新课标人教版高中生物选修1专题2课题2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》同步训练.doc

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人教版生物选修1第2章第2节土壤中分解尿素的细菌的分离与计数同步训练
1．下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是( )
A．制作果醋时应不断通入无菌空气
B．在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用平板划线法
C．通过比色法来检测亚硝酸盐含量需要制备标准显色液
D．饥饿时，胰高血糖素分泌量上升，促进肝糖原和肌糖原分解
答案：B
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：土壤中分解尿素的细菌分离实验中，采用稀释涂布平板法接种，故B错误。
分析：本题主要考查微生物分离，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
2．下列是以酵母菌为材料进行的实验，有关叙述错误的是( )
A．探究酵母菌的呼吸方式，可用溴麝香草酚蓝检测产生的CO2
B．用酵母菌发酵酿制果酒，选择酸性重铬酸钾检测产生的酒精
C．探究酵母菌种群数量变化，应设空白对照排除无关变量干扰
D．用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30～300菌落数的平板
答案：C
知识点：测定某种微生物的数量
解析：解答：酵母菌呼吸作用产生的CO2可使橙色的溴麝香草酚蓝水溶液来检测，颜色变化：由蓝变绿再变黄；A正确。在酸性条件下，酒精可与重铬酸钾反应呈灰绿色；B正确。探究酵母菌种群数量变化时可形成自身前后对照，无需设置空白对照；C错误。用稀释涂布平板法培养计数，为保证实验结果可靠，应选择有30～300菌落数的平板进行计数；D正确。
分析：本题主要是考查实验设计过程中试剂的选择、物质的鉴定及对实验结果的分析。
3．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )
①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐
A．①③⑤⑦ B．①③⑤⑧ C．②④⑥⑧ D．①④⑥⑦
答案：B
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，故1需要2错误，故C错误。需要用固体培养基必须加入琼脂，故3正确，4错误，D错误。需要加碳源即葡萄糖，故5正确，6错误。不需要氮源，故不需要甲硝酸眼，故7错误，8正确，因此A错误，B正确。
分析：本题考查尿素分解菌的分离相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度和应用能力。
4．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．下列有关叙述，出现科学性错误的是（　　）
A．甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题
B．可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染
C．将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误
D．B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则
答案：D
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：A、甲同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染；A正确；B、污染可能是培养基灭菌不彻底，或操作过程没有保证无菌操作，将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染；B正确；C、若是土样不同造成的，让其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学操作正确；C正确；D、B选项的实验思路都遵循了实验的对照原则，C选项的实验思路都遵循了实验的重复性原则；D错误。
分析：本题的知识点是对实验过程可能出现的错误操作的分析及验证，主要考查学生分析错因并设计实验验证错因、进行纠正的能力。
5．下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是( )
A．3号试管中的菌落稀释倍数为103倍
B．4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号的10倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个
D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
答案：B
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：3号试管是稀释104倍，A错误；4号中稀释液进行平板培养，稀释倍数比5号的低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号的10倍，B正确；5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3×105×10=1.7×108个，C错误；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D错误。
分析：本题主要考查稀释涂布平板法的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间内在联系的能力。
6．在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是( )
A．加入唯一氮源作为选择培养基，加入酚红指示剂作为鉴别培养基。
B．加入唯一氮源作为鉴别培养基，加入酚红指示剂作为选择培养基。
C．加入酚红指示剂作为选择培养基，加入唯一碳源作为鉴别培养基。
D．加入酚红指示剂作为选择培养基，加入唯一碳源作为鉴别培养基
答案：A
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：在分解尿素菌的分离和鉴定中，先加入以尿素为唯一氮源的选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基，如果培养基变红，说明培养基中已得到能降解尿素的细菌。
分析：本题主要考查微生物的分离与鉴定的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解把握知识间内在联系的能力。
7．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
答案：D
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：首先要进行培养基的制备、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，A正确；然后对土壤稀释液进行涂布于各组平板上，B正确；将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，C正确；确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数，D错误。
分析：本题主要考查微生物的分离和计数的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解把握知识间内在联系的能力。
8．能分解尿素的微生物所需要的碳源和氮源分别是( )
A．CO2和N2 B．葡萄糖和NH3
C．CO2和尿素 D．葡萄糖和尿素
答案：D
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：能分解尿素的微生物，说明可以利用尿素中的氮元素，但尿素中含的C少，所以这类微生物常常需要葡萄糖作为它们的碳源，选D。
分析：本题考查微生物的营养成分，意在考查学生对所学知识要点的理解、识记能力。
9．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。产生A同学结果的原因可能有( )
①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②③④
答案：A
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：A同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染（培养基灭菌不彻底或操作过程没有保证无菌操作都会导致菌落数偏多），还可能是操作失误，比如培养基的稀释倍数搞错了，或培养基中混入了其他含氮物质等，但与是否设置对照无关，故A项正确，B、C、D项错误。
分析：本题考查分离分解尿素的细菌的相关实验，意在考查考生具备验证简单生物学事实的能力，并对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。
10．本课题以土壤中的细菌为研究对象，要达到的目的是( )
①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
②从土壤中分离出能够分解氨的细菌
③统计每克土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌
④统计所取土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌．
A.①③ B.②④ C.①② D.③④
答案：A
知识点：用土壤浸出液进行细菌培养
解析：解答：本题是对土壤中分解尿素的菌的分离和计数的实验的考查，回忆土壤中分解尿素的菌的分离和计数的实验过程，然后分析选项进行解答．
解：①以土壤中的细菌为研究对象，可以从土壤中分离出能够分解尿素的细菌，①正确；
②氨气是气体不能存在于固体培养基中，因此不能土壤中分离出能够分解氨的细菌，②错误；
③可以采用稀释涂布平板法根据公式估算出每克土壤样品中的菌落数，即每克土壤中的菌落数=，③正确；④由③知公式表示每克土壤样品中的菌落数，但不是所取土壤样品细菌数，④错误，故选：A。
分析：本题的知识点是分离土壤中分解尿素的菌，根据平板上的菌落数估算每克样品中的菌株数，对于土壤中分解尿素的菌的分离和计数的实验的掌握是本题考查的重点．
11．通常需要借助光学显微镜才能完成的实验有( )
A.分离土壤中分解尿素的细菌
B.探究紫色洋葱表皮细胞液浓度
C.DNA粗提取和鉴定
D.调查和统计土壤动物的丰富度
答案：B
知识点：用土壤浸出液进行细菌培养
解析：解答：显微镜一般用于观察细胞或微生物．生物实验中用显微镜的实验有：脂肪的鉴定、观察植物细胞的有丝分裂、质壁分离与复原、探究酵母菌的种群数量变化等等．
解：A、分离土壤中分解尿素的细菌的实验中，只需利用选择培养基观察细菌菌落的形成，不用借助显微镜，故A错误；
B、通过质壁分离和复原探究紫色洋葱表皮细胞液的浓度，需要借助显微镜，故B正确；
C、DNA粗提取和鉴定无需显微镜，只需用不同溶液析出DNA即可，故C错误；
D、调查和统计土壤动物的丰富度直接用肉眼数出各种小动物的数量即可，故D错误．
故选B．
分析：本题考查生物实验的相关知识，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力．
12．细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖．下列与此有关的说法正确的是( )
A.乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B.氮源不可能作为细菌的能源物质
C.琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质
D.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌
答案：D
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：本题是微生物的代谢类型与培养基的成分，根据选项涉及的具体内容梳理相关知识点，然后分析综合进行判断．
解：A、乳酸菌是异养菌，硝化细菌是自养菌，二者利用的碳源不同；A错误．
B、氮源也可能作为细菌的能源物质；B错误．
C、琼脂不是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质，是凝固剂，是液体培养基转变成固体培养基所需要的物质；C错误．
D、以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌，还有可能是自生固氮菌；D正确．
故应选D．
分析：本题的知识点是乳酸菌与硝化细菌的同化作用与培养基的特点，氮源对微生物的选择作用，琼脂在培养基中的作用，主要考查学生对培养基配制原则的理解与应用．
13．在农田土壤的表层自生固氮菌较多．用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是( )
①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦37℃恒温箱中培养 ⑧28～30℃恒温箱中培养．
A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧ C.②④⑤⑧ D.②④⑥⑦
答案：C
知识点：用土壤浸出液进行细菌培养
解析：解答：本题是应用选择培养基筛选自生固氮菌，先分析自生固氮菌的代谢特点和对培养基的营养需求，然后从给出的培养基成分中选择所需要的成分，判断选项．
解：自生固氮菌是异养菌，生长繁殖需要有机碳源；自生固氮菌能利用空气中的氮气，培养基中不加氮源，固氮菌能生长繁殖，不能固氮的菌不能生长繁殖，；自生固氮菌的生长繁殖的最适宜温度是28～30℃；自生固氮菌对青霉素敏感，培养基中不能加青霉素．所以如果从土壤浸出液中分离出自生固氮菌对培养基的要求是②不加抗生素、④不加氮素、⑤加葡萄糖、⑧28～30℃恒温箱中培养．
故选：C．
分析：本题的知识点是选择培养基的选择作用，根据自生固氮菌的代谢特点和生存的适宜温度设定相应的培养基进行选择培养，主要考查学生对微生物培养知识的掌握和运用的能力．
14．下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。下列与该实验相关内容的叙述中不正确的是( )
A．实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基
B．通过图中I、Ⅱ过程目的是增加目标微生物的数量
C．统计⑤处培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数
D．在⑤处培养基上能生长的一定是能降解对羟基苯甲酸的微生物
答案：D
知识点：用土壤浸出液进行细菌培养
解析：解答：从混合物中分离某种微生物要用选择培养基，需要在培养基中加入特定的物质，如羟基苯甲酸，在该培养基中所需要的微生物能大量繁殖，故AB正确；稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示，故C正确；有些微生物可以利用其它微生物的代谢产物来进行生长繁殖，所以在选择培养基上生长的微生物不一定是所选择的微生物，故D错误。
分析：本题主要考查微生物分离，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系和识图、图文转化的能力。
15．下列叙述不正确的是( )
A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离
B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同
C．如果得到了多个菌落数目在30—300的平板，则说明稀释操作比较成功
D．牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
答案：D
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落，D错误 。
分析：本题考查土壤中各类微生物的分离，意在考查考生对知识的掌握情况。
16．在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B．分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌
C．分解尿素的细菌、霉菌、放线菌
D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
答案：C
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：乳酸菌属于异养厌氧微生物，不能在缺氮培养基上生存；金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，A错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，大肠杆菌不能在添加青霉素的选择培养基上生存，B错误；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，在添加青霉素的选择培养基上可以筛选分离真菌（如霉菌），加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长可以筛选分离放线菌，C正确；在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离固氮微生物，金黄色葡萄球菌属于细菌，不能在添加青霉素的选择培养基上生存，D错误。
分析：本题主要考查微生物的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
17．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是( )
A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释
B．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌
C．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板
D．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照
答案：B
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：从土壤中分离分解尿素的细菌时，由于土壤浸出液的微生物种类和数量较多，因此需要用无菌水进行一系列梯度稀释，故A正确；用尿素为唯一氮源的培养基可以筛选出分解尿素的细菌，加入刚果红指示剂只能鉴定出分解尿素的细菌，而不能筛选，故B错误；同一浓度的土壤浸出液至少涂布三个平板，防止偶然因素对实验结果的影响，故C正确；未接种的培养基在相同条件下培养为对照组，可以判断培养基是否灭菌彻底，故D正确。
分析：本题考查微生物的实验室培养的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
18．下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是( )
A.在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用平板划线法
B.制作果醋时应不断通入无菌空气
C.通过比色法来检测亚硝酸盐含量需要制备标准显色液
D.利用DNA和蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同提取DNA
答案：A
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用稀释涂布平板法，A错。制作果醋与醋酸菌相关，醋酸菌为好氧菌，在有氧下生成醋酸，B正确。检测亚硝酸盐含量需要制备标准显色液，与样品颜色变化比较，找出与标准液最相近的颜色，记录对应亚硝酸盐含量，进行计算，C正确。DNA和蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，选择适当盐浓度就能使DNA溶解，使杂质沉淀，或者相反，达到分离目的，D正确。
分析：本题考查生物技术实践相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。
19．下列关于高中生物学实验的叙述，正确的是( )
A．在制备果酒和果醋的实验过程中都要持续通入氧气
B．分离土壤中不同种类的微生物需采用相同的稀释度
C．将DNA粗提取后用二苯胺进行鉴定时需要进行水浴加热
D．选择过氧化氢酶作为探究温度对酶活性影响实验的理想材科
答案：C
知识点：用土壤浸出液进行细菌培养
解析：解答：果酒制作过程中需用酵母菌，前期需通入氧气，后期保持无氧环境进行发酵产生酒精，而果醋制作过程中的醋酸菌是好氧细菌，在整个过程中都要持续通入氧气，A错误；因为不同的微生物在土壤中的浓度不同，故分离土壤中不同种类的微生物需采用不同的稀释度，B错误；DNA粗提取后用二苯胺进行鉴定时需要进行水浴加热，C正确；因为过氧化氢不稳定，在高温下会自行分解成水和氧气，从而不能正确表现酶活性，故不能选择过氧化氢酶研究温度对酶活性的影响，D错误。
分析：本题主要考查生物学实验的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
20．从土壤中分离以尿素为氮源的细菌,下列实验操作不正确的是( )
A.将土壤用无菌水稀释,制备103~105稀释倍数的土壤稀释液
B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上
C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌
D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株
答案：C
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：从土壤中分离以尿素为氮源的细菌时,将土壤用无菌水稀释,制备土壤稀释液,将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上,用加入酚红指示剂的鉴别培养基可以鉴别分解尿素的细菌。从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株。
分析：本题主要考查从土壤中分离以尿素为氮源的细菌生物学实验的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
21．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养基成分如下表所示，实验步骤如图1所示。回答下列问题
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
1.4 g 2.1 g 0.2 g 10 g 1 g 15 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，调pH为7.2
（1）分解尿素的细菌能分泌________酶，能将尿素分解成__________。
（2）培养基中为“目的菌”生长提供氮源和碳源的物质分别来自________和_________。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，在培养时应采用的操作方法是______________。
（3）图中将细菌转到固体培养基上时，应采用________法接种以获得单个菌落。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定，鉴定方法是检测初步筛选目的菌种培养基的pH，若pH_______（降低/不变/升高），说明该菌种能够分解尿素。
（4）A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。有同学认为造成A同学实验结果的原因是培养基被杂菌污染。为了证实该说法，则进一步实验的操作思路是_______________。
答案：(1) 脲 氨
（2）尿素 葡萄糖 振荡培养
（3）稀释涂布 升高
（4）将A同学的培养基在不加土样的情况下，设置空白对照
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：（1）分解尿素的细菌能分泌脲酶，能将尿素分解成氨。（2）培养基中加入尿素和葡萄糖的目的是为目的菌提供氮源和碳源。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，在培养时应振荡培养，增大溶氧量。（3）转入固体培养基常采用平板划线法或稀释涂布平板法。检测初步筛选目的菌种培养基的pH，若pH升高，说明该菌种能够分解尿素，因为尿素分解后产生的氨呈碱性。（4）为了确定培养基是否被杂菌污染，应将A同学的培养基在不加土样的情况下，设置空白对照，观察实验结果。
分析：本题考查细菌的培养和分离的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构；能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订的能力。
22．下面是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方，请回答有关问题。
（1）图1中方框内应该填写的的实验步骤是 ，此步骤中起主要作用的微生物是 ，其发酵时 （需要／不需要）氧气，适宜的发酵温度范围是 。
（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？ (能/不能)，原因是 。
（3）如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是 。通常鉴定分解尿素的细菌的方法是在培养基中加入 指示剂。
答案：（1）醋酸发酵（或果醋发酵） 醋酸菌 需要 30～35℃
（2）不能 培养基还含蛋白胨做氮源（尿素不是唯一氮源），不能选择出只以尿素为氮源的微生物
（3）稀释涂布平板法 酚红
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量 酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋
解析：解答：（1）制作果酒和果醋的实验流程如下，
据此可知图1中方框内应该填写的的实验步骤是醋酸发酵（或果醋发酵），此步骤中起主要作用的微生物是醋酸菌。醋酸菌是一种好氧细菌，其发酵时需要氧气。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，所以30～35℃是醋酸发酵的适宜的发酵温度范围。
（2）培养基配方中的氮源除了尿素外，还有蛋白胨，由于尿素不是唯一的氮源，因此不能分离出只以尿素为唯一氮源的土壤中分解尿素的细菌。
（3）欲对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法为稀释涂布平板法。在培养基中加入酚红指示剂可鉴定分解尿素的细菌。
分析：本题考查果酒和果醋的制作、微生物的培养与应用的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
23．有2位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果：甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230；乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，并且取平均值163作为统计结果。请评价这两位同学的实验结果的合理性。
（1）甲同学________，原因是___________________________________________。
（2）乙同学________，原因是___________________________________________。
（3）正确做法是_______________________________________________________。
（4）稀释涂布平板法所用培养基按物理性质划分属于________培养基；
（5）倒平板前保证培养基无菌的常用方法是_______________________________。
答案：(1)不合理 没有设置重复组，结果不具有说服力
（2）不合理 其中1个计数结果与另2个相差太远(或在操作过程中可能出现错误，或只简单地计算了平均值)
（3）在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否相当，结果差距太大，意味着操作有误，需要重新实验
（4）固体
（5）高压蒸汽灭菌法
知识点：用土壤浸出液进行细菌培养 测定某种微生物的数量
解析：解答：(1) 甲同学的实验操作不合理。其原因是涂布了一个平板，没有设置重复组，结果不具有说服力。
（2）乙同学的结果也不合理。其原因是其中的1个计数结果与另外2个相差太远，不能只简单地用其平均值。
（3）在设计实验时，一定要至少涂布3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否相当，结果差距太大，意味着操作有误，需要重新实验。
（4）因培养基中加入了凝固剂琼脂，所以稀释涂布平板法所用的培养基按物理性质划分属于固体培养基。
（5）培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌。
分析：本题考查微生物的培养与应用的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
24．酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：
（1）从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于_____________培养基。该培养基的氮源来自____________。
（2）筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是____________和___________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时，需用移液管将lmL菌液移入盛有_______________mL蒸馏水的试管中。
（3）对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量_______（多于／等于／小于）后者，其原因是________。
（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。右表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用__________g／dL。若利用固定化酶技术，它的优点是_________________。
海藻酸钠质量浓度（g/dL） 凝胶强度 凝胶气泡量 成球难度 凝珠形状
1.0 中 没有 较易 扁圆形
2.0 中 少量 易 圆球形
3.0 强 较多 稍难 有托尾
4.0 强 大量 难 难成球形
答案：（1）选择 尿素
（2）平板划线法 稀释涂布平板法 9
（3）多于 有些菌落连接在一起，计数偏小
（4）CaCl2 2.0 可重复利用，且利于产物的纯化
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：（1）从功能上分析，该培养基用于筛选酸性脲酶生产菌，属于选择培养基。从培养基的成分分析，该培养基的氮源来自尿素。
（2）筛选和纯化菌种常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时，需用移液管将lmL菌液移入盛有9mL蒸馏水的试管中。
（3）用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数时，若不存在实验误操作，由于有些菌落连接在一起，计数偏小，则前者的数量多于后者。
（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，海藻酸钠形成的凝胶珠应为圆球形，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用2.0g／dL。固定化酶技术的优点是可重复利用，且利于产物的纯化。
分析：本题考查生物技术实践的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
25．请分析回答下列有关生物技术实践方面的问题：
（1）微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及 。
（2）在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰，其目的是 。
（3）某同学用稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数(取10g该土壤加90ml无菌水制成稀释液)。在对应稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为：121、212、256．则每克该土壤样品中的菌落数为 。
（4）分离分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取样、梯度稀释、样品涂布到 培养基上、挑选 。
答案：（1）碳源和氮源
（2）灭菌
（3）1.96×109
（4）选择 菌落
知识点：以尿素为氮源，测定能生长的细菌的数量
解析：解答：（1）微生物培养基中成分一般都含有水、无机盐、碳源和氮源等.（2）在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰，其目的是灭菌，防止微生物污染。（3）每克该土壤样品中的菌落数为（121+212+256）/3×106×10＝1.96×109。（4）分离分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取样、梯度稀释、样品涂布到选择培养基上、挑选菌落。
分析：本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力以及能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。
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