人教版选修1专题3课题1菊花的组织培养（共29张PPT）

课件29张PPT。菊花的组织培养JLSSY
BYH扦插嫁接压条 活动：什么是细胞分化？细胞分化的原因和结果？
愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？
组织培养的过程？以及组织培养的理论基础？
脱分化、再分化？
影响组织培养的因素？
菊花组织培养的过程，及注意的问题？
(一).植物组织培养的基本过程关键词：
外植体、脱分化、再分化、愈伤组织 1. 概念：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。一.基础知识脱分化：让已经分化的细胞，经过诱导后，
失去其特有的结构和功能而转变成未分
化细胞的过程。再分化：脱分化的细胞，在一定的条件下，
又重新分化成各种特异性的组织细胞
的过程。外植体：离体的植物器官、组织或细胞。　愈伤组织：细胞排列疏松、无规则、高度
液泡化的无定形的薄壁细胞。复习名词:切取
形成层无菌接种诱导愈伤组织
的形成试管苗的形成培养室移栽脱分化再分化2.举例（1）、培育无病毒植株（2）、 大规模培养愈伤组织（提取紫草素，治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）（4）、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法
（受体细胞为植物细胞） 3. 应用： （3）、人工种子（解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题）4.过程:离体组织或细胞植物体细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素植物细胞培养不需要光需要光5. 理论基础——细胞全能性概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。
基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。
表达条件：离体条件
无菌操作
适宜物质的诱导和调节（植物激素）
适宜的营养物质
温度、酸碱度、光照等条件的控制（二）.影响植物组织培养的因素材料的种类、年龄及保存时间长短等
营养
植物激素
PH、温度、光照等条件1. 植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难材料的年龄、保存时间的长短菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝2. MS培养基主要成分包括：A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、
I、Co等C、有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、
蔗糖等
D、植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等3. pH、温度、光照pH控制在5.8左右
温度控制在18－22℃
每日用日光灯照射12h讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 （一）制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备1、配制各种母液①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量二 .实验操作2、配制培养基分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml① 配制培养液② 调PH③培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝（二）外植体消毒2、消毒①流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右② 酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗 ③消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液（三）接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种4、接种注意事项①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分（四）培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒
培养温度控制在18-22℃
每日用日光灯光照12h（五）移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日1、打开封口膜2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间3、移栽幼苗长壮后，移栽到土壤中固体基质型，含水量高、
蓄水性强、透性好，适合栽培珍珠岩 ,珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷却而成的玻璃质岩石，有弧形或圆形裂隙，如珍珠的结构，所以被命名为珍珠岩 。蛭石是一种天然、无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。 （六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花制备MS固体培养基外植体消毒 接种 培 养栽 培 移 栽冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上配制各种母液
配制培养基
灭菌1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）
2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）
3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧）
4、无菌箱中的培养；
5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析
（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化
（三）是否进行了统计、对照与记录
（四）生根苗的移栽是否合格课题延伸（略）练习
1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。
2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。菊花的组织培养再分化材料性质、营养物质、
调节物质、环境条件外植体的消毒接种基本原理:细胞的全能性基本过程:脱分化愈伤组织影响因素：操作流程：配制MS固体培养基培养移栽栽培小结：