参考答案：
1-5，CDBDC 6-10，BCACA 11-15，CCDCB 16-20，DDCDB 21-25DBDCA
26．(1)PVC（塑料膜） (2)稀释涂布平板法 偏大 计数时将死菌和活菌都进行了计数 (3) 平板划线法 接种环
27．(1)植物组织培养 植物细胞的全能性 (2)杂种细胞再生出细胞壁
(3)⑥ 基因的选择性表达 (4) A＋B （A＋B）/2 秋水仙素/低温
28．(1)基因表达载体的构建 (2) PCR（扩增技术） 2n（232-1）
(3)促性腺激素 农杆菌转化法
(4)将转基因莴苣与非转基因莴苣（野生型莴苣）分别置于干旱环境中培养，一段时间后观察比较两组莴苣的生长状况
29．(1)B (2)RNA聚合酶识别和结合位点，驱动转录的进行
(3) Ca2+ (4) X-gal 白色 (5)抗原-抗体杂交绝密★启用前
北华中学2022-2023学年高二下学期期中考试
生物试题
考试时间：75分钟
本试卷分为第Ⅰ卷(选择题)和第Ⅱ卷(非选择题），页数在试卷下端；考试结束后，将答题纸（答题卡）上交，本卷留存。
注意事项：
1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将考号、科目等填涂正确。
2．答题时请按要求用笔。
3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。
4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。
5．保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。
第I卷（选择题）
第I卷共25小题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项汇总，只有一项符合题目要求。
选择题(共25题，每题2分，共50分）
1．几百年来，山东淄博王村“酿酒拌醋”的生产制作工艺日臻成熟和完善，故有“山东醋都”的美誉。如图是王村苹果醋生产加工流程图解，下列相关叙述错误的是（ ）
A．过程①需要对苹果进行选择、清洗
B．过程②的温度要求低于过程③
C．过程③需要在无氧条件下进行
D．过程④需要进行调配、杀菌等操作
2．下列关于纤维素分解菌分离和鉴定的叙述，正确的是（ ）
A．要从土壤中将纤维素分解菌分离出来，应该将它们接种在含指示剂的鉴别培养基上
B．分离分解纤维素的微生物时把纤维素作为唯一氮源
C．对纤维素分解菌进行选择培养时，要选用液体培养基，原因是纤维素分解菌在固体培养基上不能生长
D．刚果红染色法筛选纤维素分解菌使用的培养基属于鉴别培养基
3．某高校学生利用所学的知识调查流经学校的河水中大肠杆菌的状况，测定了该河流水样中的大肠杆菌含量，并进行了大肠杆菌的分离等工作，图1和图2分别是同学甲和乙得到的结果。下列相关叙述错误的是（ ）
A．图1中Ⅲ区是观察细菌菌落形态的最佳区域
B．整个划线操作的过程都必须在酒精灯火焰旁进行，同学甲所用接种工具总共灼烧灭菌了5次
C．图1中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落
D．同学乙采用的是稀释涂布平板法，接种时可能涂布不均匀
4．下列有关传统发酵技术及发酵工程的叙述，错误的是（ ）
A．腐乳的鲜味来自毛霉等微生物分泌的蛋白酶对豆腐中蛋白质的分解
B．利用酵母菌等菌种的发酵工程生产的单细胞蛋白，可作为食品添加剂
C．将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵可生产乙型肝炎疫苗
D．发酵是在无氧的条件下，利用微生物代谢将原料转化为人类所需产物的过程
5．下列关于发酵工程及其应用，叙述正确的是（ ）
A．发酵工程的中心环节是分离和提纯产物
B．发酵工程所用的菌种都是从自然界中筛选的性状优良的单一菌种
C．可通过过滤发酵液、离心去除固体杂质，采用蒸馏法等进一步纯化目标产品
D．啤酒、味精、赤霉素等的生产属于厌氧发酵产品
6．从人参中提取分离出的人参皂苷是一种有效的抗癌药物。自然状态下人参生长慢，人参皂苷含量低，通过植物细胞悬浮培养技术可获得大量人参细胞。植物细胞悬浮培养是指将游离的单细胞或细胞团悬浮在液体培养基中，用摇床或转床进行大规模培养的方法。经过不断继代培养筛选出疏松性均匀一致、分散性良好、大小大致相同的细胞和细胞团，建立悬浮培养细胞系。据图分析，下列叙述正确的是（ ）
A．离体的人参组织细胞除去细胞壁后直接进行悬浮培养
B．悬浮培养液中大多数细胞无固定形态，细胞壁较薄
C．悬浮培养液中一般细胞分裂素与生长素含量比值大于1
D．植物细胞悬浮培养中细胞生长不受抑制，因此只要培养容器容积足够大，就可以不断扩大培养
7．通过植物细胞工程技术，可利用甲（高产不耐盐）、乙（低产耐盐）两种二倍体植物培育高产耐盐的杂种植株。实验流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．目的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异导致植株不可育
B．由④到目的植株需进一步筛选的原因是④中含有高产不耐盐品种
C．①过程应用了酶的专一性
D．为提高纤维素酶和果胶酶的处理效果①过程可将植物细胞置于适当浓度的高渗溶液中
8．下列与动物细胞工程和胚胎工程有关的叙述中，错误的是（ ）
A．动物细胞培养过程中一定会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象
B．利用体细胞核移植技术可以生成带有供体核遗传物质的胚胎干细胞
C．选择培养后的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选可获得能分泌所需抗体的细胞团
D．胚胎移植后经受体孕育的后代，其遗传特性与供体保持一致，有的性状可能有差异
9．目前，人造皮肤已经被使用到临床皮肤移植手术上，人造皮肤的制作过程离不开细胞培养技术。下列有关说法错误的是（ ）
A．可通过培养患者的皮肤细胞得到人造皮肤，以降低皮肤移植后的排斥反应
B．可以用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理细胞组织，以便得到单个细胞
C．培养箱中应该设置适宜的温度和纯氧环境，以保证细胞的有氧呼吸
D．当贴壁培养细胞出现接触抑制时，需要分瓶进行传代培养
10．下列关于单克隆抗体制备的叙述，错误的是（ ）
A．用纤维素酶和果胶酶处理 B 淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞
B．用 PEG 作诱导剂，促使能产生抗体的 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
C．制备过程中，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞
D．与传统方法生产的抗体相比，单克隆抗体的化学本质相同，但特异性强
11．“国宝”熊猫一直深受大家的喜爱。熊猫在自然条件下受精困难，产子率较低，可以通过胚胎工程提高熊猫的产子率。下列说法错误的是（ ）
A．自然条件下，熊猫的受精作用是在雌性熊猫的输卵管内完成的
B．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂，排出第二极体后形成雌原核
C．体外受精时，从卵巢内获得的卵母细胞能直接与获能精子完成受精
D．胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割
12．卵细胞作为生殖细胞，在生物技术中常用于（ ）
①克隆动物，细胞核的受体细胞②体外受精，培育试管动物③动物细胞融合，生产单克隆抗体④植物组织培养，单倍体育种⑤形成受精卵，转基因动物的受体细胞
A．①②③ B．③④⑤ C．①②⑤ D．①③④
13．2018年3月，最后一头雄性北方白犀牛去世，至此世界上仅剩两头雌性个体。如今，科研团队拟采用提前保存的北方白犀牛冷冻精子借助核移植、体外受精等技术，以南方白犀牛作为代孕母畜人工繁育北方白犀牛。下列叙述合理的是（ ）
A．须注射免疫抑制剂以减弱代孕母畜对植入胚胎的免疫排斥反应
B．冷冻保存的精子需培养成熟后，再经获能处理才可用于体外受精
C．若取雌性白犀牛的体细胞进行核移植，获得的克隆后代可繁衍为一个种群
D．理论上可取4细胞期胚胎用酶处理成单个细胞分别培养，以提高胚胎的利用率
14．基因工程又称作重组DNA技术，是指按照人们的愿望，通过转基因技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。下列关于基因工程的描述正确的是（ ）
A．基因工程的基本工具是限制酶和DNA连接酶
B．限制酶只能特异性地识别6个核苷酸的DNA序列
C．基因工程人为实现了种间遗传物质的交换
D．通过基因工程改造的生物为新物种
15．下列关于基因工程的叙述中，不正确的是（ ）
A．一种限制酶一般只能识别一种特定的核苷酸序列
B．基因工程依据的原理主要是基因突变
C．基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工
D．基因工程能够定向地改变生物的性状
16．如图所示是5种限制酶所识别的DNA序列和酶切位点(↓表示酶切位点，切出的断面为黏性末端或平末端)。
限制酶1：—↓GATC—
限制酶2：—CATG↓—
限制酶3：—G↓GATCC—
限制酶4：—CCC↓GGG—
限制酶5：—AG↓CT—
下列有关说法错误的是（ ）
A．不同的限制酶可以切出相同的黏性末端
B．限制酶1可以识别并切割限制酶3所识别的DNA序列
C．限制酶3和4识别的序列都是由6个脱氧核苷酸组成的
D．DNA连接酶可连接由限制酶1和3切出的DNA片段，也可连接由限制酶1和2切出的DNA片段
17．从目标生物提取分离DNA是基因工程操作的基础。下列关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，错误的是（ ）
A．研磨前对植物材料进行冷冻处理，可提高DNA获得率
B．常温条件下香蕉匀浆中有些酶会影响DNA的提取
C．DNA钠盐不溶于酒精，但能溶于2mol/L的NaCl溶液中
D．用蓝色的二苯胺可对DNA进行鉴定
18．RT－PCR技术是反转录－聚合酶链式反应的简称，是指将RNA的反转录和cDNA的PCR相结合的技术。下图为RT－PCR技术过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（ ）
A．催化①②过程的酶都是DNA聚合酶
B．催化③⑤过程的酶都具有耐高温特性
C．核酸酶H和③过程的作用结果相同
D．④过程需要冷却至72 ℃左右
19．某线性DNA分子含有3000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表所示。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是（ ）
a酶切割产物（bp） b酶切割产物（bp）
1600；1100；300 800；300
A．在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个
B．a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接
C．a酶与b酶切断的化学键不相同
D．用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，序列会明显增多。
20．多重PCR-电泳技术，是指同一个PCR反应体系中包含多对引物，各引物特异性地结合到相应的目的基因上，扩增产生不同长度的片段，再通过电泳进行分离和识别，从而对病原体进行鉴别检测。下列相关叙述错误的是（ ）
A．多重PCR过程中，不同的引物之间不能互补
B．PCR和电泳都必须无菌条件下操作，防止外源DNA污染
C．该技术可同时进行多种病原微生物的检测
D．不同大小的DNA分子在电泳时，迁移的速率不同
21．如下图所示，a表示现代生物工程技术，b表示其结果，下面说法正确的是（ ）
A．如果a是核移植技术，b的产生说明了动物细胞具有全能性
B．如果a是体外受精技术，则形成的b属于克隆动物
C．如果a是胚胎分割技术，b中个体的基因型和表型一定相同
D．如果a是基因工程，b是乳腺生物反应器，则需对移植的胚胎进行性别选择
22．科研人员以β-甘露葡萄糖酶为核心研究材料，在其N端找到了两个关键的氨基酸位点，将这两个位点的组氨酸和脯氨酸分别替换为脯氨酸后，其热稳定性得到了显著提高。下列说法正确的是（ ）
A．细胞内合成改造后的高热稳定性蛋白质的过程不遵循中心法则
B．替换蛋白质中的氨基酸实际可通过改造基因中的碱基序列实现
C．在分子水平上，可利用PCR等技术检测细胞内是否合成新的目的蛋白质
D．制备过程中应先获得目标蛋白质的三维结构，再预期其生物学功能
23．转基因产品是指利用基因工程技术获得的生物制品，其安全性问题一直是大众关注和争论的热点。下列叙述错误的是（ ）
A．通过转基因育种可增加或消除原有生物品种的某些性状
B．转基因食品风险评估时还需考虑标记基因的安全性问题
C．严格选择种植区域可减少转基因作物发生外源基因扩散的可能性
D．转基因作物的长期、大规模种植不利于侵染力更强的害虫的出现
24．“三亲婴儿”技术是指取出患病母亲卵子的核，导入女性捐赠者的去核卵母细胞中，再将重构细胞和父亲的精子结合。下列有关“三亲婴儿”的叙述，不正确的是（ ）
A．该技术可以有效降低生下线粒体遗传疾病婴儿的概率
B．女性捐赠者提供的遗传物质不遵循孟德尔遗传规律
C．与正常的“双亲婴儿”相比，“三亲婴儿”核 DNA 增加
D．该技术对 DNA 的修改能够遗传，涉及伦理争议
25．生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点，下列叙述错误的是（ ）
A．种植抗虫棉可减少农药的使用量，不存在安全性问题
B．外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，有可能会出现意想不到的后果
C．克隆技术还不成熟，与社会伦理有严重冲突，应研究治疗性克隆而禁止生殖性克隆人
D．若有人以病毒作为生物武器，带来的危害将难以预估
第Ⅱ卷（非选择题）
二、综合题(共4大题，共50分)
26．农用地膜、一次性餐盒、塑料瓶等塑料制品使用后被弃置成为固体废物，由于随意乱丢乱扔，难于降解处理，给生态环境和景观造成“白色污染”。某生物兴趣小组通过查阅资料得知黄粉虫可以依靠其肠道内的一类细菌降解所吞食的塑料。该小组成员欲从黄粉虫肠道内分离、纯化该类细菌，设计了如下实验步骤。
请回答：
(1)选择培养基中需加入_____为唯一碳源。
(2)图中所用接种方法为____；与该方法相比，显微镜直接计数法的结果_____（“偏大”或“偏小”），原因是_____。
(3)除以上方法外，还可以用_____接种微生物，所用的接种工具为_____。
27．如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程，请回答下列问题。
(1)由⑤⑥⑦培育成植株的过程运用的技术手段是______，其依据的原理是___________。
(2)④过程成功的标志是___________。
(3)哪个过程属于再分化？细胞发生分化的根本原因是什么？______________________。
(4)若番茄细胞内含A个染色体，马铃薯细胞内含B个染色体，则“番茄－马铃薯”细胞内含______个染色体；若采用杂交育种方法成功的话，得到的后代含______个染色体，必须用________来处理幼苗，才能得到可育的“番茄－马铃薯”。
28．下图是获得转基因动物和植物的流程图，请据图回答：
(1)培育转基因动物和植物的核心工作是__________。
(2)图示获得大量目的基因的方法是__________，若模板双链DNA的数量为n个，经过32次循环需要消耗的引物数量是__________。
(3)图中过程③使用的激素是__________。过程⑥常用的方法是__________。
(4)研究人员按照上图所示将白羊草的抗旱基因转入莴苣细胞中，培育出转基因莴苣，欲进一步确定白羊草的抗旱基因与转基因莴苣的抗旱性是否有关，请写出简要的实验设计思路。__________。
29．下图为“乙肝基因工程疫苗”生产过程图解，质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中lacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。请回答下列问题：
回答下列问题。
(1)过程①选用限制酶的最佳方案是________。
A．只有BamHI B．BamHI和EcoRI
C．EcoRV和BamHI D．EcoRV和EcoRI
(2)构建基因表达载体时，一般将目的基因插在启动子和终止子之间。启动子的作用是_____________。
(3)过程②需要先将大肠杆菌用___________处理。
(4)为了筛选含目的基因表达载体的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的通用培养基中额外加入__________，培养一段时间后挑选出____________（填“蓝色”或“白色”）的菌落进一步培养，从而获得大量目的菌。
(5)目的基因导入受体细胞后，常用___________技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳。
