课件41张PPT。 专题3植物组织培养技术课题一 菊花的组织培养自主探究1.植物组织培养应用的理论基础是什么?
2.植物组织培养的基本过程和必要条件是什么?
3.基本概念:外植体,脱分化,再分化,愈伤组织?
1、理论基础:植物组织培养的原理植物细胞具有全能性①定义:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能②原理:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套
遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因③全能性的比较:受精卵>生殖细胞>体细胞植物体细胞>动物体细胞植物组织培养技术自主探究1.植物组织培养应用的理论基础是什么?
2.植物组织培养的基本过程和必要条件是什么?
3.基本概念:外植体,脱分化,再分化,愈伤组织?
植物组织培养技术植物组织培养技术植物组织培养技术植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体愈伤组织芽根植物细胞培养不需要光需要光植物组织培养技术离体植物组织培养必要条件:一定的营养物质、激素和其他外界条件整个过程必须在无菌条件下进行植物组织培养技术自主探究1.植物组织培养应用的理论基础是什么?
2.植物组织培养的基本过程和必要条件是什么?
3.基本概念:外植体,脱分化,再分化,愈伤组织?
细胞的分化外植体相关概念:脱分化再分化愈伤组织把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体 。植物组织培养技术自主探究4.影响植物组织培养的因素有哪些?
如何影响?
5.菊花组织培养实验过程是什么?
6.实验过程无菌操作?
4、影响植物组织培养的因素(阅读教材第33页)(1)植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果。 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝植物组织培养技术(2)不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊,需配置不同的培养基。MS培养基主要成分包括:A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有机物、植物激素植物组织培养技术讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?答:微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;
蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;
甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。
微生物培养基以有机营养为主。
与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养。 旁栏思考题植物组织培养技术①常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和赤霉素生长素类:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)细胞分裂素类:激动素(KT)、6-苄基嘌呤( 6-BA)、玉米素(ZT)赤霉素类:赤霉酸(GA3)(3)植物激素的影响植物组织培养技术②生长素和细胞分裂素作用植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。植物组织培养技术有利于根的分化有利于芽的分化,抑制根的分化促进愈伤组织生长③生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响植物组织培养技术(4)pH、温度、光照pH控制在5.8左右
温度控制在18-22。C
每日用日光灯照射12h菊花的组织培养植物组织培养技术植物组织培养的一般过程:离体组织或细胞植物体细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素植物细胞培养不需要光需要光植物组织培养技术自主探究4.影响植物组织培养的因素有哪些?
如何影响?
5.菊花组织培养实验过程是什么?
6.实验过程无菌操作?
植物组织培养技术实验操作菊花组织培养的实验操作 MS培养基包括20多种营养成分,实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备。
培养基母液:将各种营养成分按比例配制成的浓缩液。 用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。常温保存配置各种母液选材:消毒:①流水冲洗②酒精处理③消毒液处理外植体消毒要考虑药剂的消毒效果和植物的耐受力。菊花茎段,取生 长旺盛的嫩枝用70%的酒精擦洗工作台并用紫外线照射20分钟1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种4、接种注意事项①每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为75%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精灯火焰上灼烧一遍,冷却后再接种。②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定,一般胡萝卜3-4块,菊的茎或叶6-8块,以充分利用培养基中的营养成分和光照条件。③插入时应注意方向,不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗?答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。
设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。旁栏思考题1、愈伤组织的培养从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。
在无光条件下愈伤组织长的更快。
2周后,培养基成分接近耗尽,必须更换培养基,进行继代培养。2、愈伤组织的继代培养培养基与培养愈伤组织的相同,在严格的无菌条件下,移到新培养基上。继代培养一代为20d。
若延长时间,培养基中营养物质减少,外植体会分泌有毒物质,造成自身中毒。
如果愈伤组织长到直径为1-1.5cm时,就可以进行试管苗培养,否则还需进行第二代继代培养。 在愈伤组织继代培养期间,将恒温箱的门打开,让愈伤组织见光,愈伤组织见光后颜色可以转为绿色。3、试管苗的培养 当愈伤组织长到一定大小后,可以更换培养基,进行试管苗的见光培养。1、打开封口膜2、清洗转移珍珠岩:固体基质型,含水量高、蓄水性强、透性好,适合栽培3、移栽幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花1、培育无病毒植株2、 培养紫草愈伤组织,提取紫草素(治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料)4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法4、植物组织培养的应用: 3、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构,包裹上人造种皮,制成人工种子,可以解决有些作物品种繁殖能力差,结子困难或发芽率低等问题三、课题延伸1、一般来说,容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养2、实例:芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季1.下列关于愈伤组织的说法中不正确的是( )
A.愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂
B.用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用
C.培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料
D.人们可以从愈伤组织中提取所需物质 B2.植物组织培养过程中的脱分化是指
A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞
B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C.植物的器官、组织或细胞,通过离体培养产生愈伤组织的过程
D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程C3 胡萝卜的韧皮部细胞通过组织培养,能发育成新的植株。下列有关的叙述中,不正确的是 ( )
A.说明高度分化的植物细胞具有全能性
B.植物细胞的全能性得以表达要离开母体
C.新植株的形成是细胞分裂和分化的结果
D.高度分化的动物细胞也具有全能D4 甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗,以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的
A.有丝分裂 B.分化
C.减数分裂 D.全能性C5、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需要的
A.消毒灭菌
B.适宜的温度
C.充足的光照
D.适宜的养料和激素C6 植物细胞表现出全能性的必要条件是
A.导入其他植物细胞的基因
B.将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中
C.用适当浓度的秋水仙素处理
D.脱离母体后,给予适宜的营养和适宜的温度等外界条件D练习:1958年,美国科学家斯图尔德将分离得到的成熟胡萝卜根的韧皮部细胞进行培养,由单个细胞发育成完整的新植株,请分析: 1?开花的胡萝卜植株 2?胡
萝卜的切片3?从根的切片分离的细胞 4?由单个细胞分裂后形成的细胞团 5?胚
状体 6?试管植物 (1)这种生殖方式属于____ ,利用的细胞工程中的新技术是______ 。
(2)分离出来的胡萝卜根细胞成为细胞团是通过_____分裂方式来完成的。
(3)本实验说明了植物细胞具有____性 。
(4)在培养植物时,试管内应至少放入___ 种矿质元素。 无性生殖组织培养有丝全能14