课件10张PPT。2.1 细胞工程概述细胞工程的发展1907年,美国哈里森,培养蛙胚神经细胞
并存活数周,开创了动物细胞培养的先河1937年,法国特里特等培养了胡萝卜
组织,并使细胞增殖。1972年,美国卡尔逊等成功
培育第一个体细胞杂交植株1997年,英国伊恩.维尔穆特
克隆出绵羊“多利”细胞工程的基本技术 细胞工程是指以细胞为基本单位,在体外无菌条件下进行培养,繁殖或利用细胞融合、核移植等技术,使用细胞某些生物学特性按照人们的意志发生改变,从而改良生物品种、创造新品种核加速繁育生物个体以及获得某些有用的细胞代谢产物的技术。细胞工程按对象分类按技术分类植物细胞与组织培养细胞融合细胞核移植染色体工程在无菌条件下对植物离体组织或细胞培养,形成新的组织、器官或个体将有一个细胞的细胞核转移到另一个去除细胞核的细胞中区,从而是受体细胞获得新的遗传信息,产生新的生命现象 按设计有计划削减、添加和代换同种或异种染色体的方法和技术。也称为染色体操作。 细胞工程的应用郁金香人参马铃薯疮痂病) 脱毒苗脱毒马铃薯脱毒技术藻类植物氢能汽车高产奶牛濒危动物1、细胞工程的发展
2、细胞工程的基本技术
植物细胞与组织培养
细胞融合
细胞核移植
染色体工程
3、细胞工程的应用
快速培养花卉及濒危植物
获得无病毒作物
开发洁净能源减少环境污染
繁殖优良家畜品种及濒危动物1、下列技术中,一般来说不属于细胞工程范围的是( )
A、组织培养 B、细胞核移植
C、基因芯片的应用 D、细胞融合2、下列与细胞工程无关的技术是( )
A、克隆羊“多利”的产生
B、2种烟草体细胞杂交获得新植株
C、葡萄的嫁接
D、利用植物组织培养技术培育郁金香3、下列细胞工程技术中,不涉及遗传物质改变的是( )
A、植物组织培养 B、动物细胞融合
C、细胞核移植 D、染色体替换CCA课件23张PPT。2.1细胞工程概述主要内容1.说出细胞工程的发展过程;
2.细胞工程的概念;
3.细胞工程的种类及其所用技术有哪些?
4.细胞工程有何应用及前途如何?
5.细胞工程与其他生物工程的关系如何?细胞工程的发展1907年,美国哈里森,培养蛙胚神经细胞
并存活数周,开创了动物细胞培养的先河1937年,法国特里特等培养了胡萝卜
组织,并使细胞增殖。1972年,美国卡尔逊等成功
培育第一个体细胞杂交植株1997年,英国伊恩.维尔穆特
克隆出绵羊“多利”细胞工程的概念 细胞工程是指以细胞为基本单位,在体外无菌条件下进行培养,繁殖或利用细胞融合、核移植等技术,使用细胞某些生物学特性按照人们的意志发生改变,从而改良生物品种、创造新品种和加速繁育生物个体以及获得某些有用的细胞代谢产物的技术。细胞工程的技术及分类概
念
要
点操作水平:
操作环境:
结 果:
应 用:细胞水平体外无菌按人的意愿使用细胞某些生物学
特性发生改变植物细胞与组织培养在无菌条件下分离植物细胞或组织,将其放在适当的培养基上,给予必要的生长条件,是他们在体外继续生长、增殖与分化,形成新的组织、器官和个体的技术。植物细胞与组织培养技术
(1)依据原理:植物细胞的全能性。
(2)培养对象:离体的植物细胞或组织。
(3)培养条件:体外无菌条件和必要的生长条件。
(4)培养目的:使离体植物细胞或组织生长、增殖与分化,形成新的组织、器官和个体的技术。
(5)培养过程:离体的植物细胞或组织 生长、增殖、分化 新的组织、器官和个体培养基细胞融合技术注意:植物细胞要用纤维素酶等先去除细胞壁细胞核病毒颗粒细胞核灭活的病毒颗粒黏附在细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿过细胞膜连接细胞融合,形成杂种细胞细胞融合技术过程病毒颗粒经过处理后丧失感染细胞的能力,但表面抗原没有被破坏,可以黏附附与细胞表面,使细胞紧密凝集,直至融合。细胞融合技术植物体细胞杂交过程植物细胞 A(番茄)植物细胞 B(马铃薯)去除细胞壁原生质体 A原生质体 B原生质体融合正在融合的原生质体再生出细胞壁杂种细胞细胞分裂愈伤组织杂种植株(番茄马铃薯)细胞融合技术
(1)融合原理:细胞膜的流动性。
(2)融合对象:2个或多个不同细胞。
(3)促融合方法:生物法(如病毒诱导融合法)、化学法(如聚乙二醇诱导融合法)、物理法(如电场诱导融合法)。
(4)融合结果:形成杂种细胞。
(5)融合过程:2个或多个不同细胞的质膜发生粘连、破裂→细胞质发生融合→发生核融合→形成杂种细胞。
(6)融合意义:突破有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。细胞核移植技术将一个细胞的细胞核转移到另一个去除细胞核的细胞中去,从而使受体细胞获得新的遗传信息,产生新的生命现象细胞质细胞核细胞核移植多莉羊的培育过程染色体工程 按设计有计划削减、添加和代换同种或异种染色体的方法和技术。也称为染色体操作。 细胞工程的应用马铃薯疮痂病) 脱毒苗脱毒马铃薯脱毒技术藻类植物氢能汽车高产奶牛濒危动物细胞工程与基因工程的比较1、细胞工程的发展
2、细胞工程的基本技术
植物细胞与组织培养
细胞融合
细胞核移植
染色体工程
3、细胞工程的应用
快速培养花卉及濒危植物
获得无病毒作物
开发洁净能源减少环境污染
繁殖优良家畜品种及濒危动物1、下列技术中,一般来说不属于细胞工程范围的是( )
A、组织培养 B、细胞核移植
C、基因芯片的应用 D、细胞融合2、下列与细胞工程无关的技术是( )
A、克隆羊“多利”的产生
B、2种烟草体细胞杂交获得新植株
C、葡萄的嫁接
D、利用植物组织培养技术培育郁金香3、下列细胞工程技术中,不涉及遗传物质改变的是( )
A、植物组织培养 B、动物细胞融合
C、细胞核移植 D、染色体替换CCA课件35张PPT。2.2植物细胞工程的应用澳洲朱焦
租摆效果澳洲朱焦穴盘苗细胞工程 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 细胞工程植物细胞工程动物细胞工程植物细胞工程植物组织培养1、原理:
细胞的全能性
细胞的全能性1) 概念: 已高度分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。 2) 原因: 生物体细胞含有本物种所特有的全套遗传信息。3) 全能性高低: ①受精卵>胚胎干细胞>生殖细胞>体细胞
②植物细胞>动物细胞2、植物组织培养的条件
内因:离体细胞、组织或器官
外因:
1)适宜的外界环境条件,例如无菌、适宜的温度、湿度、光照等
2)培养基(一定的营养物质,激素)
植物组织培养的培养基无机营养成分:无机盐离子
有机营养成分:
① 含N物质:包括维生素和氨基酸
② 碳源:2%—5%的蔗糖溶液,调节渗透压
③ 琼脂:起支持作用
④ 激素:生长素,细胞分裂素和赤霉素
PH值:5.0-6.03、 植物组织培养的基本过程
外植体 愈伤组织 胚状体已分化出根、芽分化程度降低,分裂能力增强重新分化出组织器官的过程(细胞分裂素、生长素)细胞分化程度与细胞分裂能力呈负相关 愈伤组织的形成愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成一种排列疏松无规则、高度液泡化、无定形态的薄壁细胞组成的组织。植物组织培养(试管苗的形成)试管苗大规模培养移栽经过炼苗的小苗,可以和一般植物一样进行大规模栽培植物组织培养的概念:在无菌和人工控制的条件下将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予一定的培养条件,诱导产生愈伤组织和胚状体,最终形成完整的植株。 能力训练:1、下列不能作为植物组织培养的材料是( )D植物体细胞杂交应用研究 1、定义: 将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞,且把杂种细胞培育成新的植物体的过程。 2、优势(与有性杂交方法比较) 克服了远缘杂交不亲和的障碍,拓展了可用于杂交的亲本组合范围。植物体细胞杂交植物体细胞杂交过程示意图标志去壁思考题细胞壁如何去除?
原生质层如何融合?融合的基础是什么?
杂交完成的标志是什么?
最后通过什么手段得到新个体 ?融合体杂种细胞去壁的常用方法: 原生质体融合方法:植物体细胞杂交过程示意图细胞融合的基础: 细胞膜的流动性不能人工诱导原生质体融合的方法是:A、振动
B、电刺激、
C、PEG试剂、
D、重压
对应训练植物细胞工程的实际应用(一)、植物繁殖的新途径(二)、作物新品种的培育(三)、细胞产物的工厂化生产1.单倍体育种2.突变体的利用药物,香料,蛋白质等一、植物繁殖的新途径1.微型繁殖(属无性繁殖)
(1)微型繁殖技术(快速繁殖技术):
快速繁殖优良品种的植物组织培养技术.
(2)特点:保持优良品种的遗传特性;
高效快速地实现种苗的大量繁殖.2.培育脱毒作物
(1)材料:无病毒的茎尖
(2)脱毒苗:切取茎尖进行组织培养获得 人工种子用人工种皮包被体细胞胚,可以制造人工种子
人工种皮:藻酸钠
解决有些植物结子困难、发芽率低、繁殖困难等问题植物组织培养大量生产紫草素 现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种成功,但由于成本较高,中国尚未应用于生产。
08江苏高考:下列关于植物组织培养的叙述中,错误的是
( )
A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化
C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同D课件31张PPT。2.3动物细胞工程的应用(Ⅰ)动物细胞工程常用的技术手段:动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、
动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术
复习:植物细胞工程常用的技术手段有哪些?植物组织培养技术、 植物体细胞杂交技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。一、动物细胞培养过程阅读“动物细胞培养过程”并思考:1、动物细胞培养的概念是什么?该技术实施的原理是什么? 特点是什么?
2、为什么要对取出的动物组织进行处理,使细胞分散?
3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗?
4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?
5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?
6、简述动物细胞培养的操作过程动物细胞培养过程:原代培养传代培养1、动物细胞培养的概念是什么?该技术实施的原理是什么? 从动物机体中取出相关组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。
原理是细胞增殖 (有丝分裂) 。细胞贴壁过程那么什么是接触抑制?接触抑制:细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。
接触抑制动物细胞生长特性部分细胞突变,获得不死性,向癌细胞方向发展,糖蛋白减少。2、为什么要对取出的动物组织进行处理,使细胞分散?分散的单个细胞容易摄取所需的营养,排出代谢废物;而用大块组织培养时,内部细胞的营养供应和代谢废物的排出都较困难。 3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗?细胞间的物质主要是蛋白质(胶原纤维)。
胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2~8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4。 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外,长时间的作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用,因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。 5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,它们的细胞分化程度低,增殖能力强,分裂旺盛,容易培养。6、动物细胞培养过程:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养传代培养无限传代单个细胞加培养液动物细胞培养不能
最终培养成生物体传代培养一般传至10代直至50代就不能再分裂了,这时细胞核内遗传物质未发生变化,形成的细胞群传代培养过程中有个别细胞传至50代以后,由于遗传物质改变,失去控制,成为无限增殖的不死的癌症细胞,形成的细胞群7、什么是原代培养、传代培养?为什么要进行传代培养?原代培养:
取材(动物组织) →细胞分散→初次培养
传代培养:
培养的细胞→细胞分散→继续培养
进行传代培养的原因:
接触抑制8、传代培养中,第10代细胞与第50代以后细胞的主要区别是什么?细胞癌变,失去接触抑制特性。9、动物细胞培养能否象植物组织培养那样获得克隆个体?需要诱导其脱分化的过程吗? 不可以,因为高度分化的动物细胞的全能性受到抑制。
不需要诱导其脱分化。原代培养定义:把第1代细胞的培养与10代以内的细胞培养统称为原代培养。过程:从动物机体中取出组织 ? 剪碎 ? 加胰蛋白酶? 细胞游离 ? 加培养液 ? 将细胞接种到培养瓶内 ? 培养(1—2天换一次培养液)? 细胞贴壁生长 ? 长成单层细胞
取材(动物组织) →细胞分散→初次培养传代培养定义:当原代培养的细胞生长停止,这时如果要使细胞继续生长,就要及时用胰蛋白酶等,使细胞从瓶壁上解离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养培养的细胞→细胞分散→继续培养 细胞株:
从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞,能传到40-50代,其遗传物质没有发生变化。 细胞系:
传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化,带有癌变的特点,可能在培养条件下无限制的传代下去,这种传代细胞称为细胞系。二、动物细胞培养条件1、无菌、无毒的环境
(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)
2、营养
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)
3、温度和PH
36.5+(-)0.5度, 7.2-7.4
4、气体环境:
O2和CO2(95%空气和5% CO2 )保证细胞顺利的生长增殖思考:动物血清的作用?主要是:提供有利于细胞生长增殖所需的激素、生长因子或提供合成培养基所缺乏的营养物质等。 动物细胞培养液的主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。(1)液体培养基(2)含有动物血清动物体细胞大都生活在液体的环境植物组织培养呢?无机盐、蔗糖 、维生素、生长调节物质、植物激素成分比较:植物组织培养和动物细胞培养的比较三、动物细胞培养的应用1、获得细胞产物,如蛋白质生物制品-病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等
2、获得烧伤病人植皮所需的细胞
3、获得细胞用于检测有毒物质
4、为治疗及预防疾病提供理论依据。1、说出动物细胞培养的过程?
2、简述动物细胞培养的条件?
3、说出动物细胞培养的应用?
4、对比说出动物细胞培养与植物组织培养原理、条件、结果、培养目的你达到学习目标了吗?1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是( )
A.都需用培养箱
B.都须用液体培养基
C.都要在无菌条件下进行
D.都可体现细胞的全能性C巩固练习:外界条件适宜,植物细胞不需要。动物细胞培养一般需要培养箱。2、下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是
( )
A.培养基成分不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能
D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株A3、动物细胞工程技术的基础是( )
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
C.胚胎移植 D.动物细胞培养D愈伤组织条件适宜可以传代培养不分化。4、细胞株的特点是( )
A.遗传物质没有改变,可以无限传代B.遗传物质发生改变,不可无限传代C.遗传物质没有改变,不可无限传代D.遗传物质发生改变,且有癌变特点,可以无限传代
5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去,这种传代细胞称之为( )
A.原代培养 B.传代培养
C.细胞株 D.细胞系CD6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因是这样的组织细胞( )
A.容易产生各种变异
B.具有更强的全能性
C.取材十分方便
D.分裂增殖的能力强D7.(09江苏)下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。
(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞
。
(2)气室中充入5%C02:气体的主要作用是
。
(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的 ,以保证抗生素对肝脏无害。吸收氧气和营养物质、排出代谢废物维持培养液适宜的pH种类和剂量08年宁夏卷回答下列有关动物细胞培养的问题:
⑴在动物细胞培养的过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的 。此时,瓶壁上形成的细胞层数是 ,要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是 。
⑵随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现 的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成
细胞,该种细胞的黏着性 ,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量 。相互接触单层胰蛋白酶衰老甚至死亡接触抑制不死性降低减少⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。
⑸在细胞培养过程中,通常在 条件下保存细胞,因为在这种条件下,细胞中 的活性降低,细胞的 速率降低。
⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作
进行攻击。中冷冻酶新陈代谢抗原 课件35张PPT。2.3动物细胞工程的应用(Ⅱ)太空婚礼 2002年12月30日, 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行,植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体,动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。一段时间后,我国首批”太空娃娃”终于顺利诞生。对照实验结果表明,细胞融合率大大提高。“太空婚礼”神舟放飞强国梦“太空婚礼”科研项目一:“太空婚礼”科研项目二:
挑战自我植物体细胞杂交技术动物细胞融合技术知识回顾
植物体细胞杂交过程植物细胞 A(番茄)植物细胞 B(马铃薯)去除细胞壁原生质体 A原生质体 B原生质体融合正在融合的原生质体再生出细胞壁杂种细胞脱分化愈伤组织杂种植株(番茄马铃薯)再分化1.动物细胞融合的概念
2.动物细胞融合的原理
3.诱导动物细胞融合的方法
4.动物细胞融合的意义和应用任务:阅读教材第52页
时间:2分钟
问题:一、动物细胞融合1.概念:动物细胞融合:也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。2、原理:细胞膜的流动性3.诱导方法:物理方法:化学法:生物法:灭活的病毒电激等聚乙二醇(PEG)灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏这些病原体的抗原结构。4.意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交(种间、属间、科间、动植物之间)成为可能。5.应用:最重要的用途是制备单克隆抗体主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法(同左)灭活的病毒物理(离心、振动、电刺激)化学(聚乙二醇)诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物、动物细胞融合的比较
20世纪90年代初,英国科学家成功地利用“生物导弹”单克隆抗体瞄准并杀死了癌细胞,使患血癌的一名67岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失了。被称为“生物导弹”的单克隆抗体,能够跟踪和杀死细菌、病毒或癌细胞。
1.传统抗体的获得方法、特点
2.单克隆抗体的制备过程
3.单克隆抗体的应用、优点
4. 单克隆抗体的概念任务:阅读教材第52页—54页
时间:5分钟
问题:2、什么是抗体?二、单克隆抗体回顾3、抗体的分布?抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。主要分布在血清中。1、什么是克隆?“克隆”从英文“clone”音译而来,是指从一个共同祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子,细胞或个体。在细胞水平指动物细胞培养.4.传统抗体的获得
(1)方法:①向动物体内反复注射某种_____,使动物产生_____;②从动物_____中分离所需抗体。
(2)特点:_______、纯度低、_______差。抗原抗体血清产量低特异性B淋巴细胞特点3.每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。1.B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。2.动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。1、在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖?不可能2、我们学过的什么细胞具有这样的能力?癌细胞3、有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力?细胞融合生产单克隆抗体思路一个B淋巴细胞——只分泌一种特异性抗体
小鼠骨髓瘤细胞——能无限增殖杂交细胞既能产生特异性抗体,又能大量繁殖B淋巴细胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤细胞
培养骨髓瘤细胞融合(只考虑两两融合)培养液中细胞有几种类型?融合细胞几种类型?骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞
B淋巴细胞--- B淋巴细胞
B淋巴细胞---骨髓瘤细胞多种杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞,克隆专一抗体,
检验阳性细胞单克隆抗体注射到小鼠体内体外培养5、单克隆抗体的制备过程第1次筛选目的:得到杂交瘤细胞(多种)。第2次筛选目的:在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 该细胞继承双亲细胞的遗传特性,既能产生专一抗体又能无限增殖。
杂交瘤细胞有何特点?特异性强,灵敏度高免疫小鼠培养骨髓瘤细胞融合骨髓瘤细胞
B淋巴细胞注射特定抗原蛋白选择培养基上培养专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性注射到小鼠体内体外培养单克隆抗体克隆杂交细胞分开不同杂交细胞,克隆专一抗体,检验阳性细胞多种杂交细胞杂交瘤细胞有何特点?本过程利用的那些技术?动物细胞融合技术
动物细胞培养技术是否注射抗原(只考虑两两融合)培养液中细胞有几种类型?几种融合细胞?两次筛选的目的分别是什么?与传统制备的抗体相比具有什么特点?5.单克隆抗体的制备脾骨髓瘤细胞B淋巴细胞杂交瘤细胞增殖产生抗体克隆化抗体体外培养小鼠腹腔细胞培养液腹水1、(只考虑两两融合)融合细胞几种类型?
2、本过程中进行了两次筛选,目的分别是什 么?第1次筛选要淘汰哪些细胞?
3、杂交瘤细胞有何特点?
骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞
B淋巴细胞--- B淋巴细胞
B淋巴细胞---骨髓瘤细胞该细胞继承双亲细胞的遗传特性,既能产生专一抗体又能无限增殖。第1次筛选目的:得到杂交瘤细胞第2次筛选目的:在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。4.在制备单克隆抗体的过程中,选用哪两种细胞进行融合?为什么选择这两种细胞?浆细胞和骨髓瘤细胞
浆细胞能产生单一抗体,但不能无限增殖;骨髓瘤细胞能无限增殖,但不能产生单一抗体。究探作合 6.单克隆抗体的应用
(1)优点:_________、_________、产量大。
(2)应用
①作为诊断试剂,具有准确、_____、简易、_____的优点。
②用于_________和_________。特异性强灵敏度高高效快速治疗疾病运载药物生物导弹=单克隆抗体+药物,治疗肿瘤)
7.概括单克隆抗体的概念
单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体1.动物细胞融合技术的原理、过程、概念、应用
2.单克隆抗体的制备过程及应用1、(2011年滦县高二检测)能使动物细胞融合的特有的诱导因素是( )
A.离心 B.灭活的病毒
C.电激 D.振动B2、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( )
A.经过免疫的B淋巴细胞
B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞
D.没经过免疫的B淋巴细胞A3、“生物导弹”是指 ( )
A.单克隆抗体
B.杂交瘤细胞
C.产生特定抗体的B淋巴细胞
D.在单克隆抗体上连接抗癌药物 D4、动物细胞融合技术最重要的用途是( )
A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体
C.培育新物种 D.生产杂种细胞BA 、 B细胞为动物细胞,请据图回答问题:A细胞B细胞C细胞D细胞(1)若A细胞为骨髓瘤细胞B细胞为淋巴细胞,那么D细胞称为
细胞,D细胞具有两个亲本细胞的特征,一方面因具有骨髓瘤细胞的 性质,通过 方式产生大量细胞,我们称之为 过程;另一方面能分泌大量的抗体,我们把该过程分泌的抗体称 .杂交瘤有丝分裂无限增殖单克隆单克隆抗体练一练(2)D细胞中产生的抗体其化学本质是 ,合成该物质的场所是 ,它是由 控制合成的,合成过程包括 和 两个重要步骤.球蛋白核糖体基因转录翻译(3)D细胞中产生的抗体具有 作用,与血清抗体相比其优越之处在于 强 高.免疫特异性灵敏度 1.右图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案制备单克隆抗体不能,没有将抗原注入小鼠体内,无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞。(1).该实验方案的目的是:________________(2).该方案能达到预期效果吗?为什么? (3).A是从小鼠的脾脏中取得__________ 该细胞能够产生______ 。
(4).图中B为__________过程,常用___________作为诱导剂,该细胞继承__________的遗传特性,既能_____________ ,又能___________。
B淋巴细胞抗体细胞融合灭活的病毒双亲细胞产生专一抗体无限增殖 (5).__________ 技术是单克隆抗体的技术支持。动物细胞培养(6)单克隆抗体的特点 ___________________,并可大量制备。特异性强,灵敏度高1 完成练习册习题
2 总结本章知识体系