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广东省深圳市龙华区2022-2023学年高二下学期第二次阶段考试（期中）生物学试题
一、单选题（1-15题2分/题，16-20题3分/题，共45分）
1．（2021·奉贤模拟）如图为转基因低乳糖奶牛培育流程。该流程未涉及到的生物技术是（ ）
A．细胞核移植技术 B．动物细胞培养技术
C．转基因技术 D．细胞融合技术
【答案】D
【知识点】基因工程的应用；胚胎工程的概念及其技术
【解析】【解答】据图可知，将含目的基因的重组质粒转入牛胎儿成纤维细胞需要通过转基因技术；将牛胎儿成纤维细胞的细胞核与卵母细胞的细胞质组合成重组细胞属于细胞核移植技术；将重组细胞培养为早期胚胎需要通过动物细胞培养技术。图中不涉及细胞融合技术。ABC不符合题意，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】 1、基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术；
2、细胞核移植技术，把某细胞核取出移植到去核的细胞中形成一个新的细胞的过程；
3、将重组细胞培养为早期胚胎需要通过动物细胞培养技术。
2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（ ）
A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性
B．植物细胞培养和动物细胞培养——细胞的全能性
C．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性
D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂
【答案】B
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；动物细胞工程的常用技术与应用；动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、细胞工程中，利用酶的专一性原理，用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，用胰蛋白酶处理动物组织得到单个细胞，A正确；
B、植物组织培养的原理是细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞增殖，B错误；
C、利用生物膜的流动性原理，采用诱导技术可以诱导原生质体融合和动物细胞融合，C正确；
D、紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养的原理都是细胞增殖（分裂），D正确。
故答案为：B。
【分析】1、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：
细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合
理论基础 细胞的全能性、细胞膜的流动性 细胞增殖、细胞膜的流动性
融合前处理 酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶） 注射特定抗原，免疫处理正常小鼠
诱导手段 物理法： 离心、振动、电激
化学法：聚乙二醇（PEG） 物理法： 离心、振动、电激
化学法：聚乙二醇（PEG）
生物法：灭活的病毒（灭活的仙台病毒）
诱导过程 第一步：原生质体的制备（酶解法）
第二步：原生质体融合（物、化法）
第三步：杂种细胞的筛选和培养
第四步：杂种植株的诱导与鉴定 正常小鼠免疫处理动物细胞的融合（物、化、生法）杂交瘤细胞的筛选与培养专一抗体检验阳性细胞培养单克隆抗体的提纯
用途和意义 克服远缘杂交的不亲和障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围
应用：克服远缘杂交的不亲和障碍 制备单克隆抗体。诊断、治疗、预防疾病，例如“生物导弹”治疗癌症
2、动物细胞培养：
（1）定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，原理细胞增殖。
（2）动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
3．（2023高二下·龙华期中）尿素是一种重要的农业化肥，但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。下图是某课题小组培养从土壤中分离出能够分解尿素的细菌的结果示意图，以下相关说法正确的是（ ）
A．运用图1所示的接种方法统计的活菌数比实际值偏高
B．运用图2所示接种方法需要把接种环深入到培养基中进行接种
C．为长期保存纯化的优质菌种可以采用甘油管藏的方法
D．对尿素分解菌进行分离时需要在选择培养基中加入酚红指示剂
【答案】C
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】A、图1接种方法为稀释涂布平板法，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上显示的只是一个菌落，因此统计的菌落数常常比实际数目少，A错误；
B、平板划线法进行划线时，在培养基表面进行划线操作，B错误；
C、甘油管藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的，因此长期保存纯化的优质菌种，可以采用甘油管藏的方法，C正确；
D、对尿素分解菌进行分离时，需要在培养基中加入尿素作为唯一的氮源，D错误。
故答案为：C。
【分析】平板划线法和稀释涂布平板法的比较
项目 平板划线法 稀释涂布平板法
过程 用接种环在固体培养基表面连续划线，将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养
优点 对菌种进行分离，观察菌落特征 可以进行计数，观察菌落特征
缺点 不能计数 吸收量较少，平板不干燥效果不好，容易蔓延
相同点 都使用固体培养基，两种方法都可以用于分离微生物
4．（2023·湖北模拟）贵州知名品牌“老干妈”系列产品一直沿用传统工艺精心酿造，其中风味豆豉深受大众喜爱，远销国内外，风味豆豉的主要工艺流程如下图。下列说法正确的是（ ）
A．如果发酵装置中上层黄豆的发酵效果比底层好，推测该发酵菌的新陈代谢类型是异养厌氧型
B．传统方法制作豆豉，以混合菌种的液体发酵为主
C．调味过程中添加盐可抑制杂菌生长，白酒和风味料只是调节口味
D．黄豆煮熟的目的主要是破坏黄豆内部结构，使蛋白质变性，同时起到消毒的作用
【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、如果发酵装置中上层黄豆的发酵效果比底层好，上层氧气充足，推测该发酵菌的新陈代谢类型是异养需氧型，A错误；
B、传统发酵是以混合菌种的固体或半固体发酵为主，B错误；
C、调味过程中添加盐可抑制杂菌生长，白酒和风味料既可以调节口味也可以抑制杂菌生长，C错误；
D、黄豆煮熟的目的主要是破坏黄豆内部结构，使蛋白质变性，易于被酶水解，同时起到消毒的作用，D正确。
故答案为：D。
【分析】黄豆蒸熟或煮熟后，高温会使蛋白质分子的空间结构变得伸展、松散，肽键暴露，容易被蛋白酶水解，同时起到消毒的作用。
5．（2023高二下·龙华期中）生命活动离不开细胞，对此理解不正确的是（ ）
A．没有细胞结构的病毒必须寄生在活细胞内才能繁殖
B．单细胞生物体具有生命的基本特征——新陈代谢、繁殖
C．多细胞生物体的生命活动由不同程度分化的细胞密切合作完成
D．一切生物都是由细胞构成
【答案】D
【知识点】细胞是生物体的结构和功能单位；病毒
【解析】【解答】A、病毒营寄生生活，不能独立生存，必须寄生在活细胞中才能繁殖，A正确；
B、单细胞生物具有生命的基本特征有新陈代谢、应激性、适应环境的能力、生长繁殖等，B正确；
C、多细胞生物体绝大多数细胞发生了分化，在形态结构和生理功能上发生了稳定性差异，只能完成该细胞的特定功能，不同细胞密切合作才能完成生物体的生命活动，C正确；
D、病毒是非细胞生物，无细胞结构，D错误。
故答案为：D。
【分析】细胞是基本的生命系统。病毒没有细胞结构，只有寄生在活细胞中才能生活。病毒不属于生命系统的结构层次。单细胞生物依赖单个细胞独立完成生命活动。多细胞生物依赖各种分化的细胞共同完成一系列复杂的生命活动。
6．（2023高二下·龙华期中）在生物体内含量极少，但对维持生物体正常生命活动必不可少的元素有 （ ）
A．Zn、Cu、B、Mn B．Zn、Cu、Mg、Ca
C．Fe、Mn、Zn、Mg D．K、Mn、Cu、Mo
【答案】A
【知识点】组成细胞的元素和化合物
【解析】【解答】A、在生物体内含量极少，但对维持生物体正常生命活动必不可少的元素是微量元素，Zn、Cu均属于属于微量元素，A正确；
B、Mg和Ca元素属于生物体中的大量元素，B错误；
C、Mg元素属于大量元素，C错误；
D、K元素都属于大量元素，D正确。
故答案为：A。
【分析】组成生物体的化学元素根据其含量不同分为大量元素和微量元素两大类。大量元素包括C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg；微量元素包括Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo等。
7．（2023高二下·龙华期中）下表中，食物中营养物质的检测成分、材料、试剂和显色结果均正确的是 （ ）
选项 检测成分 材料 试剂 显色结果
A 淀粉 大米 碘液 蓝色
B 蛋白质 豆浆 双缩脲试剂 蓝色
C 还原糖 红心火龙果 斐林试剂 砖红色
D 脂肪 花生子叶 苏丹Ⅲ染液 橘红色
A．A B．B C．C D．D
【答案】A
【知识点】检测蛋白质的实验；检测还原糖的实验；检测脂肪的实验
【解析】【解答】A、大米中富含淀粉，淀粉遇碘液变蓝色，A正确；
B、双缩脲试剂与蛋白质发生紫色反应，B错误；
C、红心火龙果的红色会对实验结果（砖红色）的观察造成干扰，因此不能作为鉴定还原糖实验的材料，C错误；
D、脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，D错误。
故答案为：A。
【分析】①还原糖＋斐林试剂在水浴加热条件下生成砖红色沉淀；②蛋白质＋双缩脲试剂→紫色；③脂肪＋苏丹Ⅲ染液→橘黄色；④淀粉＋碘液→蓝色。注意：并非所有的糖都是还原糖，如淀粉、纤维素、蔗糖都是非还原糖，不能用斐林试剂检测。上述实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验中的颜色变化。脂肪鉴定的过程中滴加1～2滴体积分数为50%的酒精溶液的目的是洗去浮色，原因是苏丹Ⅲ染液易溶于酒精。
8．（2023高二下·龙华期中）常言道：“马无夜草不肥”，其实是有科学依据的。生物体内有一种被称为“BMAL1”的蛋白质，能促进脂肪堆积，这种蛋白质在白天减少，夜间增多。下列有关叙述错误的是 （ ）
A．大多数动物脂肪含有饱和脂肪酸
B．糖类和脂肪之间的转化程度有明显差异
C．“BMAL1”在夜间可能会促进糖类转化为脂肪
D．与同等质量的脂肪相比，糖类储存的能量多
【答案】D
【知识点】糖类的种类及其分布和功能；脂质的种类及其功能
【解析】【解答】A、植物脂肪大多含不饱和脂肪酸，在室温时呈液态；大多数动物脂肪含有饱和脂肪酸，在室温时呈固态，A正确；
B、糖类在供应充足的情况下，可以大量转化为脂肪；而脂肪一般只在糖类代谢发生障碍，引起供能不足时，才会分解供能，而且不能大量转化为糖类，两者之间的转化程度是有明显差异的，B正确；
C、因为“BMAL1”能促进脂肪堆积，这种蛋白质在白天减少，夜间增多，所以在夜间可能会促进糖类转化为脂肪，C正确；
D、脂肪分子中氧的含量远低于糖类，而氢的含量更高，因此与同等质量的糖类相比，脂肪储存的能量多，氧化分解时耗氧量高，释放的能量更多，D错误。
故答案为：D。
【分析】细胞中的糖类和脂质是可以相互转化的。血液中的葡萄糖除供细胞利用外，多余的部分可以合成糖原储在起来；如果葡萄糖还有富余，就可以转变成脂肪和某些氨基酸。糖类和脂肪之间的转化程度是有明显差异的。例如，糖类在供应充足的情况下，可以大量转化为脂肪；而脂肪一般只在糖类代谢发生障碍，引起供能不足时，才会分解供能，而且不能大量转化为糖类。
9．（2023高二下·龙华期中）多聚酶链式反应 （PCR）被广泛用于遗传疾病的诊断、刑事侦察、古生物学和基因工程等领域。利用PCR技术可快速扩增目的基因。下列有关叙述错误的是 （ ）
A．扩增目的基因的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列
B．PCR技术需要使用Taq酶的原因是其耐高温
C．PCR技术扩增时，两种引物的碱基序列要尽可能互补
D．若目的基因扩增5次，则需要消耗62个引物分子
【答案】C
【知识点】PCR技术的基本操作和应用
【解析】【解答】A、PCR技术的原理是DNA半保留复制，扩增目的基因时要根据一段已知目的基因的核苷酸序列合成引物，A正确；
B、PCR技术过程中要进行高温处理变性过程，因此需要用耐高温的DNA聚合酶，即Taq酶，B正确；
C、PCR技术中所用的两种引物分别和两条模板链的3 '端碱基互补配对的，因此两种引物的碱基序列不同，C错误；
D、若一个目的基因扩增5次，可得到25=32个DNA分子，共含有64条脱氧核苷酸链，其中原目的基因两条模板链不需要添加引物，因此共需消耗64-2=62个引物分子，D正确。
故答案为：C。
【分析】利用PCR获取和扩增目的基因：
①原理：DNA半保留复制。
②条件：DNA模板、2种引物、耐高温的DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸。
③扩增过程
过程 说明
变性 温度上升到90 ℃以上，双链DNA解聚为单链
复性 温度下降到50 ℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合
延伸 温度上升到72 ℃左右，溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链
10．（2023·门头沟模拟）当前生物技术发展非常迅猛，很多生物技术的应用已经与我们的日常生活密切相关。下列有关生物技术的说法或做法不正确的是（ ）
A．消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面
B．我国坚决反对克隆人，不允许进行任何生殖性克隆人实验
C．对囊胚进行胚胎分割时，必须对整个胚胎进行均等分割
D．胚胎工程繁育良种时，供体和受体母畜都要进行同期发情处理
【答案】C
【知识点】胚胎移植；胚胎分割；生物武器；克隆的利与弊
【解析】【解答】A、生物武器威胁巨大，消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面，A正确；
B、我国对待克隆人的态度：坚决反对克隆人，不允许进行任何生殖性克隆人实验，B正确；
C、对囊胚进行胚胎分割时，必须对内细胞团进行均等分割，C错误；
D、胚胎工程繁育良种时，供体和受体母畜都要进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，D正确；
故答案为：C。
【分析】胚胎分割时，对囊胚的内细胞团均等分割的原因是：内细胞团一般是受精卵发育到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养，若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。
11．（2023高二下·龙华期中）下图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图（↓表示切点）。下列相关分析错误的是 （ ）
A．这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端
B．不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同
C．能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割
D．同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等
【答案】D
【知识点】基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】A、据图可知，这三种限制酶切割位点均不在中轴线上，切割出的DNA片段末端都是黏性末端，A正确；
B、限制酶1和限制酶3切割DNA片段产生的黏性末端相同，B正确；
C、限制酶3的识别序列中包含限制酶1的识别序列，因此能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割，C正确；
D、能被限制酶1切割的DNA不一定能被限制酶3切割，因此同一个DNA经限制酶Ⅰ和限制酶3分别切割后所得片段数不一定相等，D错误。
故答案为：D。
【分析】限制酶识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸间的磷酸二酯键断开，经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，分别为黏性末端和平末端。三种限制酶的识别序列均不同，但限制酶1和3切割后产生的黏性末端相同。
12．（2023高二下·龙华期中）细胞中的有机物包括糖类、脂质、蛋白质和核酸等，下列说法错误的是 （ ）
A．细胞中的各种有机物都能为自身细胞代谢提供能量
B．脂质、蛋白质、核酸都可能传递信息
C．检测还原糖的试剂通过适当稀释可以用来制取检测蛋白质的试剂
D．脂肪储能效果高于糖类是因为二者C、H、O的比值不同
【答案】A
【知识点】检测蛋白质的实验；糖类的种类及其分布和功能；检测还原糖的实验；生物大分子以碳链为骨架；脂质的种类及其功能
【解析】【解答】A、细胞的核酸作为遗传信息的载体，不能提供能量，A错误；
B、部分激素的化学本质是脂质或蛋白质能传递信息，核酸作为遗传物质能传递信息，B正确；
C、检测还原糖的斐林试剂的乙液为0.05的CuSO4溶液，通过适当稀释可形成检测蛋白质试剂中的双缩脲试剂B液（0.01 的CuSO4溶液），C正确；
D、与相同质量的糖类相比，脂肪中的含C、H比例高，含O低，脂肪储能效果更好，D正确。
故答案为：A。
【分析】蛋白质、核酸和多糖都是生物大分子，都是由许多基本组成单位连接而成的，这些基本单位称为单体。生物大分子又称为单体的多聚体，每一个单体都是以若干个相连的碳原子构成的碳链为基本骨架，由许多单体连接成的多聚体。
13．（2023高二下·龙华期中）在现代生物技术中，下列研究方案不能实现其目的是 （ ）
选项 方案 目的
A 将人胰岛素基因导入大肠杆菌并培养 大量生产人胰岛素
B 体外诱导胚胎干细胞分化 培育供移植的组织器官
C 体外培养骨髓瘤细胞 制备单克隆抗体
D 花药离体培养 获得单倍体植株
A．A B．B C．C D．D
【答案】C
【知识点】干细胞的概念、应用及研究进展；基因工程的应用；单克隆抗体的优点及应用；单倍体育种
【解析】【解答】A、大肠杆菌属于微生物，具有繁殖速度快的特点，将人胰岛素基因导入大肠杆菌并培养，随大肠杆菌大量增殖，能大量生产人胰岛素，A正确；
B、胚胎干细胞是一类既能分裂也能分化的细胞，因此可以体外诱导胚胎干细胞分化培育供移植的组织器官，B正确；
C、体外或体内培养杂交髓瘤细胞可以制备单克隆抗体，骨髓瘤细胞不能产生抗体，C错误；
D、花药中含有精子，属于雄配子，由配子发育而成的个体属于单倍体，因此用花药离体培养法可获得单倍体植株，D正确。
故答案为：C。
【分析】（1）基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
（2）单克隆抗体制备流程：给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，从小鼠脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞并用选择培养基进行筛选；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
14．（2021·和平模拟）实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒
B．做RT-PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针
C．需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增
D．病毒的检测还可以检测病毒引发产生的抗体，其原理是抗原-抗体杂交
【答案】A
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】A、若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者体内有该病毒RNA，即被检测者感染病毒，A错误；
B、PCR 需要根据目的基因的核苷酸序列合成引物，同时 RT-PCR 还需要探针与待测样本 DNA 混合，B正确；
C、PCR扩增必须以DNA为模板，RNA不能作为PCR扩增的模板，所以需要将样本中的RNA反转录为 DNA后再进行扩增，C正确；
D、RNA病毒的检测还可以通过特异性抗体检测，即检测感染者体内通过免疫反应所产生的某种抗体，原理是抗原-抗体杂交，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、PCR技术
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
（2）原理：DNA复制。
（3）前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚台酶(Taq酶)。
（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
2、分子检测：①检测DNA--DNA分子杂交技术；②检测mRNA--分子杂交技术；③检测蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
15．（2023高二下·龙华期中）草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列说法正确的是 （ ）
A．方法一中选择甲作为组织培养材料的原因是该部位细胞的分生能力强
B．需要用体积分数 70%的酒精和质量分数 5%次氯酸钠溶液对甲进行消毒
C．两个培育过程一般都不需要光照但需要生长素和细胞分裂素
D．需要通过病毒接种的方式来判断两种选育方法的效果
【答案】B
【知识点】植物组织培养的过程；基因工程的操作程序（详细）；植物组织培养的影响因素
【解析】【解答】A、方法一目的为获得无病毒苗，选择甲作为组织培养材料的原因是该部位细胞含病毒少或无病毒，A错误；
B、甲为外植体用于植物组织培养获得无病毒植株取材后需要用体积分数70%的酒精和质量分数 5%次氯酸钠溶液对甲进行消毒，以防止杂菌污染，B正确；
C、两个培育过程一般都涉及植物组织培养技术，再分化，及形成幼苗过程均需要光照，C错误；
D、无病毒苗无抗病毒特性，不能通过病毒接种的方式来判断选育方法的效果 ，D错误。
故答案为：B。
【分析】（1）甲为甲为外植体；A、C过程表示植物组织培养过程；B过程表示将目的基因SMYELV-CP导入草莓细胞过程。
（2）植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
16．（2021·如皋模拟）下图表示单克隆抗体的制备过程。相关叙述错误的是（ ）
A．过程①注射特定抗原的目的是使小鼠产生能分泌特定抗体的浆细胞
B．过程②诱导融合产生的融合细胞都能产生单克隆抗体，且能无限增殖
C．过程③需要提供一定浓度的CO2，目的是维持培养液的pH
D．单克隆抗体的主要优点有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备
【答案】B
【知识点】单克隆抗体的制备过程；单克隆抗体的优点及应用
【解析】【解答】A、过程①是向小鼠注射特定抗原，刺激其发生特异性免疫，产生能分泌特定抗体的浆细胞，A正确；
B、过程②诱导融合产生的融合细胞中存在骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合，不能产生抗体，B细胞和B细胞融合形成的细胞不能无限增殖，B错误；
C、过程③进行动物细胞培养，需要一定浓度的CO2，维持培养液的pH，C正确；
D、单克隆抗体的主要优点有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、单克隆抗体的最主要优点就是特异性强，灵敏度高，能够大量制备。单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂（最广泛的用途）：具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。
17．（2023高二下·龙华期中）下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是 （ ）
A．①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前需对精子进行离心处理
B．②代表体外胚胎培养，在透明带中进行的受精卵的早期分裂称为卵裂
C．③代表胚胎分割，可取样桑葚胚时期的滋养层进行DNA分析，鉴定性别
D．⑤代表胚胎移植，操作前通常需要对代孕母牛做发情处理
【答案】C
【知识点】胚胎移植；胚胎分割；体外受精；胚胎的体外培养
【解析】【解答】A、①是进行精卵结合的体外受精的过程，精子获能处理前要对精子进行离心处理以除去精液利于精子获能，A正确；
B、②过程是受精卵经早期胚胎培养形成囊胚过程，胚胎发育早期是在透明带内进行的，这一时期称为卵裂期，B正确；
C、鉴定性别应选择囊胚期的滋养层细胞进行DNA分析，C错误；
D、过程⑤是将早期胚胎移植入代孕母牛的子宫内，操作前需要对供体和受体代孕母牛进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，D正确。
故答案为：C。
【分析】分析题图：图中①表示体外受精，②表示早期胚胎培养，③表示胚胎分割，④表示对分割后胚胎的培养，⑤表示胚胎移植。
18．（2023高二下·龙华期中）原油开采、运输和加工过程中的污染事件给生态环境造成了巨大破坏。以微生物为主导的生物修复技术是治理原油污染的有效方法。研究人员从青藏高原班戈桥地区的土壤中分离到一株能利用原油为碳源生长的细菌（BGQ-6），该菌对原油的总降解率为74.14%。下列说法错误的是 （ ）
A．可采用稀释涂布平板法对BGQ-6进行计数
B．一般选择菌落数为30-300的平板进行BGQ-6菌落计数
C．由单一的BGQ-6繁殖所获得的群体称为BGQ-6纯培养物
D．利用添加原油的普通培养基能从被原油污染的土壤中筛选BGQ-6
【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养；测定某种微生物的数量；培养基概述及其分类
【解析】【解答】A、稀释涂布平板法通过梯度稀释逐步减小细菌浓度，通过培养基上菌落数来统计样品中活菌的数目对BGQ-6进行计数，A正确；
B、为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数，B正确；
C、由单一的BGQ-6繁殖所获得的群体均为能利用原油为碳源生长的细菌（BGQ-6）故称为BGQ-6纯培养物，C正确；
D、普通培养基中营养物质齐全，不能起到筛选的目的，利用添加原油作为唯一碳源的选择培养基能从被原油污染的土壤中筛选BGQ-6，D错误。
故答案为：D。
【分析】（1）培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。②按功能可分为选择培养基（在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基）和鉴别培养基。③成分：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。④筛选目的微生物最好应该到目的微生物含量丰富的地方取样，如果没有这样的环境，应该人为创造适宜其生长的环境。
（2）稀释涂布平板法可以用于分离微生物，也常用来统计样品中活菌的数目。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。
19．（2023高二下·龙华期中）下图是生物体细胞内部分有机化合物的概念图。下列有关叙述正确的是 （ ）
A．a包含脂肪、磷脂和固醇等，通常都不溶于水，都含有C、H、O、N、P
B．高温、过酸、过碱、重金属盐使b变性时破坏了氨基酸的空间结构和肽键
C．烟草花叶病毒的遗传信息储存在c中，其基本单位是核糖核苷酸
D．二糖都是还原糖，糖类与细胞表面的识别、细胞间的信息传递等功能有关
【答案】C
【知识点】化合物推断-综合
【解析】【解答】A、脂肪和固醇的元素组成为C、H、O三种化学元素，A错误；
B、高温、过酸、过碱、重金属盐使蛋白质变性时未破坏氨基酸的空间结构和肽键，破坏了蛋白质的空间结构，B错误；
C、烟草花叶病毒是RNA病毒，其遗传物质是RNA，基本组成单位是核糖核苷酸，C正确；
D、二糖中的蔗糖是非还原糖，D错误。
故答案为：C。
【分析】分析图示：a为脂肪、磷脂和固醇，b为蛋白质，c为RNA。脂质主要是由C、H、O三种化学元素组成，有些还含有N和P。其中磷脂的元素组成为C、H、O、N、P；脂肪和固醇均由C、H、O三种元素组成。
20．（2023高二下·龙华期中）细菌中某些蛋白质的肽链之间有二硫键。已知不同的肽链因相对分子质量不同而以电泳方式分离。下图甲是一个分析细菌中蛋白质的电泳结果图，“-”代表没加还原剂，分子量接近130，“+”代表加还原剂形成两种分子量的分子，已知还原剂可破坏二硫键，“M”代表已知相对分子质量的蛋白质，图乙代表蛋白质或多肽的结构图。根据图甲结果，图乙中哪幅图最能代表该细菌原本蛋白质结构(图乙中“-”代表二硫键的位置) （ ）
A．A B．B C．C D．D
【答案】B
【知识点】蛋白质分子的化学结构和空间结构；蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】细菌中的该蛋白质在没加还原剂时以电泳方式分离只得到一条分离带且相对分子质量是130，加入还原剂之后二硫键被破坏，以电泳方式分离的结果出现了两条分离带，一条相对分子质量为67左右，另一条的相对分子质量约为30，两者之和不等于130，因此该蛋白质不是由两条肽链组成，因为67+30×2=130，所以细菌中的该蛋白质是由一条相对分子质量为67的肽链和两条相对分子质量约为30的肽链构成，中间有两个二硫键相连，B正确，A、C、D错误，
故答案为：B。
【分析】本题突破口在于分析图甲电泳结果，加还原剂后二硫键被破坏，蛋白质的分子质量应稍大于130，由此得出答案。
二、非选择题(共55分)
21．（2023高二下·龙华期中）人体中血清白蛋白可以运输脂肪酸、胆色素、氨基酸、类固醇激素、金属离子和许多治疗分子等，同时参与维持血浆正常的渗透压，在临床上应用广泛。但从人体中直接提取的血清白蛋白含量少，且易受污染，生物反应器可以解决此项难题。回答下列问题：
（1）从人体获取的血清白蛋白基因可通过 技术进行扩增，扩增后的血清白蛋白基因与启动子、 和 等构建成基因表达载体。构建乳腺生物反应器时选用的是乳腺蛋白基因的启动子，其目的是 。
（2）科学家将构建好的基因表达载体通过 技术导入奶牛的受精卵中。受精卵继续培养至胚胎。当胚胎发育至 阶段，取其 做DNA分析来进行性别鉴定，筛选出发育状态良好的 （填“雌”或“雄”）性胚胎进行移植，使其生长发育成转基因动物，将来可从牛奶中提取得到大量的人血清白蛋白。
（3）有人提议将乳腺蛋白基因的启动子换成uroplakinⅡ基因启动子（高效促进目的蛋白在膀胱特异性表达及分泌），可增加血清白蛋白的产量。请分析产量高的原因 。
【答案】（1）PCR；终止子；标记基因；使目的基因在动物体内的乳腺细胞中表达，从而在乳汁中获取所需产品
（2）显微注射；囊胚；滋养层细胞；雌
（3）雌性牛只有在哺乳期才能分泌乳汁，而尿液不会受到性别和发育期的影响，尿液的分泌总量要比乳汁的分泌量大
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的应用；胚胎移植；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】（1）利用PCR技术可扩增目的基因。基因表达载体由目的基因、启动子、终止子、标记基因等组成。构建乳腺生物反应器，目的是使基因特异性地只在乳腺细胞中表达，在乳汁中获取所需产品，因此选用的是乳腺蛋白基因的启动子。
故填：PCR；终止子；标记基因；使目的基因在动物体内的乳腺细胞中表达，从而在乳汁中获取所需产品。
（2）将基因表达载体导入动物细胞通常使用显微注射技术。做DNA分析来进行性别鉴定一般选择囊胚期滋养层细胞进行操作，因为滋养层细胞发育为胎盘和胎膜，不影响组织器官的形成和发育。目的产物要从乳汁中获取，故选择雌性胚胎进行移植。
故填：显微注射；囊胚；滋养层细胞；雌。
（3）通过乳汁获取血清蛋白仅限于雌性动物哺乳期，而尿液不会受到性别和发育期的影响，尿液的分泌总量要比乳汁的分泌量大，因此将乳腺蛋白基因的启动子换成uroplakinⅡ基因启动子，可增加血清白蛋白的产量。
故填：雌性牛只有在哺乳期才能分泌乳汁，而尿液不会受到性别和发育期的影响，尿液的分泌总量要比乳汁的分泌量大。
【分析】（1）基因工程步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。其中基因表达载体的构建是核心步骤，基因表达载体要包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点。
（2）目的基因的检测与鉴定
检测水平 检测目的 检测方法
分子水平 目的基因是否插入到转基因生物染色体DNA上 RCR
目的基因是否转录出了mRNA
目的基因是否翻译出蛋白质 抗原—抗体杂交
个体水平 转基因生物是否表现出相应的特性 如抗虫、抗病的接种实验
22．（2021·永州模拟）科学家将胰蛋白酶抑制剂基因通过农杆菌导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。回答下列问题：
（1）构建该重组质粒时，可选择的限制酶有 ，相比较而言 更合适，原因是 。
（2）Ti质粒是基因工程中常用的运载体，从图中可以看出其作为运载体具备的条件有 （答出两点），Ti质粒上有T-DNA，其作用是 。
（3）重组质粒除了有目的基因和复制原点外，还应该有 。
（4）从过程④到⑤需要更换培养基，两者培养基所需成分中主要是 的比例不同。
【答案】（1）EcoRⅠ或者BamHⅠ和HindⅢ；BamHⅠ和HindⅢ；既能防止质粒自身环化，又可以保证目的基因正确连接在质粒上
（2）有一个或多个限制酶切割位点；具有特殊的标记基因；可转移至受体细胞，并且能整合到受体细胞染色体的DNA上
（3）启动子、终止子、标记基因
（4）生长素和细胞分裂素或不同激素
【知识点】基因工程的应用；组织培养基的成分及作用
【解析】【解答】（1）构建该重组质粒时，可选择的限制酶有EcoRⅠ或者BamHⅠ和HindⅢ，相比较而言BamHⅠ和HindⅢ更合适，原因是这样切割的目的基因和质粒两端的粘性末端不同，既能防止质粒自身环化，又可以保证目的基因正确连接在质粒上。（2）从图中可以看出其作为运载体具备的条件有，一个或多个限制酶切割位点；具有特殊的标记基因（抗性基因）。Ti质粒上T-DNA的作用是可转移至受体细胞，并且能整合到受体细胞染色体的DNA上。（3）重组质粒要具有启动子、终止子、标记基因、目的基因和复制原点等。（4）过程④是脱分化，过程⑤是再分化，两个过程生长素和细胞分裂素等激素的比例不同。
【分析】一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并且在特点的位点切割DNA分子。作为运载体的质粒要具有多个限制酶的切点，且能在受体细胞中复制和标记基因等特点。
23．（2023高二下·龙华期中）下图表示细胞内某些有机物的元素组成和功能关系，其中A、B代表元素，I、II、III是生物大分子，X/Y、P是相应的小分子物质。请回答下列问题：
（1）物质I在人体肝脏、玉米籽粒中分别主要指 ：为了检测玉米籽粒发芽过程中该物质含量的变化，将不同发芽阶段的玉米籽粒纵切，滴加 后进行观察，结果胚乳呈蓝色块状，且随着发芽时间的延长逐渐变小，由此可得出的结论是 。
（2）细胞中携带遗传信息的物质II是指 ，在生物体的遗传、变异和 中具有重要作用。
（3）请设计实验证明白萝卜贮藏根组织细胞中含有图中物质III(对试剂的浓度、用量不做要求，要求简要写出实验思路和预期实验结果)。
实验思路
预期实验结果
【答案】（1）肝糖原、淀粉；碘液；胚乳主要成分是淀粉，玉米种子发芽过程中被水解
（2）核酸；蛋白质的生物合成
（3）实验思路：将白萝卜贮藏根充分研磨获取组织样液；取组织样液和蛋白质标准样 液等量（2mL）分别注入甲、乙两只试管中；向两只试管内分别注入0.1 g/mL的 NaOH溶液1 mL，摇匀后分别滴加0.01 g/mL的CuSO4溶液4滴（或向两只试管内分别 加入等量的双缩脲试剂），观察颜色变化。；预期实验结果：甲、乙两只试管中均出现紫色现象。
【知识点】检测蛋白质的实验；核酸在生命活动中的作用；糖类的种类及其分布和功能
【解析】【解答】（1）物质Ⅰ是多糖，在人体肝脏、玉米籽粒中分别主要指肝糖原和淀粉；淀粉遇碘变蓝，在玉米种子发芽过程中胚乳呈蓝色，说明胚乳中含有淀粉；随着发芽时间的延长逐渐变小，说明淀粉在种子发芽过程中被水解。
故填：肝糖原、淀粉；碘液；胚乳主要成分是淀粉，玉米种子发芽过程中被水解。
（2）核酸是细胞内携带遗传信息的物质，在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中具有重要作用。
故填：核酸；蛋白质的生物合成。
（3）物质Ⅲ能承担生命活动，是蛋白质。因此本实验的目的为：证明白萝卜贮藏根组织细胞中含有蛋白质。选取双缩脲试剂对蛋白质进行鉴定。在进行实验设计时遵循对照原则和单一变量原则。
故填：实验思路：将白萝卜贮藏根充分研磨获取组织样液；取组织样液和蛋白质标准样液等量（2mL）分别注入甲、乙两只试管中；向两只试管内分别注入0.1 g/mL的 NaOH溶液1 mL，摇匀后分别滴加0.01 g/mL的CuSO4溶液4滴（或向两只试管内分别加入等量的双缩脲试剂），观察颜色变化；预期实验结果：甲、乙两只试管中均出现紫色现象。
【分析】据题意可知：I、II、III是生物大分子，X/Y、P是相应的小分子物质。生物大分子包括蛋白质、核酸和多糖，其基本单位分别是氨基酸、核苷酸和葡萄糖。图中Ⅰ是能源物质，由C、H、O三种元素组成，因此Ⅰ是多糖，X是葡萄糖；Ⅱ携带遗传信息，所以Ⅱ是核酸，Y是核苷酸，Ⅲ承担生命活动是蛋白质，P是其基本单位氨基酸；核酸由C、H、O、N、P五种元素组成，因此A代表N和P两种元素，氨基酸由C、H、O、N组成，因此B代表N元素。
24．（2023高二下·龙华期中）（厨余垃圾中有机质含量高，利用微生物发酵技术将厨余垃圾变成绿色有机肥，可有效实现厨余垃圾无害化和资源化处理。某实验小组欲从厨余垃圾中筛选能高效降解淀粉的细菌，实验操作流程如图所示。回答下列问题：
（1）实验过程中对培养皿、烧杯等玻璃仪器常用 法进行灭菌。在接种前，需要对厨余垃圾浸出液进行 处理。根据X培养基上菌落的生长情况，推测该接种方法是 。
（2）在配制X培养基的组成成分时，加入的唯一碳源是淀粉，目的是 。培养、加入碘液后，部分菌落周围出现清晰区，图中能最高效降解淀粉的细菌是 （填编号）。与X培养基相比，Y培养基在成分组成上的特点是 。
（3）用来筛选淀粉分解菌的X、Y培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有 。
（4）若厨余垃圾中混入了抗生素，将不利于其生物降解，为了筛选出对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的细菌，在上图所示的基础上，对实验操作的优化方案是 。
【答案】（1）干热灭菌；梯度稀释；稀释涂布平板法
（2）筛选得到能高效降解淀粉的微生物；②；营养物质丰富、不含琼脂
（3）提供无机营养，维持培养基pH稳定
（4）在制备X培养基时加入一定浓度的抗生素，培养后选择降解圈最大的菌落接种在含有抗生素的Y培养基中培养
【知识点】微生物的分离和培养；培养基概述及其分类；灭菌技术
【解析】【解答】（1）对培养皿、烧杯等玻璃仪器常用干热灭菌法进行灭菌。根据X培养基上菌落的生长情况来看，培养基上形成的是分散的单个菌落，所以接种方法是稀释涂布平板法。因此在接种前，需要对厨余垃圾浸出液进行梯度稀释处理。
故填：干热灭菌；梯度稀释；稀释涂布平板法。
（2）因为淀粉是唯一碳源，所以能在该培养基上生长的微生物必须能够分解淀粉，以淀粉为碳源，不能分解淀粉的微生物不能在该培养基上生存，所以能够筛选出高效降解淀粉的微生物。因为淀粉遇碘变蓝，部分菌落周围出现清晰区是因为淀粉被高效降解淀粉的细菌分解，透明圈越大分解效率越高，据图可知，能最高效降解淀粉的细菌是②。X培养基是固体培养基，Y培养基用于扩大培养是液体培养基，所以Y培养基中不含凝固剂琼脂；因为Y培养基要大量培养细菌，所以营养物质需更加丰富。
故填：筛选得到能高效降解淀粉的微生物；②；营养物质丰富、不含琼脂。
（3）KH2PO4和Na2HPO4属于无机盐，也可以作为缓冲物质调节pH 的相对稳定。
故填：提供无机营养，维持培养基pH稳定。
（4）为筛选出既对抗生素有抗性又能高效降解淀粉的细菌，需要在X培养基和Y培养基筛选降解淀粉细菌的基础上加入抗生素，将对抗生素有抗性的微生物筛选出来。
故填：在制备X培养基时加入一定浓度的抗生素，培养后选择降解圈最大的菌落接种在含有抗生素的Y培养基中培养。
【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。③成分：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。④筛选目的微生物最好应该到目的微生物含量丰富的地方取样，如果没有这样的环境，应该人为创造适宜其生长的环境。
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广东省深圳市龙华区2022-2023学年高二下学期第二次阶段考试（期中）生物学试题
一、单选题（1-15题2分/题，16-20题3分/题，共45分）
1．（2021·奉贤模拟）如图为转基因低乳糖奶牛培育流程。该流程未涉及到的生物技术是（ ）
A．细胞核移植技术 B．动物细胞培养技术
C．转基因技术 D．细胞融合技术
2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（ ）
A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性
B．植物细胞培养和动物细胞培养——细胞的全能性
C．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性
D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂
3．（2023高二下·龙华期中）尿素是一种重要的农业化肥，但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。下图是某课题小组培养从土壤中分离出能够分解尿素的细菌的结果示意图，以下相关说法正确的是（ ）
A．运用图1所示的接种方法统计的活菌数比实际值偏高
B．运用图2所示接种方法需要把接种环深入到培养基中进行接种
C．为长期保存纯化的优质菌种可以采用甘油管藏的方法
D．对尿素分解菌进行分离时需要在选择培养基中加入酚红指示剂
4．（2023·湖北模拟）贵州知名品牌“老干妈”系列产品一直沿用传统工艺精心酿造，其中风味豆豉深受大众喜爱，远销国内外，风味豆豉的主要工艺流程如下图。下列说法正确的是（ ）
A．如果发酵装置中上层黄豆的发酵效果比底层好，推测该发酵菌的新陈代谢类型是异养厌氧型
B．传统方法制作豆豉，以混合菌种的液体发酵为主
C．调味过程中添加盐可抑制杂菌生长，白酒和风味料只是调节口味
D．黄豆煮熟的目的主要是破坏黄豆内部结构，使蛋白质变性，同时起到消毒的作用
5．（2023高二下·龙华期中）生命活动离不开细胞，对此理解不正确的是（ ）
A．没有细胞结构的病毒必须寄生在活细胞内才能繁殖
B．单细胞生物体具有生命的基本特征——新陈代谢、繁殖
C．多细胞生物体的生命活动由不同程度分化的细胞密切合作完成
D．一切生物都是由细胞构成
6．（2023高二下·龙华期中）在生物体内含量极少，但对维持生物体正常生命活动必不可少的元素有 （ ）
A．Zn、Cu、B、Mn B．Zn、Cu、Mg、Ca
C．Fe、Mn、Zn、Mg D．K、Mn、Cu、Mo
7．（2023高二下·龙华期中）下表中，食物中营养物质的检测成分、材料、试剂和显色结果均正确的是 （ ）
选项 检测成分 材料 试剂 显色结果
A 淀粉 大米 碘液 蓝色
B 蛋白质 豆浆 双缩脲试剂 蓝色
C 还原糖 红心火龙果 斐林试剂 砖红色
D 脂肪 花生子叶 苏丹Ⅲ染液 橘红色
A．A B．B C．C D．D
8．（2023高二下·龙华期中）常言道：“马无夜草不肥”，其实是有科学依据的。生物体内有一种被称为“BMAL1”的蛋白质，能促进脂肪堆积，这种蛋白质在白天减少，夜间增多。下列有关叙述错误的是 （ ）
A．大多数动物脂肪含有饱和脂肪酸
B．糖类和脂肪之间的转化程度有明显差异
C．“BMAL1”在夜间可能会促进糖类转化为脂肪
D．与同等质量的脂肪相比，糖类储存的能量多
9．（2023高二下·龙华期中）多聚酶链式反应 （PCR）被广泛用于遗传疾病的诊断、刑事侦察、古生物学和基因工程等领域。利用PCR技术可快速扩增目的基因。下列有关叙述错误的是 （ ）
A．扩增目的基因的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列
B．PCR技术需要使用Taq酶的原因是其耐高温
C．PCR技术扩增时，两种引物的碱基序列要尽可能互补
D．若目的基因扩增5次，则需要消耗62个引物分子
10．（2023·门头沟模拟）当前生物技术发展非常迅猛，很多生物技术的应用已经与我们的日常生活密切相关。下列有关生物技术的说法或做法不正确的是（ ）
A．消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面
B．我国坚决反对克隆人，不允许进行任何生殖性克隆人实验
C．对囊胚进行胚胎分割时，必须对整个胚胎进行均等分割
D．胚胎工程繁育良种时，供体和受体母畜都要进行同期发情处理
11．（2023高二下·龙华期中）下图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图（↓表示切点）。下列相关分析错误的是 （ ）
A．这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端
B．不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同
C．能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割
D．同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等
12．（2023高二下·龙华期中）细胞中的有机物包括糖类、脂质、蛋白质和核酸等，下列说法错误的是 （ ）
A．细胞中的各种有机物都能为自身细胞代谢提供能量
B．脂质、蛋白质、核酸都可能传递信息
C．检测还原糖的试剂通过适当稀释可以用来制取检测蛋白质的试剂
D．脂肪储能效果高于糖类是因为二者C、H、O的比值不同
13．（2023高二下·龙华期中）在现代生物技术中，下列研究方案不能实现其目的是 （ ）
选项 方案 目的
A 将人胰岛素基因导入大肠杆菌并培养 大量生产人胰岛素
B 体外诱导胚胎干细胞分化 培育供移植的组织器官
C 体外培养骨髓瘤细胞 制备单克隆抗体
D 花药离体培养 获得单倍体植株
A．A B．B C．C D．D
14．（2021·和平模拟）实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒
B．做RT-PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针
C．需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增
D．病毒的检测还可以检测病毒引发产生的抗体，其原理是抗原-抗体杂交
15．（2023高二下·龙华期中）草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列说法正确的是 （ ）
A．方法一中选择甲作为组织培养材料的原因是该部位细胞的分生能力强
B．需要用体积分数 70%的酒精和质量分数 5%次氯酸钠溶液对甲进行消毒
C．两个培育过程一般都不需要光照但需要生长素和细胞分裂素
D．需要通过病毒接种的方式来判断两种选育方法的效果
16．（2021·如皋模拟）下图表示单克隆抗体的制备过程。相关叙述错误的是（ ）
A．过程①注射特定抗原的目的是使小鼠产生能分泌特定抗体的浆细胞
B．过程②诱导融合产生的融合细胞都能产生单克隆抗体，且能无限增殖
C．过程③需要提供一定浓度的CO2，目的是维持培养液的pH
D．单克隆抗体的主要优点有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备
17．（2023高二下·龙华期中）下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是 （ ）
A．①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前需对精子进行离心处理
B．②代表体外胚胎培养，在透明带中进行的受精卵的早期分裂称为卵裂
C．③代表胚胎分割，可取样桑葚胚时期的滋养层进行DNA分析，鉴定性别
D．⑤代表胚胎移植，操作前通常需要对代孕母牛做发情处理
18．（2023高二下·龙华期中）原油开采、运输和加工过程中的污染事件给生态环境造成了巨大破坏。以微生物为主导的生物修复技术是治理原油污染的有效方法。研究人员从青藏高原班戈桥地区的土壤中分离到一株能利用原油为碳源生长的细菌（BGQ-6），该菌对原油的总降解率为74.14%。下列说法错误的是 （ ）
A．可采用稀释涂布平板法对BGQ-6进行计数
B．一般选择菌落数为30-300的平板进行BGQ-6菌落计数
C．由单一的BGQ-6繁殖所获得的群体称为BGQ-6纯培养物
D．利用添加原油的普通培养基能从被原油污染的土壤中筛选BGQ-6
19．（2023高二下·龙华期中）下图是生物体细胞内部分有机化合物的概念图。下列有关叙述正确的是 （ ）
A．a包含脂肪、磷脂和固醇等，通常都不溶于水，都含有C、H、O、N、P
B．高温、过酸、过碱、重金属盐使b变性时破坏了氨基酸的空间结构和肽键
C．烟草花叶病毒的遗传信息储存在c中，其基本单位是核糖核苷酸
D．二糖都是还原糖，糖类与细胞表面的识别、细胞间的信息传递等功能有关
20．（2023高二下·龙华期中）细菌中某些蛋白质的肽链之间有二硫键。已知不同的肽链因相对分子质量不同而以电泳方式分离。下图甲是一个分析细菌中蛋白质的电泳结果图，“-”代表没加还原剂，分子量接近130，“+”代表加还原剂形成两种分子量的分子，已知还原剂可破坏二硫键，“M”代表已知相对分子质量的蛋白质，图乙代表蛋白质或多肽的结构图。根据图甲结果，图乙中哪幅图最能代表该细菌原本蛋白质结构(图乙中“-”代表二硫键的位置) （ ）
A．A B．B C．C D．D
二、非选择题(共55分)
21．（2023高二下·龙华期中）人体中血清白蛋白可以运输脂肪酸、胆色素、氨基酸、类固醇激素、金属离子和许多治疗分子等，同时参与维持血浆正常的渗透压，在临床上应用广泛。但从人体中直接提取的血清白蛋白含量少，且易受污染，生物反应器可以解决此项难题。回答下列问题：
（1）从人体获取的血清白蛋白基因可通过 技术进行扩增，扩增后的血清白蛋白基因与启动子、 和 等构建成基因表达载体。构建乳腺生物反应器时选用的是乳腺蛋白基因的启动子，其目的是 。
（2）科学家将构建好的基因表达载体通过 技术导入奶牛的受精卵中。受精卵继续培养至胚胎。当胚胎发育至 阶段，取其 做DNA分析来进行性别鉴定，筛选出发育状态良好的 （填“雌”或“雄”）性胚胎进行移植，使其生长发育成转基因动物，将来可从牛奶中提取得到大量的人血清白蛋白。
（3）有人提议将乳腺蛋白基因的启动子换成uroplakinⅡ基因启动子（高效促进目的蛋白在膀胱特异性表达及分泌），可增加血清白蛋白的产量。请分析产量高的原因 。
22．（2021·永州模拟）科学家将胰蛋白酶抑制剂基因通过农杆菌导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。回答下列问题：
（1）构建该重组质粒时，可选择的限制酶有 ，相比较而言 更合适，原因是 。
（2）Ti质粒是基因工程中常用的运载体，从图中可以看出其作为运载体具备的条件有 （答出两点），Ti质粒上有T-DNA，其作用是 。
（3）重组质粒除了有目的基因和复制原点外，还应该有 。
（4）从过程④到⑤需要更换培养基，两者培养基所需成分中主要是 的比例不同。
23．（2023高二下·龙华期中）下图表示细胞内某些有机物的元素组成和功能关系，其中A、B代表元素，I、II、III是生物大分子，X/Y、P是相应的小分子物质。请回答下列问题：
（1）物质I在人体肝脏、玉米籽粒中分别主要指 ：为了检测玉米籽粒发芽过程中该物质含量的变化，将不同发芽阶段的玉米籽粒纵切，滴加 后进行观察，结果胚乳呈蓝色块状，且随着发芽时间的延长逐渐变小，由此可得出的结论是 。
（2）细胞中携带遗传信息的物质II是指 ，在生物体的遗传、变异和 中具有重要作用。
（3）请设计实验证明白萝卜贮藏根组织细胞中含有图中物质III(对试剂的浓度、用量不做要求，要求简要写出实验思路和预期实验结果)。
实验思路
预期实验结果
24．（2023高二下·龙华期中）（厨余垃圾中有机质含量高，利用微生物发酵技术将厨余垃圾变成绿色有机肥，可有效实现厨余垃圾无害化和资源化处理。某实验小组欲从厨余垃圾中筛选能高效降解淀粉的细菌，实验操作流程如图所示。回答下列问题：
（1）实验过程中对培养皿、烧杯等玻璃仪器常用 法进行灭菌。在接种前，需要对厨余垃圾浸出液进行 处理。根据X培养基上菌落的生长情况，推测该接种方法是 。
（2）在配制X培养基的组成成分时，加入的唯一碳源是淀粉，目的是 。培养、加入碘液后，部分菌落周围出现清晰区，图中能最高效降解淀粉的细菌是 （填编号）。与X培养基相比，Y培养基在成分组成上的特点是 。
（3）用来筛选淀粉分解菌的X、Y培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有 。
（4）若厨余垃圾中混入了抗生素，将不利于其生物降解，为了筛选出对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的细菌，在上图所示的基础上，对实验操作的优化方案是 。
答案解析部分
1．【答案】D
【知识点】基因工程的应用；胚胎工程的概念及其技术
【解析】【解答】据图可知，将含目的基因的重组质粒转入牛胎儿成纤维细胞需要通过转基因技术；将牛胎儿成纤维细胞的细胞核与卵母细胞的细胞质组合成重组细胞属于细胞核移植技术；将重组细胞培养为早期胚胎需要通过动物细胞培养技术。图中不涉及细胞融合技术。ABC不符合题意，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】 1、基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术；
2、细胞核移植技术，把某细胞核取出移植到去核的细胞中形成一个新的细胞的过程；
3、将重组细胞培养为早期胚胎需要通过动物细胞培养技术。
2．【答案】B
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用；动物细胞工程的常用技术与应用；动物细胞培养技术
【解析】【解答】A、细胞工程中，利用酶的专一性原理，用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，用胰蛋白酶处理动物组织得到单个细胞，A正确；
B、植物组织培养的原理是细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞增殖，B错误；
C、利用生物膜的流动性原理，采用诱导技术可以诱导原生质体融合和动物细胞融合，C正确；
D、紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养的原理都是细胞增殖（分裂），D正确。
故答案为：B。
【分析】1、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：
细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合
理论基础 细胞的全能性、细胞膜的流动性 细胞增殖、细胞膜的流动性
融合前处理 酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶） 注射特定抗原，免疫处理正常小鼠
诱导手段 物理法： 离心、振动、电激
化学法：聚乙二醇（PEG） 物理法： 离心、振动、电激
化学法：聚乙二醇（PEG）
生物法：灭活的病毒（灭活的仙台病毒）
诱导过程 第一步：原生质体的制备（酶解法）
第二步：原生质体融合（物、化法）
第三步：杂种细胞的筛选和培养
第四步：杂种植株的诱导与鉴定 正常小鼠免疫处理动物细胞的融合（物、化、生法）杂交瘤细胞的筛选与培养专一抗体检验阳性细胞培养单克隆抗体的提纯
用途和意义 克服远缘杂交的不亲和障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围
应用：克服远缘杂交的不亲和障碍 制备单克隆抗体。诊断、治疗、预防疾病，例如“生物导弹”治疗癌症
2、动物细胞培养：
（1）定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，原理细胞增殖。
（2）动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
3．【答案】C
【知识点】尿素分解菌的分离与计数
【解析】【解答】A、图1接种方法为稀释涂布平板法，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上显示的只是一个菌落，因此统计的菌落数常常比实际数目少，A错误；
B、平板划线法进行划线时，在培养基表面进行划线操作，B错误；
C、甘油管藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的，因此长期保存纯化的优质菌种，可以采用甘油管藏的方法，C正确；
D、对尿素分解菌进行分离时，需要在培养基中加入尿素作为唯一的氮源，D错误。
故答案为：C。
【分析】平板划线法和稀释涂布平板法的比较
项目 平板划线法 稀释涂布平板法
过程 用接种环在固体培养基表面连续划线，将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养
优点 对菌种进行分离，观察菌落特征 可以进行计数，观察菌落特征
缺点 不能计数 吸收量较少，平板不干燥效果不好，容易蔓延
相同点 都使用固体培养基，两种方法都可以用于分离微生物
4．【答案】D
【知识点】微生物发酵及其应用
【解析】【解答】A、如果发酵装置中上层黄豆的发酵效果比底层好，上层氧气充足，推测该发酵菌的新陈代谢类型是异养需氧型，A错误；
B、传统发酵是以混合菌种的固体或半固体发酵为主，B错误；
C、调味过程中添加盐可抑制杂菌生长，白酒和风味料既可以调节口味也可以抑制杂菌生长，C错误；
D、黄豆煮熟的目的主要是破坏黄豆内部结构，使蛋白质变性，易于被酶水解，同时起到消毒的作用，D正确。
故答案为：D。
【分析】黄豆蒸熟或煮熟后，高温会使蛋白质分子的空间结构变得伸展、松散，肽键暴露，容易被蛋白酶水解，同时起到消毒的作用。
5．【答案】D
【知识点】细胞是生物体的结构和功能单位；病毒
【解析】【解答】A、病毒营寄生生活，不能独立生存，必须寄生在活细胞中才能繁殖，A正确；
B、单细胞生物具有生命的基本特征有新陈代谢、应激性、适应环境的能力、生长繁殖等，B正确；
C、多细胞生物体绝大多数细胞发生了分化，在形态结构和生理功能上发生了稳定性差异，只能完成该细胞的特定功能，不同细胞密切合作才能完成生物体的生命活动，C正确；
D、病毒是非细胞生物，无细胞结构，D错误。
故答案为：D。
【分析】细胞是基本的生命系统。病毒没有细胞结构，只有寄生在活细胞中才能生活。病毒不属于生命系统的结构层次。单细胞生物依赖单个细胞独立完成生命活动。多细胞生物依赖各种分化的细胞共同完成一系列复杂的生命活动。
6．【答案】A
【知识点】组成细胞的元素和化合物
【解析】【解答】A、在生物体内含量极少，但对维持生物体正常生命活动必不可少的元素是微量元素，Zn、Cu均属于属于微量元素，A正确；
B、Mg和Ca元素属于生物体中的大量元素，B错误；
C、Mg元素属于大量元素，C错误；
D、K元素都属于大量元素，D正确。
故答案为：A。
【分析】组成生物体的化学元素根据其含量不同分为大量元素和微量元素两大类。大量元素包括C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg；微量元素包括Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo等。
7．【答案】A
【知识点】检测蛋白质的实验；检测还原糖的实验；检测脂肪的实验
【解析】【解答】A、大米中富含淀粉，淀粉遇碘液变蓝色，A正确；
B、双缩脲试剂与蛋白质发生紫色反应，B错误；
C、红心火龙果的红色会对实验结果（砖红色）的观察造成干扰，因此不能作为鉴定还原糖实验的材料，C错误；
D、脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，D错误。
故答案为：A。
【分析】①还原糖＋斐林试剂在水浴加热条件下生成砖红色沉淀；②蛋白质＋双缩脲试剂→紫色；③脂肪＋苏丹Ⅲ染液→橘黄色；④淀粉＋碘液→蓝色。注意：并非所有的糖都是还原糖，如淀粉、纤维素、蔗糖都是非还原糖，不能用斐林试剂检测。上述实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验中的颜色变化。脂肪鉴定的过程中滴加1～2滴体积分数为50%的酒精溶液的目的是洗去浮色，原因是苏丹Ⅲ染液易溶于酒精。
8．【答案】D
【知识点】糖类的种类及其分布和功能；脂质的种类及其功能
【解析】【解答】A、植物脂肪大多含不饱和脂肪酸，在室温时呈液态；大多数动物脂肪含有饱和脂肪酸，在室温时呈固态，A正确；
B、糖类在供应充足的情况下，可以大量转化为脂肪；而脂肪一般只在糖类代谢发生障碍，引起供能不足时，才会分解供能，而且不能大量转化为糖类，两者之间的转化程度是有明显差异的，B正确；
C、因为“BMAL1”能促进脂肪堆积，这种蛋白质在白天减少，夜间增多，所以在夜间可能会促进糖类转化为脂肪，C正确；
D、脂肪分子中氧的含量远低于糖类，而氢的含量更高，因此与同等质量的糖类相比，脂肪储存的能量多，氧化分解时耗氧量高，释放的能量更多，D错误。
故答案为：D。
【分析】细胞中的糖类和脂质是可以相互转化的。血液中的葡萄糖除供细胞利用外，多余的部分可以合成糖原储在起来；如果葡萄糖还有富余，就可以转变成脂肪和某些氨基酸。糖类和脂肪之间的转化程度是有明显差异的。例如，糖类在供应充足的情况下，可以大量转化为脂肪；而脂肪一般只在糖类代谢发生障碍，引起供能不足时，才会分解供能，而且不能大量转化为糖类。
9．【答案】C
【知识点】PCR技术的基本操作和应用
【解析】【解答】A、PCR技术的原理是DNA半保留复制，扩增目的基因时要根据一段已知目的基因的核苷酸序列合成引物，A正确；
B、PCR技术过程中要进行高温处理变性过程，因此需要用耐高温的DNA聚合酶，即Taq酶，B正确；
C、PCR技术中所用的两种引物分别和两条模板链的3 '端碱基互补配对的，因此两种引物的碱基序列不同，C错误；
D、若一个目的基因扩增5次，可得到25=32个DNA分子，共含有64条脱氧核苷酸链，其中原目的基因两条模板链不需要添加引物，因此共需消耗64-2=62个引物分子，D正确。
故答案为：C。
【分析】利用PCR获取和扩增目的基因：
①原理：DNA半保留复制。
②条件：DNA模板、2种引物、耐高温的DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸。
③扩增过程
过程 说明
变性 温度上升到90 ℃以上，双链DNA解聚为单链
复性 温度下降到50 ℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合
延伸 温度上升到72 ℃左右，溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链
10．【答案】C
【知识点】胚胎移植；胚胎分割；生物武器；克隆的利与弊
【解析】【解答】A、生物武器威胁巨大，消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面，A正确；
B、我国对待克隆人的态度：坚决反对克隆人，不允许进行任何生殖性克隆人实验，B正确；
C、对囊胚进行胚胎分割时，必须对内细胞团进行均等分割，C错误；
D、胚胎工程繁育良种时，供体和受体母畜都要进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，D正确；
故答案为：C。
【分析】胚胎分割时，对囊胚的内细胞团均等分割的原因是：内细胞团一般是受精卵发育到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养，若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。
11．【答案】D
【知识点】基因工程的基本工具（详细）
【解析】【解答】A、据图可知，这三种限制酶切割位点均不在中轴线上，切割出的DNA片段末端都是黏性末端，A正确；
B、限制酶1和限制酶3切割DNA片段产生的黏性末端相同，B正确；
C、限制酶3的识别序列中包含限制酶1的识别序列，因此能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割，C正确；
D、能被限制酶1切割的DNA不一定能被限制酶3切割，因此同一个DNA经限制酶Ⅰ和限制酶3分别切割后所得片段数不一定相等，D错误。
故答案为：D。
【分析】限制酶识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸间的磷酸二酯键断开，经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，分别为黏性末端和平末端。三种限制酶的识别序列均不同，但限制酶1和3切割后产生的黏性末端相同。
12．【答案】A
【知识点】检测蛋白质的实验；糖类的种类及其分布和功能；检测还原糖的实验；生物大分子以碳链为骨架；脂质的种类及其功能
【解析】【解答】A、细胞的核酸作为遗传信息的载体，不能提供能量，A错误；
B、部分激素的化学本质是脂质或蛋白质能传递信息，核酸作为遗传物质能传递信息，B正确；
C、检测还原糖的斐林试剂的乙液为0.05的CuSO4溶液，通过适当稀释可形成检测蛋白质试剂中的双缩脲试剂B液（0.01 的CuSO4溶液），C正确；
D、与相同质量的糖类相比，脂肪中的含C、H比例高，含O低，脂肪储能效果更好，D正确。
故答案为：A。
【分析】蛋白质、核酸和多糖都是生物大分子，都是由许多基本组成单位连接而成的，这些基本单位称为单体。生物大分子又称为单体的多聚体，每一个单体都是以若干个相连的碳原子构成的碳链为基本骨架，由许多单体连接成的多聚体。
13．【答案】C
【知识点】干细胞的概念、应用及研究进展；基因工程的应用；单克隆抗体的优点及应用；单倍体育种
【解析】【解答】A、大肠杆菌属于微生物，具有繁殖速度快的特点，将人胰岛素基因导入大肠杆菌并培养，随大肠杆菌大量增殖，能大量生产人胰岛素，A正确；
B、胚胎干细胞是一类既能分裂也能分化的细胞，因此可以体外诱导胚胎干细胞分化培育供移植的组织器官，B正确；
C、体外或体内培养杂交髓瘤细胞可以制备单克隆抗体，骨髓瘤细胞不能产生抗体，C错误；
D、花药中含有精子，属于雄配子，由配子发育而成的个体属于单倍体，因此用花药离体培养法可获得单倍体植株，D正确。
故答案为：C。
【分析】（1）基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
（2）单克隆抗体制备流程：给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，从小鼠脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞并用选择培养基进行筛选；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
14．【答案】A
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】A、若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者体内有该病毒RNA，即被检测者感染病毒，A错误；
B、PCR 需要根据目的基因的核苷酸序列合成引物，同时 RT-PCR 还需要探针与待测样本 DNA 混合，B正确；
C、PCR扩增必须以DNA为模板，RNA不能作为PCR扩增的模板，所以需要将样本中的RNA反转录为 DNA后再进行扩增，C正确；
D、RNA病毒的检测还可以通过特异性抗体检测，即检测感染者体内通过免疫反应所产生的某种抗体，原理是抗原-抗体杂交，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、PCR技术
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
（2）原理：DNA复制。
（3）前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚台酶(Taq酶)。
（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
2、分子检测：①检测DNA--DNA分子杂交技术；②检测mRNA--分子杂交技术；③检测蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
15．【答案】B
【知识点】植物组织培养的过程；基因工程的操作程序（详细）；植物组织培养的影响因素
【解析】【解答】A、方法一目的为获得无病毒苗，选择甲作为组织培养材料的原因是该部位细胞含病毒少或无病毒，A错误；
B、甲为外植体用于植物组织培养获得无病毒植株取材后需要用体积分数70%的酒精和质量分数 5%次氯酸钠溶液对甲进行消毒，以防止杂菌污染，B正确；
C、两个培育过程一般都涉及植物组织培养技术，再分化，及形成幼苗过程均需要光照，C错误；
D、无病毒苗无抗病毒特性，不能通过病毒接种的方式来判断选育方法的效果 ，D错误。
故答案为：B。
【分析】（1）甲为甲为外植体；A、C过程表示植物组织培养过程；B过程表示将目的基因SMYELV-CP导入草莓细胞过程。
（2）植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
16．【答案】B
【知识点】单克隆抗体的制备过程；单克隆抗体的优点及应用
【解析】【解答】A、过程①是向小鼠注射特定抗原，刺激其发生特异性免疫，产生能分泌特定抗体的浆细胞，A正确；
B、过程②诱导融合产生的融合细胞中存在骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合，不能产生抗体，B细胞和B细胞融合形成的细胞不能无限增殖，B错误；
C、过程③进行动物细胞培养，需要一定浓度的CO2，维持培养液的pH，C正确；
D、单克隆抗体的主要优点有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、单克隆抗体的最主要优点就是特异性强，灵敏度高，能够大量制备。单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂（最广泛的用途）：具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。
17．【答案】C
【知识点】胚胎移植；胚胎分割；体外受精；胚胎的体外培养
【解析】【解答】A、①是进行精卵结合的体外受精的过程，精子获能处理前要对精子进行离心处理以除去精液利于精子获能，A正确；
B、②过程是受精卵经早期胚胎培养形成囊胚过程，胚胎发育早期是在透明带内进行的，这一时期称为卵裂期，B正确；
C、鉴定性别应选择囊胚期的滋养层细胞进行DNA分析，C错误；
D、过程⑤是将早期胚胎移植入代孕母牛的子宫内，操作前需要对供体和受体代孕母牛进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，D正确。
故答案为：C。
【分析】分析题图：图中①表示体外受精，②表示早期胚胎培养，③表示胚胎分割，④表示对分割后胚胎的培养，⑤表示胚胎移植。
18．【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养；测定某种微生物的数量；培养基概述及其分类
【解析】【解答】A、稀释涂布平板法通过梯度稀释逐步减小细菌浓度，通过培养基上菌落数来统计样品中活菌的数目对BGQ-6进行计数，A正确；
B、为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数，B正确；
C、由单一的BGQ-6繁殖所获得的群体均为能利用原油为碳源生长的细菌（BGQ-6）故称为BGQ-6纯培养物，C正确；
D、普通培养基中营养物质齐全，不能起到筛选的目的，利用添加原油作为唯一碳源的选择培养基能从被原油污染的土壤中筛选BGQ-6，D错误。
故答案为：D。
【分析】（1）培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。②按功能可分为选择培养基（在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基）和鉴别培养基。③成分：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。④筛选目的微生物最好应该到目的微生物含量丰富的地方取样，如果没有这样的环境，应该人为创造适宜其生长的环境。
（2）稀释涂布平板法可以用于分离微生物，也常用来统计样品中活菌的数目。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。
19．【答案】C
【知识点】化合物推断-综合
【解析】【解答】A、脂肪和固醇的元素组成为C、H、O三种化学元素，A错误；
B、高温、过酸、过碱、重金属盐使蛋白质变性时未破坏氨基酸的空间结构和肽键，破坏了蛋白质的空间结构，B错误；
C、烟草花叶病毒是RNA病毒，其遗传物质是RNA，基本组成单位是核糖核苷酸，C正确；
D、二糖中的蔗糖是非还原糖，D错误。
故答案为：C。
【分析】分析图示：a为脂肪、磷脂和固醇，b为蛋白质，c为RNA。脂质主要是由C、H、O三种化学元素组成，有些还含有N和P。其中磷脂的元素组成为C、H、O、N、P；脂肪和固醇均由C、H、O三种元素组成。
20．【答案】B
【知识点】蛋白质分子的化学结构和空间结构；蛋白质的提取和分离
【解析】【解答】细菌中的该蛋白质在没加还原剂时以电泳方式分离只得到一条分离带且相对分子质量是130，加入还原剂之后二硫键被破坏，以电泳方式分离的结果出现了两条分离带，一条相对分子质量为67左右，另一条的相对分子质量约为30，两者之和不等于130，因此该蛋白质不是由两条肽链组成，因为67+30×2=130，所以细菌中的该蛋白质是由一条相对分子质量为67的肽链和两条相对分子质量约为30的肽链构成，中间有两个二硫键相连，B正确，A、C、D错误，
故答案为：B。
【分析】本题突破口在于分析图甲电泳结果，加还原剂后二硫键被破坏，蛋白质的分子质量应稍大于130，由此得出答案。
21．【答案】（1）PCR；终止子；标记基因；使目的基因在动物体内的乳腺细胞中表达，从而在乳汁中获取所需产品
（2）显微注射；囊胚；滋养层细胞；雌
（3）雌性牛只有在哺乳期才能分泌乳汁，而尿液不会受到性别和发育期的影响，尿液的分泌总量要比乳汁的分泌量大
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的应用；胚胎移植；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】（1）利用PCR技术可扩增目的基因。基因表达载体由目的基因、启动子、终止子、标记基因等组成。构建乳腺生物反应器，目的是使基因特异性地只在乳腺细胞中表达，在乳汁中获取所需产品，因此选用的是乳腺蛋白基因的启动子。
故填：PCR；终止子；标记基因；使目的基因在动物体内的乳腺细胞中表达，从而在乳汁中获取所需产品。
（2）将基因表达载体导入动物细胞通常使用显微注射技术。做DNA分析来进行性别鉴定一般选择囊胚期滋养层细胞进行操作，因为滋养层细胞发育为胎盘和胎膜，不影响组织器官的形成和发育。目的产物要从乳汁中获取，故选择雌性胚胎进行移植。
故填：显微注射；囊胚；滋养层细胞；雌。
（3）通过乳汁获取血清蛋白仅限于雌性动物哺乳期，而尿液不会受到性别和发育期的影响，尿液的分泌总量要比乳汁的分泌量大，因此将乳腺蛋白基因的启动子换成uroplakinⅡ基因启动子，可增加血清白蛋白的产量。
故填：雌性牛只有在哺乳期才能分泌乳汁，而尿液不会受到性别和发育期的影响，尿液的分泌总量要比乳汁的分泌量大。
【分析】（1）基因工程步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。其中基因表达载体的构建是核心步骤，基因表达载体要包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点。
（2）目的基因的检测与鉴定
检测水平 检测目的 检测方法
分子水平 目的基因是否插入到转基因生物染色体DNA上 RCR
目的基因是否转录出了mRNA
目的基因是否翻译出蛋白质 抗原—抗体杂交
个体水平 转基因生物是否表现出相应的特性 如抗虫、抗病的接种实验
22．【答案】（1）EcoRⅠ或者BamHⅠ和HindⅢ；BamHⅠ和HindⅢ；既能防止质粒自身环化，又可以保证目的基因正确连接在质粒上
（2）有一个或多个限制酶切割位点；具有特殊的标记基因；可转移至受体细胞，并且能整合到受体细胞染色体的DNA上
（3）启动子、终止子、标记基因
（4）生长素和细胞分裂素或不同激素
【知识点】基因工程的应用；组织培养基的成分及作用
【解析】【解答】（1）构建该重组质粒时，可选择的限制酶有EcoRⅠ或者BamHⅠ和HindⅢ，相比较而言BamHⅠ和HindⅢ更合适，原因是这样切割的目的基因和质粒两端的粘性末端不同，既能防止质粒自身环化，又可以保证目的基因正确连接在质粒上。（2）从图中可以看出其作为运载体具备的条件有，一个或多个限制酶切割位点；具有特殊的标记基因（抗性基因）。Ti质粒上T-DNA的作用是可转移至受体细胞，并且能整合到受体细胞染色体的DNA上。（3）重组质粒要具有启动子、终止子、标记基因、目的基因和复制原点等。（4）过程④是脱分化，过程⑤是再分化，两个过程生长素和细胞分裂素等激素的比例不同。
【分析】一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并且在特点的位点切割DNA分子。作为运载体的质粒要具有多个限制酶的切点，且能在受体细胞中复制和标记基因等特点。
23．【答案】（1）肝糖原、淀粉；碘液；胚乳主要成分是淀粉，玉米种子发芽过程中被水解
（2）核酸；蛋白质的生物合成
（3）实验思路：将白萝卜贮藏根充分研磨获取组织样液；取组织样液和蛋白质标准样 液等量（2mL）分别注入甲、乙两只试管中；向两只试管内分别注入0.1 g/mL的 NaOH溶液1 mL，摇匀后分别滴加0.01 g/mL的CuSO4溶液4滴（或向两只试管内分别 加入等量的双缩脲试剂），观察颜色变化。；预期实验结果：甲、乙两只试管中均出现紫色现象。
【知识点】检测蛋白质的实验；核酸在生命活动中的作用；糖类的种类及其分布和功能
【解析】【解答】（1）物质Ⅰ是多糖，在人体肝脏、玉米籽粒中分别主要指肝糖原和淀粉；淀粉遇碘变蓝，在玉米种子发芽过程中胚乳呈蓝色，说明胚乳中含有淀粉；随着发芽时间的延长逐渐变小，说明淀粉在种子发芽过程中被水解。
故填：肝糖原、淀粉；碘液；胚乳主要成分是淀粉，玉米种子发芽过程中被水解。
（2）核酸是细胞内携带遗传信息的物质，在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中具有重要作用。
故填：核酸；蛋白质的生物合成。
（3）物质Ⅲ能承担生命活动，是蛋白质。因此本实验的目的为：证明白萝卜贮藏根组织细胞中含有蛋白质。选取双缩脲试剂对蛋白质进行鉴定。在进行实验设计时遵循对照原则和单一变量原则。
故填：实验思路：将白萝卜贮藏根充分研磨获取组织样液；取组织样液和蛋白质标准样液等量（2mL）分别注入甲、乙两只试管中；向两只试管内分别注入0.1 g/mL的 NaOH溶液1 mL，摇匀后分别滴加0.01 g/mL的CuSO4溶液4滴（或向两只试管内分别加入等量的双缩脲试剂），观察颜色变化；预期实验结果：甲、乙两只试管中均出现紫色现象。
【分析】据题意可知：I、II、III是生物大分子，X/Y、P是相应的小分子物质。生物大分子包括蛋白质、核酸和多糖，其基本单位分别是氨基酸、核苷酸和葡萄糖。图中Ⅰ是能源物质，由C、H、O三种元素组成，因此Ⅰ是多糖，X是葡萄糖；Ⅱ携带遗传信息，所以Ⅱ是核酸，Y是核苷酸，Ⅲ承担生命活动是蛋白质，P是其基本单位氨基酸；核酸由C、H、O、N、P五种元素组成，因此A代表N和P两种元素，氨基酸由C、H、O、N组成，因此B代表N元素。
24．【答案】（1）干热灭菌；梯度稀释；稀释涂布平板法
（2）筛选得到能高效降解淀粉的微生物；②；营养物质丰富、不含琼脂
（3）提供无机营养，维持培养基pH稳定
（4）在制备X培养基时加入一定浓度的抗生素，培养后选择降解圈最大的菌落接种在含有抗生素的Y培养基中培养
【知识点】微生物的分离和培养；培养基概述及其分类；灭菌技术
【解析】【解答】（1）对培养皿、烧杯等玻璃仪器常用干热灭菌法进行灭菌。根据X培养基上菌落的生长情况来看，培养基上形成的是分散的单个菌落，所以接种方法是稀释涂布平板法。因此在接种前，需要对厨余垃圾浸出液进行梯度稀释处理。
故填：干热灭菌；梯度稀释；稀释涂布平板法。
（2）因为淀粉是唯一碳源，所以能在该培养基上生长的微生物必须能够分解淀粉，以淀粉为碳源，不能分解淀粉的微生物不能在该培养基上生存，所以能够筛选出高效降解淀粉的微生物。因为淀粉遇碘变蓝，部分菌落周围出现清晰区是因为淀粉被高效降解淀粉的细菌分解，透明圈越大分解效率越高，据图可知，能最高效降解淀粉的细菌是②。X培养基是固体培养基，Y培养基用于扩大培养是液体培养基，所以Y培养基中不含凝固剂琼脂；因为Y培养基要大量培养细菌，所以营养物质需更加丰富。
故填：筛选得到能高效降解淀粉的微生物；②；营养物质丰富、不含琼脂。
（3）KH2PO4和Na2HPO4属于无机盐，也可以作为缓冲物质调节pH 的相对稳定。
故填：提供无机营养，维持培养基pH稳定。
（4）为筛选出既对抗生素有抗性又能高效降解淀粉的细菌，需要在X培养基和Y培养基筛选降解淀粉细菌的基础上加入抗生素，将对抗生素有抗性的微生物筛选出来。
故填：在制备X培养基时加入一定浓度的抗生素，培养后选择降解圈最大的菌落接种在含有抗生素的Y培养基中培养。
【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。③成分：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。④筛选目的微生物最好应该到目的微生物含量丰富的地方取样，如果没有这样的环境，应该人为创造适宜其生长的环境。
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