课件42张PPT。专题3 植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养课题2 月季的花药培养课题1 菊花的组织培养课题1 学习目标、重难点学习目标:
1、掌握植物组织培养的原理
2、学会菊花或其他植物的组织培养
重 难 点:
植物组织培养过程中使用的
无菌技术
菊花的组织培养
脱分化:
由 的植物组织或细胞
产生 的过程。
2. 愈伤组织:
细胞排列 而无规则,是一种
的呈 的 。
3. 再分化:
脱分化产生的 继续培养,
重新分化出 或 等器官的过程。
4. 植物组织培养的理论基础:
植物细胞的 。高度分化 愈伤组织 疏松高度液泡化无定形状态 薄壁细胞愈伤组织 根 芽 全能性植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素植物细胞培养不需要光需要光 在无菌和人工控制条件下,
将离体的植物器官、组织、细胞,
培养在人工配制的培养基上,
给予适宜的培养条件,
诱导其产生愈伤组织、丛芽,
最终形成完整的植株。基础知识(一)植物组织培养的基本过程由高度分化的植物组织或
细胞产生愈伤组织的过程脱分化去分化细胞排列疏松而无规则,
是一种高度液泡化的呈
无定形状态的薄壁细胞。愈伤组织我就是
愈伤组织哦!再分化 愈伤组织
(脱分化)(二、)影响植物组织培养的因素材料的种类、年龄及保存时间长短等
营养
植物激素
PH、温度、光照等条件(1)植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难1、不同的组织,培养的难易程度差别很大菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝2、材料的年龄、保存时间的长短(2)MS培养基主要成分包括:A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、
I、Co等C、有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、
蔗糖等
D、植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和赤霉素
生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素
在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈加强的趋势
激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向(3)植物激素的影响生长素类:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)细胞分裂素类:激动素(KT)、6-苄基嘌呤( 6-BA)、玉米素(ZT)赤霉素类:赤霉酸(GA3)(4)pH、温度、光照pH控制在5.8左右
温度控制在18-22℃
每日用日光灯照射12h一、制备MS固体培养基
1、配制母液
2、配制培养基
二、外植体消毒
四、培养
五、移栽
六、栽培实验操作3、灭菌三、接种(一)制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分,实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备1、配制各种母液①无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍,常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液③用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量2、配制培养基分装到锥形瓶中,每瓶分装50ml或100ml① 配制培养液② 调PH③培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌1、选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝(二)外植体消毒2、消毒①流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min左右② 酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动2-3次,持续6-7s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗 ③消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1-2min,取出后在无菌水中至少清洗3次,漂净消毒液(三)接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种室消毒是至关重要的。用70%的酒精喷雾使空气消毒, 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种4、接种注意事项①每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为75%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定,一般胡萝卜3-4块,菊的茎或叶6-8块,也不要太少,以充分利用培养基中的营养成分和光照条件③插入时应注意方向,不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分(四)培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养,培养期间应定期消毒
培养温度控制在18-22℃
每日用日光灯光照12h(五)移栽 移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日1、打开封口膜2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间3、移栽幼苗长壮后,移栽到土壤中固体基质型,含水量高、
蓄水性强、透性好,适合栽培珍珠岩 ,珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩,经急剧冷却而成的玻璃质岩石,有弧形或圆形裂隙,如珍珠的结构,所以被命名为珍珠岩 。蛭石是一种天然、无毒的矿物质,在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物,属于硅酸盐。 (六)栽培 幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花请你演示接种过程动动手切菊花茎段 左手持瓶 右手解绳攥膜 左手持瓶旋转通过火焰 右手夹菊花茎段插入培养基中封膜 工作台消毒 点燃酒精灯 排列锥形瓶 课题延伸探究植物激素的使用比例
(A=生长素/细胞分裂素)
对植物组织培养的影响
例如:设计对照实验
(1)不加植物激素
(2)A=1
(3)A>1
(4)A<1课题1小结1、植物组织培养的基本过程2、影响植物组织培养的因素3、实验操作的步骤4、实验结果分析与评价5、课题延伸学生自我小结达标检测1.下列四个选项中,
肯定没有采用植物组织培养技术的一项是( )
A.花药离体培养得到单倍体植株
B.秋水仙素处理萌发的种子
或幼苗得到多倍体植株
C.基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株
D.细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株基础巩固B2.在植物组织培养中,
切取胡萝卜的外植体时一般选择( )
A.具有木质部的部分
B.具有韧皮部的部分
C.具有形成层的部分
D.具有髓的部分C3.菊花的花粉经组织培养可发育成一株幼苗,
这一过程不涉及下列哪一项( )
A.有丝分裂、细胞分化、组织器官的形成
B.呼吸作用、光合作用、相关激素的调控
C.DNA的复制、转录、蛋白质的生物合成
D.等位基因的分离、非等位基因的自由组合D4.某花卉感染了植物病毒,叶子呈现疱状,欲培
养出无病毒的后代,应采取的方法是( )
A.用种子培养后代
B.用无明显症状部分的枝扦插
C.用茎尖进行组织培养诱导出植株
D.用叶表皮细胞进行组织培养,诱导出植株C5.下列关于影响植物组织培养的因素的叙述
不正确的是( )
A.幼嫩组织较成熟组织易培养成功
B.给外植体消毒用70%的酒精
C.接种花药后一段时间内不需要光照,
但幼小植株形成后需要光照
D.生长素与细胞分裂素含量之比较高时
有利于芽的分化D6.乙醇等“绿色能源”的开发备受关注,利用玉米秸秆等生产燃料酒精已成大势所趋。植物组织培养可实现玉米等的大规模快速繁殖,图解如上,由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植株,
这项技术利用了 原理,
通过组织培养技术进行植物繁育,
可以很好地保持亲本的优良性状,
原因是
A、B分别代表 和 ,
过程①、②分别表示 和 。拓展提高植物细胞全能性 子代遗传物质与亲代相同,
不会像有性生殖一样出现性状分离 愈伤组织 胚状体 脱分化 再分化 感谢大家的参与!