射洪中学高2022级强基班高二(下)第一学月考试
生物试题
(时间：75分钟 满分：100分)
注意事项：
1.答卷前，考生务必将自己的班级、姓名、考号填写在答题卡上。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。
3.回答非选择题时，将答案写在答题卡对应题号的位置上。写在本试卷上无效。
4.考试结束后，将答题卡交回。
第I卷(选择题)
一、选择题(共60分，每小题2分)
1. 下列关于家庭制作果酒(实验I)、果醋(实验II) 和泡菜(实验Ⅲ) 三个实验的叙述，正确的是（ ）
A. 都需要对发酵器具和原材料进行灭菌
B. 都需在发酵前期通气，发酵后期密闭
C. 实验I和Ⅲ以葡萄糖为原料，实验Ⅱ只能以酒精为原料
D. 实验Ⅱ和Ⅲ的主要菌种为原核生物，实验I的为真核生物
2. 我国早在9000年前就可以运用发酵技术获得产品，为生活增添丰富的色彩。下列说法正确的是（ ）
A. 制作果酒时，可通过控制发酵的温度、发酵液pH等措施降低杂菌使果酒变质的概率
B. 利用酵母菌进行传统酿酒过程中，需一直保持无氧的条件
C. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出
D. 腐乳鲜美的味道主要由曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起
3. 某生物活动小组分别用3种不同浓度的食盐制作泡菜，下图是活动小组记录的亚硝酸盐含量与发酵天数的关系图，下列描述正确的是（ ）
A. 结果显示食盐浓度过低会导致亚硝酸盐含量过高，传统发酵一般配制质量分数为1%—5%的盐水
B. 盐水煮沸后，立即倒入装有菜料的泡菜坛中，并使盐水没过全部菜料，盖好坛盖
C. 腌制泡菜过程中经发酵会产生多种酸，其中含量最高的酸是亚硝酸
D. 先用沸水短时间处理白萝卜块，再添加陈泡菜水可以缩短白萝卜制作泡菜的腌制时间
4. 果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，下列相关措施正确的是（ ）
A. 酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
B. 葡萄酒发酵过程中，每隔12h左右打开瓶盖一次放出CO2
C. 在果醋发酵过程中，要关闭充气口，有利于醋酸菌的代谢
D. 果酒发酵过程温度控制在18～30℃，果醋发酵温度控制在30～35℃
5. 某兴趣小组利用葡萄制作果酒和果醋，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 当缺少糖源和氧气时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
B. 当葡萄酒制作完成后，可打开瓶盖后盖上一层纱布进行葡萄醋发酵
C. 进行酒精发酵的菌种的代谢类型是异养厌氧型
D. 果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
6. 下列有关微生物培养基的配制表述错误的是（ ）
A. 培养硝化细菌的培养基中添加的铵盐可作为能量来源
B. 尿素固体培养基中的K2HPO4能用于维持培养基的pH
C. 培养光能自养型蓝细菌的培养基中不需提供有机碳源
D. 马铃薯琼脂固体培养基中的琼脂能作为酵母菌的碳源
7. 微生物培养最基本的要求是无菌操作，下列对培养基、培养皿、接种环、双手、空气所采用的灭菌或消毒方法的正确顺序依次是（ ）
①化学药剂消毒 ②高压蒸汽灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤灼烧灭菌
A. ⑤③⑤①④ B. ③②⑤④① C. ②③⑤①④ D. ②②⑤④①
8. 无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是（ ）
A. 紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果
B. 不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味
C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D. 在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
9. 微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。如图为酵母菌的纯培养的部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A. 完成步骤④的过程中，接种环共灼烧处理了5次
B. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的
C. 该接种方法可用于获得酵母菌的纯培养物
D. 接种后，待菌液被培养基吸收，将④倒置培养，皿盖上标注菌种及接种日期等信息
10. 下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，下列叙述正确的是（ ）
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂
含量(g) 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
A. 根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基
B. 蛋白胨可为目标微生物提供氮源
C. 该培养基也可用来筛选土壤中的尿素分解菌
D. 该培养基的制备流程为灭菌→加入琼脂→倒平板
11. 下列对常用的无菌操作的描述，错误的是（ ）
A. 高压蒸汽灭菌既能杀死微生物的营养细胞，也能杀死芽孢等休眠体
B. 实验中避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触
C 高温导致蛋白质变性，故不能用湿热灭菌法对培养基进行灭菌
D. 接种前、后都要灼烧试管口
12. 某种物质A（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解A．研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株。图中③将M中的菌液稀释一定倍数后，取0．1mL涂布到平板上，初步估测摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2．4x108个。相关叙述正确的是（ ）
A. 实验时，淤泥及盛有培养基摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
B. 乙中需要加琼脂和物质A等，实验需设平行重复实验，无需另外设置空白对照
C. ③接种方法为稀释涂布平板法，涂布时用涂布器蘸取菌液均匀涂布于平板上
D. 若乙平板上菌落数平均为240个，则接种的菌液的稀释倍数为105
13. 下列与某实验小组分离产脲酶菌的实验设计相关的说法，不合理的是（ ）
A. 可选择富含尿素的土壤作为样品来分离目的菌株
B. 能分解酚红指示剂使其褪色的是产脲酶菌株
C. 富集培养的目的是增加目的菌的浓度
D. 在选择培养基中添加尿素作为唯一氮源
14. 发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的分离、提纯等环节。下面有关分析正确的是（ ）
A. 优良菌种只能通过诱变育种或基因工程育种来获得
B. 扩大培养采用液体培养基，其目的是提高接种时发酵罐中菌种的数目
C. 发酵时的环境条件会影响微生物的生长繁殖，并不影响微生物代谢物的形成
D. 发酵工程产生的废弃物对环境的污染大
15. 下列有关啤酒工业化生产的叙述，正确的是（ ）
A. 工业化啤酒生产中，焙烤的目的是使淀粉酶失活
B. 糖的分解及代谢物的生成在后发酵阶段完成
C. 在啤酒的酿造过程中，适时打开发酵装置有利于提高啤酒产量
D. 啤酒的发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段
16. 下列对发酵工程及其应用的叙述，不正确的是（ ）
A. 生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉
B. 发酵工程产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身
C. 利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物生长
D. 用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取
17. 使用如图的发酵罐进行啤酒的现代化工业发酵。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 啤酒酵母在接入发酵罐前需要对其进行扩大培养
B. 通过pH检测装置检测发酵液pH可监测发酵进程
C. 发酵中期需使用叶轮搅拌发酵液以增加发酵液中的溶解氧
D. 夏季高温时，可使用冷却水对罐体进行降温处理以免发酵失败
18. 下列有关细胞全能性的叙述，正确的是（ ）
A. 玉米种子萌发长成新植株，说明植物细胞具有全能性
B. 没有离体的植物细胞也能表现出全能性
C. 植物原生质融合标志着植物细胞全能性的实现
D. 雄蜂的发育体现了已分化的动物细胞也具有全能性
19. 南方水果基地为了快速培养甘蔗，拟采用植物组织培养技术，下图是该过程中出现的不同结果。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 切取甘蔗的茎尖进行组织培养，获得脱毒苗具有抗病毒特性
B. 整个培养过程需要适宜的温度和一定的营养条件，不需要光照
C. B先通过再分化得到C，再通过再分化得到A
D. 生根、生芽时，培养基只需要α-苯乙酸生长素类调节剂
20. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ）
A. 用自然生长的茎进行组培须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒
B. 菊花组织培养中，需要三种培养基，其营养成分中的碳源应该是有机碳源
C. 组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富
D. 愈伤组织是离体的植物器官、组织或细胞经过细胞增殖与分化形成的
21. 如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（ ）
A. 培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子
B. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性
C. 需要通过植物组织培养技术获得植株只有①③④
D. 植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0（不考虑基因突变）
22. 植物细胞工程具有广泛的应用前景和实用价值，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株幼苗
B. 利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料
C. 次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养
D. 植物细胞培养技术主要利用促进细胞生长培养条件提高单个细胞中次生代谢物含量
23. 海拉细胞是一种人工培养的具有无限增殖能力的细胞，广泛应用于科学研究，极大程度地推动了医学发展。如图是海拉细胞培养部分过程，下列说法正确的是（ ）
A. 丙和丁的过程不一定会出现细胞接触抑制的现象
B. 甲→乙过程需要用胃蛋白酶或胶原蛋白酶等处理
C. 丙、丁过程中通常会通入O2和CO2的混合气体刺激细胞呼吸
D. 为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气
24. 成体干细胞是指存在于已经分化组织中的未完全分化的细胞，能自我更新且能特化形成所在组织中的一种或多种细胞。下列叙述错误的是（ ）
A. 骨髓中的造血干细胞通过分裂和分化可以产生各种血细胞
B. 神经干细胞产生神经组织的各类细胞是一个不可逆的过程
C. 成体干细胞具有全能性，可分化出所有组织细胞
D. 诱导成体干细胞分化的过程实质是基因的选择性表达
25. 为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染已免疫的B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，进而获得染色体稳定的杂交瘤细胞，基本实验流程如图。EBV转化细胞能在HAT培养基中存活，但对Oua敏感；骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下列分析正确的是（ ）
A. 杂交瘤细胞产生的抗体能针对相应抗原和EBV
B. HAT培养基可去除骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞
C. 灭活病毒诱导细胞融合的原理是促进骨髓瘤细胞核和B细胞核融合
D. 图示筛选获得的杂交瘤细胞即可在小鼠腹腔内生产单克隆抗体
26. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 植物体细胞杂交技术属于有性杂交，包括细胞融合和植物组织培养技术
B. 植物组织培养技术和动物细胞培养技术的原理相同
C. 卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法
D. 重构胚需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程
27. 实验人员对动物细胞培养过程中的动物细胞增殖情况进行统计，其变化曲线如图所示，图中B、D两点表示经筛选后继续培养。下列叙述错误的是（ ）
A. 对新鲜取材的动物组织处理时可用机械的方法使组织细胞分散
B. 体外培养的大多数种类的动物细胞能够悬浮在培养液中生长增殖
C. 将细胞制成细胞悬液进行原代培养，其增殖情况如OA段所示
D. AB段可能发生了接触抑制
28. 抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC组成及作用机制如图，下列叙述正确的是（ ）
A. 细胞毒素的特异性是ADC能选择性作用于肿瘤细胞的关键
B. ADC进入肿瘤细胞的运输方式为协助扩散
C. ADC中抗体的作用是与肿瘤细胞特异性结合，将细胞毒素带到肿瘤细胞
D. ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞坏死而杀死肿瘤细胞
29. 下列是体细胞核移植技术的相关叙述，正确的是（ ）
A. 体细胞核移植技术的原理是动物细胞核具有全能性
B. 现在的克隆技术已经相当成熟了，可以向临床推广
C. 体细胞核移植时可用取自新鲜卵巢的卵母细胞直接作为受体细胞
D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对供核动物进行了100%的复制
30. 下列叙述中，不属于动物体细胞核移植技术应用前景的是（ ）
A. 加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育
B. 可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性
C. 转基因克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白
D. 用克隆动物做疾病模型，便于更好地追踪疾病发展过程
第II卷(非选择题)
二、非选择题(共40分)
31. 下图为酿制果酒果醋的实验装置。请据图分析回答相关问题：
（1）用此装置制作葡萄酒，在酒精发酵的过程中，需要对气阀___________(填“a”或“b”)进行关闭，发酵过程中d连接长而弯曲的胶管的目的是___________。新鲜水果装入发酵瓶之前要将发酵瓶清洗干净，用___________消毒。发酵产生的酒精可在酸性条件下用___________试剂进行检测。
（2）若利用已制备的葡萄酒，继续使用此装置制作葡萄醋，需改变的条件是：①___________；②___________。
（3）实验表明，醋酸菌在气体条件适宜，糖源充足或缺少糖源时都能产生醋酸，请写出当缺少糖源时醋酸菌产生醋酸的反应简式：___________。
32. 石油对土壤的污染不仅给周边生态环境带来严重的损害，还严重影响居民的健康生活，且污染物含量越多。降解难度越大。为解决石油污染问题。某科研小组用了将近 1年的时间，从长庆油田中被石油污染最严重的土壤中分离出了高效分解石油的细菌。如图所示。回答下列问题∶
（1）配制好的培养基通常可以使用___________法灭菌。步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤③培养基中以___________为唯一碳源。在微生物学中，将___________的培养基称为选择培养基。
（2）倒平板冷却后，需要倒置，目是___________。
（3）进行过程④之前，常需要检验培养基平板灭菌是否合格，方法是___________。
（4）常采用_______法对石油分解菌进行分离和计数。该接种方法可计数的原理是_______。
33. 发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图所示。回答相关问题：
（1）在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至___________性。
（2）接种之前的过程①、②都属于___________。整个发酵过程的中心环节是___________。在发酵过程中，需要随时检测培养液中微生物的数量以及___________等，以了解发酵进程。
（3）过程③需要严格的灭菌，否则由于____，可能会导致青霉素产量下降。过程④可采用____方法将菌体分离干燥。
（4）研究发现，某些青霉菌属于维生素营养缺陷型菌株，失去合成某种维生素的能力，只有在基本培养基中补充所缺乏的维生素后才能生长。某研究小组筛选出某种维生素营养缺陷型菌株，为了进一步确定该菌株的具体类型，他们把15种维生素按照不同组合分为5个小组，用5个滤纸片分别蘸取不同小组的维生素，然后覆于接种后的琼脂平板上培养一段时间。结果如下：
组别 维生素组合
1 维生素A 维生素B1 维生素B2 维生素B6 维生素B12
2 维生素C 维生素B1 维生素D2 维生素E 烟酰胺
3 叶酸 维生素B2 维生素D2 胆碱 泛酸钙
4 对氨基苯甲酸 维生素B6 维生素E 胆碱 肌醇
5 生物素 维生素B12 烟酰胺 泛酸钙 肌醇
实验结果显示1组和2组滤纸片周围产生生长圈(图2)，则该营养缺陷型大肠杆菌不能合成的维生素是___________。若该菌株为叶酸和生物素的双营养缺陷型大肠杆菌，则其在培养基上形成菌落的位置是___________的交界处。
34. 下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题：
（1）在自然条件下，“矮牵牛”和“粉蓝烟草”进行有性杂交不能产生后代，原因是两者之间存在_______。
（2）利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的根本原因是____。
（3）植物体细胞杂交依据的生物学原理主要有________。人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类—物理法和化学法，其中化学法包括________、________，植物体细胞融合完成的标志是_______。
（4）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含_______条染色体，属于______倍体植株。
35. 我国科兴及北京生物两款新冠灭活疫苗均使用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞系）进行病毒扩增培养（见下图）。
（1）动物细胞工程常用的技术手段有多种，其中______是其他动物细胞工程技术的基础。Vero细胞的培养应在培养箱中进行，箱内的气体环境条件为______。
（2）Vero细胞的传代培养过程中需要使用______酶使细胞分散，并在合成培养基中加入______等天然成分。此外，在培养过程中，应定期更换培养液，目的是______。射洪中学高2022级强基班高二(下)第一学月考试
生物试题
(时间：75分钟 满分：100分)
注意事项：
1.答卷前，考生务必将自己的班级、姓名、考号填写在答题卡上。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。
3.回答非选择题时，将答案写在答题卡对应题号的位置上。写在本试卷上无效。
4.考试结束后，将答题卡交回。
第I卷(选择题)
一、选择题(共60分，每小题2分)
1. 下列关于家庭制作果酒(实验I)、果醋(实验II) 和泡菜(实验Ⅲ) 三个实验的叙述，正确的是（ ）
A. 都需要对发酵器具和原材料进行灭菌
B. 都需在发酵前期通气，发酵后期密闭
C. 实验I和Ⅲ以葡萄糖为原料，实验Ⅱ只能以酒精为原料
D. 实验Ⅱ和Ⅲ的主要菌种为原核生物，实验I的为真核生物
【答案】D
【解析】
【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、家庭制作果酒、果醋和泡菜，原材料不需要严格灭菌，A错误；
B、醋酸菌是好氧菌，果醋过程中需要不断通入空气，泡菜制作的乳酸菌属于厌氧型，一直需要密闭环境，B错误；
C、实验Ⅱ果醋的制作也能以葡萄糖为原料，C错误；
D、果酒使用的是酵母菌，果醋使用的是醋酸菌，泡菜使用的是乳酸菌，只有酵母菌是真核生物，即实验Ⅱ和Ⅲ的主要菌种为原核生物，实验I的为真核生物，D正确。
故选D。
2. 我国早在9000年前就可以运用发酵技术获得产品，为生活增添丰富的色彩。下列说法正确的是（ ）
A. 制作果酒时，可通过控制发酵的温度、发酵液pH等措施降低杂菌使果酒变质的概率
B. 利用酵母菌进行传统酿酒过程中，需一直保持无氧的条件
C. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出
D. 腐乳鲜美的味道主要由曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起
【答案】A
【解析】
【分析】1、制作泡菜的注意事项：（1）盐水煮沸，一是为了消除杂菌，二是为了除去水中的氧气，冷却再用是为了避免高温杀死坛中蔬菜表面的乳酸菌；（2）加水密封是为了阻止外面的空气再进入泡菜坛，为乳酸菌发酵制作泡菜创造无氧的环境条件。若此过程中进入大量氧气，可能导致乳酸菌死亡而好氧菌大量繁殖，使菜腐烂；（3）菜料只能装八成满的原因：初期会有气体产生；要往坛中加盐水没过菜料，所以不能加菜料太满。
2、制作果酒和果醋的注意事项： （1）发酵瓶和榨计机都要用体积分数为70%的酒精消毒；（2）葡萄要先冲洗再去枝梗，以免去枝梗时葡萄破碎，增加被杂菌污染的风险；（3）瓶中留有1/3空间为酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖提供氧气。果酒发酵过程中会产生大量CO2导致瓶内气压升高，需拧松瓶盖放气，但不要完全打开，否则可能会被杂菌污染。
【详解】A、制作果酒时，果酒中除了酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等微生物；乳酸菌可能分解果酒中的糖、甘油、酒石酸等，从而使果酒变质；可通过控制发酵的温度、发酵液的pH等措施降低乳酸菌使果酒变质的概率，A正确；
B、利用酵母菌酿制果酒时，初始阶段可往装置中通入一定量空气，使酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，后期再密封发酵使酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精，B错误；
C、泡菜发酵时，发酵初期酵母菌等的活动会产生气体，使体积膨胀，故泡菜坛装八成满可防止发酵液溢出，乳酸菌只进行无氧呼吸（乳酸发酵）不产生二氧化碳，C错误；
D、多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉 等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉通过分泌脂肪酶和蛋白酶将豆腐块中的大分子物质分解为小分子肽和氨基酸，D错误。
故选A。
3. 某生物活动小组分别用3种不同浓度的食盐制作泡菜，下图是活动小组记录的亚硝酸盐含量与发酵天数的关系图，下列描述正确的是（ ）
A. 结果显示食盐浓度过低会导致亚硝酸盐含量过高，传统发酵一般配制质量分数为1%—5%的盐水
B. 盐水煮沸后，立即倒入装有菜料的泡菜坛中，并使盐水没过全部菜料，盖好坛盖
C. 腌制泡菜过程中经发酵会产生多种酸，其中含量最高的酸是亚硝酸
D. 先用沸水短时间处理白萝卜块，再添加陈泡菜水可以缩短白萝卜制作泡菜的腌制时间
【答案】D
【解析】
【分析】在制作泡菜的过程中，要注意控制温度、时间和食盐的用量。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。
由图可知，食盐浓度过低会导致亚硝酸盐含量过高，随腌制时间的延长，亚硝酸盐的含量先升高后降低。
【详解】A、结果显示食盐浓度过低会导致亚硝酸盐含量过高，传统发酵一般按清水与盐的质量比4：1配制盐水，A错误；
B、盐水煮沸后，冷却后倒入装有菜料的泡菜坛中，避免杀死菌种，并使盐水没过全部菜料，盖好坛盖，B错误；
C、腌制泡菜过程中经发酵会产生多种酸，其中含量最高酸是乳酸，C错误；
D、沸水短时处理白萝卜块后，能使白萝卜的细胞破裂，细胞内营养物质外流使发酵菌种快速获得营养物质，从而缩短发酵时间，已经腌制过的泡菜汁中含有一定量的发酵菌种，所以在腌制的过程中，加入一些已经腌制的泡菜汁可以缩短腌制时间，D正确。
故选D。
4. 果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，下列相关措施正确的是（ ）
A. 酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
B. 葡萄酒发酵过程中，每隔12h左右打开瓶盖一次放出CO2
C. 在果醋发酵过程中，要关闭充气口，有利于醋酸菌的代谢
D. 果酒发酵过程温度控制在18～30℃，果醋发酵温度控制在30～35℃
【答案】D
【解析】
【分析】（1）酵母菌为真核生物，酒精发酵的细胞代谢方式为无氧呼吸，发酵的最适温度为18~30℃；
（2）醋酸杆菌为原核生物，果醋发酵的细胞代谢方式为有氧呼吸，发酵的最适温度为30~35℃。
【详解】A、酵母菌为真核生物，增殖方式有芽殖、裂殖、芽裂，醋酸杆菌为原核生物，增殖方式为二分裂，A错误；
B、葡萄酒发酵过程中每隔12小时左右需要拧松瓶盖一次放出二氧化碳，不能拧开，拧开瓶盖会使空气中的杂菌落入发酵瓶影响发酵，B错误；
C、果醋发酵过程中醋酸菌的代谢方式为有氧呼吸，应打开瓶盖并在瓶口盖上一层纱布，C错误；
D、果酒发酵过程温度控制在18～30℃，果醋发酵温度控制在30～35℃，D正确。
故选D。
5. 某兴趣小组利用葡萄制作果酒和果醋，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 当缺少糖源和氧气时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
B. 当葡萄酒制作完成后，可打开瓶盖后盖上一层纱布进行葡萄醋发酵
C. 进行酒精发酵的菌种的代谢类型是异养厌氧型
D. 果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
【答案】B
【解析】
【分析】果酒制备的菌种是酵母菌，发酵前期酵母菌先进性有氧呼吸，促进酵母菌的繁殖，后期进行无氧呼吸产生酒精。果酒制作的原理是酵母菌在无氧的条件下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖原都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。
【详解】A、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，氧气充足时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，A错误；
B、当葡萄酒制作完成后，可打开瓶盖后盖上一层纱布进行葡萄醋发酵，打开瓶盖的目的是为乙酸发酵提供充足的氧气，盖上一层纱布的目的是减少空气中尘土等的污染，B正确；
C、进行酒精发酵的菌种酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，C错误；
D、果醋制作过程中有二氧化碳产生发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中也有二氧化碳产生发酵液pH也逐渐降低，D错误。
故选B。
6. 下列有关微生物培养基的配制表述错误的是（ ）
A. 培养硝化细菌的培养基中添加的铵盐可作为能量来源
B. 尿素固体培养基中的K2HPO4能用于维持培养基的pH
C. 培养光能自养型蓝细菌的培养基中不需提供有机碳源
D. 马铃薯琼脂固体培养基中的琼脂能作为酵母菌的碳源
【答案】D
【解析】
【分析】在自然界中，除了光合作用，还有另外一种制造有机物的方式。少数种类的细菌，细胞内没有叶绿素，不能进行光合作用，但是却能利用体外环境中的某些无机物氧化时所释放的能量来制造有机物。例如，生活在土壤中的硝化细菌，能将土壤中的氨（NH3）氧化成亚硝酸（HNO2），进而将亚硝酸氧化成硝酸（HNO3）。这两个化学反应中释放出的化学能，就被硝化细菌用来将CO2和H2O合成糖类。这些糖类就可以供硝化细菌维持自身的生命活动。
【详解】A、硝化细菌是化能自养型生物，可利用氧化NH3获得能量，将无机物转化为有机物，故培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为能源，A正确；
B、尿素固体培养基中的K2HPO4能用于维持培养基的pH，保证微生物所需的酸碱环境，B正确；
C、培养光能自养型的蓝细菌的培养基中不需提供有机物，蓝细菌可利用二氧化碳和水合成有机物，C正确；
D、琼脂的作用是凝固剂，不能作为碳源，D错误。
故选D。
7. 微生物培养最基本的要求是无菌操作，下列对培养基、培养皿、接种环、双手、空气所采用的灭菌或消毒方法的正确顺序依次是（ ）
①化学药剂消毒 ②高压蒸汽灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤灼烧灭菌
A. ⑤③⑤①④ B. ③②⑤④① C. ②③⑤①④ D. ②②⑤④①
【答案】C
【解析】
【分析】消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒方法包括煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法；常用的灭菌方法包括干热灭菌法、灼烧灭菌法、湿热灭菌法（如高压蒸汽灭菌法）。
【详解】为了保持培养基中的水分不被烘干，常采用②高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌；培养皿等需要保持干燥的玻璃器皿可以采用③干热灭菌进行灭菌；接种过程中需要对接种环进行⑤灼烧灭菌；操作者双手可用酒精等化学药剂进行消毒，即①化学消毒法；为了杀死空气中微生物，常采用④紫外线消毒法；综上所述，对培养基、培养皿、接种环、双手、空气所采用的灭菌或消毒方法的正确顺序依次是②③⑤①④，C正确，ABD错误。
故选C。
8. 无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是（ ）
A. 紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果
B. 不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味
C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D. 在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
【答案】A
【解析】
【分析】无菌技术的概念：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。
【详解】A、用紫外线照射30min，可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果，A正确；
B、不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是可以杀死 牛奶中的绝大多数微生物，并且基本不会破 坏牛奶的营养成分，B错误；
C、为了防止污染，接种环经火焰灭菌、冷却后才可以快速挑取菌落，C错误；
D、在微生物接种的实验中，一般用75%酒精对实验者的双手进行消毒，用紫外线照射30min对超净工作台进行灭菌，D错误。
故选A。
9. 微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。如图为酵母菌的纯培养的部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A. 完成步骤④的过程中，接种环共灼烧处理了5次
B. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的
C. 该接种方法可用于获得酵母菌的纯培养物
D. 接种后，待菌液被培养基吸收，将④倒置培养，皿盖上标注菌种及接种日期等信息
【答案】D
【解析】
【分析】由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③④是进行平板划线。
【详解】A、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，A错误；
B、以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素的目的是提供氮源，加入酚红的目的是检测尿素分解后形成的碱性环境，B错误；
C、该接种方法为平板划线法，可用于获得酵母菌的单菌落，需挑出单菌落进行纯培养才能获取纯培养物，C错误；
D、接种后，待菌液被培养基吸收，将④倒置培养（避免水分过快蒸发和冷凝水污染培养基），皿盖上标注菌种及接种日期等信息，D正确。
故选D。
10. 下表是某公司研发一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，下列叙述正确的是（ ）
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂
含量(g) 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
A. 根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基
B. 蛋白胨可为目标微生物提供氮源
C. 该培养基也可用来筛选土壤中的尿素分解菌
D. 该培养基的制备流程为灭菌→加入琼脂→倒平板
【答案】B
【解析】
【分析】选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基;鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养基。
【详解】A、从配方上看，该培养基有琼脂，因此为半固体培养基，A错误；
B、蛋白胨（含有蛋白质成分等）可为目标微生物主要提供氮源，B正确；
C、若要筛选出土壤中的尿素分解菌，需要以尿素作为唯一氮源，需要将蛋白胨改为尿素才能用来筛选土壤中的尿素分解菌，C错误；
D、该培养基的制备流程为加入琼脂→灭菌→倒平板，D错误。
故选B。
11. 下列对常用的无菌操作的描述，错误的是（ ）
A. 高压蒸汽灭菌既能杀死微生物的营养细胞，也能杀死芽孢等休眠体
B. 实验中避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触
C. 高温导致蛋白质变性，故不能用湿热灭菌法对培养基进行灭菌
D. 接种前、后都要灼烧试管口
【答案】C
【解析】
【分析】实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、灭菌是可以较为彻底杀灭微生物，高压蒸汽灭菌既能杀死微生物的营养细胞，也能杀死芽孢等休眠体，A正确；
B、为保证无菌操作，实验中避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触，B正确；
C、对培养基进行灭菌的方法是湿热灭菌，通常是高压蒸汽灭菌法，C错误；
D、接种前、后都要过火灼烧试管口，通过灼烧防止杂菌污染，D正确。
故选C。
12. 某种物质A（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解A．研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株。图中③将M中的菌液稀释一定倍数后，取0．1mL涂布到平板上，初步估测摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2．4x108个。相关叙述正确的是（ ）
A. 实验时，淤泥及盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
B. 乙中需要加琼脂和物质A等，实验需设平行重复实验，无需另外设置空白对照
C. ③接种方法为稀释涂布平板法，涂布时用涂布器蘸取菌液均匀涂布于平板上
D. 若乙平板上菌落数平均为240个，则接种的菌液的稀释倍数为105
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上，④为挑取单菌落接种，⑤在以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上进一步筛选出高效降解A的菌株。
【详解】A、实验时，要从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株，则图①为淤泥取样进行稀释，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，淤泥中有菌种，因此不能进行灭菌处理；盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，A错误；
B、识图分析可知，③是稀释涂布平板法接种到以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上，因此乙为固体培养基，需要加琼脂和物质A等，为了提高准确度，实验需设平行重复实验，且需要另外设置空白对照，检测培养基配制是否合格，B错误；
C、③接种方法为稀释涂布平板法，接种工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，应该将菌液用微量移液管加入到培养基中，用涂布器进行均匀涂抹，C错误；
D、若乙平板上长出的菌落数平均为240个，假设稀释倍数为a，根据摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2.4×108个，在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，则有240×a÷0.1=2.4×108，则稀释倍数a=105，D正确。
故选D。
13. 下列与某实验小组分离产脲酶菌的实验设计相关的说法，不合理的是（ ）
A. 可选择富含尿素的土壤作为样品来分离目的菌株
B. 能分解酚红指示剂使其褪色的是产脲酶菌株
C. 富集培养的目的是增加目的菌的浓度
D. 在选择培养基中添加尿素作唯一氮源
【答案】B
【解析】
【分析】为了筛选可分解尿素的细菌，配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培养基上能生长，其它微生物在该培养基上因缺乏氮源而不能生长，可用于分离含脲酶的微生物。
【详解】AD、为了筛选可分解尿素的细菌，可选择富含尿素的土壤作为样品来分离目的菌株，尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该土壤能生长，AD正确；
B、在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，能对分离的菌种做进一步鉴定，B错误；
C、富集培养的目的是增加目的菌的浓度，以增加目的菌种数量，C正确。
故选B。
14. 发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的分离、提纯等环节。下面有关分析正确的是（ ）
A. 优良菌种只能通过诱变育种或基因工程育种来获得
B. 扩大培养采用液体培养基，其目的是提高接种时发酵罐中菌种的数目
C. 发酵时的环境条件会影响微生物的生长繁殖，并不影响微生物代谢物的形成
D. 发酵工程产生的废弃物对环境的污染大
【答案】B
【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。产品不同，分离提纯的方法一般不同。①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
2、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
3、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、用于发酵的菌种可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A错误；
B、扩大培养采用液体培养基，扩大培养的目的是增大接种时发酵罐中菌种的数目，加快发酵过程的进程，B正确；
C、发酵时的环境条件会影响微生物的生长繁殖，也影响微生物的代谢物形成，C错误；
D、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强因而可以得到较为专一的产物，D错误。
故选B。
15. 下列有关啤酒工业化生产的叙述，正确的是（ ）
A. 工业化啤酒生产中，焙烤的目的是使淀粉酶失活
B. 糖的分解及代谢物的生成在后发酵阶段完成
C. 在啤酒的酿造过程中，适时打开发酵装置有利于提高啤酒产量
D. 啤酒的发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段
【答案】D
【解析】
【分析】主发酵又称“前发酵”，是啤酒发酵的主要过程，在这个过程中，酵母完成了增殖、厌氧发酵及其沉淀回收等，消耗了大部分可发酵性糖等成分，排出的发酵代谢产物即啤酒的主要组分。主发酵一般需要6-8天，长的达8-10天。下酒以后，由于嫩啤酒还含有少量的可发酵性糖类，在贮酒罐内会再次出现一个较为旺盛的发酵过程，这个过程即称为“后发酵”。后发酵是传统发酵方式的一个必然过程，依靠这个后发酵过程，可以完成驱除生酒味、溶解与饱和二氧化碳的作用，同时可以形成适量的酯，并有益于酵母、蛋白质凝固物的沉降，达到啤酒成熟的目的。
【详解】A、焙烤杀死种子胚但不使淀粉酶失活，A错误；
B、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵，B错误；
C、啤酒酿造的原理是酵母菌无氧呼吸生成酒精，需要提供无氧环境，因此不能打开发酵装置，C错误；
D、啤酒的生产包括主发酵和后发酵两个阶段，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒，D正确；
故选D。
16. 下列对发酵工程及其应用的叙述，不正确的是（ ）
A. 生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉
B. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身
C. 利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物生长
D. 用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取
【答案】D
【解析】
【分析】发酵过程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。
【详解】A、柠檬酸可以通过黑曲霉的发酵制得，所以生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉，A正确；
B、发酵工程的产品可以是微生物的代谢物、酶以及菌体本身，B正确；
C、根瘤菌肥作为微生物肥料，可以通过根瘤菌的固氮作用，增加土壤中的氮肥量，促进植物生长，C正确；
D、单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，D错误。
故选D。
17. 使用如图的发酵罐进行啤酒的现代化工业发酵。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 啤酒酵母在接入发酵罐前需要对其进行扩大培养
B. 通过pH检测装置检测发酵液pH可监测发酵进程
C. 发酵中期需使用叶轮搅拌发酵液以增加发酵液中的溶解氧
D. 夏季高温时，可使用冷却水对罐体进行降温处理以免发酵失败
【答案】C
【解析】
【分析】啤酒发酵时需要利用酵母菌的呼吸作用，为了让菌种数量增加，一般先对其进行扩大培养，先进行有氧呼吸，再营造密闭环境进而进行无氧呼吸产生酒精，在发酵过程中因酵母菌进行无氧呼吸使得发酵液处于一种缺氧、酸性的环境。
【详解】A、为了提高发酵菌种的数量，常常在接入发酵罐前需要对其进行扩大培养，A正确；
B、在啤酒的发酵过程中会随着发酵时间的延长pH慢慢降低，因此可通过pH检测装置检测发酵液pH可监测发酵进程，B正确；
C、发酵中期需要严格的无氧环境，不需要增加发酵液中的溶解氧，C错误；
D、酵母菌在发酵时需要严格控制发酵温度，夏季高温时，可使用冷却水对罐体进行降温处理以免发酵失败，D正确。
故选C。
18. 下列有关细胞全能性的叙述，正确的是（ ）
A. 玉米种子萌发长成新植株，说明植物细胞具有全能性
B. 没有离体的植物细胞也能表现出全能性
C. 植物原生质融合标志着植物细胞全能性的实现
D. 雄蜂发育体现了已分化的动物细胞也具有全能性
【答案】D
【解析】
【分析】关于细胞的“全能性”，可以从以下几方面把握：（1）概念：细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。（2）细胞具有全能性的原因是：细胞含有该生物全部的遗传物质。（3）细胞全能性大小：受精卵＞干细胞＞生殖细胞＞体细胞。（4）细胞表现出全能性的条件：离体、适宜的营养条件、适宜的环境条件
【详解】A、玉米种子萌发长成新植株是通过细胞分裂和分化形成的，起点不是细胞或组织，不能体现细胞的全能性，A错误；
B、细胞表现出全能性的条件：离体、适宜的营养条件、适宜的环境条件，B错误；
C、植物原生质体融合形成杂种细胞，不能体现植物细胞全能性，C错误；
D、雄蜂是由未受精的卵细胞发育而成的，这个过程依靠卵细胞的全能性，卵细胞是高度分化的细胞，所以体现了已分化的动物细胞也具有全能性，D正确。
故选D。
19. 南方水果基地为了快速培养甘蔗，拟采用植物组织培养技术，下图是该过程中出现的不同结果。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 切取甘蔗的茎尖进行组织培养，获得脱毒苗具有抗病毒特性
B. 整个培养过程需要适宜的温度和一定的营养条件，不需要光照
C. B先通过再分化得到C，再通过再分化得到A
D. 生根、生芽时，培养基只需要α-苯乙酸生长素类调节剂
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，该技术依据的原理是植物细胞具有全能性。
【详解】A、由于茎尖、芽尖等分生组织病毒极少，甚至无病毒，因此可切取甘蔗的茎尖进行组织培养获得脱毒苗，但获得的脱毒苗不具有抗病毒特性，仍具有感染病毒的可能，A错误；
B、整个培养过程需要适宜的温度和一定的营养条件，其中脱分化过程为避免形成维管组织，一般需要避光处理，而再分化过程中需要光照诱导叶绿素的合成，B错误；
C、诱导愈伤组织形成试管苗的过程，需要将生长良好的愈份组织先转接到诱导生芽的培养基上，长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导生根，因为先诱导生芽有利于生根，C正确；
D、诱导生芽或生根时，需要生长素与细胞分裂素的比例适合，其中生长素和细胞分裂素的比值大于1时有利于根的形成，比值小于1时，则促进芽的形成，因此诱导生根、生芽时，培养基中需要加入生长素类调节剂、细胞分裂素类调节剂等，D错误。
故选C。
20. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ）
A. 用自然生长的茎进行组培须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒
B. 菊花组织培养中，需要三种培养基，其营养成分中的碳源应该是有机碳源
C. 组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石带菌量低且营养丰富
D. 愈伤组织是离体的植物器官、组织或细胞经过细胞增殖与分化形成的
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养技术：
1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。
2、原理：植物细胞的全能性。
3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【详解】A、自然生长茎段的消毒属于外植体消毒，先用70%酒精，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗，A错误；
B、菊花组织培养中，共需配制三种培养基，分别是脱分化培养基、生芽培养基和生根培养基，这些培养基需要的碳源是蔗糖，是有机碳源，B正确；
C、组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质的原因是蛭石比较松软，持水性也较好，有利于幼苗的生根和叶片的生长，C错误；
D、乙是愈伤组织，愈伤组织的形成过程是脱分化，脱分化过程只进行细胞增殖不进行细胞分化，D错误。
故选B。
21. 如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（ ）
A. 培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子
B. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性
C. 需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④
D. 植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0（不考虑基因突变）
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图可知：对植株A的花粉经过离体培养得到的植株①单倍体植株，而后对该单倍体幼苗经秋水仙素处理得到的植物②是纯合二倍体，该过程属于单倍体育种。植株③的获得采用了植物组织培养技术，该植株的获得利用了诱变育种方法。植株④采用了植物组织培养技术，属于细胞工程育种；植株⑤的培育采用了植物体细胞杂交技术。
【详解】A、对植株A（杂合子Aa）的花粉（A或a）经过离体培养得到的植株①单倍体植株（A或a），秋水仙素处理单倍体植株①，获得的植株②（AA或aa）为纯合子，A错误；
B、选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，通过组织培养技术获得植株③，体现了细胞的全能性，B错误；
C、图中需要通过植物组织培养技术获得的植株是①③④⑤，该过程中利用了细胞的全能性，植株②是秋水仙素处理植株①的幼苗得到，没有用到植物组织培养技术，C错误；
D、植株①是通过花药离体培养获得的单倍体植株（A或a），秋水仙素处理得到植株②（AA或aa）；植株③④是通过植物组织培养获得的，其基因型为Aa；植株⑤是通过植物体细胞杂交的方法获得的，其遗传物质是由植株A和植株B组成的，与植株A的基因型不同，因此植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0，D正确。
故选D。
22. 植物细胞工程具有广泛的应用前景和实用价值，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株幼苗
B. 利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料
C. 次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养
D. 植物细胞培养技术主要利用促进细胞生长培养条件提高单个细胞中次生代谢物含量
【答案】B
【解析】
【分析】1、次生代谢不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或器官中，并在一定条的环境和时间条件下才进行；
2、植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术，利用植物细胞培养来获得目标产物的过程是细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、利用植物细胞培养生产紫草宁时，不需要培育出完整植株，培育出能产生紫草宁的组织细胞即可，A错误；
B、单倍体植株的染色体数目是正常植株的一半，当发生突变时，与正常植株相比更容易出现性状的改变，因此可作为研究遗传突变的理想材料，B正确；
C、次生代谢不是植物生长所必需的，初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢活动，C错误；
D、植物细胞培养技术主要利用促进细胞生长培养条件来提高多个细胞中次生代谢物含量，D错误。
故选B。
23. 海拉细胞是一种人工培养的具有无限增殖能力的细胞，广泛应用于科学研究，极大程度地推动了医学发展。如图是海拉细胞培养部分过程，下列说法正确的是（ ）
A. 丙和丁的过程不一定会出现细胞接触抑制的现象
B. 甲→乙过程需要用胃蛋白酶或胶原蛋白酶等处理
C. 丙、丁过程中通常会通入O2和CO2的混合气体刺激细胞呼吸
D. 为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气
【答案】A
【解析】
【分析】1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入 培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液 →转入培养液(传代培养) →放入二氧化碳培养箱培养。
2、图示为肾脏上皮细胞培养过程示意图，图中甲表示剪碎肾脏组织块，乙表示制成细胞悬液，丙表示原代培养，丁表示传代培养。
【详解】A、丙表示原代培养，丁表示传代培养，海拉细胞是一种具有无限增殖能力的细胞，其在原代培养和传代培养的过程中不会出现细胞接触抑制的现象，A正确；
B、在动物细胞培养过程中，需要用胶原蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是在多数动物细胞培养液适宜的pH范围内，胃蛋白酶已失去活性，B错误；
C、丙、丁过程中通常会通入95%空气和5%的 CO 的混合气体，前者（O2的主要作用是）维持细胞进行有氧呼吸，后者（CO2的主要作用是）维持培养液适宜的pH，C错误；
D、为避免培养过程中的杂菌污染，保证其气体需要，丙、丁过程中需松动培养瓶盖，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养，D错误。
故选A。
24. 成体干细胞是指存在于已经分化组织中的未完全分化的细胞，能自我更新且能特化形成所在组织中的一种或多种细胞。下列叙述错误的是（ ）
A. 骨髓中的造血干细胞通过分裂和分化可以产生各种血细胞
B. 神经干细胞产生神经组织的各类细胞是一个不可逆的过程
C. 成体干细胞具有全能性，可分化出所有组织细胞
D. 诱导成体干细胞分化的过程实质是基因的选择性表达
【答案】C
【解析】
【分析】哺乳动物的胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，在功能上具有发育的全能性。
【详解】A、骨髓中的造血干细胞能通过分裂和分化产生红细胞、白细胞和血小板等各种血细胞，A正确；
B、神经干细胞产生神经组织的各类细胞是由于基因的选择性表达，基因表达过程一般是一个不可逆的过程，B正确；
C、胚胎干细胞可分化出所有组织细胞，而成体干细胞是已经分化组织中的未完全分化的细胞，不能分化出所有组织细胞，C错误；
D、诱导胚胎干细胞分化的过程实质是细胞内的基因进行了选择性表达，D正确。
故选C。
25. 为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染已免疫的B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，进而获得染色体稳定的杂交瘤细胞，基本实验流程如图。EBV转化细胞能在HAT培养基中存活，但对Oua敏感；骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下列分析正确的是（ ）
A. 杂交瘤细胞产生的抗体能针对相应抗原和EBV
B. HAT培养基可去除骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞
C. 灭活病毒诱导细胞融合的原理是促进骨髓瘤细胞核和B细胞核融合
D. 图示筛选获得的杂交瘤细胞即可在小鼠腹腔内生产单克隆抗体
【答案】B
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、杂交瘤细胞产生的抗体能针对相应抗原而不针对EBV（一种病毒颗粒），A错误；
B、据题意“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感；骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感”可知，HAT培养基筛选去除的是未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞，B正确；
C、病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，即主要促进骨髓瘤细胞膜和B淋巴细胞膜的融合，C错误；
D、图示获得的杂交瘤细胞还要进行克隆培养和抗体检测，检测呈现阳性的杂交瘤细胞才能用于生产单克隆抗体，D错误。
故选B。
26. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 植物体细胞杂交技术属于有性杂交，包括细胞融合和植物组织培养技术
B. 植物组织培养技术和动物细胞培养技术的原理相同
C. 卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法
D. 重构胚需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养技术：1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。2、原理：植物细胞的全能性。3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。4、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物体细胞杂交技术是将不同种类的植物细胞融合并培养形成杂种植株，包括细胞融合和植物组织培养技术，属于无性繁殖，A错误；
B、植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，B错误；
C、核移植前需要使用显微直接去除的方法把细胞核去除（并非是显微注射法），C错误；
D、在体细胞核移植过程中，用物理方法或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白质合成酶抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，D正确。
故选D。
27. 实验人员对动物细胞培养过程中的动物细胞增殖情况进行统计，其变化曲线如图所示，图中B、D两点表示经筛选后继续培养。下列叙述错误的是（ ）
A. 对新鲜取材的动物组织处理时可用机械的方法使组织细胞分散
B. 体外培养的大多数种类的动物细胞能够悬浮在培养液中生长增殖
C. 将细胞制成细胞悬液进行原代培养，其增殖情况如OA段所示
D. AB段可能发生了接触抑制
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、对新鲜取材的动物组织处理时可用机械方法使组织细胞分散，也可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理为单个细胞，A正确；
B、体外培养的大多数种类的动物细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，B错误；
C、原代培养即分瓶前的培养，该时期细胞数量相对较少，增殖情况如OA所示，C正确；
D、AB段细胞几乎不再增殖，可能发生了接触抑制，需要用胰蛋白酶等处理，使组织细胞分散开来，才能进行BC段的传代培养，D正确。
故选B。
28. 抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC组成及作用机制如图，下列叙述正确的是（ ）
A. 细胞毒素的特异性是ADC能选择性作用于肿瘤细胞的关键
B. ADC进入肿瘤细胞的运输方式为协助扩散
C. ADC中抗体的作用是与肿瘤细胞特异性结合，将细胞毒素带到肿瘤细胞
D. ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞坏死而杀死肿瘤细胞
【答案】C
【解析】
【分析】据图分析，抗体上带有细胞毒素，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把细胞毒素一并带进靶细胞，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡。
【详解】A、细胞毒素杀伤肿瘤细胞没有特异性，能与肿瘤细胞膜上的受体发生特异性结合的是抗体，A错误；
B、ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，ADC进入肿瘤细胞的方式是胞吐，B错误；
C、肿瘤细胞相当于抗原，ADC中，抗体可以特异性的和肿瘤细胞结合，将细胞毒素带到肿瘤细胞，C正确；
D、图示显示，ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞，D错误。
故选C。
29. 下列是体细胞核移植技术的相关叙述，正确的是（ ）
A. 体细胞核移植技术的原理是动物细胞核具有全能性
B. 现在的克隆技术已经相当成熟了，可以向临床推广
C. 体细胞核移植时可用取自新鲜卵巢的卵母细胞直接作为受体细胞
D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对供核动物进行了100%的复制
【答案】A
【解析】
【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物，克隆动物的核基因完全来自供体动物，而细胞质基因来自受体细胞；核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，因为体细胞的全能性低于胚胎细胞。
【详解】A、动物体细胞核移植技术体现了动物体细胞核具有全能性，A正确；
B、尽管通过体细胞核移植技术已经获得了多种克隆动在问题但该技术的成功率仍然非常低，各个技术环节也有待进改进，B错误；
C、为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏，C错误；
D、克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞，用体细胞核移植方法生产的克隆动物，不是对体细胞供体动物进行100%的复制，D错误。
故选A。
30. 下列叙述中，不属于动物体细胞核移植技术应用前景的是（ ）
A. 加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育
B. 可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性
C. 转基因克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白
D. 用克隆动物做疾病模型，便于更好地追踪疾病发展过程
【答案】B
【解析】
【分析】
本题主要考察了动物体细胞核移植的应用前景，其在畜牧业、医药卫生，已经其他领域有着广泛的应用前景。例如在畜牧生产中，利用体细胞克隆技术可以加速家畜遗传改良进程，促进优秀畜群繁育，在濒危动物保护方面，可望利用体细胞核移植技术增加这些动物的存活数量。
【详解】A、利用体细胞克隆技术可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育，A正确；
B、检测有毒物质，判断某种物质的毒性属于动物细胞培养技术的应用，不是动物体细胞核移植技术的应用，B错误；
C、转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白，C正确；
D、利用克隆动物做疾病模型，有利于人们追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病，D正确。
故选B。
【点睛】
第II卷(非选择题)
二、非选择题(共40分)
31. 下图为酿制果酒果醋的实验装置。请据图分析回答相关问题：
（1）用此装置制作葡萄酒，在酒精发酵的过程中，需要对气阀___________(填“a”或“b”)进行关闭，发酵过程中d连接长而弯曲的胶管的目的是___________。新鲜水果装入发酵瓶之前要将发酵瓶清洗干净，用___________消毒。发酵产生的酒精可在酸性条件下用___________试剂进行检测。
（2）若利用已制备的葡萄酒，继续使用此装置制作葡萄醋，需改变的条件是：①___________；②___________。
（3）实验表明，醋酸菌在气体条件适宜，糖源充足或缺少糖源时都能产生醋酸，请写出当缺少糖源时醋酸菌产生醋酸的反应简式：___________。
【答案】31. ①. a ②. 排出发酵产生的CO2 并防止空气中的杂菌污染发酵液 ③. 70%酒精 ④. 重铬酸钾
32. ①. 不断通入氧气 ②. 温度调整为30-35℃
33. C2H5OH+O2CH3COOH（醋酸）+H2O+能量
【解析】
【分析】果酒和果醋的发酵装置图，其中a表示充气口，b表示排气口，c表示出料口。排气孔的作用是排气，其弯弯曲曲的好处是防止杂菌和浮尘的污染；充气口的作用是在果醋制作时通入氧气的；出料口的作用是出料、检测。
【小问1详解】
在酒精发酵的过程中，需对气阀a进行关闭，让酵母菌进行无氧呼吸产生酒精；酵母菌无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳，其中的二氧化碳可通过气阀b排出；发酵过程中d连接长而弯曲的胶管的目的是排出发酵产生的CO2 并防止空气中的杂菌污染发酵液；新鲜水果装入发酵瓶之前要将发酵瓶清洗干净，用70%酒精消毒；发酵产生的酒精可在酸性条件下用重铬酸钾试剂进行检测，反应颜色为灰绿色。
【小问2详解】
制作葡萄醋的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，故若利用已制备的葡萄酒，继续使用此装置制作葡萄醋，需改变的条件是：①打开气阀a，不断通入氧气；②调整温度为30～35℃。
【小问3详解】
当缺少糖源时醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，其反应简式为：C2H5OH+O2 CH3COOH（醋酸）+H2O+能量
32. 石油对土壤的污染不仅给周边生态环境带来严重的损害，还严重影响居民的健康生活，且污染物含量越多。降解难度越大。为解决石油污染问题。某科研小组用了将近 1年的时间，从长庆油田中被石油污染最严重的土壤中分离出了高效分解石油的细菌。如图所示。回答下列问题∶
（1）配制好的培养基通常可以使用___________法灭菌。步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤③培养基中以___________为唯一碳源。在微生物学中，将___________的培养基称为选择培养基。
（2）倒平板冷却后，需要倒置，目的是___________。
（3）进行过程④之前，常需要检验培养基平板灭菌是否合格，方法是___________。
（4）常采用_______法对石油分解菌进行分离和计数。该接种方法可计数的原理是_______。
【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌（湿热灭菌） ②. 石油 ③. 允许特定微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长
（2）防止皿盖上的水珠落回培养基造成污染；防止培养基中的水分过快挥发
（3）随机取若干灭菌后的平板倒置于恒温箱中培养24h身观察是否有菌落出现
（4） ①. 稀释涂布平板 ②. 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
微生物培养应注意无菌操作，配制好的培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌；由题干信息分析可知，该实验的目的是分离和纯化高效分解石油的细菌，故步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，步骤③培养基为选择培养基，最大的区别是步骤③培养基中以石油为唯一碳源，从而分离出能分解石油的细菌；在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
【小问2详解】
平板冷却后需要倒置目的有两个：一是防止皿盖上的水珠落回培养基造成污染；二是防止培养基中的水分过快挥发。
【小问3详解】
进行过程④之前常需要检验培养基平板灭菌是否合格的方法是：随机取若干灭菌后的平板（不接种）倒置于恒温箱中培养24h，观察是否有菌落出现：若有菌落出现，则证明灭菌不合格。
【小问4详解】
常采用稀释涂布平板法对石油分解菌进行分离和计数；该接种方法可计数的原理是：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
33. 发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图所示。回答相关问题：
（1）在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至___________性。
（2）接种之前的过程①、②都属于___________。整个发酵过程的中心环节是___________。在发酵过程中，需要随时检测培养液中微生物的数量以及___________等，以了解发酵进程。
（3）过程③需要严格的灭菌，否则由于____，可能会导致青霉素产量下降。过程④可采用____方法将菌体分离干燥。
（4）研究发现，某些青霉菌属于维生素营养缺陷型菌株，失去合成某种维生素的能力，只有在基本培养基中补充所缺乏的维生素后才能生长。某研究小组筛选出某种维生素营养缺陷型菌株，为了进一步确定该菌株的具体类型，他们把15种维生素按照不同组合分为5个小组，用5个滤纸片分别蘸取不同小组的维生素，然后覆于接种后的琼脂平板上培养一段时间。结果如下：
组别 维生素组合
1 维生素A 维生素B1 维生素B2 维生素B6 维生素B12
2 维生素C 维生素B1 维生素D2 维生素E 烟酰胺
3 叶酸 维生素B2 维生素D2 胆碱 泛酸钙
4 对氨基苯甲酸 维生素B6 维生素E 胆碱 肌醇
5 生物素 维生素B12 烟酰胺 泛酸钙 肌醇
实验结果显示1组和2组滤纸片周围产生生长圈(图2)，则该营养缺陷型大肠杆菌不能合成的维生素是___________。若该菌株为叶酸和生物素的双营养缺陷型大肠杆菌，则其在培养基上形成菌落的位置是___________的交界处。
【答案】（1）酸性 （2） ①. 扩大培养 ②. 发酵罐内的发酵 ③. 产物浓度
（3） ①. 杂菌污染 ②. 过滤、沉淀
（4） ①. 维生素B1 ②. 3和5的交界处
【解析】
【分析】1、培养基的配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。
2、发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。发酵罐中发酵是发酵工程的中心环节。
【小问1详解】
虽然各种培养基的配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如，在培养霉菌时，需要将培养基调至酸性。
【小问2详解】
工业发酵罐的体积一般为几十到几百立方米，接入的菌种总体积需要几立方米到几十立方米，所以在发酵之前还需要对菌种进行扩大培养。发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度，pH和溶解氧等发酵条件。
【小问3详解】
发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种，一旦有杂菌污染；可能会致产量大大下降。因此，在青霉素生产过程中如果污染了杂菌，某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉。因此，培养基和发酵设备都须经过严格的灭菌。如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥即可得到产品，如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
【小问4详解】
实验结果显示1组和2组滤纸片周围产生生长圈，比较表格中各种维生素组合，1组和2组含有而其他组不含有的维生素是维生素B1，所以该营养缺陷型大肠杆菌不能合成的维生素是维生素B1。只有3 组含有叶酸，只有5组含有生物素，所以若菌株为叶 酸和生物素的双营养缺陷型大肠杆菌，则其在培养 基上形成菌落的位置是3与5的交界处。
34. 下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题：
（1）在自然条件下，“矮牵牛”和“粉蓝烟草”进行有性杂交不能产生后代，原因是两者之间存在_______。
（2）利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的根本原因是____。
（3）植物体细胞杂交依据的生物学原理主要有________。人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类—物理法和化学法，其中化学法包括________、________，植物体细胞融合完成的标志是_______。
（4）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含_______条染色体，属于______倍体植株。
【答案】（1）生殖隔离
（2）矮牵牛的茎尖分生组织含有矮牵牛的全部遗传物质
（3） ①. 细胞膜的流动性 ②. PEG（或聚乙二醇）促融 ③. 高Ca2+-高pH融合法 ④. 杂种细胞再生出细胞壁
（4） ①. 38 ②. 四##4
【解析】
【分析】图示表示通过植物细胞工程培育矮牵牛-粉蓝烟草植株的过程，其中①②都表示去除细胞壁，获得原生质体的过程；③表示诱导原生质体融合的过程；④表示融合的原生质体再生形成新的细胞壁的过程；⑤表示植物组织培养过程。
【小问1详解】
矮牵牛和粉蓝烟草属于不同的物种，两者之间存在生殖隔离，因此在自然条件下矮牵牛和粉蓝烟草杂交不能产生后代。
【小问2详解】
由于矮牵牛的茎尖分生组织含有矮牵牛的全部遗传物质，所以在特定条件下其可发育为完整的植株。
【小问3详解】
植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性。人工诱导原生质体融合的方法很多，基本可分为两大类——物理法和化学法，其中化学法主要用PEG（或聚乙二醇）促融、高Ca2+-高pH融合法等，杂种细胞再生出细胞壁是植物体细胞融合完成的标志。
【小问4详解】
“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含有的染色体数目是矮牵牛和粉蓝烟草的体细胞中染色体数目之和，为14+24=38，属于四倍体植株。
35. 我国科兴及北京生物两款新冠灭活疫苗均使用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞的传代细胞系）进行病毒扩增培养（见下图）。
（1）动物细胞工程常用的技术手段有多种，其中______是其他动物细胞工程技术的基础。Vero细胞的培养应在培养箱中进行，箱内的气体环境条件为______。
（2）Vero细胞的传代培养过程中需要使用______酶使细胞分散，并在合成培养基中加入______等天然成分。此外，在培养过程中，应定期更换培养液，目的是______。
（3）将已对新冠病毒发生免疫的B淋巴细胞和Vero细胞系获得杂交细胞，再经过______筛选、克隆化培养和______检测，获得产生特定抗体的______，用以生产单克隆抗体。单克隆抗体的优点是：______。
【答案】（1） ①. 动物细胞培养 ②. 5%CO2、95%空气
（2） ①. 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） ②. 血清 ③. 清除代谢废物；防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
（3） ①. （特定的）选择培养基 ②. 专一抗体 ③. 杂交瘤细胞 ④. 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合、并且可以大量制备
【解析】
【分析】动物细胞培养的条件营养：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配置而成的培养基，称为合成培养基。（通常需要加入血清等一些天然成分）无菌、无毒的环境：添加抗生素温度、pH和渗透压：36.5±0.5℃ 7.2~7.4气体环境：O2是细胞代谢所需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱进行培养。
【小问1详解】
动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。Vero细胞的培养应置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱进行培养。
【小问2详解】
Vero细胞的传代培养过程中需要使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶使细胞分散。将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。为了清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，在培养过程中，应定期更换培养液。
【小问3详解】
