开滦第二高级中学2022-2023学年高二下学期6月月考
生物试卷答案
一、选择题
1-5 CACAC 6-10 ADDCB 11-15 BBACB
16 ABD 17 ABD 18 BC 19 C
二、简答题
20. （8分，除标注外，每空1分）
(1)脂肪 碳源必须是含碳无机物（或碳酸盐），同时加入硫化物（2分） 选择
(2)防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，防止培养皿表面的水分过快地挥发（2分）
(3)稀释涂布平板法 D
21. （10分，除标注外，每空1分）
(1)高压蒸汽灭菌 香豆素的化学结构与黄曲霉毒素的类似，作为唯一碳源可使目的菌能够生长而其他微生物生长受到抑制（2分） 提供无机盐和维持培养基的PH值（2分）
(2)平板划线法或稀释涂布平板法 单个菌落直径较大
(3)灭菌的发酵离心上清液 H菌株分泌的黄曲霉毒素降解酶的活力（2分）
22.（11分）
（1）刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞（1分）
（2）血清（1分） 95%的空气和5%的CO2（1分）
（3）灭活的病毒（1分）只有融合的杂交瘤细胞才能生长（1分）
（4）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或“每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞”）（2分）
（5）克隆化培养和抗体检测（2分）
（6）既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量（2分）
23.（13分，除标注外，每空1分）
（1）逆转录 限制性内切核酸
（2）相同的黏性末端 DNA连接 将目的基因导入受体细胞
（3）能自主复制、有多个限制酶切位点、有标记基因、对宿主细胞无害（2分）
（4）病毒在人体内进行增殖（2分）
（5）DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物体（2分）
（6）从预期蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列（2分）
24．(16分，除标注外，每空1分)
（1）AGATCT GGTAACC
使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸（2分）
（2）抗生素N 2、3（2分）
启动子、终止子、目的基因、标记基因、复制原点（2分）
（3）BglⅡ和 BstEⅡ（2分）
防止发生自身环化，保证 CBHⅡ基因和pUT 质粒正确连接（2分）
（4）A菌 B菌分解纤维素能力比A菌更强
降解秸秆，减少秸秆燃烧带来的空气污染开滦第二高级中学2022-2023学年高二下学期6月月考
生物试卷
第I卷（选择题42分）
一、单项选择题（每题2分，共30分；请将正确选项涂写在答题卡上）
1． 发酵食品是中国传统食品中一个重要的类别，承载了中华民族悠久的历史和丰富的文化内涵。早在《齐民要术》中就有泡菜制作技术的相关记载：“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内雍中。”下列关于泡菜制作的叙述，错误的是（ ）
A．发酵初期，水槽内有气泡产生是因为微生物有氧呼吸产生了 CO2
B．盐水注入泡菜坛前，煮沸所用盐水的目的是杀灭细菌和除去部分溶解氧
C．发酵过程中的无氧环境、发酵液的 pH 上升可抑制其他杂菌生长
D．若罐口密闭不严会导致需氧腐生菌生长繁殖，使泡菜腐烂变质
2．微生物培养过程中十分重视无菌操作，以防止杂菌污染。请分析下列操作正确的是（ ）
A．实验操作者的双手用 75%酒精消毒
B．接种操作时要打开紫外灯并在酒精灯火焰附近进行
C．培养工作结束后，所有使用过的器皿都必须洗涤后再高压蒸汽灭菌处理
D．高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从高压蒸汽灭菌锅开始加热时计时
3．关于微生物的培养与应用，下列叙述错误的是（ ）
A．通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，是因为水果中果胶含量较高
B．为获得某微生物的单菌落，可用稀释涂布平板法对微生物悬液进行操作
C．葡萄酒酿制期间，酵母细胞内由ADP转化为ATP的过程只在线粒体中进行
D．酵母菌菌液用血细胞计数板计数的数值比用稀释涂布平板法计数的大
4．下列有关发酵工程应用的叙述，错误的是（ ）
A．发酵工程以其生产条件温和、原料来源丰富、产物多样等特点在许多领域得到广泛应用
B．发酵工程可生产多种食品添加剂，用于增加食品营养或改善食品口味、色泽和品质等
C．基因工程与发酵工程结合，可利用微生物大量生产动植物体的某些激素或代谢物
D．发酵工程可利用制糖工业的废液生产单细胞蛋白，这也符合生态工程中的循环原理
5．烟薯—25 是一种甜度大、抗病力强、产量高的红薯。它是通过无性繁殖获得的作物，多代繁殖后病毒会在体内积累，导致含糖量不足，产量下降。大面积栽培时，一般都用脱毒苗。下列有关脱毒苗培育过程的叙述，错误的是（ ）
A．脱毒苗培育过程的原理是植物细胞具有全能性
B．脱毒苗培育过程需经历脱分化和再分化两个阶段
C．脱分化和再分化的培养基成分是相同的，但两个阶段光照条件不同
D．培育脱毒苗应选用分生组织，因为分裂旺盛，所含的病毒少
6．科学家用植物体细胞杂交技术，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，培育出了“番茄一马铃薯”杂种植株，培育过程如下图所示，其中①～⑤表示过程，a～f 表示细胞、组织或植株。下列说法错误的是（ ）
A．过程①常用酶解法去除细胞壁，过程②常用灭活病毒诱导原生质体融合
B．过程③涉及的主要细胞器是高尔基体，过程④不需要光照，过程⑤需要光照
C．该技术打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种
D．杂种植株最后没有实现“地上结番茄，地下长马铃薯”，可能是基因的表达相互干扰导致的
7．我国科学家利用基因编辑技术，获得一只生物节律核心基因 BMAL1 敲除的猕猴。取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，获得 5 只克隆猴，用于研究节律机制。以下叙述不正确的是（ ）
A．克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性
B．克隆猴基因组成差异小，作为实验动物便于研究
C．可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合
D．受精卵经基因编辑后形成的胚胎可发育为克隆猴
8．受精过程的顺序为（ ）
①第一次卵裂开始②释放第二极体③穿越透明带④雌、雄原核的形成⑤核膜消失，雌雄原核融合
A．①②③④⑤ B．③④②⑤①
C．④⑤②①③ D．③②④⑤①
9．北方白犀牛曾经广泛分布于非洲中部，因盗猎和栖息地破坏而濒临灭绝。2018 年 3 月，北方白犀牛仅剩下最后两头雌性个体。此前，科学家保存了北方白犀牛的精子，欲通过胚胎工程方法繁育北方白犀牛。下列说法错误的是（ ）
A．可以从雌性北方白犀牛体内取出卵母细胞进行体外受精
B．可以使用雌性南方白犀牛作为受体，进行胚胎移植
C．此过程和克隆技术相同，将会得到遗传背景一致的后代
D．可以通过胚胎分割技术得到更多遗传物质相同的后代
10．阿霉素是一种抗肿瘤抗生素，没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对机体其它细胞造成伤害。将阿霉素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合制成抗体–药物偶联物（ADC）。有关叙述错误的是（ ）
A．阿霉素对肿瘤细胞和已经分化的组织细胞都有杀伤作用
B．将肿瘤抗原反复注射到小鼠体内，从小鼠的血清中分离出的抗体为单克隆抗体
C．ADC的制成实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤
D．利用同位素标记的单克隆抗体在特定组织中的成像技术，可定位诊断肿瘤
11.干细胞在生命科学的细胞修复、发育生物学、医学、药物学等领域有着极为广阔的应用前景，吸引着众多科学家投入到相关研究中、下列相关叙述错误的是（ ）
A．造血干细胞是发现最早的一类成体干细胞
B．目前发现的干细胞都来源于早期胚胎和骨髓
C．不同类型干细胞的分化潜能存在着较大差别
D．用iPS细胞治疗阿尔茨海默病理论上可以避免免疫排斥反应
12. 下列关于PCR技术的叙述，正确的是（）
A．PCR反应体系中需要添加耐高温的解旋酶和DNA聚合酶
B．PCR过程中在引物的3'端添加脱氧核苷酸实现子链延伸
C．利用PCR对目的基因进行扩增时需要基因序列全部已知
D．在设计两种引物时，需要让引物和引物之间的碱基序列互补
13.下列关于以洋葱为材料进行“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（）
A．利用DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精的特性，可初步分离DNA与蛋白质
B．将洋葱切碎加入研磨液充分研磨，过滤后收集沉淀物中的DNA
C．加入预冷的酒精后，立即用玻璃棒迅速搅拌，使丝状DNA析出并缠绕在玻璃棒上
D．将白色丝状物溶解在NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后振荡，观察颜色变化
14. 如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图．已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因．判断下列说法正确的是（ ）
A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法
B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌
C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌
D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
15. 转基因作物是通过转基因技术对农作物进行精确地改造而产生的。转基因作物一方面在产量、抗逆性及品质等方面有显著改进，极大地降低了农业生产成本；另一方面，科学家通过动物实验发现转基因作物可能对人类健康存在危害。英国前首相布莱尔为此发表了一篇文章，文中说：“毫无疑问，转基因作物对人类健康和环境有可能带来危害，保护公众和环境的安全，现在是，将来也是政府的首要任务；但与此同时，这种新的科技成果将给人类带来更多的利益，这也是毋庸置疑的。”据以上材料，你认为下列说法欠妥的是( )
A. 转基因技术应用的基本原理是基因重组，转基因作物是转基因技术的一种产物
B. 若转基因作物产生了对人类健康及环境的负面影响，我们应该反思转基因技术
C. 科学家必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的风险并采取相应的防范措施
D. 国家必须对转基因作物研究制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制
二、不定向选择题：（本题共4小题，每小题3分，共12分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
16. 如图甲是果酒和果醋发酵的装置图，图乙是果酒和果醋制作过程中发生的物质变化。下列相关叙述不正确的是（ ）
A．用图甲所示装置制作果酒时，要加入适量的酵母菌，且一直关紧阀a和阀b
B．用图甲所示装置制作果醋时，阀a要关闭
C．在无氧条件下能发生图乙中的①②过程
D．③④过程都需要氧气的参与，且反应场所相同
17. 抗体—药物偶联物(ADC)通过采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到能特异性识别肿瘤细胞的单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如图所示，下列有关说法正确的是（ ）
A．单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
B．用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体
C．ADC通过抗体与细胞膜上的受体特异性结合，以主动运输的方式进入肿瘤细胞
D．ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡
18. 下图为利用玉米（2n=20）的幼苗芽尖细胞（基因型AaBb，两对基因独立遗传）进行实验的流程示意图。下列叙述错误的是（ ）
A．经①过程培育的植株A一般能保持原来玉米幼芽的基因型
B．秋水仙素通过抑制着丝粒分裂使得植株B含4个染色体组
C．植株C是由花粉离体培育而来的单倍体且基因型有1种
D．获得幼苗1和2的过程可体现体细胞和生殖细胞具有全能性
19. ACC合成酶是乙烯合成的关键酶，乙烯的合成会影响番茄的储藏和运输。下图为科学家利用ACC合成酶基因的反向连接构建载体，通过基因工程设计的耐储转基因番茄流程图。下列说法不正确的是（）
A．引物的特异性是能够从番茄DNA中获取ACC合成酶基因的关键
B．反向连接的ACC合成酶基因合成的mRNA通过与正常的ACC合成酶基因的mRNA互补，限制了细胞内乙烯的合成
C．可以在培养基中加入氨苄青霉素和四环素，存活下来的细胞内则含有携带目的基因的质粒
D．设计双酶切处理目的基因及载体的目的是为了更好地保证目的基因的反向连接
第II卷（非选择题58分）
三、简答题：(请将答案填写在答题纸的相应位置上)
20. （8 分）鲸死亡后会沉入海底，俗称“鲸落”。“鲸落”后期会形成一个以厌氧菌和硫细菌等为主体的生态系统。厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食，同时产生一些硫化氢等硫化物。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐，并以该过程中释放的能量合成有机物。请回答相关问题：
(1)培养微生物的培养基中一般都会含有水、无机盐、氮源和碳源，培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是________。要培养硫细菌，培养基中的成分需要特殊配制，主要体现在____ _____，这种培养基可以用来专一性培养硫细菌，所以称为________培养基。
(2)在分离“鲸落”中的微生物时要制备固体培养基，在倒平板操作后，将平板倒置，这样做的目的是_____________________________________________。
(3)为了研究“鲸落”中含有微生物的情况，需将“鲸落”提取物加水稀释，然后将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，这种方法称为________________。下面所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是________。
21.（10分） 黄曲霉毒素主要是由黄曲霉和寄生曲霉等多种真菌产生的次级代谢产物，包括AFB1、AFB2、AFG1等多种衍生物。黄曲霉毒素的毒性强，具有抑制免疫、诱导突变和致癌的作用，香豆素是黄曲霉毒素的结构类似物。黄曲霉毒素的生物去除法是利用微生物分泌的酶降解黄曲霉毒素，产生低毒或无毒的降解产物。研究人员为筛选高效降解黄曲霉毒素的菌株，开展了相关的研究。回答下列问题：
(1)配制的富集培养基和初筛平板培养基，常用_________法进行灭菌。富集培养基的成分：香豆素0．1%、（NH4）2SO4 0．5%、NaC1 0．85%、pH7．0；初筛平板培养基的成分：香豆素0．1%、（NH4）2SO40．5%、KH2PO40．25%、MgSO40．1%、Na2HPO4·12H2O 0．05%、CaCl2 0．01%、琼脂2%、pH6．5。香豆素可用于筛选目的菌的原因是_____________________________________________________。
初筛平板培养基中无机物的主要作用是 ____________________________________________。
(2)从霉烂的花生壳、动物粪便中取样，稀释后将菌悬液加入到富集培养基中，适宜条件下富集培养三次。将富集培养的菌液用_______________法接种到初筛平板培养基上，适宜条件下培养后，挑选_________的菌体进行纯化培养。
(3)经多轮筛选后获得H菌株。摇瓶培养H菌株一段时间后取5mL发酵液进行离心，取950μL离心上清液加入5μL一定浓度的AFB1液，控制AFB1的终浓度1μg/mL。反应24h后经萃取、溶解、过滤后检测残余AFB1的含量。该实验还需要在________________________________中加入等量的AFB1液作为空白对照。该步骤用于检测 ________________________________________________。
22.（11分） 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：
（1）在图2中，过程①注射癌胚抗原的目的是____________________________________。
（2）培养骨髓瘤细胞时，需要在培养液中提供细胞所需的各种营养物质，如糖类、氨基酸、无机盐、维生素。此外，通常还需要加入__________等天然成分。进行细胞培养时，需提供的气体环境是__________________。
（3）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是_____________。经过过程②诱导融合后的细胞在HAT培养基上进行筛选，筛选结果是________________________________。
（4）过程④一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是____________________________。
（5）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行________________________，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞。
（6）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药的优势是____________________________________________。
23.（13分）由陈薇院士主导研制的缺陷型腺病毒重组新冠疫苗已在多个国家开展三期临床实验。请据此回答相关问题：
（1）新冠病毒是RNA病毒，陈薇院士团队提取新冠病毒的RNA后，可在 酶的作用下，合成一段DNA分子。以新冠病毒的RNA为模板合成的DNA分子中含有合成新冠病毒表面刺突蛋白（简称为“S蛋白”）基因，可用特定的 酶将该基因从DNA分子上切割下来。
（2）陈薇院士团队用切割“S蛋白”基因的酶切割缺陷型腺病毒（简称“腺病毒”）的DNA，以便获得 ，然后可用 酶将“S蛋白”基因和用同种酶切割过的腺病毒DNA整合在一起形成一个重组DNA分子。将重组DNA分子与腺病毒蛋白质外壳重组形成重组病毒，重组病毒感染人体细胞后可使人体细胞合成S蛋白，重组病毒感染人体细胞的过程相当于基因工程的 的过程。
（3）科学家采用了缺陷型腺病毒作为合成新冠病毒表面刺突蛋白的基因的载体，你认为科学家选它的理由有_ 等（写出2点）。
（4）疫苗制备中选取复制缺陷型腺病毒作为载体可以防止 ，进而提高疫苗的安全性。
（5）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么这一启示是 。
（6）研究发现，如果将S蛋白上的某个氨基酸改变为半胱氨酸，免疫效果更好，请写出此种技术的基本流程 。
24.（16分）研究人员从土壤中分离获得能分解纤维素的细菌（A菌），从A菌中提取一种纤维素酶基因（CBHⅡ，长度为1.4kbp）并进行PCR扩增，然后与高效表达载体pUT质粒（长度为11．7bp）连接构建成重组质粒并导入A菌，从而获得分解纤维素能力更强的工程菌（B菌）。
限制酶 识别序列及酶切位点
BglⅡ A↓GATCT
BstEⅡ G↓GTAACC
SacⅠ G↓AGCTC
MspⅠ G↓CGG
BamHⅠ G↓GATCC
（1）CBHⅡ基因两端需添加相关酶切位点才能与pUT质连接，因此在扩增CBHⅡ基因时，需要在两种引物上分别添加 ______序列和 ______序列。PCR中需要添加引物的原因是 ______。
（2）为鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒导入A菌，并将其接种在含 ______的培养基上培养，然后提取3个不同菌落的质粒分别进行双酶切验证将酶切片段和CBHⅡ基因分别进行电泳，结果如图2所示。据此分析，菌落 ______中成功导入了重组质粒。完整的重组质粒应包括 ______（至少答出三点）
。
（3）图3中B链为转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为5′→3′。为了使CBHⅡ基因按照正确的方向与已被酶切的pUT质粒连接，图中酶切位点1和酶切位点2所对应的酶分别是 ______，用两种限制酶切割的目的是 ______。
（4）为检测B菌的纤维素分解能力，将含有20%纤维素的培养基分为三组，一组接种B菌，一组不做处理，一组接种 ______，在相同条件下培养一段时间，测定培养基中纤维素含量，结果如图4所示，说明 ______。预期该工程菌在处理废弃物及保护环境方面可能的应用，举一个实例。 ______。
