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§3-3 DNA的复制
基因的本质
第3节 DNA的复制
学习目标
对DNA复制的推测
DNA半保留复制的探究(假说-演绎法)
DNA复制:①概念 ②场所 ③时间 ④结果 ⑤意义
⑥过程 ⑦特点 ⑧条件 ⑨精确复制的原因
DNA复制-拓展:①多起点复制;②双向复制;
③半不连续复制
有关DNA复制的计算
细胞分裂中染色体标记的问题
碱基互补配对原则暗示DNA的复制机制可能是怎样的?
这句话中,为什么要用“可能”二字?这反映科学研究具有什么特点?
沃森和克里克在发表DNA双螺旋结构的那篇著名短文的结尾处写道:“值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能的机制。”
提示:碱基互补配对原则是指DNA两条链的碱基之间有准确的一一对应关系,暗示DNA的复制,可能需要先解开DNA的两条链,然后通过碱基互补配对合成互补链。
讨论
提示:科学研究需要大胆的想象,但是得出结论必须建立在确凿的证据之上。
《核酸的分子结构》论文节选
问题探讨
DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂;
解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸依据碱基互补配对原则, 通过形成氢键,结合到作为模板的单链上;
新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,这种复制方式被称做半保留复制。
1.沃森和克里克提出DNA自我复制假说:
半保留复制
对DNA复制的推测
(1)半保留复制
(2)全保留复制
(3)分散复制
2.其他观点——全保留复制、弥散复制
全保留复制:DNA复制以DNA双链为模板,子代DNA的双链都是新合成的。
弥散复制:DNA复制以DNA双链为模板,子代DNA的双链都是随机的。
对DNA复制的推测
探究DNA复制的方式--假说-演绎法
1.提出问题
2.作出假设
DNA以半保留方式复制(全保留、分散)
DNA的是如何复制的
合作探究一:要通过实验“探究DNA复制是哪种方式?”关键思路是什么?
关键思路:通过实验区分亲代和子代的DNA。
合作探究二:DNA是肉眼看不可见的,如何做区分亲代和子代的DNA,又如何进行实验观察呢?
探究DNA复制的方式--假说-演绎法
科学家:1958年美国生物学家梅塞尔森(M.Meselson)和 斯塔尔(F.Stahl)
科学方法:同位素标记法、密度梯度离心法
科研方法:假说-演绎法
实验材料:大肠杆菌(繁殖快,20min一代)
同位素标记法
密度梯度离心法
15N和14N是N元素的两种稳定的同位素,这两种同位素的相对原子质量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大,从而区分亲代和子代的DNA。
利用离心技术可以在试管中区分含有不同N元素的DNA
探究DNA复制的方式--假说-演绎法
科学技术方法——密度梯度离心
探究DNA复制的方式--假说-演绎法
15N/15N-DNA
14N
14N
14N
15N/14N-DNA
15N/14N-DNA
14N/14N-DNA
14N/14N-DNA
15N/14N-DNA
第一代
第二代
提取DNA,离心
转移到含14NH4Cl的培养液中
密度
低
高
细胞分裂一次
提取DNA,离心
提取DNA,离心
细胞再分裂一次
15N/15N-DNA
如果DNA复制是半保留复制
第一代会出现的结果是
第二代会出现的结果是
标记大肠杆菌
转移培养
提取DNA、离心
观察记录
大肠杆菌在含15NH4Cl的培养液中生长若干代
实验过程
假设DNA是半保留复制(全保留复制、分散复制),离心后试管中DNA的位置会是怎样的呢?请运用演绎推理来分析实验过程,完成预期,填写图中方框。
实验预期
探究DNA复制的方式--假说-演绎法
3.演绎推理
15N
14N
亲 代
子一代
子二代
细胞再分裂一次
15N
15N
转移到含14NH4Cl的培养液中
细胞分裂一次
提出DNA离心
提出DNA离心
提出DNA离心
①假设DNA的复制是半保留复制
高密度带
中密度带
低密度带
中密度带
P:
F1:
F2:
14N
14N
15N
14N
14N
14N
15N
14N
探究DNA复制的方式--假说-演绎法
亲 代
子一代
子二代
细胞再分裂一次
15N
15N
转移到含14NH4Cl的培养液中
细胞分裂一次
提出DNA离心
提出DNA离心
提出DNA离心
②假设DNA的复制是全保留复制
15N
15N
14N
14N
高密度带
低密度带
高密度带
低密度带
高密度带
P:
F1:
F2:
14N
14N
15N
15N
14N
14N
14N
14N
3.演绎推理
亲 代
子一代
子二代
细胞再分裂一次
15N
15N
转移到含14NH4Cl的培养液中
细胞分裂一次
提出DNA离心
提出DNA离心
提出DNA离心
③假设DNA的复制是弥散复制
F1:
15N
14N
15N
14N
中密度带
F2:
15N
14N
15N
14N
15N
14N
15N
14N
中密度带
P:
高密度带
探究DNA复制的方式--假说-演绎法
3.演绎推理
4.实验验证
探究DNA复制的方式--假说-演绎法
6.得出结论:
证明DNA的复制是半保留复制
排除DNA的复制是全保留复制
排除DNA的复制是分散型复制
亲 代
子一代
子二代
细胞再分裂一次
15N
14N
15N
15N
14N
14N
转移到含14NH4Cl的培养液中
细胞分裂一次
15N
14N
提出DNA离心
提出DNA离心
提出DNA离心
5.实验验证
探究DNA复制的方式--假说-演绎法
1.DNA复制的概念是什么 时间?场所?
2.DNA复制过程怎么进行
3.DNA复制过程需要哪些条件
4.DNA复制过程有何特点
5.DNA复制有何生物学意义
合作探究三:思考下列问题:
DNA复制的过程
2.DNA复制场所
1.概念
真核细胞:主要在细胞核,线粒体、叶绿体
原核细胞:主要在拟核,质粒
3.发生时期(真核生物)
细胞分裂前的间期(S期)(有丝分裂前的间期、减数分裂前的间期),随着染色体的复制而完成。
4.结果
以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。DNA→DNA
DNA复制的过程
1个DNA复制形成2个完全相同的DNA
5.意义
将遗传信息从亲代传递给子代,从而保证了遗传信息的连续性。
解旋:复制开始时,在细胞提供的能量的驱动下,解旋酶将DNA双螺旋的两条链解开。
双链DNA分子
碱基配对:DNA聚合酶等以解开的每一条母链为模板,以细胞中游离的4种脱氧核苷酸为原料,按照碱基互补配对原则,各自合成与母链互补的一条子链。
延伸:随着模板链解旋过程的进行,新合成的子链也在不断延伸。
螺旋:同时,每条新链与其对应的模板链盘绕成双螺旋结构。
DNA复制的过程
DNA复制的过程
2.特点:
1.条件:
(2)原料:四种脱氧核苷酸(No:A、G、C、T)
(3)酶:解旋酶、 DNA聚合酶等
(4)能量:ATP(物质)
半保留复制——准确
边解旋边复制
①模板:特定碱基序列
②酶:识别,专一催化
③原则:碱基互补配对
高效
双向复制
真核生物有多个复制起点
(1)模板:亲代DNA的两条链(两条母链)
DNA复制的过程
一个DNA分子形成两个完全相同的DNA分子
4.结果
5.意义
使遗传信息从亲代传递给子代,保持遗传信息的连续性,使本物种保持相对稳定和延续。
从子链的5' 端向 3' 端延伸
3.方向
6.DNA准确复制的原因
①DNA具有独特的双螺旋结构,能为复制提供精确的模板。
②碱基具有互补配对的能力,保证了复制能够准确地进行。
DNA复制的过程
DNA复制的推测
DNA复制实验证据
DNA复制
全保留复制
半保留复制
实验过程
实验结果
实验结论
基本条件
过程
特点
用15N标记DNA大肠杆菌放在含有14N的培养液中培养,在不同时刻提取DNA并进行分离
亲代:一条DNA带(底部)
第一代:一条DNA带(中间)
第二代:两条DNA带(中间、上部)
DNA复制是半保留复制
解旋
合成子链
重新螺旋
模板
酶
能量
原料
DNA的两条链
四种脱氧核苷酸
边解旋边复制
解旋酶
DNA聚合酶
证明
参与
参与
小结
真核生物与原核生物DNA复制的区别
真核生物 DNA 的复制从多个起点开始进行,使得复制能在较短时间内完成。
原核生物 DNA 的复制只有一个复制起点。
DNA复制的拓展
DNA复制的拓展
1)多起点复制
真核生物 DNA 的复制从多个起点开始进行,使得复制能在较短时间内完成。
2)双向复制
多数生物细胞内 DNA 的复制都是从固定的起点开始双向进行的。
3)半不连续复制
由于DNA聚合酶具有专一性(子链从5`→3`延伸),而 DNA的2条链是反向平行的,所以在复制时一条子链的合成是连续进行的,而另一条子链的合成是反向不连续进行的。
DNA复制的拓展
4)子链合成时需要引物
DNA 聚合酶只能延长已存在的 DNA 链,不能从头合成 DNA 链,所以 DNA 复制时,往往先由引物酶(具有RNA 聚合酶活性)在 DNA 模板上合成一段 RNA 作为复制的引物,DNA 聚合酶从引物游离的3`端延伸子链。
下图为真核生物染色体上DNA分子复制过程示意图,有关叙述错误的是( )
A.图中DNA分子复制是从多个起点同时开始的
B.图中DNA分子复制是边解旋边双向复制的
C.真核生物DNA分子复制过程需要解旋酶
D.真核生物的这种复制方式提高了复制速率
A
课堂检测
活动探究一:
将含有15N的DNA分子放在含有14N的培养基上培养,复制n次,则:
(1)DNA分子数:
①子代DNA (含14N)分子数是多少?
②含有亲代DNA链的子代DNA(15N)分子数是多少?
③不含亲代链的子代DNA(只含14N)分子数是多少?
(2)脱氧核苷酸链数:
①子代DNA分子中脱氧核苷酸链数是多少?
②亲代脱氧核苷酸链数(15N)是多少?
③新合成的脱氧核苷酸链数(14N)是多少?
2n个
2个
(2n-2)个
2n+1条
2条
(2n+1-2)条
有关DNA复制的计算
有关DNA复制的计算
活动探究二:
将普通的大肠杆菌(DNA种含14N )放在含15N的培养液培养,若亲代DNA分子中含有腺嘌呤脱氧核苷酸m个,
(1)1次复制需要该游离的脱氧核苷酸多少个?
(2)2次复制呢需要该游离的脱氧核苷酸多少个?
(3)n次复制呢需要该游离的脱氧核苷酸多少个?
14N
15N
14N
15N
15N
15N
15N
15N
复制2次:
14N
14N
亲代
汉水丑生侯伟作品
14N
14N
15N
15N
复制1次:
m个
3m个
m (2n-1)个
活动探究三:
将普通的大肠杆菌(DNA种含14N )放在含15N的培养液培养,若亲代DNA分子中含有腺嘌呤脱氧核苷酸m个,
(1)第1次复制需要该游离的脱氧核苷酸多少个?
(2)第2次复制呢需要该游离的脱氧核苷酸多少个?
(3)第n次复制呢需要该游离的脱氧核苷酸多少个?
有关DNA复制的计算
m个
2m个
m·2n-1个
14N
15N
14N
15N
15N
15N
15N
15N
14N
14N
亲代
汉水丑生侯伟作品
14N
14N
15N
15N
复制1次:
复制2次:
第一
注意“DNA复制了n次”和“第n次复制”的区别,前者包括所有的复制,但后者只包括第n次的复制。
第二
第三
注意碱基的单位是“对”还是“个”。
切记在DNA复制过程中,无论复制了几次,含有亲代脱氧核苷酸链的DNA分子仅有两个。
第四
看清试题中问的是“DNA分子数”?还是“链数”?是“含”还是“只含”等关键词,以免掉进陷阱。
关于“DNA复制”的四点“注意”
有关DNA复制的计算
一个被15N标记的DNA分子,含有m对碱基,其中腺嘌呤为a个,在含14N的培养基中复制n次。
共产生子代DNA分子____个;
子代DNA分子中,含15N的DNA分子_____个;
子代DNA分子中,含14N的DNA分子_____个;
子代DNA分子中,只含15N的DNA分子_____个;
子代DNA分子中,只含14N的DNA分子______个;
复制过程中共需要游离(原料)的胞嘧啶_______________个;
7.复制第n次需要游离(原料)的胞嘧啶 ____________个。
2n
2
2n
0
2n - 2
(2n-1)×(m-a)
(2n-1)×(m-a)
有关DNA复制的计算
1.将用15N标记的一个DNA分子放在含有14N的培养基中,让其复制三次,则含有15N的DNA分子占全部DNA分子的比例是:( )
A.1/2 B.1/4 C.1/6 D.1/8
2.某一个DNA分子的碱基总数中,腺嘌呤为200个,复制n次后,消耗周围环境中含腺嘌呤的脱氧核苷酸3000个,该DNA分子已经复制了几次(是第几代)( )
A.三次(第四代) B.四次(第五代)
C.五次(第六代) D.六次(第七代)
课堂检测
3.一个被15N标记的DNA分子,以含14N的4种脱氧核苷酸为原料,连续复制3次,则含15N的脱氧核苷酸链占全部脱氧核苷酸链的比例是 ( )
A.1/2 B.1/4 C.1/6 D.1/8
4.一个由15N标记的DNA分子,放在没有标记的环境中培养,复制5次后标记的DNA分子占DNA分子总数的 ( )
A.1/10 B.1/5 C.1/16 D.1/25
课堂检测
5.有100个碱基对的某DNA分子片段,内含60个胞嘧啶脱氧核苷酸,若连续复制n次,则在第n次复制时需游离的胸腺嘧啶脱氧核苷酸是多少?( )
A.40n-1 B.40n C.40×2n-1 D.40×(2n-1)
6.某DNA分子有碱基200对,已知腺嘌呤和胸腺嘧啶之和占碱基总数的60%,则该DNA分子连续复制两次所需游离的鸟嘌呤脱氧核苷酸分子数为( )
A.80 B.160 C.240 D.320
课堂检测
7.一个含有1000个脱氧核苷酸对的双链DNA分子,放在32P标记了脱氧核苷酸的培养基中培养一代后,形成的子代分子其相对分子量比原来增加了( )
A.1000 B.2000
C.4000 C.5000
脱氧
核糖
含氮碱基
磷酸
课堂检测
8.在一个密闭的容器里,用含有同位素14C的脱氧核苷酸合成一个DNA分子,然后加入普通的含12C的脱氧核苷酸,经n次复制后,所得DNA分子中含12C的脱氧核苷酸链数与含14C的脱氧核苷酸链数之比是 ( )
A.2n∶1 B.(2n-2)∶n
C.(2n-2)∶2 D.(2n-1)∶1
10.某DNA分子中含有1 000个碱基对(被32P标记),其中有胸腺嘧啶400个。若将该DNA分子放在只含被31P标记的脱氧核苷酸的培养液中让其复制两次,子代DNA分子相对分子质量平均比原来减少 。
1500
课堂检测
(2021·安徽合肥高三调研)如图为某DNA分子片段,假设该DNA分子中有5 000对碱基,A+T占碱基总数的34%,若该DNA分子在含14N的培养基中连续复制2次,下列叙述正确的是( )
A.复制时作用于③处的酶为DNA聚合酶
B.DNA分子复制2次需游离的胞嘧啶脱氧核苷酸9900个
C.④处指的是腺嘌呤核糖核苷酸
D.子代中含15N的DNA分子占1/2
B
课堂检测
细胞分裂中染色体标记的问题---①有丝分裂
①有丝分裂中染色体标记情况分析
一个含有2n条染色体的细胞,其染色体DNA的两条链都被标记,
在不含有标记的原料中进行有丝分裂。
细胞分裂中染色体标记的问题---①有丝分裂
①有丝分裂中染色体标记情况分析
前中期 后期 子细胞
染色体总数 2n 4n 2n
标记染色体数 2n 4n 2n
标记单体数 4n(每条染色体的两个单体都被标记) 0 0
标记DNA数 4n(每个DNA的一条链被标记) 4n(每个DNA的一条链被标记) 2n(每个DNA的一条链被标记)
细胞分裂中染色体标记的问题---①有丝分裂
①有丝分裂中染色体标记情况分析
见证奇迹的时刻就在第二次有丝分裂的后期。
2n条染色体没有标记,2n条染色体有标记,走向细胞一极的2n条染色体可以是都有标记的染色体,走向细胞另一极的2n条染色体就是都没有标记的染色体。这样就形成了一个带有标记的子细胞和一个没有标记的子细胞。然而这是一种小概率事件,常发生的情况是,走向细胞一极的2n条染色体既有标记的染色体,也有不带标记的染色体,这样形成的两个子细胞就都会带有标记。
细胞分裂中染色体标记的问题---①有丝分裂
①有丝分裂中染色体标记情况分析
前中期 后期 子细胞
染色体总数 2n 4n 2n
标记染色体数 2n 2n 0~2n
标记单体数 2n(每条染色体的一个单体都被标记) 0 0
细胞分裂中染色体标记的问题---①有丝分裂
①有丝分裂中染色体标记情况分析
前中期 后期 子细胞
标记DNA数 2n(每条染色体的一个单体上的DNA的一条链被标记) 2n个DNA不含标记 2n(每条染色体上的一个单体上的DNA的一条链被标记) 2n个DNA不含标记 0~2n
减数分裂中染色体标记情况分析
细胞分裂中染色体标记的问题---②减数分裂
一个含有2n条染色体的细胞,其染色体DNA的两条链都被标记,在不含有标记的原料中进行减数分裂。
减数分裂中染色体标记情况分析
细胞分裂中染色体标记的问题---②减数分裂
前中期 后期 子细胞
染色体总数 2n(n对) 2n(n对) n
标记染色体数 2n(n对) 2n(n对) n
标记单体数 4n(每条染色体的两个单体都被标记) 4n(每条染色体的两个单体都被标记) 2n(每条染色体的两个单体都被标记)
标记DNA数 4n(每个DNA的一条链被标记) 4n(每个DNA的一条链被标记) 2n(每个DNA的一条链被标记)
减数分裂中染色体标记情况分析
细胞分裂中染色体标记的问题---②减数分裂
前中期 后期 子细胞
染色体总数 n条 2n n
标记染色体数 n 2n(n对) n
标记单体数 2n(每条染色体的两个单体都被标记) 0 0
标记DNA数 2n(每个DNA的一条链被标记) 2n(每个DNA的一条链被标记) n(每个DNA的一条链被标记)
细胞分裂中染色体标记的问题
一个含有2n条染色体的细胞,其染色体DNA的两条链都被标记,在不含有标记的原料中进行连续两次分裂,产生4个子细胞。
规律总结
1.若进行有丝分裂,则含有标记的子细胞数为2或3或4
2.若进行减数分裂,则含有放射性的子细胞数为4。
一个细胞中最多有2n条染色体被标记
每个细胞中有n条染色体被标记
细胞分裂中染色体标记的问题
例1.用32P标记玉米体细胞(含有20条染色体)的DNA分子双链,再将这些细胞转入不含32P的培养基中培养,在第二次细胞分裂的中期、后期及所产生的子细胞中被32P标记的染色体数分别为( )
A.20、40、20 B.20、20、20 C.20、20、0~20 D.20、40、0~20
C
例2.将DNA分子双链用3H标记的蚕豆(2n=12)根尖移入普通培养液(不含放射性元素)中,再让细胞连续进行有丝分裂。某普通培养液中的第三次有丝分裂中期,根据图示,判断该细胞中染色体的标记情况最可能是 。
b+c=12个,但b和c数目不确定
一、概念检测
1. DNA复制是在为细胞分裂进行必要的物质准备。据此判断下列相关表述是否正确。
(1) DNA复制与染色体复制是分别独立进行的。 ( × )
(2) 在细胞有丝分裂的中期,每条染色体是由两条染色单体组成的,所以DNA的复制也是在这个时期完成的。 ( × )
2. DNA复制保证了亲子代间遗传信息的连续性。下列关于DNA复制的叙述,正确的是(B)
A. 复制均在细胞核内进行
B. 碱基互补配对原则保证了复制的准确性
C. 1个DNA分子复制1次产生4个DNA分子
D. 游离的脱氧核苷酸在解旋酶的作用下合成子链
3. 将DNA双链都被15N标记的大肠杆菌放在含有14N的培养基中培养,使其分裂3次,下列叙述正确的是 (C)
A. 所有的大肠杆菌都含有15N
B. 含有15N的大肠杆菌占全部大肠杆菌的比例为1/2
C. 含有15N的大肠杆菌占全部大肠杆菌的比例为1/4
D. 含有15N的DNA分子占全部DNA分子的比例为1/8
练习与应用
二、拓展应用
1. 虽然DNA复制通过碱基互补配对在很大程度上保证了复制的准确性,但是,DNA平均每复制109个碱基对,就会产生1个错误。请根据这一数据计算,约有31.6亿个碱基对的人类基因组复制时可能产生多少个错误?这些错误可能产生什么影响?
【提示】可能有6个碱基发生错误。产生的影响可能很大,也可能没有影响。
复制泡
【答案】说明果蝇的DNA有多个复制起点,可同时从不同起点开始DNA的复制,由此加快DNA复制的速率,为细胞分裂做好物质准备。
2. 已知果蝇的基因组大小为1.8 ×108bp(bp 表示碱基对),真核细胞中DNA复制的速率一般为50 - 100bp/s。下图为果蝇DNA的电镜照片,图中的泡状结构叫作DNA复制泡,是DNA上正在复制的部分。请你推测果蝇DNA形成多个复制泡的原因。
练习与应用