人教版选修1专题2课题1微生物的实验室培养（共22张PPT）

课件22张PPT。课题1 微生物的实验室培养专题2 :微生物的培养与应用培养基的营养物质和无菌技术的应用 培养基的营养物质和无菌技术的应用难点：学习目标：重点： 了解有关培养基和无菌技术的基础知识1.何为培养基？3.不同的培养基有不同的配方，但是其基本成分都相同，都包括哪些营养元素？有何作用？请举例说明。阅读教材P14～15相关内容，回答以下问题： 2.按照不同的培养基划分标准，培养基有哪些种类、配制特点及其应用？（一）培养基一、基础知识：（一）培养基 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。（1）按物理状态来分：
（2）按功能来分:
（3）按成分来分:1.培养基的类型和用途 固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。可分为选择培养基和鉴别培养基.可分为天然培养基和合成培养基。 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材P83附录内容) 3. 培养基成分：
一般都含有 、 、和 、 等营养物质，另外还需要满足微生物生长对 、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及 、 、渗透压等的要求。 水碳源氮源无机盐PH氧气CO2C1．关于微生物营养物质的叙述中，正确的是
A、是碳源的物质不可能同时是氮源
B、凡碳源都提供能量
C、除水以外的无机物只提供无机盐
D、无机氮源也能提供能量D课堂练习2．右表是某微生物培养基成分，请据此回答：
（1）右表培养基可培养的微生物类型是 。
（2）若不慎将过量NaCl加入培养基中。如不想浪费此培养基，可再加入 。
（3）若除去成分②，加（CH2O），该培养基可用于培养 。自养型微生物 含碳有机物 固氮微生物 （4）表中营养成分共
有 类。
（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行是 。
（6）右表中各成分重量确定的原则是 。
（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是________________。3 调整pH 依微生物的生长需要确定 琼脂（或凝固剂） 1.何为无菌技术？无菌技术包括哪些方面？2.什么是消毒？灭菌？两者有何区别？3.常用的消毒与灭菌的方法有哪些？有何要求？4.请说出干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法的操作步骤。（二）无菌技术涂布器接种环接种针① 煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min(1)消毒的方法2.常用的消毒与灭菌的方法（二）无菌技术1. 概念 又称无菌操作，泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。② 巴氏消毒法：70～75 ℃下煮30min或 80℃ 下煮15min ③ 化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;用氯气消毒水源等④ 紫外线消毒接种室、接种箱或超净工作台 ①灼烧灭菌(2)灭菌的方法②干热灭菌：160～170 ℃下加热1～2h。③高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15～30min.接种工具，接种环、接种针或其他金属用具 玻璃器皿（吸管、培养皿） 三. 实验操作---大肠杆菌的纯化培养（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算－称量－溶化－灭菌－倒平板
（二）纯化大肠杆菌
最常用的接种方法有：
平板划线法和稀释涂布平板法（冷却至50℃）倒平板讨论1，2讨论3，4平板划线法讨论2，3菌种的保存1、临时保藏法：
对象：
温度：
缺点：
2、甘油管藏法：
对象：
温度：频繁使用的菌种 4℃（冰箱） 容易被污染或
产生变异 长期保存的菌种 -20℃（冷冻箱） 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？操作的第一步灼烧接种环：

每次划线前灼烧接种环：
划线结束后灼烧接种环：
避免接种环上可能存在的微生物污染培养物； 杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？
以免接种环温度太高，杀死菌种。划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，
将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 不要
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生