新课标人教版高中生物选修1专题4课题3《酵母细胞的固定化》同步训练.doc

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人教版生物选修1专题4.3酵母细胞的固定化
同步训练
1．下面是制备固定化酵母细胞的步骤，正确的是（ ）
①配制CaCl2溶液 ②海藻酸钠溶化 ③海藻酸钠与酵母细胞混合
④酵母细胞的活化 ⑤固定化酵母细胞
A．①②③④⑤ B．④①③②⑤ C．④⑤②①③ D．④①②③⑤
答案：D
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：制备固定化酵母细胞的步骤是：细胞的活化、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液、配制海藻酸钠溶液、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合、固定化酵母细胞，故D正确。
分析：本题考查固定化细胞的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
2．下列有关固定化技术的叙述错误的是（ ）
A．从操作角度来考虑，固定化细胞比固定化酶更容易
B．固定化细胞比固定化酶对酶活性的影响更小
C．固定化细胞固定的是一种酶
D．固定化酶和固定化细胞的共同优点之一就是可以重复使用
答案：C
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：固定化细胞比固定化酶操作更容易，故A正确；细胞内部的酶比在外界环境中受到的影响更小，故B正确；固定化细胞固定的是一系列酶，而不是一种酶，故C错误；固定化酶和固定化细胞都可以重复利用，故D正确。
分析：本题考查酶的研究和应用的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
3．研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将从大肠杆菌得到的三酯磷酸酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与微生物降解相比，其作用不需要适宜的（ ）
A．温度 B．酸碱度 C．水分 D．营养
答案：D
知识点：固相化酶的应用价值
解析：解答：酶作用的发挥需要适宜的温度、pH，故AB不合题意；底物的浓度影响酶促反应的速率，而底物的浓度与水分多少有关，故C不合题意；营养是微生物不可或缺的条件，酶有活性，但不是生物，酶降解与用微生物降解相比不需要的是营养，故D符合题意。
分析：本题考查酶的研究和应用的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
4．如图所示，玉米经加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。相关叙述错误的是（ ）
A.筛选水解秸秆中纤维素的细菌，可采用刚果红染色法
B.发酵过程中对酵母菌数量进行计数，可采用平板划线法
C.对玉米秸秆的利用，体现了物质循环再生的生态工程原理
D.利用固定化酶技术使葡萄糖异构酶可重复利用，降低了生产成本
答案：B
知识点：固相化酶的应用价值
解析：解答：筛选水解秸秆中纤维素的细菌，可采用刚果红染色法，根据有无透明圈及透明圈的大小进行筛选，A正确；发酵过程中对酵母菌数量进行计数，可采用稀释涂布平板法，不能用平板划线法，B错误；对玉米秸秆的利用，体现了物质循环再生的生态工程原理，C正确；利用固定化酶技术使葡萄糖异构酶可重复利用，降低了生产成本，D正确。
分析：本题考查生物技术实践能的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
5．关于固定化酶技术说法，正确的是（ ）
A．固定化酶技术就是固定反应物，将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术
B．固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应
C．固定化酶中的酶无法重复利用
D．固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术
答案：D
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：固定化酶技术就是固定酶，将酶依附着载体使其能被反复利用的技术，A错误；固定化细胞的优势在于能催化一系列的酶促反应，一种酶只能催化一种或一类反应，B错误；固定化酶中的酶可以重复利用，C错误；固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术，D正确。
分析：本题考查固定化酶技术的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
6．目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列属于酶应用中面临的实际问题的是（ ）
A．酶对高温不敏感，但对强酸、强碱非常敏感
B．加酶洗衣粉因为额外添加了酶制剂，比普通洗衣粉更易污染环境
C．固定化酶可以反复利用，但在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性
D．酶的催化功能很强，但需给以适当的营养物质才能较长时间维持其作用
答案：C
知识点：固相化酶的应用价值
解析：解答：酶对高温、强酸、强碱都非常敏感，A错误；加酶洗衣粉因为额外添加了酶制剂，能减少N、P的排放，有利于保护环境，B错误；固定化酶可以反复利用，但在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性，C正确；酶的催化功能很强，但需给以适宜的温度和PH等环境条件才能较长时间维持其作用，不需要提供营养物质，D错误。
分析：本题考查酶的应用等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
7．下列有关固定化酵母技术的叙述中，正确的是（ ）
A．实验中需要先利用蒸馏水消耗酵母细胞中的有机物
B．若制备的凝胶珠的颜色过浅，可能是由于海藻酸钠的浓度偏低
C．实验中使用CaCl2溶液处理的目的是提高酵母细胞发酵效率
D．固定化酵母细胞的常用方法是吸附法，这种方法对酵母细胞活性影响最小
答案：B
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：固定化酵母技术中，需要先利用蒸馏水使酵母细胞活化，A错误；若制备的凝胶珠的颜色过浅，可能是由于海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数量过少，B正确；实验中使用CaCl2溶液处理的目的是形成凝胶珠，C错误；固定化酵母细胞的常用方法是包埋法，这种方法对酵母细胞活性影响最小，D错误。
分析：本题考查固定化酵母技术的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
8．下列说法不正确的是（ ）
A．固定化酶和固定化细胞在应用上的主要区别是后者需要一定的营养
B．固定化酶技术一次只能固定一种酶
C．固定化酶和固定化细胞的共同点之一是酶都是在细胞外起作用
D．固定化酶和固定化细胞都能反复使用
答案：C
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：固定化酶和固定化细胞在应用上的主要区别是后者需要一定的营养，以维持活细胞代谢需要，A正确；固定化酶技术一次只能固定一种酶，B正确；固定化细胞的酶不一定都是在细胞外起作用，C错误；固定化酶和固定化细胞都能反复使用，D正确。
分析：本题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
9．试分析下图中,哪一种与用海藻酸钠作载体制备的固定化酵母细胞相似（ ）
答案：D
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：分析图形可知，A是将酶吸附在载体表面上，B是将酶相互连接起来，C是将酶包埋在细微网格里，D是是将酶固定在凝胶颗粒内；用海藻酸钠作载体制备固定化酵母细胞是需将活的酵母细胞固定在凝胶颗粒内，所以选D。
分析：本题考查固定化酶与固定化细胞的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
10．下列实验准备工作中合理的是（ ）
A.为了倒平板将已凝固的固体培养基加热熔化
B.为了恢复干酵母的活力将其用沸水处理
C.为观察植物有丝分裂准备洋葱鳞片叶
D.为双缩脲试剂鉴定蛋白质的实验准备沸水浴
答案：A
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：倒平板时，锥形瓶中的培养基应该呈液体状态，因此为了倒平板，需将已凝固的固体培养基加热熔化，A项正确；用沸水处理酵母菌，会因温度过高而导致酵母菌死亡，B项错误；洋葱鳞片叶的细胞没有分裂能力，不能用于观察植物有丝分裂的材料，C项错误；蛋白质与双缩脲试剂作用，产生紫色反应，不需要沸水浴，D项错误。
分析：本题考查微生物的实验室培养、影响酵母菌活力的因素、观察植物有丝分裂、检测生物组织中的蛋白质的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
11．下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是（ ）
A.可用包埋法制备固定化酵母细胞
B.反应产物对固定化酶的活性没有影响
C.葡萄糖异构酶固定前后专一性不同
D.固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应
答案：A
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法（交联法），由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法，A正确；某些反应产物可能与酶结合，致使酶的结构产生变化，从而改变酶的催化活性，B错误；固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上，实现酶的反复利用，并提高酶稳定性，酶的各项特性（如高效性、专一性和作用条件的温和性）依然保持，C错误；固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用，但如果反应底物是大分子物质，则难以自由通过细胞膜，从而限制固定化细胞的催化反应，D错误．
分析：本题主要考查固定化酶和固定化细胞的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
12．下列属于固定化酶在利用时特点的是（ ）
A．有利于酶与产物分离
B．制成的加酶洗衣服可以被反复利用
C．能自由出入依附的载体
D．能催化一系列的酶促反应
答案：A
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：固定化酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物，在催化反应中，它以固相状态作用于底物，反应完成后，容易与水溶性反应物和产物分离，可被反复使用，A项正确，B、C项错误；能催化一系列的酶促反应是固定化细胞的优点，D项错误。
分析：本题考查细胞和酶的固定化的相关知识，意在考查学生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
13．某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验，分组见下表，下列有关说法错误的是（ ）
组别 固定化酶柱长度(cm) 淀粉溶液的流速(mL﹒min-l)
甲 10 0.3
乙 10 0.5
丙 15 0.3
丁 15 0.5
A．固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量
B．淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉
C．各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同
D．淀粉溶液的pH对实验结果有影响
答案：A
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：固定化酶柱长度决定了酶柱中酶的含量，A项错误。淀粉溶液流速过快，酶来不及催化反应发生，会导致流出液中含有淀粉，B项正确。实验要遵循等量原则，C项正确。pH影响酶的活性，D项正确。
分析：本题考查固定化酶实验和酶有关的知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构，能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。
14．下列与实验相关的叙述，错误的是（ ）
A．运用固定化酶和固定化细胞进行生产时，都需要为其提供营养物质
B．用低倍光学显微镜，就可观察到植物细胞的质壁分离及复原现象
C．用斐林试剂检测还原性糖时，可以用葡萄汁代替苹果或梨匀浆
D．判断酵母菌是否进行了酒精发酵可选择溴麝香草酚蓝水溶液，不能选择碘液
答案：AD
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：固定化细胞进行生产时，需要为其提供营养物质，固定化酶不需要，A错误；可在低倍光学显微镜下观察到植物细胞的质壁分离及复原现象，B正确；检测还原糖原料的要求是含还原糖且组织白色或接近白色，C正确；溴麝香草酚蓝水溶液可检测有无二氧化碳生成，而酵母菌有氧呼吸、无氧呼吸都能生成二氧化碳，D错误。
分析：本题考查微生物的培养及生物实验等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
15．酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有（ ）
A．热稳定性 B．催化高效性
C．催化特异性 D．可反复使用性
答案：D
知识点：固相化酶的应用价值
解析：解答：酶应用中的不足是：酶的稳定性差、一次性使用、产物的分离提纯困难等，固定化酶是指固定在一定载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶，既能与反应物接触又能与反应物分离，而酶在反应前后自身质量和化学性质不变，可以反复使用，因此酶固定化所依据的基本原理在于酶具有可反复使用性。故选D项。
分析：本题考查制备和应用固相化酶，意在考查学生能了解所列知识点，并能在相对简单的情境中识别并使用它们。
16．下列有关制备固定化酵母细胞叙述正确的是（ ）
A．在向溶化好的海藻酸钠溶液中加入的必须是已活化的酵母细胞
B．溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温，才能加入细胞
C．溶解海藻酸钠，最好采用小火，或者持续加热的方法
D．在固定化酵母细胞的过程中，要以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中
答案：ABD
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：向溶化的海藻酸钠溶液中加入的是活化的酵母细胞，故A正确。溶化好的海藻酸钠溶液需要冷却到室温才能加入细胞，否则细胞可能失去活性，故B正确。溶解海藻酸钠需用小火，或者间断加热，故C错误。固定化酵母细胞过程中，需要以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，故D正确。因此应选ABD。
分析：本题考查酵母细胞的固定化相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。
17．固定化酶的优点是（ ）
A．有利于提高酶活性 B．有利于提高反应速度
C．有利于产物的纯化 D．有利于酶发挥作用
答案：C
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：固定化酶的优点是能让酶和产物分开，有利于产物的纯化，故C正确。
分析：本题主要考查固定化酶的优点，意在考查考生能理解所学知识的要点的能力。
18．下图为某同学利用海藻酸钠固定化酵母细胞的实验结果，出现此结果的可能原因有（ ）
A．海藻酸钠浓度过高
B．酵母细胞已经死亡
C．注射器中的溶液推进速度过快
D．注射器距离CaCl2溶液液面太近
答案：ACD
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：图中凝胶珠不成球形，可能的原因是海藻酸钠浓度过高导致的，也可能是注射器距离CaCl2溶液液面太近或注射器中的溶液推进速度过快导致的，但是从图中无法看出酵母细胞的死活，故ACD正确。
分析：本题考查固定化酵母细胞的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
19．下列关于酶制剂的叙述正确的是（ ）
A.需依次经过提纯、沉淀、过滤等过程
B.经过固定化的酶才能称为酶制剂
C.酶制剂活性的维持需要提供营养物质
D.酶制剂中的酶最终来源于活细胞
答案：D
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：酶制剂是指从生物中提取的具有酶特性的一类物质，主要作用是催化食品加工过程中各种化学反应，改进食品加工方法，答案D。
分析：本题考查固定化酶的相关知识，意在考查考生能识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
20．某校学生尝试用琼脂作载体,用包埋法固定α淀粉酶来探究固定化酶的催化效果。实验结果见表(假设加入试管中的固定化淀粉酶量与普通α淀粉酶量相同)。实验表明1号试管中淀粉未被水解,你认为最可能的原因是（ ）
1号试管 2号试管
固定化淀粉酶 √ —
普通α淀粉酶 — √
淀粉溶液 √ √
60 ℃保温5分钟,取出冷却至室温,滴加碘液
现象 变蓝 不变蓝
A.实验中的温度过高,导致固定化淀粉酶失去活性
B.淀粉是大分子物质,难以通过琼脂与淀粉酶接触
C.水浴保温时间过短,固定化淀粉酶未将淀粉水解
D.实验程序出现错误,试管中应先加入碘液后保温
答案：B
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：本题考查酶的固定化,意在考查考生的理解和应用能力。由于固定化酶是用包埋法固定的,而淀粉是大分子物质,它不能通过琼脂与酶充分接触,导致淀粉不能被水解而遇碘液呈现蓝色。
分析：本题考查固定化酵母细胞的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
21．乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：
(1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用__________作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是___________。从功能上讲，这种培养基属于___________。
(2)培养微生物L前，宜采用__________方法对接种环进行灭菌。
(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越___________.
(4)乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的___________确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括___________、_____________、离子吸附法及交联法等。
答案：（1）乳糖 凝固剂 选择培养基
（2）灼烧
（3）小
（4）（酶）活性[或（酶）活力] 包埋法 物理吸附法（注：两空可颠倒）
知识点：制成固相化乳糖酶并检测牛奶中乳糖的分解
解析：解答：（1）已知乳糖乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用乳糖作为培养基中的唯一碳源，培养基中琼脂的作用是凝固剂，从功能上讲，这种培养基属于选择培养基。（2）为了避免杂菌污染，在培养微生物前，对接种环等接种工具应采用灼烧灭菌。（3）用电泳法纯化乳糖酶时，若在相同条件下分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越小，电泳速度越快。（4）固定化酶的应用价值与酶的活性（或活力）有关，因此用化学结合法固定化乳糖酶时，可通过检测固定化乳糖酶的活性（或活力）来确定其应用价值。固定酶化的方法包括化学结合法、包埋法、物理吸附法、离子吸附法及交联法等。
分析：本题考查固定化乳糖乳糖酶的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
22．生物技术实践与人们的生产和生活密切相关。请回答下列有关问题。
(1)进行菊花组织培养的基本操作步骤是制备MS固体培养基、_______ _、接种、培养、移栽、栽培。花药离体培养时，选择合适发育时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是_______ 。花粉经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中______ 。
(2)如图一表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图中的X溶液为________ ，其作用是____ 。用注射器滴加海藻酸钠与酵母菌混合液时，应将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止______ 。
(3)为了探究某加酶洗衣粉中碱性蛋白酶含量与洗涤效果的关系，某同学通过实验获得如图二所示的结果。由图可知，加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是______%，本实验的自变量是 _______________ 。
答案：(1)外植体消毒 醋酸洋红法 激素的种类及其浓度配比
(2)CaCl2溶液 使海藻酸钠形成凝胶珠 高温杀死酵母菌
(3)0．6 碱性蛋白酶的含量
知识点：植物的组织培养 脂肪酶、蛋白酶的洗涤效果 制备和应用固相化酶
解析：解答：(1)进行菊花组织培养的基本操作步骤是制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培。确定花粉发育时期最常用的染色方法是醋酸洋红法。花粉经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
(2) 制备固定化酵母细胞时，将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温后再加入已活化的酵母菌，目的是防止高温杀死酵母菌。用注射器将海藻酸钠与酵母菌混合液滴加入CaCl2溶液中，可使海藻酸钠形成凝胶珠，固定酵母菌。
(3)分析图二曲线可知，加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量0．6%，本实验自变量是碱性蛋白酶的含量。
分析：本题考查植物组织培养、酵母细胞固定化及加酶洗衣粉的相关实验，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。
23．酵母菌与人们的日常生活密切相关，也是现代生物技术研究常用的生物。
（1）制作固定化酵母细胞时，充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和的______溶液中形成凝胶珠。若形成凝胶珠颜色过浅，则说明________。酵母细胞的固定化技术是包埋法，而制备固定化酶则不宜用此方法，原因是____ __。
（2）利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可观察到的现象为___ ___，同时会闻到酒味。利用酵母菌发酵产生酒精时要控制的必要条件是____ __。
（3）利用玉米秸杆生产酒精时，水解秸杆所用的纤维素酶可来自微生物。分离产生该酶的微生物时，所需要的培养基为________（按功能分），培养基中的碳源为___ ___。微生物培养时对培养基常用________灭菌。
答案：（1）CaCl2 固定化酵母菌细胞数目较少 酶分子很小，容易从包埋材料中漏出
（2）产生很多气泡 无氧
（3）选择培养基 纤维素 高压蒸汽
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：（1）制作固定化酵母细胞时，充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和的CaCl2溶液中形成凝胶珠；若形成凝胶珠颜色过浅，则说明固定化酵母菌细胞数目较少；因为酶分子很小，容易从包埋材料中漏出，所以制备固定化酶不宜用包埋法，而是更适合采用化学结合和物理吸附法固定化。
（2）酵母菌发酵可以产生CO2和酒精，所以利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可观察到有很多气泡产生，同时会闻到酒味；利用酵母菌发酵产生酒精时的必要条件是无氧。
（3）分离产生纤维素酶的微生物时，按功能分，所需要的培养基为选择培养基；培养基中的碳源为纤维素；微生物培养时常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。
分析：本题考查酶的研究与利用的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
24．下面是某同学所做的生成啤酒酿造实验，请根据其实验过程，回答相关问题：
实验原理：利用固定化酵母菌分解麦芽汁，生成啤酒。
实验步骤：
第一步：酵母细胞活化。取一克干酵母，放入50mL的小烧杯中，加蒸馏水10mL，用玻璃棒搅拌均匀，放置一小时，使其活化。
第二步：配制海藻酸钠溶液。取0.7g海藻酸钠，放入另一只50mI的小烧杯中，加蒸馏水10mL，并搅拌，直至溶化，用蒸馏水定容至10mL。加热时，注意火候。
第三步：海藻酸钠与酵母细胞混合。将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入活化的酵母细胞，充分搅拌均匀。
第四步：用注射器以恒定的速度将上述混合液滴加到0.05mol/LCaCl2溶液。制成凝胶珠。
第五步：倒去CaCl2溶液，加无菌水洗涤三次后，将凝胶珠放入500mL三角瓶中，加入300mL麦芽汁溶液，置于25℃下封口，发酵五天后，倒出发酵后的麦芽汁即为啤酒，品尝其口味。
（1）酵母细胞活化的作用是 。第二步中注意火候指的是 。第三步中为什么要等海藻酸钠溶液冷却至室温，再加入活化的酵母细胞？ 。
（2）凝胶珠的组成是海藻酸钠与 。海藻酸钠的主要作用是 。
（3）上述固定化细胞的方法称为 ，形成的凝胶珠颜色为 色。如果形成的凝胶珠颜色过浅，则配制的海藻酸钠溶液浓度 ，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则配制的海藻酸钠浓度 。
（4）与固定化酶相比，该方法的优点是 。
（5）要想反复使用固定化酵母细胞，实验过程要在严格的 条件下进行，同时要控制适宜的 和 。
答案：⑴ 让休眠状态的酵母细胞恢复到正常生活状态 用小火或间断加热 防止高温杀死酵母细胞
⑵ 酵母细胞 固定酵母细胞
⑶ 包埋法 浅黄色 过低 过高
⑷ 成本更低，操作更容易；省去酶的分离、提纯等工序，同时酶的活性更稳定
⑸ 无菌 温度 PH
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：（1）酵母细胞活化的作用是让休眠状态的酵母细胞恢复到正常生活状态。第二步中注意火候指的是用小火或间断加热，防止海藻酸钠焦糊。为防止高温杀死酵母细胞，第三步中要等海藻酸钠溶液冷却至室温，再加入活化的酵母细胞。
（2）凝胶珠的组成是海藻酸钠与酵母细胞。海藻酸钠的主要作用是固定酵母细胞。
（3）上述固定化细胞的方法称为包埋法，形成的凝胶珠颜色为浅黄色色。如果形成的凝胶珠颜色过浅，则配制的海藻酸钠溶液浓度过低，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则配制的海藻酸钠浓度过高。
（4）与固定化酶相比，固定化细胞的优点是成本更低，操作更容易；省去酶的分离、提纯等工序，同时酶的活性更稳定。
（5）要想反复使用固定化酵母细胞，实验过程要在严格的无菌条件下进行，同时要控制适宜的温度和PH，以保证酵母细胞的活性。
分析：本题考查酵母细胞固定化的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
25．固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率)，分析回答下列问题。
（1）测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的 或产物的 来表示。
（2）从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是_______。
（3）乙图曲线表明浓度为________的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低原因是___________________。
（4）固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，由丙图可知，固定化酯酶一般可重复使用______次，酶活力明显下降。
（5）固定小麦酯酶不仅采用海藻酸钠直接包埋，同时用戊二醛作交联剂，这是因为________。
答案：⑴减少量 增加量
⑵固定化酶比游离酶对温度变化适应性更强且应用范围较广
⑶3% 海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足
⑷3
⑸酶分子很小，很容易从包埋材料中漏出
知识点：制备和应用固相化酶
解析：解答：⑴酶活力通常用底物的消耗量或产物的生成量表示。
（2）通过分析甲图可知，固定化酶与游离酶相比，对温度变化的适应性更强且应用范围较广．
（3）乙图曲线表明浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好，此时酶活力最高．当海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足，因此酶活力较低．
（4）由丙图可知，固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，且在使用3次以后，酶活力显著下降．
（5）由于小麦酯酶分子很小，很容易从包埋材料中漏出，因此固定小麦酯酶不采用海藻酸钠直接包埋，而是采用双重固定法．
分析：本题考查固定化技术，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
产乳糖酶微生物L的筛选
乳糖酶的固定化
乳糖酶的提取纯化
产乳糖酶微生物L的培养
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