毒诱导，而诱导植物原生质体融合时常用PEG诱导。
(4)发生接触抑制时需要用胰蛋白酶（胶原蛋白酶）处理分散成单个细胞。为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，故动物细胞培养过程中需要定期更换细胞培养液。
(5)①转基因农产品的直接加工品，在产品外包装中标注“加工原料为转基因”标识再上市，尊重消费者的知情权，这不违背我国相应法律法规或伦理道德，①不符合题意；
②为了避免妊娠过程给自身带来影响，选择用“试管婴儿”技术，并找人代孕以得到孩子，这违背我国相应法律法规或伦理道德，②符合题意；
③在实验室中进行冠状病毒基因改造研究，以备在发生战争时用于投放他国，违背法律法规，③符合题意；
④养牛场中运用胚胎性别鉴定技术，筛选雌性胚胎进行胚胎移植以扩大高产奶牛数量，从而可以得到理想性别的牛胚胎，这不违背我国相应法律法规或伦理道德，④不符合题意。
故答案为：②③。
【分析】1、植物体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交是首先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；用物理法（离心、振动、电刺激）或者化学法（聚乙二醇）诱导细胞融合，获得融合的原生质体；原生质体再生出细胞壁，获得杂种细胞；杂种细胞经过脱分化和再分化获得杂种植株。
2、动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性、细胞的增殖，诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产性杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。
3、动物细胞培养的流程：取动物组织块——剪碎组织——用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞——制成细胞悬液——转入培养液中（原代培养）——放入二氧化碳培养箱培养——贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞制成细胞悬液——转入培养液（传代培养）——二氧化碳培养箱。
33．【答案】（1）基因探针；逆转录；耐热的DNA聚合酶（Taq酶）；变性、退火、延伸
（2）病毒基因；启动子和终止子；稳定存在；表达和发挥作用
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】(1)新冠病毒为RNA病毒，需要从样本中提取出RNA，然后逆转录为DNA，PCR扩增后，用含有目的基因的单链DNA或基因探针来检测。RNA逆转录为DNA需要用到逆转录酶。PCR技术需要DNA作为模板、脱氧核苷酸为原料，还需要两种不同的引物以及耐热的DNA聚合酶（Taq酶），因此PCR需在样本中再加入引物，原料（dNTP），耐热的DNA聚合酶（Taq酶）。PCR中每次循环可以分为：变性、退火、延伸，一共三步。
(2)基因工程疫苗需要使用到病毒基因的一段无毒序列构建疫苗的目的基因，构建基因表达载体。构建表达载体时，需要将目的基因插入到载体的启动子和终止子之间，便于表达。构建基因表达载体的目的就是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给后代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。
【分析】1、PCR技术：
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
（2）原理：DNA复制。
（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物。
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。
34．【答案】（1）磷酸二酯键；Sal I
（2）氨苄青霉素抗性；选择
（3）白色；不能
【知识点】基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】(1)限制酶能催化双链DNA分子中磷酸二酯键的断裂。从图中可知，酶HindIII可破坏目的基因，而质粒和目的基因两侧都有酶SalI识别位点，因此本实验可使用限制酶SalI处理pUC18质粒和图乙中的DNA片段，并利用DNA连接酶将两者连接起来形成重组质粒。
(2)重组质粒上有氨苄青霉素抗性基因，由于未发生转化的大肠杆菌没有该质粒，因而不具有氨苄青霉素抗性，在含氨苄青霉素培养基上不能生长。从功能上划分，该培养基属于选择培养基，选择了含重组质粒的大肠杆菌。
(3)从图中可知，重组质粒是用酶SalI分别处理过的质粒和目的基因片段形成的，重组质粒的lacZ′基因被破坏，不能合成β-半乳糖苷酶（Z酶），不能催化底物（X-gal）水解产生蓝色物质，故呈菌落白色。在 pUC18 质粒中，lacZ′ 编码 Z 酶氨基端的一个片段(称为α 肽)，lacZ′基因被破坏，那么不能合成α 肽。
【分析】基因工程的基本操作程序：
第一步：目的基因的获取；
第二步：基因表达载体的构建（核心）
1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
第三步：将目的基因导入受体细胞
1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2、常用的转化方法：
将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术，方法的受体细胞多是受精卵。
第四步：目的基因的检测和表达
将目的基因导入细菌：感受态细胞法：用Ca2+处理细胞使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。
2、其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交（DNA-RNA）技术。
3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原—抗体杂交技术。
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