课件13张PPT。2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞工程三、动物细胞融合1.概念: 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。2、动物细胞融合基本原理:与植物原生质体融合的基本原理相同,即细胞膜的流动性3、诱导方式物理法:化学法:生物法:灭活的病毒电激、振动、离心聚乙二醇(PEG)例如:仙台病毒灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合,形成杂种细胞
(细胞膜具有一定的流动性)生物法:灭活的病毒(丧失感染性、保留抗原结构)4、过程:动物细胞A
动物细胞B诱导,融合2个完整的杂交细胞AB有丝分裂(膜融合、质融合)(核融合)注意:动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起,让它们随机融合后,再从中筛选杂交细胞5、意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交(种间、属间、科间、动植物之间)成为可能。6、应用:成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体7、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较获得杂种植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性
细胞的全能性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理(离心、振荡、电刺激)
化学(聚乙二醇)物理、化学方法(同左)
灭活的病毒四、单克隆抗体传统的抗体的生产方法及缺陷是什么? 1.B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生特异性抗体。
2.动物在免疫反应过程中,体内产生特异性抗体种类可达百万种以上,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。
3.但每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
4、在体外,一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的。 产量低、纯度低;而且制备抗体特异性差。分析: B淋巴细胞与抗体的关系1、单克隆抗体(概念) 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 那么,如何大量获得化学性质单一、特异性强的抗体?(即单克隆抗体) 2、过程B淋巴细胞
骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养杂交瘤细胞( B-瘤细胞)克隆化培养抗体检测杂交瘤细胞体外培养单克隆抗体动物细胞融合技术B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤只有杂种细胞才能活动物细胞培养3.单克隆抗体制备过程获得产生相应抗体的B淋巴细胞4、单克隆抗体的特点和应用与常规抗体相比,单克隆抗体特异性强,灵敏度高,产量高,优越性十分明显。应用:特点:1可用于作为诊断试剂:有准确,高效,快速的优点
2可用于疾病治疗
3可用于运载药物(作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹“。)
“生物导弹”=单克隆抗体+药物两个过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法一个新细胞一个优势课堂小结你记住了吗?--灭活的病毒--杂交瘤细胞--单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势