人教版选修3专题二第二节动物细胞工程（共36张PPT）
文档属性
| 名称 | 人教版选修3专题二第二节动物细胞工程（共36张PPT） |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 630.6KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（新课程标准） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2014-09-11 14:06:02 | ||
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文档简介
课件36张PPT。一 动物细胞的培养1. 动物细胞的培养的概念：动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。2. 原理：细胞的增殖选材：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养。动物细胞的培养过程
幼龄动物取动物器官
和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础3. 动物细胞培养过程动物胚胎或幼龄动物的组织、器官单个细胞。细胞悬液细胞贴壁，接触抑制单个细胞，制细胞悬液
剪碎，胰蛋白酶处理加培养液原代培养胰蛋白酶消化传代培养10代以内，容易传代，10-50代左右，部分细胞核型可能发生变化
细胞贴壁生长：
培养悬液中分散的动物细胞，置于适宜的条件下，很快就贴附在培养瓶壁的表面上生长，
称为细胞贴壁或贴壁生长。
要求：
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞原代培养50代细胞传代培养无限传代单个细胞过程细胞产生接触抑制，停止增殖，出现第一次危机分瓶培养细胞增殖缓慢，
甚至停止，出现第二次危机遗传物质突变贴壁生长在进行动物细胞培养时，用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。2.分散成单个细胞动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶单个细胞加培养液制成细胞悬液10代
细胞部分细胞“癌变”，遗传物质改变，无限传代动物细胞培养不能
最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系3、过程：如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？遗传物质改变有关概念原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。①.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？
②.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？
③.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？
④.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？
进一步思考：否 胰蛋白酶水解蛋白质蛋白质蛋白质和磷脂能注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近4.动物细胞培养的条件:1）无菌无毒的环境：适宜的温度：人和哺乳动物细胞最适温度为36.5±0.5℃。
适宜的酸碱度：PH：7.2-7.4液体合成培养基：（糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）等；通常还需加入血浆、血清等天然成分。4）气体环境：2）营养：3）温度和pH：主要是O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） o2是细胞代谢必须的； CO2维持培养液的PH。①对培养液和所有培养用具无菌处理；②培养液中添加抗生素防止培养过程中污染；③定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。使用时需要注意的问题？为何动物细胞培养必须加入血清？补充合成培养基中缺乏的物质10、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此图回答。
(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自___________。
(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是__________，然后用 酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是_______________.
(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有
_______ ___等。在此瓶中培养一段时间后，一般传到第 代，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为___________.
(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用_____
处理，然后配置成___________，再分装。
(5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡。原因是_________________________。幼龄动物的器官或组织、动物胚胎剪碎 胰蛋白 使每个细胞能与培养液接触 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 10原代培养胰蛋白酶 细胞悬浮液细胞没有发生瘤变动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶单个细胞加培养液制成细胞悬浮液10代
细胞部分细胞“癌变”，无限传代动物细胞培养不能
最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系2.动物细胞培养过程： 概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物原理：供体细胞的选择及原因：受体细胞的选择及原因：动物细胞核的全能性取供体动物的体细胞培养,一般选用传代10代以内的细胞因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型选择减Ⅱ中期的卵母细胞作为受体细胞①细胞大,易于操作;
②卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养;
③细胞质中含有某种能激发重组细胞分裂分化的物质取供体细胞取卵母细胞 供体细胞培养培养到 MⅡ中期 卵母细胞去核 供体细胞注入去核的卵母细胞 供体核进入受体卵母细胞 重组胚胎 代孕母牛 生出与供体遗传物质基本相同的个体2.过程：二、动物体细胞核移植技术和克隆动物类型：操作流程：胚胎细胞核移植和体细胞核移植应用：存在问题：1、加速家畜的遗传改良，促进优良畜群繁育
2、保护濒危物种
3、生产珍贵的医用蛋白
4、克隆器官作为器官移植的供体1、成活率低
2、克隆动物的健康问题
3、克隆动物食品的安全性问题克隆羊“多利”的产生过程:核移植技术1.克隆羊培育过程另一头绵羊的子宫动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞原代培养50代细胞传代培养无限传代单个细胞过程细胞产生接触抑制，停止增殖，出现第一次危机分瓶培养细胞增殖缓慢，
甚至停止，出现第二次危机遗传物质突变贴壁生长2、(06江苏)下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。（1）_______________技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于________培养基。
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是________________。
（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用________________。
（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_______________特点，又具备淋巴细胞的_______________特点。
（6）淋巴细胞是由动物体_________中的______________细胞分化、发育而来。
（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是____________。动物细胞培养选择特异性强,灵敏度高灭活的病毒在体外大量增殖分泌特异性抗体骨髓造血干细胞主动运输3、下图为单克隆抗体制备流程示意图。
(1)单克隆抗体制备技术的基础是 。
(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是
。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的 ，以保证生命活动的正常进行。
(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞／ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是 。
(4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是 。动物细胞培养筛选杂交瘤细胞种类和数量（浓度）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜4．已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请回答：
（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有 种融合细胞。
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说原理。
方法： ；
原理： 。 2培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖 5、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案3）图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。1）该实验方案的目的是__________2）A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______4）C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体B细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代50（二）动物细胞融合1.过程：②特点：产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏常规抗体制备一个B淋巴细胞：只分泌一种特异性抗体单克隆抗体杂交瘤细胞 小鼠骨髓瘤细胞：能无限增殖融合 ①向动物体内反复注射抗原，使动物产生抗体，然后从血清中分离所
需抗体。用专一抗体检验阳性1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ）
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞A2、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ ） A.容易产生各种变异 B．具有更强的全能性 C.取材十分方便 D．分裂增殖的能力强D3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于( )
A.培养基不同；
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；
C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；
D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。A4、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合
中有特殊性的是（ ）
A、融合的原理 B、融合的优点
C、融合的诱导手段 D、融合的过程
5、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导
融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培
养基上不能存活、增殖的细胞是（ ）
①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞
A、① ② ③ ④ B、 ① ③ ⑤ C、① ③ D、② ④ C A6、基因型为AaBb的水稻(具有24条染色体)的花粉通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的育种过程。
(1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后的形成的不规则细胞团，愈伤组织形成中，必须从培养基中获得__________。
(2)要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有________和_______两类激素。
(3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照，其原因是_____________利用光照制造有机物，供试管苗生长。
(4)试管苗的细胞核中含有___________条脱氧核苷酸链。
(5)培养出的试管基因型有 。如果要获得育种需要的植株，并能繁殖新品种，后面的育种步骤是_________________。 各种营养(水、无机盐、蔗糖等能量物质)和小分子有机物生长素、 细胞分裂素叶绿体 24AB、Ab、ab、aＢ用一定浓度的秋水仙素处理组织培养获得的幼苗6、基因型为AaBb的水稻(具有24条染色体)的花粉通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的育种过程。
(1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后的形成的不规则细胞团，愈伤组织形成中，必须从培养基中获得__________。
(2)要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有________和_______两类激素。
(3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照，其原因是_____________利用光照制造有机物，供试管苗生长。
(4)试管苗的细胞核中含有___________条脱氧核苷酸链。
(5)培养出的试管基因型有 。如果要获得育种需要的植株，并能繁殖新品种，后面的育种步骤是_________________。 各种营养(水、无机盐、蔗糖等能量物质)和小分子有机物生长素、 细胞分裂素叶绿体 24AB、Ab、ab、aＢ用一定浓度的秋水仙素处理组织培养获得的幼苗1.下列哪—项属于克隆（ ）
A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中
B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内
C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤
细胞
D．将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系D2.（多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用
成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应
器,成功地在实验室里培育出新的动脉血管，这种血管的
外形和功能都与真的血管一样,这一研究成果是生物组织
培养领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，正
确的是（ ）
A．属于“克隆” B．可能要利用去核卵细胞
C．关键是激发血管细胞的全能性
D．关键是激发血管细胞发育成血管的潜能ABD3 .从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉
核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植
入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状
（ ）
A、难以预测 B、像甲 C、像乙 D、像丙
4.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再
是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功
“复生”野驴的方法是 （ ）
A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分
化、再分化，培育成新个体
B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个
体
C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，
经孕育培养成新个体
D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体B C 5.下图所示为用两栖动物卵所做的实验图解，据图回答
下列问题：⑴蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需的_________，重新组合的细胞相当于蛙的______ 细胞，经过
____________ 和________________形成组织和器官。
全部基因 受精卵 细胞分裂 细胞分化 ⑵本实验结果说明_____________________具有全能性，图中A过程采用的技术手段称做_______________。 动物体细胞核 核移植技术4.科学工作者用绿色和红色荧光材料，分别标记人和鼠的
细胞膜上的蛋白质。当两个标记细胞融合成一个细胞后，
起初一半膜发出绿色荧光，另一半膜发出红色荧光，一段
时间后，两种颜色的荧光点均匀分布，如图所示。请分析
回答： ⑴该实验结果说明了细胞膜 ，这是因为
⑵若在两个细胞融合成一个细胞后，将融合细胞置于0℃
条件下再保持40min，则融合细胞仍然是一半膜发绿色荧
光，另一半膜发红色荧光，这说明具有一定的流动性 构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质大都是可以运动的 膜的流动性受温度影响，在低温下分子的运动受抑制
幼龄动物取动物器官
和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础3. 动物细胞培养过程动物胚胎或幼龄动物的组织、器官单个细胞。细胞悬液细胞贴壁，接触抑制单个细胞，制细胞悬液
剪碎，胰蛋白酶处理加培养液原代培养胰蛋白酶消化传代培养10代以内，容易传代，10-50代左右，部分细胞核型可能发生变化
细胞贴壁生长：
培养悬液中分散的动物细胞，置于适宜的条件下，很快就贴附在培养瓶壁的表面上生长，
称为细胞贴壁或贴壁生长。
要求：
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞原代培养50代细胞传代培养无限传代单个细胞过程细胞产生接触抑制，停止增殖，出现第一次危机分瓶培养细胞增殖缓慢，
甚至停止，出现第二次危机遗传物质突变贴壁生长在进行动物细胞培养时，用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。2.分散成单个细胞动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶单个细胞加培养液制成细胞悬液10代
细胞部分细胞“癌变”，遗传物质改变，无限传代动物细胞培养不能
最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系3、过程：如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？遗传物质改变有关概念原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。①.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？
②.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？
③.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？
④.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？
进一步思考：否 胰蛋白酶水解蛋白质蛋白质蛋白质和磷脂能注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近4.动物细胞培养的条件:1）无菌无毒的环境：适宜的温度：人和哺乳动物细胞最适温度为36.5±0.5℃。
适宜的酸碱度：PH：7.2-7.4液体合成培养基：（糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）等；通常还需加入血浆、血清等天然成分。4）气体环境：2）营养：3）温度和pH：主要是O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） o2是细胞代谢必须的； CO2维持培养液的PH。①对培养液和所有培养用具无菌处理；②培养液中添加抗生素防止培养过程中污染；③定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。使用时需要注意的问题？为何动物细胞培养必须加入血清？补充合成培养基中缺乏的物质10、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此图回答。
(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自___________。
(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是__________，然后用 酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是_______________.
(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有
_______ ___等。在此瓶中培养一段时间后，一般传到第 代，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为___________.
(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用_____
处理，然后配置成___________，再分装。
(5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡。原因是_________________________。幼龄动物的器官或组织、动物胚胎剪碎 胰蛋白 使每个细胞能与培养液接触 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 10原代培养胰蛋白酶 细胞悬浮液细胞没有发生瘤变动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶单个细胞加培养液制成细胞悬浮液10代
细胞部分细胞“癌变”，无限传代动物细胞培养不能
最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系2.动物细胞培养过程： 概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物原理：供体细胞的选择及原因：受体细胞的选择及原因：动物细胞核的全能性取供体动物的体细胞培养,一般选用传代10代以内的细胞因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型选择减Ⅱ中期的卵母细胞作为受体细胞①细胞大,易于操作;
②卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养;
③细胞质中含有某种能激发重组细胞分裂分化的物质取供体细胞取卵母细胞 供体细胞培养培养到 MⅡ中期 卵母细胞去核 供体细胞注入去核的卵母细胞 供体核进入受体卵母细胞 重组胚胎 代孕母牛 生出与供体遗传物质基本相同的个体2.过程：二、动物体细胞核移植技术和克隆动物类型：操作流程：胚胎细胞核移植和体细胞核移植应用：存在问题：1、加速家畜的遗传改良，促进优良畜群繁育
2、保护濒危物种
3、生产珍贵的医用蛋白
4、克隆器官作为器官移植的供体1、成活率低
2、克隆动物的健康问题
3、克隆动物食品的安全性问题克隆羊“多利”的产生过程:核移植技术1.克隆羊培育过程另一头绵羊的子宫动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞原代培养50代细胞传代培养无限传代单个细胞过程细胞产生接触抑制，停止增殖，出现第一次危机分瓶培养细胞增殖缓慢，
甚至停止，出现第二次危机遗传物质突变贴壁生长2、(06江苏)下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。（1）_______________技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于________培养基。
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是________________。
（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用________________。
（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_______________特点，又具备淋巴细胞的_______________特点。
（6）淋巴细胞是由动物体_________中的______________细胞分化、发育而来。
（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是____________。动物细胞培养选择特异性强,灵敏度高灭活的病毒在体外大量增殖分泌特异性抗体骨髓造血干细胞主动运输3、下图为单克隆抗体制备流程示意图。
(1)单克隆抗体制备技术的基础是 。
(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是
。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的 ，以保证生命活动的正常进行。
(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞／ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是 。
(4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是 。动物细胞培养筛选杂交瘤细胞种类和数量（浓度）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的
（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜4．已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请回答：
（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有 种融合细胞。
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说原理。
方法： ；
原理： 。 2培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖 5、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案3）图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。1）该实验方案的目的是__________2）A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______4）C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体B细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代50（二）动物细胞融合1.过程：②特点：产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏常规抗体制备一个B淋巴细胞：只分泌一种特异性抗体单克隆抗体杂交瘤细胞 小鼠骨髓瘤细胞：能无限增殖融合 ①向动物体内反复注射抗原，使动物产生抗体，然后从血清中分离所
需抗体。用专一抗体检验阳性1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ）
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞A2、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ ） A.容易产生各种变异 B．具有更强的全能性 C.取材十分方便 D．分裂增殖的能力强D3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于( )
A.培养基不同；
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；
C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；
D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。A4、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合
中有特殊性的是（ ）
A、融合的原理 B、融合的优点
C、融合的诱导手段 D、融合的过程
5、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导
融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培
养基上不能存活、增殖的细胞是（ ）
①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞
A、① ② ③ ④ B、 ① ③ ⑤ C、① ③ D、② ④ C A6、基因型为AaBb的水稻(具有24条染色体)的花粉通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的育种过程。
(1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后的形成的不规则细胞团，愈伤组织形成中，必须从培养基中获得__________。
(2)要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有________和_______两类激素。
(3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照，其原因是_____________利用光照制造有机物，供试管苗生长。
(4)试管苗的细胞核中含有___________条脱氧核苷酸链。
(5)培养出的试管基因型有 。如果要获得育种需要的植株，并能繁殖新品种，后面的育种步骤是_________________。 各种营养(水、无机盐、蔗糖等能量物质)和小分子有机物生长素、 细胞分裂素叶绿体 24AB、Ab、ab、aＢ用一定浓度的秋水仙素处理组织培养获得的幼苗6、基因型为AaBb的水稻(具有24条染色体)的花粉通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的育种过程。
(1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后的形成的不规则细胞团，愈伤组织形成中，必须从培养基中获得__________。
(2)要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有________和_______两类激素。
(3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照，其原因是_____________利用光照制造有机物，供试管苗生长。
(4)试管苗的细胞核中含有___________条脱氧核苷酸链。
(5)培养出的试管基因型有 。如果要获得育种需要的植株，并能繁殖新品种，后面的育种步骤是_________________。 各种营养(水、无机盐、蔗糖等能量物质)和小分子有机物生长素、 细胞分裂素叶绿体 24AB、Ab、ab、aＢ用一定浓度的秋水仙素处理组织培养获得的幼苗1.下列哪—项属于克隆（ ）
A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中
B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内
C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤
细胞
D．将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系D2.（多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用
成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应
器,成功地在实验室里培育出新的动脉血管，这种血管的
外形和功能都与真的血管一样,这一研究成果是生物组织
培养领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，正
确的是（ ）
A．属于“克隆” B．可能要利用去核卵细胞
C．关键是激发血管细胞的全能性
D．关键是激发血管细胞发育成血管的潜能ABD3 .从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉
核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植
入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状
（ ）
A、难以预测 B、像甲 C、像乙 D、像丙
4.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再
是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功
“复生”野驴的方法是 （ ）
A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分
化、再分化，培育成新个体
B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个
体
C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，
经孕育培养成新个体
D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体B C 5.下图所示为用两栖动物卵所做的实验图解，据图回答
下列问题：⑴蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需的_________，重新组合的细胞相当于蛙的______ 细胞，经过
____________ 和________________形成组织和器官。
全部基因 受精卵 细胞分裂 细胞分化 ⑵本实验结果说明_____________________具有全能性，图中A过程采用的技术手段称做_______________。 动物体细胞核 核移植技术4.科学工作者用绿色和红色荧光材料，分别标记人和鼠的
细胞膜上的蛋白质。当两个标记细胞融合成一个细胞后，
起初一半膜发出绿色荧光，另一半膜发出红色荧光，一段
时间后，两种颜色的荧光点均匀分布，如图所示。请分析
回答： ⑴该实验结果说明了细胞膜 ，这是因为
⑵若在两个细胞融合成一个细胞后，将融合细胞置于0℃
条件下再保持40min，则融合细胞仍然是一半膜发绿色荧
光，另一半膜发红色荧光，这说明具有一定的流动性 构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质大都是可以运动的 膜的流动性受温度影响，在低温下分子的运动受抑制