人教版选修1专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数（共18张PPT）

课件18张PPT。课题2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1、实例：启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的
要求，到相应的环境中去寻找。原因：因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大多
数微生物只有Taq细菌被筛选出来。DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。筛选菌株2、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。什么是选择性培养基？1、尿素的利用 尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成 。脲酶一、从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
制备以 为唯一氮源的 培养基。尿素选择3、制备培养基：碳源： 氮源：葡萄糖、尿素 尿素培养基的唯一氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。4、鉴定方法 在以尿素为唯一氮源的培养基中加
入 指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将 ，说明该细菌能够分解尿素。P26酚红变红测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到 伊红美蓝 培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。大肠杆菌呈 黑色中心 ,有或无金属光泽大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB)上典型特征 1、显微镜直接计数：方法：
缺点：
例子：二.统计菌落数目：不能区分死菌与活菌；
不适于对运动细菌的计数；
需要相对高的细菌浓度；
个体小的细菌在显微镜下难以观察；血球计数板酵母菌种群数量变化2.间接计数法（活菌计数法）
⑴原理：一个菌落来源于一个活菌。
⑵常用方法：稀释涂布平板法。（3）计算公式：
每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。6、怎样证明此培养基具有选择性呢？以尿素为
唯一氮源
的培养基牛肉膏
蛋白胨
培养基?是分离
尿素
细菌判断该
培养基
有无选
择性只生长尿素细菌生长多种微生物是注意事项
①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。
②设计重复组 目的增加实验说服力与准确性。方法可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。
③设置对照组 主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
④统计的菌落往往比活菌的实际数目低。
⑤培养不同微生物往往需要不同培养温度。
细菌：30～37℃培养1～2d
放线菌：25～28℃培养5～7d
霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。1.使用选择培养基的目的是（ 　）
A.培养细菌　　
B.培养真菌　　
C.使需要的微生物大量繁殖
D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别
2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( )
A.CO2和N2 B.葡萄糖和NH3　　
C.CO2和尿素 D.葡萄糖和尿素实践训练CD3.下列说法不正确的是（ 　）
A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶
B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值
C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度
D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。
B
4.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（　　）
A.较多的氮源物质 B.较多的碳源物质
C.青霉素类药物 D.高浓度食盐C 课题3
分解纤维素的微生物的分离
一、基础知识：
1、纤维素
2、纤维素酶
①组成：是一种复合酶，至少包括 。
②分布环境：
③作用:C1 酶 、CX酶和葡萄糖苷酶棉花、木材、作物秸秆和麦麸等 富含纤维素。 富含纤维素的环境中。如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。3、刚果红
是一种染料，能与纤维素形成 。二、纤维素分解菌的分离
1、方法：红色复合物刚果红染色法即：根据是否出现透明圈来筛选纤维素分解菌。