(
条件
) (
（
2
）待酵母菌
到
计数室底部， 再用 进
行观察、计数。
) (
绘图分析
)
第 2 节 种群数量的变化
第 2 课时 培养液中酵母菌种群数量的变化
班级 学号 姓名
1.学会利用血细胞计数板对酵母菌计数。
2.探究培养液中酵母菌种群数量的变化。
1. 实验原理
（1）用 培养基培养酵母菌， 酵母菌种群的增长受培养液的 等因素的影响。 （2）在理想的环境中，酵母菌种群的增长呈 曲线；在有限的环境中， 一定时间内，酵母菌种群的
增长呈 曲线。
（3）计算酵母菌数量可采用 的方法——显微计数法。
2. 实验步骤
液体培养基、无菌条件
(
振荡培养酵母菌
) (
使酵母菌均匀分布于培养基中
) (
目
的
) (
计数初始数量，连续观察
7
天，每天
定时取样、计数
) (
观察并计数
)（1）先将 放在计数室 上 ， 用吸管吸取培养液 ， 滴 于 ，让培养 液 。多余的培养液 用 吸去。
将所得数值用曲线表示出来， 得出酵 母菌种群数量变化规律
3. 结果
（1）曲线
酵母菌的数量变化：先 ， 一段时间后 。
（2）变化原因分析
①开始培养时， 相对充足，条件适宜，酵母菌 ，种群数量增加。
②种群数量增加到一定值时，由于 等，种群数量维持 。
③随 不断消耗、 变化、 积累，生存条件恶劣，种群数量 。
4. 血细胞计数板及计数方法
（1）血细胞计数板：血细胞计数板有两个方格网， 每个方格网有 9 个大方格， 中央的一个大方格为 。 计数室的面积为 1mm2 ，计数室两侧各有一条高出计数室平面 0.1mm 的结构，加盖玻片后，盖玻片和计数
室间形成 0.1mm3 的缝隙，因此，计数室的容积为 mm3（1×10-4mL）。
（2）计数室通常有两种规格：16 个中方格×25 个小方格和 25 个中方格×16 个小方格，两种规格的计数室
均被分成 400 个小方格。
（3）计数方法
放大的方格网（9 个大方格）
放大的计数室（25×16）
以 25×16 型为例：可用 统计计数室中 5 个中方格中的总菌数，结合公式计算。
计算公式为 1mL 培养液中细胞个数=5个中方格中小方格个数 (5个中方格中的细胞总数) 根 400 根104 根 稀释倍数
【实验操作注意事项】
(1)在从试管中吸取培养液前,需将试管轻轻振荡几次, 目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,减小误差。
(2)每天取样的时间要尽量保持相同,并做到随机取样。
(3)若取出的液体中酵母菌密度过大,可以增加稀释倍数。
(4)计数时先将盖玻片放在计数室上,将培养液滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入。
(5)用显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应只计数相邻两边及其顶角的(类似于“样方法”)。
【特别提醒】
(1)实验的对照设置:酵母菌在不同时间的数量可以形成前后对照,不需要另设对照实验。
(2)实验的重复性原则:为减少实验误差,需要做重复实验求平均值,以保证实验结果的准确性。
5.判断下列相关表述的正误
(1)利用血细胞计数板计数时，要先向计数室滴加培养液，再盖上盖玻片。 ( )
(2)探究本实验需要设置对照实验( )
(3)待酵母菌全部沉降到计数室底部再开始计数( )
任务一 如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数
资料 1 血细胞计数板是一块比普通载玻片厚的特制玻片。它由四条下凹的槽构成三个平台。中间的平台较 宽，它的中间被一个短横槽隔为两半，每个半边上刻有一个方格网(如图 A)。每个方格网上有 9 个大方格，
其中只有中间的一个大方格为计数室，供计数用。
1．计数室的长和宽各为 1 mm，深度为 0.1 mm，容积为 mm3。计数室通常有两种规格， 一种是大方格 分为 25 个中方格，每个中方格又分为 16 个小方格；另一种是大方格分为 16 个中方格，每个中方格又分为
25 个小方格。这两种规格的计数室，每个大方格都由 个小方格组成。
2 ．盖盖玻片和滴加培养液哪个步骤在前？
3 ．从试管中吸出培养液进行计数之前，建议将试管轻轻振荡几次。这是为什么？
4 ．滴加培养液后要稍等片刻，待酵母菌全部沉降到计数室底部再计数。请分析原因。
5 ．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取什么措施？
6 ．计数的酵母菌都是活的吗？怎样分辨是否为活菌？
7 ．对于压在计数方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？
8．若使用的血细胞计数板(规格为 1 mm×1 mm×0.1 mm)每个计数室分为 25 个中方格， 每个中方格又分为 16 个小方格，将样液稀释 100 倍后计数，发现计数室四个角及中央共 5 个中方格内的酵母菌总数为 20 个，
则培养液中酵母菌的密度为 个/mL。
任务二：实验设计及结果分析
1 ．探究本实验需要设置对照实验吗？需要做重复实验吗？
2 ．设计记录表记录结果。
3.根据实验结果绘制的曲线图如图所示，请分析回答下列问题：
(1)增长曲线的总趋势是 ，原因是在开始时培养液的 、空间充裕、条件适宜，因此酵 母菌大量繁殖， 种群数量剧增， 随着酵母菌数量的不断增多， 营养消耗、pH 变化、 积累等， 使生
存条件恶化，酵母菌死亡率高于出生率，种群数量下降。
(2)根据酵母菌数量的变化曲线，作出对应增长速率的曲线图。
4 ．进一步探究：其他因素对酵母菌种群数量的影响。
资料 2 实验设计如表所示：
试管编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃)
1 10 - 0.1 28
2 10 - 0.1 5
3 - 10 0.1 28
每天同一时间，各组取出试管，用血细胞计数板分别计数酵母菌个数并记录，连续观察 7 天种群的密度变
化如曲线图所示：
(1)本实验的自变量是 。
(2)A 曲线对应的培养条件是什么？
(3)由实验结果可以得出结论：
。
1.如图为某同学在完成“探究培养液中酵母菌种群数量的变化 ”实验时通过显微镜观察到的血细胞计数板
(1 mm×1 mm×0.1 mm)中一个中方格中的菌体分布①情况,稀释倍数为 100 倍②。下列说法错误的是 ( )
A.本实验存在对照,对酵母菌数量的调查方法常用抽样检测法
B.制片时,先用吸管滴加样液,再将盖玻片放在计数室上
C.取样时从静置的培养液底部吸取,会导致数据偏大
D.若五个中方格的酵母菌平均数如图所示,则估算该稀释度下酵母菌的种群密度为 6×108 个/mL
2. (2023·山东菏泽期末)在探究“培养液中酵母菌种群数量的变化 ”实验中，某同学将 10 mL 酵母菌培养液放在适宜的条件下培养，并间隔相同时间分别等量均匀取样 4 次，测定样液的
pH 和酵母菌数量如下表所示。据表分析错误的是( )
样品 酵母菌数量/(个·mm－3) pH
1 1 210 4.8
2 820 5.4
3 1 210 3.7
4 1 000 5.0
A.取样的先后次序为 2 、4 、1 、3
B.10 mL 培养液的 K 值可能为 1.21×107 个
C.培养过程中酵母菌的出生率始终大于死亡率
D.若再次取样测定， 10 mL 培养液中的酵母菌数量有可能低于 1.21×107 个(
条件
) (
（
2
）待酵母菌
全部沉降
到
计数室底部， 再用
显微镜
进
行观察、计数。
) (
绘图分析
)第 2 节 种群数量的变化
第 2 课时 培养液中酵母菌种群数量的变化
班级 学号 姓名
1.学会利用血细胞计数板对酵母菌计数。
2.探究培养液中酵母菌种群数量的变化。
1. 实验原理
（1）用 液体 培养基培养酵母菌，酵母菌种群的增长受培养液的 成分、pH、温度 等因素的影响。
（2）在理想的环境中，酵母菌种群的增长呈 “J ”形 曲线；在有限的环境中， 一定时间内，酵母菌种群
的增长呈 “S ”形 曲线。
（3）计算酵母菌数量可采用 抽样检测 的方法——显微计数法。
2. 实验步骤
液体培养基、无菌条件
(
振荡培养酵母菌
) (
使酵母菌均匀分布于培养基中
) (
目
的
) (
计数初始数量，连续观察
7
天，每天
定时取样、计数
) (
观察并计数
)（1）先将 盖玻片 放在计数 室上， 用吸管吸取培养液， 滴于 盖玻片边缘 ，让培养液 自行 渗入 。多余的培养液用 滤纸 吸去。
将所得数值用曲线表示出来， 得出酵 母菌种群数量变化规律
3. 结果
（1）曲线
酵母菌的数量变化：先 上升 ， 稳定 一段时间后 下降 。
（2）变化原因分析
①开始培养时， 营养、空间 相对充足，条件适宜，酵母菌 大量繁殖 ，种群数量增加。
②种群数量增加到一定值时，由于 空间不足 等，种群数量维持 相对稳定 。
③随 营养 不断消耗、 pH 变化、 代谢产物 积累，生存条件恶劣，种群数量 下降 。
4. 血细胞计数板及计数方法
（1）血细胞计数板：血细胞计数板有两个方格网，每个方格网有 9 个大方格，中央的一个大方格为 计数 室 。计数室的面积为 1mm2 ，计数室两侧各有一条高出计数室平面 0.1mm 的结构，加盖玻片后，盖玻片
和计数室间形成 0.1mm3 的缝隙，因此，计数室的容积为 0.1 mm3（1×10-4mL）。
（2）计数室通常有两种规格：16 个中方格×25 个小方格和 25 个中方格×16 个小方格，两种规格的计数室
均被分成 400 个小方格。
（3）计数方法
放大的方格网（9 个大方格）
放大的计数室（25×16）
以 25×16 型为例：可用 五点取样法 统计计数室中 5 个中方格中的总菌数，结合公式计算。
计算公式为 1mL 培养液中细胞个数=5个中方格中小方格个数 (5个中方格中的细胞总数) 根 400 根104 根 稀释倍数
【实验操作注意事项】
(1)在从试管中吸取培养液前,需将试管轻轻振荡几次, 目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,减小误差。
(2)每天取样的时间要尽量保持相同,并做到随机取样。
(3)若取出的液体中酵母菌密度过大,可以增加稀释倍数。
(4)计数时先将盖玻片放在计数室上,将培养液滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入。
(5)用显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应只计数相邻两边及其顶角的(类似于“样方法”)。
【特别提醒】
(1)实验的对照设置:酵母菌在不同时间的数量可以形成前后对照,不需要另设对照实验。
(2)实验的重复性原则:为减少实验误差,需要做重复实验求平均值,以保证实验结果的准确性。
5.判断下列相关表述的正误
(1)利用血细胞计数板计数时，要先向计数室滴加培养液，再盖上盖玻片。 ( × )
(2)探究本实验需要设置对照实验( × )
(3)待酵母菌全部沉降到计数室底部再开始计数( × )
任务一 如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数
资料 1 血细胞计数板是一块比普通载玻片厚的特制玻片。它由四条下凹的槽构成三个平台。中间的平台较 宽，它的中间被一个短横槽隔为两半，每个半边上刻有一个方格网(如图 A)。每个方格网上有 9 个大方格，
其中只有中间的一个大方格为计数室，供计数用。
1．计数室的长和宽各为 1 mm，深度为 0.1 mm，容积为 0.1 mm3。计数室通常有两种规格，一种是大方格 分为 25 个中方格，每个中方格又分为 16 个小方格；另一种是大方格分为 16 个中方格，每个中方格又分为
25 个小方格。这两种规格的计数室，每个大方格都由 400 个小方格组成。
2 ．盖盖玻片和滴加培养液哪个步骤在前？
提示 先盖盖玻片，再滴加培养液于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，用滤纸吸去多余的培养液。
3 ．从试管中吸出培养液进行计数之前，建议将试管轻轻振荡几次。这是为什么？
提示 使培养液中的酵母菌分布均匀，以减少误差。
4 ．滴加培养液后要稍等片刻，待酵母菌全部沉降到计数室底部再计数。请分析原因。
提示 如果酵母菌未能全部沉降到计数室底部，通过显微镜观察时，就可能出现以下现象：要么能看清酵
母菌但看不清格线，要么能看清格线但看不清酵母菌。
5 ．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取什么措施？
提示 当小方格中的酵母菌过多时，可以增大稀释倍数然后再计数，即计数前应摇匀→取样→稀释→计数。
6 ．计数的酵母菌都是活的吗？怎样分辨是否为活菌？
提示 不都是，计数的酵母菌包括活菌和死菌。可以用台盼蓝染液对菌体进行染色，被染成蓝色的是死菌，
没有染色的是活菌。
7 ．对于压在计数方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？
提示 对于压在计数方格界线上的酵母菌，应只计数相邻两边及其夹角(一般是左上边界及其夹角)的酵母菌。
8．若使用的血细胞计数板(规格为 1 mm×1 mm×0.1 mm)每个计数室分为 25 个中方格， 每个中方格又分为 16 个小方格，将样液稀释 100 倍后计数，发现计数室四个角及中央共 5 个中方格内的酵母菌总数为 20 个，
则培养液中酵母菌的密度为 20×(25÷5)×100×10 000 ＝1×108 个/mL。
任务二：实验设计及结果分析
1 ．探究本实验需要设置对照实验吗？需要做重复实验吗？
提示 酵母菌在不同时间内的数量可以相互对照，不需另设对照实验。需要做分组重复实验获取平均值，
以保证计数的准确性(对每个样品可计数三次，再取平均值)。
2 ．设计记录表记录结果。
提示 如表所示
时间/天 次数 1 2 3 4 5 6 7
1
2
3
平均值
3.根据实验结果绘制的曲线图如图所示，请分析回答下列问题：
(1)增长曲线的总趋势是先增加再降低，原因是在开始时培养液的 营养充足、空间充裕、条件适宜，因此酵 母菌大量繁殖， 种群数量剧增， 随着酵母菌数量的不断增多， 营养消耗、pH 变化、 有害产物积累等， 使生
存条件恶化，酵母菌死亡率高于出生率，种群数量下降。
(2)根据酵母菌数量的变化曲线，作出对应增长速率的曲线图。
提示 如图所示
4 ．进一步探究：其他因素对酵母菌种群数量的影响。
资料 2 实验设计如表所示：
试管编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃)
1 10 - 0.1 28
2 10 - 0.1 5
3 - 10 0.1 28
每天同一时间，各组取出试管，用血细胞计数板分别计数酵母菌个数并记录，连续观察 7 天种群的密度变
化如曲线图所示：
(1)本实验的自变量是温度、营养物质。
(2)A 曲线对应的培养条件是什么？
提示 10 mL 培养液中 28 ℃下培养(试管 1)。
(3)由实验结果可以得出结论：温度和营养物质均会对酵母菌种群数量产生影响，温度较低时种群增长缓慢，
营养缺乏时种群几乎不增长。
1.如图为某同学在完成“探究培养液中酵母菌种群数量的变化 ”实验时通过显微镜观察到的血细胞计数板
(1 mm×1 mm×0.1 mm)中一个中方格中的菌体分布①情况,稀释倍数为 100 倍②。下列说法错误的是 ( )
A.本实验存在对照,对酵母菌数量的调查方法常用抽样检测法
B.制片时,先用吸管滴加样液,再将盖玻片放在计数室上
C.取样时从静置的培养液底部吸取,会导致数据偏大
D.若五个中方格的酵母菌平均数如图所示,则估算该稀释度下酵母菌的种群密度为 6×108 个/mL
[解题思维]
提取关键点 ①一个中方格中的菌体分布 ②稀释倍数为 100 倍
转化知识点 酵母菌种群密度的计算,酵母菌种群数量的调查方法
排除障碍点 血细胞计数板使用时应先盖盖玻片再滴加样液
答案 B
解析 本实验自身前后形成对照,对酵母菌数量的调查方法常用抽样检测法,A 正确 ;在血细胞计数板计数室 上先盖上盖玻片后,在盖玻片一侧的边沿用吸管滴加样液,让其自行渗入计数室,B 错误 ;酵母菌是兼性厌氧 菌,若取样时从静置的培养液底部吸取,会导致数据偏大,C正确;中格中酵母菌数为24,稀释倍数为 100,故酵
母菌的种群密度为 24×25×104 ×100=6×108 个/mL,D 正确。
2. (2023·山东菏泽期末)在探究“培养液中酵母菌种群数量的变化 ”实验中，某同学将 10 mL 酵母菌培养液放在适宜的条件下培养，并间隔相同时间分别等量均匀取样 4 次，测定样液的
pH 和酵母菌数量如下表所示。据表分析错误的是( )
样品 酵母菌数量/(个·mm－3) pH
1 1 210 4.8
2 820 5.4
3 1 210 3.7
4 1 000 5.0
A.取样的先后次序为 2 、4 、1 、3
B.10 mL 培养液的 K 值可能为 1.21×107 个
C.培养过程中酵母菌的出生率始终大于死亡率
D.若再次取样测定， 10 mL 培养液中的酵母菌数量有可能低于 1.21×107 个
答案 C
解析 酵母菌细胞呼吸会产生二氧化碳，使培养液的 pH 下降，根据 pH 确定取样的先后次序 为 2 、4 、1 、3 ，A 正确；1 mL ＝1 000 mm3 ，据表中数据可知，酵母菌的数量在样品 1 和样品 3 中相等且达到最大值， 10 mL 培养液的 K 值可能为 1 210×1 000×10 ＝1.21×107 个，B 正确； 从表中数据可知， 酵母菌的数量在样品 1 和样品 3 中相等， 说明对应的培养过程中酵母菌的出 生率等于死亡率， C 错误；随着培养时间的延长， 营养物质逐渐减少， 有害代谢产物大量积累， 培养液 pH 的改变， 可能会导致酵母菌数量减少， 若再次取样测定， 10 mL 培养液中的酵母菌
数量有可能低于 1.21×107 个， D 正确。
