2023届高三生物三轮复习课件(共18张PPT有视频)高考热点-新冠病毒的检测专题复习
文档属性
| 名称 | 2023届高三生物三轮复习课件(共18张PPT有视频)高考热点-新冠病毒的检测专题复习 |  | |
| 格式 | pptx | ||
| 文件大小 | 22.7MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2023-05-26 21:37:09 | ||
图片预览
文档简介
(共18张PPT)
新型冠状病毒的检测复习专题
新型冠状病毒检测
刺突糖蛋白
核衣壳蛋白
包膜蛋白
病毒的结构
新型冠状病毒核酸检测
①病毒只能寄生在活细胞中，才能繁殖
人们可采集到病毒核酸，源于病毒具备什么特征？
②结构简单有利于快速繁殖
采样
新型冠状病毒核酸检测
病毒核酸保存液需要哪些化学物质？
提示：既可以灭活病毒，又可以保证核酸稳定性
蛋白质变性剂
RNA酶抑制剂
杀菌抑菌剂
酚红指示剂
留样、保存
新型冠状病毒核酸检测
低温保存
提取
新型冠状病毒核酸检测
思考：提取RNA时应注意什么？
① 使提取的RNA分子纯度较高（依据：RNA、DNA、蛋白质、脂质在物理和化学性质上存在差异。）
② 提取过程中应尽量避免 RNA的断裂和降解，保持RNA分子的完整性
③ 提取过程中避免引入外源核酸的污染
④ 提取过程中要避免提取的核酸污染外界环境。
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
×100000倍
ORFlab基因
N基因
耐高温的DNA聚合酶
（Taq 酶）
模板
引物（2种）
稳定的缓冲溶液
（一般添加Mg2+）
PCR反应体系所需组分:
四种脱氧核苷酸
(实际为dNTP)
促进Taq DNA聚合酶活性
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
PCR名称：聚合酶链式反应
逆转录酶
使DNA充分变性，以利于引物更好地和模板结合。
步骤
1、移液：
用微量移液器按照PCR反应体系配方或PCR试剂盒的说明书，在微量离心管中依次加入各组分
2、离心：
待所有组分都加入后，盖严离心管的盖子，将微量离心管放入离心机里，离心约10s，使反应液集中在离心管的底部
3、反应：
参照下表的参数，设置好PCR仪的循环程序。将装有反应液的微量离心管放入PCR仪中进行反应。
循环程序 变性 复性 延伸
预变性 94℃,5min / /
30次 94℃,30s 55℃,30s 72℃,1min
最后一次 94℃,1min 55℃,30s 72℃,1min
预变性：
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
（提高反应速率）
对扩增后的DNA染色处理后凝胶电泳分离。DNA电泳是根据DNA分子大小来分离和识别DNA片段的技术。较小的DNA片段在凝胶中的移动相对容易，较大的DNA片段移动难。
当电泳结束时，比较DNA样品所在的位置和一系列已知大小的DNA片段的位置，这些已知大小的片段称为DNA分子量标准样。
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
核酸探针：是一段带有检测标记（同位素、荧光分子或化学发光催化剂），且顺序已知的，与目的基因互补核酸序列(DNA或RNA)。
核酸分子杂交过程:
英国分子生物学家萨瑟恩（Edwin Southern，1938—）Southern印迹原理示意图
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数(Ct值)与病毒核酸浓度有关，病毒核酸浓度越高，Ct值越_____。
小
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
1.荧光RT—PCR检测具有特异
性和灵敏性都很高的特点，主要与
试剂盒中的_____、___________有关
引物
探针
2. Taq 酶除了能催化DNA子链的延伸，还能____________________________。
催化探针的水解
3.每分子探针水解释放的R基团荧光强度为定值a，则反应体系中某时刻荧光信号强度(Rn)主要_____________、____________________________
________________有关
扩增次数
样品中病毒初始数量(或病毒样
品模板RNA含量)
新型冠状病毒抗原检测
第一“站”
样品垫 S
第二“站”
结合垫
第三“站”
反应垫 T 含新冠病毒抗体的条带
第四“站”
吸水垫 C
制作抗原检测试剂盒，
最重要的准备为：
制备单克隆抗体
T 为检测线
C 为质检线
新冠病毒的检测方法：
新冠病毒抗原检测：
可用 杂交技术检测。
缺点:1. 因筛选_____________往往需要长时间的研发过程。
2. 从鼻咽、口咽等上呼吸道取样，不一定能取到病原体，或者取样中所含病毒数量较少，因此抗原检测较核酸检测__________。
抗原—抗体
单克隆抗体
新型冠状病毒抗原检测
敏感度低
新冠病毒的检测方法：
血清抗体检测：
检查血液中的某一种抗体可确定一个人是否曾经受到某种特定的病原体的侵袭，所以检测患者血清中是否存在特异性抗体（需抗体达到一定浓度）可作为COVID-19感染的诊断指标，可用 杂交技术检测。
与核酸检测方法相比，抗体检测法更加简单，样本来源和处理单一，更易控制，但该方法不适合对可能处于潜伏期的疑似患者做早期排查，原因是：
因为机体没来得及产生相应的抗体或产生的抗体数量太少。
抗原-抗体
新型冠状病毒抗体检测
新型冠状病毒抗体检测
现今我国主要采用核酸扩增检测法，抗体检测结合临床表现等情况的方法，同时推进“抗原筛查、核酸诊断”的监测模式，在核酸检测基础上增加抗原检测作为补充。
我国现阶段应该采取怎样的监测模式？
（通过比较三种检测方式的优缺点）
检测方法 样本类型 优点 缺点 适用场景
核酸检测
抗原检测
抗体检测
讨论交流
新型冠状病毒的检测复习专题
新型冠状病毒检测
刺突糖蛋白
核衣壳蛋白
包膜蛋白
病毒的结构
新型冠状病毒核酸检测
①病毒只能寄生在活细胞中，才能繁殖
人们可采集到病毒核酸，源于病毒具备什么特征？
②结构简单有利于快速繁殖
采样
新型冠状病毒核酸检测
病毒核酸保存液需要哪些化学物质？
提示：既可以灭活病毒，又可以保证核酸稳定性
蛋白质变性剂
RNA酶抑制剂
杀菌抑菌剂
酚红指示剂
留样、保存
新型冠状病毒核酸检测
低温保存
提取
新型冠状病毒核酸检测
思考：提取RNA时应注意什么？
① 使提取的RNA分子纯度较高（依据：RNA、DNA、蛋白质、脂质在物理和化学性质上存在差异。）
② 提取过程中应尽量避免 RNA的断裂和降解，保持RNA分子的完整性
③ 提取过程中避免引入外源核酸的污染
④ 提取过程中要避免提取的核酸污染外界环境。
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
×100000倍
ORFlab基因
N基因
耐高温的DNA聚合酶
（Taq 酶）
模板
引物（2种）
稳定的缓冲溶液
（一般添加Mg2+）
PCR反应体系所需组分:
四种脱氧核苷酸
(实际为dNTP)
促进Taq DNA聚合酶活性
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
PCR名称：聚合酶链式反应
逆转录酶
使DNA充分变性，以利于引物更好地和模板结合。
步骤
1、移液：
用微量移液器按照PCR反应体系配方或PCR试剂盒的说明书，在微量离心管中依次加入各组分
2、离心：
待所有组分都加入后，盖严离心管的盖子，将微量离心管放入离心机里，离心约10s，使反应液集中在离心管的底部
3、反应：
参照下表的参数，设置好PCR仪的循环程序。将装有反应液的微量离心管放入PCR仪中进行反应。
循环程序 变性 复性 延伸
预变性 94℃,5min / /
30次 94℃,30s 55℃,30s 72℃,1min
最后一次 94℃,1min 55℃,30s 72℃,1min
预变性：
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
（提高反应速率）
对扩增后的DNA染色处理后凝胶电泳分离。DNA电泳是根据DNA分子大小来分离和识别DNA片段的技术。较小的DNA片段在凝胶中的移动相对容易，较大的DNA片段移动难。
当电泳结束时，比较DNA样品所在的位置和一系列已知大小的DNA片段的位置，这些已知大小的片段称为DNA分子量标准样。
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
核酸探针：是一段带有检测标记（同位素、荧光分子或化学发光催化剂），且顺序已知的，与目的基因互补核酸序列(DNA或RNA)。
核酸分子杂交过程:
英国分子生物学家萨瑟恩（Edwin Southern，1938—）Southern印迹原理示意图
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数(Ct值)与病毒核酸浓度有关，病毒核酸浓度越高，Ct值越_____。
小
上机检测
新型冠状病毒核酸检测
1.荧光RT—PCR检测具有特异
性和灵敏性都很高的特点，主要与
试剂盒中的_____、___________有关
引物
探针
2. Taq 酶除了能催化DNA子链的延伸，还能____________________________。
催化探针的水解
3.每分子探针水解释放的R基团荧光强度为定值a，则反应体系中某时刻荧光信号强度(Rn)主要_____________、____________________________
________________有关
扩增次数
样品中病毒初始数量(或病毒样
品模板RNA含量)
新型冠状病毒抗原检测
第一“站”
样品垫 S
第二“站”
结合垫
第三“站”
反应垫 T 含新冠病毒抗体的条带
第四“站”
吸水垫 C
制作抗原检测试剂盒，
最重要的准备为：
制备单克隆抗体
T 为检测线
C 为质检线
新冠病毒的检测方法：
新冠病毒抗原检测：
可用 杂交技术检测。
缺点:1. 因筛选_____________往往需要长时间的研发过程。
2. 从鼻咽、口咽等上呼吸道取样，不一定能取到病原体，或者取样中所含病毒数量较少，因此抗原检测较核酸检测__________。
抗原—抗体
单克隆抗体
新型冠状病毒抗原检测
敏感度低
新冠病毒的检测方法：
血清抗体检测：
检查血液中的某一种抗体可确定一个人是否曾经受到某种特定的病原体的侵袭，所以检测患者血清中是否存在特异性抗体（需抗体达到一定浓度）可作为COVID-19感染的诊断指标，可用 杂交技术检测。
与核酸检测方法相比，抗体检测法更加简单，样本来源和处理单一，更易控制，但该方法不适合对可能处于潜伏期的疑似患者做早期排查，原因是：
因为机体没来得及产生相应的抗体或产生的抗体数量太少。
抗原-抗体
新型冠状病毒抗体检测
新型冠状病毒抗体检测
现今我国主要采用核酸扩增检测法，抗体检测结合临床表现等情况的方法，同时推进“抗原筛查、核酸诊断”的监测模式，在核酸检测基础上增加抗原检测作为补充。
我国现阶段应该采取怎样的监测模式？
（通过比较三种检测方式的优缺点）
检测方法 样本类型 优点 缺点 适用场景
核酸检测
抗原检测
抗体检测
讨论交流
同课章节目录