人教版选修3专题二第二节动物细胞工程（共59张PPT）
文档属性
| 名称 | 人教版选修3专题二第二节动物细胞工程（共59张PPT） |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 2.1MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（新课程标准） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2014-10-18 20:53:53 | ||
图片预览
文档简介
课件59张PPT。动物细胞工程专题2 细胞工程多莉动物细胞工程的成果口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗、脊髓灰质炎病毒疫苗、乙型肝炎疫苗、α及β干扰素、凝血因子Ⅷ和Ⅸ、生长激素、免疫球蛋白以及单克隆抗体等。 人耳鼠动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术核移植动物细胞工程常用技术基础动物细胞培养和核移植技术为什么要进行动物细胞培养?什么是动物细胞培养?如何进行细胞培养?动物细胞工程之一
----动物细胞培养 从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。一、动物细胞培养发展历史:
20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。动物细胞培养的概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.(一)动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶原代培养贴壁生长胰蛋白酶传代培养单个细胞加培养液动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）动物细胞的培养过程
幼龄动物取动物器官
和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础动物细胞培养关键词:
接触抑制
细胞贴壁
原代培养
传代培养接触抑制 (contact inhibition) 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。有关概念原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？:遗传物质改变有关概念 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。思考讨论：在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？用胃蛋白酶行吗？ 胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞
间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个
细胞。 （二）动物细胞培养的条件1.无菌无毒的环境
2.营养
3.温度和pH
4.气体环境
(二)动物细胞培养的条件
无菌、无毒的环境:
培养液和所有培养用具进行无菌处理
措施：培养液中加抗生素，定期更换培养液
营养:
糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子（维生素、激素等）和动物血清
温度和PH:
气体环境:36.5±0.5℃ 7.2-7.4O2 CO2 95％空气 5％的CO2思考：2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组织培养基有何独特之处？3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体（三）动物细胞培养技术的应用1、蛋白质生物制品的生产
如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体
2、基因工程离不开动物细胞培养
3、用于检测有毒物质
4、细胞的生理、药理、病理研究
培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植
培养病变细胞用于研究
细胞的全能性细胞株、细胞系、细胞产品植物体、细胞产品培养结果获得细胞或 细胞分泌产物快速繁殖、培育无病毒植株等用途葡萄糖、动物血清蔗糖、 植物激素培养基特有成分液体培养基固体、半固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1、概念
动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.2、类型
体细胞核移植
胚胎细胞核移植核移植技术3.克隆羊培育过程另一头绵羊的子宫胚胎移植技术 供体
体细胞卵巢卵母细胞细胞培养体细胞去核减Ⅱ中期无核卵母细胞细胞
融合重组细胞重组胚胎胚胎移植代孕动物的子宫克隆动物3、过程：遗传物质与供体相同，性状基本相同体积大易操作，营养物质丰富；含有促进细胞核全能性表达的物质。细胞
培养注入4.体细胞核移植技术的应用前景4、体细胞核移植技术的应用前景加速家畜遗传改良，促进优良畜群繁育。
保护濒危物种。
生产医用蛋白。
治疗人类疾病：转基因克隆动物细胞、组织和器官可作为异种移植的供体。
了解胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。5.体细胞核移植技术存在的问题
①成功率低
②克隆动物存在健康问题
③克隆动物食品的安全性问题存在争议。
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是
A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞2、动物细胞工程技术的基础是（ ）
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
C.胚胎移植 D.动物细胞培养AD 3、动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于
A.培养基不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株A4、下列有关动物细胞培养的叙述，不正确的是
A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织
B.将所取的组织先用胰蛋白酶进行处理使其分散成单个细胞
C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液
D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞就衰老死亡D苏丹红是一种人工色素（工业染料），它在人体内代谢生成相应的胺类。科研人员以小鼠为实验材料，用“动物细胞培养技术”对苏丹红毒性进行了检测。
（1）该方法检测有毒物质毒性的指标是 。
（2）请完善检测苏丹红毒性的实验。
主要实验步骤： ．
第一步，取大小相同的六只培养瓶依次编号为l~6，分别加入等量相同的培养液和小鼠细胞；
第二步： ；
第三步： 。
结果如下表：结论： 。变异细胞占全部培养细胞的比例向1号瓶中加入适量的水，向2—6号瓶中加入等量不同浓度的苏丹红添加剂。培养一段时间后，取样制成临时装片，观察记录变异细胞的数目。低浓度的苏丹红毒性很小，随浓度增加毒性逐渐增强。动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是 。
（2）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的
细胞中特异表达。
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠细胞的
转入 细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为 。该重组细胞发育的过程中还应用了 技术。显微注射法膀胱上皮细胞核 去核的卵母细胞细胞核移植动物细胞培养动物细胞培养技术的应用?结束动物细胞融合与单克隆抗体一、动物细胞融合
细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合 受精作用二、动物细胞融合4.诱导融合的方法：1.概念：
指两个或多个动物细胞结合成一个细胞的过程。3.融合的具体过程：2.原理：细胞膜的流动性物理法、化学法、灭活病毒杂交细胞先是细胞质融合，细胞核的融合是在第一次有丝分裂时完成的。
细胞A细胞B杂交细胞灭活的病毒物理法
化学法仙台病毒
疱疹病毒
新城鸡瘟病毒用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂
质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭
活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 细胞融合技术应用于哪些方面？①突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能②成为研究细胞遗传、细胞免疫肿瘤和生物新品种培育及制备单克隆抗体等。5.意义：二、单克隆抗体什么是抗体？
抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
B淋巴细胞（浆细胞）产生抗体。B淋巴细胞与抗体 １．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。
２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。
３．每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体。单克隆抗体： 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 如何大量生产单克隆抗体？利用淋巴细胞产生抗体的功能
利用肿瘤细胞无限增殖的特性
利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞
利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 1、单克隆抗体制备过程细胞融合、筛选足够数量的、能产生特定抗体的细胞群单克隆抗体用特定的选择性培养基，选出杂交瘤细胞用多孔细胞培养板，利用特异抗原思考：1、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有骨髓瘤细胞无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体.
细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活。3、骨髓瘤细胞是癌细胞吗?有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞，
具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞，
所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。4、整个制备过程为何要经过两次筛选?第一次：选择性培养基筛选得到杂交瘤细胞（多种）
第二次：需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。
由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体（这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。） 3、单克隆抗体的应用（1）杂交瘤细胞既能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体
（2）与常规抗体相比，单克隆抗体特异性强，灵敏度高，产量大，优越性十分明显。（1）临床诊断（2）作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。2、特点小结两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法
－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较细胞膜的流动性和植物细胞全能性细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理（离心、振荡、电刺激）
化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）
灭活的病毒获得杂种植株形成杂种细胞，制备单克隆抗体植物组织培养、
植物体细胞杂交等动物细胞培养、动物细胞融合、单
克隆抗体、核移植技术等纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶蔗糖、维生素、矿质元素、植物激素等葡萄糖、氨基酸、无机盐、
维生素和动物血清等 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案制备单克隆抗体B 淋巴细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代501.动物细胞工程技术的基础是：（ ）
A．动物细胞融合
B．胚胎移植
C．动物细胞培养
D．核移植Ｃ２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
A．结果是相同的
B．杂种细胞的形成过程基本相同
C．操作过程中酶的作用相同
D．诱导融合的手段相同
Ｂ３. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞
诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，
在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ）
①淋巴细胞
②小鼠骨髓瘤细胞
③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞
⑤杂交瘤细胞
A． ②④ B．①③⑤
C． ①②③④ D．②③ C4、已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请回答：
（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有 中融合细胞。
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说原理。
方法： 。
原理： 培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖细胞加入氨基嘌呤后使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。再见
----动物细胞培养 从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。一、动物细胞培养发展历史:
20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。动物细胞培养的概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.(一)动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶原代培养贴壁生长胰蛋白酶传代培养单个细胞加培养液动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）动物细胞的培养过程
幼龄动物取动物器官
和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础动物细胞培养关键词:
接触抑制
细胞贴壁
原代培养
传代培养接触抑制 (contact inhibition) 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。有关概念原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？:遗传物质改变有关概念 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。思考讨论：在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？用胃蛋白酶行吗？ 胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞
间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个
细胞。 （二）动物细胞培养的条件1.无菌无毒的环境
2.营养
3.温度和pH
4.气体环境
(二)动物细胞培养的条件
无菌、无毒的环境:
培养液和所有培养用具进行无菌处理
措施：培养液中加抗生素，定期更换培养液
营养:
糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子（维生素、激素等）和动物血清
温度和PH:
气体环境:36.5±0.5℃ 7.2-7.4O2 CO2 95％空气 5％的CO2思考：2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组织培养基有何独特之处？3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体（三）动物细胞培养技术的应用1、蛋白质生物制品的生产
如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体
2、基因工程离不开动物细胞培养
3、用于检测有毒物质
4、细胞的生理、药理、病理研究
培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植
培养病变细胞用于研究
细胞的全能性细胞株、细胞系、细胞产品植物体、细胞产品培养结果获得细胞或 细胞分泌产物快速繁殖、培育无病毒植株等用途葡萄糖、动物血清蔗糖、 植物激素培养基特有成分液体培养基固体、半固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1、概念
动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.2、类型
体细胞核移植
胚胎细胞核移植核移植技术3.克隆羊培育过程另一头绵羊的子宫胚胎移植技术 供体
体细胞卵巢卵母细胞细胞培养体细胞去核减Ⅱ中期无核卵母细胞细胞
融合重组细胞重组胚胎胚胎移植代孕动物的子宫克隆动物3、过程：遗传物质与供体相同，性状基本相同体积大易操作，营养物质丰富；含有促进细胞核全能性表达的物质。细胞
培养注入4.体细胞核移植技术的应用前景4、体细胞核移植技术的应用前景加速家畜遗传改良，促进优良畜群繁育。
保护濒危物种。
生产医用蛋白。
治疗人类疾病：转基因克隆动物细胞、组织和器官可作为异种移植的供体。
了解胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。5.体细胞核移植技术存在的问题
①成功率低
②克隆动物存在健康问题
③克隆动物食品的安全性问题存在争议。
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是
A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞2、动物细胞工程技术的基础是（ ）
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
C.胚胎移植 D.动物细胞培养AD 3、动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于
A.培养基不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株A4、下列有关动物细胞培养的叙述，不正确的是
A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织
B.将所取的组织先用胰蛋白酶进行处理使其分散成单个细胞
C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液
D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞就衰老死亡D苏丹红是一种人工色素（工业染料），它在人体内代谢生成相应的胺类。科研人员以小鼠为实验材料，用“动物细胞培养技术”对苏丹红毒性进行了检测。
（1）该方法检测有毒物质毒性的指标是 。
（2）请完善检测苏丹红毒性的实验。
主要实验步骤： ．
第一步，取大小相同的六只培养瓶依次编号为l~6，分别加入等量相同的培养液和小鼠细胞；
第二步： ；
第三步： 。
结果如下表：结论： 。变异细胞占全部培养细胞的比例向1号瓶中加入适量的水，向2—6号瓶中加入等量不同浓度的苏丹红添加剂。培养一段时间后，取样制成临时装片，观察记录变异细胞的数目。低浓度的苏丹红毒性很小，随浓度增加毒性逐渐增强。动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是 。
（2）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的
细胞中特异表达。
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠细胞的
转入 细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为 。该重组细胞发育的过程中还应用了 技术。显微注射法膀胱上皮细胞核 去核的卵母细胞细胞核移植动物细胞培养动物细胞培养技术的应用?结束动物细胞融合与单克隆抗体一、动物细胞融合
细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合 受精作用二、动物细胞融合4.诱导融合的方法：1.概念：
指两个或多个动物细胞结合成一个细胞的过程。3.融合的具体过程：2.原理：细胞膜的流动性物理法、化学法、灭活病毒杂交细胞先是细胞质融合，细胞核的融合是在第一次有丝分裂时完成的。
细胞A细胞B杂交细胞灭活的病毒物理法
化学法仙台病毒
疱疹病毒
新城鸡瘟病毒用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂
质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭
活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 细胞融合技术应用于哪些方面？①突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能②成为研究细胞遗传、细胞免疫肿瘤和生物新品种培育及制备单克隆抗体等。5.意义：二、单克隆抗体什么是抗体？
抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
B淋巴细胞（浆细胞）产生抗体。B淋巴细胞与抗体 １．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。
２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。
３．每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体。单克隆抗体： 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 如何大量生产单克隆抗体？利用淋巴细胞产生抗体的功能
利用肿瘤细胞无限增殖的特性
利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞
利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 1、单克隆抗体制备过程细胞融合、筛选足够数量的、能产生特定抗体的细胞群单克隆抗体用特定的选择性培养基，选出杂交瘤细胞用多孔细胞培养板，利用特异抗原思考：1、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有骨髓瘤细胞无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体.
细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活。3、骨髓瘤细胞是癌细胞吗?有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞，
具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞，
所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。4、整个制备过程为何要经过两次筛选?第一次：选择性培养基筛选得到杂交瘤细胞（多种）
第二次：需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。
由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体（这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。） 3、单克隆抗体的应用（1）杂交瘤细胞既能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体
（2）与常规抗体相比，单克隆抗体特异性强，灵敏度高，产量大，优越性十分明显。（1）临床诊断（2）作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。2、特点小结两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法
－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较细胞膜的流动性和植物细胞全能性细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理（离心、振荡、电刺激）
化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）
灭活的病毒获得杂种植株形成杂种细胞，制备单克隆抗体植物组织培养、
植物体细胞杂交等动物细胞培养、动物细胞融合、单
克隆抗体、核移植技术等纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶蔗糖、维生素、矿质元素、植物激素等葡萄糖、氨基酸、无机盐、
维生素和动物血清等 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案制备单克隆抗体B 淋巴细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代501.动物细胞工程技术的基础是：（ ）
A．动物细胞融合
B．胚胎移植
C．动物细胞培养
D．核移植Ｃ２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
A．结果是相同的
B．杂种细胞的形成过程基本相同
C．操作过程中酶的作用相同
D．诱导融合的手段相同
Ｂ３. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞
诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，
在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ）
①淋巴细胞
②小鼠骨髓瘤细胞
③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞
⑤杂交瘤细胞
A． ②④ B．①③⑤
C． ①②③④ D．②③ C4、已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请回答：
（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有 中融合细胞。
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说原理。
方法： 。
原理： 培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖细胞加入氨基嘌呤后使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。再见