齐鲁名校联盟2023-2024学年(下)高三年级开学质量检测生物学
考生注意：
1.答题前，考生务必将自己的姓名、考生号填写在试卷和答题卡上，并将考生号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 下列关于动物体内元素与化合物的说法，正确的是（ ）
A. 组成动物体的元素和化合物在无机自然界中都可以找到
B. 动物细胞内的脂肪大多含有不饱和脂肪酸，室温下呈液态
C. 占细胞鲜重最多的元素是氧，占细胞干重最多的元素是碳
D. Fe参与血浆中血红蛋白的组成，血红蛋白的功能主要是运输O2
2. 细胞膜受损较为严重时，大多数细胞会选择死亡，但个别细胞会选择修复。修复时，细胞外高浓度的钙离子迅速通过细胞膜上破损的孔洞进入细胞质中，触发溶酶体的胞吐作用，携带溶酶体膜的囊泡通过与破损的细胞膜融合，堵塞细胞膜表面破损的孔洞，从而恢复细胞膜的完整性。下列相关分析错误的是（ ）
A. 寿命较长细胞的细胞膜受损后往往选择修复
B. 细胞外钙离子浓度升高不利于细胞膜的修复
C. 溶酶体膜上可能具有特异识别钙离子的蛋白质
D. 不同生物膜能融合的基础是膜结构具有相似性
3. 肾小管上皮细胞基底外侧膜上的Na+-K+泵通过水解ATP建立了胞内低而胞外高的Na+电化学梯度，细胞顶部膜借助Na+电化学梯度，通过膜上的Na+/K+/C1-共转运体从肾小管腔中同时重吸收Na+、K+和C1-，细胞内液的C1-浓度增加后，C1-顺浓度梯度运到组织液。下列分析错误的是（ ）
A. Na+-K+泵是一种通道蛋白，同时又具有催化作用
B. C1-进出肾小管上皮细胞跨膜运输方式是不同的
C. Na+通过Na+/K+/C1-共转运体被重吸收的过程属于协助扩散
D. 细胞膜上的某些转运蛋白可同时采用不同的方式跨膜转运物质
4. 对老鼠(2N=40)生殖腺某-部位的切片进行显微观察，依据细胞中染色体的数目将细胞分为甲、乙、丙三组，每组细胞数目的占比如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 生殖腺中的细胞既可以进行有丝分裂，又可以进行减数分裂
B. 甲组细胞处于有丝分裂过程中，部分细胞可能发生等位基因的分离
C. 乙组的部分细胞含有同源染色体，部分细胞可能不含有同源染色体
D. 丙组细胞产生的各个子细胞内的染色体在形态大小和数目上一定相同
5. 家蚕的性别决定方式为ZW型，其体色有黄体和透明体(相关基因用A、a表示)，蚕丝颜色有彩色和白色(相关基因用B、b表示)，且两对基因均不位于W染色体上。现让一黄体彩色蚕丝雌蚕与一纯合透明体白色蚕丝雄蚕杂交，F1为黄体白色蚕丝和透明体白色蚕丝个体；让F1两种表型的个体杂交，F2的表型及比例为黄体白色蚕丝(♂):透明体白色蚕丝(♂):黄体彩色蚕丝(♀):透明体白色蚕丝(♀)=1:1:1:1，不考虑突变和染色体互换。下列说法错误的是（ ）
A. 根据F1的表型可知，蚕丝颜色中的白色为显性性状
B. 亲本中雌蚕一定是杂合子，基因型为AaZbW
C. 根据体色就可以判断F1个体的性别，黄体个体为雄性
D. 若让F2个体自由交配，则子代会出现黄体:透明体=7:9
6. T淋巴细胞线粒体内的代谢产物可影响细胞核内遗传物质的表达，进而调控细胞的功能，其部分过程如图所示，图中的乙酰辅酶A为乙酸的活化形式，NFAT为转录调控蛋白。下列相关说法错误的是（ ）
A. 据图可知，该T淋巴细胞可能是辅助性T细胞
B. 自由基是有氧呼吸的产物，可影响细胞质基质中NFAT的活性
C. 乙酰辅酶A通过影响染色质中蛋白质的乙酰化过程来影响基因的转录
D. NFAT通过影响mRNA与核糖体的结合来调控干扰素、白细胞介素的合成
7. 下列属于现代生物进化理论观点的是（ ）
A. 所有生物的生命活动都是靠能量驱动的
B. 自然选择的直接对象是个体的基因型
C. 地球上所有的生物具有共同的祖先
D. 生物多样性是协同进化的结果
8. 人体骨骼肌受到牵拉而过度收缩时，会引起骨骼肌内的腿梭兴奋，通过脊髓中抑制性中间神经元的作用，抑制α-运动神经元的活动，使受拉的肌肉舒张，这种现象称为反牵张反射，该过程的反射弧结构如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 腱梭属于反牵张反射弧的感受器
B. 抑制性中间神经元接受的是兴奋性神经递质
C. 刺激①处，可在②处检测到膜外电位由正变负
D. 反牵张反射能防止肌肉因过度牵拉而受到损伤
9. 尿崩症是由于抗利尿激素缺乏，或肾脏对抗利尿激素敏感性缺陷，导致肾小管重吸收水功能障碍的一组临床综合征。前者为中枢性尿崩症，后者为肾性尿崩症，其临床特点为多尿烦渴低渗尿。下列分析错误的是（ ）
A. 禁水一段时间后，注射适量抗利尿激素可初步诊断患者的尿崩症类型
B. 肾小管细胞的抗利尿激素受体基因甲基化程度增强可能导致肾性尿崩症
C. 血浆渗透压升高可使尿崩症患者的下丘脑渗透压感受器产生兴奋
D. 尿崩症患者的尿液渗透压比正常人低是因为原尿中的Na+被重吸收
10. 下列关于“探索生长素类调节剂促进插条生根的最适浓度”实验的说法，正确的是（ ）
A. 沾蘸法要求溶液浓度较低，且是空气湿度较大、遮阴的环境
B. 可以参考实验所用植物体内天然生长素含量，设置合理的浓度梯度
C. 研究不同浓度生长素类调节剂的影响时，处理时间的长短可以不一致
D. 用不同浓度的生长素类调节剂处理插条，不可能获得相同的生根数目
11. 如图表示甲、乙两个种群先后迁人某生态系统后的种群数量变化曲线。下列相关说法错误的是（ ）
A. 0~t2时间段，甲种群的增长曲线为“S”形
B. 甲种群与乙种群的种间关系为捕食，乙为捕食者
C. 若乙种群在t1时刻迁入，则甲种群就不会达到环境容纳量
D. 甲、乙两种群可能会降低原有生态系统中的群落物种丰富度
12. 下列关于生命系统中信息传递的叙述，错误的是（ ）
A. 细胞之间的信息传递必须借助于细胞膜上的受体
B. 激素、神经递质是生命系统中常见的信息分子
C. 不同生物间传递的物理信息可以不依赖具体的信息分子
D. 生态系统中的信息传递可促进能量流动和物质循环
13. 相传，酒祖杜康的儿子在长江边上开了个酒糟房，他把酒糟和江水搅拌后，封存在缸中。到了第21天的酉时才想起自己的酒，开缸一闻，香气扑鼻；舌尖咂磨，酸中带甜；浇到菜里，菜味鲜美。酒没酿出来，倒酿出来一味好佐料。他高兴地琢磨，21天后的酉时，就在酉字后面加上昔(廿一日)，造出了“醋”字。根据上述材料，下列相关分析正确的是（ ）
A. 酒糟只提供发酵所需的微生物
B. 传统发酵以混合菌种的液体发酵为主
C. 酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分
D. 酒和醋的原料和工艺流程相同，但二者的发酵条件不同
14. 养殖池中存在的有毒物质主要是氨和亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用。研究人员从养殖池的池泥中分离出硝化细菌并进行计数。下列相关说法错误的是（ ）
A. 取样用的铲子和试管使用前后都需要灭菌
B. 对硝化细菌的计数可采用稀释涂布平板法
C. 分离硝化细菌的培养基为含亚硝酸盐的牛肉膏蛋白胨培养基
D. 为保证结果准确，要选择菌落数为30~300的平板进行计数
15. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞。下列叙述错误的是（ ）
A. 内细胞团经过一定处理后，可获得胚胎干细胞
B. 囊胚外边的透明带保持完整是胚胎继续发育的基础
C. 为获得更多的早期胚胎，通常用激素处理雌鼠使其超数排卵
D. 胚胎干细胞具有全能性，经定向诱导可获得多种功能细胞
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 下图为酵母菌线粒体内的部分呼吸链，这些按特定顺序排列的蛋白质，被称为呼吸链的成员。前面的成员接受电子，又传递给下一个成员，同时将H+泵出到膜间隙。在电子传递的过程中，有机物逐步释放能量，并将其中的一部分能量储存在ATP分子中。下列说法错误的是（ ）
A. I、Ⅱ、Ⅲ会使线粒体内膜形成外高内低的H+浓度差
B. 图中NADH是还原型辅酶I，可催化某些化学反应
C. 图中F1，既是转运蛋白，又与ATP的形成有关
D. 提供充足的氧气更有利于脂肪的分解
17. 某雌雄异株植物的性别决定方式为XY型，其花色有黄色、白色和橙红色三种，由等位基因A、a(在常染色体上)和等位基因B、b共同控制，已知无A基因时植株开白花。下表为两组杂交实验的结果，F1自由交配获得F2，下列说法正确的是（ ）
组别 亲本 F1 F2
母本 父本
甲 黄色1 白色1 橙红色 黄色:白色:橙红色=3:4:9
乙 黄色2 白色2 橙红色 黄色:白色:橙红色=1:4:3
A. 根据表中甲组的实验结果就可推知，该植物花色的遗传遵循自由组合定律
B. 若要判断基因B、b是否在性染色体上，则需统计甲组F2中黄色或橙红色个体的雌雄比
C. 乙组F2比例异常的原因是F1植株缺失基因A所在的染色体片段导致雄配子致死
D. 基因决定花色体现了基因通过控制蛋白质的合成直接控制生物体的性状
18. 2023年诺贝尔生理学或医学奖授予卡塔琳·卡里科和德鲁·魏斯曼，表彰他们在mRNA疫苗领域中的突出贡献。新冠病毒疫苗包括灭活病毒疫苗、mRNA疫苗等多种类型。下图是新冠病毒mRNA疫苗发挥作用的示意图，序号表示过程。下列分析正确的是（ ）
A. 过程②需要mRNA、rRNA和tRNA参与，并消耗氨基酸、ATP等物质
B. mRNA疫苗进入细胞的方式是胞吞，该过程不需要细胞膜上的蛋白质参与
C. 过程⑤⑥可说明B细胞和细胞毒性T细胞都含有能与细胞因子结合的受体
D. 与灭活病毒疫苗相比，mRNA疫苗可诱导机体发生细胞免疫以增强防御功能
19. 科研人员追踪了某地退耕还林后的物种变化，群落演替的变化规律为草本植物阶段→灌木阶段→乔木阶段。下列叙述正确的是（ ）
A. 草本植物和灌木可以为乔木的生长提供适宜条件
B. 随着灌木和乔木的兴起，一些耐阴的草本植物被逐渐淘汰
C. 随着退耕时间的延长，该地生态系统的稳定性会越来越高
D. 与灌木阶段相比，乔木阶段群落对环境资源的利用更充分
20. 下表为几种限制酶的识别序列及其切割位点，由此推断，下列说法正确的是（ ）
限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点
BamH I 5'-G↓GATCC -3' Kpn I 5' - CGTAC↓C-3'
EcoR I 5' -C↓AATTC -3' Sau3A I 5'-↓GATC-3'
Hind II 5' - GTY↓RAC -3' Sma I 5'- CCC↓GGG -3'
注：Y为C或T，R为A或G。
A. HindII能识别GTCAAC序列，也能识别GTTAAC序列
B. Sau3A I和EcoRI破坏的都是识别序列中心轴线处的磷酸二酯键
C. BamHI和KpnI两种限制酶可识别相同的序列但切割后形成不同的黏性末端
D. HindII、SmaI两种限制酶的切割位点在识别序列中心轴线上，因而形成平末端
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 某实验小组为验证KHCO3对某植物幼苗光合作用的影响，进行了甲、乙两组不同处理的实验。甲组制备了叶绿体悬液，乙组将等量植物幼苗叶片切割成1mm2的叶小片分别进行实验，然后在适宜光照、20℃恒温条件下用氧电极测量这两组植物的O2释放速率，结果如图1所示。请回答下列问题：
（1）通常情况下，分离出细胞中的叶绿体的方法是_____________。本实验的自变量是______________。
（2）清水组的叶小片中无O2释放，原因最可能是____________。有同学认为KHCO3浓度为0.05mol·L-1时，两组实验的O2释放速率存在差异的原因是光合速率不同，你____________(填“认同”或“不认同")此观点，理由是__________。
（3）科研人员通过研究拟南芥发现，与WT(野生型)相比，突变体t1和t2在正常光照条件下，叶绿体在叶肉细胞中的分布及位置不同(如图2所示，不考虑叶绿体的运动)，进而引起光合速率差异，但三者叶绿素含量及其他性状基本一致。
①据图2分析，引起三者光合速率差异的主要原因是____________不同。
②植物光合速率与细胞呼吸速率相等时的光照强度，称为光补偿点。据图2分析，t1和t2相比，光补偿点更高的是____________，判断依据是____________。
22. 糖尿病患者数量呈逐年上升趋势，此现象引起人们广泛关注。血糖平衡对机体生命活动具有重要作用，机体内有多种激素参与血糖浓度的调节。请回答下列问题：
（1）可升高血糖的激素有多种，除胰高血糖素外，还有__________________(答出三种)。从血糖去向角度分析，胰岛素降低血糖的途径为________________。
（2）研究者研制了一种“智能”胰岛素(IA)，IA中的X能够抑制GT(葡萄糖进入细胞的载体蛋白)的功能。为测试葡萄糖对IA与GT结合的影响，将足量的带荧光标记的IA加入红细胞膜悬液中处理30分钟，使IA与膜上的胰岛素受体、GT充分结合后，再分别加入葡萄糖至不同的终浓度，10分钟后检测膜上的荧光强度。
图2结果可说明，随着悬液中葡萄糖浓度的升高，IA与GT的结合量____________，出现该现象的原因可能是__________。
（3）研究表明，长期肠道菌群失调引起的炎症反应可能导致抑郁症，抑郁症程度越严重的大鼠对糖水的偏好度越低，明暗箱实验中停留在明箱的时间越短。已知饲喂药物M可缓解大鼠的肠道炎症，进而治疗其抑郁症，而L-茶氨酸对抑郁症也有疗效。科研人员为了探究L-茶氨酸治疗大鼠抑郁症的机制是否与药物M一致，进行了实验。实验材料与用具：因肠道炎症而患抑郁症的模型鼠多只、正常鼠多只、L-茶氨酸、药物M、生理盐水、糖水及明暗箱。
①本实验的自变量是_________。
②本实验的因变量是_________。
③本实验的实验思路是________________________，相同条件下培养一段时间后，检测各组大鼠对糖水的偏好度和停留在明箱的时间，以及大鼠肠道中菌群的种类和数量、炎症情况等。
23. 下图表示某生态系统部分营养级之间的关系及部分能量值(单位：J·m-2·a-1)。请回答下列问题：
（1）生态系统的能量流动是指生态系统中能量的____________、____________、转化和散失的过程；生态系统中的能量通过____________依次传递。
（2）图中“草→草食性动物→肉食性动物①→肉食性动物②”________(填“能”或“不能”)表示一条食物链，判断依据是________。
（3）由草食性动物到肉食性动物①的能量传递效率是_________%，肉食性动物①用于自身生长、发育和繁殖等生命活动的能量占同化量的比例是________%(保留2位小数)。
（4）肉食性动物②会用自己的耳朵辨别肉食性动物①的声音，肉食性动物①会根据肉食性动物②的气味躲避猎捕，此过程涉及的信息类型有___________，由此可见，信息传递具有的作用体现在____________。
24. 拟南芥(2N=10)是自花受粉植物，基因高度纯合，易获得突变型，是遗传学实验中常见模式植物。请回答下列问题：
（1）拟南芥叶片边缘的光滑(M)对锯齿状(m)为显性，基因M/m位于2号染色体上。2号染色体上成功导入抗盐基因(D)且叶片边缘锯齿状的植株与叶片边缘光滑的纯合植株杂交，从F1中筛选出抗盐植株与正常的叶片边缘锯齿状的植株进行测交，发现测交后代中叶片边缘光滑且抗盐的植株占20%，试分析其原因：_____________。据此推测，让F1中的抗盐植株进行自交，所得F2中叶片边缘光滑且抗盐的纯合植株所占比例为____________。
（2）拟南芥的A基因决定雄配子育性，A基因失活会使可育雄配子减少1/3；B基因存在时种子萌发，但在种子中来自亲代母本的B基因不表达。研究者将某种抗性基因插人野生型植株(AABB)的A基因或B基因内部，获得了“敲除”A基因的抗性植株甲(基因型表示为AaBB)和“敲除”B基因的抗性植株乙(基因型表示为AABb)。
①进行杂交实验：甲(♂)×乙(♀)，则所结种子中，基因型为AaBb的种子所占比例为________。
②让上述杂交实验所得子代中基因型为AaBb的植株自交，若后代种子中可萌发种子占1/2，则表明A、B基因在染色体上的位置关系是____________________，作出该判断的依据是____________。
③基于以上推论将基因型为AaBb的种子作为父本与抗性植株甲(AaBB)作为母本进行杂交，所得子代中有抗性且可萌发种子的比例为________，子代中有抗性但不能萌发种子所占比例为________。
25. CRISPR/Cas9基因编辑技术可以按照人们的意愿精准剪切、改变任意靶基因的遗传信息，从而达到基因定点敲除、插入、突变的目的。在该基因编辑技术中，sgRNA是根据靶基因设计的引导RNA，准确引导Cas9切割与sgRNA配对的靶基因DNA序列。请回答下列问题：
（1）Cas9可准确切割与sgRNA配对的靶基因DNA序列，由此可见，Cas9在功能上属于______酶，该过程体现了酶具有______性；此外，Cas9可准确切割靶基因DNA序列还依赖于sgRNA与靶基因DNA序列之间的___________。
（2）sgRNA是人工合成的一段能与靶基因互补配对的特殊序列，由23个连续的碱基组成。研究发现，sgRNA有时会出现脱靶问题，试分析其原因可能是________；解决措施是_________。
（3）为了实现某基因的特异性敲除，如图1所示，科学家将含有3个不同的但靶向相同基因的sgRNA编码基因的重组质粒组装到具有特殊元件的载体上，形成新的重组质粒。
注：eflap是能够驱动基因广泛表达的启动子；EGFP是增强型绿色荧光蛋白基因；I-SecI是归位内切酶，可将质粒随机插入目标生物的基因组中。
理论上，一个sgRNA便能实现靶基因的敲除，请分析构建图1所示重组质粒的优势：____________(答出两点)。
（4）为筛选特定D基因“敲除”的果蝇，在D基因的DNA断裂位点插入绿色荧光蛋白基因(EGFP)需构建携带有绿色荧光蛋白基因的供体质粒。把EGFP基因和His标签基因(His标签由6个组氨酸组成)连接起来构建融合基因并构建重组质粒，图2为载体、EGFP基因的结构、不同限制酶的识别序列及切割位点，欲将标签基因连接在绿色荧光蛋白基因(EGFP)编码区的首端，已知组氨酸的密码子为CAU，起始密码子为AUG。
①写出His基因模板链的碱基序列：5'-___________________________-3'。
②为构建融合基因并将其插入载体科研人员设计了一对与EGFP基因编码区两端序列互补配对的引物，设计时需在引物_______(填“A”或“B”)的5'端增加相应的限制酶识别序列和His基因的编码序列，请写出该引物开头的12个碱基序列：5'-_________-3'。齐鲁名校联盟2023-2024学年(下)高三年级开学质量检测生物学
考生注意：
1.答题前，考生务必将自己的姓名、考生号填写在试卷和答题卡上，并将考生号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 下列关于动物体内元素与化合物的说法，正确的是（ ）
A. 组成动物体元素和化合物在无机自然界中都可以找到
B. 动物细胞内的脂肪大多含有不饱和脂肪酸，室温下呈液态
C. 占细胞鲜重最多的元素是氧，占细胞干重最多的元素是碳
D. Fe参与血浆中血红蛋白的组成，血红蛋白的功能主要是运输O2
【答案】C
【解析】
【分析】细胞的鲜重中元素含量由多到少分别是O、C、H、N，干重中元素含量由多到少分别是C、O、N、H；组成细胞的化合物包括无机物和有机物，无机物包括水和无机盐，有机物包括蛋白质、脂质、糖类和核酸，鲜重含量最多的化合物是水，干重含量最多的有机物是蛋白质。
【详解】A、组成动物体的元素无机自然界中都可以找到，没有一种是动物体所特有的，但有些化合物是只有动物体才能合成的，A 错误；
B、动物细胞内的脂肪大多含有饱和脂肪酸，室温下呈固态，B错误；
C、细胞鲜重最多的元素是氧，干重最多的元素是碳，C正确；
D、Fe参与红细胞中血红蛋白的组成，血红蛋白的功能主要是运输O2，D错误。
故选C。
2. 细胞膜受损较为严重时，大多数细胞会选择死亡，但个别细胞会选择修复。修复时，细胞外高浓度的钙离子迅速通过细胞膜上破损的孔洞进入细胞质中，触发溶酶体的胞吐作用，携带溶酶体膜的囊泡通过与破损的细胞膜融合，堵塞细胞膜表面破损的孔洞，从而恢复细胞膜的完整性。下列相关分析错误的是（ ）
A. 寿命较长细胞的细胞膜受损后往往选择修复
B. 细胞外钙离子浓度升高不利于细胞膜的修复
C. 溶酶体膜上可能具有特异识别钙离子的蛋白质
D. 不同生物膜能融合的基础是膜结构具有相似性
【答案】B
【解析】
【分析】溶酶体是“消化车间”，内含多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并且杀死侵入细胞的病毒和细菌。
【详解】A、细胞膜受损后选择修复而不选择死亡，有助于延长细胞寿命，A正确；
B、根据题意“细胞膜破损时，细胞外高浓度的钙离子迅速通过细胞膜上破碎的孔洞进入细胞质中，从而触发溶酶体的胞吐作用，携带溶酶体膜的囊泡通过与破损的细胞膜融合，堵塞细胞膜表而破损的孔洞，从而恢复细胞膜的完整性”，因此细胞内钙离子浓度升高有助于囊泡的形成和破损细胞膜的修复，B错误；
C、由“细胞外高浓度的钙离子迅速通过细胞膜上破损的孔洞进入细胞质中，触发溶酶体的胞吐作用”可知，溶酶体膜上可能具有特异识别钙离子的蛋白质，C正确；
D、不同生物膜能融合的基础是膜结构具有相似性，不同生物膜均是由磷脂双分子层构成其基本骨架，D正确。
故选B
3. 肾小管上皮细胞基底外侧膜上的Na+-K+泵通过水解ATP建立了胞内低而胞外高的Na+电化学梯度，细胞顶部膜借助Na+电化学梯度，通过膜上的Na+/K+/C1-共转运体从肾小管腔中同时重吸收Na+、K+和C1-，细胞内液的C1-浓度增加后，C1-顺浓度梯度运到组织液。下列分析错误的是（ ）
A. Na+-K+泵是一种通道蛋白，同时又具有催化作用
B. C1-进出肾小管上皮细胞的跨膜运输方式是不同的
C. Na+通过Na+/K+/C1-共转运体被重吸收的过程属于协助扩散
D. 细胞膜上的某些转运蛋白可同时采用不同的方式跨膜转运物质
【答案】A
【解析】
【分析】分析题意可知，Na+从肾小管上皮细胞运输到组织液中消耗ATP，方式为主动运输；肾小管上皮细胞中Na+浓度低于肾小管腔中液体，Na+从肾小管腔进入肾小管上皮细胞中为协助扩散，同时协同运输K+、C1-，C1-顺浓度梯度从肾小管上皮细胞到组织液中，方式为协助扩散。
【详解】A、Na+-K+泵是一种载体蛋白，同时又具有催化作用，可催化ATP水解，A错误；
B、C1-进肾小管上皮细胞的跨膜运输方式是主动运输，出肾小管上皮细胞的跨膜运输方式是协助扩散，B正确；
C、由“细胞顶部膜借助Na+电化学梯度，通过膜上的Na+/K+/C1-共转运体从肾小管腔中同时重吸收Na+、K+和C1-”可知，Na+通过Na+/K+/C1-共转运体被重吸收的过程属于协助扩散，C正确；
D、细胞膜上的某些转运蛋白可同时采用主动运输和协助扩散的方式跨膜转运物质，D正确。
故选A。
4. 对老鼠(2N=40)生殖腺某-部位的切片进行显微观察，依据细胞中染色体的数目将细胞分为甲、乙、丙三组，每组细胞数目的占比如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 生殖腺中的细胞既可以进行有丝分裂，又可以进行减数分裂
B. 甲组细胞处于有丝分裂过程中，部分细胞可能发生等位基因的分离
C. 乙组的部分细胞含有同源染色体，部分细胞可能不含有同源染色体
D. 丙组细胞产生的各个子细胞内的染色体在形态大小和数目上一定相同
【答案】D
【解析】
【分析】细胞中的染色体数为：80、40、20，可知老鼠体细胞中的染色体为40条。甲组细胞中染色体数目是体细胞的2倍，处于有丝分裂后期；乙组细胞中染色体数目与体细胞相同，可能处于有丝分裂前期、中期、末期，也可能处于减数第一次分裂，或是减数第二次分裂后期；丙组细胞中染色体数目是体细胞的一半，可能处于减数第二次分裂前期、中期和末期。
【详解】A、细胞分裂分为有丝分裂和减数分裂，生殖腺中的细胞既可以进行有丝分裂，又可以进行减数分裂，A正确；
B、甲组细胞中染色体数目是体细胞的2倍，处于有丝分裂过程中，部分细胞可能发生等位基因的分离，B正确；
C、乙组细胞中染色体数目与体细胞相同，可能处于有丝分裂前期、中期、末期，也可能处于减数第一次分裂，或是减数第二次分裂后期，乙组的部分细胞含有同源染色体，部分细胞可能不含有同源染色体，C正确；
D、丙细胞中只含一条X或只含一条Y，丙组细胞产生的各个子细胞内的染色体在形态大小和数目上不一定相同，D错误。
故选D。
5. 家蚕的性别决定方式为ZW型，其体色有黄体和透明体(相关基因用A、a表示)，蚕丝颜色有彩色和白色(相关基因用B、b表示)，且两对基因均不位于W染色体上。现让一黄体彩色蚕丝雌蚕与一纯合透明体白色蚕丝雄蚕杂交，F1为黄体白色蚕丝和透明体白色蚕丝个体；让F1两种表型的个体杂交，F2的表型及比例为黄体白色蚕丝(♂):透明体白色蚕丝(♂):黄体彩色蚕丝(♀):透明体白色蚕丝(♀)=1:1:1:1，不考虑突变和染色体互换。下列说法错误的是（ ）
A. 根据F1的表型可知，蚕丝颜色中的白色为显性性状
B. 亲本中的雌蚕一定是杂合子，基因型为AaZbW
C. 根据体色就可以判断F1个体的性别，黄体个体为雄性
D. 若让F2个体自由交配，则子代会出现黄体:透明体=7:9
【答案】B
【解析】
【分析】黄体雌蚕与纯合白体雄蚕杂交，F1均为白蚕，说明白色为显性；F2雌雄个体体色比例不同，其中雄蚕只有白色，说明控制蚕丝颜色的基因位于性染色体（Z染色体）上，且白色：彩色=3：1，即白色对彩色为显性。
【详解】A、黄体雌蚕与纯合白体雄蚕杂交，F1均为白蚕，说明白色为显性，A正确；
B、黄体雌蚕与纯合透明体雄蚕杂交，F1为黄体和透明体个体，说明透明体为隐性，F1两种表型的个体杂交，F2中雌雄均为黄体：透明体=1：1，说明控制体色的基因也位于Z染色体上，且亲本中的雌蚕基因型为ZAbW,B错误；
C、由题干分析可知，亲本基因型组合为ZaBZaB×ZAbW，F1基因型为ZAbZaB和ZaBW，雄性个体表现为黄体，雌性个体表现为透明体，故根据体色就可以判断F1个体的性别，C正确；
D、只考虑体色，F2个体基因型为1/4ZAZa、1/4ZaZa、1/4ZAW、1/4ZaW，雄配子种类及比例为1/4ZA、3/4Za，雌配子比例为1/4ZA、1/4Za、1/2W，雌雄配子随机结合，透明体比例为= 3/4×1/4+3/4×1/2=9/16 ，黄体：透明体=7：9，D正确。
故选B。
6. T淋巴细胞线粒体内的代谢产物可影响细胞核内遗传物质的表达，进而调控细胞的功能，其部分过程如图所示，图中的乙酰辅酶A为乙酸的活化形式，NFAT为转录调控蛋白。下列相关说法错误的是（ ）
A. 据图可知，该T淋巴细胞可能是辅助性T细胞
B. 自由基是有氧呼吸的产物，可影响细胞质基质中NFAT的活性
C. 乙酰辅酶A通过影响染色质中蛋白质的乙酰化过程来影响基因的转录
D. NFAT通过影响mRNA与核糖体的结合来调控干扰素、白细胞介素的合成
【答案】D
【解析】
【分析】据图分析可知，乙酰辅酶A进入三羧酸循环后，代谢产生[H]，[H]参与有氧呼吸第三阶段，与O2结合形成H2O，同时产生了大量自由基，自由基激活NFAT等分子，进入细胞核的NFAT和乙酰辅酶A在乙酰化酶催化下发生乙酰化反应，参与调控核内基因的表达，进而调控合成干扰素、白细胞介素等。
【详解】A、该T淋巴细胞可以合成干扰素和白细胞介素等细胞因子，推测该细胞可能是辅助性T细胞，A正确；
B、由图可知，自由基是有氧呼吸第三阶段的产物，可影响细胞质基质中NFAT的活性，B正确；
C、由图可以看出，乙酰辅酶A通过影响染色质中蛋白质的乙酰化过程进而激活干扰素、白细胞介素等基因的转录，C正确；
D、NFAT通过影响DNA的转录来调控干扰素、白细胞介素的合成，D错误。
故选D。
7. 下列属于现代生物进化理论观点的是（ ）
A. 所有生物的生命活动都是靠能量驱动的
B. 自然选择的直接对象是个体的基因型
C. 地球上所有的生物具有共同的祖先
D. 生物多样性是协同进化的结果
【答案】D
【解析】
【分析】 现代生物进化理论：适应是自然选择的结果；种群是生物进化的基本单位；突变和基因重组提供进化的原材料，自然选择导致种群的基因频率定向改变，进而通过隔离形成新的物种；生物进化的过程实际上是生物与生物、生物与无机环境协同进化的过程；生物多样性是协同进化的结果。
【详解】A、水通过被动运输进出细胞，不需要能量，A错误；
B、自然选择的直接对象是个体的表现型，B错误；
C、地球上所有的生物具有共同的祖先，但该观点不属于现代生物进化理论，C错误；
D、生物进化的过程实际上是生物与生物、生物与无机环境协同进化的过程；生物多样性是协同进化的结果，属于现代生物进化理论观点，D正确。
故选D。
8. 人体骨骼肌受到牵拉而过度收缩时，会引起骨骼肌内的腿梭兴奋，通过脊髓中抑制性中间神经元的作用，抑制α-运动神经元的活动，使受拉的肌肉舒张，这种现象称为反牵张反射，该过程的反射弧结构如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 腱梭属于反牵张反射弧的感受器
B. 抑制性中间神经元接受的是兴奋性神经递质
C. 刺激①处，可在②处检测到膜外电位由正变负
D. 反牵张反射能防止肌肉因过度牵拉而受到损伤
【答案】C
【解析】
【分析】据图分析：图中腱梭是感受器，骨骼肌是效应器，还有传入神经和两种传出神经，神经中枢的突触由突触前膜、突触间隙、突触后膜构成。
【详解】A、根据神经中枢中突触的方向可以判断腱梭属于反牵张反射弧的感受器，A正确；
B、根据神经中枢中突触的方向判断①是传入神经，②是传出神经，感受器产生兴奋之后通过传入神经再到脊髓的抑制神经元，抑制性中间神经元接受的是兴奋性神经递质，B正确；
C、刺激①处，产生兴奋传到抑制中间神经元，抑制神经元产生抑制性神经递质传到②，检测不到兴奋，膜外电位不会由正变负，C错误；
D、由题干可知反牵张反射能防止肌肉因过度牵拉而受到损伤，D正确。
故选C。
9. 尿崩症是由于抗利尿激素缺乏，或肾脏对抗利尿激素敏感性缺陷，导致肾小管重吸收水功能障碍的一组临床综合征。前者为中枢性尿崩症，后者为肾性尿崩症，其临床特点为多尿烦渴低渗尿。下列分析错误的是（ ）
A. 禁水一段时间后，注射适量抗利尿激素可初步诊断患者的尿崩症类型
B. 肾小管细胞的抗利尿激素受体基因甲基化程度增强可能导致肾性尿崩症
C. 血浆渗透压升高可使尿崩症患者的下丘脑渗透压感受器产生兴奋
D. 尿崩症患者的尿液渗透压比正常人低是因为原尿中的Na+被重吸收
【答案】D
【解析】
【分析】当人体失水过多或吃的食物过咸，细胞外液渗透压升高，刺激下丘脑渗透压感受器，由下丘脑产生、垂体释放的抗利尿激素增加，促进肾小管、集合管重新吸收水分，减少尿量的排出，同时大脑皮层渴觉中枢兴奋产生渴觉，主动饮水，以降低细胞外液渗透压。
【详解】A、抗利尿激素的靶器官是肾脏，禁水一段时间后，细胞外液渗透压升高，注射适量的抗利尿激素，若患者细胞外液渗透压无明显变化，则可能是肾性尿崩症，反之则为中枢性尿崩症，A正确；
B、甲基化可影响基因的表达，所以肾小管细胞的抗利尿激素受体基因甲基化程度增强可能导致肾脏对抗利尿激素不敏感，因此导致肾性尿崩症，B正确；
C、尿崩症是由于抗利尿激素缺乏，或肾脏对抗利尿激素敏感性缺陷引起的，因此血浆渗透压升高依然可使尿崩症患者的下丘脑渗透压感受器产生兴奋，C正确；
D、发生尿崩时，由于大量水分进入尿液，导致尿液渗透压降低，D错误。
故选D。
10. 下列关于“探索生长素类调节剂促进插条生根的最适浓度”实验的说法，正确的是（ ）
A. 沾蘸法要求溶液浓度较低，且是空气湿度较大、遮阴的环境
B. 可以参考实验所用植物体内天然生长素的含量，设置合理的浓度梯度
C. 研究不同浓度生长素类调节剂的影响时，处理时间的长短可以不一致
D. 用不同浓度的生长素类调节剂处理插条，不可能获得相同的生根数目
【答案】B
【解析】
【分析】探索生长素类调节剂促进插条生根的最适浓度的实验中，自变量是生长素类调节剂的浓度，因变量是促进或抑制生根能力强弱，检测指标是插条生根数量，无关变量包括：侧芽的数目、溶液处理的时间等，无关变量会影响实验的结果，因此应保持相同且适宜。
【详解】A、浸泡法要求溶液浓度较低，且是空气湿度较大、遮阴的环境，A错误；
B、不同植物促进插条生根最适浓度不同，可以参考实验所用植物体内天然生长素的含量，设置合理的浓度梯度，B正确；
C、研究不同浓度生长素类调节剂的影响时，处理时间的长短应保持一致，C错误；
D、用不同浓度的生长素类调节剂处理插条，可能获得相同的生根数目，D错误。
故选B。
11. 如图表示甲、乙两个种群先后迁人某生态系统后的种群数量变化曲线。下列相关说法错误的是（ ）
A. 0~t2时间段，甲种群的增长曲线为“S”形
B. 甲种群与乙种群的种间关系为捕食，乙为捕食者
C. 若乙种群在t1时刻迁入，则甲种群就不会达到环境容纳量
D. 甲、乙两种群可能会降低原有生态系统中的群落物种丰富度
【答案】C
【解析】
【分析】分析曲线可知：在0~t3时间段，甲种群的数量增长呈S型，乙种群迁入后，甲种群数量开始波动，甲乙种群数量出现不同步的变化，说明乙捕食甲。
【详解】A、0~t2时间段，甲种群的增长曲线为“S”形，A正确；
B、根据甲乙种群数量变化曲线呈现先增加者先减少的变化趋势，可知乙种群和甲种群的种间关系是捕食，其中甲种群是被捕食者，B正确；
C、若乙种群在t1时刻迁入，可能会降低甲种群的环境容纳量，但是甲种群仍会达到新的环境容纳量，C错误；
D、甲、乙两种群可能会降低原有生态系统中的群落物种丰富度，D正确。
故选C。
12. 下列关于生命系统中信息传递的叙述，错误的是（ ）
A. 细胞之间的信息传递必须借助于细胞膜上的受体
B. 激素、神经递质是生命系统中常见的信息分子
C. 不同生物间传递的物理信息可以不依赖具体的信息分子
D. 生态系统中的信息传递可促进能量流动和物质循环
【答案】A
【解析】
【分析】1、细胞间的信息交流主要有三种方式：（1）通过化学物质来传递信息；（2）通过细胞膜直接接触传递信息；（3）通过细胞通道来传递信息，如高等植物细胞之间通过胞间连丝。
2、信息传递在生态系统中的作用：（1）个体：生命活动的正常进行，离不开信息的作用。（2）种群：生物种群的繁衍，离不开信息传递。（3）群落和生态系统：能调节生物的种间关系，维持生态系统的稳定。
【详解】A、生物体内细胞之间的信息传递不是都必须依赖细胞膜上的受体的识别，如高等植物细胞之间通过胞间连丝进行信息交流，A错误；
B、激素、神经递质是生命系统中常见的信息分子：激素可通过与靶器官或靶细胞上的受体结合起作用，而神经递质与突触后膜上的受体结合起作用，B正确；
C、生态系统中的信息传递不一定依赖于信息分子，如物理信息可通过光、声音等进行传递，C正确；
D、生态系统的基本功能包括能量流动、物质循环和信息传递。生态系统的信息传递是指各种信息在生态系统的组成成分之间和组成成分内部的交换与流动，生态系统中的信息传递可促进能量流动和物质循环，D正确。
故选A。
13. 相传，酒祖杜康的儿子在长江边上开了个酒糟房，他把酒糟和江水搅拌后，封存在缸中。到了第21天的酉时才想起自己的酒，开缸一闻，香气扑鼻；舌尖咂磨，酸中带甜；浇到菜里，菜味鲜美。酒没酿出来，倒酿出来一味好佐料。他高兴地琢磨，21天后的酉时，就在酉字后面加上昔(廿一日)，造出了“醋”字。根据上述材料，下列相关分析正确的是（ ）
A. 酒糟只提供发酵所需的微生物
B. 传统发酵以混合菌种的液体发酵为主
C. 酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分
D. 酒和醋的原料和工艺流程相同，但二者的发酵条件不同
【答案】C
【解析】
【分析】酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。醋的制作离不开醋酸菌，醋酸菌属于好氧性细菌。
【详解】A、酒糟不仅提供发酵所需的微生物还提供了原料，A错误；
B、传统发酵是以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，B错误；
C、酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分，C正确；
D、酒和醋的原料和工艺流程不完全相同，发酵条件也不同，D错误。
故选C。
14. 养殖池中存在的有毒物质主要是氨和亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用。研究人员从养殖池的池泥中分离出硝化细菌并进行计数。下列相关说法错误的是（ ）
A. 取样用的铲子和试管使用前后都需要灭菌
B. 对硝化细菌的计数可采用稀释涂布平板法
C. 分离硝化细菌的培养基为含亚硝酸盐的牛肉膏蛋白胨培养基
D. 为保证结果准确，要选择菌落数为30~300的平板进行计数
【答案】C
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、取样用的铲子和试管使用前后都需要灭菌，防止污染，A正确；
B、对硝化细菌的计数可采用稀释涂布平板法，B正确；
C、分离硝化细菌的培养基为选择培养基，应以亚硝酸盐或氨为唯一氮源，C错误；
D、为保证结果准确，要选择菌落数为30~300的平板进行计数，避免因误差过大而影响计数，D正确。
故选C。
15. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞。下列叙述错误的是（ ）
A. 内细胞团经过一定处理后，可获得胚胎干细胞
B. 囊胚外边的透明带保持完整是胚胎继续发育的基础
C. 为获得更多的早期胚胎，通常用激素处理雌鼠使其超数排卵
D. 胚胎干细胞具有全能性，经定向诱导可获得多种功能细胞
【答案】B
【解析】
【分析】根据胚胎形态的变化，可将早期发育的胚胎分为桑椹胚、囊胚、原肠胚等几个阶段。胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，具有发育的全能性可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。在体外培养条件下，胚胎干细胞可以增殖而不发生化，可以进行冷冻保存也可进行遗传改造。
【详解】A、囊胚期的内细胞团可以分化为胚胎干细胞，离体培养可以得到胚胎干细胞系，A正确；
B、透明带在囊胚形成并长大后破裂，这个过程称为囊胚孵化。囊胚孵化是哺乳动物中胚胎着床前的必要步骤，只有在脱去透明带之后着床才可以发生，B错误；
C、为了获得更多的囊胚，可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，C正确；
D、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，胚胎干细胞具有全能性，D正确。
故选B。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 下图为酵母菌线粒体内的部分呼吸链，这些按特定顺序排列的蛋白质，被称为呼吸链的成员。前面的成员接受电子，又传递给下一个成员，同时将H+泵出到膜间隙。在电子传递的过程中，有机物逐步释放能量，并将其中的一部分能量储存在ATP分子中。下列说法错误的是（ ）
A. I、Ⅱ、Ⅲ会使线粒体内膜形成外高内低的H+浓度差
B. 图中NADH是还原型辅酶I，可催化某些化学反应
C. 图中F1，既是转运蛋白，又与ATP的形成有关
D. 提供充足的氧气更有利于脂肪的分解
【答案】B
【解析】
【分析】蛋白复合体（I、Ⅱ、Ⅲ）可以传递有机物分解产生的电子，同时又将H＋运输到膜间隙，使膜两侧形成H＋浓度差；H＋通过ATP合成酶以被动运输的方式进入线粒体基质，并驱动ATP生成；H＋可以通过 F1蛋白由膜间隙跨膜运输到线粒体基质。
【详解】A、H＋通过I、Ⅱ、Ⅲ的运输会导致线粒体基质的H＋减少，从而线粒体内膜形成外高内低的H+浓度差，A正确；
B、图中NADH是还原型辅酶I，被氧化为氧化型辅酶Ⅰ，没有催化化学反应，B错误；
C、F1在线粒体内膜上既可充当载体蛋白起运输作用，还可以充当酶来催化ATP的合成，C正确；
D、在分解脂肪时，由于脂肪的H含量比糖高，通过该电子传递链消耗的氧将增加，故提供充足的氧气更有利于脂肪的分解，D正确。
故选B。
17. 某雌雄异株植物的性别决定方式为XY型，其花色有黄色、白色和橙红色三种，由等位基因A、a(在常染色体上)和等位基因B、b共同控制，已知无A基因时植株开白花。下表为两组杂交实验的结果，F1自由交配获得F2，下列说法正确的是（ ）
组别 亲本 F1 F2
母本 父本
甲 黄色1 白色1 橙红色 黄色:白色:橙红色=3:4:9
乙 黄色2 白色2 橙红色 黄色:白色:橙红色=1:4:3
A. 根据表中甲组的实验结果就可推知，该植物花色的遗传遵循自由组合定律
B. 若要判断基因B、b是否在性染色体上，则需统计甲组F2中黄色或橙红色个体的雌雄比
C. 乙组F2比例异常的原因是F1植株缺失基因A所在的染色体片段导致雄配子致死
D. 基因决定花色体现了基因通过控制蛋白质的合成直接控制生物体的性状
【答案】AB
【解析】
【分析】1、甲组，根据甲组的实验结果，子二代出现了黄花：白花：橙红花=3：4：9（9:3:3:1的变式），可推测花色遵循自由组合定律，甲组F1的橙红花基因型为AaBb，则AaBb表现为橙红花，A_bb表现为黄花，aa__表现为白花；
2、乙组中黄花和白花只产生了橙红花，则亲本基因型为AAbb×aaBB，F1基因行为AaBb。
【详解】A、根据甲组的实验结果，子二代出现了黄花：白花：橙红花=3：4：9（9:3:3:1的变式），可推测花色遵循自由组合定律，A正确；
B、若要判断基因B、b是否在性染色体上，则需统计甲组F2中黄色或橙红色个体的雌雄比，如果雌雄比不同则B、b在性染色体上，否则不在性染色体上，B正确；
C、根据分析，子一代基因型为AaBb，若含A的雄配子致死，父本产生配子的基因型是aB：ab=1：1，母本产生的配子的类型及比例是AB：Ab：aB：ab=1：1：1：1，运用棋盘法可得：后代的表现型及比例是红花：黄花：白花=3：1：4，雌配子A致死与雄配子A致死结果相同；若含a的雄配子致死，父本产生配子AB：Ab=1：1，母本产生配子AB：Ab：aB：ab=1：1：1：1，后代没有aa__个体，即后代没有白色个体，与结果不符合，因此是A基因所在染色体发生缺失，可能是雄配子致死，也可能是雌配子致死，C错误；
D、由题干“无A基因时植株开白花”可知，该花色的表现体现了基因通过控制酶的合成控制生物代谢进而控制生物体的性状的，D错误。
故选AB。
18. 2023年诺贝尔生理学或医学奖授予卡塔琳·卡里科和德鲁·魏斯曼，表彰他们在mRNA疫苗领域中的突出贡献。新冠病毒疫苗包括灭活病毒疫苗、mRNA疫苗等多种类型。下图是新冠病毒mRNA疫苗发挥作用的示意图，序号表示过程。下列分析正确的是（ ）
A. 过程②需要mRNA、rRNA和tRNA参与，并消耗氨基酸、ATP等物质
B. mRNA疫苗进入细胞的方式是胞吞，该过程不需要细胞膜上的蛋白质参与
C. 过程⑤⑥可说明B细胞和细胞毒性T细胞都含有能与细胞因子结合的受体
D. 与灭活病毒疫苗相比，mRNA疫苗可诱导机体发生细胞免疫以增强防御功能
【答案】ACD
【解析】
【分析】1、体液免疫：病原体侵入机体后，一些病原体被树突状细胞、B细胞等抗原呈递细胞摄取，这为激活B细胞提供了第一个信号，抗原呈递细胞将抗原处理后呈递在细胞表面，然后传递给辅助性T细胞，辅助性T细胞表面的特定分子发生变化并与B细胞结合，这为激活B细胞提供了第二个信号，辅助性T细胞开始分裂、分化，并分泌细胞因子，B细胞受到两个信号的刺激后开始分裂、分化，大部分分化为浆细胞，小部分分化为记忆B细胞，细胞因子促进B细胞的分裂、分化过程，浆细胞产生和分泌大量抗体，抗体可以随体液在全身循环并与这种病原体结合，抗体与病原体结合可以抑制病原体增殖或对人体细胞的黏附。
2、细胞免疫：病原体侵入靶细胞后，被感染的宿主细胞（靶细胞）膜表面某些分子发生变化，细胞毒性T细胞识别这一变化信号，之后开始分裂并分化，形成新的细胞毒性T细胞和记忆细胞，细胞因子能加速这一过程，新形成的细胞毒性T细胞在体液中循环，他们可以识别并接触、裂解被同样病原体感染的靶细胞，靶细胞裂解死亡后，病原体暴露出来，抗体可以与之结合，或被其他细胞吞噬掉。
【详解】A、过程②是以mRNA为模板合成病毒蛋白S的过程，属于翻译过程，需要mRNA、rRNA和tRNA参与，并消耗氨基酸、ATP等物质，A正确；
B、mRNA疫苗进入细胞的方式是胞吞，该过程首先是大分子与膜上的蛋白质结合，需要膜上蛋白质参与，B错误；
C、过程⑤是细胞因子促进B细胞的增殖和分化，过程⑥是细胞因子促进细胞毒性T细胞的增殖和分化，可说明B细胞和细胞毒性T细胞都含有能与细胞因子结合的受体，C正确；
D、传统灭活病毒疫苗和重组蛋白疫苗，一般都只能诱导体液免疫（抗原肽不能侵入人体细胞内，仅在内环境中发挥抗原作用），而mRNA疫苗在人体细胞内表达，可同时诱导体液免疫和细胞免疫，增强防御功能，D正确。
故选ACD。
19. 科研人员追踪了某地退耕还林后的物种变化，群落演替的变化规律为草本植物阶段→灌木阶段→乔木阶段。下列叙述正确的是（ ）
A. 草本植物和灌木可以为乔木的生长提供适宜条件
B. 随着灌木和乔木的兴起，一些耐阴的草本植物被逐渐淘汰
C. 随着退耕时间的延长，该地生态系统的稳定性会越来越高
D. 与灌木阶段相比，乔木阶段群落对环境资源的利用更充分
【答案】AD
【解析】
【分析】1、群落演替：随着时间的推移，一个群落被另一个群落代替的过程。
2、人类可以砍伐树木，填湖造地、捕杀动物，也可以封山育林、治理沙漠、管理草原，甚至可以建立人工群落。人类活动往往会使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向进行。
【详解】A、群落演替过程中，随着环境和生物之间的相互作用，草本植物和灌木可以为乔木的生长提供适宜条件，A正确；
B、随着灌木和乔木的兴起，一些耐阴的草本植物会减少，但不会被淘汰，B错误；
C、随着退耕时间的延长，该地生态系统的抵抗力稳定性会越来越高，但恢复力稳定性会越来越低，C错误；
D、与灌木阶段相比，乔木阶段群落空间结构更复杂，对环境资源的利用更充分，D正确。
故选AD。
20. 下表为几种限制酶的识别序列及其切割位点，由此推断，下列说法正确的是（ ）
限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点
BamH I 5'-G↓GATCC -3' Kpn I 5' - CGTAC↓C-3'
EcoR I 5' -C↓AATTC -3' Sau3A I 5'-↓GATC-3'
Hind II 5' - GTY↓RAC -3' Sma I 5'- CCC↓GGG -3'
注：Y为C或T，R为A或G。
A. HindII能识别GTCAAC序列，也能识别GTTAAC序列
B. Sau3A I和EcoRI破坏的都是识别序列中心轴线处的磷酸二酯键
C. BamHI和KpnI两种限制酶可识别相同的序列但切割后形成不同的黏性末端
D. HindII、SmaI两种限制酶的切割位点在识别序列中心轴线上，因而形成平末端
【答案】AD
【解析】
【分析】限制酶能识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点进行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。
【详解】A、当Y为C，R为A时，Hind II的识别序列为GTCAAC序列，当Y为T，R为A时，识别序列为GTTAAC序列，A正确；
B、Sau3A I识别序列为5'-↓GATC-3'，切割后形成的末端为黏性末端GATC-3'，破坏的是识别序列中心轴线两侧的磷酸二酯键，B错误；
C、BamHI和KpnI两种限制酶识别序列不同，但切割后可形成相同的黏性末端GATC -3'，C错误；
D、由表格可知，HindII、SmaI两种限制酶的切割位点在识别序列中心轴线上，因而形成平末端，D正确。
故选AD。
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 某实验小组为验证KHCO3对某植物幼苗光合作用的影响，进行了甲、乙两组不同处理的实验。甲组制备了叶绿体悬液，乙组将等量植物幼苗叶片切割成1mm2的叶小片分别进行实验，然后在适宜光照、20℃恒温条件下用氧电极测量这两组植物的O2释放速率，结果如图1所示。请回答下列问题：
（1）通常情况下，分离出细胞中的叶绿体的方法是_____________。本实验的自变量是______________。
（2）清水组的叶小片中无O2释放，原因最可能是____________。有同学认为KHCO3浓度为0.05mol·L-1时，两组实验的O2释放速率存在差异的原因是光合速率不同，你____________(填“认同”或“不认同")此观点，理由是__________。
（3）科研人员通过研究拟南芥发现，与WT(野生型)相比，突变体t1和t2在正常光照条件下，叶绿体在叶肉细胞中的分布及位置不同(如图2所示，不考虑叶绿体的运动)，进而引起光合速率差异，但三者叶绿素含量及其他性状基本一致。
①据图2分析，引起三者光合速率差异的主要原因是____________不同。
②植物光合速率与细胞呼吸速率相等时的光照强度，称为光补偿点。据图2分析，t1和t2相比，光补偿点更高的是____________，判断依据是____________。
【答案】21. ①. 差速离心法 ②. KHCO3的浓度及对叶片的处理方式
22. ①. CO2浓度低，此时叶小片的光合速率小于或等于呼吸速率（或CO2浓度低，此时叶小片的净光合速率小于或等于0） ②. 不认同 ③. 甲组测的是叶绿体释放O2的速率（即总光合速率），而乙组测的是叶小片释放O2的速率（即净光合速率），有无呼吸作用消耗O2是二者O2释放速率存在差异的原因
23. ①. 叶肉细胞向光面的叶绿体分布数量 ②. t2 ③. t1叶肉细胞向光面的叶绿体较多，t2叶肉细胞向光面的叶绿体较少，因此，t2需要更强的光照才能达到光补偿点
【解析】
【分析】光合作用固定二氧化碳的速率，即单位时间单位叶面积的二氧化碳固定（或氧气产生）量，也称光合强度；呼吸作用是植物在单位时间内吸收的二氧化碳的含量。
【小问1详解】
通常情况下，分离出细胞中的叶绿体的方法是差速离心法。本实验中KHCO3的浓度不同，甲乙两组的叶片处理方式也不同，故本实验的自变量是KHCO3的浓度以及对叶片的处理方式
【小问2详解】
加入清水组的叶小片中无O2释放，原因可能是CO2浓度低，此时叶小片的光合速率小于或等于呼吸速率（或CO2浓度低，此时叶小片的净光合速率小于或等于0）。净光合速率=光合速率-呼吸速率，KHCO3浓度为0.05mol·L-1时，两组实验的O2释放速率存在差异的原因是甲组测得的叶绿体O2释放速率为总光合速率，而叶小片中测得的O2释放速率为净光合速率，二者的不同主要在于有无呼吸作用消耗O2。
【小问3详解】
①分析图2可知，三者在向光面的叶绿体数目t1>t2>WT，引起三者光合速率差异的主要原因是叶肉细胞向光面的叶绿体分布数量不同。
②分析图2可知三者在向光面的叶绿体数目t1>t2，t1和t2相比，t1叶肉细胞向光面的叶绿体较多，t2叶肉细胞向光面的叶绿体较少，因此，t2需要更强的光照才能达到光补偿点，光补偿点更高的是t2。
22. 糖尿病患者数量呈逐年上升趋势，此现象引起人们广泛关注。血糖平衡对机体生命活动具有重要作用，机体内有多种激素参与血糖浓度的调节。请回答下列问题：
（1）可升高血糖的激素有多种，除胰高血糖素外，还有__________________(答出三种)。从血糖去向角度分析，胰岛素降低血糖的途径为________________。
（2）研究者研制了一种“智能”胰岛素(IA)，IA中的X能够抑制GT(葡萄糖进入细胞的载体蛋白)的功能。为测试葡萄糖对IA与GT结合的影响，将足量的带荧光标记的IA加入红细胞膜悬液中处理30分钟，使IA与膜上的胰岛素受体、GT充分结合后，再分别加入葡萄糖至不同的终浓度，10分钟后检测膜上的荧光强度。
图2结果可说明，随着悬液中葡萄糖浓度的升高，IA与GT的结合量____________，出现该现象的原因可能是__________。
（3）研究表明，长期肠道菌群失调引起的炎症反应可能导致抑郁症，抑郁症程度越严重的大鼠对糖水的偏好度越低，明暗箱实验中停留在明箱的时间越短。已知饲喂药物M可缓解大鼠的肠道炎症，进而治疗其抑郁症，而L-茶氨酸对抑郁症也有疗效。科研人员为了探究L-茶氨酸治疗大鼠抑郁症的机制是否与药物M一致，进行了实验。实验材料与用具：因肠道炎症而患抑郁症的模型鼠多只、正常鼠多只、L-茶氨酸、药物M、生理盐水、糖水及明暗箱。
①本实验的自变量是_________。
②本实验的因变量是_________。
③本实验的实验思路是________________________，相同条件下培养一段时间后，检测各组大鼠对糖水的偏好度和停留在明箱的时间，以及大鼠肠道中菌群的种类和数量、炎症情况等。
【答案】22. ①. 甲状腺激素、肾上腺素、糖皮质激素 ②. 促进血糖进入组织细胞进行氧化分解，进入肝、肌肉并合成糖原，进入脂肪细胞和肝细胞转变为甘油三酯
23. ①. 降低 ②. 葡萄糖会与IA竞争结合GT
24. ①. 大鼠是否患抑郁症、饲喂药物的种类 ②. 各组大鼠对糖水的偏好度和停留在明箱的时间，大鼠肠道中菌群的种类和数量、炎症情况等 ③. 取一定数量正常大鼠为A组，取抑郁症程度一致的模型鼠随机均分为B、C、D三组，各组数量与A组相同；A、B两组每日饲喂适量的生理盐水，C组饲喂添加适量药物M的等量生理盐水，D组饲喂添加适量L-茶氨酸的等量生理盐水
【解析】
【分析】当血糖浓度升高到一定程度时，胰岛B细胞的活动增强，胰岛素分泌量明显增加。体内胰岛素水平的上升，一方面促进血糖进入组织细胞进行氧化分解，进入肝、肌肉合成糖原，进入脂肪组织细胞转变为甘油三酯；另一方面又能抑制肝糖原的分解和非糖物质转变葡萄糖。当血糖浓度降低时，胰岛A细胞的活动增强，胰高血糖素的分泌量增加。胰高血糖素主要作用于肝，促进肝糖原分解为葡萄糖进入血液，促进非糖物质转变为糖，使血糖浓度回升正常水平。
【小问1详解】
可升高血糖的激素有多种，除胰高血糖素外，还有甲状腺激素、肾上腺素、糖皮质激素。胰岛素通过促进血糖进入组织细胞进行氧化分解，进入肝、肌肉并合成糖原，进入脂肪细胞和肝细胞转变为甘油三酯来降低血糖。
【小问2详解】
葡萄糖会与IA竞争结合GT，通过增大葡萄糖浓度，IA与GT的结合量会降低。
【小问3详解】
①本实验探究L-茶氨酸治疗大鼠抑郁症的机制是否与药物M一致，利用因肠道炎症而患抑郁症的模型鼠和正常鼠进行实验，因此自变量是大鼠是否患抑郁症、饲喂药物的种类。
②长期肠道菌群失调引起的炎症反应可能导致抑郁症，抑郁症程度越严重的大鼠对糖水的偏好度越低，明暗箱实验中停留在明箱的时间越短，因此本实验因变量是进行实验处理后，各组大鼠对糖水的偏好度和停留在明箱的时间，大鼠肠道中菌群的种类和数量、炎症情况等。
③本实验的实验思路是取一定数量正常大鼠为A组作为对照组，取抑郁症程度一致的模型鼠随机均分为B、C、D三组，各组数量与A组相同；A、B两组每日饲喂适量的生理盐水，C组饲喂添加适量药物M的等量生理盐水，D组饲喂添加适量L-茶氨酸的等量生理盐水，相同条件下培养一段时间后，检测各组大鼠对糖水的偏好度和停留在明箱的时间，以及大鼠肠道中菌群的种类和数量、炎症情况等，如果饲喂L-茶氨酸和药物M两组的因变量数值相似，则作用机制一致。
23. 下图表示某生态系统部分营养级之间关系及部分能量值(单位：J·m-2·a-1)。请回答下列问题：
（1）生态系统的能量流动是指生态系统中能量的____________、____________、转化和散失的过程；生态系统中的能量通过____________依次传递。
（2）图中的“草→草食性动物→肉食性动物①→肉食性动物②”________(填“能”或“不能”)表示一条食物链，判断依据是________。
（3）由草食性动物到肉食性动物①的能量传递效率是_________%，肉食性动物①用于自身生长、发育和繁殖等生命活动的能量占同化量的比例是________%(保留2位小数)。
（4）肉食性动物②会用自己的耳朵辨别肉食性动物①的声音，肉食性动物①会根据肉食性动物②的气味躲避猎捕，此过程涉及的信息类型有___________，由此可见，信息传递具有的作用体现在____________。
【答案】23. ①. 输入 ②. 传递 ③. 食物链（和食物网）
24. ①. 不能 ②. 草、草食性动物与肉食性动物的种类均不止一种，因此不能表示一条食物链
25. ①. 3 ②. 3.11
26. ①. 物理信息、化学信息 ②. 调节生物的种间关系，从而维持生态系统的平衡与稳定
【解析】
【分析】能量流动的特点：
1、单向流动：能量流动只能沿食物链由低营养级流向高营养级，不可逆转，也不能循环流动；同时各营养级通过呼吸作用所产生的热能不能被生物群落重复利用，因此能量流动无法循环。
2、逐级递减：输入到某一营养级的能量中，只有10%~20%的能量能够传递到下一营养级。
【小问1详解】
生态系统的能量流动是指生态系统中能量的输入、传递、转化和散失的过程；生态系统中的能量通过食物链（和食物网）依次传递。
【小问2详解】
图中的“草→草食性动物→肉食性动物①→肉食性动物②”不能表示一条食物链，草、草食性动物与肉食性动物的种类均不止一种，因此不能表示一条食物链。
【小问3详解】
草食性动物到肉食性动物①的能量传递效率是（2.25×107）÷（7.50×108）×100%=3%，肉食性动物①用于自身生长、发育和繁殖等生命活动的能量占同化量的比例是（7.50×108-7.15×108）÷7.50×100%=3.11%。
【小问4详解】
肉食性动物①的声音属于物理信息，肉食性动物②的气味属于化学信息；肉食性动物②会用自己的耳朵辨别肉食性动物①的声音，肉食性动物①会根据肉食性动物②的气味躲避猎捕，说明信息传递可以调节生物的种间关系，从而维持生态系统的平衡与稳定。
24. 拟南芥(2N=10)是自花受粉植物，基因高度纯合，易获得突变型，是遗传学实验中常见的模式植物。请回答下列问题：
（1）拟南芥叶片边缘的光滑(M)对锯齿状(m)为显性，基因M/m位于2号染色体上。2号染色体上成功导入抗盐基因(D)且叶片边缘锯齿状的植株与叶片边缘光滑的纯合植株杂交，从F1中筛选出抗盐植株与正常的叶片边缘锯齿状的植株进行测交，发现测交后代中叶片边缘光滑且抗盐的植株占20%，试分析其原因：_____________。据此推测，让F1中的抗盐植株进行自交，所得F2中叶片边缘光滑且抗盐的纯合植株所占比例为____________。
（2）拟南芥的A基因决定雄配子育性，A基因失活会使可育雄配子减少1/3；B基因存在时种子萌发，但在种子中来自亲代母本的B基因不表达。研究者将某种抗性基因插人野生型植株(AABB)的A基因或B基因内部，获得了“敲除”A基因的抗性植株甲(基因型表示为AaBB)和“敲除”B基因的抗性植株乙(基因型表示为AABb)。
①进行杂交实验：甲(♂)×乙(♀)，则所结种子中，基因型为AaBb的种子所占比例为________。
②让上述杂交实验所得子代中基因型为AaBb的植株自交，若后代种子中可萌发种子占1/2，则表明A、B基因在染色体上的位置关系是____________________，作出该判断的依据是____________。
③基于以上推论将基因型为AaBb的种子作为父本与抗性植株甲(AaBB)作为母本进行杂交，所得子代中有抗性且可萌发种子的比例为________，子代中有抗性但不能萌发种子所占比例为________。
【答案】24. ①. 从F1中筛选出的抗盐植株在减数分裂产生配子的过程中发生了染色体互换 ②. 4%
25. ①. 1/5 ②. A、B基因位于非同源染色体上 ③. 基因型为AaBb的植株产生含B基因的雄配子占1/2，而雌配子中B基因不表达，只有A、B基因位于非同源染色体上时，后代种子中可萌发种子才占1/2，符合题中比例 ④. 7/20 ⑤. 1/2
【解析】
【分析】1、自由组合定律的实质：控制不同性状的遗传因子的分离和组合是互不干扰的；在形成配子时，决定同一性状的成对的遗传因子彼此分离，决定不同性状的遗传因子自由组合。
2、基因分离定律的实质：在杂合子的细胞中，位于一对同源染色体上的等位基因，具有一定的独立性；生物体在进行减数分裂形成配子时，等位基因会随着同源染色体的分开而分离，分别进入到两个配子中，独立地随配子遗传给后代。
【小问1详解】
根据题意基因M/m、抗盐基因(D)位于2号染色体上，且m基因与抗盐基因(D)位于一条染色体上，如果mm带有抗除草剂基因记为＋，因此该植株基因型是mm+，和MM杂交，F1中有抗性植株的基因型是Mm+，当其进行测交，理论上子代表现为Mm和m+m，且比例为1: 1，现出现了20％的个体表现为叶片边缘光滑且抗盐，即M+m，从F1中筛选植株在减数分裂产生配子时，则子代有20％的配子发生了互换，所以若让F1中筛选出的抗盐植株自交，F2中获得边缘光滑且抗盐的纯合植株（M+M+）所占的比例为20%×20%=4%。
【小问2详解】
①进行杂交实验：甲AaBB(♂)×AABb乙(♀)，母本产生的配子种类和比例为：AB:Ab=1: 1，由于"A基因失活会使雄配子育性减少1/3。"，父本产生的雄配子的种类和比例为AB:aB=3:2，因此F1种子中，基因型为AaBb的所占比例1/3×2/5=1/5。
②子代中基因型为AaBb的植株自交，若A、B基因位于一对同源染色体上，则F1中基因型为AaBb作母本产生的配子类型为Ab：aB=1：1，作父本产生的配子类型Ab：aB=3：2；B基因存在时种子萌发，但在种子中来自亲代母本的B基因不表达，即而雌配子中B基因不表达，故产生后代的基因型为3/10AAbb（不萌发）、3/10AaBb(不萌发，B来自于母本），2/10AaBb（萌发），2/10aaBB（萌发）不符合题意。若A、B基因位于非同源染色体上基因型为AaBb的植株产生含B基因的雄配子占1/2，而雌配子中B基因不表达，只有A、B基因位于非同源染色体上时，后代种子中可萌发种子才占1/2，符合题中比例。
③将基因型为AaBb的种子作为父本与抗性植株甲(AaBB)作为母本进行杂交，产生的雌配子为AB:aB=1:1，产生的雄配子为AB:Ab:aB:ab=3:3:2:2，A基因决定雄配子育性，A基因失活会使可育雄配子减少1/3；B基因存在时种子萌发，但在种子中来自亲代母本的B基因不表达，研究者将某种抗性基因插人野生型植株(AABB)的A基因或B基因内部，含a或b基因则具有抗性，故子代为3/20AABB（萌发无抗性，B一个来自于母本、一个来自父本）、3/20AABb（不萌发有抗性，B来自于母本）、2/20AaBB（萌发有抗性，B一个来自于母本、一个来自父本），2/20AaBb（不萌发有抗性，B来自于母本）、3/20AABb（萌发有抗性）、3/20AAbb（不萌发有抗性）、2/20AaBb（萌发有抗性）、2/20Aabb（不萌发有抗性）；所得子代中有抗性且可萌发种子的比例为7/20，子代中有抗性但不能萌发种子所占比例为1/2。
25. CRISPR/Cas9基因编辑技术可以按照人们的意愿精准剪切、改变任意靶基因的遗传信息，从而达到基因定点敲除、插入、突变的目的。在该基因编辑技术中，sgRNA是根据靶基因设计的引导RNA，准确引导Cas9切割与sgRNA配对的靶基因DNA序列。请回答下列问题：
（1）Cas9可准确切割与sgRNA配对的靶基因DNA序列，由此可见，Cas9在功能上属于______酶，该过程体现了酶具有______性；此外，Cas9可准确切割靶基因DNA序列还依赖于sgRNA与靶基因DNA序列之间的___________。
（2）sgRNA是人工合成的一段能与靶基因互补配对的特殊序列，由23个连续的碱基组成。研究发现，sgRNA有时会出现脱靶问题，试分析其原因可能是________；解决措施是_________。
（3）为了实现某基因的特异性敲除，如图1所示，科学家将含有3个不同的但靶向相同基因的sgRNA编码基因的重组质粒组装到具有特殊元件的载体上，形成新的重组质粒。
注：eflap是能够驱动基因广泛表达的启动子；EGFP是增强型绿色荧光蛋白基因；I-SecI是归位内切酶，可将质粒随机插入目标生物的基因组中。
理论上，一个sgRNA便能实现靶基因的敲除，请分析构建图1所示重组质粒的优势：____________(答出两点)。
（4）为筛选特定D基因“敲除”的果蝇，在D基因的DNA断裂位点插入绿色荧光蛋白基因(EGFP)需构建携带有绿色荧光蛋白基因的供体质粒。把EGFP基因和His标签基因(His标签由6个组氨酸组成)连接起来构建融合基因并构建重组质粒，图2为载体、EGFP基因的结构、不同限制酶的识别序列及切割位点，欲将标签基因连接在绿色荧光蛋白基因(EGFP)编码区的首端，已知组氨酸的密码子为CAU，起始密码子为AUG。
①写出His基因模板链的碱基序列：5'-___________________________-3'。
②为构建融合基因并将其插入载体科研人员设计了一对与EGFP基因编码区两端序列互补配对的引物，设计时需在引物_______(填“A”或“B”)的5'端增加相应的限制酶识别序列和His基因的编码序列，请写出该引物开头的12个碱基序列：5'-_________-3'。
【答案】（1） ①. 限制 ②. 专一 ③. 碱基互补配对
（2） ①. sgRNA序列过短，易与靶基因以外的DNA序列互补配对而脱靶 ②. 适当增加sgRNA的长度，提高其与靶基因识别的特异性
（3）只构建一个表达载体即可，能准确插入目标生物基因组中，能通过绿色荧光进行筛选
（4） ①. ATGATGATGATGATGATGCAT ②. A ③. CAATTGATGCAT
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
1、目基因的获取：利用PCR技术扩增和化学合成法等。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法常用农杆菌转化法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态法。
4、目的基因的检测与鉴定。
【小问1详解】
Cas9可准确切割与sgRNA配对的靶基因DNA序列，Cas9在功能上属于限制酶，该过程体现了酶具有专一性；此外，Cas9可准确切割靶基因DNA序列还依赖于sgRNA与靶基因DNA序列之间的碱基互补配对。
【小问2详解】
sgRNA是人工合成一段能与靶基因互补配对的特殊序列，由23个连续的碱基组成。由于sgRNA序列过短，易与靶基因以外的DNA序列互补配对而脱靶，可以通过适当增加sgRNA的长度，提高其与靶基因识别的特异性来解决这个问题。
【小问3详解】
由图1可知，EGFP是增强型绿色荧光蛋白基因；I-SecI是归位内切酶，可将质粒随机插入目标生物的基因组中，理论上，一个sgRNA便能实现靶基因的敲除，构建图1所示重组质粒的优势有：只构建一个表达载体即可，能准确插入目标生物基因组中，能通过绿色荧光进行筛选等。
【小问4详解】
已知His标签由6个组氨酸组成，组氨酸的密码子为CAU，起始密码子为AUG，所以His基因模板链的碱基序列为：5'-ATGATGATGATGATGATGCAT-3'；设计与EGFP基因编码区两端序列互补配对的引物时要保证限制酶切割位点不能破坏EGFP基因且标签基因连接在绿色荧光蛋白基因(EGFP)编码区的首端，故需在引物A的5'端增加相应的限制酶识别序列和His基因的编码序列，由图2分析可知，选择MunI限制酶，结合组氨酸的密码子为CAU，起始密码子为AUG，引物序列为：5'-CAATTGATGCAT-3'。
