人教版选修1专题3课题2月季的花药培养（共39张PPT）

(共39张PPT)
种子有果皮包被着，（胚珠有子房壁包被着）
被子植物 裸子植物
种子无果皮包被着，（胚珠无子房壁包被着）
种子
花的结构
被子植物的有性生殖是在花里进行的，雌蕊和雄蕊是进行有性生殖的主要部分。
雌蕊
雄蕊
雌蕊的结构
花粉粒
花粉管
精子
(2个)
卵细胞
极核
（一）、被子植物的花粉发育
花丝
花药：囊状结构，内有很多花粉粒
雄蕊：
一、基础知识
药隔：由薄壁细胞构成，内有维管束
花药
花粉囊（4或2）
囊壁
花粉粒
药隔
药隔
花粉囊
囊壁
花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞
②花粉粒的形成
①经历时期：
四分体时期、单核期、双核期
四分体时期(小孢子)
有丝
分裂
单核靠边期(小孢子)
单核居中期(小孢子)
花粉母细胞
（小孢子母细胞）
减数分裂
精子
精子
有丝
分裂
花粉管细胞核
生殖细胞核
生殖细胞
营养细胞
双核期
两个精子和一个营养细胞的基因型相同
1个花粉母细胞
4个小孢子
减分
有分
4个花粉管细胞核
4个生殖细胞核
有分
8个精子
(二)、产生花粉植株的两条途径
（三）、影响花药培养的因素
1、材料的选择
①时期－－－初花期
②选择合适的花粉发育时期是
－－提高诱导成功率的重要因素
只有某一个时期对离体刺激敏感。
最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期
措施？？
2、培养基的组成
花药培养所采用的培养基因植物的不同而有所变化
3、其他因素
亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种的密度等对诱导成功都有一定的影响
六、实验操作
（一）材料的选取
②某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
①最常用的方法有醋酸洋红法
1、方法
①醋酸洋红法染色机理
醋酸洋红为碱性染色剂，而花粉细胞内有染色体，染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色 。
②醋酸洋红的配置
2、醋酸洋红法
将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加入1g洋红，在加热回流8h，冷却至50℃，过滤即可。
将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1％的醋酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜下检查。
③染色操作
3、焙花青—铬钒法
将无水酒精与冰醋酸按体积比为3 ：1的比例混匀
①卡诺氏固定液的配制方法
将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中，溶解后加入0.1g焙花青，混匀并加热至沸腾，煮沸5分钟后冷却至室温，过滤，加蒸馏水定容至100ml。
②焙花青—铬钒溶液的配制方法
花药应该在卡诺氏固定液中固定20min，然后取出放在载玻片上，加焙花青—铬钒溶液染色，盖上盖玻片后在显微镜下检查。
③染色操作
（二）材料的消毒
1、酒精处理
①花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒，立即取出。
②无菌水清洗
③无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
2、消毒液处理
① 放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
② 无菌水冲洗3~5次
用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。
（三）接种和培养
在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药
②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成
1、剥取花药
①勿损伤花药，以免诱导出非花粉愈伤组织
注意：
立即将花药接种于培养基上，通常每瓶接种花药7-10个。
2、接种
①培养条件：温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。
3、培养
②培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体
长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株
③注意：如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。
在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化（主要原因是营养核和生殖核融合造成的）
4、鉴定和筛选
5、植物组织培养技术与花药培养技术的异同点：
项目 相同点 不同点
植物组织培养技术 离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。 外植体为体细胞，染色体数无需加倍。
花药培养技术 取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。