南昌市部分中学2023-2024学年高二下学期3月月考生物试卷
考试时间：75min
一、单选题（每题2分，共24分）
1. 下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是 （ ）
A. 家庭酿果酒，一般不对果实进行严格消毒，主要是保留水果的原味
B. 腌制泡菜的过程中乳酸菌含量会逐渐增多并达到最高峰，然后下降
C. 果酒变酸可能是醋酸菌将乙醇直接转化为醋酸
D. 工业制作腐乳时，豆腐块上的毛霉主要是来自于空气中的毛霉孢子
【答案】B
【解析】
【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
参与腐乳制作微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。
【详解】A、家庭酿果酒，一般不对果实进行严格的消毒，主要是保留水果的酵母菌原种，A错误；
B、发酵中期，由于乳酸菌产生了大量乳酸，其他细菌活动受到抑制，只有乳酸菌活动增强。此时期乳酸菌数量达到最高峰，发酵后期，由于乳酸的积累，酸度继续增长，乳酸菌活动也受到抑制，乳酸菌数量下降，B正确；
C、乳酸菌不能将乙醇直接转化为醋酸，醋酸菌可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，C错误；
D、传统工艺制作腐乳时，豆腐块上的毛霉来自于空气中的毛霉孢子，工业制作腐乳时，豆腐块上的毛霉是接种而来，D正确。
故选B。
【点睛】
2. 下图为啤酒生产过程的简要流程，其中糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质。下列叙述错误的是（ ）
A. 经赤霉素溶液浸泡处理的大麦种子可缩短过程①的时间
B. 过程②破碎有利于淀粉与α-淀粉酶充分接触，缩短过程②的时间
C. 过程③在选育菌种方面，可利用基因工程改造啤酒酵母，缩短过程③的时间
D. 发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期更应缩短排气时间间隔
【答案】D
【解析】
【分析】赤霉素可以解除休眠，促进种子的萌发；发酵初期应提供氧气，因酵母菌在有氧条件下能快速繁殖，以提高菌种数量、缩短发酵时间。
【详解】A、赤霉素可诱导α-淀粉酶合成，以催化淀粉水解，从而促进大麦种子萌发，所以用赤霉素溶液处理大麦种子可缩短过程①的时间，A正确；
B、“糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质”，故过程②破碎有利于淀粉与α-淀粉酶的充分接触，缩短糖化过程所用的时间，B正确；
C、啤酒生产需要筛选产酒精量高的酵母菌，因此过程③使用基因工程改造的啤酒酵母，使之产酒精量较高，可以加速发酵过程，缩短生产周期，C正确；
D、发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期由于糖类物质不充足，产生的气体变少，可以适当延长排气时间间隔，D错误。
故选D。
3. 下列有关发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（ ）
①生产食品酸度调节剂柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉
②发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
③谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，培养液的pH应调至酸性
④啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段
⑤一种放线菌产生的抗生素——井冈霉素可以用于防治水稻枯纹病
A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项
【答案】B
【解析】
【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等步骤。
【详解】①生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉，①正确；
②发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，②正确；
③谷氨酸棒状杆菌发酵时，需在中性或弱碱性条件下，才能积累谷氨酸，故生产谷氨酸需将pH调至中性或弱碱性，③错误；
④啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，故啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成，④错误；
⑤利用放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病，这是微生物农药的实例，⑤正确。
综上所述可知，有3项正确，B正确，ACD错误。
故选B。
4. 下列关于培养基的叙述，正确的是（ ）
A. 倒平板时，应将打开的皿盖放在一边，以免培养基溅到皿盖上
B. 在培养霉菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性
C. 培养基中的营养物质浓度越高，对微生物生长越有利
D. 在培养乳酸杆菌时，在培养基中添加的维生素属于特殊营养物质
【答案】D
【解析】
【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质，根据物理性质分为固体培养基和液体培养基；根据作用分为鉴别培养基和选择培养基等。营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【详解】A、倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，A错误；
B、在培养霉菌时，需要将培养基调至酸性，培养细菌时需要将pH调至中性或微碱性，B错误；
C、培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水，将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，C错误；
D、除提供碳源、氮源、水、无机盐外，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求，如在培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，D正确。
故选D。
5. 在微生物培养的过程中，可利用选择培养基和鉴别培养基来筛选和鉴定目标菌种，下列与之相关的叙述不正确的是（ ）
A. 纤维素分解菌能够分解刚果红染料，从而使菌落周围出现透明圈
B. 尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而能在仅以尿素为氮源的培养基上生长
C. 在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株
D. 在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“透明圈”
【答案】A
【解析】
【分析】
从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：
1、第一种是可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入或不加该营养物质，从而使它成为一种选择培养基（如在含高浓度NaCl的培养基上分离金黄色葡萄球菌，在不含N的培养基上分离固氮菌）；或根据分离对象对pH、温度和氧气浓度的不同要求，改变培养环境的理化性质，使环境条件最适宜该微生物的生存，从而达到分离的目的，将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。
2、第二种办法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势。
【详解】A、纤维素分解菌能够分解纤维素，在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，A错误；
B、尿素分解菌能够将尿素分解为氨，能够利用尿素提供氮源，从而能在仅以尿素为氮源的培养基上生长，B正确；
C、在培养基中加入抗生素，能够筛选出具有相应抗性的菌株，如加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌，C正确；
D、在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”，即以乳酸菌为中心的“透明圈”，D正确。
故选A。
【点睛】
6. 下列植物育种过程中可以不需要植物组织培养的是（ ）
A. 转基因农作物的培育过程
B. 单倍体农作物的育种过程
C. 多倍体植物的培育过程
D. 体细胞杂交培育农作物的过程
【答案】C
【解析】
【分析】植物的组织培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
【详解】A.转基因农作物的培育过程：将目的基因与农杆菌质粒结合形成重组质粒→重组质粒导入农杆菌→用农杆菌侵染普通植物细胞→利用植物组织培养方法培养导入目的基因成功的植物体细胞→转基因农作物，A正确；
B.单倍体农作物的育种过程：花药（离体培养） →单倍体幼苗→（秋水仙素诱导）→纯合子，其中花药离体培养成为单倍体幼苗的过程就是植物组织培养过程，B正确；
C.多倍体植物的育种过程：用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，此过程没有植物组织培养， C错误；
D.体细胞杂交培育农作物的过程：先是植物体细胞融合成杂种细胞，再通过植物组织培养获得杂种植株，D正确。
故选C。
【点睛】植物组织培养技术已经得到广泛应用，包括：植物繁殖的新途径（如微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（如单倍体育种、突变体的应用）、细胞产物的工厂化生产（如从培养的红豆杉细胞中提取抗肿瘤药物紫杉醇）。
7. 超低温冷冻脱毒法是先用超低温对细胞进行选择性破坏，再用组织培养技术获得脱毒植株的方法。以马铃薯茎尖为材料，采用超低温冷冻脱毒法可获得脱毒苗。下列叙述错误的是（ ）
A. 用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少或无病毒
B. 经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯比未脱毒的马铃薯抗病毒能力更强
C. 该技术利用了茎尖分生组织无成熟液泡不易形成冰晶的特性
D. 与传统茎尖培养脱毒相比，该方法取材时不受茎尖长度的限制
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养的应用：微型繁殖、作物脱毒(选材应该选择茎尖组织)、制造人工种子、单倍体育种(最大的优点是明显缩短育种年限，得到的全为纯种)、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物的分生区病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，经过人工培养可获得脱毒苗，A正确；
B、经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯只是脱毒，并没有获得抗病毒的能力，B错误；
C、茎尖分生组织无成熟液泡，不易形成冰晶，C正确；
D、与传统茎尖培养脱毒相比，该方法取材不受茎尖长度限制，传统茎尖脱毒法切取茎尖的大小与脱毒效果直接相关，茎尖越小，去病毒机会越大，而超低温冷冻脱毒法是通过超低温处理，大多数细胞都受到了损伤而死亡，存活下来的仅有生长点的分生组织细胞，D正确。
故选B。
8. 抗生素可以通过干扰细菌的代谢过程而影响其结构和生理功能，从而达到抑制和杀灭细菌的目的。测试某细菌对不同抗生素敏感性的实验方法如下：在涂有该细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴浸有不同种类抗生素的纸片，抗生素向周围扩散，如果抑制生长，则在滤纸片周围出现抑菌圈，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 该实验的自变量是抗生素的种类
B. 该细菌对抗生素IV的敏感程度大于抗生素I、II和III
C. 抗生素II形成的抑菌圈较小的原因可能与该抗生素扩散速度太慢有关
D. 在本实验条件下，该细菌产生耐药性的变异对该细菌而言是有害变异
【答案】D
【解析】
【分析】由题图信息分析可知，不同的抑菌药物的抑菌圈直径不同，是因为受药物在琼脂中扩散速度的影响，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度。抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。透明圈直径大小与药物浓度、细菌浓度有直接关系。
【详解】A、在涂有该细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴浸有不同种类抗生素的纸片，则该实验的自变量是抗生素的种类，A正确；
B、抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，由此推测形成的抑菌圈越小，说明细菌对该种抗生素抗性越强，对抗生素越不敏感，该细菌对抗生素IV的敏感程度大于抗生素I、II和III，B正确；
C、纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后便不断向纸片周围区域扩散，扩散快的抗生素形成的透明圈更大，所以不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响，C正确；
D、在本实验中，能够耐药的细菌生存下来，不能耐药的细菌不能生长繁殖，因此在抗生素的选择下，细菌产生耐药性的变异对细菌而言是有利变异，D错误。
故选D。
9. 为了初步检测药物X和Y的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X或Y，培养过程及结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
实验结果
组别 细胞数（个/孔）
对照 7.8×106
药物X 6.7×104
药物Y 5.3×105
A. 对照组中应加入与实验组等体积的二甲基亚矾溶液
B. 可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来并进行计数
C. 细胞培养需要在无菌、无毒且温度适宜的环境中进行
D. 根据实验结果，可以初步判断这两种药物都具有抗癌作用且药物Y的抗癌效果较好
【答案】D
【解析】
【分析】1、分析题意可知：该实验目的是检测药物X和Y的抗癌活性，自变量是药物X或Y，因变量是细胞数量。
2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒环境：①消毒和灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。
（2）营养物质：糖、氨基酸、无机盐、微量元素和促生长因子等，还需添加血清、血浆一些天然成分。
（3）温度和pH：哺乳动物一般为36.5℃±0.5℃；适宜的一定的pH：7.2~7.4。
（4）气体环境：95%的空气（细胞代谢所必需）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
【详解】A、根据单一变量原则可知，对照组中加入的溶液是和实验组等体积的无菌二甲基亚砜，以排除溶剂对实验结果的干扰，A正确；
B、胰蛋白酶处理可以使肝癌细胞间的蛋白质被分解，破坏细胞间的连接，可以获得游离的肝癌细胞并计数，B正确；
C、为了防止污染，细胞培养需要在无菌、无毒且温度适宜的环境中进行，C正确；
D、根据实验结果可知，最终细胞的数量：对照组（7.8×106）＞药物Y实验组（5.3×105）＞药物X实验组（6.7×104），说明加入药物X的实验组存活的癌细胞数是最少的，即可以初步判断药物X的抗癌效果较好，D错误。
故选D。
10. “白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是（ ）
A. 除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶
B. 通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是使用PEG和灭活的病毒诱导
C. 上述“白菜—甘蓝”杂种植株产生的变异属于染色体变异
D. 愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过脱分化过程
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图：图示表示“白菜一甘蓝”的培育过程，首先需要用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁；其次需要用物理（如电激、离心、振动）或化学（聚乙二醇）诱导原生质体融合；再采用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，包括脱分化和再分化两个重要过程。
【详解】A、植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，除去细胞壁形成原生质体时，可运用的酶是纤维素酶和果胶酶，A错误；
B、灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合，但不能用于诱导植物原生质体融合，B错误；
C、上述“白菜—甘蓝”杂种植株为异源多倍体，该变异属于染色体（数目）变异，C正确；
D、愈伤组织形成“白菜一甘蓝”植物体属于再分化过程，D错误。
故选C。
【点睛】
11. 菌株Ⅰ只能在补充维生素B1（VB1）的基本培养基上生长，菌株Ⅱ只能在补充维生素B7（VB7）的基本培养基上生长。科研人员利用菌株Ⅰ和菌株Ⅱ进行如下实验：
实验1：将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ在同时添加VB1和VB7的基本培养基中混合培养一段时间后，再将菌体离心提取、接种在基本培养基上，发现长出了菌落。
实验2：将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ用微孔滤板（细菌不能通过，DNA等化合物可通过）隔离，培养一段时间后，再将两种菌体分别离心提取、接种在基本培养基上，发现均不长出菌落。
依据实验结果推测，最可能发生的是（ ）
A. 混合培养时发生DNA转移 B. 隔离培养时发生DNA转移
C. 混合培养时发生基因突变 D. 隔离培养时发生基因突变
【答案】A
【解析】
【分析】题图分析，将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ单独涂布于基本培养基上时都没有产生菌落，而将两者混合后涂布于基本培养基上时产生了菌落，据此推测可能是二者在混合培养过程中发生了基因的转移。
【详解】A、菌株Ⅰ只能在补充维生素B1（VB1）的基本培养基上生长，菌株Ⅱ只能在补充维生素B7（VB7）的基本培养基上生长，但混合培养后在基本培养基上长出菌落，据此可推测混合培养时发生DNA转移，A正确；
B、根据实验结果可知，隔离培养可能没有发生DNA转移，因而两种菌种依然不能在基本培养基上生长，B错误；
C、基因突变的发生于混合培养没有必然的联系，因此根据上述实验结果不能推出混合培养时发生基因突变的结论，C错误；
D、基因突变具有自发性，但根据隔离培养后菌落都没有在基本培养基上出现，不能推出在隔离培养时发生基因突变的结论，D错误。
故选A。
12. 乳腺癌、胃癌细胞表面有大量的HER2蛋白，T细胞表面有CD3蛋白和CD28蛋白。研究人员将上述三种蛋白作为抗原分别制备单克隆抗体，然后将其在体外解偶联后重新偶联制备得到三特异性抗体，简称三抗（如下图）。下列说法错误的是（ ）
A. 同时注射3种抗原蛋白，可刺激B细胞增殖分化为分泌三抗的浆细胞
B. 利用抗原—抗体杂交的原理筛选图示三抗时需要3种相应抗原蛋白
C. 与植物原生质体融合相比，制备单抗时可采用灭活的病毒进行诱导融合
D. 与单抗相比，三抗增加了两个特异性抗原结合位点，对癌细胞的杀伤更强
【答案】A
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备过程：①给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，然后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；②诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合；③利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；④进行克隆化培养和专一抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤用培养基培养筛选出来的杂交瘤细胞或将其注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、同时注射3种抗原会刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，进而产生三种抗体，一种浆细胞只能产生一种抗体，并不能产生三抗，A错误；
B、由于抗体剧还有特异性，所以利用抗原—抗体杂交的原理筛选图示三抗时需要3种相应抗原蛋白，B正确；
C、动物细胞融合与原生质体融合相比特有的融合方式是灭活的病毒进行诱导，C正确；
D、抗体具有特异性，三抗可以结合癌细胞不同的部位，所以与单抗相比，三抗增加了两个特异性抗原结合位点，对癌细胞的杀伤更强，D正确。
故选A。
二、多选题（每题
13. 袋装酸奶的包装上通常都会注明“胀袋勿食”。某同学选择一过期的胀袋密封酸奶，按图中的操作流程，研究其中的某微生物生长情况并计数，有关叙述错误的是（ ）
A. 利用图示方法接种前和接种后都要对接种环进行灼烧灭菌
B. 酸奶胀袋是漏气造成乳酸菌有氧呼吸产生了CO2
C. 使用巴氏消毒法可以有效杀死芽孢但不破坏牛奶营养成分
D. 若3个平板的平均菌落数是180个，则1mL酸奶中该微生物个数为9×106个
【答案】ABC
【解析】
【分析】稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、图示采用的接种方法是稀释涂布平板法，该方法所用的接种工具是涂布器而非接种环，A错误；
B、乳酸菌无氧呼吸的产物是乳酸，不产生二氧化碳，B错误；
C、消毒只能杀死物体表明的部分微生物，不能杀死芽孢，C错误；
D、据图分析，图中共第3个试管共稀释了104倍，若3个平板的平均菌落数是180个，则1mL酸奶中该微生物个数为180÷0.2×104=9×106个，D正确。
故选ABC。
14. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。为培育抗黑腐病杂交植株，研究者设计如下流程。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 过程①需要使用纤维素酶和果胶酶来处理两种细胞
B. 过程②后，显微镜下观察到有叶绿体的细胞即为融合细胞
C. 过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化，这一过程体现了植物细胞具有全能性
D. 获得的杂种细胞经鉴定和筛选后进行植物组织培养，即可获得用于推广的杂种植株
【答案】BCD
【解析】
【分析】诱导愈伤组织期间一般不需要光照，在后续的培养过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照。（在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体。人工诱导原生质体融合的方法基本可以分为两大类——物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2＋—高pH融合法等，融合后得到的杂种细胞再经过诱导可形成愈伤组织，并可进一步发育成完整的杂种植株。
【详解】A、过程①是去除细胞壁获得原生质体过程，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A正确；
B、过程②表示诱导原生质体融合的过程，显微镜下观察有无叶绿体作为初步筛选的标志，还需要鉴定是否具有抗黑腐病特性来确定融合细胞，B错误；
C、过程③是脱分化形成愈伤组织的过程，没有体现植物细胞的全能性，C错误；
D、经植物组织培养获得的杂种幼苗，一般需要经过由无菌到有菌的炼苗过程才能用于生产实践，D错误。
故选BCD。
15. 如图表示某学习小组利用正常的小鼠细胞进行动物细胞培养的过程，①～④表示相关过程。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 过程①可以使用机械法或酶解法改变细胞的通透性
B. 过程②为原代培养，培养细胞1一般会发生接触抑制现象
C. 培养细胞2需要贴附于基质表面生长，直接用离心法进行收集
D. 进行动物细胞培养的过程中，不会发生基因的选择性表达
【答案】ACD
【解析】
【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、在进行细胞培养时，首先要对新鲜取材的动物组织进行处理，或用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，将组织分散成单个细胞，A错误；
B、过程②为原代培养，培养细胞1分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖出现接触抑制现象，B正确；
C、培养细胞2需要重新用胰蛋白酶处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，C错误；
D、进行动物细胞培养的过程中，也存在基因的选择性表达， D错误。
故选ACD。
16. CD47是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体
B. 过程②和过程③筛选得到的杂交瘤细胞都能够产生抗CD47的单克隆抗体
C. 若实验组的吞噬指数高于对照组，则单克隆抗体有解除CD47对巨噬细胞的抑制作用
D. 实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱
【答案】AB
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、根据单一变量原则可知，应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系为对照组，A错误；
B、由于小鼠处在多种抗原刺激下，因此筛选出来的杂交瘤细胞不一定能产生所需的抗体，还需要对第一次筛选的细胞进行克隆化培养和抗体检测，故过程②筛选得到的杂交瘤细胞不一定能产生抗CD47的单克隆抗体，C错误；
C、抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，没有抗体抑制，CD47对巨噬细胞有抑制作用，因此若实验组的吞噬指数高于对照组可验证上述推测，C正确；
D、动物细胞培养应放在二氧化碳培养箱，故实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱，D正确。
故选AB。
三、非选择题
17. 如图表示葡萄酒的酿制过程，请据图分析：
（1）设计该过程的依据是：酵母菌是__________厌氧微生物。
（2）葡萄酒的酿制原理是：先通气使酵母菌进行__________，以增加酵母菌的数量，然后使酵母菌____________获得葡萄酒。
（3）在甲中进行搅拌的目的是____________，乙中排出的气体是发酵过程产生的__________。
（4）如果利用丙进行葡萄醋的发酵，应____________瓶盖，利用____________菌，在30-35℃下发酵7-8天，该菌与酵母菌在结构上最显著的区别是____________。
（5）在制作馒头时，可采用小苏打或者通过酵母菌发酵的方法使馒头松软，请问这两种方法中，馒头中的营养和所含有的能量情况相比较最可能的是____________。
A.后者所含有机物种类多、能量略少
B.后者所含机物种类少、能量略少
C.前者所含机物种类多、能量略多
D.两者所含机物种类和能量相同
【答案】 ①. 兼性 ②. 有氧呼吸 ③. 无氧呼吸（或厌氧发酵） ④. 使微生物和培养基（营养）充分接触并增加溶氧 ⑤. 二氧化碳 ⑥. 打开/去除 ⑦. 醋酸（菌） ⑧. 无核膜包被的细胞核 ⑨. A
【解析】
【分析】
1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。
2、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
【详解】（1）酵母菌代谢类型是异养兼性厌氧型生物，在有氧条件下进行有氧呼吸，在无氧条件下进行无氧呼吸。
（2）葡萄酒的酿制原理是先通气使酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，以增加酵母菌的数量；然后使酵母菌进行 无氧呼吸（产物是酒精和二氧化碳）获得葡萄酒。
（3）在甲中进行搅拌的目的是使微生物和培养基（营养）充分接触并增加溶氧；乙中排出的气体是发酵过程中产生的CO2。
（4）醋酸发酵所用菌种为醋酸菌，是一种需氧菌，故如果利用丙进行葡萄醋的发酵，应打开/去除瓶盖；利用醋酸菌的发酵作用在30-35℃下发酵7-8天；醋酸菌为原核生物，酵母菌为真核生物，故醋酸菌与酵母菌在结构上最显著的区别是醋酸菌无核膜包被的细胞核。
（5）采用小苏打发酵的原理是小苏打在高温下分解产生二氧化碳，使馒头松软，并不会改变面粉中的营养物质和能量；利用酵母菌发酵后，淀粉分解成小分子有机物，释放少量能量，所以营养物质丰富而能量减少。故选A。
【点睛】本题考查果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型；掌握果酒和果醋制作的原理，能结合题图信息和所学知识准确答题。
18. 扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一，其次级代谢产物棒曲霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，研究人员进行了如图所示的实验，其中“病健交界处”为腐烂部位与 未腐烂部位的交界处，取样分离的 5 个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。请回答下列问题：
（1）苹果腐烂部位的微生物除扩展青霉外，还有枯草杆菌。两种微生物在结构上的主要区别是___________ 。
（2）活化扩展青霉菌种使用的培养基成分如下表，根据物理性质划分该培养基属于__________培养基，其中能为扩展青霉的生长繁殖提供能源的是________；NaNO3的作用是_________________（答两点）
蔗糖 NaNO3 MgSO4 KCl FeSO4 KH2PO4 蒸馏水
30g 2g 0.5g 0.5g 0.01g 1g 1000mL
（3）用平板划线法分离扩展青霉时，划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是______________。
（4）接种扩展青霉前，应对苹果进行____________（填“消毒”或“灭菌”）。研究人员测定了病斑直径为1、2、3cm 的苹果中①～⑤号部位的 Pat 含量，请推测最可能的结果：__________________；____________。
【答案】（1）扩展青霉有以核膜为界限的细胞核，枯草杆菌无
（2） ①. 液体 ②. 蔗糖 ③. 为扩展青霉的生长提供氮源和无机盐、维持培养液一定的渗透压
（3）第一区域划线结束，接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始
（4） ①. 消毒 ②. 病斑越大，相同部位的Pat含量越高 ③. 相同病斑情况下，离病斑越远的部位，Pat含量越低
【解析】
【分析】1、按物理性质培养基分为固体培养基、液体培养基。固体培养基中加入凝固剂，主要用于微生物的分离、鉴定；液体培养基中不加任何凝固剂，主要用于工业生产。
2、平板划线操作的注意事项：第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌；灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；划线时最后一区域不要与第一区域相连；划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
3、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【小问1详解】
苹果腐烂部位的微生物除扩展青霉外，还有枯草杆菌。青霉属于真核生物，而枯草杆菌属于原核生物，故这两种微生物在结构上的主要区别是扩展青霉有以核膜为界限的细胞核，枯草杆菌无；
【小问2详解】
活化扩展青霉菌种使用的培养基成分中没有凝固剂，故根据物理性质属于液体培养基，其中能为扩展青霉的生长繁殖提供能源的是蔗糖。NaNO3的作用是为扩展青霉的生长提供氮源和无机盐、维持培养液一定的渗透压；
【小问3详解】
划线时需要从上一次划线的末端开始划线。用平板划线法分离扩展青霉时，划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落。导致失误的原因可能是：第一区域划线结束，接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始，从而导致这种情况的出现；
【小问4详解】
接种扩展青霉前，为了避免苹果上其他杂菌、病原微生物的污染，应对苹果进行消毒处理。由图分析可知，①号为腐烂部位，②③④⑤依次距离腐烂部位越来越远，推测①号部位的Pat含量最高，离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低。
19. 餐厨垃圾是家庭公共食堂和餐饮行业等产生的食物废弃物的总称。国内传统的餐厨垃圾处理上，大部分城市会将餐厨垃圾运往养殖场，直接作为饲料饲养禽畜，这样有可能导致人类和动物某些疾病的互相感染。近年来一些城市已经开始研究餐厨垃圾资源化利用的新模式。某研究团队将垃圾处理厂的土壤经初步筛选得到6株产淀粉酶菌株，通过二次培养得到以下结果，请回答：
表 产淀粉酶菌株筛选结果
菌株 透明圈直径（D）/菌落直径（d）的比值（D/d） 体外酶活性测定（U/ml）
① ② ③
X－1 2.3 2.1 2.09 146.1
X－2 1.7 1.2 1.8 108.0
X－3 1.1 0.9 1.38 40.5
X－4 4.2 4.3 4.0 246.4
X－5 0.6 0.8 1.2 83.3
X－6 1.0 0.6 0.9 69.9
（1）为筛选产淀粉酶菌株，将土壤稀释液接种至以_________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于_________培养基。
（2）根据表格信息判断，菌株_________最适合用于分解厨余垃圾，原因是__________________。
（3）将上述筛选出的菌株进行DNA测序和基因库比对，再结合菌落的____________等特征，可确定为黑曲霉。
（4）餐厨垃圾除了含有产淀粉酶菌株外，还含有一些致病菌，它们可能导致人类和动物某些疾病的相互感染。因此，我们可以通过对餐厨垃圾进行_________（煮沸消毒或高压蒸汽灭菌）处理，从而减少疾病的传播。
【答案】（1） ①. 淀粉 ②. 选择
（2） ①. X－4 ②. 与其它菌株比较，菌株X－4的透明圈直径/菌落直径的平均比值（D/d的比值）和体外酶活性均最大
（3）外观、形状（或大小、隆起程度和颜色等）
（4）煮沸消毒
【解析】
【分析】1、实验中筛选微生物利用的原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制其它微生物的生长。
2、灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。
【小问1详解】
产淀粉酶菌株可分泌淀粉酶，将淀粉分解为单糖来利用，而其他的菌没这种能力，在仅以淀粉为碳源的培养基中只有该类菌可以生存。若想筛选产淀粉酶菌株，应将土壤稀释液接种至以淀粉为唯一碳源的固体培养基上进行培养。由于该培养基能够筛选产淀粉酶菌株，因此该培养基从功能上分类属于选择培养基。
【小问2详解】
由表格数据可知，X－4菌株与其它菌株比较其透明圈直径/菌落直径的平均比值（D/d的比值）和体外酶活性均最大，说明其分解淀粉的能力最强，最适合用于分解厨余垃圾。
【小问3详解】
对菌落的特征观察通常表现在菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等。
【小问4详解】
为了餐厨垃圾资源化利用，防止餐厨垃圾中有效成分的破坏和对产淀粉酶菌株的筛选，可对餐厨垃圾进行煮沸消毒处理，这样既能减少致病菌的传播，又能使餐厨垃圾资源化利用。
【点睛】本题考查微生物的分离和培养，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验原理、实验条件、实验方法等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。
20. 幽门螺旋杆菌（Hp）是高感染率的慢性致病菌，是导致人类慢性胃肠道炎症、溃疡的重要致病因子。我国的平均感染率约为59%。
（1）幽门螺旋杆菌侵入人体能够在胃黏膜上皮表面定植引发炎症，其能在酸性环境中存活与Hp产生的尿素酶有关。尿素酶能将尿素分解为氨和二氧化碳，可通过呼气试验判断是否感染Hp，方法是受试者服用14C标记的尿素胶囊，通过特定的仪器检测受试者_______________。
（2）目前常采用抗生素三联药物（枸橼酸铋钾片、替硝唑片、克拉霉素片联合）治疗幽门螺旋杆菌感染，具较好临床疗效，但易产生耐药现象。研究发现中药左金方能够在幽门螺旋杆菌的抗感染治疗中发挥作用，研究人员对此进行实验。
①将正常的胃黏膜上皮细胞（GES-1）用_______________酶处理后，接种在DMEM培养液中，该培养液中加入了_______________这种天然成分，可为细胞生长提供特殊的营养，接种后转移至恒温培养箱中培养。
②培养GES-1细胞至完全贴壁后，加入不同感染复数（感染时病菌与培养细胞的比值）的幽门螺旋杆菌菌液，不同时间检测GES-1细胞的凋亡率，结果见下表。结合表中数据，可选择感染复数为100：1的菌液用于后续实验，原因是_______________。
结果 组别 细胞凋亡率（%）
12h 24h 48h
对照 10.52 12.37 11.74
不同感染复数的幽门螺旋杆菌菌液 1：1 12.34 2170 47.17
50：1 17.19 38.20 60.03
100：1 23.74 53.60 70.67
200：1 25.18 57.30 72.37
300：1 27.85 58.93 74.41
③用100：1的幽门螺旋杆菌菌液感染GES-1细胞，进行不同处理，培养24小时后，检测细胞中促进细胞凋亡的蛋白Caspase-3的表达水平，结果如图。图中模型组的处理是_______________。
结果表明，左金方可以_______________，且作用效果低于三联药物。
（3）有研究表明，母亲通过咀嚼食物后喂养的幼儿，幽门螺旋杆菌感染的危险系数为非咀嚼喂养幼儿的2.9倍。幽门螺杆菌通常以口口、粪口形式进行传播。请根据上述信息提出日常生活中预防幽门螺旋杆菌感染的两条措施_______________。
【答案】（1）呼出的CO2中是否含14C
（2） ①. 胰蛋白 ②. 动物血清 ③. 100：1的作用效果显著高于50：1，而与200：1、300：1的作用效果相比差异不明显 ④. 用幽门螺旋杆菌菌液感染GES-1细胞，不做其他处理 ⑤. 抑制幽门螺旋杆菌诱导的GES-1细胞凋亡
（3）分餐；聚餐时用公筷；保持口腔健康；餐具器皿应定期消毒；不喝生水等
【解析】
【分析】根据幽门螺旋杆菌在胃中的代谢过程作为原理进行幽门螺旋杆菌的检测。培养动物细胞时需要加入血清、血浆等天然成分，保证细胞能够正常的生长。实验遵循对照原则和单一变量原则。一定要学会数据分析并得到结论的能力。
【小问1详解】
根据题干：幽门螺旋杆菌能在酸性环境中存活与Hp产生的尿素酶有关。尿素酶能将尿素分解为氨和二氧化碳，可通过呼气试验判断是否感染Hp，方法是受试者服用14C标记的尿素胶囊，通过特定的仪器检测受试者呼出的CO2中是否含14C；
【小问2详解】
①将正常的胃黏膜上皮细胞（GES-1）用胰蛋白酶处理后，接种在DMEM培养液中，该培养液中加入了动物血清这种天然成分，可为细胞生长提供特殊的营养，接种后转移至恒温培养箱中培养；
②根据表格信息，100：1的作用效果显著高于50：1，而与200：1、300：1的作用效果相比差异不明显，所以可选择感染复数为100：1的菌液用于后续实验；
③用100：1幽门螺旋杆菌菌液感染GES-1细胞，进行不同处理，培养24小时后，检测细胞中促进细胞凋亡的蛋白Caspase-3的表达水平，结果显示：三联药物组处理后细胞中Caspase-3的表达水平最低，左金方组也可以降低Caspase-3的表达水平，但是效果低于三联药物，三联药物组和左金方组均明显低于模型组，模型组Caspase-3的表达水平较高，说明模型组的处理是用幽门螺旋杆菌菌液感染GES-1细胞，不做其他处理，且幽门螺旋杆菌菌液感染GES-1细胞会促进细胞凋亡；由此判断左金方可以抑制幽门螺旋杆菌诱导的GES-1细胞凋亡，且作用效果低于三联药物。
【小问3详解】
日常生活中预防幽门螺旋杆菌感染的措施有分餐；聚餐时用公筷；保持口腔健康；餐具器皿应定期消毒；不喝生水等。
21. 埃博拉病毒（EBOV）是一种能导致人类出血热的致死性病毒，对公共卫生具有较严重的危害。EBOV的NP蛋白在病毒复制中具有重要作用，也是检测EBOV的重要靶蛋白。实验人员用NP蛋白免疫小鼠来制备抗EBOV单克隆抗体，过程如下图所示。回答下列问题：
（1）制备单克隆抗体依赖的生物技术有__________（答出2点）。步骤①中，用NP蛋白多次免疫小鼠的目的是________。
（2）选择骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合，原因是骨髓瘤细胞具有_______的特征。体外培养骨髓瘤细胞时，应该在合成培养基的基础上添加_______以补充细胞生长所需的未知营养物质。与植物体细胞杂交技术相比，诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合特有的方法是______。
（3）获得的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测，目的是_________________。
（4）抗EBOV单克隆抗体可用于检测血浆中EBOV的含量，检测原理如下图所示。
①检测前，先将抗EBOV单克隆抗体固定在支持物上，然后向检测体系中加入一定量含有EBOV的血浆（其NP蛋白称为待测抗原）和等量酶标记的NP蛋白（酶标记抗原），目的是让待测抗原、酶标记抗原与抗EBOV单克隆抗体__________结合。
②保温一段时间后洗涤，再向检测体系中加入一定量的白色底物，若检测体系蓝色越深，则说明______________。
【答案】（1） ①. 动物细胞培养、动物细胞融合
②. 刺激小鼠产生更多能分泌抗NP抗体的B淋巴细胞
（2） ①. 能无限增殖 ②. 血清 ③. 灭活病毒诱导法
（3）和骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞有多种，杂交瘤细胞不一定能产生抗NP蛋白的抗体
（4） ①. 竞争性 ②. 血浆中NP蛋白（或EBOV）含量越少
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
单克隆抗体制备过程中需要将免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，涉及动物细胞融合技术，还需要培养骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞等，因此还涉及动物细胞培养技术。制备抗EBOV单克隆抗体过程中，需要用免疫过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，用NP蛋白多次免疫小鼠的目的是：刺激小鼠产生更多能分泌抗NP抗体的B淋巴细胞。
【小问2详解】
适宜条件下，骨髓瘤细胞具有能无限增殖的特点，而免疫的B淋巴细胞不能增殖，因此选择骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合，使形成的杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖；为保证动物细胞的正常生长，体外培养骨髓瘤细胞时，应该在合成培养基的基础上添加血清等天然成分以补充细胞生长所需的未知营养物质。与植物细胞融合相比（有物理方法、化学方法等），诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法。
【小问3详解】
经过第一次筛选后，得到的是杂交瘤细胞，由于和骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞有多种，故杂交瘤细胞不一定能产生抗NP蛋白的抗体，故获得的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测，以筛选得出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。
【小问4详解】
①根据图示反应原理，酶标记抗原和待测抗原都能与抗EBOV单克隆抗体特异性结合，即让待测抗原中的目标抗原和酶标记抗原竞争结合抗EBOV单克隆抗体。
②标记抗原的酶可催化白色底物变为蓝色产物，所以如果待测抗原中目标抗原越多，则酶标记抗原和抗体结合得越少，催化生成的蓝色产物就越少，检测体系蓝色就越浅，反之若检测体系蓝色越深，则说明待测抗原中目标抗原越少，即血浆中NP蛋白（或EBOV）含量越少。南昌市部分中学2023-2024学年高二下学期3月月考生物试卷
考试时间：75min
一、单选题（每题2分，共24分）
1. 下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是 （ ）
A. 家庭酿果酒，一般不对果实进行严格消毒，主要是保留水果的原味
B. 腌制泡菜的过程中乳酸菌含量会逐渐增多并达到最高峰，然后下降
C. 果酒变酸可能是醋酸菌将乙醇直接转化为醋酸
D. 工业制作腐乳时，豆腐块上的毛霉主要是来自于空气中的毛霉孢子
2. 下图为啤酒生产过程的简要流程，其中糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质。下列叙述错误的是（ ）
A. 经赤霉素溶液浸泡处理的大麦种子可缩短过程①的时间
B. 过程②破碎有利于淀粉与α-淀粉酶充分接触，缩短过程②的时间
C. 过程③在选育菌种方面，可利用基因工程改造啤酒酵母，缩短过程③的时间
D. 发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期更应缩短排气时间间隔
3. 下列有关发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（ ）
①生产食品酸度调节剂柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉
②发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
③谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，培养液的pH应调至酸性
④啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段
⑤一种放线菌产生的抗生素——井冈霉素可以用于防治水稻枯纹病
A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项
4. 下列关于培养基的叙述，正确的是（ ）
A. 倒平板时，应将打开的皿盖放在一边，以免培养基溅到皿盖上
B. 在培养霉菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性
C. 培养基中的营养物质浓度越高，对微生物生长越有利
D. 在培养乳酸杆菌时，在培养基中添加的维生素属于特殊营养物质
5. 在微生物培养的过程中，可利用选择培养基和鉴别培养基来筛选和鉴定目标菌种，下列与之相关的叙述不正确的是（ ）
A. 纤维素分解菌能够分解刚果红染料，从而使菌落周围出现透明圈
B. 尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而能在仅以尿素为氮源的培养基上生长
C. 在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株
D. 在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“透明圈”
6. 下列植物育种过程中可以不需要植物组织培养的是（ ）
A. 转基因农作物的培育过程
B. 单倍体农作物的育种过程
C. 多倍体植物的培育过程
D. 体细胞杂交培育农作物的过程
7. 超低温冷冻脱毒法是先用超低温对细胞进行选择性破坏，再用组织培养技术获得脱毒植株的方法。以马铃薯茎尖为材料，采用超低温冷冻脱毒法可获得脱毒苗。下列叙述错误的是（ ）
A. 用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少或无病毒
B. 经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯比未脱毒的马铃薯抗病毒能力更强
C. 该技术利用了茎尖分生组织无成熟液泡不易形成冰晶的特性
D. 与传统茎尖培养脱毒相比，该方法取材时不受茎尖长度的限制
8. 抗生素可以通过干扰细菌的代谢过程而影响其结构和生理功能，从而达到抑制和杀灭细菌的目的。测试某细菌对不同抗生素敏感性的实验方法如下：在涂有该细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴浸有不同种类抗生素的纸片，抗生素向周围扩散，如果抑制生长，则在滤纸片周围出现抑菌圈，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 该实验的自变量是抗生素的种类
B. 该细菌对抗生素IV的敏感程度大于抗生素I、II和III
C. 抗生素II形成的抑菌圈较小的原因可能与该抗生素扩散速度太慢有关
D. 在本实验条件下，该细菌产生耐药性的变异对该细菌而言是有害变异
9. 为了初步检测药物X和Y的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X或Y，培养过程及结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
实验结果
组别 细胞数（个/孔）
对照 7.8×106
药物X 6.7×104
药物Y 5.3×105
A. 对照组中应加入与实验组等体积的二甲基亚矾溶液
B. 可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来并进行计数
C. 细胞培养需要在无菌、无毒且温度适宜的环境中进行
D. 根据实验结果，可以初步判断这两种药物都具有抗癌作用且药物Y的抗癌效果较好
10. “白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是（ ）
A. 除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶
B. 通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是使用PEG和灭活的病毒诱导
C. 上述“白菜—甘蓝”杂种植株产生的变异属于染色体变异
D. 愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过脱分化过程
11. 菌株Ⅰ只能在补充维生素B1（VB1）的基本培养基上生长，菌株Ⅱ只能在补充维生素B7（VB7）的基本培养基上生长。科研人员利用菌株Ⅰ和菌株Ⅱ进行如下实验：
实验1：将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ在同时添加VB1和VB7的基本培养基中混合培养一段时间后，再将菌体离心提取、接种在基本培养基上，发现长出了菌落。
实验2：将菌株Ⅰ和菌株Ⅱ用微孔滤板（细菌不能通过，DNA等化合物可通过）隔离，培养一段时间后，再将两种菌体分别离心提取、接种在基本培养基上，发现均不长出菌落。
依据实验结果推测，最可能发生的是（ ）
A. 混合培养时发生DNA转移 B. 隔离培养时发生DNA转移
C. 混合培养时发生基因突变 D. 隔离培养时发生基因突变
12. 乳腺癌、胃癌细胞表面有大量的HER2蛋白，T细胞表面有CD3蛋白和CD28蛋白。研究人员将上述三种蛋白作为抗原分别制备单克隆抗体，然后将其在体外解偶联后重新偶联制备得到三特异性抗体，简称三抗（如下图）。下列说法错误的是（ ）
A. 同时注射3种抗原蛋白，可刺激B细胞增殖分化为分泌三抗的浆细胞
B. 利用抗原—抗体杂交的原理筛选图示三抗时需要3种相应抗原蛋白
C. 与植物原生质体融合相比，制备单抗时可采用灭活的病毒进行诱导融合
D. 与单抗相比，三抗增加了两个特异性抗原结合位点，对癌细胞的杀伤更强
二、多选题（每题
13. 袋装酸奶的包装上通常都会注明“胀袋勿食”。某同学选择一过期的胀袋密封酸奶，按图中的操作流程，研究其中的某微生物生长情况并计数，有关叙述错误的是（ ）
A. 利用图示方法接种前和接种后都要对接种环进行灼烧灭菌
B. 酸奶胀袋是漏气造成乳酸菌有氧呼吸产生了CO2
C. 使用巴氏消毒法可以有效杀死芽孢但不破坏牛奶营养成分
D. 若3个平板的平均菌落数是180个，则1mL酸奶中该微生物个数为9×106个
14. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。为培育抗黑腐病杂交植株，研究者设计如下流程。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 过程①需要使用纤维素酶和果胶酶来处理两种细胞
B. 过程②后，显微镜下观察到有叶绿体的细胞即为融合细胞
C. 过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化，这一过程体现了植物细胞具有全能性
D. 获得的杂种细胞经鉴定和筛选后进行植物组织培养，即可获得用于推广的杂种植株
15. 如图表示某学习小组利用正常的小鼠细胞进行动物细胞培养的过程，①～④表示相关过程。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 过程①可以使用机械法或酶解法改变细胞的通透性
B. 过程②为原代培养，培养细胞1一般会发生接触抑制现象
C. 培养细胞2需要贴附于基质表面生长，直接用离心法进行收集
D. 进行动物细胞培养的过程中，不会发生基因的选择性表达
16. CD47是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体
B. 过程②和过程③筛选得到的杂交瘤细胞都能够产生抗CD47的单克隆抗体
C. 若实验组的吞噬指数高于对照组，则单克隆抗体有解除CD47对巨噬细胞的抑制作用
D. 实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱
三、非选择题
17. 如图表示葡萄酒的酿制过程，请据图分析：
（1）设计该过程的依据是：酵母菌是__________厌氧微生物。
（2）葡萄酒的酿制原理是：先通气使酵母菌进行__________，以增加酵母菌的数量，然后使酵母菌____________获得葡萄酒。
（3）在甲中进行搅拌的目的是____________，乙中排出的气体是发酵过程产生的__________。
（4）如果利用丙进行葡萄醋的发酵，应____________瓶盖，利用____________菌，在30-35℃下发酵7-8天，该菌与酵母菌在结构上最显著的区别是____________。
（5）在制作馒头时，可采用小苏打或者通过酵母菌发酵的方法使馒头松软，请问这两种方法中，馒头中的营养和所含有的能量情况相比较最可能的是____________。
A.后者所含有机物种类多、能量略少
B.后者所含机物种类少、能量略少
C.前者所含机物种类多、能量略多
D.两者所含机物种类和能量相同
18. 扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一，其次级代谢产物棒曲霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，研究人员进行了如图所示的实验，其中“病健交界处”为腐烂部位与 未腐烂部位的交界处，取样分离的 5 个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。请回答下列问题：
（1）苹果腐烂部位的微生物除扩展青霉外，还有枯草杆菌。两种微生物在结构上的主要区别是___________ 。
（2）活化扩展青霉菌种使用培养基成分如下表，根据物理性质划分该培养基属于__________培养基，其中能为扩展青霉的生长繁殖提供能源的是________；NaNO3的作用是_________________（答两点）
蔗糖 NaNO3 MgSO4 KCl FeSO4 KH2PO4 蒸馏水
30g 2g 0.5g 0.5g 0.01g 1g 1000mL
（3）用平板划线法分离扩展青霉时，划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是______________。
（4）接种扩展青霉前，应对苹果进行____________（填“消毒”或“灭菌”）。研究人员测定了病斑直径为1、2、3cm 苹果中①～⑤号部位的 Pat 含量，请推测最可能的结果：__________________；____________。
19. 餐厨垃圾是家庭公共食堂和餐饮行业等产生的食物废弃物的总称。国内传统的餐厨垃圾处理上，大部分城市会将餐厨垃圾运往养殖场，直接作为饲料饲养禽畜，这样有可能导致人类和动物某些疾病的互相感染。近年来一些城市已经开始研究餐厨垃圾资源化利用的新模式。某研究团队将垃圾处理厂的土壤经初步筛选得到6株产淀粉酶菌株，通过二次培养得到以下结果，请回答：
表 产淀粉酶菌株筛选结果
菌株 透明圈直径（D）/菌落直径（d）的比值（D/d） 体外酶活性测定（U/ml）
① ② ③
X－1 2.3 2.1 2.09 146.1
X－2 17 1.2 1.8 108.0
X－3 1.1 0.9 1.38 40.5
X－4 4.2 4.3 4.0 246.4
X－5 0.6 0.8 1.2 83.3
X－6 1.0 0.6 0.9 69.9
（1）为筛选产淀粉酶菌株，将土壤稀释液接种至以_________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于_________培养基。
（2）根据表格信息判断，菌株_________最适合用于分解厨余垃圾，原因是__________________。
（3）将上述筛选出的菌株进行DNA测序和基因库比对，再结合菌落的____________等特征，可确定为黑曲霉。
（4）餐厨垃圾除了含有产淀粉酶菌株外，还含有一些致病菌，它们可能导致人类和动物某些疾病的相互感染。因此，我们可以通过对餐厨垃圾进行_________（煮沸消毒或高压蒸汽灭菌）处理，从而减少疾病的传播。
20. 幽门螺旋杆菌（Hp）是高感染率的慢性致病菌，是导致人类慢性胃肠道炎症、溃疡的重要致病因子。我国的平均感染率约为59%。
（1）幽门螺旋杆菌侵入人体能够在胃黏膜上皮表面定植引发炎症，其能在酸性环境中存活与Hp产生的尿素酶有关。尿素酶能将尿素分解为氨和二氧化碳，可通过呼气试验判断是否感染Hp，方法是受试者服用14C标记的尿素胶囊，通过特定的仪器检测受试者_______________。
（2）目前常采用抗生素三联药物（枸橼酸铋钾片、替硝唑片、克拉霉素片联合）治疗幽门螺旋杆菌感染，具较好临床疗效，但易产生耐药现象。研究发现中药左金方能够在幽门螺旋杆菌的抗感染治疗中发挥作用，研究人员对此进行实验。
①将正常的胃黏膜上皮细胞（GES-1）用_______________酶处理后，接种在DMEM培养液中，该培养液中加入了_______________这种天然成分，可为细胞生长提供特殊的营养，接种后转移至恒温培养箱中培养。
②培养GES-1细胞至完全贴壁后，加入不同感染复数（感染时病菌与培养细胞的比值）的幽门螺旋杆菌菌液，不同时间检测GES-1细胞的凋亡率，结果见下表。结合表中数据，可选择感染复数为100：1的菌液用于后续实验，原因是_______________。
结果 组别 细胞凋亡率（%）
12h 24h 48h
对照 10.52 12.37 11.74
不同感染复数的幽门螺旋杆菌菌液 1：1 12.34 21.70 47.17
50：1 1719 38.20 60.03
100：1 23.74 53.60 70.67
200：1 25.18 57.30 72.37
300：1 27.85 58.93 74.41
③用100：1的幽门螺旋杆菌菌液感染GES-1细胞，进行不同处理，培养24小时后，检测细胞中促进细胞凋亡的蛋白Caspase-3的表达水平，结果如图。图中模型组的处理是_______________。
结果表明，左金方可以_______________，且作用效果低于三联药物
（3）有研究表明，母亲通过咀嚼食物后喂养的幼儿，幽门螺旋杆菌感染的危险系数为非咀嚼喂养幼儿的2.9倍。幽门螺杆菌通常以口口、粪口形式进行传播。请根据上述信息提出日常生活中预防幽门螺旋杆菌感染的两条措施_______________。
21. 埃博拉病毒（EBOV）是一种能导致人类出血热的致死性病毒，对公共卫生具有较严重的危害。EBOV的NP蛋白在病毒复制中具有重要作用，也是检测EBOV的重要靶蛋白。实验人员用NP蛋白免疫小鼠来制备抗EBOV单克隆抗体，过程如下图所示。回答下列问题：
（1）制备单克隆抗体依赖的生物技术有__________（答出2点）。步骤①中，用NP蛋白多次免疫小鼠的目的是________。
（2）选择骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合，原因是骨髓瘤细胞具有_______的特征。体外培养骨髓瘤细胞时，应该在合成培养基的基础上添加_______以补充细胞生长所需的未知营养物质。与植物体细胞杂交技术相比，诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合特有的方法是______。
（3）获得的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测，目的是_________________。
（4）抗EBOV单克隆抗体可用于检测血浆中EBOV的含量，检测原理如下图所示。
①检测前，先将抗EBOV单克隆抗体固定在支持物上，然后向检测体系中加入一定量含有EBOV的血浆（其NP蛋白称为待测抗原）和等量酶标记的NP蛋白（酶标记抗原），目的是让待测抗原、酶标记抗原与抗EBOV单克隆抗体__________结合。
②保温一段时间后洗涤，再向检测体系中加入一定量的白色底物，若检测体系蓝色越深，则说明______________。
