山东省济宁市梁山县2023-2024学年高二下学期质量检测联合调考试题（含解析）

高二质量检测联合调考
生物学
本试卷满分100分，考试用时90分钟。
注意事项：
1．答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
4．本试卷主要考试内容：人教版选择性必修3。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1．某同学在制作泡菜前，查阅资料得知，可以向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”。在制作泡菜时，他在不同时间测定了泡菜中的亚硝酸盐含量，结果如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．该同学制作出的泡菜“咸而不酸”，可能的原因是食盐浓度过高、发酵温度过低等
B．泡菜制作过程中检测亚硝酸盐含量的目的是了解乳酸菌的生长状况
C．泡菜制作过程中加入的“陈泡菜水”需要进行灭菌处理
D．泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量越积越多，因此泡菜的取食时间越早越好
2．酵母菌的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。下列相关叙述正确的是（ ）
A．纯培养物是由单一酵母菌繁殖所获得的酵母菌群体分泌的代谢物
B．在配制固体培养基时需要先进行灭菌，再对pH进行调节
C．倒平板时冷却后的培养皿须倒置主要是为了方便观察
D．利用平板划线法接种时，接种环只蘸取一次酵母菌液
3．啤酒是以大麦为主要原料制成的，利用大麦生产啤酒的过程如图所示。下列有关说法错误的是（ ）
A．大麦发芽的过程中产生淀粉酶，破碎过程使淀粉酶与淀粉接触，促进糖化
B．蒸煮冷却过程可使糖化过程终止，也可以对糖液进行灭菌
C．过滤消毒过程可杀死啤酒中的所有微生物，延长啤酒的保存期
D．与传统酿酒技术相比，发酵工程所用的菌种纯度更高，生产的酒的品质更好
4．自然沉降法是指让空气中的细菌自然降至琼脂平板表面的方法。某同学采用自然沉降法对大学校园中的细菌进行采集，对其培养后对所有培养皿里生长的菌落数量进行统计，经换算所得对应空气中细菌总数（单位：cfu·m-3的结果如表所示。下列相关分析错误的是（ ）
时间 空气中的细菌总数 采样点 14：00—15：00（人流低峰） 18：00—19：00（人流高峰）
男生宿舍 938 1328
女生宿舍 703 859
食堂 508 625
图书馆 352 391
A．该同学对不同时间的同一地点及同一时间的不同地点的空气进行采样
B．让空气中的细菌自然降至琼脂平板表面相当于微生物培养中的接种
C．每个采样点仅需要放置1个已灭菌的培养基
D．空气中细菌的数量在人流高峰时比在人流低峰时多
5．植物组织培养技术的过程一般为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→试管苗移栽及鉴定。下列叙述错误的是（ ）
A．外植体是离体的植物器官、组织或细胞等，培养前需要对其进行灭菌处理
B．愈伤组织属于未分化的薄壁组织，没有特定的结构和功能，全能性强
C．植物激素中生长素、细胞分裂素的浓度、比例等会影响植物细胞的发育方向
D．若培育的是耐旱植株，则在其生长过程中可适当减少浇水量以鉴定其耐旱能力
6．动物细胞培养需要适宜的营养条件和环境条件，目的是让细胞正常生长和增殖。下列相关叙述错误的是（ ）
A．培养动物细胞一般使用液体培养基，通常需要加入血清等天然成分
B．对培养液、培养用具等进行灭菌处理，有利于保证无菌、无毒的环境
C．多数动物细胞生存的适宜pH为弱酸性，培养温度与动物内环境温度接近
D．进行动物细胞培养时可以采用松盖培养瓶，CO 的主要作用是维持培养液的pH
7．动物细胞核移植技术可以用来研究胚胎发育过程中细胞核和细胞质的功能及二者之间的相互关系，也可以用来探讨遗传、发育和细胞分化等方面的一些问题。下列相关叙述错误的是（ ）
A．将该技术用于优良动物的克隆，可使某种性状的个体数量增加
B．哺乳动物体细胞核移植的难度明显低于胚胎细胞核移植的难度
C．克隆遗传背景相同的动物，可通过它们之间的对比来分析致病基因
D．克隆特定疾病模型的动物，利于研究致病机理以及开发合适的药物
8．图甲为受精作用的过程以及早期胚胎发育示意图，图乙表示早期胚胎发育的某个时期。下列叙述正确的是（ ）
图甲 图乙
A．自然条件下，过程①在哺乳动物的子宫内进行且每次只形成一个受精卵
B．图甲中过程②细胞数量增加，胚胎的总体积和细胞内遗传物质几乎不变
C．随着胚胎逐步扩大，结构⑥破裂，胚胎从其中伸展出来，该过程叫作孵化
D．图乙处于图甲中的a时期，细胞⑦将来发育成胎儿的胎膜和胎盘
9．体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可以为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，正确的是（ ）
A．从卵巢中获得的卵母细胞培养成熟后才能与刚获取的精子进行受精
B．需要对受体注射免疫抑制剂以降低其对外来胚胎的免疫排斥反应
C．给供体动物饲喂一定量的激素后可实现超数排卵，以增加胚胎的数量
D．经胚胎移植给受体获得的后代可能具有两个或多个个体的遗传物质
10．植物体细胞杂交技术的一般流程如图所示，通过该技术可实现不同种、属的杂交，打破生殖隔离，实现了远缘杂交育种。下列叙述错误的是（ ）
A．步骤①需要在等渗溶液中进行，这样可以保证原生质体的正常形态
B．步骤②是该技术的关键环节，融合的细胞均具有两种细胞的遗传物质
C．C形成杂种细胞的过程中线粒体等细胞器参与细胞壁的形成
D．步骤④⑤的原理是植物细胞的全能性，某些基因会在特定时期表达
11．作为原始多能干细胞，胚胎干细胞就像一张白纸，没有基因指令，也没有特定的发展路径，具有发育成多种组织的潜能，通过定向分化诱导可以产生各种特化的细胞和组织，在解除分化抑制的条件下，胚胎干细胞还拥有发育成完整动物体的潜能。下列相关叙述错误的是（ ）
A．囊胚的滋养层细胞不属于胚胎干细胞，不具有发育成完整个体的潜能
B．一般认为，造血干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞
C．将健康人的造血干细胞移植到病人体内即可完成病人造血和免疫功能的恢复
D．若用病人体细胞诱导产生的诱导多能干细胞治疗疾病，理论上可避免免疫排斥反应
12．下列关于转基因生物及其安全性的叙述，正确的是（ ）
A．用转基因抗除草剂农作物生产的食品会导致人体患癌症
B．只要转基因生物的外源基因来源于自然界，就是安全的
C．转基因生物生产的食品中的外源基因会整合到人的基因组中
D．对外源基因要严格选择，避免产生对人体有害的蛋白质
13．生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。下列有关生殖性克隆的叙述，正确的是（ ）
A．可以运用转基因技术对人类的基因进行改造，从而培育出更完美的克隆人
B．虽然生殖性克隆人存在伦理道德问题，但倡导生殖性克隆人实验可以推动技术的进步
C．目前，克隆技术已经成熟，可以运用该技术进行生殖性克隆人的研究
D．生殖性克隆破坏了人类基因多样性的天然属性，不利于人类生存和进化
14．将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱海水稻新品种。下图PCR扩增OsMYB56时需要添加引物，应选用的引物组合为（ ）
A．5'-CTTCGATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3'
B．5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TAAGTTGTCT-3'
C．5'-ATTCAACAGA-3'和5'-ATCATCCAAG-3'
D．5'-ATTCAACAGA-3'和5'-GAACCTACTA-3
15．“DNA粗提取与鉴定”实验需要对材料进行选择、处理。为了提取出DNA相对含量较高的白色丝状物，下列对实验材料的选择和处理，正确的是（ ）
A．以猪成熟红细胞为实验材料时，可在滤液中加入适量的木瓜蛋白酶
B．以菜花为实验材料时，在研磨过程中可加入适量的纤维素酶
C．以植物叶片为实验材料时，一般使用体积分数为50%的预冷酒精提取DNA
D．以香蕉为实验材料时，将研磨液在4℃的冰箱中放置几分钟后，取沉淀物进行离心
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16．开展深海微生物研究对于开发海洋资源具有重要意义。我国科考船采集了深海冷泉附近的沉积物样品，厌氧培养一段时间后，从中分离到了拟杆菌菌株，并进一步研究了其生物学特性，具体过程如图所示，图中Ⅰ～Ⅴ是操作步骤。下列相关叙述正确的是（ ）
A．培养基①灭菌后，应立刻接种灭菌海水
B．培养拟杆菌的培养基中可通入N 除氧
C．拟杆菌分泌的酶可能具有耐低温的特性
D．V过程可用细菌计数板对拟杆菌进行计数
17．脂多糖（LPS）是某些细菌的主要致病毒素。LPS会与相应抗体特异性结合，若多肽链与LPS的结构越相似，则其与LPS竞争抗体结合能力越强。现欲探究多肽A的结构与LPS的相似程度，科研人员进行了以下操作。下列有关推测正确的是（ ）
A．步骤三中与LPS结合的抗体会被洗脱，与多肽A结合的抗体不会被洗脱
B．检测板上测出的抗体含量越高，表明多肽A与LPS的结构越相似
C．若在步骤二中增加多肽A的数量，则步骤三中检测到的抗体数量可能会减少
D．以多肽A为抗原制备出的单克隆抗体一定不能与LPS结合
18．研究表明细胞内甲基转移酶M可以催化RNAm A修饰的过程，RNAm A修饰（即RNA某位点的甲基化）可提高mRNA结构稳定性从而影响早期胚胎发育。科学家为研究其作用机制，比较了猪骨髓间充质干细胞（A组）和猪体细胞（B组）内RNAm A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育率，结果如图所示。下列有关说法错误的是（ ）
A．随着分化程度的提高，甲基转移酶M的活性呈增强的趋势
B．RNAm A修饰改变了基因的碱基序列，从而影响基因的表达
C．若早期胚胎细胞的甲基转移酶M基因发生突变，则其可能难以继续正常发育
D．实验表明卵裂期发育至囊胚期的过程中RNAm A修饰加强导致重构胚的发育率下降
19．自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花出现的主要原因是花瓣细胞液泡中的花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建了基因表达载体（如图），通过农杆菌转化法将上述基因导入白玫瑰，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。下列相关叙述错误的是（ ）
注：PmeI、BamHI、SpeI、SacI为不同限制酶。
A．不同限制酶的识别序列都是由6个脱氧核苷酸组成的
B．将idgS基因插入Ti质粒时使用的限制酶是SpeI和BamHI
C．将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是PmeI和SacI
D．启动子和终止子不表达出蛋白质，都属于基因的调控序列
20．PCR技术在生物工程中应用广泛，PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。下列有关叙述错误的是（ ）
A．PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg 用于激活DNA聚合酶
B．PCR反应体系中须加入耐高温的DNA聚合酶，该酶可在复性过程起作用
C．若采用PCR技术对一个双链目的基因进行扩增，则第n代复制共需要引物2"个
D．限制酶切割质粒前后，质粒的长度不变，故无法通过电泳检测质粒是否被切开
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21．（11分）近年来，水环境中发现的不同程度的抗生素残留，不仅威胁水生生物的生存，还会损害微生物的生态平衡。氧氟沙星（OFL）（C H OFN O ）是一种人工合成的广谱抗菌的氟喹诺酮类药物，某实验小组成功地从废水环境样品中分离得到能降解OFL的菌株A。筛选分离的操作过程如图所示。回答下列问题：
（1）利用细菌处理去除废水中的抗生素，这种方法的不足之处是________，因此需要筛选抗生素优势降解菌株。
（2）筛选能够降解OFL的菌株时，富集培养基中需要加入_________作为唯一碳源或氮源。用于培养菌株A的固体培养基含有水、蛋白胨、酵母提取物和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为菌株A提供碳源、氮源和_________。
（3）过程Ⅲ所利用的接种方法是__________，与平板划线法不同的是，此方法还可以用于_________。过程Ⅱ中的总稀释次数为8次，在过程Ⅲ中，可以每隔24h统计一次菌落的数目，选取_________时的记录作为结果，三个培养基中长出的菌落数量分别是145、163、154，故推测A中细菌的数量为_________个。mL 。
（4）该实验小组欲进一步探究初始OFL浓度对菌株A降解OFL能力的影响，请帮助其设计实验并写出实验思路：________。
22．（11分）科研人员制备某种单克隆抗体的流程如图所示，图中序号表示相应的步骤，SP2/0细胞为小鼠的骨髓瘤细胞。回答下列问题：
（1）步骤①中的小鼠必须用特定的抗原进行免疫的目的是_________。
（2）在对SP2/0细胞进行培养的过程中，需要创设的气体条件是_________。与培养大多数动物体细胞不同，SP2/0细胞在培养过程中不会出现_________的现象，只要营养等条件适宜即可一直增殖。
（3）步骤②常采用灭活的病毒诱导细胞融合，是因为灭活病毒表面含有的_________能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，进而实现细胞融合。实验中进行步骤③筛选的原因是_________，从功能上看，这种培养基属于_________。
（4）步骤⑤的小鼠注射的是_________，步骤⑥是从小鼠腹水中获得单克隆抗体，列举单克隆抗体的2个用途：_________。
23．（11分）樟木牛和阿沛甲咂牛原产于青藏高原，是世界珍稀地方黄牛品种。科研人员采集了樟木牛和阿沛甲咂牛的耳组织，建立了成纤维细胞系，利用体细胞核移植技术，制备了早期胚胎，将胚胎移植到代孕母牛中，经过足月的妊娠，获得了8头克隆牛，这是世界首例克隆西藏濒危牛。获得克隆牛的过程如图所示。回答下列问题：
（1）细胞①取自西藏濒危牛的耳组织细胞，这样取材的好处是_________（答出1点）。
（2）卵母细胞采集后要在体外培养到_________期，通过_________法使细胞①与去核卵母细胞融合，形成重构胚，再用_________（答出具体的2种方法）等方法激活重构胚，使其发育成早期胚胎，其中细胞②的遗传物质来自_________。
（3）胚胎移植技术的实质是________。为一次获得多个具有同种遗传物质的个体，可对_________时期的胚胎进行_________，该操作的注意事项是_________。
24．（11分）暹罗芽孢杆菌有望作为饲料发酵剂和添加剂应用于畜禽生产，以实现绿色健康养殖。沙门氏菌、大肠杆菌和产气荚膜梭菌（厌氧菌）能引起家禽和家畜的肠道疾病，常使用氨苄青霉素进行治疗。为检测暹罗芽孢杆菌代谢物的抑菌能力，研究人员进行了如下实验。回答下列问题：
（1）菌种培养涉及两种培养基，分别为LB培养基和FTG培养基，配制的培养基可用_________法进行灭菌处理。若要获得该实验所用的固体培养基，需要在上述培养基中加入_________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_________。
（2）要得出“暹罗芽孢杆菌对以上三种病原菌均有较好的抑菌活性，且不弱于氨苄青霉素”的结论，还需要设计怎样的实验？请完善下表中的实验设计：①_________；②___________；③_________。
组别 培养基 培养基处理 小孔中添加的物质 检测指标
甲 含沙门氏菌的LB固体培养基 培养基上形成5个相同的小孔，标号为1～5 1号孔：等量LB液体培养基 2号孔：①________ 3～5号孔：等量含暹罗芽孢杆菌的LB液体培养基 抑菌圈的大小
乙 ②________ 培养基上形成5个相同的小孔，标号为1～5 1号孔：等量LB液体培养基 2号孔：①________ 3～5号孔：等量含暹罗芽孢杆菌的LB液体培养基 抑菌圈的大小
丙 含产气荚膜梭菌的FTG固体培养基 培养基上形成5个相同的小孔，标号为1～5 1号孔：③________ 2号孔：①________ 3～5号孔：等量含暹罗芽孢杆菌的LB液体培养基 抑菌圈的大小
请写出能得出以上实验结论的预期实验现象：_____________________________________。
25．（11分）构建基因表达载体时，将动物E蛋白基因插入质粒pUC18的AmpR内部，以期培育工程菌生成动物E蛋白。构建重组质粒及限制酶的识别序列如图所示。回答下列问题：
注：tetR为四环素抗性基因、AmpR为氨苄青霉素抗性基因。
（1）构建基因表达载体时，用限制酶EcoRV和PstⅠ切割质粒pUC18和含E蛋白基因的DNA片段后，选用_________（选“E．coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）进行连接。将重组质粒pUC20导入大肠杆菌前，先用（________处理大肠杆菌，目的是__________________。
（2）原核生物编码蛋白质时偏好使用GTG编码起始密码子，而真核生物偏好使用ATG。为驱动受体大肠杆菌E蛋白基因的高效表达，对E蛋白基因模板链3'端的引物进行_________的改造，并优化E蛋白基因上游的_________序列以驱动转录。
（3）初步获得的细菌含有质粒pUC18或质粒pUC20。为筛选出含有重组质粒的大肠杆菌，配制A～C三种选择培养基进行初筛，结果如表所示：
培养基 抗生素种类 菌落类型
A 四环素 甲
B 氨苄青霉素 乙
C 四环素+氨苄青霉素。 丙
根据初筛结果，为获得目的菌，需从菌落类型______中挑选多个单菌落分别接种到选择培养基进一步筛选。实验的思路和预期结果及结论：__________________。
高二质量检测联合调考
生物学参考答案
1．A【解析】“陈泡菜水”中含有乳酸菌，加入“陈泡菜水”有利于泡菜的发酵。亚硝酸盐含量过高不利于身体健康，泡菜发酵过程中亚硝酸盐的含量会先升高后降低，可通过检测亚硝酸盐含量确定泡菜取食时间。综上所述，A项符合题意。
2．D【解析】纯培养物是单一个体繁殖所获得的微生物群体。配制培养基时要先调节pH再进行灭菌，培养皿倒置是为了防止冷凝水滴落污染培养基。D项符合题意。
3．C【解析】过滤消毒过程可杀死啤酒中的大多数微生物，延长啤酒的保存期，C项错误。
4．C【解析】一般需要在每个采样点放置3个或3个以上已灭菌的培养基，以这几个培养基中菌落数的平均值作为菌落数。由表格数据可知，空气中细菌的数量在人流高峰时比在人流低峰时多，C项符合题意。
5．A【解析】外植体在培养前需要进行消毒处理，不是灭菌处理，A项符合题意。
6．C【解析】一般对动物细胞进行培养时，pH为7.2～7．4，不是弱酸性，C项符合题意。
7．B【解析】哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的难度，B项符合题意。
8．B【解析】自然条件下，哺乳动物的受精在输卵管中完成，每次受精有可能会形成多个受精卵，A项错误。胚胎逐步扩大，结构⑤（透明带）会破裂，胚胎从其中伸展出来，C项错误。图乙中细胞⑦表示内细胞团，将来会发育成胎儿的各种组织，D项错误。
9．D【解析】刚获取的精子不具有受精能力，胚胎移植时不需要对受体注射免疫抑制剂，给供体注射促性腺激素可以使其超数排卵，该激素不可饲喂，D项符合题意。
10．B【解析】步骤②表示原生质体的融合，是该技术的关键环节，融合后的细胞可能仅含有一种植物细胞的遗传物质，B项符合题意。
11．C【解析】进行细胞移植前需要对供体和受体的HLA进行鉴定，C项符合题意。
12．D【解析】即使转基因生物的外源基因来源于自然界，也可能产生对人体有害的物质，比如某些蛋白质成为新的过敏原，B项错误。
13．D【解析】生殖性克隆破坏了人类基因多样性的天然属性，不利于人类生存和进化，D项符合题意。
14．A【解析】—①端为DNA链的5'端，——OH端为DNA链的3'端。进行PCR时，引物与模板链的3'端结合，因此在扩增OsMYB56时需要添加的引物是5'—CTTGGATGAT—3'和5'—TCTGTTGAAT—3'，A项符合题意。
15．B【解析】猪成熟红细胞无细胞核与细胞器，几乎不含DNA，不能用作该实验的材料，A项错误。由于菜花细胞含有细胞壁，可在研磨过程中加入适量的纤维素酶，以缩短研磨时间，避免研磨时间过长，影响DNA的提取量，B项正确。以植物的叶片为实验材料时，一般使用体积分数为95%的预冷酒精提取DNA，C项错误。以香蕉为实验材料时，将研磨液在4℃的冰箱中放置几分钟后，取上清液进行离心，D项错误。
16．BCD【解析】一般培养基①利用高压蒸汽灭菌法灭菌，灭菌后需要冷却至50℃左右再进行接种，A项不符合题意。
17．C【解析】因LPS固定于检测板上，步骤三中与LPS结合的抗体不会被洗脱，与多肽A结合的抗体会被洗脱，A项错误。LPS和多肽A竞争性与抗体结合，检测板上测出的抗体含量越高，表明抗体与LPS结合得越紧密，多肽A与LPS的结构差异越大，B项错误。以多肽A为抗原制备出的单克隆抗体可能能与LPS结合，D项错误。
18．ABD【解析】由图可知，骨髓间充质干细胞的RNAm A修饰水平高于猪体细胞的，可推测随着分化程度的提高，甲基转移酶M的活性呈减弱的趋势，A项错误。RNAm A修饰不会引起基因碱基序列的改变，B项错误。
19．ABC【解析】将sfp基因插入Ti质粒时，可使用限制酶BamHⅠ。将idgS基因插入Ti质粒时，可用SpeⅠ和SacⅠ进行双酶切割。启动子和终止子不表达出蛋白质，都属于基因的调控序列，D项不符合题意。
20．BD【解析】PCR反应体系中须加入耐高温的DNA聚合酶，该酶在延伸过程起作用，B项错误。凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小和构象等有关，因此限制酶切割质粒前后，质粒在凝胶中的迁移速率可能不同，D项错误。
21．（1）抗生素会抑制细菌的生长繁殖（1分）
（2）OFL（氧氟沙星）（1分） 维生素（1分）
（3）稀释涂布平板法（1分） 统计样品中活菌的数目（1分） 菌落数目稳定（1分） 1.54×10 （2分）
（4）配制等量的含一系列浓度梯度的OFL的液体培养基，将培养基灭菌后，在培养基中接种等量的纯化菌液，每隔一段时间取样，测定培养基中OFL的残余含量，计算出OFL去除率（3分）
【解析】（1）抗生素会抑制细菌的生长繁殖，需要筛选抗生素优势降解菌株来处理废水中的抗生素。（2）筛选能够降解OFL的菌株时，富集培养基中需要加入OFL来作为唯一碳源或氮源。蛋白胨主要为菌株A提供碳源、氮源和维生素。（3）过程Ⅲ利用的接种方法是稀释涂布平板法，与平板划线法相比，此方法还可以用于统计样品中活菌的数目。A中细菌的数量为（145+163+154）÷3×108÷0.1=1.54×1011个·mL 。
22．（1）获得能产生特定抗体的B淋巴细胞（1分）
（2）含95%空气和5%CO 的混合气体（2分） 接触抑制（1分）
（3）糖蛋白和一些酶（1分）细胞之间的融合可以发生在任意两个（或多个）细胞之间，可能还有未融合的细胞（合理即可，2分）选择培养基（1分）
（4）抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞（1分）用作诊断试剂、用来运载药物、用于治疗疾病（答出2点，2分）
【解析】步骤①中的小鼠需要用特定抗原进行免疫是为了获得能产生特定抗体的B淋巴细胞。对动物细胞进行培养时，需要将其置于含95%的空气和5%CO 混合气体的培养箱中。SP2/0细胞为小鼠的骨髓瘤细胞，其具有无限增殖的特点，培养过程中不会出现接触抑制的
现象。步骤⑤的小鼠注射的是抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞，使其能在小鼠体内增殖，从而产生大量单克隆抗体。
23．（1）减少对濒危牛的损伤，保持本物种的遗传特征（合理即可，1分）
（2）MⅡ（1分） 电融合（1分） 电刺激、Ca 载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂（答出2点，2分） 濒危牛（或细胞①）的细胞核和卵母细胞的细胞质（1分）
（3）早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移（2分） 桑葚胚或囊胚（1分） 胚胎分割（1分）在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割（1分）
【解析】通过电融合法可以将细胞①与去核卵母细胞融合，形成重构胚，再用电刺激、Ca 载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。融合后的细胞②的遗传物质来自濒危牛（或细胞①）的细胞核和卵母细胞的细胞质。
24．（1）高压蒸汽灭菌（1分） 琼脂（1分） 将灭菌后的未接种的空白培养基和接种过的培养基，放在相同且适宜的条件下培养，若空白培养基表面没有产生菌落，则说明培养基灭菌彻底（3分）
（2）①等量含氨苄青霉素的LB液体培养基（1分） ②含大肠杆菌的LB固体培养基（1分）③等量LB液体培养基（1分） 甲、乙、丙组结果均为1号孔周围无抑菌圈，3～5号孔周围有抑菌圈且均不小于2号孔周围的（3分）
【解析】（1）对培养基进行灭菌时常采用高压蒸汽灭菌法。将灭菌后的未接种的空白培养基和接种过的培养基放在相同且适宜的条件下培养，如果空白培养基表面没有产生菌落，则说明培养基灭菌彻底。（2）实验设计需要遵循单一变量等原则，所以①②③处实验设计分别是等量含氨苄青霉素的LB液体培养基、含大肠杆菌的LB固体培养基、等量LB液体培养基。若甲、乙、丙组结果均为1号孔周围无抑菌圈，3～5号孔周围有抑菌圈，且均不小于2号孔周围的，则可验证暹罗芽孢杆菌对三种病原菌有较好的抑菌活性，且不弱于氨苄青霉素。
25．（1）T4DNA连接酶（1分） 使细胞处于容易吸收周围环境中的DNA分子的生理状态（合理即可，2分）
（2）将ATG改为GTG（2分） 启动子（1分）
（3）甲（1分）
实验思路：将甲菌落的菌体接到含有氨苄青霉素的培养基上，观察是否形成菌落（2分）
预期结果及结论：若能形成菌落，则细菌含有pUC18质粒，不是目的菌；若菌落不能存活，则细菌含有pUC20质粒，是目的菌（2分）
【解析】用限制酶EcoRV切割后会形成平末端，T4DNA连接酶可连接平末端和黏性平端。E蛋白基因插入后，AmpR失活，只有含重组质粒（pUC20）或质粒pUC18的大肠杆菌能在含四环素的培养基上生长，可用含氨苄青霉素的培养基进一步筛选。